芳基磺酰胺胺化合物及它们作为 5-HT6 配体的用途 技术领域 本发明涉及本文所述式 (I) 的新芳基磺酰胺胺化合物， 它们的互变异构形式， 它 们的立体异构体， 它们的多晶型物， 它们的可药用盐， 它们的可药用溶剂化物， 以及包含它 们的可药用组合物。
本发明还涉及制备上文所述新化合物， 它们的互变异构形式， 它们的立体异构体， 它们的多晶型物， 它们的可药用盐， 它们的可药用溶剂化物， 以及包含它们的可药用组合物 的方法。
这些化合物可用于治疗或预防与 5-HT6 受体功能相关的多种疾病。
背景技术
认为多种中枢神经系统疾病 ( 如焦虑、 抑郁、 运动障碍等 ) 涉及神经递质 5- 羟色 胺 (5-HT) 或血清素的紊乱。血清素位于中枢和周围神经系统， 已知其影响包括精神病在 内的多种类型的病症、 运动行为、 进食行为、 性行为和神经内分泌调控等。5-HT 受体亚型调 控血清素的多种作用。已知的 5-HT 受体家族包括 5-HT1 家族 ( 如 5-HT1A)、 5-HT2 家族 ( 如 5-HT2A&5-HT2C)、 5-HT3、 5-HT4、 5-HT5、 5-HT6 和 5-HT7 亚型。
1993 年 5-HT6 受体亚型首先克隆自大鼠组织 (Monsma， F.J. ； Shen， Y. ； Ward， R.P. ； Hamblin， M.W.， Sibley， D.R.， Molecular Pharmacology， 1993， 43， 320-327)， 随后是人组织 (Kohen， R. ； Metcalf， M.A. ； Khan， N. ； Druck， T. ； Huebner， K. ； Sibley， D.R.， Journal of Neurochemistry， 1996， 66， 47-56)。所述受体是与腺苷酸环化酶正偶联的 G 蛋白偶联受体 (GPCR)(Ruat， M. ； Traiffort， E. ； Arrang， J-M. ； Tardive1-Lacombe， L. ； Diaz， L. ； Leurs， R. ； Schwartz， J-C， Biochemical Biophysical Research Communications， 1993， 193， 268-276)。在大鼠和人中， 所述受体几乎只见于中枢神经系统 (CNS) 区域。
对大鼠脑中 5-HT6 受体采用 mRNA 进行的原位杂交研究显示 5-HT 显影区域的主 要位置包括纹状体、 伏隔核、 嗅结节和海马结构 (Ward， R.P. ； Hamblin， M.W. ； Lachowicz， J.E. ； Hoffman， B.J. ； Sibley， D.R. ； Dorsa， D.M.， Neuroscience， 1995， 64， 1105-1111)。在 嗅结节、 纹状体、 伏隔核和齿状回以及海马的 CA1、 CA2 和 CA3 区已观察到最高水平的 5-HT6 受体 mRNA。在小脑的颗粒层、 几个间脑核、 扁桃体和皮层中发现了较低水平的 5-HT6 受体 mRNA。Northern 印迹揭示 5-HT6 受体 mRNA 似乎只存在于脑中， 其在外围组织中的存在只有极少的证据。
多种抗精神病药剂对 5-HT6 受体的高亲和性以及 5-HT6 受体 mRNA 定位于纹状 体、 嗅结节和伏隔核中表明 ： 这些化合物的一些临床作用可通过该受体介导。该受体与大 范围的用于精神病领域的治疗性化合物结合的能力， 以及其在脑中的有趣分布显著地引 起了对能够与所述受体相互作用的新化合物的兴趣 (Sleight， AJ. 等， 5-HT6 and 5-HT7 receptors ： molecular biology， functional correlates and possible therapeutic indications， Drug News Perspective.1997， 10， 214-224)。一直在努力理解 5-HT 6 受体 在精神病、 认知缺陷、 运动功能和控制、 记忆、 情绪等中的可能作用。人们急切地找寻证 实对 5-HT6 受体具有结合亲和性的化合物来帮助对 5-HT6 受体的研究并作为治疗中枢神 经系统疾病的潜在治疗剂， 例如参见 Reavill C. 和 Rogers D.C.， Current Opinion in Investigational Drugs， 2001， 2(1) ： 104-109， Pharma Press Ltd.。
Monsma FJ. 等 (1993) 和 Kohen， R. 等 (2001) 已 经 证 明 若 干 三 环 的 抗 抑 郁 化 合物 ( 例如阿米替林 ) 和非典型性抗抑郁化合物 ( 如米塞林 ) 对 5-HT6 受体具有高亲和 性。这些发现引出 5-HT6 受体参与情感障碍的发病机理和 / 或治疗的假设。焦虑相关行 为的啮齿类动物模型产生与 5-HT6 受体在焦虑中的作用相矛盾的结果。在大鼠的最大电 休克惊厥检测中用 5-HT6 受体拮抗剂治疗提高了惊厥阈值 (Stean， T. 等， Anticonvulsant properties of the selective 5-HT6 receptor antagonist SB-271046 in the rat maximal electroshock seizure threshold test.British Journal of Pharmacology， 1999， 127， Proc.Supplement-131 页 ； Routledge， C. 等， Characterization of SB-271046 ： a potent， selective and orally active 5-HT6 receptor antagonist.British Journal of Pharmacology， 2000， 130， 1606-1612)。尽管这表示 5-HT6 受体可调节惊厥阈值， 但其作 用不像已知的抗惊厥药物那样明显。
我们对 5-HT6 受体配体的作用的理解在两个该受体可能起主要作用的治疗适应症 中获得最大的进展 ： 学习和记忆缺陷， 和异常进食行为。尽管 5-HT6 激动剂最近已经进入 I 期临床阶段， 但 5-HT6 受体在其他 CNS 适应症 ( 如焦虑 ) 中的确切作用还有待确立。根据 直接作用以及可获得的科学研究的启示， 5-HT6 受体配体在人中有很多潜在的治疗用途。 这 些研究包括迄今为止已进行的受体位置、 对具有已知体内活性的配体的亲和性以及多种动 物研究。优选地， 寻找 5-HT6 受体的拮抗剂化合物以作为治疗剂。
5-HT6 受体功能调节剂的一个潜在治疗用途是在诸如阿尔兹海默症的人类疾病中 增强认知和记忆。在如前脑 ( 包括尾核 / 壳核、 海马、 伏隔核和皮层 ) 的结构中发现的高 水平受体表明该受体在记忆和认知中的作用， 这是因为已知这些区域在记忆中起关键作用 (Gerard， C； Martres， M.P. ； Lefevre， K. ； Miquel， M.C ； Verge， D. ； Lanfumey， R. ； Doucet， E. ； Hamon， M. ； EI Mestikawy， S.， Brain Research， 1997， 746， 207-219)。已知的 5-HT6 受 体配体增强胆碱能传递的能力也支持了潜在的认知方面的应用 (Bentley， J.C ； Boursson， A. ； Boess， F.G. ； Kone， F.C ； Marsden， C.A. ； Petit， N. ； Sleight， A.J.， British Journal of Pharmacology， 1999， 126(7)， 1537-1542)。
研究已经发现已知的 5-HT6 选择性拮抗剂显著地提高额叶皮质中谷氨酸和天冬 氨酸的水平， 而不提高去甲肾上腺素、 多巴胺或 5-HT 的水平。这种对一些神经化学物质的 选择性提高在记忆和认知中被注意到， 这强烈提示 5-HT6 配体在认知中的作用 (Dawson，L.A. ； Nguyen， H.Q. ； Li， ， P.British Journal of Pharmacology， 2000， 130(1)， 23-26)。用 已知的选择性 5-HT6 拮抗剂进行的记忆和学习的动物研究有一些有益作用 (Rogers， D.C ； Hatcher， P.D. ； Hagan， J.J.Society of Neuroscience， Abstracts， 2000， 26， 680)。
5-HT6 配体的相关潜在治疗应用是治疗儿童和成人的注意力缺陷障碍 (ADD， 也称 注意力缺陷多动障碍或 ADHD)。由于 5-HT6 拮抗剂似乎增强黑质纹状体多巴胺通路的活 性， 并且已将 ADHD 与尾核的异常相联系 (Ernst， M； Zametkin， A.J. ； Matochik， J.H. ； Jons， P.A. ； Cohen， R.M.， Journal of Neuroscience， 1998， 18(15)， 5901-5907)， 因此 5-HT6 拮抗 剂可减轻注意力缺陷障碍。
当前可获得几个全选择性的激动剂。Wyeth 的激动剂 WAY-181187 目前在针对焦 虑的 I 期试验中 (Cole， D.C. 等 (2005)Discovery of a potent， selective and orally active 5-HT6receptor agonist， WAY-181187.230th ACS Natl.Meet.(8 月 28 号 -9 月 1 号， Washington DC)， 摘要 MEDI 17)。
国际专利公开 WO 03/066056A1 报道， 对 5-HT6 受体的拮抗作用能够促进哺乳动物 中枢神经系统内神经细胞生长。另一篇国际专利公开 WO03/065046A2 公开了新的人 5-HT6 受体变体， 并提出 5-HT6 受体与多种其他疾病相关。 检测多种具有已知治疗用途或与已知药物有强结构相似性的 CNS 配体的亲和性 的早期研究显示了 5-HT6 配体在精神分裂症和抑郁治疗中的作用。 例如， 氯氮平 ( 一种有效 的临床抗精神病药 ) 对 5-HT6 受体亚型有高亲和性。并且， 若干临床抗抑郁剂也对所述受 体有高亲和性并作为该位点的拮抗剂 (Branchek， T.A. ； Blackburn， T.P.， Annual Reviews inPharmacology and Toxicology， 2000， 40， 319-334)。
此外， 近期大鼠的体内研究显示 5-HT6 调节剂可用于包括癫痫在内的运动疾病 的治疗 (Stean， T. ； Routledge， C； Upton， N.， British Journal of Pharmacology， 1999， 127 Proc.Supplement-131P ； 和 Routledge， C； Bromidge， S.M. ； Moss， S.F. ； Price， G.W. ； Hirst， W. ； Newman， H. ； Riley， G. ； Gager， T. ； Stean， T. ； Upton， N. ； Clarke， S.E. ； Brown， A.M. ； BritishJournal of Pharmacology， 2000， 30(7)， 1606-1612)。
综上， 以上研究强烈提示作为 5-HT6 受体调节剂的化合物 ( 即配体 ) 可用于以下 治疗性适应症， 包括 ： 与记忆、 认知和学习缺陷相关的疾病 ( 如阿尔兹海默症 ) 和注意力缺 陷疾病的治疗 ； 人格缺陷 ( 如精神分裂症 ) 的治疗 ； 行为疾病 ( 如焦虑、 抑郁和强迫症 ) 的 治疗 ； 活动或运动障碍 ( 如帕金森氏病和癫痫 ) 的治疗 ； 与神经变性相关的疾病 ( 如卒中或 头部损伤 ) 的治疗 ； 或药物上瘾 ( 包括对尼古丁、 酒精和其他可滥用物质的上瘾 ) 的戒除。
还预计这些化合物可用于一些肠胃 (GI) 疾病如功能性肠病的治疗。参见， 例 如 Roth， B.L. 等， Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics， 1994， 268， 1403-1412 ； Sibley， D.R. 等， Molecular Pharmacology， 1993， 43， 320-327， Sleight， A.J. 等， Neurotransmission， 1995， 11， 1-5 ； 以及 Sleight， A.J. 等， Serotonin ID Research Alert， 1997， 2(3)， 115-118。
此外， 已经报道 5-HT6 拮抗剂和 5-HT6 反义寡核苷酸用于减少大鼠食物摄取的作 用， 因此潜在地其可用于肥胖治疗。参见例如 Bentley， J.C ； Boursson， A. ； Boess， F.G. ； Kone， F.C ； Marsden， C.A. ； Petit， N. ； Sleight， A.J.， British Journal of Pharmacology， 1999 ， 126(7) ， 1537-1542) ； Wooley 等， Neuropharmacology ， 2001 ， 41 ： 210-129 和 WO
02/098878。
一篇近期的综述 (Holenz， Jo ″ rg 等， Drug Discovery Today， 11， 7/8， 2006 年 4 月， Medicinal chemistry strategies to 5-HT6 receptor ligands as potential cognitive enhancers and antiobesity agents) 对 5-HT6 配体的进展进行了详尽的讨 论。其概括了用于在如精神分裂症的疾病、 其他多巴胺相关疾病和抑郁中的评估 5-HT6 受 体的药理学工具和临床前候选药， 并描述了阻断或激活 5-HT6 受体的神经化学和电生理 学 作 用。 最 近， 一 篇 综 述 (Heal D.J. 等， Pharmacology and therapeutics， 2008， 117， 207-231， Selective 5-HT6 receptor ligands ： Progress in the development of a novel pharmacological approach to the tratment of the obesity and related metabolic disorders) 描述了 5-HT6 配体的药物化学和药理学领域的主要进展， 尤其强调了它们作为 新的抗肥胖药的潜在应用。此外， 它们已被用于表征 5-HT6 受体和研究其分布。
已经报道 GlaxoSmithKline 的 II 期拮抗剂候选药 SB-742457 用于与阿尔兹海 默症相关的认知功能障碍的治疗性适应症 (Ahmed， M. 等， (2003)Novel compounds.WO 专 利 2003080580) 和 Lilly 的 化 合 物 LY-483518(Filla， S.A. 等 ； (2002)Preparation of benzenesulfonic acid indo1-5-yl esters as antagonists of the 5-HT6 receptor， WO 2002060871)。第一个进入临床 I 期开发的 5-HT6 受体拮抗剂 SB-271046 已被停用 ( 可能 是由于对血脑屏障的低穿透 )。此外， 选择性 5-HT6 受体拮抗剂 SB-271046 在有关有或无 精神分裂症症状的动物实验中均无活性 (Pouzet， B. 等， Effects of the 5-HT6 receptor antagonist， SB-271046， in animal models for schizophrenia.Pharmacol.Biochem. Behav.2002， 71， 635-643)。
国 际 专 利 公 开 WO 2007/046112、 WO 2007/020653、 WO2007/138611、 WO 2005/066157、 WO 2004/108671、 WO 2004/048331、 WO 2004/048330 和 WO 2004/048328( 均 授予 Suven Life Sciences Limited) 描述了相关的现有技术。此外 WO 98/27081、 WO 99/02502、 WO 99/37623、 WO 99/42465 和 WO 01/32646( 均授予 Glaxo SmithKline Beecham PLC) 公开了一系列作为 5-HT6 受体拮抗剂的芳基磺酰胺和亚砜化合物， 并声称可用于多种 CNS 疾病的治疗。尽管已经公开了一些 5-HT6 调节剂， 但还是继续需要可用于调节 5-HT6 的 化合物。在我们对 5-HT6 受体领域的研究中， 我们发现式 I 的芳基磺酰胺胺化合物被证明 有非常高的 5-HT6 受体亲和性。因此， 本发明的一个目的是提供化合物， 其作为治疗剂可用 于治疗 / 预防多种中枢神经系统疾病或受 5-HT6 受体影响的疾病。
发明概述
本发明涉及本文所述式 (I) 的新芳基磺酰胺胺化合物， 它们的互变异构形式， 它 们的立体异构体， 它们的多晶型物， 它们的可药用盐， 它们的可药用溶剂化物， 以及包含它 们的可药用组合物。
其中 R1、 R 2、 R3 和 R5 可以相同或不同， 并且各自独立地表示氢、 卤素、 (C1-C3) 烷基、 (C1-C3) 烷氧基、 环 (C3-C6) 烷基、 环 (C3-C6) 烷氧基、 卤代 (C1-C3) 烷基或卤代 (C1-C3) 烷氧 基；
表示芳基或杂环 ；R4 表示氢、 (C1-C3) 烷基、 环 (C3-C6) 烷基、 卤代 (C1-C3) 烷基、 芳基或芳烷基 ；
“n” 表示 1 至 2 ； 本发明涉及治疗有效量的式 (I) 的化合物用于制备用于治疗 / 预防与 5-HT6 受体 功能相关的多种疾病的药物的用途。
特别地， 本发明的化合物用于治疗以下多种疾病， 如焦虑、 阿尔兹海默症、 抑郁、 惊 厥性疾病、 强迫症、 偏头痛、 头痛、 认知记忆障碍、 ADHD( 注意力缺陷疾病 / 多动综合征 )、 人 格障碍、 精神病、 妄想痴呆、 精神病性抑郁、 帕金森氏病、 躁狂症、 精神分裂症、 恐慌症、 睡眠 障碍、 药物滥用戒除综合征、 卒中、 头部损伤、 轻度认知障碍、 神经变性疾病、 胃肠病和肥胖。
在另一方面， 本发明涉及药物组合物， 其包含治疗有效量的式 (I) 的化合物或单 个立体异构体、 立体异构体的外消旋或非消旋混合物或其可药用盐或溶剂化物的至少一种 与至少一种适合的载体、 稀释剂、 佐剂或赋形剂的混合物。
在另一方面， 本发明涉及放射标记的式 (I) 的化合物， 其用于医学诊断或治疗 ； 并 涉及放射标记的式 (I) 的化合物的用途， 其用于制备可用于治疗与 5-HT6 受体功能相关的 多种疾病的药物。
在另一方面， 本发明涉及本发明化合物与至少一种其他活性成分组合以制备用于 治疗或预防疾病和病症的药物的用途。
在又一方面， 本发明涉及包含式 (I) 化合物的组合物以及应用式 (I) 的化合物的 方法。
在再一方面， 本发明还涉及制备式 (I) 的化合物的方法。
以下是属于通式 (I) 化合物的部分列表 ：
N-[4- 氯 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
4- 氟 -N-[4- 氯 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
4- 甲基 -N-[4- 氯 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
4- 异丙基 -N-[4- 氯 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
2- 溴 -N-[4- 氯 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
4- 氟 -N-[4- 甲氧基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；N-[4- 甲氧基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
2- 溴 -N-[4- 甲氧基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
4- 异丙基 -N-[4- 甲氧基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
4- 甲基 -N-[4- 甲氧基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
2- 溴 -N-[3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
4- 异丙基 -N-[3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
4- 氟 -N-[3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
4- 甲基 -N-[3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
2- 溴 -N-[4- 甲基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
N-[4- 甲基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
4- 氟 -N-[4- 甲基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
4- 甲基 -N-[4- 甲基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
N-[3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
5- 氯 -3- 甲基 -N-[4- 甲氧基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯并 [b] 噻 吩 -2- 基磺酰胺 ；
N-[4- 氯 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺盐酸盐 ； 4- 异丙基 -N-[4- 甲基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺盐酸盐 ； 2- 溴 -N-{4- 甲氧基 -3-[N- 甲基 -N-(1- 甲基哌啶 -4- 基 ) 氨基 ] 苯基 } 苯磺酰 N-[4- 溴 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； N-[4- 乙氧基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； N-[4- 三氟甲基 -3-( 哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 4- 氟 -N-[4- 氟 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 4- 氟 -N-[4- 甲氧基 -3-( 哌啶 -1- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 4- 甲基 -N-[4- 溴 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 4- 甲基 -N-[4- 乙氧基 -3-( 哌啶 -1- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 4- 异丙基 -N-[4- 三氟甲氧基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 4- 异丙基 -N-[4- 氯 -3-( 哌啶 -1- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 2- 溴 -N-[4- 氯 -3-( 哌啶 -1- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 4- 溴 -N-[3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 4- 溴 -N-[4- 氯 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 4- 甲氧基 -N-[4- 溴 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 4- 甲氧基 -N-[4- 三氟甲基 -3-( 哌啶 -1- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 2， 4- 二氯 -N-[4- 甲氧基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 2， 4- 二氯 -N-[4- 溴 -3-( 哌啶 -1- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 4- 三氟甲氧基 -N-[4- 氯 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 4- 氯 -N-[4- 氯 -3-( 哌啶 -1- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 2- 氯 -N-[4- 氯 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 2- 甲氧基 -N-[4- 三氟甲基 -3-( 哌啶 -1- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 ；11胺；
102159564 A CN 102159570
说明书7/32 页4- 甲基 -N-[4- 氯 -3-[N- 甲基 -N-(4- 甲基哌啶 -1- 基 ) 氨基 ] 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 4- 甲基 -N-[4- 甲氧基 -3-[N- 甲基 -N-(4- 甲基哌啶 -1- 基 ) 氨基 ] 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 4- 甲基 -N-[4- 氟 -3-[N- 甲基 -N-( 哌啶 -1- 基 ) 氨基 ] 苯基 ] 苯磺酰胺 ； 以及
4- 甲基 -N-[4- 三氟甲基 -3-[N- 甲基 -N-( 哌啶 -1- 基 ) 氨基 ] 苯基 ] 苯磺酰胺 ；
及其互变异构形式， 其立体异构体， 其多晶型物， 其可药用盐和溶剂化物。
发明详述
除非另外说明， 说明书和权利要求书中所用的以下术语具有以下意义 ：
“卤素” 指氟、 氯、 溴或碘 ；
“(C1-C3) 烷基” 指含有 1 至 3 个碳原子的直链或有支链的烷基基团， 并包括甲基、 乙基、 正丙基或异丙基 ；
“(C1-C3) 烷氧基” 指含有 1 至 3 个碳原子的直链或有支链的烷基基团， 并包括甲氧 基、 乙氧基、 丙氧基或异丙氧基 ；
“环 (C3-C6) 烷基” 指含有 3 至 6 个碳原子的环状或具有支链的环状烷基基团， 并包 括环丙基、 环丁基、 环戊基、 环丙基甲基、 环 (C3-C6) 烷基甲基或环己基， 其可被取代或未被 取代， 并且任选地取代基可选自卤素、 (C1-C3) 烷基或 (C1-C3) 烷氧基 ；
“环 (C3-C6) 烷氧基” 指含有 3 至 6 个碳原子的环状或具有支链的环状烷基基团， 并 包括环丙氧基、 环丁氧基、 环戊氧基或环己氧基 ；
“卤代 (C1-C3) 烷基” 指含有 1 至 3 个碳原子的直链或有支链的烷基基团， 并包括氟 甲基、 二氟甲基、 三氟甲基、 三氟乙基、 氟乙基、 二氟乙基等 ；
“卤代 (C1-C3) 烷氧基” 指含有 1 至 3 个碳原子的直链或有支链的烷基基团， 并包括 氟甲氧基、 二氟甲氧基、 三氟甲氧基、 三氟乙氧基、 氟乙氧基、 二氟乙氧基等 ；
“杂环” 指包含环结构的有机化合物， 所述环结构除碳原子外还包含如硫、 氧或氮 的原子作为环的一部分。它们可以是简单的芳环或非芳环， 并包括吡啶、 嘧啶、 苯并噻吩 等；
“芳基” 指单环芳环体系， 其可以任选地被氢、 卤素、 (C1-C3) 烷基、 卤代 (C1-C3) 烷 基、 (C1-C3) 烷氧基或卤代 (C1-C3) 烷氧基取代 ；
“芳烷基” 指苄基或杂环基甲基等 ；
术语 “精神分裂症” 指精神分裂症、 类精神分裂症和精神分裂性疾病。
术语 “精 神 病”指 妄 想 症、 主 导 性 幻 觉、 言 语 混 乱、 或 行 为 混 乱 或 紧 张。 参 见 Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorder ； 第 4 版， American Psychiatric Association， Washington， D.C.。
术语 “可药用盐” 表示必须与制剂中包含的其他组分、 用其治疗的哺乳动物在化学 和 / 或毒理学上可相容的物质或组合物。
“治疗有效量” 定义为 (i) 治疗或预防特定疾病、 病症或异常 ； (ii) 缓解、 改善或消 除特定疾病、 病症或异常的一种或更多种症状 ； (iii) 预防或延缓本文所述的特定疾病、 病 症或异常的一种或更多种症状的发病的本发明化合物的量。
术语 “治疗” 涵盖如防止性、 预防性和减轻性的全部意义。
术语 “立体异构体” 是指只有原子空间方向不同的单个分子的所有异构体的通用
术语。它包括镜像异构体 ( 对映异构体 )、 几何 ( 顺反 ) 异构体以及具有多于一个手性中心 的彼此不为镜像的化合物的异构体 ( 非对映异构体 )。
术语 “ADHD” 指注意力缺陷多动症。
一些式 (I) 的化合物能够以立体异构体的形式 ( 如非对映异构体和对映异构体 ) 存在， 并且本发明包括这些立体异构体形式中的每一个以及其混合物 ( 包括外消旋体 )。 可 通过常用方法将不同的立体异构体形式彼此分离或任何给定异构体可通过立体特异或不 对称合成而获得。本发明还包括互变异构形式及其混合物。
立体异构体通常以外消旋体获得， 并可将其用原本已知的方式分离成有光学活性 的异构体。在具有不对称碳原子的通式 (I) 化合物的情况下， 本发明涉及 D- 型、 L- 型和 D， L- 混合物， 在多个不对称碳原子的情况下， 本发明包括这些立体异构形式中的每一个及其 混合物 ( 包括外消旋体 )。可以通过常用方法将含有不对称碳原子并通常以外消旋体形式 获得的通式 (I) 的那些化合物彼此分离， 或可通过立体特异或不对称合成获得任何给定的 异构体。 然而， 也可以在开始时采用光学活性化合物， 然后获得对应的光学活性对映异构体 化合物或非对映异构体作为最终化合物。
通式 (I) 的化合物的立体异构体可以通过一种或更多种以下方式制备 ：
(i) 可以以光学活性形式使用一种或更多种试剂。
(ii) 可以在还原过程中与金属催化剂一起采用光学纯的催化剂或手性配体。该 金属催化剂可以是铑、 钌、 铟等。手性配体可以优选为手性膦 (Principles of Asymmetric synthesis， J.E.Baldwin Ed.， Tetrahedron series， 14， 311-316)。
(iii) 立体异构体的混合物可用传统方法拆分， 如与手性酸、 手性胺、 手性氨基醇、 手性氨基酸形成非对映体的盐。然后可将得到的非对映异构体的混合物用如分级结晶、 色谱法等的方法分离， 而后是通过水解衍生物来分离光学活性产物的另外步骤 (Jacques 等，″ Enantiomers， Racemates and Resolution″， WileyInterscience， 1981)。
(iv) 立体异构体的混合物可以通过传统方法拆分， 如微生物拆分， 拆分与手性酸 或手性碱形成的非对映体的盐。
可使用的手性酸可以是酒石酸、 扁桃酸、 乳酸、 樟脑磺酸、 氨基酸等。 可以采用的手 性碱可以是金鸡纳生物碱、 二甲马钱子碱或碱性氨基酸 ( 如赖氨酸、 精氨酸等 )。在包含几 何异构体的通式 (I) 的化合物的情况下， 本发明涉及所有几何异构体。
适合的可药用盐对本领域技术人员来说是明显的， 并且包括 J.Pharm.Sci.， 1977， 66， 1-19 中所述的那些， 如与无机酸 ( 如盐酸、 氢溴酸、 硫酸、 硝酸或磷酸 ) 和有机酸 ( 如琥 珀酸、 马来酸、 醋酸、 富马酸、 柠檬酸、 酒石酸、 苯甲酸、 p- 甲苯磺酸、 甲磺酸或萘磺酸 ) 形成 的酸加成盐。本发明在其范围内包括所有可能的化学计量和非化学计量形式。
构成本发明一部分的可药用盐可以通过用 1-6 当量的碱处理式 (I) 的化合物来制 备， 所述碱如氢化钠、 甲醇钠、 乙醇钠、 氢氧化钠、 t- 丁醇钾、 氢氧化钙、 乙酸钙、 氯化钙、 氢氧 化镁、 氯化镁等。可以采用溶剂如水、 丙酮、 醚、 THF、 甲醇、 乙醇、 t- 丁醇、 二氧杂环己烷、 异 丙醇、 异丙醚或其混合物。
式 (I) 的化合物可以以结晶或非结晶的形式制备， 如果是结晶形式， 其可以任选 地被溶剂化， 如以水合物的形式。 本发明在其范围内包括化学计量的溶剂化物 ( 如水化物 ) 及含有可变量溶剂 ( 例如水 ) 的化合物。本发明的化合物可彼此或与用于治疗或预防上述病症的其他治疗剂或方法组合 使用。这些试剂或方法包括 ： β- 分泌酶抑制剂 ； γ- 分泌酶抑制剂 ； 淀粉样蛋白聚集抑制 剂 ( 如 Alzhemed) ； 直接或间接作用的神经保护化合物 ； 抗氧化剂如维生素 E 和 ginkolide ； 抗炎剂如 Cox 抑制剂或 NSAID 类 ； HMG-CoA 还原酶抑制剂 ( 他汀类 ) ； 乙酰胆碱酯酶抑制剂 如多奈哌齐、 卡巴拉汀、 他克林、 加兰他敏 ； NMDA 受体拮抗剂 ( 如美金刚 ) ； AMPA 激动剂 ； 调 节神经递质释放或浓度的化合物 ( 如 NS-2330) ； 诱导生长激素释放的化合物 ( 如甲磺酸 伊布莫仑和卡莫瑞林 ) ； CB1 受体拮抗剂或反向激动剂 ； 抗生物质剂如米诺环素或利福平 ； PDE-IV 和 PDE-IX 抑制剂 ； GABAA 反向激动剂 ； 烟碱酸激动剂 ： 组胺 H3 拮抗剂、 5-HT4 激动剂 或部分激动剂 ； 5-HT6 拮抗剂 ； a2- 肾上腺素受体拮抗剂 ； 毒蕈碱 M1 激动剂 ； 毒蕈碱 M2 激动 剂； 代谢型谷氨酸受体 5 正调节剂 ； 以及以以下方式调节受体或酶的化合物， 即本发明化合 物的效力和 / 或安全性被提高或副作用被降低。
优选的是包含一种或更多种本发明化合物和一种或更多种另外的活性组分的组 合， 所述活性组分选自 Alzhemed、 维生素 E、 ginkolide、 多奈哌齐、 卡巴拉汀、 他克林、 加兰 他敏、 美金刚、 NS-2330、 甲磺酸伊布莫仑、 卡莫瑞林、 米诺环素和利福平。
在本发明的组合中， 本发明的化合物和上述联用药可以单独 ( 例如， 成套试剂的 一部分 ) 或在一种药物组合物 ( 例如， 胶囊或片剂 ) 中一起施用。此外， 本发明组合的一种 成分的施用可以在本发明组合的另一种成分的施用之前、 同时或之后。如果本发明的化合 物和所述一种或更多种另外的活性成分存在于单独的制剂中， 则这些单独的制剂可同时或 顺次施用。
对于上述疾病和病症的治疗或预防， 本发明的化合物可以与免疫学方法组合使 用， 所述免疫学方法如用 A β 肽或其衍生物免疫或施用抗 -A β 肽抗体。
因此， 本发明涉及本发明的化合物与至少一种另外的活性成分组合用于制备用于 治疗或预防疾病和病症的药物的用途。
可容易地获得多种放射性同位素， 包括氢、 碳、 氮、 氧、 磷、 硫、 碘、 氟、 溴和氯的同位 2 3 11 13 14 13 15 15 17 18 31 32 35 123 124 125 131 18 75 76 77 素，如 H、 H、 C、 C、 C、 N、 N、 O、 O、 O、 P、 P、 S、 I、 I、 I、 I、 F、 Br、 Br、 Br、 82 36 Br 和 Cl。
可通过采用有机化学中已知的标准技术对通式 (I) 的化合物进行放射标记。或 者， 用放射性同位素作为用在式 (I) 化合物合成中的原料之一或中间体中的取代基来对式 (I) 的化合物进行放射标记。例如， 参见 Arthur Murry III， D.Lloyd Williams ； Organic Synthesis with Isotopes， 第 I 和 II 卷， Interscience Publishers Inc.， N.Y.(1958) 以 及 Melvin Calvin 等， Isotopic Carbon John Wiley and Sons Inc.， N.Y.(1949)。
放射标记化合物的合成可以方便地由擅长放射标记探针化合物的订制合成的 放射同位素供应商进行， 如， Amersham Corporation， Arlington Heights， IL ； Cambrige Isotopes Laboratories， Inc.Andover， MA ； Wizard Laboratories， West Sacramento， CA ； ChemSyn Laboratories， Lexena， KS ； AmericanRadiolabeled Chemicals， Inc.&St.Louis， MO。
放射标记的式 (I) 化合物的类似物可用在临床研究中以评估多个确信有 5-HT6 受 体参与的疾病领域中 5-HT6 受体配体的作用。
放射标记的式 (I) 的化合物可在医学治疗和诊断中用作成像试剂和生物标记物。这些放射标记的化合物还可用作研究 5-HT6 功能和活性的药理学工具。例如， 同位素标记 的化合物在 SPECT( 单光子发射化合物断层扫描 ) 和 PET( 正电子发射断层扫描 ) 中尤其有 效。
本发明还提供制备通式 (I) 化合物或其可药用盐的方法， 其包括以下路线 ( 方 案 -I)，
方案 -I
其中关键中间体 (II) 通过在文献中已知的多种方法合成。
本发明的方法包括 ： 在环境温度下采用适合的还原剂和碱并在适合的溶剂存在 下， 使式 (II) 的化合物
与哌啶 -4- 酮衍生物反应以获得式 (I) 的化合物， 其中所有取代基如上所述。
以上反应优选在如诸以下的溶剂中进行 ： 乙醇、 四氢呋喃、 甲苯、 乙酸乙酯、 水、 异 丙醇钛、 二甲基甲酰胺、 二甲基亚砜、 二甲醚等或其混合物， 并优选采用乙酸乙酯。 所述反应 在诸如以下的还原剂中进行 ： 钠、 硼氢化钠、 氰基硼氢化钠、 三乙酰氧基硼氢化钠等或其混 合物， 并优选采用三乙酰氧基硼氢化钠。所述反应可以被碱的存在影响， 所述碱如碳酸钾、 氢氧化钠、 碳酸氢钠、 氢化钠或其混合物， 并优选采用氢氧化钠。所述反应温度根据所选择 的溶剂可以为 20℃至 45℃， 并且优选的温度范围为 20℃至 30℃。反应的持续时间可以为 1 至 5 小时， 优选的时间为 2 至 4 小时。
关键中间体 (II) 按照制备 1 中所述合成。该关键中间体 (II) 可购得或可以采用 已知方法通过传统方法或通过改性制备。
本发明还提供制备通式 (I) 的化合物或其可药用盐的替代方法， 其包括以下路线 ( 方案 -II)， 其中关键中间体 (III) 通过在文献中已知的多种方法合成。
本发明的方法包括 ： 在环境温度下在适合的溶剂存在下， 使式 (III) 的化合物方案 -II
与芳基磺酰氯衍生物反应以获得式 (I) 的化合物， 其中所有取代基如上所述。
以上反应优选在如以下的溶剂中进行 ： 乙醇、 四氢呋喃、 甲苯、 乙酸乙酯、 水、 吡啶、 二氯甲烷、 二甲基亚砜、 二甲醚等或其混合物， 并优选采用吡啶和二氯甲烷。所述反应温度 根据所选择的溶剂可以为 20℃至 45℃， 并且优选的温度范围为 25℃至 30℃。反应的持续 时间可以为 1 至 5 小时， 优选的时间为 4 小时。
关键中间体 (III) 按照制备 2 中所述合成。该关键中间体 (III) 可购得或可以采 用已知方法通过传统方法或通过改性制备。
可以采用公知的反应通过进一步的化学改性将通过本发明以上制备方法得到的 化合物转化成本发明的其他化合物， 所述反应如氧化、 还原、 保护、 去保护、 重排反应、 卤化、 羟基化、 烷基化、 烷硫化、 去甲基化、 O- 烷基化、 O- 酰化、 N- 烷基化、 N- 烯基化、 N- 酰化、 N- 氰 化、 N- 磺酰化、 采用过渡金属的偶联反应等。
如需要， 可以进行任何一个或多于一个的以下步骤，
(i) 将一种式 (I) 的化合物转化成另一种式 (I) 的化合物
(ii) 去除任何保护基 ； 或
(iii) 形成其可药用盐、 溶剂化物或前药。
方法 (i) 可以采用传统的相互转换步骤进行， 如差向异构化、 氧化、 还原、 烷基化、 亲核或亲电芳香族取代以及酯水解或酰胺键形成。
在 方 法 (ii) 中， 保 护 基 的 实 例 和 它 们 的 去 除 方 式 可 参 见 T.W.Greene ′ Protective Groups in Organic Synthesis′ (J.Wiley and Sons， 1991)。适合的胺保 护基包括磺酰基 ( 例如甲苯磺酰基 )、 酰基 ( 例如， 乙酰基、 2’ ， 2’ ， 2’ - 三氯乙氧基羰基、 苄 氧基羰基或叔丁氧基羰基 ) 和芳基烷基 ( 如苄基 )， 其可根据需要通过水解 ( 例如采用酸， 如盐酸或三氟醋酸 ) 或还原 ( 氢解苄基或在醋酸中用锌还原去除 2’ ， 2’ ， 2’ - 三氯乙氧基羰 基 ) 去除。其他适合的胺保护基包括 ： 三氟乙酰基， 其可通过碱催化水解去除 ； 或固相树脂 结合苄基 ( 如 Merrifield 树脂结合 2， 6- 二甲氧基苄基基团 (Ellman 连接基 )， 其可通过酸 催化水解 ( 例如采用三氟醋酸 ) 去除。
在方法 (iii) 中可以通过与早先详细描述的适合的酸或酸衍生物反应传统地制 备卤化物、 羟化物、 烷基化物和 / 或可药用盐。
为了在治疗中使用式 (I) 的化合物， 通常将其按照标准药学实践配制成药物组合 物。
本发明的药物组合物可以采用一种或更多种可药用载体以传统方法配制。因此， 本发明的活性化合物可配制成口服、 口含、 鼻内、 肠胃外 ( 如静脉内、 肌内或皮下 ) 或直肠施 用或适合于通过吸入或吹入施用的形式。
对于口服施用， 所述药物组合物可以采用的形式例如 ： 采用可药用赋形剂通过传
统方法制备的片剂或胶囊， 所述赋形剂如结合剂 ( 例如预凝胶化的玉米淀粉、 聚乙烯基吡 咯烷酮或羟丙基甲基纤维素 ) ； 填充剂 ( 如， 乳糖、 微晶纤维素或磷酸钙 ) ； 润滑剂 ( 如硬脂 酸镁、 滑石或二氧化硅 ) ； 崩解剂 ( 如马铃薯淀粉或羟基乙酸淀粉钠 ) ； 或润湿剂 ( 如月桂 基硫酸钠 )。片剂可以通过本领域公知的方法包衣。口服施用的液体制剂可以采用的形式 如溶液、 糖浆或混悬液， 或可以干燥产物的形式存在， 以在使用前用水或其他适合的载体重 构。这些液体制剂可以用可药用添加剂通过传统方法制备， 所述添加剂如悬浮剂 ( 如， 山梨 糖醇糖浆、 甲基纤维素或氢化的可食用脂肪 ) ； 乳化剂 ( 如卵磷脂和阿拉伯树胶 ) ； 非水载 体 ( 如杏仁油、 油状酯或乙醇 ) 和防腐剂 ( 如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯或山梨酸 )。
对于口含施用， 所述组合物可采用以传统方法制备的片剂或锭剂形式。
本发明的活性化合物可以被配制成通过注射肠胃外施用 ( 包括采用传统的导管 插入技术或输液 )。 注射用制剂可以单位剂型存在， 例如， 在安瓿瓶中或在多剂量容器中， 并 添加防腐剂。 所述组合物的形式可以是油性或水性载体中的混悬液、 溶液或乳液， 并可以包 含配制剂， 如悬浮、 稳定和 / 或分散剂。或者， 活性组分可以是粉末的形式， 以在使用前用适 合的载体 ( 如无菌无热原水 ) 重构。
本发明的活性化合物还可以被配制成直肠施用组合物， 如栓剂或保留灌肠， 如包 含传统的栓剂基料如可可油或其他甘油酯。
对于鼻内施用或通过吸入施用， 本发明的活性化合物可以以加压容器或喷雾器 中、 或采用吸入器或吹入器的胶囊中的气溶胶喷洒的形式方便地递送。在加压气溶胶的情 况下， 可以通过采用阀递送计量来确定适合的推进剂 ( 如二氯二氟甲烷、 三氯氟甲烷、 二氯 四氟乙烷、 二氧化碳或其他适合的气体 ) 和单位剂量。加压容器或喷雾器的药物可以包含 活性化合物的溶液或悬浮液， 而对胶囊其优选为粉末的形式。在吸入器或吹入器中采用的 胶囊和药筒 ( 例如由明胶制成 ) 可以被配制成包含本发明化合物和适合的粉末基料 ( 如乳 糖或淀粉 ) 混合的粉末。
用于在普通成人中治疗上述病症 ( 例如偏头痛 ) 的气溶胶制剂优选地制备为每个 计量剂量或气溶胶 “喷气” 包含 20μg 至 1000μg 的本发明化合物。气溶胶的每天总剂量 在 100μg 至 10mg 的范围内。可以一天施用几次， 如 2、 3、 4 或 8 次， 每次给予例如 1、 2或3 个剂量。
有效量的以上定义的通式 (I) 化合物或它们的衍生物可与传统的药物辅剂、 载体 和添加剂一起用于制备药物。
这种治疗包括多种选择 ： 例如， 在单个剂型中同时施用两种可相容的化合物， 或以 单独的剂量单独施用每种化合物 ； 或者如果需要， 在相同的时间区间或分别地施用以根据 已知的药理学原则最大化药物的有利作用或最小化潜在的副作用。
活性化合物的剂量可根据以下因素而变化， 如施用途径、 患者的年龄和体重、 待治 疗疾病的性质和严重程度及类似因素。因此， 本文中提到的任何通式 (I) 的化合物的药物 有效量均涉及上述因素。 对治疗普通成人的上述病症， 无论口服、 肠胃外、 经鼻或口含施用， 本发明活性化合物的建议剂量为每单位剂量 0.1 至 200mg 活性成分， 并可以例如每天 1 至 4 次施用。
使用未经进一步纯化的商业试剂。室温是指 25-30℃。采用 KBr 并在固态下进行 IR。除非另外指明， 采用 ESI 条件进行所有质谱。在 Bruker 仪上以 400MHz 记录 1H-NMR 谱。用氘代氯仿 (99.8％ D) 作为溶剂。 用 TMS 作为内参照标准。 化学位移值表示为每百万 (δ) 值的部分。以下简写用于 NMR 信号的多重性 ： s ＝单峰、 bs ＝宽单峰、 d ＝双重峰、 t ＝三重 峰、 q ＝四重峰、 qui ＝五重峰、 h ＝七重峰、 dd ＝双双重峰、 dt ＝双三重峰、 tt ＝三三重峰、 m ＝多重峰。层析是指用 100-200 目硅胶进行并在氮气压力 ( 快速层析 ) 条件下实施的柱 层析。 实施例 本发明的新化合物利用合适的材料按照以下步骤制备， 并通过以下具体实施例进 一步示例。 本发明最优选的化合物是这些实施例中具体给出的任何一个或所有。 然而， 不能 认为这些化合物是本发明的唯一种类， 化合物或它们基团的任何组合可以形成一个种类。 以下实施例进一步说明了制备本发明化合物的细节。 本领域技术人员能容易地理解以下制 备步骤地条件和方法的已知变化形式可用于制备这些化合物。
制备 1 ： 制备 N-(4- 氯 -3- 氨基苯基 ) 苯磺酰胺
步骤 (I) ： 制备 2- 氯 -5- 硝基乙酰苯胺
将 2- 氯 -5- 硝基苯胺 (12 克， 70mmol) 在搅拌下放入含有二氯甲烷 (110mL) 的 500mL 三颈圆底烧瓶中。然后在室温下， 在 15 分钟内逐滴向反应物中添加三乙胺 (14.9mL， 105mmol)。在搅拌下将反应物冷却到 0 ℃并在 0 ℃下， 在 10 分钟的时间内加入乙酰氯 (6.8mL， 84mmol)。在 20-25℃下再搅拌反应物 3 小时。在 150mL 水中将反应停止并用过量 的二氯甲烷萃取产物。用饱和盐水溶液 (2×25mL) 清洗合并的有机层， 用无水硫酸钠干燥， 过滤除盐， 在真空中浓缩以获得油状物质 (7.8g)。
IR 谱 (cm-1) ： 1550， 1335， 1190 ； 1
H-NMR(δppm) ： 2.15(3H， s)， 7.51-7.53(1H， d， J ＝ 8.56Hz)， 7.85-7.87(1H， dd， J ＝ 2.48， 8.56Hz)， 8.21(1H， d， J ＝ 2.46Hz) ；
质谱 (m/z) ： 215.6(M+H)+
步骤 (II) ： 制备 2- 氯 -5- 氨基乙酰苯胺
在 500mL 三颈圆底烧瓶中加入在步骤 (I) 获得的 2- 氯 -5- 硝基乙酰苯胺 (34.0 克， 158.5mmol) 和甲醇 (100mL)。搅拌该反应物以获得澄清溶液， 然后缓慢并小心的用甲醇 (20mL) 加入 Raney 镍 (3.4 克 )。在氮气氛下将反应物温度保持在 25-30℃的温度下， 逐滴 加入水合肼 (39.6mL， 792.5mmol)。在加入过程中反应放热。在 25-30℃下再搅拌反应物 2 小时。通过 hyflowsupercel 床过滤反应物， 并用甲醇 (50mL) 清洗。浓缩滤液获得油状物 质。加水 (200mL) 并用 40％氢氧化钠水溶液将 pH 调节至 10。用乙酸乙酯 (3×100mL) 萃 取产物。用饱和盐水溶液 (2×25mL) 清洗合并的有机层， 用无水硫酸钠干燥， 过滤除盐， 在 真空中浓缩以获得油状产物 (18.48g)。
IR 谱 (cm-1) ： 3310， 1535， 1331， 1153 ； 1
H-NMR(δppm) ： 2.15(3H， s)， 3.68(2H， bs)， 6.34-6， 37(1H， dd， J ＝ 2.48， 8.56Hz)， 6.70(1H， d， J ＝ 2.46Hz)， 6.90-6.92(1H， d， J ＝ 8.56Hz) ； +
质谱 (m/z) ： 185.6(M+H)
步骤 (III) ： 制备 N-(4- 氯 -3- 乙酰胺基苯基 ) 苯磺酰胺
在含有二氯乙烷 (20mL) 的干燥 100mL 三颈圆底烧瓶中加入步骤 (II) 中获得的
2- 氯 -5- 氨基乙酰苯胺 (1.5 克， 8mmol)， 随后在氮气氛下加入吡啶 (0.7mL， 8mmol)。将反 应物搅拌 1 小时， 而后在室温下在 20 分钟内逐滴加入苯磺酰氯 (1.6mL， 9.2mmol)， 再搅拌反 应物 2 小时。在完成反应后， 在 100mL 水中终止反应， 并用二氯乙烷 (3×350mL) 萃取产物。 用饱和盐水溶液 (2×25mL) 清洗合并的有机层， 用无水硫酸钠干燥， 过滤除盐， 在真空中浓 缩以获得油状物质， 其用乙酸乙酯和己烷作为洗脱剂通过柱层析进一步纯化以获得 2.1 克 产物。
IR 谱 (cm-1) ： 1652， 1522， 1310， 1155 ； 1
H-NMR(δppm) ： 2.1(3H， s)， 3.52(1H， bs)， 6.34-6.37(1H， dd， J ＝ 8.56， 2.48Hz)， 6.70(1H， d， J ＝ 2.46Hz)， 6.90-6.92(1H， d， J ＝ 8.56Hz)， 7.25-7.39(3H， m)， 7.66-7.68(2H， m)， 941(1H， s) ；
质谱 (m/z) ： 325.7(M+H)+
步骤 (IV) ： 制备 N-(4- 氯 -3 氨基苯基 ) 苯磺酰胺
将步骤 (III) 中获得的 N-(4- 氯 -3- 乙酰胺基苯基 ) 苯磺酰胺 (4.5 克， 13.8mmol) 在搅拌下加入含有乙醇 (50mL) 的 100mL 三颈圆底烧瓶中。加入浓盐酸水溶液 (4.2mL， 30mmol) 并在回流 (75-80℃ ) 下加热反应物 5 小时。在真空下蒸馏掉乙醇， 并将所得物质 放入水 (100mL) 中终止反应， 并用三乙胺碱化。用乙酸乙酯 (4×100mL) 萃取产物。用饱和 盐水溶液 (2×25mL) 清洗合并的有机层， 用无水硫酸钠干燥， 过滤除盐， 在真空中浓缩以获 得油状物质， 其用乙酸乙酯和己烷 (1 ∶ 1 混合物 ) 通过柱层析进一步纯化以获得 3.1 克产 物。
IR 谱 (cm-1) ： 1603， 1520， 1325， 1151 ； 1
H-NMR(δppm) ： 3.96(2H， bs)， 6.35-6.38(1H， dd， J ＝ 8.56， 2.48Hz)， 6.62(1H， d， J ＝ 2.46Hz)， 6.86-6.88(1H， d， J ＝ 8.56Hz)， 7.25-7.39(3H， m)， 7.66-7.68(2H， m)， 9.41(1H， s) ；
质谱 (m/z) ： 283.7(M+H)+
制备 2 ： 制备 4- 甲氧基 -N- 甲基 -N-(1- 甲基哌啶 -4- 基 ) 苯 -1， 3- 二胺
步骤 (I) ： 制备 2- 甲氧基 -5- 硝基 -N-(1- 叔丁氧羰基哌啶 -4- 基 ) 苯胺
将 2- 甲氧基 -5- 硝基苯胺 (8.0 克， 47.61nmol) 加入圆底烧瓶中， 而后加入 1- 叔 丁氧羰基 -4- 哌啶酮 (28.42 克， 142.83mmol)、 硫酸钠 (67.6 克， 476mmol) 和醋酸 (80mL)。 在环境温度下搅拌上述反应物 8 小时。 然后在 20-25℃下， 在 5 分钟的时间内加入三乙酰氧 基硼氢化钠 (30.28 克， 142.83mmol)， 并再搅拌反应物 3 小时。将物质加入水 (100mL) 中终 止反应并用 50％氢氧化钠水溶液碱化到 pH 为 9。用乙酸乙酯 (4×50mL) 萃取产物。用盐 水 (100mL) 清洗合并的有机层， 用硫酸钠干燥并浓缩以获得油状产物。产物通过柱层析进 一步纯化以获得 24.01 克纯产物， 所用洗脱剂为乙酸乙酯、 正己烷和三乙基胺。 -1
IR 谱 (cm ) ： 3418， 2950， 1685， 1264， 1172 ； 1
H-NMR(δppm) ： 1 . 3 5 - 1 . 4 5 ( 2 H ，m ) ， 1 . 4 7 ( 9 H ，s ) ， 2 . 0 4 - 2 . 0 9 ( 2 H ，m ) ， 2.96-3.02(2H， m)， 3.50-3.52(1H， m)， 3.94(3H， s)， 4.06-4.11(2H， m)， 4.33-4.35(1H， d， J ＝ 7.76Hz)， 6.75-6.77(1H， d， J ＝ 8.8Hz)， 7.38-7.39(1H， d， J ＝ 2.64Hz)， 7.60-7.63(1H， dd， J ＝ 8.76， 2.64Hz) ；
质谱 (m/z) ： 352.2(M+H)+步骤 (II) ： 制备 2- 甲氧基 -5- 硝基 -N- 甲基 -N-(1- 叔丁氧羰基哌啶 -4- 基 ) 苯胺 将步骤 (I) 中获得的 2- 甲氧基 -5- 硝基 -N-(1- 叔丁氧羰基哌啶 -4- 基 ) 苯胺 (5 克， 14.24mmol) 放入含有甲醇 (10mL) 的圆底烧瓶中并在 25-30℃下搅拌 5 分钟。加入氰基 硼氢化钠 (1.06 克， 17.09mmol) 和甲酸 (1.96 克， 42.7mmol) 并搅拌反应物 10 分钟。 将白色 固体物质分离出来。然后在冰浴中将反应物冷却到 0-5℃并加入甲醛 (2.84mL， 28.4mmol， 30-50％ )。获得澄清溶液。在 20-25℃再搅拌反应物 6 小时。在反应完成 ( 薄层层析 ) 后， 将溶剂蒸馏以获得油状物质。加水 (100mL) 并用饱和碳酸氢钠溶液碱化到 pH 为 8。用乙酸 乙酯 (3×100mL) 萃取产物并分离层。用盐水溶液 (100mL) 清洗合并的有机层， 用无水硫酸 钠干燥。浓缩有机层以获得 5.86 克深黄色油。
IR 谱 (cm-1) ： 3425， 2959， 1680， 1176 ； 1
H-NMR( δ ppm) ： 1.45(9H ， s) ， 1.60-1.69(4H ， m) ， 2.66(2H ， m) ， 2.75(3H ， s) ， 3.34-3.37(1H， m)， 3.94(3H， s)， 4.14-4.19(2H， bs)， 6.88-6.90(1H， d， J ＝ 8.98Hz)， 7.79-7.80(1H， d， J ＝ 2.72Hz)， 7.90-7.93(1H， dd， J ＝ 8.95， 2.72Hz) ； +
质谱 (m/z) ： 366.5(M+H)
步骤 (III) ： 制备 2- 甲氧基 -5- 硝基 -N- 甲基 -N-( 哌啶 -4- 基 ) 苯胺
在 250mL 的三颈圆底烧瓶中加入步骤 (II) 中获得的 2- 甲氧基 -5- 硝基 -N- 甲 基 -N-(1- 叔丁氧羰基哌啶 -4- 基 ) 苯胺 (3 克， 8.21mmol)， 随后加入异丙醇 (20mL) 并搅 拌 10 分钟。将反应物加热到 40-45 ℃并搅拌 5 分钟以得到澄清溶液。在 10 分钟内在上 述反应物中逐滴加入异丙醇的盐酸 (20％ ) 溶液 (15.99mL， 65.75mmol)。继续加热反应物 至 60-63℃ 2 小时。分离出的固体被过滤并加入水 (20mL) 中， 用氨溶液碱化并用乙酸乙酯 (3×50mL) 萃取。 用盐水溶液 (20mL) 清洗合并的有机层， 用硫酸钠干燥， 减压除去溶剂以获 得 2.5 克标题产物。
IR 谱 (cm-1) ： 3410， 2956， 1650， 1174 ； 1
H-NMR(δppm) ： 1 . 6 5 - 1 . 7 2 ( 4 H ，m ) ， 2 . 5 5 - 2 . 6 1 ( 2 H ，m ) ， 2 . 7 8 ( 3 H ，s ) ， 3.14-3.17(2H， m) ， 3.31-3.34(1H， m)， 3.94(3H ， s) ， 6.87-6.89(1H ， d， J ＝ 8.96Hz) ， 7.79-7.80(1H， d， J ＝ 2.74Hz)， 7.88-7.91(1H， dd， J ＝ 8.98， 2.68Hz) ； +
质谱 (m/z) ： 266.1(M+H)
步骤 (IV) ： 制备 2- 甲氧基 -5- 硝基 -N- 甲基 -N-(1- 甲基哌啶 -4- 基 ) 苯胺
将步骤 (III) 中获得的 2- 甲氧基 -5- 硝基 -N- 甲基 -N-( 哌啶 -4- 基 ) 苯胺 (1.93 克， 7.33mmol) 加入 250mL 三颈圆底烧瓶中， 随后加入甲醇 (20mL) 并在 25-30℃下搅拌 5 分 钟。 加入氰基硼氢化钠 (0.548 克， 8.80mmol) 和甲酸 (1.08 克， 22.01mmol) 并搅拌反应物 10 分钟。 在冰浴中将反应物冷却到 0-5℃并用注射器加入甲醛 (1.46mL， 14.6mmol， 30-50％ )。 获得澄清溶液。在 20-25℃再搅拌反应物 6 小时。在反应完成 ( 薄层层析 ) 后， 减压蒸馏出 溶剂。向残留的油状物质中加水 (100mL) 并用饱和碳酸氢钠溶液碱化到 pH 为 8。用乙酸乙 酯 (3×100mL) 萃取产物。用盐水溶液 (100mL) 清洗合并的有机层， 用无水硫酸钠干燥。减 压除去溶剂以获得 1.96 克深黄色油状物质。
IR 谱 (cm-1) ： 2956， 1650， 1515， 1180 ； 1
H-NMR( δ ppm) ： 1.68-1.71(2H ，m) ， 1.86-1.92(2H ，m) ， 1.98-2.04(2H ，
m) ， 2.17(3H ，s) ， 2.78(3H ，s) ， 2.94-2.97(2H ，m) ， 3.25-3.28(1H ，m) ， 3.96(3H ，s) ， 6.87-6.91(1H， d， J ＝ 8.98Hz)， 7.80(1H， d， J ＝ 2.68Hz)， 7.88-7.92(1H， dd， J ＝ 8.96， 2.64Hz) ；
质谱 (m/z) ： 280.2(M+H)+
步骤 (V) ： 制备 4- 甲氧基 -N- 甲基 -N-(1- 甲基哌啶 -4- 基 ) 苯 -1， 3- 二胺
将铁粉 (1.99 克， 6.81mmol) 和 10mL 去矿物质水加入 250mL 的三颈圆底烧瓶中。 搅拌反应物 5 分钟并逐滴加入浓盐酸 (12mL)。反应放热。随后， 将反应物加热到 50℃并 通过滴液漏斗逐滴加入在步骤 (IV) 中获得的 2- 甲氧基 -5- 硝基 -N- 甲基 -N-(1- 甲基哌 啶 -4- 基 ) 苯胺 (1.9 克， 6.81mmol) 溶解在乙醇 (20mL) 中的溶液。在 78-80℃加热反应物 4 小时。 在反应完成 ( 薄层层析 ) 后， 减压完全蒸馏出乙醇以获得油状物质。 加入水 (50mL) 并用 50％氢氧化钠水溶液碱化到 pH 为 9。过滤无机物并用乙酸乙酯 (2×50mL) 清洗滤饼。 分离有机层并用无水硫酸钠干燥， 浓缩以获得 2.31 克的油状产物。 -1
IR 谱 (cm ) ： 3415， 2970， 1625， 1532， 1171 ； 1
H-NMR( δ ppm) ： 1.24-1.25(2H ，m) ， 1.68-1.81(2H ，m) ， 1.92-1.98(2H ，m) ， 2.26(3H， s)， 2.26-2.27(2H， m)， 2.68(3H， s)， 2.88-2.91(1H， m)， 3.77(3H， s)， 4.70(2H， bs)， 6.29-6.31(1H， dd， J ＝ 8.40， 2.53Hz)， 6.38(1H， d， J ＝ 2.72Hz)， 6.68-6.70(1H， d， J＝ 8.61Hz) ；
质谱 (m/z) ： 250.2(M+H)+
实施例 1 ： 制备 N-[4- 氯 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺
将在制备 1 中获得的 N-(4- 氯 -3- 氨基苯基 ) 苯磺酰胺 (1 克， 3.5mmol) 加入到 100mL 的三颈圆底烧瓶中， 随后加入 1- 甲基 -4- 哌啶酮 (0.81 克， 7.18mmol)、 硫酸钠 (3.49 克， 35mmol) 和醋酸 (20mL)。在室温 (30℃ ) 下搅拌反应物 8 小时， 而后在 20-25℃下， 在5 分钟内将三乙酰氧基硼氢化钠 (2.23 克， 10.5mmol) 加入反应物中。在室温下再搅拌反应 混合物 3 小时。将反应混合物加入 100mL 水中停止反应， 用 50％氢氧化钠水溶液碱化到 pH 为 9， 并用乙酸乙酯 (4×50mL) 萃取产物。用饱和盐水溶液 (2×50mL) 清洗合并的有机层， 用无水硫酸钠干燥并过滤除盐， 真空浓缩以获得油状物质。 其采用乙酸乙酯、 正己烷和三乙 基胺作为洗脱剂通过柱层析进一步纯化以获得 0.86g 标题产物。
IR 谱 (cm-1) ： 1603， 1324， 1148， 1092 ； 1
H-NMR( δ ppm) ： 1.44-1.53(2H ，m) ， 1.92-1.96(2H ，m) ， 2.10-2.16(2H ，m) ， 2.30(3H， s)， 2.76-2.79(2H， m)， 3.18-3.20(1H， m)， 4.18-4.20(1H， d)， 6.17-6.20(1H， dd， J ＝ 8.39， 2.44Hz)， 6.42-6.43(1H， d， J ＝ 2.40Hz)， 7.04-7.06(1H， d， J ＝ 8.39Hz)， 7.43-7.47(2H， m)， 7.53-7.57(1H， m)， 7.76-7.78(2H， m) ； +
质谱 (m/z) ： 380(M+H)
实施例 2-20
实施例 2-20 的化合物在进行一些非关键改变的情况下按照实施例 1 所述的步骤 制备。
实施例 21 ： 制备 N-[4- 氯 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺盐酸盐
将从实施例 1 中获得的产物 (0.86 克 ) 通过以下步骤转化成其盐酸盐。将获得的 碱放入乙醚 (25mL) 中并加入 1mL 10％盐酸异丙醇。在 25-30℃搅拌反应物 3 小时并过滤 盐酸盐以获得标题产物 (0.8 克 )。
IR 谱 (cm-1) ： 1605， 1326， 1152， 1095 ； 1
H-NMR( δ ppm) ： 1.46-1.50(2H ，m) ， 1.94-1.97(2H ，m) ， 2.12-2.15(2H ，m) ， 2.32(3H， s)， 2.75-2.78(2H， m)， 3.19-3.21(1H， m)， 4.15-4.17(1H， d)， 6.19-6.21(1H， dd， J ＝ 8.39， 2.44Hz)， 6.44-6.45(1H， d， J ＝ 2.40Hz)， 7.08-7.10(1H， d， J ＝ 8.39Hz)， 7.44-7.48(2H， m)， 7.54-7.56(1H， m)， 7.78-7.80(2H， m) ； +
质谱 (m/z) ： 380(M+H)
实施例 22 ： 制备 4- 异丙基 -N-[4- 甲基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯 磺酰胺盐酸盐
在进行一些非关键改变的情况下采用与实施例 1 中所述相似的步骤制备 4- 异丙 基 -N-[4- 甲基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺盐酸盐。将如此获得的碱放 入乙醚 (25mL) 中并加入 1mL 10％盐酸异丙醇。在 25-30℃下搅拌反应物 3 小时并过滤盐 酸盐以获得标题产物 (0.78 克 )。
IR 谱 (cm-1) ： 1592， 1528， 1166， 1156 ； 1
H-NMR(δppm) ： 1.22-1.24(6H， d， J ＝ 6.92Hz)， 1.43-1.48(2H， m)， 1.95-1.97(2H，
m)， 2.02(3H， s)， 2.10-2.15(2H， m)， 2.30(3H， s)， 2.77-2.79(2H， m)， 2.91-2.94(1H， 七 重 峰， J ＝ 6.92Hz)， 3.20(1H， m)， 3.40(1H， bs)， 6.20-6.23(1H， dd， J ＝ 8.40， 2.40Hz)， 6.36-6.37(1H， d， J ＝ 2.40Hz)， 6.85-6.87(1H， d， J ＝ 8.40Hz)， 7.26-7.28(2H， m)， 7.67-7.70(2H， m) ；
质谱 (m/z) ： 402.3(M+H)+
实施例 23 ： 制备 2- 溴 -N-{4- 甲氧基 -3-[N- 甲基 -N-(1- 甲基哌啶 -4- 基 ) 氨基 ] 苯基 } 苯磺酰胺
将在制备 2 中获得的 4- 甲氧基 -N- 甲基 -N-(1- 甲基哌啶 -4- 基 ) 苯 -1， 3- 二胺 (2 克， 8.03mmol) 溶解在 100mL 烧瓶中的二氯甲烷 (25mL) 中。在该烧瓶中加入吡啶 (1.29mL， 16.06mmol) 并在氮气氛下搅拌反应物 30 分钟。在 25-30℃下通过滴液漏斗逐滴加入 2- 溴 苯磺酰氯 (2.45 克， 9.63mmol) 的二氯甲烷 (10mL) 溶液。再搅拌反应物 4 小时。加入水 (80mL) 并用二氯甲烷 (3×60mL) 萃取产物。干燥合并的有机层， 减压除去溶剂以获得油状 物质。随后， 将其以乙酸乙酯和己烷作洗脱剂通过柱层析纯化以获得标题产物 (1.65 克 )。
熔化范围 ： 119.2-121.3℃ ； -1
IR 谱 (cm ) ： 2951， 1503， 1330， 1235， 1164 ； 1
H-NMR( δ ppm) ： 1.46-1.49(2H ，m) ， 1.64-1.71(2H ，m) ， 1.83-1.89(2H ，m) ， 2.24(3H， s)， 2.54(3H， s)， 2.83-2.86(2H， m)， 3.08(1H， m)， 3.76(3H， s)， 6.64-6.68(2H， m)， 6.75-6.78(1H， dd， J ＝ 8.60， 2.53Hz)， 7.28-7.36(2H， m)， 7.70-7.72(1H， dd， J ＝ 7.6， 1.6Hz)， 7.89-7.99(1H， dd， J ＝ 7.42， 2.08Hz) ；
质谱 (m/z) ： 468.2， 470.2(M+H)+
实施例 24-27
本领域技术人员可以按照上述步骤制备实施例 24-47 的化合物。
24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 N-[4- 溴 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 N-[4- 乙氧基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 N-[4- 三氟甲基 -3-( 哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 4- 氟 -N-[4- 氟 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 4- 氟 -N-[4- 甲氧基 -3-( 哌啶 -1- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 4- 甲基 -N-[4- 溴 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 4- 甲基 -N-[4- 乙氧基 -3-( 哌啶 -1- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 4- 异丙基 -N-[4- 三氟甲氧基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 4- 异丙基 -N-[4- 氯 -3-( 哌啶 -1- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 2- 溴 -N-[4- 氯 -3-( 哌啶 -1- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺28102159564 A CN 10215957034 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47说明书24/32 页4- 溴 -N-[3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 4- 溴 -N-[4- 氯 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 4- 甲氧基 -N-[4- 溴 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 4- 甲氧基 -N-[4- 三氟甲基 -3-( 哌啶 -1- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 2， 4- 二氯 -N-[4- 甲氧基 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 2， 4- 二氯 -N-[4- 溴 -3-( 哌啶 -1- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 4- 三氟甲氧基 -N-[4- 氯 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 4- 氯 -N-[4- 氯 -3-( 哌啶 -1- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 2- 氯 -N-[4- 氯 -3-(1- 甲基哌啶 -4- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 2- 甲氧基 -N-[4- 三氟甲基 -3-( 哌啶 -1- 基氨基 ) 苯基 ] 苯磺酰胺 4- 甲基 -N-[4- 氯 -3-[N- 甲基 -N-(4- 甲基哌啶 -1- 基 ) 氨基 ] 苯基 ] 苯磺酰胺 4- 甲基 -N-[4- 甲氧基 -3-[N- 甲基 -N-(4- 甲基哌啶 -1- 基 ) 氨基 ] 苯基 ] 苯磺酰胺 4- 甲基 -N-[4- 氟 -3-[N- 甲基 -N-( 哌啶 -1- 基 ) 氨基 ] 苯基 ] 苯磺酰胺 4- 甲基 -N-[4- 三氟甲基 -3-[N- 甲基 -N-( 哌啶 -1- 基 ) 氨基 ] 苯基 ] 苯磺酰胺
实施例 1 的化合物 乳糖 结晶纤维素 K 90 聚维酮 预凝胶化淀粉 胶体二氧化硅 硬脂酸镁 每片总重
5mg 60mg 25mg 5mg 3mg 1mg 1mg 100mg实施例 48 ： 含有式 (I) 化合物的片剂合并各组分并用如甲醇的溶剂颗粒化。 然后干燥制剂并用适合的压片机形成片剂 ( 含有约 20mg 活性化合物 )。实施例 49 ： 口服施用的组合物重量 / 重量％ 20.0％ 79.5％ 0.5％将各组分合并并分配入胶囊中， 每粒胶囊含有约 100mg， 一粒胶囊约为 1 天的全部 实施例 50 ： 液体口服制剂组分 活性组分 富马酸 氯化钠 羟苯甲酯 羟苯丙酯 糖颗粒 山梨醇 (70％溶液 ) Veegum K(Vanderbilt Co.) 调味剂 着色剂 蒸馏水 量 1.0g 0.5g 2.0g 0.15g 0.05g 25.5g 12.85g 1.0g 0.035g 0.5g 补至 100mL剂量。
将各组分混合以形成用于口服施用的混悬液。 实施例 51 ： 肠胃外制剂组分 活性组分 重量 / 重量％ 0.25g30102159564 A CN 102159570 氯化钠 注射用水
说明书适量， 使等渗 100mL26/32 页使活性组分溶于一部分注射用水中。然后， 伴随搅拌加入足够量的氯化钠以形成 等渗溶液。用余下的注射用水补足至溶液的重量， 通过 0.2 微米的膜过滤器过滤并在无菌 条件下包装。
实施例 52 ： 栓剂制剂
组分 活性组分 聚乙二醇 1000 聚乙二醇 4000 重量 / 重量％ 1.0％ 74.5％ 24.5％
在蒸汽浴上使各组分熔化并混合， 倒入模具中， 其中含有的总重为 2.5 克。 实施例 53 ： 局部制剂组分 活性组分 Span 60 Tween 60 矿物油 矿脂 羟苯甲酯 羟苯丙酯 BHA( 丁基羟基茴香醚 ) 水 gm 0.2-2g 2g 2g 5g 10g 0.15g 0.05g 0.01g 100mL将除水外的所有组分合并并加热至约 60℃， 伴随搅拌。然后在约 60℃下加入足够 量的水， 伴随剧烈搅拌以乳化组分， 而后加水补足至约 100 克。
实施例 54 ： 人 5-HT6 受体的结合测定
按照以下步骤检测化合物。
材料和方法 ：
受体来源 ： 在 HEK293 细胞中表达的人重组体
放射性配体 ： [3H]LSD(60-80Ci/mmol)
最终配体浓度 ： -[1.5nM]
非特异性决定簇 ： 美赛西平甲磺酸 -[0.1μM]
参照化合物 ： 美赛西平甲磺酸
阳性对照 ： 美赛西平甲磺酸
孵育条件 ：
在 37℃下在含有 10μM MgCl2、 0.5mM EDTA 的 50μM TRIS-HCl(pH 7.4) 中进行反 应 60 分钟。通过在玻璃纤维过滤器上的快速真空过滤终止反应。确定过滤器上捕获的放 射活性并与对照值比较， 以确定检测化合物与克隆的血清素 5-HT6 结合位点的任何相互作 用。
实施例编号 2. 3. 5. 6. 8. 10. 11. 13. 14. 15. 17. 18.
10nM 时抑制％ 20.71 71.95 8.56 100nM 时抑制％ 69.45 78.66 93.8 90.83 99.38 88.26 64.11 34.95 45.25 99.44 64.27 63.42 1000nM 时抑制％ 96.73 98.42 101.6 99.64 100.63 99.2 94.73 71.2 80.78 104.28 93.00 92.37参考文献 ： Monsma F.J.Jr. 等， Molecular Cloning and Expression of Novel Serotonin Receptor with High Affinity for Tricyclic Psychotropic Drugs.Mo1. Pharmacol.1993， 43， 320-327
实施例 55 ： 环 AMP 5-HT6 功能测定
化合物对人 5-HT6 受体的拮抗特性通过测定其在稳定转染的 HEK293 细胞中对 cAMP 积累的作用来确定。激动剂与人 5-HT6 受体的结合会导致腺苷酸环化酶活性的增强。作为激动剂的化合物会显示 cAMP 生成的增加， 作为拮抗剂的化合物会阻止激动剂的作用。
在 HEK293 细胞中将人 5-HT6 受体克隆并稳定表达。 将这些细胞铺在 6 孔板的含有 10％胎牛血清 (FCS) 和 500μg/mL G418 的 DMEM/F12 培养基中， 并在 CO2 培养箱中在 37℃ 下孵育。在试验开始之前使细胞生长至约 70％的汇合度。在试验当天， 除去培养基并用无 血清培养基 (SFM) 清洗细胞一次。加入 2mL SFM+IBMX 培养基， 并在 37℃下孵育 10 分钟。 去除培养基， 并在恰当的孔中加入含有各种化合物和 1μM 血清素 ( 作为拮抗剂 ) 的新鲜 SFM+IBMX 培养基， 孵育 30 分钟。在孵育后， 去除培养基， 用 1mL 的 PBS( 磷酸盐缓冲盐水 ) 清洗细胞 1 次。用 1mL 冷的 95％乙醇和 5μM EDTA(2 ∶ 1) 在 4℃下处理每个孔 1 小时。然 后破碎细胞并转移到 Eppendorf 管中。在 4℃下将管离心 5 分钟， 并将上清液贮存在 4℃下 以待测定。
用 Amersham Biotrak cAMP EIA 试剂盒 (Amersham RPN 225) 通过 EIA( 酶联免疫 测定 ) 确定 cAMP 含量。所用的步骤如试剂盒中所述。简单而言， cAMP 通过未标记的 cAMP 与固定量的过氧化物酶标记 cAMP 之间竞争在抗 cAMP 抗体上的结合位点来确定。该抗体固 定在用二抗预包被的聚苯乙烯微滴定孔中。 反应开始时， 向用抗血清 (100mL) 在 4℃预孵育 2 小时的样本 (100μL) 中加入 50μL 过氧化物酶标记的 cAMP。在 4℃孵育 1 小时后， 通过 简单的清洗步骤分离未结合的配体。 而后加入酶底物三甲基联苯胺 (1) 并在室温孵育 60 分 钟。 通过添加 100mL 1.0M 硫酸停止反应， 并在 30 分钟内通过微滴定板分光光度计在 450nm 处测定得到的颜色。 在功能性腺苷酸环化酶测定中， 发现本发明的一些化合物相对许多其他受体 ( 包 括其他血清素受体如 5-HT1A 和 5-HT7) 为具有较好选择性的竞争性拮抗剂。
实施例 56 ： 啮齿类动物药物动力学研究
用从 NIN(National Institute of Nutrition， Hyderabad， India) 获得的雄性 wistar 大鼠 (230-280 克 ) 作为试验动物。
每个笼中饲养 3 至 5 只动物。在夜间将动物拴牢并维持 12 小时的明 / 暗循环。在 第 0 天和第 2 天， 对 3 只大鼠口服和静脉内施用 NCE(10mg/Kg)。
在每个时间点通过颈静脉收集血液。在 -20℃冻存血浆以备分析。用 LC-MS/MS 方 法确定血浆中 NCE 化合物的浓度。
排定的时间点 ： 给药前、 给药后 0.25、 0.5、 1、 1.5、 2、 3、 4、 6、 8、 10、 12 和 24 小时 (n ＝ 3)。采用固相萃取技术通过经验证的 LC-MS/MS 法定量血浆中的 NCE 化合物。在校准范 围 2-2000ng/mL 内定量血浆中的 NCE 化合物。采用批内的校准样本和批间的质量控制样本 分析所研究的样本。
采用软件 WinNonlin 5.1 版通过无间隔模型计算药物动力学参数 Cmax、 Tmax、 AUCt、 AUCinf、 半衰期、 分布体积、 清除率、 平均存留时间和由此的口服利用度。
实施例 57 ： 啮齿类动物脑穿刺试验
用从 NIN(National Institute of Nutrition， Hyderabad， India) 获得的雄性 wistar 大鼠 (230-280 克 ) 作为试验动物。每个笼中饲养 3 只动物。在整个试验中动物可 自由获取水和食物， 并保持 12 小时的明 / 暗循环。
脑穿刺在大鼠的稳态下测定。在给药的前一天， 用氟烷麻醉雄性 wistar 大鼠 (225-250 克 ) 以手术放置颈和股静脉导管。在手术后， 在单独的与输液组件 (Instech Solomon ； Plymouth Meeting， PA.USA) 相连的大鼠输液笼中饲养大鼠， 并使其自由获取食物 和水。
将 NCE 化合物溶解在水中， 在 6-10 小时内以 1.0mg 游离碱 /kg/ 小时的目标给药 速率， 以固定的输液速率 (5mL/kg/ 小时 ) 施用。在输液的靠后时间中取出血液样本以确定 稳态血液浓度， 收集脑和血并评估。 处死动物以收集血浆和脑组织并匀浆。 在 -20℃冻存血 浆和脑以备分析。用 LC-MS/MS 法确定血浆和脑中 NCE 化合物的浓度。
使用固相萃取技术通过经验证的 LC-MS/MS 法定量血浆和脑匀浆物中的 NCE 化合 物。在校准范围 1-500ng/mL 内定量血浆和脑匀浆物中的 NCE 化合物。采用批内的校准样 本和批间的质量控制样本分析所研究的样本。计算脑 - 血含量的比值 (Cb/Cp)。
实施例 58 ： 对神经递质的可能调节的啮齿类动物脑微量渗析研究
用从 N.I.N.(National Institute of Nutrition， Hyderabad， India) 获得的雄性 wistar 大鼠 (230-280 克 ) 作为试验动物。
组分配， 组1 ： 载体 ( 水， 5mL/kg ； 口服 )， 组2 ： NCE(3mg/kg ； 口服 )， 组3 ： NCE(10mg/ kg ； 口服 )
手术过程 ： 用 水 合 氯 醛 麻 醉 大 鼠 并 放 置 在 立 体 定 位 架 上。 根 据 Paxinos 和 Watson(1986) 的图将引导套管 (CMA/12) 放置在相对于 bregramsa AP ： -5.2mm， ML ： +5.0mm， 相对于脑表面 DV ： -3.8mm 处。在动物仍在麻醉状态时， 将微量渗析探针 (CMA/12， 4mm， PC) 插入引导套管中并固定。在手术后在将动物进行研究前保持 48-72 小时的恢复期。
在 研 究 前 一 天 将 动 物 转 移 到 饲 养 笼 中 适 应， 并经植入的探针灌注调整的 Ringer 溶 液 过 夜， 速 率 为 通 过 微 输 液 泵 (PicoPlus， Harward) 设 定 的 0.2μL/ 分 钟， 该 调 整 的 Ringer 溶 液 含 1.3μM CaCl2(Sigramsa)， 1.0μM MgCl2 (Sigramsa)， 3.0μM KCl(Sigramsa)， 147.0μM NaCl(Sigramsa)， 1.0μMNa2HPO4·7H2O 和 0.2μM NaH2PO4·2H2O 以及 0.3μM neostigramsine bromide(Sigramsa)(pH 为 7.2)。在试验当天将输液速率改 为 1.2μL/ 分钟， 并稳定 3 小时。在稳定期后， 在给药前以 20 分钟间隔收集 4 个基样。用 CMA/170 冷冻级分收集器收集在玻璃管中的渗析液样本。
在收集 4 个级分后， 通过管饲法施用载体或 NCE(3mg/kg 或 10mg/kg)。 收集灌注液 直到施用后 6 小时。
通过 LC-MS/MS(API 4000， MDS SCIEX) 法测量渗析液样本中的乙酰胆碱浓度。在 校准范围 0.250 至 8.004ng/mL 中定量渗析液中的乙酰胆碱。
在完成微渗析试验后， 处死动物， 取出它们的脑并贮存在 10％的福尔马林溶液中。 在低温恒温器 (Leisa) 上将每个脑切成 50μ 的片， 染色并显微检测以确定探针位置。剔除 从探针位置不正确的动物中获得的数据。
微渗析数据表示为对基线的变化百分比 ( 平均值 ± 标准差 )， 基线定义为给药前 4 个样本的平均绝对值 (fM/10μL)。
通过单向 ANOVA， 随后用 Dunnett 多重比较检测统计评估 NCE(3 和 10mg/kg) 和载 体处理的作用。在所有统计测定中， 认为 p ＜ 0.05 具有显著性。用 Graph Pad Prism 程序 统计评估数据。
实施例 59 ： 食物摄取测定
用从 N.I.N.(National Institute of Nutrition， Hyderabad， India) 获得的雄性 wistar 大鼠 (120-140 克 ) 作为试验动物。然后按照以下步骤测定通式 (I) 的化合物对良 好喂养的大鼠的食物摄取的长期作用。
将大鼠在单个饲养笼中饲养 28 天。在此期间， 每天 1 次通过口服或腹腔注射向大 鼠施用含有式 (I) 的化合物的组合物或无所述化合物的对应组合物 ( 载体 )( 对照组 )， 大 鼠自由获取食物和水。
在第 0、 1、 7、 14、 21 和 28 天向大鼠提供预先称重的食物。例行测量食物摄取和 重量增加。在文献 (Kask 等， European Journal of Pharmacology， 414， 2001， 215-224 和 Turnball 等， Diabetes， 2002， 51， 2441-2449， 以及一些内部修改 ) 中也公开了食物消化法。 该描述的对应部分通过引用并入本文， 它们构成本公开内容的一部分。
当在以 10mg/Kg 或 30mg/Kg 或两者的剂量下以上述方式进行时， 一些代表性化合 物显示出食物摄取的统计显著降低。
实施例 60 ： 物体识别任务模型采用动物认知模型 ( 物体识别任务模型 ) 评估本发明化合物的认知增高特性。
用从 N.I.N.(National Institute of Nutrition， Hyderabad， India) 获得的雄 性 wistar 大鼠 (230-280 克 ) 作为试验动物。每个笼中饲养 4 只动物。在 1 天前将动物以 20％的食物减少饲养， 在整个试验的过程中水可自由获取， 并维持 12 小时的明 / 暗循环。 并 且将大鼠在无任何物体的单独的试验场中习惯 1 小时。
在熟悉 (T1) 和选择试验 (T2) 前 1 小时， 12 只大鼠的一组口服施用载体 (1mL/Kg)， 另一组动物口服或腹腔注射施用式 (I) 的化合物。
在由丙烯酸类制成的 50×50×50cm 开放场地中进行试验。在熟悉阶段 (T1)， 将 大鼠单独地放在开放场地 3 分钟， 其中在两个相邻的角落， 距墙 10cm， 放置只以黄色遮蔽胶 带覆盖的两个相同物体 ( 塑料瓶， 高 12.5cm× 直径 5.5cm)(a1 和 a2)。在长期记忆试验的 (T1) 试验 24 小时后， 将相同的小鼠放置在 T1 试验中所用的试验场。在选择阶段 (T2)， 使 大鼠观察开放空间 3 分钟， 其中放置一个熟悉物体 (a3) 和一个新物体 (b)( 琥珀色玻璃瓶， 高 12cm， 直径为 5cm)。熟悉的物体具有相似的质地、 颜色和大小。在 T1 和 T2 试验期间， 用 秒表分别记录对每个物体的观察 ( 定义为嗅、 舔、 咀嚼或移动触须同时在少于 1cm 的距离内 将鼻子朝向物体 ) 时间。不认为蹲坐在物体上是观察行为， 然而很少观察到该现象。
T1 是对熟悉物体 (a1+a2) 观察的总时间。
T2 是对熟悉物体和新物体 (a3+b) 观察的总时间。
按照 Ennaceur， A.， Delacour， J.， A new one-trial test for neurobiological studies of memory in rats-Behavioural data， Behav.Brain Res.， 1988， 31， 47-59 所述 进行物体识别检测。
一些有代表性的化合物显示出有利作用， 表现出提高的新物体识别能力， 即对新 物体的提高的观察时间以及较高鉴别指数。
实施例 61 ： 水迷宫
水迷宫设施由黑色有机玻璃 (TSE systems， Germany) 构建的圆形池 ( 直径 1.8m， 高 0.6m) 组成， 其中充满水 (24±2℃ ) 并在底部放置广角摄像机以跟踪动物。将在水表面 2 下 1cm 的 10cm 的有机玻璃平台放置在四个假想象限中的一个的中央， 并对所有大鼠维持 不动。用于构建迷宫和平台的黑色有机玻璃不对逃脱行为提供迷宫内指导提示。而训练室 提供了几个迷宫外强视觉提示， 以帮助学习逃脱必需的空间地图的形成。采用自动跟踪系 统 (Videomot 2(5.51)， TSE systems， Germany)。该程序分析经数字摄像机获取的录像以 及图像获取板来确定路径长度、 游泳速度和入口数量以及在水迷宫的每个象限所用的游泳
时间。
实施例编号 6. 8. 15.
莨若胺诱导的反转 ≤ 3mg/kg， 口服 ≤ 3mg/kg， 口服 ≤ 3mg/kg， 口服实施例 62 ： 由 5-HT6 拮抗剂诱导的咀嚼 / 打哈欠 / 伸展
使用重 200-250 克的雄性 Wister 大鼠。在试验前 2 天， 每天对大鼠注射施用载 体并将其单独放置在透明箱内 1 小时， 以使它们适应观察箱和试验程序。在试验当天， 在 施用药物后将大鼠立即放置在观察箱中， 并在注射药物或载体后的 60 至 90 分钟持续观 察打哈欠、 伸展及咀嚼行为。在前给药 60 分钟， 对所有动物腹腔注射施用 0.1mg/kg 的 Physostigramsine。记录在 30 分钟的观察时间内打哈欠、 伸展和无意义咀嚼动作的平均次 数。 参考文献 ： (A)King M.V.， Sleight A.， J.， Woolley M.L. 等， Neuropharmacology， 2004， 47， 195-204.(B)Bentey J.C， Bourson A.， Boess F.G.， Fone K.C.F.， Marsden C.A.， Petit N.， Sleight A.J.， British Journal of Pharmacology， 1999， 126(7)， 1537-1542)。
实施例 63 ： 被动回避
将动物在单次试验、 一步完成的明 - 暗被动回避模型中训练。训练设施由长 300mm， 宽 260mm， 高 270mm 的房间构成， 其按照成型设计构建。前部和顶部是透明的， 使实 验者能够观察动物在设施内的行为。 将房间划分为两个室， 由中央的遮板分隔， 该遮板上有 50mm 宽、 75mm 高靠近房间前部的小开口。较小的室宽 9mm， 具有低电力 (6V) 照明源。较大 的室宽 210mm 并且无照明。暗室的地板由 16 根水平不锈钢棒的网格组成， 所述棒的直径为 5mm， 间隔 12.5mm。发电机对网格地板供应 0.75mA 的电， 其每 0.5 秒穿过 16 个棒一次。对 对照组的大鼠计算所得的电阻范围是 40-60 微欧姆， 将设施按此进行校准。测量动物电阻 的电子电路保证通过电阻变化的电压的自动变化传递精确的电流。
试验过程 ： 这按照前述进行。采用重 200-230 克的雄性成体 Wister 大鼠。在实验 前 1 小时将动物放入实验室。在训练日， 将动物放置在面朝设施的明室后部。一旦动物全 部转向面朝房间的前部就开始计时。记录进入暗室的等待时间 ( 通常＜ 20 秒 )， 对完全进 入暗室的动物施加 3 秒无法避免的 0.75mA 的足部电击。然后将动物返回到它们的饲养笼。 在每个训练之间， 清理房间的两个室以消除任何混淆性嗅觉提示。在训练后 24 小时， 72 小 时和第 7 天通过将动物送回明室并记录它们进入暗室的时间来评估对抑制性刺激的回忆， 采用 300 秒为标准时间。
参考文献 ： (A)Callahan P.M.， Rowe N.B.， Tehim A.， Abst.776.19.2004， Society for neuroscience， 2004.(B)Fox G.B.， Connell A.W.U.， Murphy K.J.， Regan C.M.， Journal of Neurochemistry， 1995， 65， 6， 2796-2799。
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