硬化素与WNT信号通路和骨形成的抑制.pdf

SOST基因产物硬化素丢失会导致特征为高骨量(HBM)的硬化性骨化病。在这个报告中，我们发现硬化素能拮抗人胚肾A293细胞系和小鼠成骨细胞MC3T3中的经典Wnt信号通路。这种硬化素介导的拮抗作用可以被过量表达Wnt共受体LRP5所逆转。另外，我们发现硬化素能与LRP5和LRP6结合，并且识别用于结合的LRP5的第一个双YWTD-EGF重复结构域。虽然诱导经典Wnt信号需要这两个重复结构域，不过经典Wnt没有显示出和硬化素竞争结合LRP5。在初期颅盖成骨细胞分化中检测硬化素和Wnt7b(自分泌经典的Wnt)的表达，发现硬化素在成骨细胞分化后期表达，和成骨标志物骨钙素的表达同时发生，并尾随在Wnt7b表达之后。因为大量的证据表明经典Wnt信号刺激成骨作用，所以我们认为与硬化素缺失相关的HBM表型有可能至少部分归因于硬化素介导的Wnt拮抗作用降低所导致的经典Wnt信号增强。

1.促进骨形成或骨重建的方法，包括给予防止硬化素与参与骨形成或骨重建的受体或共受体结合的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。2.促进骨形成或骨重建的方法，包括给予防止硬化素与LRP5或LRP6受体结合的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。3.促进骨形成或骨重建的方法，包括给予防止硬化素与LRP5或LRP6受体的同系物结合的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。4.促进骨形成或骨重建的方法，包括给予防止硬化素与LRP5或LRP6受体的至少一个结构域结合的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。5.促进骨形成或骨重建的方法，包括给予防止硬化素与LRP5或LRP6受体的第一个或第二个结构域结合的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。6.权利要求1到5的方法，其中所述化合物或所述化合物片段包括IIIC3或IIC8。7.权利要求1到5的方法，其中所述化合物或所述化合物片段包括IIIC3、IIC8或它们的任意衍生物或类似物。8.权利要求6或7的方法，其中所述两种或更多种化合物或所述化合物片段通过交联直接地连接在一起，或通过连接臂间接地连接在一起。9.权利要求8的方法，其中所述化合物、所述化合物片段或它们的任何组合，对接到相同结合位点、受体或蛋白质上的第一个位置和第二个位置。10.权利要求8的方法，其中所述化合物、所述化合物片段或它们的任何组合，对接到不同结合位点、受体或蛋白质上的第一个位置和第二个位置。11.权利要求1到5的方法，其中所述化合物或所述化合物片段通过连接臂或交联连接到一起。12.权利要求1到11的方法，其中所述化合物或所述化合物片段包括小分子、蛋白质、肽、多肽、环状分子、杂环有机分子、核酸、脂质、带电脂质、极性脂质、非极性脂质、糖、糖蛋白、糖脂、脂蛋白、化学药品、或包括杂环有机分子、核酸、脂质、带电脂质、极性脂质、非极性脂质、糖、糖蛋白、糖脂、脂蛋白或化学药品的化合物的片段。13.权利要求1到5的方法，其中所述给药步骤包括通过吸入、口服、静脉内、腹膜内、肌肉内、肠胃外、透皮、阴道内、鼻内、粘膜的、舌下、局部的、直肠的或皮下给药或它们的任何组合进行给药。14.权利要求1到12的方法，其中所述化合物或所述化合物片段包括至少一种激动剂、拮抗剂、部分激动剂或它们的任何组合。15.权利要求1到14的方法，其中所述化合物用下述方法鉴定，该方法包括：a.使用UNITY^TM程序筛选适合进入受体上的腔中的化合物；b.使用Flexx^TM程序将所述化合物对接进入腔；和c.使用Cscore^TM程序获得具有最高结合亲和力的化合物。16.治疗哺乳动物受试者骨折、骨疾病、骨损伤或骨异常的方法，包括给予防止硬化素与参与骨形成或骨重建的受体或共受体结合的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。17.治疗哺乳动物受试者骨折、骨疾病、骨损伤或骨异常的方法，包括给予防止硬化素与LRP5或LRP6受体结合的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。18.治疗哺乳动物受试者骨折、骨疾病、骨损伤或骨异常的方法，包括给予防止硬化素与LRP5或LRP6受体的同系物结合的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段，或它们的任何组合。19.权利要求16到18的方法，其中所述化合物包括IIIC3或IIC8。20.权利要求16到18的方法，其中所述化合物或所述化合物片段包括IIIC3或IIC8。21.权利要求19或20的方法，其中所述两种或更多种化合物或所述化合物片段通过交联直接地连接在一起，或通过连接臂间接地连接在一起。22.权利要求21的方法，其中所述化合物、所述化合物片段或它们的任何组合，对接到相同结合位点、受体或蛋白质的第一个位置和第二个位置。23.权利要求21的方法，其中所述化合物、所述化合物片段或它们的任何组合，对接到不同结合位点、受体或蛋白质的第一个位置和第二个位置。24.权利要求16到18的方法，其中所述化合物或所述化合物片段通过连接臂或交联连接到一起。25.权利要求16到24的方法，其中所述化合物或所述化合物片段包括小分子、蛋白质、肽、多肽、环状分子、杂环有机分子、核酸、脂质、带电脂质、极性脂质、非极性脂质、糖、糖蛋白、糖脂、脂蛋白、化学药品、或包括杂环有机分子、核酸、脂质、带电脂质、极性脂质、非极性脂质、糖、糖蛋白、糖脂、脂蛋白或化学药品的化合物的片段。26.权利要求16到18的方法，其中所述给药步骤包括通过吸入、口服、静脉内、腹膜内、肌肉内、肠胃外、透皮、阴道内、鼻内、粘膜的、舌下、局部的、直肠的或皮下给药或它们的任意组合进行给药。27.权利要求16到25的方法，其中所述化合物或所述化合物片段包括至少一种激动剂、拮抗剂、部分激动剂或它们的任何组合。28.权利要求16到27的方法，其中所述化合物用下述方法鉴定，所述方法包括：a.使用UNITY^TM程序筛选适合进入受体上的腔中的化合物；b.使用Flexx^TM程序将所述化合物对接进入腔；和c.使用Cscore^TM程序获得具有最高结合亲和力的化合物。29.治疗组合物，用于治疗哺乳动物受试者骨折、骨疾病、骨损伤或骨异常，包括防止硬化素与骨形成或骨重建中的受体或共受体结合的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段，或它们的任何组合。30.治疗组合物，用于治疗哺乳动物受试者骨折、骨疾病、骨损伤或骨异常，包括防止硬化素与LRP5或LRP6受体结合的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。31.治疗组合物，用于治疗哺乳动物受试者骨折、骨疾病、骨损伤或骨异常，包括防止硬化素与LRP5或LRP6受体的同系物结合的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。32.权利要求29到30的组合物，其中所述化合物或所述化合物片段包括IIIC3或IIC8。33.权利要求29到31的组合物，其中所述化合物或所述化合物片段包括IIIC3、IIC8或它们的任意衍生物或类似物。34.权利要求32或33的组合物，其中所述两种或更多种化合物或化合物片段通过交联直接地连接在一起，或通过连接臂间接地连接在一起。35.权利要求34的方法，其中所述化合物、所述化合物片段或它们的任何组合，对接到相同结合位点、受体或蛋白质的第一个位置和第二个位置。36.权利要求34的组合物，其中所述化合物、所述化合物片段或它们的任何组合，对接到不同结合位点、受体或蛋白质的第一个位置和第二个位置。37.权利要求29到31的组合物，其中所述化合物或所述化合物片段通过连接臂或交联连接到一起。38.权利要求29到37的组合物，其中所述化合物或所述化合物片段包括小分子、蛋白质、肽、多肽、环状分子、杂环有机分子、核酸、脂质、带电脂质、极性脂质、非极性脂质、糖、糖蛋白、糖脂、脂蛋白、化学药品、或包括杂环有机分子、核酸、脂质、带电脂质、极性脂质、非极性脂质、糖、糖蛋白、糖脂、脂蛋白或化学药品的化合物的片段。39.权利要求29到31的组合物，其中所述给药步骤包括通过吸入、口服、静脉内、腹膜内、肌肉内、肠胃外、透皮、阴道内、鼻内、粘膜的、舌下、局部的、直肠的或皮下给药或它们的任意组合进行给药。40.权利要求29到38的组合物，其中所述化合物或所述化合物片段包括至少一种激动剂、拮抗剂、部分激动剂或它们的任何组合。41.权利要求29到40的组合物，其中所述非天然化合物用下述方法鉴定，所述方法包括：a.使用UNITY^TM程序筛选适合进入受体上的腔中的化合物；b.使用Flexx^TM程序将所述化合物对接进入腔；和c.使用Cscore^TM程序获得具有最高结合亲和力的化合物。42.权利要求29到41的组合物，其中所述组合物进一步包括药学上可接受的载体。43.权利要求29到41的组合物，其中所述组合物被配制为片剂、丸剂、锭剂、液体、凝胶、胶囊、糖浆、膏剂或悬浮液。44.调节骨形成或骨重建的方法，包括给予破坏硬化素和参与骨形成或骨重建的受体或共受体之间的相互作用的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。45.调节骨形成或骨重建的方法，包括给予破坏硬化素和LRP5或LRP6受体之间的相互作用的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。46.调节骨形成或骨重建的方法，包括给予破坏硬化素和LRP5或LRP6受体的同系物之间的相互作用至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。47.调节骨形成或骨重建的方法，包括给予破坏硬化素和LRP5或LRP6受体的至少一个结构域之间的相互作用至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段，或它们的任何组合。48.调节骨形成或骨重建的方法，包括给予破坏硬化素和LRP5或LRP6受体的第一个或第二个结构域之间的相互作用的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段，或它们的任何组合。49.权利要求44到48的方法，其中所述化合物或所述化合物片段包括IIIC3或IIC8。50.权利要求44到48的方法，其中所述化合物或所述化合物片段包括IIIC3、或IIC8或它们的任意衍生物或类似物。51.权利要求49或50的方法，其中所述两种或更多种化合物或所述化合物片段通过交联直接地连接在一起，或通过连接臂间接地连接在一起。52.权利要求51的方法，其中所述化合物、所述化合物片段或它们的任何组合，对接到相同结合位点、受体或蛋白质的第一个位置和第二个位置。53.权利要求51的方法，其中所述化合物、所述化合物片段或它们的任何组合，对接到不同结合位点、受体或蛋白质的第一个位置和第二个位置。54.权利要求44到48的方法，其中所述化合物或所述化合物片段通过连接臂或交联连接到一起。55.权利要求44到54的方法，其中所述化合物或所述化合物片段包括小分子、蛋白质、肽、多肽、环状分子、杂环有机分子、核酸、脂质、带电脂质、极性脂质、非极性脂质、糖、糖蛋白、糖脂、脂蛋白、化学药品、或包括杂环有机分子、核酸、脂质、带电脂质、极性脂质、非极性脂质、糖、糖蛋白、糖脂、脂蛋白或化学药品的化合物的片段。56.权利要求44到48的方法，其中所述给药步骤包括通过吸入、口服、静脉内、腹膜内、肌肉内、肠胃外、透皮、阴道内、鼻内、粘膜的、舌下、局部的、直肠的或皮下给药或它们的任意组合进行给药。57.权利要求44到55的方法，其中所述化合物或所述化合物片段包括至少一种激动剂、拮抗剂、部分激动剂或它们的任何组合。58.权利要求44到57的方法，其中所述化合物用下述方法鉴定，所述方法包括：a.使用UNITY^TM程序筛选适合进入受体上的腔中的化合物；b.使用Flexx^TM程序将所述化合物对接进入腔；和c.使用Cscore^TM程序获得具有最高结合亲和力的化合物。59.治疗哺乳动物受试者骨折、骨疾病、骨损伤或骨异常的方法，包括给予破坏硬化素和参与骨形成或骨重建的受体或共受体之间的相互作用的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。60.治疗哺乳动物受试者骨折、骨疾病、骨损伤或骨异常的方法，包括给予破坏硬化素和LRP5或LRP6受体之间的相互作用的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。61.治疗哺乳动物受试者骨折、骨疾病、骨损伤或骨异常的方法，包括给予破坏硬化素和LRP5或LRP6受体的同系物之间的相互作用的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。62.治疗哺乳动物受试者骨折、骨疾病、骨损伤或骨异常的方法，包括给予破坏硬化素和LRP5或LRP6受体的至少一个结构域之间的相互作用的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。63.治疗哺乳动物受试者骨折、骨疾病、骨损伤或骨异常的方法，包括给予破坏硬化素和LRP5或LRP6受体的第一个或第二个结构域之间的相互作用的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。64.权利要求59到63的方法，其中所述化合物或所述化合物片段包括IIIC3或IIC8。65.权利要求59到63的方法，其中所述化合物或所述化合物片段包括IIIC3、IIC8或它们的任意衍生物或类似物。66.权利要求64或65的方法，其中所述两种或更多种化合物或所述化合物片段通过交联直接地连接在一起，或通过连接臂间接地连接在一起。67.权利要求66的方法，其中所述化合物、所述化合物片段或它们的任何组合，对接到相同结合位点、受体或蛋白质的第一个位置和第二个位置。68.权利要求66的方法，其中所述化合物、所述化合物片段或它们的任何组合，对接到不同结合位点、受体或蛋白质的第一个位置和第二个位置。69.权利要求59到63的方法，其中所述化合物或所述化合物片段通过连接臂或交联连接到一起。70.权利要求59到69的方法，其中所述化合物或所述化合物片段包括小分子、蛋白质、肽、多肽、环状分子、杂环有机分子、核酸、脂质、带电脂质、极性脂质、非极性脂质、糖、糖蛋白、糖脂、脂蛋白、化学药品、或包括杂环有机分子、核酸、脂质、带电脂质、极性脂质、非极性脂质、糖、糖蛋白、糖脂、脂蛋白或化学药品的化合物的片段。71.权利要求59到63的方法，其中所述给药步骤包括通过吸入、口服、静脉内、腹膜内、肌肉内、肠胃外、透皮、阴道内、鼻内、粘膜的、舌下、局部的、直肠的或皮下给药或它们的任意组合进行给药。72.权利要求59到69的方法，其中所述化合物或所述化合物片段包括至少一种激动剂、拮抗剂、部分激动剂或它们的任何组合。73.权利要求59到72的方法，其中所述非天然化合物用下述方法鉴定，所述方法包括：a.使用UNITY^TM程序筛选适合进入受体上的腔中的化合物；b.使用Flexx^TM程序将所述化合物对接进入腔；和c.使用Cscore^TM程序获得具有最高结合亲和力的化合物。74.治疗组合物，用于治疗哺乳动物受试者骨折、骨疾病、骨损伤或骨异常，包括破坏硬化素和参与骨形成或骨重建的受体或共受体之间的相互作用的至少一种非天然化合物、至少一种化合物的片段或它们的任何组合。75.治疗组合物，用于治疗哺乳动物受试者骨折、骨疾病、骨损伤或骨异常，包括破坏硬化素和LRP5或LRP6受体之间的相互作用的至少一种非天然化合物、至少一种化合物片段或它们的任何组合。76.治疗组合物，用于治疗哺乳动物受试者骨折、骨疾病、骨损伤或骨异常，包括破坏硬化素和LRP5或LRP6受体的同系物之间的相互作用的至少一种非天然化合物、至少一种化合物片段或它们的任何组合。77.治疗组合物，用于治疗哺乳动物受试者骨折、骨疾病、骨损伤或骨异常，包括破坏硬化素和LRP5或LRP6受体的至少一个结构域之间的相互作用的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。78.治疗组合物，用于治疗哺乳动物受试者骨折、骨疾病、骨损伤或骨异常，包括破坏硬化素和LRP5或LRP6受体的第一个或第二个结构域之间的相互作用的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。79.权利要求74到78的组合物，其中所述化合物包括IIIC3或IIC8。80.权利要求74到78的组合物，其中所述化合物包括IIIC3、IIC8或它们的任意衍生物或类似物。81.权利要求79或80的组合物，其中所述两种或更多种化合物或所述化合物片段通过交联直接地连接在一起，或通过连接臂间接地连接在一起。82.权利要求81的方法，其中所述化合物、所述化合物片段或它们的任何组合，对接到相同结合位点、受体或蛋白质的第一个位置和第二个位置。83.权利要求81的方法，其中所述化合物、所述化合物片段或它们的任何组合，对接到不同结合位点、受体或蛋白质的第一个位置和第二个位置。84.权利要求74到78的方法，其中所述化合物或所述化合物片段通过连接臂或交联连接到一起。85.权利要求74到84的组合物，其中所述化合物或所述化合物片段包括小分子、蛋白质、肽、多肽、环状分子、杂环有机分子、核酸、脂质、带电脂质、极性脂质、非极性脂质、糖、糖蛋白、糖脂、脂蛋白、化学药品、或包括杂环有机分子、核酸、脂质、带电脂质、极性脂质、非极性脂质、糖、糖蛋白、糖脂、脂蛋白或化学药品的化合物的片段。86.权利要求74到78的组合物，其中所述给药步骤包括通过吸入、口服、静脉内、腹膜内、肌肉内、肠胃外、透皮、阴道内、鼻内、粘膜的、舌下、局部的、直肠的或皮下给药或它们的任意组合进行给药。87.权利要求74到86的组合物，其中所述非天然化合物用下述方法鉴定，所述方法包括：a.使用UNITY^TM程序筛选适合进入受体上的腔中的化合物；b.使用Flexx^TM程序将所述化合物对接进入腔；和c.使用Cscore^TM程序获得具有最高结合亲和力的化合物。88.权利要求74到87的组合物，其中所述组合物进一步包括药学上可接受的载体。89.权利要求74到87的组合物，其中所述组合物被配制为片剂、丸剂、锭剂、液体、凝胶、胶囊、糖浆、膏剂或悬浮液。90.通过给予硬化素防止或阻断哺乳动物受试者中骨形成的方法。91.治疗哺乳动物受试者中异常骨生长的方法，包括给予硬化素的抗体或任意的减少或清除硬化素的其他非天然化合物或化合物片段。92.权利要求91的方法，其中所述化合物或所述化合物片段包括小分子、蛋白质、肽、多肽、环状分子、杂环有机分子、核酸、脂质、带电脂质、极性脂质、非极性脂质、糖、糖蛋白、糖脂、脂蛋白或化学药品。93.权利要求91或92的方法，其中所述给药步骤包括通过吸入、口服、静脉内、腹膜内、肌肉内、肠胃外、透皮、阴道内、鼻内、粘膜的、舌下、局部的、直肠的或皮下给药或它们的任意组合进行给药。94.权利要求90到92的方法，其中所述硬化素包括相关蛋白、带有类似功能的不相关蛋白或者硬化素的任意同系物或衍生物。95.治疗组合物，包含用于防止或阻断哺乳动物受试者中的骨形成的硬化素。96.防止或阻断哺乳动物受试者中骨形成的治疗组合物，包含硬化素抗体或任意的减少或清除硬化素的其它非天然化合物或化合物片段。97.权利要求91到96的方法或组合物，其中所述非天然化合物用下述方法鉴定，所述方法包括：a.使用UNITY^TM程序筛选适合进入受体上的腔中的化合物；b.使用Flexx^TM程序将所述化合物对接进入腔；和c.使用Cscore^TM程序获得具有最高结合亲和力的化合物。98.鉴定促进或抑制蛋白-蛋白相互作用的候选药物或化合物的方法，包括：a.确定受体蛋白的实际结构；b.鉴定所述受体蛋白中的特定结合腔；c.鉴定所述结合腔中的特异性位点；和d.筛选适合进入所述特异性位点的化合物。99.权利要求98的方法，进一步包括使用Cscore^TM程序鉴定具有最高结合亲和力的化合物的步骤。100.权利要求98的方法，其中所述鉴定特定的结合腔的步骤包括根据化合物的生物功能进行实验。101.权利要求100的方法，其中所述实验包括突变分析。102.权利要求98的方法，其中所述受体蛋白是不溶性的或膜结合的。103.鉴定促进或抑制蛋白-蛋白相互作用的候选药物或化合物的方法，包括：a.确定受体蛋白的实际结构；b.鉴定所述受体蛋白中的特定结合腔；c.鉴定所述结合腔中的特异性位点；和d.使用UNITY^TM程序筛选适合进入所述特异性位点的化合物；e.使用Flexx^TM程序所述将化合物对接进入腔内；和f.使用Cscore^TM程序获得具有最高结合亲和力的化合物。104.权利要求103的方法，其中所述鉴定特定的结合腔的步骤包括根据化合物的生物功能进行实验。105.权利要求104的方法，其中所述实验包括突变分析。106.权利要求103的方法，其中所述受体蛋白是不溶性的或膜结合的。107.鉴定与参与骨形成或骨重建的受体蛋白结合的候选药物化合物的方法，包括：a.确定不可溶受体蛋白的实际或计算结构，包括使用氨基酸测序、X射线衍射晶体分析、核磁共振、所述受体蛋白的类似物或衍生物或者它们的任何组合；b.使用基于生物功能的实验，包括突变分析、氨基酸化学修饰、共结晶、核磁共振或它们的任何组合来鉴定所述受体蛋白中的特定结合腔；c.根据突变或化学修饰鉴定所述结合腔中的特异性的结合位点；d.使用UNITY^TM程序筛选适合进入所述特异性位点的化合物；和e.使用Cscore^TM程序鉴定具有最高结合亲和力或最低能量的化合物来找到最造化合物。108.鉴定与参与骨形成或骨重建的受体蛋白结合的候选药物化合物的方法，包括：a.确定信号肽的实际或计算结构，包括使用氨基酸测序、X射线衍射晶体分析、核磁共振、所述信号肽的类似物或衍生物或者它们的任何组合；b.使用基于生物功能的实验，包括突变分析、化学修饰、共结晶、核磁共振或它们的任何组合来鉴定所述受体蛋白中的特定结合腔；c.根据所述实验获得的结果鉴定所述结合腔中的特异性的结合位点；d.使用UNITY^TM程序筛选适合进入所述结合腔或所述结合腔中的所述特异性位点的化合物；e.使用Flexx^TM程序将所述化合物对接进入到所述结合腔或所述结合腔中的所述特异性位点中；和f.使用Cscore^TM程序鉴定具有最高结合亲和力或最低能量的化合物。109.鉴定与参与信号转导系统的蛋白相结合的候选药物或化合物的方法，包括：a.提供或确定所述蛋白的实际或计算结构，包括使用氨基酸测序、X射线衍射晶体分析、核磁共振、所述受体蛋白的类似物或衍生物或者它们的任何组合；b.使用多种实验，包括突变分析、氨基酸化学修饰、共结晶、核磁共振或它们的任何组合来鉴定所述蛋白中的特定结合腔、位点或结构域；c.根据所述实验的结果鉴定所述结合腔、位点或结构域中的特异性的结合位点；和d.筛选候选药物化合物库来鉴定最适合于所述特异性结合位点或所述结合腔、位点或结构域的候选药物或化合物。110.鉴定与参与信号转导系统的不可溶蛋白或膜结合蛋白相结合的候选药物或化合物的方法，包括：a.提供或确定所述蛋白的实际或计算结构，包括使用氨基酸测序、X射线衍射晶体分析、核磁共振、所述受体蛋白的类似物或衍生物或者它们的任何组合；b.使用多种实验，包括突变分析、氨基酸化学修饰、共结晶、核磁共振或它们的任何组合来鉴定所述蛋白的特定结合腔、位点或结构域；c.根据所述实验的结果鉴定所述结合腔、位点或结构域中的特异性的结合位点；和d.筛选候选药物化合物库来鉴定最适合于所述特异性结合位点或所述结合腔、位点或结构域的候选药物或化合物。111.鉴定与参与Wnt信号传导途径的蛋白相结合的候选药物或化合物的方法，包括：a.提供或确定所述蛋白的实际或计算结构，包括使用氨基酸测序、X射线衍射晶体分析、核磁共振、所述受体蛋白的类似物或衍生物或者它们的任何组合；b.使用多种实验，包括突变分析、氨基酸化学修饰、共结晶、核磁共振或它们的任何组合来鉴定所述蛋白的特定结合腔、位点或结构域；c.根据所述实验的结果鉴定所述结合腔、位点或结构域中的特异性的结合位点；和d.筛选候选药物化合物库来鉴定最适合于所述特异性结合位点或所述结合腔、位点或结构域的候选药物或化合物。112.鉴定与参与信号转导系统的蛋白相结合的候选药物或化合物以用于促进或抑制骨生长的方法，包括：a.提供或确定所述蛋白的实际或计算结构，包括使用氨基酸测序、X射线衍射晶体分析、核磁共振、所述受体蛋白的类似物或衍生物或者它们的任何组合；b.使用多种实验，包括突变分析、氨基酸化学修饰、共结晶、核磁共振或它们的任何组合来鉴定所述蛋白的特定结合腔、位点或结构域；c.根据所述实验的结果鉴定所述结合腔、位点或结构域中的特异性的结合位点；和d.筛选候选药物化合物库来鉴定最适合于所述特异性结合位点或所述结合腔、位点或结构域的候选药物或化合物。113.用于调节骨形成或骨重建的方法，包括给予减少或消除硬化素对参与骨形成或骨重建的受体或共受体的亲和力的至少一种非天然化合物、至少一种非天然化合物片段或它们的任何组合。

硬化素与Wnt信号通路和骨形成的抑制

相关专利申请参考

本申请是标题为“骨形成和重建的组合物和方法”(申请号10/849,067，提交日期2004年5月19日)的专利申请的部分继续申请。本申请还和标题为“刺激或增强骨形成和细胞自我更新的组合物和方法”(申请号10/849,643，提交日期2004年5月19日)的专利申请相关，其内容全部引入此处作为参考。