一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法.pdf

摘要
申请专利号：	CN201010540537.9	申请日：	2010.11.11
公开号：	CN102154420A	公开日：	2011.08.17
当前法律状态：	终止	有效性：	无权
法律详情：	未缴年费专利权终止IPC(主分类):C12P 21/06申请日:20101111授权公告日:20130522终止日期:20141111\|\|\|专利权人的姓名或者名称、地址的变更IPC(主分类):C12P 21/06变更事项:专利权人变更前:湖北远成药业有限公司变更后:湖北远成赛创科技有限公司变更事项:地址变更前:432100 湖北省孝感市南区沦河船闸下游变更后:432100 湖北省孝感市南区沦河船闸下游\|\|\|文件的公告送达IPC(主分类):C12P 21/06收件人:湖北远成赛创科技有限公司专利负责人文件名称:视为未提出通知书\|\|\|授权\|\|\|专利申请权的转移IPC(主分类):C12P 21/06变更事项:申请人变更前权利人:武汉远城科技发展有限公司变更后权利人:湖北远成药业有限公司变更事项:地址变更前权利人:430064 湖北省武汉市武昌区中山路496号变更后权利人:432100 湖北省孝感市南区沦河船闸下游登记生效日:20120628\|\|\|实质审查的生效IPC(主分类):C12P 21/06申请日:20101111\|\|\|公开
IPC分类号：	C12P21/06; B01D61/00	主分类号：	C12P21/06
申请人：	武汉远城科技发展有限公司
发明人：	叶传发; 张小东; 胡承四; 叶思
地址：	430064 湖北省武汉市武昌区中山路496号
优先权：
专利代理机构：	武汉宇晨专利事务所 42001	代理人：	王敏锋
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内容摘要

本发明公开了一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，该方法采用新鲜猪皮为主要原料，经过清洗、配水和添加亚硫酸钠升温蒸煮、过滤、脂肪酶脱脂、蛋白酶酶解、灭酶、脱色、膜分离，将得到的滤液经干燥后即得到猪皮胶原蛋白肽。本发明方法生产周期短、成本低、反应条件温和、对环境友好，而且所得产品安全性高，可广泛应用于保健品、化妆品和药品等领域。

权利要求书

1：一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，其步骤如下： 1）、称取新鲜猪皮作为原料，用 35℃ -45℃水洗净后，分别按原料重量的 7-9 倍和 1-2% 加水和亚硫酸钠搅拌均匀，然后升温至 100℃回流蒸煮 4-6h，再趁热过滤； 2）、接着冷却滤液至 50-60℃，调节 pH 至 7-8，加入原料猪皮重量
2： 5-3% 的 18U/mg 的脂肪酶，温度保持在 50-60℃，反应 7-9h，反应过程中保持体系 pH 值稳定； 3）、再加入原料猪皮重量 1.5-3% 的 25U/mg 的碱性蛋白酶，搅拌酶解 8-10h，酶解过程中保持 pH 值 7-8，酶解完后将得到的酶解液升温至 90-100℃，保持 10-20min 灭酶； 4）、将酶解液过滤得上清液，上清液中加入原料猪皮重量 1.8-2.2% 的粉末状活性炭脱色，然后滤除活性炭，得滤液； 5）、滤液经纳滤膜分离系统进行分离，脱盐并浓缩； 6）、浓缩液干燥后即得猪皮胶原蛋白肽干品。 2. 如权利要求 1 所述的方法，其特征在于：所述的脱色温度和时间分别为 40-45℃和 1h。
3：如权利要求 1 所述的方法，其特征在于：所述的纳滤膜孔径为 1nm。
4：如权利要求 1 所述的方法，其特征在于：所述的干燥为喷雾干燥。

说明书

一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法
    技术领域本发明方法涉及猪皮的深加工技术领域，具体涉及一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，是一种以新鲜猪皮为原料，利用纯生物手段获取猪皮胶原蛋白肽的方法。
     背景技术猪皮是猪肉生产过程中的一种副产品，在肉制品厂的猪肉加工过程中，猪皮经过了热处理，不能用于皮革制造。而其中蛋白质的含量高达 33％以上，其中胶原蛋白含量为 88％左右，其营养价值十分可观。胶原蛋白由于特殊复杂的空间结构，其分子量高达 300KD，相对于胶原蛋白肽而言很难被人体吸收，因此，通过生物手段把胶原蛋白水解为小分子的多肽物质，开发出对人体有益的产品具有广阔的前景。
     目前，有关猪皮胶原蛋白肽的提取方法，一股采用是化学手段进行两次脱脂 ( 如中国专利申请 200810061250.0)，操作繁琐而且还不可避免地导致氨基酸等物质结构的破坏。本发明方法采用脂肪酶进行脱脂，可以有效克服这些缺点，本法反应条件温和，操作简便，进一步提高了产品的安全性。
     发明内容
     针对现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供了一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，是一种无需化学手段处理，而是完全利用生物酶解的手段，并采用了膜分离技术脱盐和浓缩，提取出猪皮胶原蛋白肽的方法。
     为了实现上述技术目的，本发明采取如下技术方案：
     一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，其步骤如下：
     1、采用新鲜猪皮作为原料，用 35℃ -45℃水洗净后，分别按原料重量的 7-9 倍和 1-2％加水和亚硫酸钠并搅拌均匀，升温至 100℃回流蒸煮 4-6h，然后趁热过滤；
     2、接着冷却滤液至 50-60℃，用 0.1M 的 NaOH 溶液调节 pH 至 7-8，加入原料猪皮重量的 2.5-3％的脂肪酶，温度保持在 50-60℃，反应 7-9h，反应过程中保持体系 pH 值稳定；
     3、再加入原料猪皮重量 1.5-3％的碱性蛋白酶，搅拌酶解 8-10h，酶解过程中保持 pH 值 7-8，然后将得到的酶解液升温至 90-100℃，保持 10-20min 灭酶；
     4、将酶解液过滤得上清液，上清液中加入原料猪皮重量 1.8-2.2％的粉末状活性炭， 40-45℃搅拌吸附 1h 脱色，然后滤除活性炭，得滤液；
     5、滤液经孔径为 1nm 的纳滤膜分离系统进行分离，脱盐并浓缩；
     6、浓缩液经喷雾干燥后即得猪皮胶原蛋白肽干品。
     本发明方法中使用的脂肪酶和碱性蛋白酶的酶活力分别为： 18U/mg 和 25U/mg。
     与现有技术相比，本发明方法的优点和有益效果如下：
     1、有效避开了化学手段所带来的环境污染，以及对产品的结构的破坏；
     2、本发明的膜分离技术，对液态物料进行分离、浓缩和纯化，均在常温下操作、无相态变化、高效节能，并且生产过程中不产生污染；3、本发明方法生产出来的猪皮胶原蛋白肽产品的纯度高，其总蛋白质中分子量 500-3000 道尔顿的肽含量达到 97％以上，分子量≥ 3000 道尔顿的在 3％以内；
     4、本发明方法生产出来的猪皮胶原蛋白肽的分子量小，人体容易吸收，吸收率达 90％以上；
     5、本发明采用了活性炭脱色，所得产品为白色均匀粉末状；
     6、本发明方法的生产周期短、成本低、不产生任何有毒有害物质，安全，无毒副作用，可广泛应用于化妆品、食品、药品等领域。具体实施方式
     下面通过具体的实施例对本发明方法作进一步的详细说明。
     实施例 1 ：
     一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，步骤如下：
     称取新鲜猪皮 1kg，用 40℃水洗净后，配纯水 7kg，再加入无水亚硫酸钠 15g，搅拌均匀，升温至 100℃回流 4h，然后趁热过滤；再冷却滤液至 55℃，用 0.1M 食品级片状氢氧化钠溶液调 pH 至 7.5，加入 30g 脂肪酶，保持温度在 55℃，搅拌酶解 8h，反应过程中用 0.1M 食品级片状氢氧化钠溶液保持体系 pH 值稳定；再加入 15g 碱性蛋白酶，用 0.1M 食品级片状氢氧化钠溶液保持反应体系 pH 值 7.5，保持温度在 55℃，搅拌酶解 8h ；然后升温至 95℃，保温 15min 灭酶；将酶解液过滤，得上清液；上清液中加入 20g 粉末状活性炭，保持温度 42℃搅拌吸附 1h 脱色，滤除活性炭；滤液经孔径为 1nm 的纳滤膜分离系统进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷雾干燥，得到 396g 白色粉末状猪皮胶原蛋白肽，所得产品的检测报告见表 1。
     表 1 实施例 1 所得产品的检测报告
     实施例 2 ：
     一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，步骤如下：
     称取新鲜猪皮 2kg，用 38℃水洗净后，配纯水 15kg，再加入无水亚硫酸钠 40g，搅拌均匀，升温至 100℃回流 4h，然后趁热过滤；再冷却滤液至 60℃，用 0.1M 食品级片状氢氧化钠溶液调 pH 至 7，加入 50g 脂肪酶，保持温度在 60℃，搅拌酶解 7h，反应过程中用 0.1M 食品级片状氢氧化钠溶液保持体系 pH 值稳定；再加入 40g 碱性蛋白酶，用 0.1M 食品级片状氢氧化钠溶液保持反应体系 pH 值 7，保持温度在 60℃，搅拌酶解 8h ；然后升温至 90℃，保温 20min 灭酶；将酶解液过滤，得上清液；上清液中加入 40g 粉末状活性炭，保持温度 45℃搅拌吸附 1h 脱色，滤除活性炭；滤液经孔径为 1nm 的纳滤膜分离系统进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷雾干燥，得到 801g 白色粉末状猪皮胶原蛋白肽，所得产品的检测报告见表 2。
     表 2 实施例 2 所得产品的检测报告
     实施例 3 ：
     一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，步骤如下：
     称取新鲜猪皮 10kg，用 45℃水洗净后，配纯水 90kg，再加入无水亚硫酸钠 160g，搅拌均匀，升温至 100℃回流 5h，然后趁热过滤；再冷却滤液至 50℃，用 0.1M 食品级片状氢氧化钠溶液调 pH 至 8，加入 280g 脂肪酶，保持温度在 50℃，搅拌酶解 9h，反应过程中用 0.1M 食品级片状氢氧化钠溶液保持体系 pH 值稳定；再加入 150g 碱性蛋白酶，用 0.1M 食品级片状氢氧化钠溶液保持反应体系 pH 值 8，保持温度在 50℃，搅拌酶解 10h ；然后升温至 100℃，保温 10min 灭酶；将酶解液过滤，得上清液；上清液中加入 220g 粉末状活性炭，保持温度 44℃ 搅拌吸附 1h 脱色，滤除活性炭；滤液经孔径为 1nm 的纳滤膜分离系统进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷雾干燥，得到 4.01kg 白色粉末状猪皮胶原蛋白肽，所得产品的检测报告见表 3。
     表 3 实施例 3 所得产品的检测报告
     实施例 4 ：
     一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，步骤如下：
     称取新鲜猪皮 100kg，用 35℃水洗净后，配纯水 800kg，再加入无水亚硫酸钠 1kg，搅拌均匀，升温至 100℃回流 6h，然后趁热过滤；再冷却滤液至 55℃，用 0.1M 食品级片状氢氧化钠溶液调 pH 至 7.5，加入 3kg 脂肪酶，保持温度在 55℃，搅拌酶解 7.5h，反应过程中用 0.1M 食品级片状氢氧化钠溶液保持体系 pH 值稳定；再加入 3kg 碱性蛋白酶，用 0.1M 食品级片状氢氧化钠溶液保持反应体系 pH 值 7.5，保持温度在 55℃，搅拌酶解 9h ；然后升温至 90℃，保温 20min 灭酶；将酶解液过滤，得上清液；上清液中加入 1.8kg 粉末状活性炭，保持温度 40℃搅拌吸附 1h 脱色，滤除活性炭；滤液经孔径为 1nm 的纳滤膜分离系统进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷雾干燥，得到 41kg 白色粉末状猪皮胶原蛋白肽，所得产品的检测报告见表 4。
     表 4 实施例 4 所得产品的检测报告
     8

资源描述

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1、10申请公布号CN102154420A43申请公布日20110817CN102154420ACN102154420A21申请号201010540537922申请日20101111C12P21/06200601B01D61/0020060171申请人武汉远城科技发展有限公司地址430064湖北省武汉市武昌区中山路496号72发明人叶传发张小东胡承四叶思74专利代理机构武汉宇晨专利事务所42001代理人王敏锋54发明名称一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法57摘要本发明公开了一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，该方法采用新鲜猪皮为主要原料，经过清洗、配水和添加亚硫酸钠升温蒸煮、过滤、脂肪酶脱脂、蛋白酶酶解、灭酶。

2、、脱色、膜分离，将得到的滤液经干燥后即得到猪皮胶原蛋白肽。本发明方法生产周期短、成本低、反应条件温和、对环境友好，而且所得产品安全性高，可广泛应用于保健品、化妆品和药品等领域。51INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书6页CN102154421A1/1页21一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，其步骤如下1）、称取新鲜猪皮作为原料，用3545水洗净后，分别按原料重量的79倍和12加水和亚硫酸钠搅拌均匀，然后升温至100回流蒸煮46H，再趁热过滤；2）、接着冷却滤液至5060，调节PH至78，加入原料猪皮重量253的18U/MG的脂肪酶，温度保持在5060，反应7。

3、9H，反应过程中保持体系PH值稳定；3）、再加入原料猪皮重量153的25U/MG的碱性蛋白酶，搅拌酶解810H，酶解过程中保持PH值78，酶解完后将得到的酶解液升温至90100，保持1020MIN灭酶；4）、将酶解液过滤得上清液，上清液中加入原料猪皮重量1822的粉末状活性炭脱色，然后滤除活性炭，得滤液；5）、滤液经纳滤膜分离系统进行分离，脱盐并浓缩；6）、浓缩液干燥后即得猪皮胶原蛋白肽干品。2如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的脱色温度和时间分别为4045和1H。3如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的纳滤膜孔径为1NM。4如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的干燥为喷雾干燥。权利要。

4、求书CN102154420ACN102154421A1/6页3一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法技术领域0001本发明方法涉及猪皮的深加工技术领域，具体涉及一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，是一种以新鲜猪皮为原料，利用纯生物手段获取猪皮胶原蛋白肽的方法。背景技术0002猪皮是猪肉生产过程中的一种副产品，在肉制品厂的猪肉加工过程中，猪皮经过了热处理，不能用于皮革制造。而其中蛋白质的含量高达33以上，其中胶原蛋白含量为88左右，其营养价值十分可观。胶原蛋白由于特殊复杂的空间结构，其分子量高达300KD，相对于胶原蛋白肽而言很难被人体吸收，因此，通过生物手段把胶原蛋白水解为小分子的多肽物质，开发出对人体有益的。

5、产品具有广阔的前景。0003目前，有关猪皮胶原蛋白肽的提取方法，一股采用是化学手段进行两次脱脂如中国专利申请2008100612500，操作繁琐而且还不可避免地导致氨基酸等物质结构的破坏。本发明方法采用脂肪酶进行脱脂，可以有效克服这些缺点，本法反应条件温和，操作简便，进一步提高了产品的安全性。发明内容0004针对现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供了一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，是一种无需化学手段处理，而是完全利用生物酶解的手段，并采用了膜分离技术脱盐和浓缩，提取出猪皮胶原蛋白肽的方法。0005为了实现上述技术目的，本发明采取如下技术方案0006一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，其步骤如下0。

6、0071、采用新鲜猪皮作为原料，用3545水洗净后，分别按原料重量的79倍和12加水和亚硫酸钠并搅拌均匀，升温至100回流蒸煮46H，然后趁热过滤；00082、接着冷却滤液至5060，用01M的NAOH溶液调节PH至78，加入原料猪皮重量的253的脂肪酶，温度保持在5060，反应79H，反应过程中保持体系PH值稳定；00093、再加入原料猪皮重量153的碱性蛋白酶，搅拌酶解810H，酶解过程中保持PH值78，然后将得到的酶解液升温至90100，保持1020MIN灭酶；00104、将酶解液过滤得上清液，上清液中加入原料猪皮重量1822的粉末状活性炭，4045搅拌吸附1H脱色，然后滤除活性炭，得滤。

7、液；00115、滤液经孔径为1NM的纳滤膜分离系统进行分离，脱盐并浓缩；00126、浓缩液经喷雾干燥后即得猪皮胶原蛋白肽干品。0013本发明方法中使用的脂肪酶和碱性蛋白酶的酶活力分别为18U/MG和25U/MG。0014与现有技术相比，本发明方法的优点和有益效果如下00151、有效避开了化学手段所带来的环境污染，以及对产品的结构的破坏；00162、本发明的膜分离技术，对液态物料进行分离、浓缩和纯化，均在常温下操作、无相态变化、高效节能，并且生产过程中不产生污染；说明书CN102154420ACN102154421A2/6页400173、本发明方法生产出来的猪皮胶原蛋白肽产品的纯度高，其总蛋白质。

8、中分子量5003000道尔顿的肽含量达到97以上，分子量3000道尔顿的在3以内；00184、本发明方法生产出来的猪皮胶原蛋白肽的分子量小，人体容易吸收，吸收率达90以上；00195、本发明采用了活性炭脱色，所得产品为白色均匀粉末状；00206、本发明方法的生产周期短、成本低、不产生任何有毒有害物质，安全，无毒副作用，可广泛应用于化妆品、食品、药品等领域。具体实施方式0021下面通过具体的实施例对本发明方法作进一步的详细说明。0022实施例10023一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，步骤如下0024称取新鲜猪皮1KG，用40水洗净后，配纯水7KG，再加入无水亚硫酸钠15G，搅拌均匀，升温至100回。

9、流4H，然后趁热过滤；再冷却滤液至55，用01M食品级片状氢氧化钠溶液调PH至75，加入30G脂肪酶，保持温度在55，搅拌酶解8H，反应过程中用01M食品级片状氢氧化钠溶液保持体系PH值稳定；再加入15G碱性蛋白酶，用01M食品级片状氢氧化钠溶液保持反应体系PH值75，保持温度在55，搅拌酶解8H；然后升温至95，保温15MIN灭酶；将酶解液过滤，得上清液；上清液中加入20G粉末状活性炭，保持温度42搅拌吸附1H脱色，滤除活性炭；滤液经孔径为1NM的纳滤膜分离系统进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷雾干燥，得到396G白色粉末状猪皮胶原蛋白肽，所得产品的检测报告见表1。0025表1实施例1所得产品。

10、的检测报告说明书CN102154420ACN102154421A3/6页500260027实施例20028一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，步骤如下0029称取新鲜猪皮2KG，用38水洗净后，配纯水15KG，再加入无水亚硫酸钠40G，搅拌均匀，升温至100回流4H，然后趁热过滤；再冷却滤液至60，用01M食品级片状氢氧化钠溶液调PH至7，加入50G脂肪酶，保持温度在60，搅拌酶解7H，反应过程中用01M食品级片状氢氧化钠溶液保持体系PH值稳定；再加入40G碱性蛋白酶，用01M食品级片状氢氧化钠溶液保持反应体系PH值7，保持温度在60，搅拌酶解8H；然后升温至90，保温20MIN灭酶；将酶解液过滤，。

11、得上清液；上清液中加入40G粉末状活性炭，保持温度45搅拌吸附1H脱色，滤除活性炭；滤液经孔径为1NM的纳滤膜分离系统进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷雾干燥，得到801G白色粉末状猪皮胶原蛋白肽，所得产品的检测报告见表2。0030表2实施例2所得产品的检测报告0031说明书CN102154420ACN102154421A4/6页60032实施例30033一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，步骤如下0034称取新鲜猪皮10KG，用45水洗净后，配纯水90KG，再加入无水亚硫酸钠160G，搅拌均匀，升温至100回流5H，然后趁热过滤；再冷却滤液至50，用01M食品级片状氢氧化钠溶液调PH至8，加入280。

12、G脂肪酶，保持温度在50，搅拌酶解9H，反应过程中用01M食品级片状氢氧化钠溶液保持体系PH值稳定；再加入150G碱性蛋白酶，用01M食品级片状氢氧化钠溶液保持反应体系PH值8，保持温度在50，搅拌酶解10H；然后升温至100，保温10MIN灭酶；将酶解液过滤，得上清液；上清液中加入220G粉末状活性炭，保持温度44搅拌吸附1H脱色，滤除活性炭；滤液经孔径为1NM的纳滤膜分离系统进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷雾干燥，得到401KG白色粉末状猪皮胶原蛋白肽，所得产品的检测报告见表3。0035表3实施例3所得产品的检测报告说明书CN102154420ACN102154421A5/6页700360。

13、037实施例40038一种猪皮胶原蛋白肽的提取方法，步骤如下0039称取新鲜猪皮100KG，用35水洗净后，配纯水800KG，再加入无水亚硫酸钠1KG，搅拌均匀，升温至100回流6H，然后趁热过滤；再冷却滤液至55，用01M食品级片状氢氧化钠溶液调PH至75，加入3KG脂肪酶，保持温度在55，搅拌酶解75H，反应过程中用01M食品级片状氢氧化钠溶液保持体系PH值稳定；再加入3KG碱性蛋白酶，用01M食品级片状氢氧化钠溶液保持反应体系PH值75，保持温度在55，搅拌酶解9H；然后升温至90，保温20MIN灭酶；将酶解液过滤，得上清液；上清液中加入18KG粉末状活性炭，保持温度40搅拌吸附1H脱色，滤除活性炭；滤液经孔径为1NM的纳滤膜分离系统进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷雾干燥，得到41KG白色粉末状猪皮胶原蛋白肽，所得产品的检测报告见表4。0040表4实施例4所得产品的检测报告0041说明书CN102154420ACN102154421A6/6页8说明书CN102154420A。

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