作为KV13钾通道阻断剂的螺氮杂环庚烷噁唑烷酮.pdf

1、10申请公布号CN102333782A43申请公布日20120125CN102333782ACN102333782A21申请号200980149479222申请日2009121008171421420081212EPC07D498/10200601A61P29/00200601A61P3/10200601A61K31/5520060171申请人雅培卫生保健产品有限责任公司地址荷兰韦斯普72发明人P斯米德M穆利纳里奇JHM兰格KF科勒S努纳兹加西亚E韦格纳74专利代理机构中国国际贸易促进委员会专利商标事务所11038代理人王贵杰54发明名称作为KV13钾通道阻断剂的螺氮杂环庚烷噁唑烷酮57摘要本

2、发明涉及作为电压门控性KV13钾通道阻断剂的螺氮杂环庚烷噁唑烷酮，含有这些化合物的药物组合物，所述化合物的制备方法，用于其合成的新颖中间体的制备方法，和组合物的制备方法。本发明还涉及这种化合物和组合物的用途，尤其是将其给予病人以在对糖尿病、银屑病、肥胖症、移植排斥和炎症性神经病，包括T细胞介导的自身免疫疾病，例如类风湿性关节炎和多发性硬化的治疗中实现治疗效果的用途。所述化合物具有式1，其中所述符号具有说明书中给出的含义30优先权数据85PCT申请进入国家阶段日2011061086PCT申请的申请数据PCT/EP2009/0668362009121087PCT申请的公布数据WO2010/0668

3、40EN2010061751INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书4页说明书19页CN102333796A1/4页21式1的化合物，或互变异构体、立体异构体，或前述任一种的药理学上可接受的盐，其中R1和R2独立地为氢、氘、氟、CF3或烷基C13，所述烷基C13未被取代或被一个或多个氟原子取代，N为0零、1或2，R3选自卤素、烷基C13、CF3、CN、NH2、NHAC、OH、OCH3或OCF3，M为0零、1、2或3，R4选自卤素、烷基C13、CF3、CN、NH2、NHAC、OH、OCH3或OCF3，或R4M与其所连接的苯环一起形成萘基。2权利要求1的化合物，或互变异

4、构体、立体异构体，或前述任一种的药理学上可接受的盐，其中R1和R2独立地为氢或甲基，N为0零或1，R3为氢，M为1或2，且R4选自卤素、CF3、CN、OCH3或OCF3，或R4M与其所连接的苯环一起形成萘基。3权利要求1的化合物或互变异构体、立体异构体，或前述任一种的药理学上可接受的盐，所述化合物选自5S83，5双三氟甲基苯甲酰基31S1苯基乙基1氧杂3，8二氮杂螺46十一烷2酮，5R83，5双三氟甲基苯甲酰基31S1苯基乙基1氧杂3，8二氮杂螺46十一烷2酮，5R83，5双三氟甲基苯甲酰基31R1苯基乙基1氧杂3，8二氮杂螺46十一烷2酮，5S83，5双三氟甲基苯甲酰基31R1苯基乙基1氧杂

5、3，8二氮杂螺46十一烷2酮，5S83氰基苯甲酰基31S1苯基乙基1氧杂3，8二氮杂螺46十一烷2酮，5R83氰基苯甲酰基31S1苯基乙基1氧杂3，8二氮杂螺46十一烷2酮，5R83氰基苯甲酰基31R1苯基乙基1氧杂3，8二氮杂螺46十一烷2酮，权利要求书CN102333782ACN102333796A2/4页35S83氰基苯甲酰基31R1苯基乙基1氧杂3，8二氮杂螺46十一烷2酮。4权利要求1或权利要求2的化合物，或其药理学上可接受的盐，所述化合物为光学活性的对映异构体或非对映异构体。5权利要求1或权利要求2的化合物，或其药理学上可接受的盐，其中与噁唑烷酮环上的氮原子相连的碳原子是R或S对映

6、异构体。6权利要求1或权利要求2的化合物，或其药理学上可接受的盐，其中所述中心季螺碳原子为R或S对映异构体。7式V的化合物，其中R1、R2、N和R3具有权利要求1中给出的含义，这种化合物可用于合成式1的化合物。8式VI的化合物，其中R1、R2、N和R3具有权利要求1中给出的含义，这种化合物可用于合成式1的化合物。9式VII的化合物，权利要求书CN102333782ACN102333796A3/4页4其中R1、R2、N和R3具有权利要求1中给出的含义，这种化合物可用于合成式1的化合物。10权利要求9的化合物，所述化合物为11制备权利要求1的化合物的方法，包括下述步骤I用保护基保护六氢1H氮杂环庚

7、三烯4酮1的氨基，得到式2的酮II将式2的酮环氧化为式3的螺环氧化物III用式RNH2的胺4氨解式3的螺环氧化物，得到式5的氨基醇，其中R代表如下部分其中R1和R2独立地为氢、氘、氟、CF3或烷基C13，所述烷基C13未被取代或被一个或多个氟原子取代；N为0零、1或2；R3选自卤素、烷基C13、CF3、CN、NH2、NHAC、OH、OCH3或OCF3；M为0零、1、2或3，权利要求书CN102333782ACN102333796A4/4页5IV在羰基化试剂存在下，经DMAP催化使氨基醇5闭环形成螺噁唑烷酮衍生物6V将式6的螺噁唑烷酮脱保护，得到式7的化合物。12权利要求11的方法，其中所述保护

8、基选自苄氧基羰基CBZ或叔丁氧基羰基TBOC。13药物，所述药物包含权利要求16中任一项的化合物或其药理学上可接受的盐。14权利要求111中任一项的化合物用于制备药物组合物的用途，其中所述药物组合物用于治疗糖尿病、银屑病、肥胖症、移植排斥和炎症性神经病，包括T细胞介导的自身免疫疾病，例如类风湿性关节炎和多发性硬化。15药物组合物，所述组合物包含至少一种药学上可接受的载体，或至少一种药学上可接受的辅助物质，或其两种或更多种的组合；和药理学活性量的至少一种权利要求111中任一项的化合物或其药理学上可接受的盐。权利要求书CN102333782ACN102333796A1/19页6作为KV13钾通道阻

9、断剂的螺氮杂环庚烷噁唑烷酮技术领域0001本发明涉及药物和有机化学领域。本发明的实施方案涉及并且提供了作为电压门控性KV13钾通道阻断剂的螺氮杂环庚烷噁唑烷酮1氧杂3，8二氮杂螺46十一烷2酮，以及中间体、制剂和方法。背景技术0002WO00/25786MERCKCO，2000、SCHMALHOFER等人BIOCHEMISTRY，41，77817794，2002、BAELLEXPERTOPINTHERPATENTS，159，12091220，2005和HARVEYJMEDCHEM，494，14331441，2006均公开了基于苯甲酰氨基亚甲基环己基骨架SCAFFOLD的电压门控性KV13钾通道

10、阻断剂。0003公开内容0004据发现，取代的螺氮杂环庚烷噁唑烷酮1氧杂3，8二氮杂螺46十一烷2酮是新颖的电压门控性KV13钾通道阻断剂。本发明涉及式1的化合物，或互变异构体、立体异构体或前述任一种的药理学上可接受的盐，00050006其中0007R1和R2独立地为氢、氘、氟、CF3或烷基C13，所述烷基C13未被取代或被一个或多个氟原子取代，0008N为0零、1或2，0009R3选自卤素、烷基C13、CF3、CN、NH2、NHAC、OH、OCH3或OCF3，0010M为0零、1、2或3，0011R4选自卤素、烷基C13、CF3、CN、NH2、NHAC、OH、OCH3或OCF3，或R4M与其

11、所连接的苯环一起形成萘基。0012在一些实施方案中，本发明还涉及式1的化合物，或互变异构体、立体异构体或前述任一种的药理学上可接受的盐，其中R1和R2独立地为氢或甲基，N为0零或1，R3为卤素，M为1或2，且R4选自卤素、CF3、CN、OCH3或OCF3，或R4M与其所连接的苯环一起形成萘基。说明书CN102333782ACN102333796A2/19页70013其它实施方案提供一种或多种式1的化合物或互变异构体、立体异构体或前述任一种的药理学上可接受的盐，其中R1和R2独立地为氢、氘、氟、CF3或烷基C13，所述烷基C13未被取代或被一个或多个氟原子取代；N为0零、1或2；R3选自卤素、烷

12、基C13、CF3、CN、NH2、NHAC、OH、OCH3或OCF3；M为0零、1、2或3；R4选自卤素、烷基C13、CF3、CN、NH2、NHAC、OH、OCH3或OCF3，或R4M与其所连接的苯环一起形成萘基。0014在一些实施方案中，本发明还涉及式1的化合物，或互变异构体、立体异构体或前述任一种的药理学上可接受的盐，其中R1和R2独立地为氢或甲基，N为0零或1，R3为卤素，M为1或2，且R4选自卤素、CF3、CN、OCH3或OCF3，或R4M与其所连接的苯环一起形成萘基。0015其它实施方案提供式1的化合物或互变异构体、立体异构体或前述任一种的药理学上可接受的盐，所述化合物选自00165S

13、83，5双三氟甲基苯甲酰基31S1苯基乙基1氧杂3，8二氮杂螺46十一烷2酮，00175R83，5双三氟甲基苯甲酰基31S1苯基乙基1氧杂3，8二氮杂螺46十一烷2酮，00185R83，5双三氟甲基苯甲酰基31R1苯基乙基1氧杂3，8二氧杂螺46十一烷2酮，00195S83，5双三氟甲基苯甲酰基31R1苯基乙基1氧杂3，8二氮杂螺46十一烷2酮，00205S83氰基苯甲酰基31S1苯基乙基1氧杂3，8二氮杂螺46十一烷2酮，00215R83氰基苯甲酰基31S1苯基乙基1氧杂3，8二氮杂螺46十一烷2酮，00225R83氰基苯甲酰基31R1苯基乙基1氧杂3，8二氮杂螺46十一烷2酮，00235S

14、83氰基苯甲酰基31R1苯基乙基1氧杂3，8二氮杂螺46十一烷2酮。0024其它实施方案提供一种或多种式1的化合物或其药理学上可接受的盐，所述化合物为光学活性的对映异构体或非对映异构体。0025在一些实施方案中，本发明还涉及式1的化合物或其药理学上可接受的盐，其中与噁唑烷酮环中的氮原子相连的碳原子为R或S对映异构体。0026在一些实施方案中，本发明还涉及式1的化合物或其药理学上可接受的盐，其中中心的季螺碳原子为R或S对映异构体。0027本发明的其它实施方案涉及式V、VI或VII的化合物0028说明书CN102333782ACN102333796A3/19页80029其中R1、R2、N和R3具有

15、上述含义，这样的化合物可以用于合成式1的化合物。0030其它实施方案提供下述化合物00310032另一个实施方案提供制备式1的化合物的方法，所述方法包括如下步骤0033I用保护基保护六氢1H氮杂环庚三烯4酮1，得到式2的酮00340035II将式2的酮环氧化为式3的螺环氧化物00360037III用式RNH2的胺4氨解式3的螺环氧化物，得到式5的氨基醇，其中R代表如下部分0038说明书CN102333782ACN102333796A4/19页90039其中R1和R2独立地为氢、氘、氟、CF3或烷基C13，所述烷基C13未被取代或被一个或多个氟原子取代；N为0零、1或2；R3选自卤素、烷基C13

16、、CF3、CN、NH2、NHAC、OH、OCH3或OCF3；M为0零、1、2或3，00400041IV在羰基化试剂存在下，经DMAP催化使氨基醇5闭环形成螺噁唑烷酮衍生物600420043V将式6的螺噁唑烷酮脱保护，得到式7的化合物。0044具体实施方案所提供的上述方法为，其中所述保护基选自苄氧基羰基CBZ或叔丁氧基羰基TBOC。0045其它实施方案提供包含式1的化合物或其药理学上可接受的盐的药物。0046进一步的实施方案提供用于治疗糖尿病、银屑病、肥胖症、移植排斥和炎症性神经病，包括T细胞介导的自身免疫疾病，例如类风湿性关节炎和多发性硬化的式1的化合物。0047在一些实施方案中，本发明还涉及

17、组合物，所述组合物包含至少一种药学上可接受的载体或至少一种药学上可接受的辅助物质，或其两种或更多种的组合；和药理学活性量的至少一种式1的化合物或其药理学上可接受的盐。0048进一步的实施方案提供式1的化合物用于制备药物组合物的用途，所述组合物用于治疗糖尿病、银屑病、肥胖症、移植排斥和炎症性神经病，包括T细胞介导的自身免疫疾病，例如类风湿性关节炎和多发性硬化。0049本发明的其它实施方案包括0050用于治疗糖尿病、银屑病、肥胖症、移植排斥和炎症性神经病，包括T细胞介导的自身免疫疾病，例如类风湿性关节炎和多发性硬化的方法，所述方法包括向需要这种治疗的病人给予式1的化合物；0051阻断KV13钾通道

18、的方法，所述方法包括向需要阻断KV13钾通道的受治疗者给说明书CN102333782ACN102333796A5/19页10予药学上有效量的式1的化合物。0052本发明进一步涉及联合治疗法，其包括将式1的化合物，或包含式1的化合物的药物组合物或制剂与另外的一种或多种治疗剂同时或依次给药，或作为与另外的一种或多种治疗剂的联合制剂给药，从而用于治疗一种或多种上面所列的病症。可以在给予本发明的化合物之前、同时或之后给予所述另外的一种或多种治疗剂。0053本发明还提供用于治疗糖尿病、银屑病、肥胖症、移植排斥和炎症性神经病，包括T细胞介导的自身免疫疾病，例如类风湿性关节炎和多发性硬化的化合物、药物组合物

19、、试剂盒和方法，所述方法包括向需要这种治疗的病人给予式1的化合物。0054本发明化合物具有KV13钾通道阻断活性。本发明化合物的抑制活性可以例如使用本文中描述的或现有技术中已知的一个或多个试验而容易地证实。0055本发明还提供制备本发明化合物的方法和用于那些方法中的中间体。0056如果希望，可以借助任何适当的分离或纯化方法，例如过滤、萃取、结晶、柱色谱、薄层色谱、厚层色谱、制备性低或高压液相色谱，或这些方法的组合来实现本文中描述的化合物和中间体的分离和纯化。适当的离析和分离方法的具体示例可以来自制备和实施例。但是，当然还可以使用其它等价的离析或分离方法。0057本发明的化合物可以含有一个或多个

20、不对称中心，并因此可以为外消旋物和外消旋混合物、单个的对映异构体、非对映异构体混合物和单个的非对映异构体。本发明的所有化合物在其季螺碳原子上都含有至少一个手性中心。绝对手性未知时的手性被称作“构型1”，另一个对映异构体被称作“构型2”。“构型1”和“构型2”可能分别与R或S指定相关联，或者相反地分别与S或R指定相关联。0058取决于各种取代基的性质，分子可以具有额外的不对称中心。每个这种不对称中心将独立地产生两个光学异构体。无论是在混合物中，还是为纯的或部分纯化的化合物，所有可能的光学异构体、对映异构体和非对映异构体都属于本发明的范围。本发明包括这些化合物的所有这些异构形式。式1显示了一类化合

21、物的结构，其没有显示优选的立体化学构型。如所属领域已知的，可以通过其中公开的方法的适当变型实现这些光学异构体的单独合成，或其色谱分离。对结晶产品或结晶中间体如果必要，用含有不对称中心且绝对构型已知的试剂对其进行衍生化进行X射线结晶法可以确定其绝对立体化学构型。可以通过所属领域公知的方法将所述化合物的外消旋混合物分离为单独的对映异构体，例如将化合物的外消旋混合物偶合为对映异构纯的化合物以形成非对映异构体混合物，之后用标准方法，例如分步结晶法或色谱法分离单个的非对映异构体。还可以借助所属领域公知的采用手性固定相的色谱法直接分离所述化合物的外消旋混合物。可选地，通过所属领域公知的方法，使用光学纯的原

22、料或已知构型的试剂通过立体选择性合成可以获得化合物的任何对映异构体。0059式1的化合物的顺式和反式异构体或其药学上可接受的盐也属于本发明，这也适用于式1的化合物的互变异构体。0060所述化合物的一些结晶形式可以作为多晶形物存在，这些也意图包括在本发明中。PET或SPECT能够检测出来的同位素标记的式1的化合物也落在本发明的范围内。这也适用于以13C、14C、3H、18F、125I或其它同位素富集原子标记的、适用于受体结合或代谢研究的式1的化合物。说明书CN102333782ACN102333796A6/19页110061本发明的化合物还可以在神经功能、功能障碍和疾病的生物化学研究中用作试剂或

23、标准物。0062定义0063用于描述本发明的化合物的一般术语具有其通用含义。本文中所用的术语烷基指单价饱和的支链或直链的烃链。除非另外说明，否则这种链可以含有1至18个碳原子。这样的烷基的代表是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、己基、异己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七烷基、十八烷基等。当限定为“低级”时，所述烷基含有1至6个碳原子。同样的碳含义适用于母体术语“烷烃”，并适用于衍生的术语例如“烷氧基”。各种含烃部分的碳含量以前缀表示，指出了在所述部分中碳原子的最小和最大数值，即前缀CXY定义

24、的存在的碳原子数为整数“X”至整数“Y”，含端值。“烷基C13”例如包括甲基、乙基、正丙基或异丙基，“烷基C14”包括“甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、2丁基、异丁基或叔丁基”。0064“卤代”或“卤素”指氯代、氟代、溴代或碘代；“杂烷基、杂芳基”等中使用的“杂”包括含有一个或多个N、O或S原子。“杂烷基”包括在任意位置上带有杂原子的烷基，并因此包括结合了N的、结合了O的或结合了S的烷基。0065术语“取代的”意指指定的基团或部分含有一个或多个取代基。其中任何基团可以带有多个取代基，并且可以提供多个可能的取代基，所述取代基各自独立地进行选择，不一定相同。术语“未取代的”意指指定的基团不含有

25、取代基。根据取代基的定义，术语“独立地”意指当可能有多于一个的这种取代基时，其彼此可以相同或不同。0066本文中所用的作为另一个基团的一部分的术语“氧基”、“硫基”和“羰基”分别指氧原子、硫原子和羰基CO，其作为两个基团例如羟基、氧基烷基、硫烷基、羧基烷基等的连接基。本文中单独或作为另一个基团的一部分使用的术语“氨基”指可以为端基或为两个其它基团的连接基的氮原子，其中所述基团可以为伯、仲或叔分别为两个氢原子键合在所述氮原子上、一个氢原子键合在所述氮原子上和无氢原子键合在所述氮原子上胺。为了提供更简明的描述，术语“化合物”或“多种化合物”包括互变异构体、立体异构体或药理学上可接受的盐，在没有明确

26、提及的时候也是如此。0067术语“形式”包括所有固体多晶型物、溶剂合物和无定形形式。“晶体”指相同化合物的各种固体形式，例如多晶型物、溶剂合物和无定形形式。“共晶”是指具有独特晶格的多组分晶体由中性化合物制备的新化学物质。“无定形形式”是指不具有长周期结构的非结晶物质，其通常不会产生独特的X射线衍射图案。BYRNPHARMACEUTICALRESEARCH，127，945954，1995和MARTIN“REMINGTONTHESCIENCEANDPRACTICEOFPHARMACY”，MACKPUBLISHINGCOMPANY，19TH版，EASTON，PA，第2卷，第83章，14471462

27、，1995对晶型进行了一般性描述。“多晶型物”是指化合物可以以不同的晶体堆积方式进行结晶的晶体结构，其中所有堆积方式都具有相同的元素组成。多晶型性是一种常见现象，其受多种结晶条件例如温度、过饱和水平、杂质存在、溶剂极性、冷却速率的影响。不同的多晶型物通常具有不同的X射线衍射图案、固态NMR谱图、红外或拉曼谱图、熔点、密度、硬度、晶形、光学和电学性质、稳定性和溶解性。重结晶溶剂、结晶速率、贮存温度和其它因素可能会导致一种结晶形式为主要形式。说明书CN102333782ACN102333796A7/19页120068为了提供更简明的描述，本文中给出的一些定量描述没有用“约”进行限制。应该理解，无论

28、是否明确使用术语“约”，本文中给出的每个数量都意指实际给出的数值，并且其还意指所属领域普通技术人员能够合理推断的这种给定值的近似值，包括这种给定值的试验或测量条件所导致的近似值。0069在本申请的说明书和权利要求中，措辞“包括”和所述措辞的变型，例如“包含”和“含有”，并不意图排除其它添加剂、组分、整数或步骤。0070虽然可以将式1的化合物按照原化学品形式给药，但是优选其为“药物组合物”。根据进一步的方面，本发明提供一种药物组合物，所述组合物包含至少一种式1的化合物、至少一种其药学上可接受的盐或前述任一种的混合物，以及一种或多种其药学上可接受的载体，并且可以含有或不含有一种或多种其它治疗成分。

29、所述载体必须是“可接受的”，意思是与制剂的其它试剂可兼容并且对其受用者无毒。本文中所用的术语“组合物”包括包含预定量或预定比例的指定成分的产品，以及指定量的指定成分经组合而直接或间接产生的任何产品。就药物组合物而言，该术语包括包含一种或多种活性成分和任选的包含惰性成分的载体的产品，以及任意两种或多种成分经组合、配合或聚集而直接或间接产生的任何产品。通常，按照下述方式制备药物组合物使活性成分与液体载体或精细分散的固体载体或二者均匀、密切结合，之后如果必要将所述产品成型为希望的制剂。所述药物组合物包括足量的活性目标化合物，从而对疾病的进展或症状产生希望的作用。因此，本发明的药物组合物包括由本发明的

30、化合物与药学上可接受的载体混合而制得的任何组合物。“药学上可接受的”意指载体、稀释剂或赋形剂必须与所述制剂的其它成分兼容并且对其受用者无毒。0071在本申请的背景下，术语“联合制剂”包括真正的联合，意指式1的化合物与一种或多种其它药物被物理结合在一种制剂，例如片剂或注射液中，以及“多部分试剂盒”，其包含在分开的剂型中的式1的化合物和一种或多种其它药物，加上使用说明，并且带有或不带有其它有助于组分化合物给药的手段，例如标签或图样。对于真正的联合，所药物疗法被定义为同时给药。“多部分试剂盒”的内容物可以同时给药或以不同的时间间隔给药。是伴随疗法还是顺序疗法取决于使用的其它药物的特性、诸如作用开始和

31、持续时间的特性、血浆水平、清除性等，并且取决于所述疾病、其阶段和病人个体的特性。0072剂量。下面确定本发明化合物作为电压门控性KV13通道抑制剂的效力。根据测定的给定的式1的化合物的效力，可以估计出理论的最低有效剂量。当化合物浓度等于测定的抑制常数的2倍时，所述化合物可以阻断将近100的KV13通道。将该浓度换算为每KG病人的化合物MG数，可以得到理论的最低有效剂量，其中假定为理想的生物利用率。药物代谢动力学、药效学和其它需要考虑的事项可能会使实际给药的剂量改变至更高或更低值。活性成分的常用日剂量可以在宽范围内变化并且取决于多种因素，例如相关适应症、给药途径、病人的年龄、体重和性别，其可以由

32、内科医生确定。通常，单次或以多个单独剂量给药于病人时，总剂量可以为例如每日0001至10MG/KG体重，更通常为每日001至1,000MG活性成分总量。向需要治疗的病人给药这种剂量，每日1至3次，或按照药效需要而多次给药，给药时间为至少两个月，更通常至少六个月，或长期给药。0073本文中所用的术语“治疗有效量”指在治疗通过给予本发明的组合物可以治疗的症状时，治疗剂的量。该量包括在组织体系、动物或人体中足以显示可检测的治疗或缓解说明书CN102333782ACN102333796A8/19页13反应的量。所述效果可以包括例如治疗本文中所列的病症。用于患者的精确的药学上有效量取决于患者的体型和健康

33、状况、待治疗的病症的性质和程度、主治医生研究人员、兽医、医生或其它临床医师的建议，和所选的给药疗法或疗法组合。因此，提前指定确切的药学上有效量也没有用。“药物盐”指在同一结晶结构中含有活性药物成分API以及另外的非毒性分子物质的酸碱配合物。术语“药学上可接受的盐”指下述盐在合理的医学判断范围内，适用于与人和低级动物的组织接触而不产生过度的毒性、辐射、过敏反应等并且具有合理的利益/风险比。药学上可接受的盐是所属领域公知的。如果最后要分离和纯化本发明的化合物则可以就地制备所述盐，或通过使其与药学上可接受的非毒性碱或酸，包括无机或有机碱和无机或有机酸反应来制备BERGE，SM“PHARMACEUTI

34、CALSALTS”，JPHARMACEUTICALSCIENCE，66，1191977。用在药学上可接受的盐中的常规阴离子包括氯离子、溴离子、硫酸根、硝酸根、磷酸根、碳酸氢根、甲磺酸根、乙磺酸根、羟乙基磺酸盐ISOTHIANATE、甲苯磺酸根、萘磺酸根、苯磺酸盐、乙酸根、丙酸根、马来酸根、苯甲酸根、水杨酸根、富马酸根、柠檬酸根、乳酸根、马来酸根、酒石酸根、双羟萘酸根、琥珀酸根、乙醇酸根、己酸根、辛酸根、癸酸根、硬脂酸根、油酸根、天冬氨酸根和谷氨酸根。在药学上可接受的盐中用作反离子的常规阳离子包括钠、钾、钙、镁、锂、锌、铝、精氨酸、赖氨酸、组胺酸、三乙胺、乙醇胺、三乙醇胺、亚乙基二胺、甲葡胺、普

35、鲁卡因和N，N双苄基1，2乙二胺BENZATHINE。0074使所述盐与碱或酸接触并从常规物质中分离母体化合物则可以使“游离碱”形式得以再生。所述化合物母体形式的某些物理性质，例如在极性溶剂中的溶解性与各种盐形式有所不同，但是另外地，用于本发明的目的时所述盐与化合物母体形式是等效的。0075本文中所用的术语“治疗”指对人类病症或疾病的任何治疗，包括1抑制疾病或病症，即阻止其发展，2缓解疾病或病症，即使病症复原，或3终止疾病的症状。术语“抑制”包括其普遍接受的含义，包括限制、缓解、改善，和减缓、终止或逆转进程、严重性或导致的症状。如本文中所用的，术语“医学疗法”意图包括在人体内或体外进行的诊断和

36、治疗法。0076实施例1分析方法0077除非另外说明，否则使用BRUKERARX4001H400MHZ，13C100MHZ，在300K下，于指示的溶剂中确定核磁共振谱图1HNMR和13CNMR，APT。在VARIANINOVA500光谱仪上进行19FNMR和13CNMR试验，其中所述光谱仪使用5MMSW探针于1174T1H，4999MHZ；13C，1257MHZ；19F，507MHZ，4704MHZ下操作。在得自CAMBRIDGEISOTOPELABORATORIESLTD的氘代氯仿或二氯甲烷中确定谱图。化学位移从四甲基硅烷向低磁场方向以PPM表示1H，13C或CCL3F19F。偶合常数J以H

37、Z表示。NMR谱的峰形标记为符号“Q”四重峰、“DQ”两个四重峰、“T”三重峰、“DT”两个三重峰、“D”双重峰、“DD”两个双重峰、“S”单峰、“BS”宽的单峰和“M”多重峰。将样品与一滴D2O混合后鉴别出NH和OH信号。0078快速色谱法指使用指示的洗脱剂和硅胶ACROS00300075MM，或MERCK硅胶6000400063MM进行纯化。0079使用硅胶6000630200MM，MERCK实施柱色谱法。0080在BCHIB545熔点仪上记录熔点。说明书CN102333782ACN102333796A9/19页140081使用薄层色谱法TLC，用指定的洗脱液在硅胶涂敷的塑料片MERCK预

38、涂布硅胶60F254上监测反应。使用UV光254NM或I2使点显现。0082采用JEOLJMSSX/SX102A串联质谱仪测量质谱和精确的质量，其中所述质谱仪使用快原子轰击FASTATOMBOMBARDEMENTFAB。使用分辨能力为10,00010峰谷定义的高分辨率FAB质谱分析法。0083在C18柱INERTSILODS3，粒度3MM；46MM50MM上进行分析性HPLC，使用下列洗脱梯度5至95CH3CN水溶液的线性梯度，历时5分钟，其中所述的95CH3CN含有004HCO2H，然后以20MLMIN1的速率使含有004HCO2H的95CH3CN水溶液流过2分钟。在254NM处检测产品。0

39、084液相色谱质谱LCMS“方法W”0085LCMS系统由WATERS1525泵及与其相连的WATERS2777自动采样器组成。LC方法为00860087A100的水和02HCOOH；B100乙腈和02HCOOH0088所述自动采样器具有10L的注射回路，注射体积为10L。所述自动采样器与带有25UM颗粒的WATERSSUNFIREC183046MM柱连接。所述柱恒温至室温约23。所述柱与WATERS2996PDA连接。波长从240扫描至320NM。分辨率为12NM，取样速率为20HZ。经过PDA之后，将物流分为11并连接至WATERS2424ELSD，其具有下列参数气体压力40PSI；数据速

40、率20点/秒；放大500；时间常数02秒；以喷雾器方式冷却；漂移管50。0089样品还采用WATERSZQ质量检测器测量。所述质谱仪具有下列参数扫描范围117900AMU；极性正；数据格式质心；每次扫描的时间0500秒；中间扫描的时间005秒；毛细管25KV；锥心25V；提取器2V；RF镜头05V；源温125；去溶剂温度400；锥心气体100L/HR；去溶剂气体800L/HR；LM1分辨率15；HM1分辨率15；离子能量05；倍增器500V。整个系统由MASSLYNX41控制。0090液相色谱质谱分析法LCMS“方法H”0091仪器ALLIANCEHT2795，WATERS0092光电二极管阵

41、列检测器2996，WATERS0093ZQSINGLEQUAD，WATERS/MICROMASS0094PLELS1000光散射检测器，POLYMERLABS0095LC参数说明书CN102333782ACN102333796A10/19页150096柱XTERRAMSC18，25M，50X46MM，WATERS0097保护柱XTERRAMSC18，35M，10X21MM，WATERS0098溶剂A001MNH4ACPH505乙腈0099溶剂B乙腈0100梯度特征100A1MIN恒溶剂0101100A6MIN100B线性或非线性梯度，曲线40102100B2MIN恒溶剂0103100A1MIN

42、100B线性梯度0104100A1MIN恒溶剂0105停止时间MIN100106流速ML/MIN100107注射体积L30108PDA参数0109说明书CN102333782ACN102333796A11/19页1601100111ELSD参数01120113实施例2药理学方法0114对KV13钾通道的体外抑制率所述试验用于确定钾离子通道在细胞膜内的透过性。在细胞培养中，由于铷RB具有类似的物理化学形式，因此其可以用作钾的代替物。向由附着的CHO细胞过表达的电压门控性钾通道KV13上负载RB。对细胞进行去极化作用，从而使钾通道打开，而RB流过所述钾通道。这样，上清液中的RB浓度与钾离子通道透过

43、性成正比。为了鉴定钾通道阻断剂，在去极化作用之前用化合物培养细胞。上清液中RB的减少表明存在钾离子通道阻断剂。使用原子吸收光谱仪测量上清液中的RB浓度。0115在37/5CO2中培养CHO细胞表达的KV13、KV15或HERG离子通道。在试验之前，将细胞接种在96孔板中CORNING，NEWYORK，USA并培养24H。弃去介质，并用100LRB缓冲液代替介质10MMHEPESPH74，5MM葡萄糖，5MMRBCL，140MMNACL，2MM说明书CN102333782ACN102333796A12/19页17CACL2，1MMMGSO4。培养4H之后，用低钾缓冲液洗涤细胞3次10MMHEPE

44、SPH74，5MM葡萄糖，5MMKCL，140MMNACL，2MMCACL2，1MMMGSO4。将化合物溶解在75L低钾缓冲液中并将其加入到细胞中。12分钟之后，加入75M高钾缓冲液对细胞进行去极性处理10MMHEPESPH74，5MM葡萄糖，145MMKCL，2MMCACL2，1MMMGSO4，之后再培养15分钟。将上清液转移至96孔板中，使用ZEENIT原子吸收光谱仪ANALYTIKJENA，德国测量RB浓度。将对照与去极性的W/O化合物进行比较，从而确定所述离子通道抑制率。测量进行三次。0116试验数据105M下的KV13抑制率列在“实施例5”的表格中下面。0117实施例3通用的合成情况

45、011801190120可以按照描述的方法由可商购获得的呱啶4酮合成六氢1H氮杂环庚三烯4酮1ROGLANS，A等，SYNTHCOMMUN22，12491258，1992；ASHWOOD，MS等，JCHEMSOCPERKINTRANSI，641644，1995。可以用保护基，例如叔丁氧基羰基TBOC或苄氧基羰基CBZ保护1中的氨基，生成式2化合物。优选，在碱例如氢氧化钠水溶液或三乙胺存在下，于惰性有机溶剂如二氯甲烷或甲醇中进行这种保护。在碱例如氢化钠存在下使用三甲基氧化锍碘化物可以将化合物2中的羰基部分环氧化，从而得到环氧化物3。以此方式，可以经4个步骤由4呱啶酮获得纯的环氧化物3，无需任何色

46、谱纯化步骤。0121可以按照下述方式制备标题化合物用通式4的胺氨解螺环氧化物3，之后使用羰基化剂，例如羰二咪唑CDI使形成的氨基醇5闭环。在该特定反应中，优选存在少量DMAP例如，5MOL，用以催化至通式6的螺噁唑烷酮衍生物的转化。与形成45二氮杂螺癸烷CAROON，JM等，JMEDCHEM1981，24，13201328的类似反应相比，该闭环反应其中形成了4，6二氮杂螺十一烷螺环通常进行得更缓慢。为了提高5至6的转化率，优选从氨基醇5中除去剩余的痕量原料4。对叔丁氧基羰基进行酸解可以使所得的螺噁唑烷酮6脱保护，得到通式7的化合物。通式7的化合物可以与羰基化试剂，例如通式8的酰氯衍生物反应，生

47、成式9化合物。为了清除释放出的盐酸，这种反应优选在碱，例如DIPEA或三乙胺存在下，于惰性有机溶剂，例如乙腈中进行。说明书CN102333782ACN102333796A13/19页180122特定合成方法的选择要取决于所属领域熟练技术人员已知的因素，例如官能团与所用试剂的兼容性、使用保护基的可能性、催化剂、活化和偶合试剂，以及在制备的最终化合物中存在的基本结构特征。0123使用所属领域公知的方法，例如将本发明的化合物与适当的酸，如无机酸或有机酸混合可以获得药学上可接受的盐。0124实施例4中间体的合成0125六氢4氧代4H氮杂环庚三烯1甲酸叔丁酯2将六氢4H氮杂环庚三烯4酮单盐酸盐30G，2

48、00MMOL悬浮在甲醇200ML中并冷却至0。滴加溶解在水20ML中的氢氧化钠802G，200MMOL。逐份加入重碳酸二叔丁酯BOC酸酐4376G，200MMOL，搅拌所得溶液16小时。蒸除甲醇，将剩余物溶解在乙醚400ML和水200ML中。用水洗涤有机层、干燥MGSO4、过滤并真空浓缩，得到为棕色油的粗2。随后经快速色谱纯化乙酸乙酯/石油醚得到为浅黄色油的纯242G，93。1HNMR400MHZ，CDCL3145S，9H，TBU；170182M，2H，254266M，4H，355365M，4H。01261氧杂6氮杂螺26壬烷6甲酸叔丁酯3在氮气氛、搅拌下向三甲基氧化锍碘化物561G，255M

49、MOL在无水DMSO150ML的溶液中加入NAH混合物185G，15当量，60，在矿物油中。65下搅拌混合物1小时，之后加入溶于DMSO10ML中的化合物232G，150MMOL的溶液。在氮气氛下使所述混合物回流整夜。使所述溶液达到室温，加入水，用乙醚3X200ML萃取混合物。用H2O、盐水洗涤合并的有机层，并在NA2SO4上干燥。蒸除ET2O，得到821G32G，95化合物3。1HNMR300MHZ，CDCL3PPM145S，9H，BOC；150210M，6H，260270M，2H，35360M，2H。01274羟基4R1苯基乙基氨基甲基1氮杂环庚烷甲酸叔丁酯5A将螺环氧化物3515G，226MMOL和R1苯基乙基胺4A，5768ML，453MMOL溶解在300MLMEOH/MECN，1/1V/V中。在60下搅拌所述溶液48小时。用TLCCH2CL2/ETOH9/1；RF5A04监测反应。在二氧化硅上真空浓缩反应混合物并用硅胶柱色谱纯化洗脱液CH2CL2/ETOH95/5，得到为油的纯的化合物5A72G，90。01283R1苯基乙基2氧杂3，8二氮杂螺46十一烷8甲酸叔丁酯6A用5025G15当量羰基二咪唑CDI处理5A72G，206MMOL在1400ML无水MEC