一种治疗类风湿性关节炎的药物组合物及制备方法和用途.pdf

1、10申请公布号CN101953906A43申请公布日20110126CN101953906ACN101953906A21申请号201010296866322申请日20071123200610022313220061123CN200710187708220071123A61K36/714200601A61P19/02200601A61P19/04200601A61P29/0020060171申请人成都中医药大学地址611137四川省成都市温江区柳台大道1166号72发明人彭成郭力曹小玉李晋齐姬洁莹余葱葱54发明名称一种治疗类风湿性关节炎的药物组合物及制备方法和用途57摘要本发明治疗类风湿性关节炎

2、的药物组合物，它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂川乌总碱12份、白芍总苷13份。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。本发明药物药效明确，抗炎、镇痛，治疗类风湿性关节炎较好，具有最佳药效配伍，质量可控性强，为临床提供了一种新的选择。66本国优先权数据62分案原申请数据51INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书20页CN101953906A1/1页21一种治疗类风湿性关节炎的药物组合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂川乌总碱12份、白芍总苷13份。2根据权利要求1所述的治疗类风湿性关节炎的药物组合物，其特征在于它是由下述重量配比

3、的原料制备而成的药剂川乌总碱1份、白芍总苷1份；或，川乌总碱1份、白芍总苷2份；或，川乌总碱2份、白芍总苷1份；或，川乌总碱2份、白芍总苷3份。3根据权利要求1或2所述的治疗类风湿性关节炎的药物组合物，其特征在于所述的川乌总碱，总生物碱含量以乌头碱计含量30W/W；白芍总苷，总苷含量以芍药苷计含量30W/W。4根据权利要求1或2所述的治疗类风湿性关节炎的药物组合物，其特征在于所述的药剂是片剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂或口服液。5一种制备权利要求1所述的治疗类风湿性关节炎的药物组合物的方法，包括如下步骤A、称取重量配比的原料川乌总碱12份、白芍总苷13份；C、混合，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分

4、制备成药学上常用的制剂。6权利要求1或2所述的药物组合物在制备治疗类风湿性关节炎的药物中的用途。权利要求书CN101953906A1/20页3一种治疗类风湿性关节炎的药物组合物及制备方法和用途0001本申请是申请号2007101877082的专利申请的分案申请。原申请申请号2007101877082，申请日2007年11月23日，发明名称一种治疗类风湿性关节炎的药物组合物及制备方法和用途。技术领域0002本发明涉及一种治疗类风湿性关节炎的药物组合物，具体地，是药物的有效部位为活性成分制备而成的药物组合物，属中药领域。背景技术0003川乌与白芍配伍的方剂现代临床上已经广泛应用于痹证、类风湿性关节

5、炎、腰椎间盘突出症、强直性脊柱炎、坐骨神经痛、三叉神经痛、膝关节囊积液等疾病，除传统的汤剂外，目前市场上有川乌和白芍的中成药也很多，甚至还有保健品。如治疗癌性疼痛的天蟾胶囊，治疗寒湿型颈椎及膝关节增生性关节炎的附桂骨痛片、附桂骨痛胶囊、附桂骨痛颗粒，治疗骨关节增生性疾病的骨刺胶囊、骨刺片，治疗风寒湿痹的复方小活络丸、寒湿痹颗粒、寒湿痹片，治疗卵巢癌的琥珀丸，治疗筋骨软弱的追风丸，治疗类风湿性关节炎的克痹通药酒，外用治疗跌打损伤的正骨膏，外用治疗哮喘的阿恒喘安贴等，槐木强身保健枕作为一种保健枕已经申请了专利。由此可见，川乌配伍白芍在现代临床应用中已经非常的广泛。发明内容0004本发明的技术方案是

6、提供了一种治疗类风湿性关节炎的药物组合物，本发明的另一技术方案是提供了该药物组合物的制备方法。0005本发明提供了一种治疗类风湿性关节炎的药物组合物，它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂0006川乌12份、白芍13份。0007其中，它是由川乌有效部位、白芍有效部位为活性成分制备而成的药剂0008川乌有效部位12份、白芍有效部位13份，其中所述的川乌有效部位为川乌总碱、川乌多糖；白芍有效部位为白芍总苷、白芍多糖。0009其中，川乌总碱，总生物碱含量以乌头碱计含量30W/W；川乌多糖，总多糖含量以葡萄糖计含量20W/W；白芍总苷，总苷含量以芍药苷计含量30W/W；白芍多糖，总多糖含量以葡萄糖计含

7、量35W/W。0010川乌总碱、川乌多糖、白芍总苷、白芍多糖的提取方法，可以按教科书或文献公开的方法提取制备，如肖崇厚中药化学上海科学技术出版社1997；刘芳，杨广德白芍中芍药苷的提取方法研究中成药，2003，25107922795；杨士友，孙备，黄世福，等白芍中白芍苷提取和纯化工艺的研究安徽医药，2004，81221222；舒晓燕，刘慧，梁静，等川附子粗多糖提取工艺的研究中药材，2006，291213491352；谢晓梅，廖自荣芍药中芍药苷提取方法的比较研究中国中医药科技，200512298299；说明书CN101953906A2/20页4孙玉军，陈彦，吴佳静，等草乌多糖的分离纯化和组成性质

8、研究中国药学杂志，2000；3511731733；黄建明，郭济贤，陈万生，等大孔树脂对草乌生物碱的吸附性能及提纯工艺复旦学报，2003，303267；裴晓红，许闽，李亚飞等白芍多糖铁配合物的合成及一般性质研究河南中医学院学报，2005201162829。0011其中，它是由下述重量配伍的原料制备而成的药剂0012川乌总碱12份、白芍总苷13份。0013其中，它是由下述重量配伍的原料制备而成的药剂0014川乌总碱12份、白芍多糖13份。0015其中，它是由下述重量配伍的原料制备而成的药剂0016川乌多糖12份、白芍总苷13份。0017所述的药剂是片剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂或口服液。0018本发明

9、还提供了该药物组合物的制备方法，包括如下步骤0019A、称取重量配比的原料0020川乌12份、白芍13份；0021B、提取原料中的有效部位，其中，川乌的有效部位为川乌总碱、川乌多糖、白芍有效部位为白芍总苷、白芍多糖；0022C、混合，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成药学上常用的制剂。0023本发明还提供了该药物组合物在制备治疗类风湿性关节炎的药物中的用途。0024本发明药物药效明确，原料将白芍、川乌有效成分配伍，如将川乌有效部位为川乌总碱、川乌多糖；白芍有效部位为白芍总苷、白芍多糖配伍，尤其是制川乌总碱、白芍总苷有一定的抗炎、镇痛效果，但川乌总碱、芍药总苷配伍却有明显的作用。其中，重量

10、配比为23、11、21时抗炎、镇痛，治疗类风湿性关节炎较好，具有最佳药效配伍，质量可控性强，为临床提供了一种新的选择。具体实施方式0025实施例1本发明药物的制备方法0026取原料川乌100G、白芍100G，以3倍量水浸泡30MIN，加至10倍量水煎煮，煮沸后煎6H倾出上清液，过滤，然后浓缩至相当于每毫升含1G制川乌。0027实施例2本发明药物的制备0028取原料川乌100G、白芍300G，按实施例1的方法提取，制粒，装胶囊，得胶囊剂。0029实施例3本发明药物的制备0030取原料川乌总碱100G、白芍总苷100G，按实施例1的方法提取，制粒，装胶囊，得胶囊剂。0031实施例4本发明药物的制备

11、0032取市售川乌总碱200G、白芍总苷300G，加入淀粉、糊精，制粒，装胶囊，得胶囊剂。0033实施例5本发明药物的制备0034取市售川乌总碱100G、白芍多糖100G，加入淀粉、糊精，制粒，压片，得片剂。0035实施例6本发明药物的制备0036取市售川乌总碱200G、白芍多糖300G，加入淀粉、糊精，制粒，装胶囊，得胶囊剂。说明书CN101953906A3/20页50037实施例7本发明药物的制备0038取市售川乌多糖100G、白芍总苷100G，加入淀粉、糊精，制粒，装胶囊，得胶囊剂。0039实施例8本发明药物的制备0040取市售川乌多糖200G、白芍总苷300G，加入淀粉、糊精，制粒，压

12、片，得片剂。0041以下通过具体药效学试验证明本发明的有益效果。0042试验例1制川乌与白芍组分配伍的镇痛作用00431、实验材料004411药物00451制川乌总碱26ML，含15KG生药；实验时配制成含制川乌6的制川乌总碱药液，备用。00462制川乌多糖420ML，含105KG生药；实验时配制成含制川乌6的制川乌多糖药液，备用。00473白芍总苷155ML，含333KG生药；实验时配制成含白芍6的白芍总苷药液，备用。00484白芍多糖1203G，含21KG生药；实验时配制成含白芍6的白芍多糖药液，备用。00495制川乌总碱白芍总苷11混合液按照制川乌和白芍生药11配伍成含制川乌6的制川乌总

13、碱白芍总苷混合液，备用。00506制川乌总碱白芍总苷12混合液按照制川乌和白芍生药12配伍成含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷混合液，备用。00517制川乌总碱白芍总苷21混合液按照制川乌和白芍生药21配伍成含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷混合液，备用。00528制川乌总碱白芍总苷23混合液按照制川乌和白芍生药23配伍成含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷混合液，备用。00539制川乌总碱白芍多糖11混合液按照制川乌和白芍生药11配伍成含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖混合液，备用。005410制川乌总碱白芍多糖12混合液按照制川乌和白芍生药12配伍成含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖混合液，备用。005511制

14、川乌总碱白芍多糖21混合液按照制川乌和白芍生药21配伍成含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖混合液，备用。005612制川乌总碱白芍多糖23混合液按照制川乌和白芍生药23配伍成含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖混合液，备用。005713制川乌多糖白芍总苷11混合液按照制川乌和白芍生药11配伍成含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷混合液，备用。005814制川乌多糖白芍总苷12混合液按照制川乌和白芍生药12配伍成含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷混合液，备用。005915制川乌多糖白芍总苷21混合液按照制川乌和白芍生药21配伍成含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷混合液，备用。006016制川乌多糖白芍总苷23混合液按照

15、制川乌和白芍生药23配伍成含说明书CN101953906A4/20页6制川乌6的制川乌多糖白芍总苷混合液，备用。006117制川乌多糖白芍多糖11混合液按照制川乌和白芍生药11配伍成含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖混合液，备用。006218制川乌多糖白芍多糖12混合液按照制川乌和白芍生药12配伍成含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖混合液，备用。006319制川乌多糖白芍多糖21混合液按照制川乌和白芍生药21配伍成含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖混合液，备用。006420制川乌多糖白芍多糖23混合液按照制川乌和白芍生药23配伍成含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖混合液，备用。0065以上药物为受试药物，均按

16、所述的文献方法提取制备。006621吗啡片阳性药物，由青海制药厂有限公司生产，生产批号20030513。规格5MG/片10片2板20袋20中盒。实验时用蒸馏水配制成02的药液，备用。006712动物0068KM小鼠，雌雄兼有，体重202G，由成都中医药大学实验动物研究中心提供，合格证号川实动管质04第11号，检疫后备用。006913仪器0070RB200型智能热板镇痛仪，由成都泰盟科技有限公司生产。00712、实验方法007221扭体试验0073取220只小鼠雌雄各半随机分为模型对照组N10、阳性对照组N10、制川乌总碱组N10、制川乌多糖组N10、白芍总苷组N10、白芍多糖组N10、制川乌总

17、碱白芍总苷11组N10、制川乌总碱白芍总苷12组N10、制川乌总碱白芍总苷21组N10、制川乌总碱白芍总苷23组N10、制川乌总碱白芍多糖11组N10、制川乌总碱白芍多糖12组N10、制川乌总碱白芍多糖21组N10、制川乌总碱白芍多糖23组N10、制川乌多糖白芍总苷11组N10、制川乌多糖白芍总苷12组N10、制川乌多糖白芍总苷21组N10、制川乌多糖白芍总苷23组N10、制川乌多糖白芍多糖11组N10、制川乌多糖白芍多糖12组N10、制川乌多糖白芍多糖21组N10、制川乌多糖白芍多糖23组N10。按组分别灌胃蒸馏水、02吗啡药液、含制川乌6的制川乌总碱药液、含制川乌6的制川乌多糖药液、含白芍

18、6的白芍总苷药液、含白芍6的白芍多糖药液、含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷11混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷12混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷21混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷23混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖11混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖12混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖21混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖23混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷11混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷12混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷21混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷23混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖11混合液、含制川乌6的

19、制川乌多糖白芍多糖12混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖21混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖23混合液，10ML/说明书CN101953906A5/20页7KG。给药后1H，各鼠腹腔注射06冰乙酸10ML/KG，观察15MIN内各组小鼠出现扭体反应的潜伏期及扭体次数。实验数据资料用SPSS统计软件包进行统计学处理。007422热板试验0075用RB200型智能热板镇痛仪筛选基础痛阈值以小鼠舔后足的时间作为痛阈在530秒的雌性小鼠220只，按基础痛阈值的高低随机分为模型对照组N10、阳性对照组N10、制川乌总碱组N10、制川乌多糖组N10、白芍总苷组N10、白芍多糖组N10、制川乌总碱

20、白芍总苷11组N10、制川乌总碱白芍总苷12组N10、制川乌总碱白芍总苷21组N10、制川乌总碱白芍总苷23组N10、制川乌总碱白芍多糖11组N10、制川乌总碱白芍多糖12组N10、制川乌总碱白芍多糖21组N10、制川乌总碱白芍多糖23组N10、制川乌多糖白芍总苷11组N10、制川乌多糖白芍总苷12组N10、制川乌多糖白芍总苷21组N10、制川乌多糖白芍总苷23组N10、制川乌多糖白芍多糖11组N10、制川乌多糖白芍多糖12组N10、制川乌多糖白芍多糖21组N10、制川乌多糖白芍多糖23组N10。按组分别灌胃蒸馏水、02吗啡药液、含制川乌6的制川乌总碱药液、含制川乌6的制川乌多糖药液、含白芍6

21、的白芍总苷药液、含白芍6的白芍多糖药液、含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷11混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷12混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷21混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷23混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖11混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖12混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖21混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖23混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷11混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷12混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷21混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷23混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖11混合液、含制川乌6的制

22、川乌多糖白芍多糖12混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖21混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖23混合液，10ML/KG。测定末次给药后05H、1H、15H和2H的痛阈值。实验数据资料用SPSS统计软件包进行统计学处理。00763、实验结果007731制川乌与白芍组分配伍对冰乙酸致痛小鼠的影响0078模型对照组小鼠注射06冰醋酸后疼痛明显，表现为扭体次数频繁。阳性对照组给药后疼痛阈值较模型组均提高，表现为潜伏期延长和扭体次数减少，与模型对照组比较，有非常显著性差异；制川乌总碱白芍总苷23配伍组，制川乌总碱白芍多糖11、23配伍组，制川乌多糖白芍总苷11、12配伍组给药后扭体次数显著减少，

23、与模型对照组比较显著性差异。结果详见表1。0079表1制川乌与白芍组分配伍对冰乙酸致痛小鼠的影响XSD说明书CN101953906A6/20页800800081注与模型组比较，P005，P001。008232制川乌与白芍组分配伍对热板致痛小鼠的影响0083实验前各组小鼠基础痛阈值均无显著性差异。给药30MIN后，阳性对照组、制川乌总碱白芍多糖12配伍组痛阈值均显著升高，与模型对照组比较有显著或非常显著性差异。给药60MIN后，阳性对照组痛阈值显著升高，与模型对照组比较有非常显著性差异。给药90MIN后，阳性对照组、制川乌总碱白芍总苷23配伍组、制川乌多糖白芍总苷11配伍组痛阈值均显著升高，与模

24、型对照组比较有显著或非常显著性差异。给药120MIN后，阳性对照组、制川乌总碱白芍总苷23配伍组、制川乌总碱白芍多糖12配伍组、制川乌多糖白芍总苷11配伍组痛阈值均显著升高，与模型对照组比较有显著或非常显著性差异。结果详见表2、3。0084表2制川乌与白芍组分配伍对热板致痛小鼠的影响XSD0085说明书CN101953906A7/20页90086注与模型组比较，P005，P001。0087表3制川乌与白芍组分配伍对热板致痛小鼠的影响XSD0088说明书CN101953906A8/20页100089注与模型组比较，P005，P001。00904、结论0091由以上实验结果可知，制川乌总碱、制川乌

25、多糖、白芍总苷、白芍多糖单组分在含生药6的剂量下均未表现出明显的镇痛作用，但是，其组分的相互配伍则部分表现出明显的镇痛效果。其中，制川乌总碱白芍多糖配伍的效果最为明显，制川乌多糖白芍总苷配伍和制川乌总碱白芍总苷配伍依次减弱，制川乌多糖和白芍多糖配伍无明显的镇痛作用。制川乌总碱白芍多糖配伍镇痛效果比例依次为12、11、23，制川乌多糖白芍总苷配伍镇痛效果比例依次为11、12，制川乌总碱白芍总苷配伍镇痛效果比例为23最佳。0092试验例2制川乌与白芍组分配伍的抗炎作用00931、实验材料009411药物00951制川乌总碱26ML，含15KG生药；实验时配制成含制川乌6的制川乌总碱药液，备用。00

26、962制川乌多糖420ML，含105KG生药；实验时配制成含制川乌6的制川乌多糖药液，备用。00973白芍总苷155ML，含333KG生药；实验时配制成含白芍6的白芍总苷药液，备用。说明书CN101953906A9/20页1100984白芍多糖1203G，含21KG生药；实验时配制成含白芍6的白芍多糖药液，备用。00995制川乌总碱白芍总苷11混合液按照制川乌和白芍生药11配伍成含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷混合液，备用。01006制川乌总碱白芍总苷12混合液按照制川乌和白芍生药12配伍成含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷混合液，备用。01017制川乌总碱白芍总苷21混合液按照制川乌和白芍生药21

27、配伍成含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷混合液，备用。01028制川乌总碱白芍总苷23混合液按照制川乌和白芍生药23配伍成含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷混合液，备用。01039制川乌总碱白芍多糖11混合液按照制川乌和白芍生药11配伍成含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖混合液，备用。010410制川乌总碱白芍多糖12混合液按照制川乌和白芍生药12配伍成含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖混合液，备用。010511制川乌总碱白芍多糖21混合液按照制川乌和白芍生药21配伍成含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖混合液，备用。010612制川乌总碱白芍多糖23混合液按照制川乌和白芍生药23配伍成含制川乌6的制川乌总碱白芍多

28、糖混合液，备用。010713制川乌多糖白芍总苷11混合液按照制川乌和白芍生药11配伍成含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷混合液，备用。010814制川乌多糖白芍总苷12混合液按照制川乌和白芍生药12配伍成含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷混合液，备用。010915制川乌多糖白芍总苷21混合液按照制川乌和白芍生药21配伍成含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷混合液，备用。011016制川乌多糖白芍总苷23混合液按照制川乌和白芍生药23配伍成含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷混合液，备用。011117制川乌多糖白芍多糖11混合液按照制川乌和白芍生药11配伍成含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖混合液，备用。011218制

29、川乌多糖白芍多糖12混合液按照制川乌和白芍生药12配伍成含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖混合液，备用。011319制川乌多糖白芍多糖21混合液按照制川乌和白芍生药21配伍成含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖混合液，备用。011420制川乌多糖白芍多糖23混合液按照制川乌和白芍生药23配伍成含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖混合液，备用。0115以上药物为受试药物，均由本校中药化学教研室协助提取制备。011621醋酸地塞米松片，由浙江仙琚制药股份有限公司生产。批准文号国药准字H33020822。生产批号040934。规格075MG/片100片。实验时用蒸馏水配制成0015的药液，备用。011712动物说明

30、书CN101953906A10/20页1201181KM小鼠雄性，体重272G，由成都中医药大学实验动物研究中心提供，合格证号川实动管质04第11号，检疫后备用。01192SD大鼠，雄性，体重18020G，由成都中医药大学实验动物研究中心提供，合格证号川实动管质04第11号，检疫后备用。012013仪器0121游标卡尺，由成都量具刃具股份有限公司生产。01222、实验方法012321二甲苯耳廓肿胀试验0124取220只小鼠雄性，随机分为模型对照组N10、阳性对照组N10、制川乌总碱组N10、制川乌多糖组N10、白芍总苷组N10、白芍多糖组N10、制川乌总碱白芍总苷11组N10、制川乌总碱白芍总

31、苷12组N10、制川乌总碱白芍总苷21组N10、制川乌总碱白芍总苷23组N10、制川乌总碱白芍多糖11组N10、制川乌总碱白芍多糖12组N10、制川乌总碱白芍多糖21组N10、制川乌总碱白芍多糖23组N10、制川乌多糖白芍总苷11组N10、制川乌多糖白芍总苷12组N10、制川乌多糖白芍总苷21组N10、制川乌多糖白芍总苷23组N10、制川乌多糖白芍多糖11组N10、制川乌多糖白芍多糖12组N10、制川乌多糖白芍多糖21组N10、制川乌多糖白芍多糖23组N10。按组分别灌胃蒸馏水、0015醋酸地塞米松药液、含制川乌6的制川乌总碱药液、含制川乌6的制川乌多糖药液、含白芍6的白芍总苷药液、含白芍6的

32、白芍多糖药液、含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷11混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷12混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷21混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷23混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖11混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖12混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖21混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖23混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷11混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷12混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷21混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍总苷23混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖11混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖12混合液

33、、含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖21混合液、含制川乌6的制川乌多糖白芍多糖23混合液，10ML/KG。给药05H后，每只小鼠右耳廓滴注004ML二甲苯，造模后15H脱颈椎处死，用6MM打孔器分别在同一部位摘取小鼠双耳片，称重，求两耳片之差值，即为耳肿胀度。实验数据用SPSS110统计软件处理。012522蛋清足跖肿胀试验0126取性大鼠140只，随机分为模型对照组N10、阳性对照组N10、制川乌总碱组N10、制川乌多糖组N10、白芍总苷组N10、白芍多糖组N10、制川乌总碱白芍总苷11组N10、制川乌总碱白芍总苷12组N10、制川乌总碱白芍总苷21组N10、制川乌总碱白芍总苷23组N10、制川

34、乌总碱白芍多糖11组N10、制川乌总碱白芍多糖12组N10、制川乌总碱白芍多糖21组N10、制川乌总碱白芍多糖23组N10。按组分别灌胃蒸馏水、0015醋酸地塞米松药液、含制川乌6的制川乌总碱药液、含制川乌6的制川乌多糖药液、含白芍6的白芍总苷药说明书CN101953906A11/20页13液、含白芍6的白芍多糖药液、含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷11混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷12混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷21混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍总苷23混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖11混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖12混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍多

35、糖21混合液、含制川乌6的制川乌总碱白芍多糖23混合液，10MI/KG。给药1小时后，大鼠右后足跖皮下注射新鲜鸡蛋清液005ML，用游标卡尺测定造模后05H、1H、2H、3H、4H和6H各组大鼠右后足足跖肿胀。实验数据资料用SPSS统计软件包进行统计学处理。01273、实验结果012831制川乌与白芍组分配伍对二甲苯耳廓肿胀小鼠的影响0129模型对照组小鼠造模后15H耳廓肿胀明显。阳性对照组，制川乌多糖组，白芍多糖组，制川乌总碱白芍总苷11、23配伍组，制川乌多糖白芍多糖11、12、21配伍组耳廓肿胀度均显著减轻，与模型组比较有显著或非常显著性差异。结果详见表4。0130表4制川乌与白芍组分配

36、伍对二甲苯耳廓肿胀小鼠的影响XSD01310132注与模型组比较，P005，P001。013332制川乌与白芍组分配伍对蛋清足跖肿胀大鼠的影响说明书CN101953906A12/20页140134实验前各组大鼠右后足跖均无明显差异。模型对照组大鼠右后足跖注射鸡蛋清后很快肿胀，注射后05H即肿胀明显，并在1H肿胀达高峰，注射后6H仍肿胀明显。造模05H后，阳性对照组，制川乌总碱组，制川乌总碱白芍总苷11配伍组，制川乌总碱白芍多糖11、12配伍组大鼠右后足跖肿胀均明显减轻，与模型对照组比较有显著或非常显著性差异。造模1H后，阳性对照组，制川乌总碱组，白芍总苷组，制川乌总碱白芍总苷11、12、23配

37、伍组，制川乌总碱白芍多糖11、12、21配伍组大鼠右后足跖肿胀均明显减轻，与模型对照组比较有显著或非常显著性差异。造模2H后，阳性对照组，制川乌总碱组，制川乌多糖组，白芍总苷组，白芍多糖组，制川乌总碱白芍总苷11、23配伍组，制川乌总碱白芍多糖11、12、21、23配伍组大鼠右后足跖肿胀均明显减轻，与模型对照组比较有显著或非常显著性差异。造模3H后，阳性对照组，制川乌总碱组，制川乌多糖组，制川乌总碱白芍总苷11、12、21、23配伍组、制川乌总碱白芍多糖11、12、21配伍组大鼠右后足跖肿胀均明显减轻，与模型对照组比较有显著或非常显著性差异。造模4H后，阳性对照组，制川乌总碱白芍总苷11配伍组

38、、制川乌总碱白芍多糖11、12、21配伍组大鼠右后足跖肿胀均明显减轻，与模型对照组比较有显著或非常显著性差异。造模6H后，阳性对照组，制川乌总碱组，制川乌多糖组，白芍总苷组、制川乌总碱白芍总苷11、23配伍组、制川乌总碱白芍多糖11、12、21、23配伍组大鼠右后足跖肿胀均明显减轻，与模型对照组比较有显著或非常显著性差异。结果详见表5、6、7。0135表5制川乌与白芍组分配伍对蛋清足肿胀大鼠的影响XSD01360137注与模型组比较，P005，P001。0138表6制川乌与白芍组分配伍对蛋清足肿胀大鼠的影响XSD说明书CN101953906A13/20页1501390140注与模型组比较，P0

39、05，P001。0141表7制川乌与白芍组分配伍对蛋清足肿胀大鼠的影响XSD01420143注与模型组比较，P005，P001。01444、结论0145由以上实验结果可知，制川乌总碱、芍药总苷在含生药6的剂量下未表现出明显抑制小鼠二甲苯耳廓肿胀的作用，但是其川乌总碱、芍药总苷配伍却有明显的作用，以说明书CN101953906A14/20页1623配伍比例作用最强，11配伍比例其次；制川乌多糖、白芍多糖在含生药6的剂量下均有明显抑制二甲苯耳廓肿胀的作用，并且两者配伍具有更强的作用，其中21配伍比例作用最强，12和11配伍比例其次。制川乌总碱、制川乌多糖、芍药总苷、白芍多糖单组分均有明显的抑制大鼠

40、蛋清足肿胀的作用，其中，制川乌总碱作用最强，其次为白芍总苷。制川乌总碱白芍总苷各比例配伍后均有明显的抑制大鼠蛋清足肿胀的作用，配伍比例以11作用最强，23其次，其中11配伍比例的作用强于制川乌总碱和白芍总苷。制川乌总碱白芍多糖各比例配伍后也均有明显的抑制大鼠蛋清足肿胀的作用，作用由强到弱的配伍比例依次为12、11、21、23，其中12、11配伍比例的作用强于制川乌总碱和白芍总苷。0146上述两个实验证明，制川乌总碱白芍多糖各比例配伍后针对治疗类风湿性关节炎抗炎、镇痛作用，作用由强到弱的配伍比例依次为12、11、21、23。川乌总碱、芍药总苷在23、11时有明显的抗炎镇痛作用；川乌多糖、白芍总苷

41、在12、11时有明显的抗炎镇痛作用；川乌多糖、白芍多糖在12、11有明显的抗炎作用。0147三制川乌与白芍配伍水煎液治疗痹证动物模型的作用机理01481、实验材料014911药物01501制川乌单煎剂制川乌为毛莨科多年生的草本植物乌头ACONITUMCARMICHAELIDEBX的块根。制川乌400G以3倍量水浸泡30MIN，加至10倍量水煎煮，煮沸后煎6H倾出上清液，过滤，然后浓缩至相当于每毫升含1G制川乌的制川乌单煎剂。实验时用蒸馏水配置成含6制川乌的药液。01512白芍单煎剂白芍为毛茛科多年生草本植物白芍PAEONIALACTIFLORAPALL的根。白芍400G以3倍量水浸泡30MIN

42、，加至10倍量水煎煮，煮沸后煎6H倾出上清液，过滤，然后浓缩至相当于每毫升含1G白芍的白芍单煎剂。实验时用蒸馏水配置成含6白芍的药液。01523制川乌白芍11合煎剂制川乌400G、白芍400G以3倍量水浸泡30MIN，加至10倍量水煎煮，煮沸后煎6H倾出上清液，过滤，然后浓缩至相当于每毫升含1G制川乌的制川乌白芍11合煎剂。实验时用蒸馏水配置成含6制川乌的药液。01534制川乌白芍12合煎剂制川乌400G、白芍800G以3倍量水浸泡30MIN，加至10倍量水煎煮，煮沸后煎6H倾出上清液，过滤，然后浓缩至相当于每毫升含1G制川乌的制川乌白芍12合煎剂。实验时用蒸馏水配置成含6制川乌的药液。015

43、45制川乌白芍21合煎剂制川乌400G、白芍200G以3倍量水浸泡30MIN，加至10倍量水煎煮，煮沸后煎6H倾出上清液，过滤，然后浓缩至相当于每毫升含1G制川乌的制川乌白芍21合煎剂。实验时用蒸馏水配置成含6制川乌的药液。01556制川乌白芍23合煎剂制川乌400G、白芍600G以3倍量水浸泡30MIN，加至10倍量水煎煮，煮沸后煎6H倾出上清液，过滤，然后浓缩至相当于每毫升含1G制川乌的制川乌白芍23合煎剂。实验时用蒸馏水配置成含6制川乌的药液。0156以上药物为受试药物，制川乌购于江油市恒源医药有限公司。白芍购于成都市五块石中药饮片市场；二药均由本校中药鉴定教研室鉴定。由本校中药化学教研

44、室协助提取制备。说明书CN101953906A15/20页1701577吲哚美辛肠溶片阳性药物，由重庆科瑞制药有限责任公司生产。批准文号国药准字H50020263。生产批号041101。规格25MG/片100片。实验时用蒸馏水配制成0125的药液，备用。015812动物0159SD大鼠雄性，体重18020G，由成都中医药大学实验动物研究中心提供，合格证号川实动管质04第11号，检疫后备用。016013仪器01611XH6010A闪烁计数仪由西安二六二厂生产。01622721分光光度计由上海分析仪器总厂生产。016314实验试剂016415羟色胺分析纯，美国SIGMA公司生产。生产批号093K0

45、739。016525羟吲哚乙酸分析纯，美国SIGMA公司生产。生产批号052K1301。01663去甲肾上腺素分析纯，美国SIGMA公司生产。生产批号130K0979。01674盐酸多巴胺分析纯，美国SIGMA公司生产。生产批号033K1192。016853H标记前列腺素E2PGE2放免药盒由解放军总医院科技开发中心放免所生产。01696NO检测试剂盒由南京建成生物工程研究所生产。01707免疫球蛋白GIGG放免药盒由北京原子高科核技术应用股份有限公司生产。批准文号国药准字S10940082。01718白细胞介素1IL1放免药盒由解放军总医院科技开发中心放免所生产。01729肿瘤坏死因子TNF

46、放免药盒由解放军总医院科技开发中心放免所生产。017310白细胞介素6IL6放免药盒由解放军总医院科技开发中心放免所生产。01742、实验方法0175取雄性SD大鼠90只，将动物随机分为空白对照组N10、模型对照组N10、阳性对照组N10、制川乌组N10、制川乌白芍11组N10、制川乌白芍12组N10、制川乌白芍21组N10、制川乌白芍23组N10、白芍组N10。除空白组外实验第1天开始造模，造模方法为将造模大鼠置于57冷水中，水深2CM，站立其中20MIN，同时伴以4级风力。每日一次，连续14D。在造模的第1D，每只大鼠注射完全弗氏佐剂01ML于右后足跖皮内1次。第19天除空白组外分别灌胃蒸

47、馏水、0125吲哚美辛肠溶片药液、6的制川乌药液、含制川乌6的制川乌白芍11合煎剂、含制川乌6的制川乌白芍12合煎剂、含制川乌6的制川乌白芍21合煎剂、含制川乌6的制川乌白芍23合煎剂、6的白芍药液10ML/KGD1，连续7D。017621痹证关节病理试验0177于实验第26D处死动物后取左、右关节，10中性甲醛溶液固定，24H后用混合脱钙液加温脱钙48H，常规进行石蜡包埋，切片5M，HE染色，光镜下观察。病理组织学观察按照关节损坏程度分为以下几个等级，实验数据资料用SPSS统计软件包进行统计学处理。0178正常踝关节关节滑膜、关节软骨、关节腔、关节周围组织结构正常，无充血、水肿、炎细胞浸润，

48、无组织变性、增生和坏死。说明书CN101953906A16/20页180179踝关节周围组织炎组织肿胀，大量中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞浸润关节周围组织。0180关节滑膜炎滑膜增生增厚、水肿，中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞浸入关节滑膜腔，或滑膜呈乳头状增生突向关节腔。0181关节软骨炎灶性软骨组织变性或软骨表面缺损。018222痹证免疫脏器试验0183于实验第26D处死动物后取脾脏、胸腺后称脏器湿重，按脏器系数脏器湿重/动物体重1000来计算。实验数据资料用SPSS统计软件包进行统计学处理。018423痹证免疫脏器病理试验0185于实验第26天处死动物后取胸腺和脾脏，10中性甲醛溶液固定，常规进行石蜡包埋，切片5M，HE染色，光镜下观察。018624痹证外周炎性因子试验0187于实验第26D处死动物后取血分抗凝血与非抗凝血两种，抗凝血的抗凝剂采用消炎痛EDTA，离心后取血浆，测PGE2，非抗