可降低牛羊甲烷排放量的预混合饲料.pdf

1、(10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201310473980.2 (22)申请日 2013.10.11 A23K 1/16(2006.01) A23K 1/175(2006.01) A23K 1/18(2006.01) (73)专利权人 中国农业科学院饲料研究所 地址 100081 北京市海淀区中关村南大街 12 号 (72)发明人 刁其玉 屠焰 陈丹丹 (74)专利代理机构 北京路浩知识产权代理有限 公司 11002 代理人 王文君 CN 1658768 A,2005.08.24,说明书第2页第 3 段， 说明书第 3 页第 2 段 . CN 102497786 A,20

2、12.06.13, 全文 . WO 2011045418 A1,2011.04.21, 全文 . CN 101005848 A,2007.07.25, 全文 . 贺永惠等 . 降低反刍动物甲烷排放的研究进 展 .黄牛杂志 .2001, 第 27 卷 ( 第 5 期 ), 第 47-50 页 . (54) 发明名称 可降低牛羊甲烷排放量的预混合饲料 (57) 摘要 本发明涉及可降低牛羊甲烷排放量的预混合 饲料， 所述预混合饲料含有以下重量份的成分 ： 甲烷抑制剂 1.5-20.0 份、 维生素复合物 5-15 份、 矿物质复合物 10-30 份、 硫酸钠 20-50 份、 载体 3-63.5 份

3、。本发明涉及的预混合饲料， 在降低甲 烷排放的功能上， 不使用离子载体抗生素及化学 合成的电子受体， 而是选择了绿色安全的植物提 取物， 并从中国资源量角度考虑， 以资源较多、 提 取过程较为环保的桑叶黄酮为主， 具有安全、 实 用、 有效等优势。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 南楠 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书2页 说明书15页 (10)授权公告号 CN 103518965 B (45)授权公告日 2015.04.01 CN 103518965 B 1/2 页 2 1.可降低牛羊甲烷排放量的预混合饲料， 其特征在于， 所述预混合饲料含

4、有以下重量 份的成分 ： 甲烷抑制剂1.5-20.0份、 维生素复合物5-15份、 矿物质复合物10-30份、 硫酸钠 20-50份、 载体3-63.5份， 所述甲烷抑制剂由重量百分比为3-50活性成分和50-97载体 组成， 其中活性成分为桑叶黄酮或白藜芦醇中的一种或两者的混合物， 所述甲烷抑制剂中 的载体为玉米蛋白粉、 沸石粉或稻壳粉。 2.根据权利要求 1 所述的预混合饲料， 其特征在于， 所述预混合饲料中含有以下重量 份的成分 ： 甲烷抑制剂 10-15 份、 维生素复合物 5-15 份、 矿物质复合物 10-30 份、 硫酸钠 30-40 份、 载体 10-37.0 份。 3.根据权

5、利要求 1 所述的预混合饲料， 其特征在于， 所述预混合饲料中含有以下重量 份的成分 ： 甲烷抑制剂 10-15 份、 维生素复合物 10-12 份、 矿物质复合物 15-20 份、 硫酸钠 35-45 份、 载体 15-30 份。 4.根据权利要求 1 所述的预混合饲料， 其特征在于， 所述预混合饲料中含有以下重量 份的成分 ： 甲烷抑制剂 15 份、 维生素复合物 10 份、 矿物质复合物 20 份、 硫酸钠 40 份、 载体 15 份。 5.根据权利要求 1-4 任一项所述的预混合饲料， 其特征在于， 所述活性成分为桑叶黄 酮， 其在甲烷抑制剂中的重量百分比为 25.3。 6.根据权利要

6、求 1-4 任一项所述的预混合饲料， 其特征在于， 所述活性成分为白藜芦 醇， 其在甲烷抑制剂中的重量百分比为 3-15。 7.根据权利要求 6 所述的预混合饲料， 其特征在于， 所述活性成分为白藜芦醇， 其在甲 烷抑制剂中的重量百分比为 5-12。 8.根据权利要求 7 所述的预混合饲料， 其特征在于， 所述活性成分为白藜芦醇， 其在甲 烷抑制剂中的重量百分比为 6。 9.根据权利要求 1-4 任一项所述的预混合饲料， 其特征在于， 所述活性成分为桑叶黄 酮和白藜芦醇， 二者的重量比为 20-80 ： 5-20。 10.根据权利要求 9 所述的预混合饲料， 其特征在于， 桑叶黄酮和白藜芦醇的

7、重量比为 20-60 ： 5-15。 11.根据权利要求 9 所述的预混合饲料， 其特征在于， 桑叶黄酮和白藜芦醇的重量比为 30-50 ： 5-15。 12.根据权利要求 9 所述的预混合饲料， 其特征在于， 桑叶黄酮和白藜芦醇的重量比为 38 ： 9。 13.根据权利要求 1-4 任一项所述的预混合饲料， 其特征在于所述甲烷抑制剂中的载 体为稻壳粉。 14.根据权利要求 1-4 任一项所述的预混合饲料， 其特征在于， 所述矿物质复合物由 以下重量百分比的成分组成 ： 一水硫酸亚铁 8.0-25.0、 五水硫酸铜 1.2-5.0、 一水硫 酸锰 10.0-28.0、 一水硫酸锌 8-20、

8、含钴 1的氯化钴 1.0-3.5、 含碘 1的碘化钾 4.0-10、 含硒 1的亚硒酸钠 0.8-3.0， 载体 5.5-67， 所述载体为稻壳粉、 玉米蛋白粉 或沸石粉。 15.根据权利要求 14 所述的预混合饲料， 其特征在于， 所述矿物质复合物由以下重量 百分比的成分组成 ： 一水硫酸亚铁 15.0、 五水硫酸铜 2.5、 一水硫酸锰 19.0、 一水 权 利 要 求 书 CN 103518965 B 2 2/2 页 3 硫酸锌 14.5、 含钴 1的氯化钴 2.6、 含碘 1的碘化钾 7.0、 含硒 1的亚硒酸钠 1.5， 载体 37.9， 所述载体为沸石粉。 16.根据权利要求 1-

9、4 任一项所述的预混合饲料， 其特征在于， 所述维生素复合 物是由以下重量百分比的成分组成 ： 维生素 A1.3-5、 维生素 D 0.3-1.2、 维生素 E 3.5-14.5、 抗氧化剂 0.8-3.0， 载体 76.3-94.1 ； 所述抗氧化剂为乙氧基喹啉， 所述载 体为麸皮、 米糠、 玉米蛋白粉。 17.根据权利要求 16 所述的预混合饲料， 其特征在于， 所述维生素复合物由以下重量 百分比的成分组成 ： 维生素 A 2.5 ； 维生素 D0.6 ； 维生素 E 7.2 ； 抗氧化剂 1.5， 载 体 88.2， 所述载体为玉米蛋白粉。 18.根据权利要求 1-4 任一项所述的预混合

10、饲料， 其特征在于， 所述预混合饲料中的载 体为沸石粉、 玉米蛋白粉或稻壳粉。 19.根据权利要求 1-4 任一项所述的预混合饲料， 其特征在于， 所述预混合饲料中的载 体为沸石粉。 20.权利要求 1-19 任一项所述的预混合饲料在制备抑制牛或羊甲烷排放的饲料中的 应用。 权 利 要 求 书 CN 103518965 B 3 1/15 页 4 可降低牛羊甲烷排放量的预混合饲料 技术领域 0001 本发明涉及反刍动物养殖领域， 具体涉及可降低牛羊甲烷排放量的预混合饲料。 背景技术 0002 大量研究表明， 甲烷的温室效应是二氧化碳的 20-30 倍， 对全球气候变暖的影响 作用占到了 15%-

11、20%。在全球家畜的甲烷排放量中， 反刍动物占 97%， 并且估计全球牛羊的 甲烷排放量以每年 1% 的比例递增。在我国， 动物胃肠道发酵排放甲烷量占甲烷总排放量的 29.7%。此外， 甲烷的排放也造成动物日粮能量的严重损失， 在奶牛生产中， 通常有 6%-10% 的总能转变为甲烷， 以嗳气的形式排放到大气中。 0003 因此， 降低反刍动物甲烷排放， 对减缓气候变暖和高效利用日粮具有重要意义。 0004 由于全球对于温室效应的极大关注， 许多研究人员对可调控反刍动物甲烷排放的 添加剂进行了研究， 主要有离子载体类抗生素、 电子受体、 植物提取物， 其中 ： 0005 1） 离子载体类抗生素

12、0006 离子载体类抗生素是由不同的链霉素菌株产生的一大类特殊的抗菌素， 化学上属 于聚醚类， 如莫能菌素、 盐霉素等。 它们主要是通过抑制细菌产生氢气、 甲酸， 改变瘤胃发酵 类型， 从而降低甲烷产量， 它对产甲烷菌没有抑制作用。 研究发现， 饲料中添加莫能霉素， 可 减少 25% 的甲烷生成， 同时提高饲料转化效率。 0007 2） 电子受体 0008 瘤胃中存在数种可以利用氢气和甲酸生成甲烷的细菌， 通过添加这些细菌可利用 的其他电子受体， 可以改变电子流向以降低甲烷生成是其机理所在。常用的电子受体包括 富马酸和硫酸盐、 硝酸盐等， 体外研究发现， 补饲富马酸可以降低甲烷的生成量， 增加

13、瘤胃 内丙酸的产量。饲料中添加富马酸和苹果酸可能促进富马酸利用菌的生长。饲料中添加硫 酸盐、 硝酸盐， 可促进硫酸盐、 硝酸盐、 亚硝酸盐还原菌在瘤胃内的生长发育。 但是当瘤胃中 硝酸盐添加过量时， 硝酸盐可被还原生成亚硝酸盐， 有可能引起亚硝酸盐中毒， 而且硝酸盐 本身还是很强的血管收缩剂。此外添加大量的硝酸盐、 硫酸盐， 可降低反刍动物的采食量。 虽然这些化合物可以作为氢的受体， 但不可以作为甲烷抑制剂。 0009 3） 植物提取物 0010 天然植物提取物兼有营养和专用特定功能， 可以改善动物机体代谢， 促进生长发 育， 提高免疫功能及改善畜产品品质。植物提取物毒副作用小， 无残留或残留

14、少， 不易产生 抗药性， 因此作为新型甲烷抑制剂具有很大的开发和应用前景。前人研究发现， 茶皂素 （从 茶科植物中提取） 、 丝兰皂苷 （丝兰属提取物） 、 大蒜油等可降低瘤胃原虫数量， 增加丙酸含 量， 抑制甲烷的产生。单宁也有明显的降甲烷效果， 可以通过体外发酵添加单宁提取物， 适 量饲喂反刍动物来降低甲烷产量。而针对桑叶黄酮、 白藜芦醇降低甲烷作用的研究未见明 确报道。 0011 桑叶提取物 ： 我国桑树持有面积达数千万亩， 桑叶资源丰富， 但其利用价值尚未完 全开发。桑叶含有丰富的碳水化合物、 蛋白质、 脂肪酸、 纤维素、 多种维生素和矿物质元素。 说 明 书 CN 103518965

15、 B 4 2/15 页 5 在其提取物中含有桑叶黄酮、 桑叶多酚、 桑叶多糖、 1- 脱氧野尻霉素 （DNJ） 、 - 氨基丁酸 （GABA） 等生理活性物质， 具有降血压、 降血糖、 降血胆固醇、 抗肿瘤、 抗过敏、 抗氧化、 抗毛细 管渗透、 利尿的功能。桑叶除了作为中草药应用于医药领域、 食品和化妆品等领域， 目前畜 牧领域也逐渐开发其应用价值。研究证明， 蛋鸡日粮中添加桑叶可使蛋清和蛋黄中的维生 素 K1 含量显著增加， 改善蛋黄颜色， 提高蛋重和产蛋量， 减少粪便中氨气的含量。桑叶对反 刍动物的最大作用是在作为泌乳奶牛和生长奶牛的补充料时表现出来。 而桑叶对湖羊是一 种良好的蛋白质补

16、充料， 桑叶在瘤胃内消化性较好， 48h 干物质消化率高达 62%。桑叶中总 黄酮含量占桑叶干重的1.0%-3.0%， 含量较高。 已有的研究证实， 桑叶黄酮具有抗氧化、 清楚 自由基， 降低血糖、 血脂、 血压等作用。但目前尚未见桑叶黄酮可抑制反刍动物甲烷排放的 研究报道。 0012 白藜芦醇 ： 白藜芦醇主要存在于葡萄、 虎杖、 花生等植物中， 是一种多酚类化合物， 具有抗肿瘤、 抗心血管疾病、 抗菌、 抗氧化及雌激素调节等作用。 白藜芦醇可治疗炎症、 调解 脂类代谢和控制心脏疾病。白藜芦醇目前在畜牧中应用较少， 具有广阔的开发前景。有研 究表明， 30mg/kg BW 和 15mg/kg

17、 BW 剂量的白藜芦醇对环磷酰胺致小鼠细胞免疫抑制有对 抗作用。添加 0.1%-0.2% 的白藜芦醇有利于提高肉鸡的免疫机能。 0013 虽然一些研究报道提出了某些添加剂可降低甲烷排放， 但大多数试验是以体外法 测定而得的。体外法在一定程度上可以模拟生物体的反映程度， 但无法准确地表达添加剂 的适宜添加量。 0014 关于降低甲烷排放量的饲料有如下相关报道 ： 0015 CN201080031321.8（公开号为 CN102573512A） 公开了一种含有丁子香酚、 肉桂醛 和葱提取物的食物添加物， 其包含 ： 30 至 45的丁子香酚 ； 30 至 45的肉桂醛， 10 至 40 的属于葱科

18、的植物的提取物， 主要用于牛羊的饲料。 0016 CN201110442456.X（公开号为 CN102524568A） 反刍动物饲料添加剂由下述重量 配比的原料混合而成 ： 栗树单宁 0.6-3 份、 椰子油 0.5-1.0 份， 其配合饲料由下述重量配比 的原料混合而成 ： 玉米 20-40 份、 豆饼 3-8 份、 盐 0.3-0.5 份、 矿物质 0.1-0.3 份、 维生素 0.1-0.3 份、 反刍动物饲料添加剂 0.05-0.2 份。 0017 CN97117252.8（公开号为 CN1210683A） 一种可减少反刍动物甲烷排放的微生物发 酵秸秆饲料的制备方法 , 采用一般的微

19、生物发酵处理秸秆技术 , 其特征在于 : 在微生物处 理前 , 向秸秆中添加 0.5-1.5% 重量的丙酸 ; 为进一步减少甲烷排放。 0018 CN200910158156.1（公开号为 CN101601440A） 反刍动物饲料添加剂， 其各组分的 重量百分数为 ： 人参茎叶皂苷0.5-5、 白术5-15、 茯苓3-10、 甘草1-5、 山楂3-15、 神曲3-15、 麦芽 3-15、 其余为亚麻籽果仁粉。 0019 经过检索， 未见降低牛羊甲烷排放量的类似预混合饲料的报道， 也未检索到白藜 芦醇或白藜芦醇和桑叶黄酮降低甲烷排放的预混合饲料方面的报道。 发明内容 0020 本发明的目的是提供

20、了可降低牛羊甲烷排放量的预混合饲料。 0021 本发明提供的可降低牛羊甲烷排放量的预混合饲料， 含有以下成分 ： 甲烷抑制剂、 矿物质复合物、 维生素复合物、 硫酸钠和载体。 说 明 书 CN 103518965 B 5 3/15 页 6 0022 具体的， 所述预混合饲料含有以下重量份的成分 ： 甲烷抑制剂 1.5-20.0 份、 维生 素复合物 5-15 份、 矿物质复合物 10-30 份、 硫酸钠 20-50 份、 载体 3-63.5 份。 0023 优选地， 所述预混合饲料中含有以下重量百分比的成分 ： 甲烷抑制剂 10-15 份、 维 生素复合物 5-15 份、 矿物质复合物 10-

21、30 份、 硫酸钠 30-40 份、 载体 10-37.0 份。 0024 进一步优选， 所述预混合饲料中含有以下重量百分比的成分 ： 甲烷抑制剂 10-15 份、 维生素复合物 10-12 份、 矿物质复合物 15-20 份、 硫酸钠 35-45 份、 载体 15-30 份。 0025 更进一步优选， 所述预混合饲料中含有以下重量百分比的成分 ： 甲烷抑制剂 15 份、 维生素复合物 10 份、 矿物质复合物 20 份、 硫酸钠 40 份、 载体 15 份。 0026 上述预混合饲料中 ： 0027 所述甲烷抑制剂由重量百分比为3-50%活性成分和50-97%载体组成， 其中活性成 分为桑叶

22、黄酮或白藜芦醇中的一种或两者的混合物， 具体的 ： 0028 当活性成分为桑叶黄酮时， 其在甲烷抑制剂中的重量比为 15-90% ； 优选为 20-88%， 进一步优选为 25.3%。 0029 当活性成分为白藜芦醇时， 其在甲烷抑制剂中的重量百分比为 3-15% ； 优选为 5-12%， 进一步优选为 6%。 0030 两者组合使用时， 桑叶黄酮和白藜芦醇按照 20-80 ： 5-20 的重量比组成 ； 重量比优 选为 20-60 ： 5-15 ； 进一步优选为 30-50 ： 5-15 ； 更进一步优选为 38 ： 9。 0031 所述甲烷抑制剂中的载体为玉米蛋白粉、 沸石粉或稻壳粉， 优

23、选为稻壳粉。 0032 所述矿物质复合物由以下重量百分比的成分组成 ： 一水硫酸亚铁 8.0-25.0%、 五水硫酸铜 1.2-5.0%、 一水硫酸锰 10.0-28.0%、 一水硫酸锌 8-20%、 含钴 1% 的氯化钴 1.0-3.5%、 含碘 1% 的碘化钾 4.0-10%、 含硒 1% 的亚硒酸钠 0.8-3.0%， 载体 5.5-67%， 所述载 体为稻壳粉、 玉米蛋白粉或沸石粉， 优选为沸石粉。 0033 优选地， 所述矿物质复合物由以下重量百分比的成分组成 ： 一水硫酸亚铁 15.0%、 五水硫酸铜 2.5%、 一水硫酸锰 19.0%、 一水硫酸锌 14.5%、 含钴 1% 的氯

24、化钴 2.6%、 含碘 1% 的 碘化钾 7.0%、 含硒 1% 的亚硒酸钠 1.5%， 载体 37.9%。 0034 所述维生素复合物是由以下重量份的成分组成 ： 维生素 A1.3-5%、 维生素 D0.3-1.2%、 维生素 E3.5-14.5%、 抗氧化剂 0.8-3.0%， 载体 76.3-94.1% ； 所述抗氧化剂为乙 氧基喹啉， 所述载体为麸皮、 米糠、 玉米蛋白粉， 优选为玉米蛋白粉。 0035 优选地， 所述维生素复合物由以下重量份的成分组成 ： 维生素 A2.5% ； 维生素 D0.6% ； 维生素 E7.2% ； 抗氧化剂 1.5%， 载体 88.2%。 0036 所述载

25、体为沸石粉、 玉米蛋白粉或稻壳粉， 优选为沸石粉。 0037 本发明还提供了上述预混合饲料的制备方法， 该方法包括以下步骤 ： 0038 按照配比称取各组分， 然后分别制备维生素复合物、 矿物质复合物， 再按配比称取 甲烷抑制剂、 硫酸钠、 载体， 然后再按照等量递加法混合预混合饲料中的所有成分， 即可。 0039 本发明还提供了上述预混合饲料在抑制牛或羊甲烷排放的饲料的应用。 0040 所述应用是指将上述预混合饲料以 1% 的比例添加到牛羊精饲料中， 混合均匀后， 即可饲喂牛或羊。 0041 本发明提供的牛羊用的甲烷抑制剂及含其预混合饲料具有以下优点 ： 0042 1、 本发明饲料中的甲烷抑

26、制剂采用了桑叶黄酮或白藜芦醇或桑叶黄酮与白藜芦 说 明 书 CN 103518965 B 6 4/15 页 7 醇， 其中， 桑叶黄酮是种植量较大的桑树提取物， 绿色安全， 其来源于桑叶， 栽桑养蚕是我国 农业的传统产业 , 全国有数千万亩桑园 , 因此桑叶在我国有着大量的资源优势。桑叶中总 黄酮含量占桑叶干重的1%-3%， 是所有植物茎叶中黄酮类化合物含量较高的一种。 白藜芦醇 是一种生物性很强的天然多酚类物质， 对多种细菌、 真菌、 病毒均有抑制作用。针对白藜芦 醇提取方法的研究近年来越来越丰富， 其在生物和医药方面的作用也逐步被开发出来， 而 本发明着重其在瘤胃中调控甲烷排放的作用， 通

27、过动物试验研究确定了其效果。 0043 除单独使用桑叶黄酮或白藜芦醇作为甲烷抑制剂外， 还可将两者组合使用。桑叶 黄酮和白藜芦醇均含有苯环结构以及多元酚性羟基、 多羟基， 在动物饲料中混合使用可产 生协同增效作用， 使两者的作用比单独使用显著增强。 因此， 本发明在单独使用桑叶黄酮或 白藜芦醇的基础上， 还提出两者的组合， 以提高其降低甲烷菌活性、 增强机体功能的作用。 0044 2、 发明人摈弃体外试验的缺陷， 通过呼吸代谢试验方法实测甲烷排放量的方法， 筛选出有效的甲烷抑制剂及其添加比例， 应用于反刍动物预混合饲料中， 降低反刍动物养 殖业甲烷排放水平， 提高生产经济效益。 0045 通过

28、实测肉羊 24 小时的二氧化碳、 甲烷排放量， 在桑叶黄酮的不同添加比例中筛 选出甲烷排放量最低的组， 从而确定其在反刍动物饲料中的适宜比例。 研究表明， 桑叶黄酮 本身对动物机体具有抑菌、 抗炎等作用， 可提高动物生长健康水平。 0046 3、 经过实验考察， 与未添加桑叶黄酮和白藜芦醇的日粮相比， 饲喂含桑叶黄酮或 白藜芦醇或桑叶黄酮和白藜芦醇组合的预混合饲料， 不管日排放量还是甲烷排放量的日产 量 / 代谢体重均显著降低， 且桑叶黄酮和白藜芦醇组合效果更优， 具有协同效果， 这方面尚 未见相同文献。 0047 4、 本发明涉及的预混合饲料， 在降低甲烷排放的功能上， 不使用离子载体抗生素

29、 及化学合成的电子受体， 而是选择了绿色安全的植物提取物， 并从中国资源量角度考虑， 以 资源较多、 提取过程较为环保的桑叶黄酮为主， 具有安全、 实用、 有效等优势。 具体实施方式 0048 以下实施例用于说明本发明， 但不用来限制本发明的范围。 0049 所述白藜芦醇购自西安飞达生物技术有限公司， 纯度为 98% ； 0050 所述桑叶黄酮购自西安飞达生物技术有限公司， 纯度为 10% ； 0051 其他饲料添加剂及饲料原料皆从饲料市场购买获得。 0052 实施例 1 ： 可降低牛羊甲烷排放量的预混合饲料 0053 1、 甲烷抑制剂的组成及制备方法 ： 0054 称取桑叶黄酮 38kg，

30、载体 （玉米蛋白粉） 112kg， 即桑叶黄酮在甲烷抑制剂中占 25.3%。混合均匀， 备用。 0055 2、 预混合饲料的组成及制备方法 0056 2.1 组成 ： 0057 组成重量 （kg）重量百分比 （%） 甲烷抑制剂15015.0 说 明 书 CN 103518965 B 7 5/15 页 8 维生素复合物10010.0 矿物质复合物20020.0 硫酸钠40040.0 沸石粉15015.0 合计1000100 0058 1） 所述维生素复合物的组成为 ： 0059 组成重量 （kg）重量百分比 （%） 维生素 A2.52.5 维生素 D0.60.6 维生素 E7.27.2 抗氧化剂

31、 ( 乙氧基喹 啉 ) 1.51.5 玉米蛋白粉88.288.2 合计100100 0060 制备方法 ： 将所述成分， 按照等量递加法混合均匀后， 备用。 0061 2） 所述矿物质复合物的组成为 ： 0062 组成重量 （kg）重量百分比 （%） 一水硫酸亚铁15.015.0 五水硫酸铜2.52.5 一水硫酸锰19.019.0 一水硫酸锌14.514.5 含钴 1% 的氯化钴2.62.6 含碘 1% 的碘化钾7.07.0 含钴 1% 的亚硒酸钠1.51.5 说 明 书 CN 103518965 B 8 6/15 页 9 沸石粉37.937.9 合计100100 0063 按照配比称取各原料

32、， 混合均匀后备用。 0064 2.2 制备方法 ： 0065 按照配比称取各原料， 混合均匀后， 即得预混合饲料。 0066 3、 使用方法 ： 0067 将配制好的预混合饲料， 按 1% 的比例添加入精料中， 混合均匀后， 即可饲喂给牛 羊。 0068 实施例 2 ： 可降低牛羊甲烷排放量的预混合饲料 0069 1、 甲烷抑制剂的组成及制备方法 ： 0070 称取桑叶黄酮 66kg， 载体 （玉米蛋白粉） 84kg， 即桑叶黄酮占甲烷抑制剂的比例是 44%。混合均匀， 备用。 0071 2、 预混合饲料的组成及制备方法 0072 2.1 组成 ： 0073 组成重量 （kg）重量百分比 （

33、%） 甲烷抑制剂15015.0 维生素复合物10010.0 矿物质复合物20020.0 硫酸钠40040.0 沸石粉15015.0 合计1000100 0074 所述维生素复合物、 矿物质混合物同实施例 1。 0075 2.2 制备方法 ： 同实施例 1。 0076 3、 使用方法 ： 同实施例 1。 0077 实施例 3 ： 可降低牛羊甲烷排放量的预混合饲料 0078 1、 甲烷抑制剂的组成及制备方法 ： 0079 称取桑叶黄酮 132kg， 载体 （玉米蛋白粉） 18kg， 即桑叶黄酮占甲烷抑制剂的比例是 88%。混合均匀， 备用。 0080 2、 预混合饲料的组成及制备方法 0081 2

34、.1 组成 ： 0082 说 明 书 CN 103518965 B 9 7/15 页 10 组成重量 （kg）重量百分比 （%） 甲烷抑制剂15015.0 维生素复合物10010.0 矿物质复合物20020.0 硫酸钠40040.0 沸石粉15015.0 合计1000100 0083 所述维生素复合物、 矿物质混合物同实施例 1。 0084 2.2 制备方法 ： 同实施例 1。 0085 3、 使用方法 ： 同实施例 1。 0086 实施例 4 ： 可降低牛羊甲烷排放量的预混合饲料 0087 1、 甲烷抑制剂的组成及制备方法 ： 0088 称取白藜芦醇 9kg， 载体 （稻壳粉） 141kg，

35、 即白藜芦醇在甲烷抑制剂中占 6%。混合 均匀， 备用。 0089 2、 预混合饲料的组成及制备方法 0090 2.1 组成 ： 0091 组成重量 （kg）重量百分比 （%） 甲烷抑制剂15015.0 维生素复合物505.0 矿物质复合物10010.0 硫酸钠40040.0 沸石粉30030.0 合计1000100 0092 1） 所述维生素复合物的组成为 ： 0093 组成重量 （kg）重量百分比 （%） 维生素 A5.05.0 说 明 书 CN 103518965 B 10 8/15 页 11 维生素 D1.21.2 维生素 E14.514.5 抗氧化剂 ( 乙氧基喹啉 )3.03.0

36、玉米蛋白粉76.376.3 合计100100 0094 制备方法 ： 将所述成分， 按照等量递加法混合均匀后， 备用。 0095 2） 所述矿物质复合物的组成为 ： 0096 组成重量 （kg）重量百分比 （%） 一水硫酸亚铁25.025.0 五水硫酸铜5.05.0 一水硫酸锰28.028.0 一水硫酸锌20.020.0 含钴 1% 的氯化钴3.53.5 含碘 1% 的碘化钾10.010.0 含钴 1% 的亚硒酸钠3.03.0 沸石粉5.55.5 合计100100 0097 按照配比称取各原料， 混合均匀后备用。 0098 2.2 制备方法 ： 0099 将所有原料混合在一起， 先以 50kg

37、 机组预混合， 再添加入大比例的载体， 在 500kg 机组中混合均匀。 0100 3、 使用方法 ： 0101 将配制好的预混合饲料， 按 1% 的比例添加入精料中， 混合均匀后， 即可饲喂给牛 羊。 0102 实施例 5 ： 可降低牛羊甲烷排放量的预混合饲料 0103 1、 甲烷抑制剂的组成及制备方法 ： 0104 称取白藜芦醇 17kg， 载体 （稻壳粉） 133kg， 即白藜芦醇在甲烷抑制剂中占 11.3%。 混合均匀， 备用。 0105 2、 预混合饲料的组成及制备方法 说 明 书 CN 103518965 B 11 9/15 页 12 0106 2.1 组成 ： 0107 组成重量

38、 （kg）重量百分比 （%） 甲烷抑制剂15015.0 维生素复合物505.0 矿物质复合物10010.0 硫酸钠40040.0 沸石粉30030.0 合计1000100 0108 所述维生素复合物、 矿物质复合物的组成和配制方法同实施例 4。 0109 3、 使用方法 ： 同实施例 4。 0110 实施例 6 ： 含有甲烷抑制剂的预混合饲料 0111 1、 甲烷抑制剂的组成及制备方法 ： 称取桑叶黄酮 38kg（38%） ， 白藜芦醇 9kg（9%） ， 载体 （稻壳粉） 53kg， 混合均匀， 备用。 0112 2、 预混合饲料的组成及制备方法 0113 2.1 组成 ： 0114 组成重

39、量 （kg）重量百分比 （%） 甲烷抑制剂10010.0 维生素复合物15015.0 矿物质复合物30030.0 硫酸钠30030.0 沸石粉15015.0 合计1000100 0115 1） 所述维生素复合物的组成为 ： 0116 组成重量 （kg）重量百分比 （%） 维生素 A1.31.3 说 明 书 CN 103518965 B 12 10/15 页 13 维生素 D0.30.3 维生素 E3.53.5 抗氧化剂 ( 乙氧基喹啉 )0.80.8 玉米蛋白粉94.194.1 合计100100 0117 制备方法 ： 将所述成分， 按照等量递加法混合均匀后， 备用。 0118 2） 所述矿物

40、质复合物的组成为 ： 0119 组成重量 （kg）重量百分比 （%） 一水硫酸亚铁8.08.0 五水硫酸铜1.21.2 一水硫酸锰10.010.0 一水硫酸锌8.08.0 含钴 1% 的氯化钴1.01.0 含碘 1% 的碘化钾4.04.0 含钴 1% 的亚硒酸钠0.80.8 沸石粉67.067.0 合计100100 0120 按照配比称取各原料， 混合均匀后备用。 0121 2.2 制备方法 ： 0122 将所有原料混合在一起， 先以 50kg 机组预混合， 再添加入大比例的载体， 在 500kg 机组中混合均匀。 0123 3、 使用方法 ： 0124 将配制好的预混合饲料， 按 1% 的比

41、例添加入精料中， 混合均匀后， 即可饲喂给牛 羊。 0125 实验例 1 ： 含有甲烷抑制剂 （桑叶黄酮） 的预混合饲料的试验效果验证 0126 1、 试验动物与日粮 0127 实验动物 ： 试验选取 15 只体重为 （60.01.73） kg， 年龄相近、 体况良好的杜泊绵 羊 （） 小尾寒羊 （） 杂交 F1 代肉用成年母羊， 试验前打好耳号， 免疫注射三联四防疫苗 并驱虫， 每头羊单独圈养于羊栏 （3.20.8） m2中。 说 明 书 CN 103518965 B 13 11/15 页 14 0128 试验日粮 ： 为精料和羊草， 按30 ： 70比例混合。 各试验组预混合饲料不同。 试

42、验日 粮组成及营养水平见表 1。 0129 表 1 ： 试验饲粮组成及营养水平 （风干基础） 0130 0131 0132 2、 试验分组与饲养管理 0133 试验采用单因素试验设计， 分为对照期和试验期。 对照期时， 实验各组的羊饲喂不 含甲烷抑制剂的饲料 ； 试验期时， 将 15 只羊分为 5 组， 即 A、 B、 C、 D、 E 组， 每组 3 个重复， 每 重复 1 只。其中 ： 0134 对照组 ： 对照期， 日粮的预混合饲料中不添加桑叶黄酮 ； 0135 A 组 ： 试验期， 日粮的预混合饲料中桑叶黄酮添加量为 1.65kg/100kg ； 0136 B 组 ： 试验期， 日粮的预

43、混合饲料为实施例 1 中的预混合饲料， 桑叶黄酮添加量为 3.8kg/100kg ； 0137 C 组 ： 试验期， 日粮的预混合饲料为实施例 2 中的预混合饲料， 桑叶黄酮添加量为 6.6kg/100kg ； 0138 D 组 ： 试验期， 日粮的预混合饲料为实施例 3 中的预混合饲料， 桑叶黄酮添加量为 13.2kg/100kg ； 0139 E 组 ： 试验期， 日粮的预混合饲料中桑叶黄酮添加量为 26.4kg/100kg。 0140 对照组给予早、 中、 晚三次日粮 ； 除对照组外各试验羊饲喂上述日粮的剂量是 1500g/（只d） ， 于每天 8:00、 18:00 饲喂， 且每只羊每

44、天中午补饲羊草 200g， 自由饮水。 0141 3、 测定指标与方法 0142 每期试验共 16 天， 预试期 7 天， 正试期 9 天。正试期采用 Sable 开路式循环呼吸 测热系统对 15 只羊进行呼吸测热， 测定羊的甲烷排放量 （包括呼吸道和消化道以及体表排 出的甲烷） 。 说 明 书 CN 103518965 B 14 12/15 页 15 0143 试验采用美国 Sable 呼吸测热系统， 该系统连接 3 个呼吸测热室， 可以同时测定 3 只羊的气体交换量。测热时， 将羊只固定于测热室内， 每个测热室内配有料槽和水槽， 保证 自由采食和饮水。呼吸测热系统可以同时测定羊只的 CH4

45、排放量。羊只进入呼吸测热室先 适应 24h， 随后测定 24h CH4排放量。系统首先测定环境空气中的 CH4， 然后依次测定 3 个呼 吸测热室中的 CH4， 最后再次测定空气中的 CH4。以 2 次环境空气中的 CH4含量的平均值为 基底值， 呼吸测热室内 CH4含量与该基底值之差值即为羊只 CH4的排放量。每次环境空气测 定时间为 2min， 环境向呼吸测热室的置换测定时间为 1min， 然后进行单个呼吸测热室的测 定时间为 24min（每个呼吸测热室测定时间为 8min） ， 最后呼吸测热室向环境置换测定时间 1min， 再测定环境空气2min， 因此30min完成全部3个呼吸测热室的

46、气体交换量的测定。 以 此循环往复连续测定 24h， 将所有循环计算结果累加即得羊只每天 CH4排放量。计算过程由 Sable 呼吸测热系统的测定程序及对应的宏文件于计算机统计分析生成。 0144 4、 数据处理 0145 试验数据用 Excel 进行初步整理， 再用 SAS9.1 统计软件中的 GLM 进行单因素方差 分析， 若差异显著则用 Duncan 氏法进行多重比较， P0.05） 。 因此白藜芦醇在预混合饲料中 比例以 0.9-1.7kg/100kg 为宜。 0174 实验例 3 ： 含有甲烷抑制剂的预混合饲料的试验效果验证 0175 1、 试验动物与日粮 0176 试验动物 ： 同

47、实验例 1。 0177 试验日粮 ： 各试验组预混合饲料不同。试验日粮组成及营养水平同实施例 1。 0178 2、 试验分组与饲养管理 0179 试验采用单因素试验设计， 分为对照期和试验期。 对照期时， 实验各组的羊饲喂不 含甲烷抑制剂的饲料， 即为对照组 ； 试验期时， 将 45 只羊分为 3 组， 即 A、 B、 C 组。其中 ： 0180 对照组， 对照期内饲喂不含甲烷抑制剂的饲料 ； 0181 试验A组， 15只羊， 试验期， 日粮的预混合饲料为实验例1的B组， 实施例1中的预 混合饲料， 其中桑叶黄酮添加量为 3.8kg/100kg ； 0182 试验B组， 15只羊， 试验期，

48、日粮的预混合饲料为实验例2的试验2组， 实施例4的 预混合饲料， 其中白藜芦醇添加量为 0.9kg/100kg ； 0183 试验C组， 15只羊， 试验期， 日粮的预混合饲料为实施例6的预混合饲料， 其中桑叶 黄酮添加量为 3.8kg/100kg, 白藜芦醇添加量为 0.9kg/100kg。 0184 对照组给予早、 中、 晚三次日粮 ； 除对照组外各试验羊饲喂上述日粮的剂量是 1500g/（只d） ， 于每天 8:00、 18:00 饲喂， 且每只羊每天中午补饲羊草 200g， 自由饮水。 0185 3、 测定指标与方法 ： 同实验例 1。 0186 4、 数据处理 ： 同实验例 1。 0187 5、 结果 0188 表 4 ： 不同处理组的二氧化碳和甲烷产量 0189 0190 注 ： 同行数据后缀不同小写字母者差异显著 （P0.05） 。 0191 表 4 结果显示 ： 未添加甲烷抑制剂时肉羊的日甲烷产量 / 代谢体重为 2.84L/ kgW0.75， 而饲喂添加了 3.8kg/100kg 桑叶黄酮的预混合饲料、 0.9kg/100kg 白藜芦醇的预混 合饲料， 或桑叶黄酮和白藜芦醇组合 （实施例 6）