1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯 并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲的固体形式 相关申请 本申请要求 2007 年 12 月 7 日提交的美国临时专利申请系列号 61/012,355 的优先权。 技术领域
本申请涉及 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲的固体形式及其使用方法。背景技术
长期以来人们已经认识到了抗生素的细菌耐药性， 现在认为这是世界范围内严重 的健康问题。由于耐药性， 一些细菌感染难以用抗生素治疗或者甚至无法治疗。这一问题 随着近年来在某些细菌株例如肺炎链球菌 (SP)、 金黄色葡萄球菌、 结核分枝杆菌和肠球菌 中多重耐药性的发展而变得特别严重。 随着抗生素的细菌耐药性已经变成了重要的公共健 康问题， 人们持续需要开发出更新和更有效的抗生素。 更具体地， 所需要的抗生素代表了以 前没有用于治疗细菌感染的新一类的化合物。
1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲 ( 化合物 1) 具有如下结构 ：
已经证明， 其具有治疗细菌感染的效力， 包括对一种或多种现有抗生素耐受 的 那 些 细 菌。 在 2005 年 2 月 15 日 公 开 的 US2005/0038247， 2006 年 6 月 8 日 公 开 的 US2006/0122196 和 2006 年 3 月 2 日公开的 WO2006/022773 中描述了化合物 1， 将它们以整 体通过参考引入本文。
发明内容
本发明描述了化合物 1 的固体形式。与其作为药物的效力有关的固体性质取决于 该固体的形式。 例如， 在药物中， 固体形式的变化会导致例如溶解速率、 口服吸收、 生物利用度、 毒理学结果甚至临床试验结果等性质的不同。在一些实施方案中， 化合物 1 的固体形式 是共存在 - 形式 (co-forms) 的， 例如是化合物 1 的盐、 溶剂化物、 共结晶和水合物。
本文也包括化合物 1 的同位素标记形式， 其中一个或多个原子被具有与天然发现 的通常的原子质量或质量数不同的原子质量或质量数的原子替代。 可以并入到本发明化合 3 13 14 15 18 物中的同位素的例子包括氢、 碳、 氮、 氧、 磷、 硫、 氟和氯的同位素， 例如 2H、 H、 C、 C、 N、 O 17 和 O。这些放射性标记和稳定同位素标记的化合物是有用的， 例如用作研究或诊断工具， 或者作为治疗性质改善的回旋酶抑制剂。
在一个方面， 本发明的特征是结晶 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲。
在 一 个 实 施 方 案 中，本 发 明 的 特 征 是 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲， 其特征在于， X- 射线粉末衍射 图中在 2θ 度具有一个或多个下列峰 ： 约 6.2- 约 6.6( 例如， 约 6.4)， 约 9.1- 约 9.5( 例如， 约 9.3)， 约 12.6- 约 13.0( 例如， 约 12.8)， 约 13.9- 约 14.3( 例如， 约 14.1)， 约 15.2- 约 15.6( 例如， 约 15.4)， 约 19.6- 约 20.0( 例如， 约 19.8)， 约 20.2- 约 20.6( 例如， 约 20.4)， 约 20.5- 约 20.9( 例如， 约 20.7)， 约 21.9- 约 22.3( 例如， 约 22.1)， 约 24.0- 约 24.4( 例 如， 约 24.2)， 约 26.7- 约 27.1( 例如， 约 26.9) 或约 27.5- 约 27.9( 例如， 约 27.7)。在一 个实施方案中， 该结晶 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲的特征在于， 其 X- 射线粉末衍射图基本上类似于图 2。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲的特征在于， 如在 DSC 中所测定， Tm 为约 270℃。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲的特征在于， 如用 DVS 所测定， 在 25℃下相对湿度 从 5％变为 95％时， 增重为 8％。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲在 pH 1 下溶解度为至少 2mg/ml。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲在 40℃ /75％相对湿度下保持基本上相同的物理 形式至少约 0.5， 2， 4， 6 个月。在另一个实施方案中， 期望该结晶 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲在室温下保持基本上相同的物 理形式至少约 0.5， 2， 4， 6， 12， 18， 24 个月。
本文使用的术语 “室温” 是指保持为恒温的一个温度， 包括 19℃～ 25℃的通常性 和习惯性的操作环境， 使得平均动力学温度计算为不超过 25℃， 并允许约 15℃～约 30℃的 偏差。室温的例子包括 22℃ +/-3℃， 允许约 15℃～约 30℃的偏差。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲在 40 ℃ /75 ％相对湿度下保持化学稳定形式 至少约 0.5， 2， 4 或 6 个月。在另一个实施方案中， 期望该结晶 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲在室温下保持化学稳定形式至 少约 0.5， 2， 4， 6， 12， 18， 24 个月。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲的特征在于， 在 ss13C-NMR 图中具有一个或多个 下列峰 ： 约 162.3， 约 158.8， 约 157.0， 约 149.5， 约 142.0， 约 137.5， 约 136.0， 约 131.8， 约 125.9， 约 119.3， 约 114.7， 约 35.9 或 约 16.3。 在 一 个 实 施 方 案 中， 该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲的特征在于， 其 ss13C-NMR 图基本上类似于图 6。
在 一 个 方 面， 本 发 明 的 特 征 是 一 种 制 备 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲的方法， 该方法包括从水溶液 中沉淀 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲。
在 一 个 方 面， 本 发 明 的 特 征 是 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单乙磺酸盐。
在 一 个 实 施 方 案 中，本 发 明 的 特 征 是 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单乙磺酸盐。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲· 单乙磺酸盐在 pH 1.6 下水溶性大于 150mg/ml。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲· 单乙磺酸盐的特征在于， X- 射线粉末衍射图 中在 2θ 度具有一个或多个下列峰 ： 约 6.3- 约 6.7( 例如， 约 6.5)， 约 7.0- 约 7.4( 例如， 约 7.2)， 约 12.4- 约 12.8( 例如， 约 12.6)， 约 14.2- 约 14.6( 例如， 约 14.4)， 约 15.4- 约 15.8( 例如， 约 15.6)， 约 18.4- 约 18.8( 例如， 约 18.6)， 约 19.4- 约 19.8( 例如， 约 19.6)， 约 21.5- 约 21.9( 例如， 约 21.7)， 约 22.4- 约 22.8( 例如， 约 22.6， 约 25.2- 约 25.6( 例如， 约 25.4) 或约 26.9- 约 27.3( 例如， 约 27.1)。 在一个实施方案中， 该结晶 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟 吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单乙磺酸盐的特征在于， 其 X- 射线粉末衍射图基本上类似于图 7。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单乙磺酸盐的特征在于， 如通过 DSC 所测定， Tm 为约 216℃。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单乙磺酸盐的特征在于， 在 25℃下相对湿度从 5％变为 95％时， 增重为 11％。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲· 单乙磺酸盐的特征在于， X- 射线粉末衍射图中在 2θ 度具有一个或多个下列峰 ： 约 6.0- 约 6.4( 例如， 约 6.2)， 约 7.2- 约 7.6( 例如， 约 7.4)， 约 7.9- 约 8.3( 例如， 约 8.1)， 约 12.2- 约 12.6( 例如， 约 12.4)， 约 13.0- 约 13.4( 例如， 约 13.2)， 约 14.3- 约 14.7( 例如， 约 14.5)， 约 16.1- 约 16.5( 例如， 约 16.3)， 约 16.9- 约 17.3( 例如， 约 17.1)， 约 17.6- 约 18.0( 例如， 约 17.8)， 约 18.4- 约 18.8( 例如， 约 18.6)， 约 19.6- 约 20.0( 例如， 约 19.8)， 约 20.8- 约 21.2( 例如， 约 21.0)， 约 21.3- 约 21.7( 例如， 约 21.5)， 约 22.7- 约 23.1( 例如， 约 22.9)， 约 24.8- 约 25.2( 例如， 约 25.0)， 约 25.8- 约 26.2( 例如， 约 26.0)， 约 27.0- 约 27.4( 例如， 约 27.2) 或约 27.7- 约 28.1( 例如， 约 27.9)。在一个实施方案中， 该结晶 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单乙磺酸盐的特征在于， 其 X- 射线粉末衍射图基本上类似于图 11。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单乙磺酸盐的特征在于， 当通过 DSC 测定时， Tm 为 214℃～ 216℃。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲· 单乙磺酸盐在 40℃ /75％相对湿度下保持基本 上相同的物理形式至少约 2 周。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲· 单乙磺酸盐在 40℃ /75％相对湿度下保持化学 稳定至少约 2 周。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲· 单乙磺酸盐的特征在于， X- 射线粉末衍射图中在 2θ 度具有一个或多个下列峰 ： 约 8.0- 约 8.4( 例如， 约 8.2)， 约 9.4- 约 9.8( 例如， 约 9.6)， 约 10.1- 约 10.5( 例如， 约 10.3)， 约 12.2- 约 12.6( 例如， 约 12.4)， 约 16.3- 约 16.7( 例如， 约 16.5)， 约 18.2- 约 18.6( 例如， 约 18.4)， 约 20.2- 约 20.6( 例如， 约 20.4)， 约 22.0- 约 22.4( 例如， 约 22.2)， 约 24.6- 约 25.0( 例如， 约 24.8) 或约 25.8- 约 26.2( 例如， 约 26.0)。 在一个实施方案中， 该结晶 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单乙磺酸盐的特征在于， 其 X- 射线粉末衍射图基本上类似于图 13。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲· 单乙磺酸盐的特征在于， 如用 DSC 所测定， Tm 为 216℃～ 220℃。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单乙磺酸盐的特征在于， 在 25℃下相对湿度从 5％变为 95％时， 增重为约 4％。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲· 单乙磺酸盐在 40℃ /75％相对湿度下保持基本 上相同的物理形式至少约 6 个月。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲· 单乙磺酸盐的特征在于， 在 ss13C-NMR 图中 具有一个或多个下列峰 ： 约 161.7， 约 159.9， 约 157.9， 约 153.6， 约 146.5， 约 140.6， 约 133.8， 约 132.6， 约 130.0， 约 127.9， 约 125.8， 约 125.0， 约 122.8， 约 119.4， 约 117.8， 约 107.4， 约 39.5， 约 38.0 或约 15.8。在一个实施方案中， 该结晶 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单乙磺酸盐的特征在于， 其 13 ss C-NMR 图基本上类似于图 17。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲· 单乙磺酸盐的特征在于， X- 射线粉末衍射图 中在 2θ 度具有一个或多个下列峰 ： 约 7.8- 约 8.2( 例如， 约 8.0)， 约 9.1- 约 9.5( 例如， 约 9.3)， 约 11.1- 约 11.5( 例如， 约 11.3)， 约 13.0- 约 13.4( 例如， 约 13.2)， 约 15.9- 约16.3( 例如， 约 16.1)， 约 16.4- 约 16.8( 例如， 约 16.6)， 约 17.1- 约 17.5( 例如， 约 17.3)， 约 18.8- 约 19.2( 例如， 约 19.0)， 约 19.2- 约 19.6( 例如， 约 19.4)， 约 19.6- 约 20.0( 例如， 约 19.8)， 约 21.0- 约 21.4( 例如， 约 21.2)， 约 21.3- 约 21.7( 例如， 约 21.5)， 约 21.9- 约 22.3( 例如， 约 22.1)， 约 23.8- 约 24.2( 例如， 约 24.0) 或约 26.7- 约 27.1( 例如， 约 26.9)。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲· 单乙磺酸盐的特征在于， 其 X- 射线粉末衍射图 基本上类似于图 18。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲· 单乙磺酸盐的特征在于， 如用 DSC 所测定， Tm 为 205℃。
在 一 个 方 面， 本 发 明 的 特 征 是 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单甲磺酸盐。
在一个方面， 本发明的特征是结晶 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单甲磺酸盐。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单甲磺酸盐的特征在于， X- 射线粉末衍射图中 在 2θ 度具有一个或多个下列峰 ： 约 8.5- 约 8.9( 例如， 约 8.7)， 约 10.4- 约 10.8( 例如， 约 10.6)， 约 11.4- 约 11.8( 例如， 约 11.6)， 约 11.8- 约 12.2( 例如， 约 12.0)， 约 13.2- 约 13.6( 例如， 约 13.4)， 约 15.4- 约 15.8( 例如， 约 15.6)， 约 16.2- 约 16.6( 例如， 约 16.4)， 约 17.5- 约 17.9( 例如， 约 17.7)， 约 19.9- 约 20.3( 例如， 约 20.1)， 约 21.0- 约 21.4( 例如， 约 21.2)， 约 21.7- 约 22.1( 例如， 约 21.9)， 约 24.5- 约 24.9( 例如， 约 24.7)， 约 26.8- 约 27.2( 例如， 约 27.0)， 约 30.3- 约 30.7( 例如， 约 30.5)， 或约 32.8- 约 33.2( 例如， 约 33.0)。 在一个实施方案中， 该结晶 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单甲磺酸盐的特征在于， 其 X- 射线粉末衍射图基本上类似于图 21。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲· 单甲磺酸盐的特征在于， 如用 DSC 所测定， Tm 为 215℃。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单甲磺酸盐的特征在于， 在 25℃下相对湿度从 5％变为 95％时， 增重为 4.6％。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲· 单甲磺酸盐的特征在于， 在 pH 4.4 下水中溶解 度大于 12mg/ml。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲· 单甲磺酸盐在 40℃ /75％相对湿度下保持基本 上相同的物理形式至少 1 个月。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲· 单甲磺酸盐在 40℃ /75％相对湿度下保持化学 稳定至少 1 个月。在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单甲磺酸盐的特征在于， ss13C-NMR 图中在下列 ppm 处具有一个或多个下列峰 ： 约 161.7， 约 159.9， 约 157.9， 约 153.6， 约 146.5， 约 140.6， 约 133.8， 约 132.6， 约 130.0， 约 127.9， 约 125.8， 约 125.0， 约 122.8， 约 119.4， 约 117.8， 约 107.4， 约 39.5， 约 38.0 或约 15.8。在一个实施方案中， 该结晶 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单甲磺酸盐的特征在于， 其 13 ss C-NMR 图基本上类似于图 27。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单甲磺酸盐具有 P21/n 空间群。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单甲磺酸盐具有下列晶胞大小 ：
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单甲磺酸盐的特征在于， X- 射线粉末衍射图中 在 2θ 度具有一个或多个下列峰 ： 约 6.8- 约 7.2( 例如， 约 7.0) ； 约 13.1- 约 13.5( 例如， 约 13.3)， 约 13.9- 约 14.3( 例如， 约 14.1)， 约 14.5- 约 14.9( 例如， 约 14.7)， 约 16.3- 约 16.7( 例如， 约 16.5)， 约 18.3- 约 18.7( 例如， 约 18.5)， 约 19.3- 约 19.7( 例如， 约 19.5)， 约 20.6- 约 21.0( 例如， 约 20.8)， 约 21.0- 约 21.4( 例如， 约 21.2)， 约 22.9- 约 23.3( 例如， 约 23.1) 或约 23.4- 约 23.8( 例如， 约 23.6)。 在一个实施方案中， 该结晶 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟 吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲·单甲磺酸盐的特征在于， 其 X- 射线粉末衍射图基本上类似于图 28。
在 一 个 实 施 方 案 中，该 结 晶 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟 吡 啶 -3- 基 )-7-( 嘧 啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲· 单甲磺酸盐的特征在于， 当用 DSC 测定时， Tm 为 235℃。
在一个方面， 本发明的特征是一种组合物 ( 或药物组合物 )， 其中基本上所有的化 合物 1 都是本文所述的第一种形式， 例如， 通过评价本文所述的物理、 化学或生物学参数而 确定的例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型。
在一个方面， 本发明的特征是一种组合物 ( 或药物组合物 )， 包含化合物 1 的第一 种固体形式 ( 例如， 通过评价本文所述的物理、 化学或生物学参数而确定的例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 ) 和化合物 1 的第二种形式 ( 例如， 通过评价本文所述的物 理、 化学或生物学参数而确定的例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 )。在一些实 施方案中， 第一和第二种形式包含至少一个同质部分， 即富含这些型中的一种例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型的区域。在一些实施方案中， 第一和第二种形式在该组合物 内是不同质的。
在 一 个 方 面， 本 发 明 的 特 征 是 一 种 药 物 组 合 物， 包 含 本 文 所 述 的 1- 乙 基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲的固体形式 ( 例如， IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 ) 和药学可接受的赋形剂。在一些实施方案 中， 该组合物是水溶液。在一些实施方案中， 该组合物包含固体。在一些实施方案中， 该组 合物是口服混悬液。在一些实施方案中， 该组合物是固体口服剂型 ( 例如， 片剂或胶囊 )。
在一些实施方案中， 该组合物包含一种或多种其他治疗剂。 在一些实施方案中， 其 他治疗剂是抗生素、 抗炎剂、 基质金属蛋白酶抑制剂、 脂氧合酶抑制剂、 细胞因子拮抗剂、 免 疫抑制剂、 抗癌剂、 抗病毒剂、 细胞因子、 生长因子、 免疫调节剂、 前列腺素或抗血管过度增 殖化合物。
在一些实施方案中， 一种或几种其他治疗剂是抗生素， 选自天然青霉素、 耐青霉素 酶青霉素、 抗假单胞菌青霉素、 氨基青霉素、 第一代头孢菌素、 第二代头孢菌素、 第三代头孢 菌素、 第四代头孢菌素、 碳青霉烯、 头霉素、 单酰胺菌素、 喹诺酮、 氟喹诺酮、 氨基糖苷、 大环 内酯、 酮内酯、 四环素、 糖肽、 链阳性菌素、 噁唑烷二酮、 利福霉素、 磺胺甲噁唑或其他抗生 素。
在一些实施方案中， 一种或几种其他治疗剂是抗生素， 选自青霉素、 头孢菌素、 喹 诺酮、 氨基糖苷或噁唑烷二酮。 在其他实施方案中， 其他治疗剂选自天然青霉素， 包括苄星青霉素 G、 青霉素 G 和 青霉素 V ； 耐青霉素酶青霉素， 包括氯唑西林、 双氯西林、 萘夫西林和苯唑西林 ； 抗假单胞菌 青霉素， 包括羧苄西林、 美洛西林、 哌拉西林、 哌拉西林 / 他唑巴坦、 替卡西林和替卡西林 / 克拉维酸盐 ； 氨基青霉素， 包括阿莫西林、 氨苄西林和氨苄西林 / 舒巴坦 ； 第一代头孢菌素， 包括头孢唑啉、 头孢羟氨苄、 头孢氨苄和头孢噻啶 ； 第二代头孢菌素， 包括头孢克洛、 头孢 克洛 -CD、 头孢孟多、 头孢尼西、 头孢丙烯、 氯碳头孢和头孢呋辛 ； 第三代头孢菌素， 包括头 孢地尼、 头孢克肟、 头孢哌酮、 头孢噻肟、 头孢泊肟、 头孢他啶、 头孢布烯、 头孢唑肟和头孢曲 松； 第四代头孢菌素， 包括头孢吡肟、 Ceftaroline 和 Ceftobiprole ； 头霉素， 包括头孢替坦 和头孢西丁 ； 碳青霉烯， 包括亚胺培南和美罗培南 ； 单酰胺菌素， 包括氨曲南 ； 喹诺酮， 包括 西诺沙星、 萘啶酸、 奥索利酸和吡哌酸 ； 氟喹诺酮， 包括环丙沙星、 依诺沙星、 加替沙星、 格帕 沙星、 左氧氟沙星、 洛美沙星、 莫西沙星、 诺氟沙星、 氧氟沙星和司帕沙星 ； 氨基糖苷， 包括阿 米卡星、 庆大霉素、 卡那霉素、 新霉素、 奈替米星、 大观霉素、 链霉素和妥布霉素 ； 大环内酯， 包括阿奇霉素、 克拉霉素和红霉素 ； 酮内酯， 包括泰利霉素 ； 四环素， 包括金霉素、 地美环 素、 多西环素、 米诺环素和四环素 ； 糖肽， 包括奥利万星、 达巴万星、 替拉万星， 替考拉宁和万 噁唑烷二酮， 包括利奈唑胺 ； 利福霉素， 包 古霉素 ； 链阳性菌素， 包括达福普汀 / 奎奴普丁 ； 括利福布汀和利福平 ； 及其他抗生素， 包括杆菌肽、 替加环素、 达托霉素、 氯霉素、 克林霉素、 异烟肼、 甲硝唑、 多粘菌素 B、 吡嗪酰胺和甲氧苄啶 / 磺胺甲噁唑。
在其他实施方案中， 其他治疗剂选自天然青霉素， 包括青霉素 G ； 耐青霉素酶青霉 素， 包括萘夫西林和苯唑西林 ； 抗假单胞菌青霉素， 包括哌拉西林 / 他唑巴坦 ； 氨基青霉素， 包括阿莫西林 ； 第一代头孢菌素， 包括头孢氨苄 ； 第二代头孢菌素， 包括头孢克洛、 头孢克 洛 -CD 和头孢呋辛 ； 第三代头孢菌素， 包括头孢他啶和头孢曲松 ； 第四代头孢菌素， 包括头 孢吡肟 ； 氟喹诺酮， 包括环丙沙星、 加替沙星、 左氧氟沙星和莫西沙星 ； 氨基糖苷， 包括妥布 霉素 ； 大环内酯， 包括阿奇霉素和克拉霉素 ； 四环素， 包括多西环素 ； 糖肽， 包括万古霉素 ；
利福霉素， 包括利福平 ； 及其他抗生素， 包括异烟肼、 吡嗪酰胺、 替加环素、 达托霉素或甲氧 苄啶 / 磺胺甲噁唑。
在一些实施方案中， 化合物 1 的一种形式， 例如， IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 的固体形式是作为组合物施用的， 例如， 作为固体、 液体 ( 例如， 混悬液 ) 或注射液 ( 例 如， 化合物 1 的一种形式溶于液体， 而以静脉注射形式施用 )。在一些实施方案中， 该组合 物是与其他治疗剂例如抗生素 ( 如上文所述的抗生素 ) 一起施用的。其他治疗剂例如抗生 素 ( 如上文所述的抗生素 ) 可以作为组合物施用， 例如， 作为固体、 液体 ( 例如， 混悬液 ) 或 注射液 ( 例如， 化合物 1 的一种形式溶于液体， 而以静脉注射形式施用 )。其他治疗剂可以 在施用包含化合物 1 的组合物之前 ( 例如， 约 1 天， 约 12 小时， 约 8 小时， 约 6 小时， 约4小 时， 约 2 小时， 约 1 小时， 约 30 或约 15 分钟或更短 )， 施用期间或施用之后 ( 例如， 约 15 分 钟， 约 30 分钟， 约 1 小时， 约 2 小时， 约 4 小时， 约 6 小时， 约 8 小时， 约 12 小时或约 1 天或 更长 ) 施用。在一些实施方案中， 包含化合物 1 的组合物也包含其他治疗剂， 例如固体、 液 体 ( 例如， 混悬液 ) 或注射液 ( 例如， 化合物 1 的一种形式溶于液体， 而以静脉注射形式施 用 ) 组合物包含化合物 1 的一种形式， 例如， IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型， 和至 少一种其他治疗剂， 例如抗生素 ( 如上文所述的抗生素 )。
在一些实施方案中， 化合物 1 的固体形式， 例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型， 例如包含化合物 1 的固体形式的组合物， 可以施用以治疗革兰氏阳性感染。在一 些实施方案中， 该组合物是固体、 液体 ( 例如， 混悬液 ) 或注射液 ( 例如， 化合物 1 的一种形 式溶于液体， 而以静脉注射形式施用 ) 组合物。在一些实施方案中， 包含化合物 1 的组合物 与其他抗生素联合施用， 所述抗生素例如是天然青霉素、 耐青霉素酶青霉素、 抗假单胞菌青 霉素、 氨基青霉素、 第一代头孢菌素、 第二代头孢菌素、 第三代头孢菌素、 第四代头孢菌素、 碳青霉烯、 头霉素、 单酰胺菌素、 喹诺酮、 氟喹诺酮、 氨基糖苷、 大环内酯、 酮内酯、 四环素、 糖 肽、 链阳性菌素、 噁唑烷二酮、 利福霉素或磺胺甲噁唑。在一些实施方案中， 包含化合物 1 的 固体形式例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型的组合物是口服的， 其他抗生素， 例如 天然青霉素、 耐青霉素酶青霉素、 抗假单胞菌青霉素、 氨基青霉素、 第一代头孢菌素、 第二代 头孢菌素、 第三代头孢菌素、 第四代头孢菌素、 碳青霉烯、 头霉素、 单酰胺菌素、 喹诺酮、 氟喹 诺酮、 氨基糖苷、 大环内酯、 酮内酯、 四环素、 糖肽、 链阳性菌素、 噁唑烷二酮、 利福霉素或磺 胺甲噁唑是静脉注射施用的。
在一些实施方案中， 化合物 1 的固体形式， 例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型， 例如包含化合物 1 的固体形式的组合物， 可以施用以治疗革兰氏阴性感染。在一些实施 方案中， 该组合物是固体、 液体 ( 例如， 混悬液 ) 或注射液 ( 例如， 化合物 1 的一种形式溶 于液体， 而以静脉注射形式施用 ) 组合物。在一些实施方案中， 包含化合物 1 的组合物与其 他抗生素联合施用， 所述抗生素选自 ： 天然青霉素、 耐青霉素酶青霉素、 抗假单胞菌青霉素、 氨基青霉素、 第一代头孢菌素、 第二代头孢菌素、 第三代头孢菌素、 第四代头孢菌素、 碳青霉 烯、 头霉素、 单酰胺菌素、 喹诺酮、 氟喹诺酮、 氨基糖苷、 大环内酯、 酮内酯或四环素。在一些 实施方案中， 包含化合物 1 的固体形式例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型的组合 物是口服的， 其他抗生素， 例如天然青霉素、 耐青霉素酶青霉素、 抗假单胞菌青霉素、 氨基青 霉素、 第一代头孢菌素、 第二代头孢菌素、 第三代头孢菌素、 第四代头孢菌素、 碳青霉烯、 头 霉素、 单酰胺菌素、 喹诺酮、 氟喹诺酮、 氨基糖苷、 大环内酯、 酮内酯或四环素是口服的。 在一些实施方案中， 其他治疗剂是静脉注射施用的。
在一个方面， 本发明的特征是一种治疗细菌感染的方法， 该方法包括给患者施用 本文所述的化合物 1 的固体形式 ( 例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 )。
在一个方面， 本发明的特征是一种治疗细菌感染的方法， 该方法包括给患者施用 本文所述的药物组合物 ( 例如， 包含化合物 1 的固体形式例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型的药物组合物 )。 在一些实施方案中， 细菌感染的特征在于， 存在下列细菌中的一 种或多种 ： 肺炎链球菌、 化脓链球菌、 粪肠球菌、 屎肠球菌、 肺炎克雷伯菌、 肠杆菌属、 变形杆 菌属、 绿脓杆菌、 大肠杆菌、 粘质沙雷氏菌、 金黄色葡萄球菌、 凝固酶阴性葡萄球菌、 流感嗜 血杆菌、 炭疽杆菌、 肺炎支原体、 粘膜炎莫拉菌、 肺炎衣原体、 嗜肺军团病杆菌、 结核分枝杆 菌、 幽门螺旋杆菌、 腐生性葡萄球菌或表皮葡萄球菌。
在另一个实施方案中， 细菌感染的特征在于， 存在下列细菌中的一种或多种 ： 肺炎 链球菌、 化脓链球菌、 粪肠球菌、 屎肠球菌、 金黄色葡萄球菌、 凝固酶阴性葡萄球菌、 炭疽杆 菌、 表皮葡萄球菌、 腐生性葡萄球菌或结核分枝杆菌。
在另一个实施方案中， 细菌感染的特征在于， 存在下列细菌中的一种或多种 ： 肺炎 链球菌、 粪肠球菌或金黄色葡萄球菌。
在另一个实施方案中， 细菌感染的特征在于， 存在下列细菌中的一种或多种 ： 大肠 杆菌、 粘膜炎莫拉菌或流感嗜血杆菌。
在一些实施方案中， 细菌感染的特征在于， 存在下列细菌中的一种或多种 ： 耐甲氧 西林金黄色葡萄球菌、 耐氟喹诺酮金黄色葡萄球菌、 耐万古霉素中间体金黄色葡萄球菌、 耐 利奈唑胺金黄色葡萄球菌、 耐青霉素肺炎链球菌、 耐大环内酯肺炎链球菌、 耐氟喹诺酮肺炎 链球菌、 耐万古霉素粪肠球菌、 耐利奈唑胺粪肠球菌、 耐氟喹诺酮粪肠球菌、 耐万古霉素屎 肠球菌、 耐利奈唑胺屎肠球菌、 耐氟喹诺酮屎肠球菌、 耐氨苄西林屎肠球菌、 耐大环内酯流 感嗜血杆菌、 耐 β- 内酰胺流感嗜血杆菌、 耐氟喹诺酮流感嗜血杆菌、 耐 β- 内酰胺粘膜炎 莫拉菌、 耐甲氧西林表皮葡萄球菌、 耐甲氧西林表皮葡萄球菌、 耐万古霉素表皮葡萄球菌、 耐氟喹诺酮表皮葡萄球菌、 耐大环内酯肺炎支原体、 耐异烟肼结核分枝杆菌、 耐利福平结核 分枝杆菌、 耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌、 耐氟喹诺酮凝固酶阴性葡萄球菌、 耐糖肽中间 体金黄色葡萄球菌、 耐万古霉素金黄色葡萄球菌、 异质性 - 耐万古霉素中间体金黄色葡萄 球菌、 异质性耐万古霉素金黄色葡萄球菌、 耐大环内酯 - 林肯酰胺 - 链阳性菌素葡萄球菌、 耐 β- 内酰胺粪肠球菌、 耐 β- 内酰胺屎肠球菌、 耐酮内酯肺炎链球菌、 耐酮内酯化脓链球 菌、 耐大环内酯化脓链球菌或耐万古霉素表皮葡萄球菌。
根据另一个实施方案， 耐甲氧西林葡萄球菌选自耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、 耐 甲氧西林表皮葡萄球菌或耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌。
在一些实施方案中， 化合物 1 的形式， 例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 用于治疗社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 ( 即， cMRSA)。
根据另一个实施方案， 耐氟喹诺酮葡萄球菌选自耐氟喹诺酮金黄色葡萄球菌、 耐 氟喹诺酮表皮葡萄球菌或耐氟喹诺酮凝固酶阴性葡萄球菌。
根据另一个实施方案， 耐糖肽葡萄球菌选自耐糖肽中间体金黄色葡萄球菌、 耐万 古霉素金黄色葡萄球菌、 耐万古霉素中间体金黄色葡萄球菌， 异质性耐万古霉素中间体金 黄色葡萄球菌或异质性耐万古霉素金黄色葡萄球菌。根据另一个实施方案， 耐大环内酯 - 林肯酰胺 - 链阳性菌素葡萄球菌是耐大环内 酯 - 林肯酰胺 - 链阳性菌素金黄色葡萄球菌。
根据另一个实施方案， 耐利奈唑胺肠球菌选自耐利奈唑胺粪肠球菌或耐利奈唑胺 屎肠球菌。
根据另一个实施方案， 耐糖肽肠球菌选自耐万古霉素屎肠球菌或耐万古霉素粪肠 球菌
根据另一个实施方案， 耐 β- 内酰胺粪肠球菌是耐 β- 内酰胺屎肠球菌。
根据另一个实施方案， 耐青霉素链球菌是耐青霉素肺炎链球菌。
根据另一个实施方案， 耐大环内酯链球菌是耐大环内酯肺炎链球菌。
根据另一个实施方案， 耐酮内酯链球菌选自耐大环内酯肺炎链球菌和耐酮内酯化 脓链球菌。
根据另一个实施方案， 耐氟喹诺酮链球菌是耐氟喹诺酮肺炎链球菌。
根据另一个实施方案， 耐 β- 内酰胺嗜血杆菌是耐 β- 内酰胺流感嗜血杆菌。
根据另一个实施方案， 耐氟喹诺酮嗜血杆菌是耐氟喹诺酮流感嗜血杆菌。
根据另一个实施方案， 耐大环内酯嗜血杆菌是耐大环内酯流感嗜血杆菌。
根据另一个实施方案， 耐大环内酯支原体是耐大环内酯肺炎支原体。
根据另一个实施方案， 耐异烟肼分枝杆菌是耐异烟肼结核分枝杆菌。
根据另一个实施方案， 耐利福平分枝杆菌是耐利福平结核分枝杆菌。
根据另一个实施方案， 耐 β- 内酰胺莫拉菌是耐 β- 内酰胺粘膜炎莫拉菌。
根据另一个实施方案， 细菌感染的特征在于， 存在下列细菌中的一种或多种 ： 耐甲 氧西林金黄色葡萄球菌、 耐氟喹诺酮金黄色葡萄球菌、 耐万古霉素中间体金黄色葡萄球菌、 耐利奈唑胺金黄色葡萄球菌、 耐青霉素肺炎链球菌、 耐大环内酯肺炎链球菌、 耐氟喹诺酮肺 炎链球菌、 耐万古霉素粪肠球菌、 耐利奈唑胺粪肠球菌、 耐氟喹诺酮粪肠球菌、 耐万古霉素 屎肠球菌、 耐利奈唑胺屎肠球菌、 耐氟喹诺酮屎肠球菌、 耐氨苄西林屎肠球菌、 耐大环内酯 流感嗜血杆菌、 耐 β- 内酰胺流感嗜血杆菌、 耐氟喹诺酮流感嗜血杆菌、 耐 β- 内酰胺粘膜 炎莫拉菌、 耐甲氧西林表皮葡萄球菌、 耐甲氧西林表皮葡萄球菌、 耐万古霉素表皮葡萄球 菌、 耐氟喹诺酮表皮葡萄球菌、 耐大环内酯肺炎支原体、 耐异烟肼结核分枝杆菌或耐利福平 结核分枝杆菌。
根据另一个实施方案， 细菌感染的特征在于， 存在下列细菌中的一种或多种 ： 耐甲 氧西林金黄色葡萄球菌、 耐甲氧西林表皮葡萄球菌、 耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌、 耐氟 喹诺酮金黄色葡萄球菌、 耐氟喹诺酮表皮葡萄球菌、 耐氟喹诺酮凝固酶阴性葡萄球菌、 耐万 古霉素金黄色葡萄球菌、 耐糖肽中间体金黄色葡萄球菌、 耐万古霉素金黄色葡萄球菌、 耐万 古霉素中间体金黄色葡萄球菌、 异质性耐万古霉素中间体金黄色葡萄球菌、 异质性耐万古 霉素金黄色葡萄球菌、 耐万古霉素屎肠球菌、 耐万古霉素粪肠球菌、 耐青霉素肺炎链球菌、 耐大环内酯肺炎链球菌、 耐氟喹诺酮肺炎链球菌、 耐大环内酯化脓链球菌或耐 β- 内酰胺 流感嗜血杆菌。
根据另一个实施方案， 我们认为， 化合物 1( 例如， 化合物 1 的固体形式， 例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 ) 也可以通过植入 ( 例如， 通过手术 ) 来递送， 例如用可 植入或内置装置。可植入或内置装置可以设计成长期或暂时放置于患者体内。可植入或内置装置的例子包括但不限于， 隐形眼镜、 中心静脉导管和无针接头、 气管内插管、 宫内避孕 器、 人工心脏瓣膜、 起搏器、 腹膜透析导管、 假关节， 例如髋关节和膝关节置换物、 通气管、 导 尿管、 人造发声装置、 支架、 输送泵、 血管滤器和可植入控释组合物。 生物膜对于置入可植入 或内置医疗装置的患者的健康是有害的， 因为它们将人造基质引入体内， 会导致持续感染。 因此， 在可植入或内置装置之中或之上提供化合物 1 可以防止或减少生物膜的产生。此外， 可植入或内置装置可以用作化合物 1 的贮存或贮存器。任何可植入或内置装置都可以用于 递送化合物 1， 条件是 a) 该装置、 化合物 1 和任何包含化合物 1 的药物组合物是生物相容 的， 及 b) 该装置可以递送或释放有效量的化合物 1， 以对所治疗患者赋予治疗效果。
通 过 可 植 入 或 内 置 装 置 递 送 治 疗 剂 是 本 领 域 已 知 的。 参 见 例 如， Hofma 等 人 的 “Recent Developments in Coated Stents” ，公 开 于 Current Interventional Cardiology Reports 2001， 3： 28-36， 将其全部内容， 包括其引用的参考文献， 都通过参考 引入本文。对可植入装置的其他描述可参见 U.S.6,569,195 和 6,322,847 ； 以及 U.S. 专 利 申 请 号 2004/0044405， 2004/0018228， 2003/0229390， 2003/0225450， 2003/0216699 和 2003/0204168， 将每一篇都以整体通过参考引入本文。
在一些实施方案中， 可植入装置是支架。 在一个具体的实施方案中， 支架可以包括 连锁网状的线缆。各线缆可以包括用于结构支持的金属线和用于递送治疗剂的聚合线。聚 合线可以通过将聚合物浸入到治疗剂的溶液中来给药。可替代地， 治疗剂可以在由聚合前 体溶液形成线时包埋到聚合线中。
在其他实施方案中， 可以用包含治疗剂的聚合物包衣包覆可植入或内置装置。该 聚合物包衣可以设计成控制治疗剂的释放速率。治疗剂的控释可以利用各种技术。已知装 置具有一个统一的层或包衣， 在聚合物中掺入了活性剂的异质溶液和 / 或分散液， 当活性 剂通过该聚合物扩散到聚合物—体液界面并释放到周围液中时， 活性剂在其中的扩散速率 受到了限制。 在一些装置中， 也可以将可溶物溶解或分散于聚合物中， 这样在该物质溶解后 就会留下附加的孔或通道。基质装置一般扩散受到限制， 但是该装置的通道或其他内部几 何形状也会在药剂向体液的释放中发挥作用。通道可以是预先存在的通道， 或者是释放药 剂或其他可溶物后留下的通道。
可侵蚀或可降解装置典型地含有物理固定于聚合物中的活性剂。活性剂可以溶 解和 / 或分散到整个聚合物中。聚合物通常会随着时间通过不稳定键的水解而水解分解， 使得聚合物侵蚀到体液中， 向体液中释放出活性剂。亲水性聚合物一般具有比疏水性聚合 物更快的侵蚀速率。 人们认为， 活性剂几乎完全在疏水性聚合物的表面扩散， 从表面向内侵 蚀。 而认为亲水性聚合物允许水渗透聚合物的表面， 使得表面之下的不稳定键水解， 产生对 聚合物的均匀或大量的溶蚀。
可植入或内置装置的包衣可以包含聚合物的混合物， 各聚合物具有不同释放速率 的治疗剂。例如， 包衣可以包含聚乳酸 / 聚氧乙烯 (PLA-PEO) 共聚物和聚乳酸 / 聚己酸内 酯 (PLA-PCL) 共聚物。聚乳酸 / 聚氧乙烯 (PLA-PEO) 共聚物可以显示比聚乳酸 / 聚己酸内 酯 (PLA-PCL) 共聚物更高的治疗剂释放速率。可以通过控制较快释放型聚合物与较慢释放 型聚合物的相对量来控制所递送治疗剂的相对量和经时给药速率。 为在开始时释放速率较 高， 可以增加较快释放型聚合物相对于较慢释放型聚合物的比例。如果大多数给药需要较 长时间释放， 则大多数聚合物可以是较慢释放型聚合物。 可以通过用聚合物、 活性剂和溶剂的溶液或分散液对该装置喷雾来给该装置包衣。可以蒸发掉溶剂， 留下聚合物和活性剂的 包衣。活性剂可以溶解和 / 或分散在聚合物中。在一些实施方案中， 可以从装置中挤出共 聚物。
因此， 本文所述的化合物、 组合物和方法可以用于控制、 治疗或减轻医源性或非医 源性感染的发展、 严重度或作用。医源性或非医源性感染的例子包括但不限于上呼吸道感 染、 下呼吸道感染、 耳部感染、 胸膜肺和支气管感染、 泌尿道感染、 腹腔内感染、 心血管感染、 血流感染、 败血症、 CNS 感染、 皮肤和软组织感染、 GI 感染、 骨和关节感染、 生殖器感染、 眼部 感染或肉芽肿感染。具体的细菌感染的例子包括但不限于非复杂性皮肤和皮肤结构感染、 复杂性皮肤和皮肤结构感染、 咽炎、 鼻窦炎、 外耳炎、 中耳炎、 支气管炎、 脓胸、 肺炎、 社区获 得性肺炎 (CAP)、 膀胱炎和肾盂肾炎、 肾结石、 前列腺炎、 腹膜炎、 透析相关性腹膜炎、 内脏脓 肿、 心内膜炎、 心肌炎、 心包炎、 输血伴发性败血症、 脑膜炎、 脑炎、 脑脓肿、 骨髓炎、 关节炎、 生殖器溃疡、 尿道炎、 阴道炎、 宫颈炎、 牙龈炎、 结膜炎、 角膜炎、 眼内炎、 囊性纤维变性患者 中的感染或发热性中性白细胞减少症患者的感染。
在一些实施方案中， 化合物 1 可以预防性地用于防止细菌感染 ( 例如， 化合物 1 的 固体形式， 例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 )。在一些实施方案中， 化合物 1 可 以在牙科或手术操作之前、 期间或之后使用， 以防止机会致病菌感染， 例如在细菌性心内膜 炎中所遇到的那些 ( 例如， 化合物 1 的固体形式， 例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 )。在其他实施方案中， 化合物 1( 例如， 化合物 1 的固体形式， 例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 ) 可以在牙科操作中预防性地使用， 包括但不限于， 拔牙、 牙周病处理、 牙植入物放置和牙髓手术。在其他实施方案中， 化合物 1 可以在手术操作中预防性地使用， 包括但不限于， 普通外科手术、 呼吸器官手术 ( 扁桃体切除术 / 腺样体切除体 )、 胃肠手术 ( 上 GI 及选择性小肠手术、 食道硬化疗法和扩张术、 大肠切除、 急性阑尾切除术 )、 创伤性手 术 ( 穿透性腹部手术 )、 泌尿生殖道手术 ( 前列腺切除术， 尿道扩张、 膀胱镜检查、 阴道或腹 部子宫切除术、 剖腹产 )、 移植手术 ( 肾、 肝、 胰脏或肾脏移植 )、 头颈部手术 ( 皮肤切除、 颈 淋巴清扫术、 喉切除术、 头颈癌手术、 下颌骨骨折 )、 矫形外科 ( 全关节置换、 创伤性开放性 骨折 )、 血管外科手术 ( 外周血管处理 )、 胸心外科手术、 冠状动脉旁路手术、 肺切除术和神 经外科。
在一些实施方案中， 细菌感染是医源性感染 ( 例如， 泌尿道感染、 肺炎、 外科伤口 感染、 骨和关节感染以及血流感染 )。在一些实施方案中， 细菌感染是医源性感染 ( 例如， 泌尿道感染、 肺炎、 前列腺炎、 皮肤和软组织感染、 骨和关节感染、 腹腔内感染、 脑膜炎、 脑脓 感染性腹泻和胃肠道感染、 手术预防、 及对发热性中性白细胞减少症患者的治疗 )。 肿、
在一些实施方案中， 该方法还包括施用其他治疗剂。 在一些实施方案中， 其他治疗 剂与 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲 联合施用。 在一些实施方案中， 其他治疗剂是抗生素、 抗炎剂、 基质金属蛋白酶抑制剂、 脂氧 合酶抑制剂、 细胞因子拮抗剂、 免疫抑制剂、 抗癌剂、 抗病毒剂、 细胞因子、 生长因子、 免疫调 节剂、 前列腺素或抗血管过度增殖化合物。
在一个方面， 本发明提供一种评价化合物 1 的固体形式 ( 例如， 化合物 1 的固体形 式， 例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 ) 的方法。该方法包括 ：
提供对本文所述的物理、 化学或生物学参数的评价， 例如通过粉末 X- 射线衍射评价是否存在一个或多个峰 ( 在该评价中， 所鉴定的特征或值在本文中有时称作 “标志” )，
任选地， 确定参数的值或标志 ( 例如， 对应于不存在或存在的值或标志 ) 是否满足 预选的标准， 例如， 存在或存在于预选范围内，
由此评价或处理该混合物。
在一个优选的实施方案中， 该方法包括提供该值或标志与参照值的比较， 由此评 价样品。在优选的实施方案中， 该比较包括确定所测定的值或标志与参照值是否具有预选 的相关性， 例如确定它是否满足参照值。 该值或标志不需要是数字， 但是要能显示出该形式 是否存在。
在一个优选的实施方案中， 该方法包括确定该测定的值或标志是否等于或大于参 照值、 是否小于或等于参照值、 或者是否落在一定范围内 ( 包括或排除该范围的端点 )。
在优选的实施方案中， 该测定的值或标志或是否满足预选的相关性的指示可以记 录于， 例如计算机可读记录中。
在优选的实施方案中， 采取决定或步骤， 例如， 将样品分类、 选择、 接受或排除、 释 放或抑制、 加工到药品中、 运输、 运到新地方、 配制、 贴标签、 包装、 进入商业、 销售或许诺销 售。 这可以是基于是否满足预选标准， 例如， 基于确定是否存在标志的结果， 可以加工批次， 从该批次中可取出样品。
在优选的实施方案中， 本文所述的方法和组合物从方法的观点来看是有用的， 例 如， 用于检测或确认批次间的一致性或质量， 或者用于相对于参照值， 例如预选值来评价样 品。
在优选的实施方案中， 本文所述的方法和组合物可以用于确定化合物 1 的固体形 式 ( 例如， 化合物 1 的固体形式， 例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 ) 的试验批次 是否有望具有化合物 1( 例如， 化合物 1 的固体形式， 例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 ) 的参照物或标准品的一种或多种性质。这些性质可以包括如药物批准形式的产 品插入说明所列的性质， 即在概览表例如美国药典中显示的性质， 或者管理机构例如美国 食品和药品管理局 (FDA) 对商用所要求的性质。通过本文所述的方法进行的确定可以是直 接或间接来测定上述性质， 例如当所要求的性质为所测定个体的预选水平时可以是直接测 定。在间接测定中， 所测定个体与所要求的性质例如本文所述的性质相关。
在一个优选的实施方案中， 进行评价的团队不需要实施本文所述的方法或分析， 而是只依赖于本文所述的方法或分析得到的结果即可。
本文所述的一些方法包括评价化合物 1 的固体形式， 例如化合物 1 的 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型的物理、 化学或生物学参数。因此， 在一个优选的实施方案中， 本 文所述的化学、 物理或生物学参数是用于评价或确定化合物 1 的固体形式， 例如， 评价本文 所述的药物的一种形式为下列中的一种或多种。 这些参数中的一种或多种的值或评价有时 也在本文中称作 “标志” 。
这些参数包括本文所公开的下列预选中的一个或多个 ：
粉末 X- 射线衍射图的一个或多个峰 ；
吸热量或 Tm， 例如， 在 DSC 中测定的 ；
增重的值， 例如用 DVS 所测定的， 在 25℃下相对湿度从 5％变为 95％时 ；
溶解度 ；在预选条件下基本上保持相同物理形式的能力的测定 ；
ss13C-NMR 图的一个或多个峰 ；
P21/n 空间群 ； 及
晶胞大小。
在一个优选的实施方案中， 药物形式为化合物 1 的 IA 型， 标志为本文所公开的下 列中的一个或多个 ：
粉末 X- 射线衍射图的一个或多个峰 ；
吸热量或 Tm， 例如， 在 DSC 中测定的 ；
增重的值， 例如用 DVS 所测定的， 在 25℃下相对湿度从 5％变为 95％时 ；
溶解度 ；
在预选条件下基本上保持相同物理形式的能力的测定 ； 及 13
ss C-NMR 图的一个或多个峰。
在一个优选的实施方案中， 药物形式为化合物 1·单乙磺酸盐， 标志是溶解度。
在一个优选的实施方案中， 药物为化合物 1 的 IIA 型， 标志为本文所公开的下列中 的一个或多个 ：
粉末 X- 射线衍射图的一个或多个峰 ；
吸热量或 Tm， 例如， 在 DSC 中测定的 ；
增重的值， 例如用 DVS 所测定的， 在 25℃下相对湿度从 5％变为 95％时 ； 及
溶解度 ；
在一个优选的实施方案中， 药物为化合物 1 的 IIB 型， 标志为本文所公开的下列中 的一个或多个 ：
粉末 X- 射线衍射图的一个或多个峰 ；
吸热量或 Tm， 例如， 在 DSC 中测定的 ； 及
在预选条件下基本上保持相同物理形式的能力的测定。
在一个优选的实施方案中， 药物为化合物 1 的 IIC 型， 标志为本文所公开的下列中 的一个或多个 ：
粉末 X- 射线衍射图的一个或多个峰 ；
吸热量或 Tm， 例如， 在 DSC 中测定的 ；
增重的值， 例如用 DVS 所测定的， 在 25℃下相对湿度从 5％变为 95％时 ；
溶解度 ；
在预选条件下基本上保持相同物理形式的能力的测定 ； 及 13
ss C-NMR 图的一个或多个峰。
在一个优选的实施方案中， 药物为化合物 1 的 IID 型， 标志为本文所公开的 ： 粉末 X- 射线衍射图的一个或多个峰。
在一个优选的实施方案中， 药物为化合物 1 的 IIIB 型， 标志为本文所公开的下列 中的一个或多个 ：
粉末 X- 射线衍射图的一个或多个峰 ；
吸热量或 Tm， 例如， 在 DSC 中测定的 ；
增重的值， 例如用 DVS 所测定的， 在 25℃下相对湿度从 5％变为 95％时 ；溶解度 ；
在预选条件下基本上保持相同物理形式的能力的测定 ；
ss13C-NMR 图的一个或多个峰 ；
P21/n 空间群 ； 及
晶胞大小。
在一个优选的实施方案中， 药物为化合物 1 的 IIIC 型， 标志为本文所公开的下列 中的一个或多个 ：
粉末 X- 射线衍射图的一个或多个峰 ； 及
吸热量或 Tm， 例如， 在 DSC 中测定的。
在另一个方面， 本发明的特征是一种对方法例如制备方法进行分析的方法。该方 法包括 ：
提供化合物 1 的固体形式 ( 例如， IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 ) 的制 备；
提供对本文所述的物理、 化学或生物学参数的评价， 例如当通过粉末 X- 射线衍射 测定时是否存在一个或多个峰， 和
任选地， 提供对参数的值或标志是否满足预选标准 ( 例如存在或存在于预选范围 内 ) 的确定， 由此分析该方法。
在一个实施方案中， 该方法还包括比较所确定的值和参照值， 由此分析该制备方 法。
在一个实施方案中， 该方法还包括至少部分基于该分析来维持该制备方法。在一 个实施方案中， 该方法还包括至少部分基于该分析来调整该制备方法。
在一个优选的实施方案中， 该方法包括 ： 评价一种方法， 例如制备方法， 化合物 1 的固体形式的制备可以通过一种选择的方法来进行， 所述方法包括基于本文所述的方法或 分析 ( 例如， 化合物 1 的固体形式， 例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 ) 来作出对 方法的确定。在一个实施方案中， 该方法还包括至少部分基于方法或分析来维持或调整制 备方法。 因此， 在一个优选的实施方案中， 进行评价的团队不需要实施本文所述的方法或分 析， 而是只依赖于本文所述的方法或分析得到的结果即可。
在一个优选的实施方案中， 该方法包括在监测或控制批次间差异的方法中比较两 种或多种制备， 或者比较制备物和标准参照物。
在一个实施方案中， 该方法还包括至少部分基于该确定作出决定， 例如， 将制品分 类、 选择、 接受或排除、 释放或抑制、 加工到药品中、 运输、 运到不同地方、 配制、 标记、 包装、 进入商业、 销售或许诺销售。
在另一个方面， 本发明的特征是， 一种评价方法， 例如评价如本文所述化合物 1 的 固体形式 ( 例如， IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 ) 的制品的质量的方法， 例如， 在 质量控制或释放规范分析中。该方法包括 ：
提供对本文所述的物理、 化学或生物学参数的评价， 例如通过粉末 X- 射线衍射测 定是否存在一个或多个峰， 及
任选地， 确定参数的值或标志是否满足预选的标准， 例如， 存在或存在于预选范围 内，如果所述确定的值与所述标准品具有预定的相关性， 例如在值的预选范围内， 然 后选择该制品 ( 其中选择可以是选择用于包装、 使用、 销售、 进入商业、 排除等等 )。
在另一个方面， 本发明的特征是一种评价本文所述的化合物 1 的固体形式 ( 例如， IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 ) 的制品的方法。该方法包括 ：
接收本文所述的化合物 1 的固体形式 ( 例如， IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 ) 中某一形式存在或存在水平的数据， 例如， 其中该数据是由本文所述的一种或多种方 法得到的 ；
提供记录， 其包括所述数据并任选包括对本文所述的化合物 1 的固体形式 ( 例如， IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 ) 的某一批次的鉴定 ；
将所述记录提交给决策者， 例如政府机构， 例如， FDA ；
任选地， 接收所述决策者的通信 ；
任选地， 根据决策者的通信， 决定是否将该批次的本文所述的化合物 1 的固体形 式 ( 例如， IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 ) 投放到市场中。在一个实施方案中， 该 方法还包括投放样品。
本文使用的术语 “化学稳定的” 是指当在特定条件例如， 40℃ /75％相对湿度或室 温下， 该形式的化合物 1( 例如， 本文所述的化合物 1 的固体形式， 例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 ) 在一段具体时间， 例如 1 天， 2 天， 3 天， 1 周， 2 周， 1 个月， 2 个月， 3个 月， 6 个月， 12 个月， 18 个月， 24 个月或更长时间不会分解成一种或多种不同的化合物。在 一些实施方案中， 小于 25％该形式的化合物 1 分解， 在一些实施方案中， 在特定条件下， 小 于约 20％， 小于约 15％， 小于约 10％， 小于约 5％， 小于约 3％， 小于约 1％， 小于约 0.5％的 该形式的化合物 1 分解。在一些实施方案中， 没有可检测量的该形式的化合物 1 分解。
本文使用的术语 “物理稳定的” 是指当在特定条件例如， 40℃ /75％相对湿度或室 温下， 该形式的化合物 1( 例如， 本文所述的化合物 1 的固体形式， 例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型 ) 在一段具体时间， 例如 1 天， 2 天， 3 天， 1 周， 2 周， 1 个月， 2 个月， 3个 月， 6 个月， 12 个月， 18 个月， 24 个月或更长时间不会变成化合物 1 的一种或多种不同的物 理形式 ( 例如， 通过 XRPD、 DSC 等所测定的不同的固体形式 )。 在一些实施方案中， 在特定条 件下小于 25％的该形式的化合物 1 变成一种或多种不同的物理形式。在一些实施方案中， 当在特定条件下时， 小于约 20％， 小于约 15％， 小于约 10％， 小于约 5％， 小于约 3％， 小于约 1％， 小于约 0.5％的该形式的化合物 1 变成化合物 1 的一种或多种不同物理形式。在一些 实施方案中， 没有可检测量的该形式的化合物 1 变成化合物 1 的一种或多种不同物理形式。
除非另有说明， 本文使用的术语 “治疗 (treaTment)” 是指如本文所述的方法所提 供的、 治疗或预防细菌感染， 包括治愈、 减轻所述疾病的症状或延缓所述疾病的发展。术语 “治疗 (treat)” 和 “治疗 (treating)” 的定义与前述术语 “治疗 (treaTment)” 的定义相同。
除非另有说明， 本文使用的术语 “在患者中预防细菌感染” 是指预防性地使用抗生 素例如本发明的回旋酶抑制剂， 来预防细菌感染。用回旋酶抑制剂治疗的确可以预防性地 防止对回旋酶抑制剂敏感的生物体导致的感染。 其中可以认为是预防性治疗的一组常见情 况是， 当个体由于例如免疫减弱、 手术、 创伤、 体内存在人造装置 ( 暂时或长期 )、 解剖学缺 陷、 暴露于高水平的细菌或可能暴露于致病病菌而更易受到感染伤害时的情况。可以导致 免疫减弱的因素的例子包括化疗、 放射治疗、 糖尿病、 逐渐年老、 HIV 感染和移植。解剖学缺陷的例子是心脏瓣膜的缺陷， 它会增加细菌性心内膜炎的风险。人造装置的例子包括人工 关节、 手术针、 导管等。适合预防性使用回旋酶抑制剂的另一组情况是， 防止个体间病原体 的扩散 ( 直接或间接 )。预防性用于防止病原体扩散的具体例子是在医疗保健机构 ( 例如 医院或疗养院 ) 中个体使用回旋酶抑制剂。
当表示指定形式的化合物 1( 例如， 本文所述的固体或结晶形式 ) 时， 术语 “基本上 不含” 是指存在小于 20％ ( 重量 ) 的该指定形式或共存形式 ( 例如， 化合物 1 的结晶或无 定形 )， 更优选存在小于 10％ ( 重量 ) 的该指定形式， 进一步优选存在小于 5％ ( 重量 ) 的 该指定形式， 最优选存在小于 1％ ( 重量 ) 的该指定结晶形式。
当表示指定形式的化合物 1( 例如， 本文所述的固体或结晶形式 ) 时， 术语 “基本上 纯” 是指该指定结晶形式包含小于 20％ ( 重量 ) 的残留组分， 例如化合物 1 的可替代的多 晶型或同型结晶形式或共存形式。优选化合物 1 的基本上纯的形式包含小于 10％ ( 重量 ) 的化合物 1 的可替代的多晶型或同型结晶形式， 更优选小于 5％ ( 重量 ) 的化合物 1 的可替 代的多晶型或同型结晶形式， 最优选小于 1％ ( 重量 ) 的化合物 1 的可替代的多晶型或同型 结晶形式。
本专利常常涉及评价本文所述的化学、 物理或生物学参数。这些参数可以用其他 化学、 物理或生物学参数来替代， 这些其他参数尽管本文没有公开， 但在鉴定形式方面与本 文所述的参数是基本上类似的。 本文所述的方法和组合物可以在混合物中存在、 分布或有一定量的一种或多种结 构具有或影响生物学活性时使用。该方法也可以用于结构 - 活性预测， 以评价或确认生物 学等价性。
在所附的附图和下面的说明中举出了本文的一个或多个实施方案的详述。 由这些 说明、 附图和权利要求， 本发明的其他特征、 目的和优点将变得显而易见。
附图说明
图 1a 和 1b 描述的是所观察到的 IA 型的结晶结构。 图 2 描述的是 IA 型的示例性的 XRPD。 图 3 描述的是 IA 型的示例性的 DSC 描迹线。 图 4 描述的是 IA 型的示例性的 TGA 描迹线。 图 5 描述的是 IA 型的示例性的 DVS 描迹线。 图 6 描述的是 IA 型的示例性的 ss13C-NMR 描迹线。 图 7 描述的是 IIA 型的示例性的 XRPD。 图 8 描述的是 IIA 型的示例性的 DSC 描迹线。 图 9 描述的是 IIA 型的示例性的 TGA 描迹线。 图 10 描述的是 IIA 型的示例性的 DVS 描迹线。 图 11 描述的是 IIB 型的示例性的 XRPD。 图 12 描述的是 IIB 型的示例性的 DSC 描迹线。 图 13 描述的是 IIC 型的示例性的 XRPD。 图 14 描述的是 IIC 型的示例性的 DSC 描迹线。 图 15 描述的是 IIC 型的示例性的 TGA 描迹线。图 16 描述的是 IIC 型的示例性的 DVS 描迹线。 图 17 描述的是 IIC 型的示例性的 ss13C-NMR 描迹线。 图 18 描述的是 IID 型的示例性的 XRPD。 图 19 描述的是 IID 型的示例性的 DSC 描迹线。 图 20 描述的是 IID 型的示例性的 TGA 描迹线。 图 21 描述的是 IIIB 型的示例性的 XRPD。 图 22 描述的是 IIIB 型的示例性的 DSC 描迹线。 图 23 描述的是 IIIB 型的示例性的 TGA 描迹线。 图 24 描述的是 IIIB 型的示例性的 DVS 描迹线。 图 25 描述的是 IIIB 型的示例性的结晶结构图。 图 26 描述的是 IIIB 型的示例性的 1H NMR 描迹线。 图 27 描述的是 IIIB 型的示例性的 ss13C-NMR 描迹线。 图 28 描述的是 IIIC 型的示例性的 XRPD。 图 29 描述的是 IIIC 型的示例性的 DSC 描迹线。 图 30 描述的是 IIIC 型的示例性的 TGA 描迹线。 各图中相同的参照符号表示相同的要素。具体实施方式
化合物 1 的固体形式及其制备方法
化合物 1 已经制成了各种固体形式， 包括盐和共溶剂化物。在下表 1 中提供了这 些固体形式各自的参照形式和名称 ：
表1： 化合物 1 的固体形式
参照形式名称 结晶 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑IA 型 -2- 基 ) 脲 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) IIA 型 脲·单乙磺酸盐 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) IIB 型 脲·单乙磺酸盐 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) IIC 型 脲·单乙磺酸盐1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) IID 型 脲·单乙磺酸盐 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) IIIB 型 脲·单甲磺酸盐 1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) IIIC 型 脲·单甲磺酸盐使用下述一种或多种分析技术分析上述所列的各固体形式 ： 单晶分析、 X- 射线粉 末衍射 (XRPD)、 差示扫描量热法 (DSC)、 热重量分析 (TGA)、 动态蒸汽吸收 (DVS)、 ss13C-NMR、 1 H NMR、 稳定性分析 ( 例如， 化学和 / 或物理稳定性 ) 及溶解度分析。
IA 型
IA 型的制备， 包括从水溶液中沉淀化合物 1， 例如通过调节酸性溶液至 pH 7。 在一 些实施方案中， 可以用质子溶剂例如甲醇 ( 例如， 热甲醇 ) 研磨所得固体。在一些实施方案 中， 化合物 1 的水溶液是化学合成化合物 1 的产物， 例如在实施例 1 中所提供的。
如在室温下通过单晶结构数据所观察到的， IA 型是三斜晶 P-I 系统， 具有如下的 晶胞大小 ：
α ＝ 82.700(14)°， β ＝ 83.793(14)°， γ ＝ 72.628(13)°
IA 型的单晶结构如图 1a 和 1b 所示。 IA 型的代表性的 XRPD 在图 2 中提供。XRPD 中观察到的代表性的峰在下表 1 中提 表1： IA 型的代表性的 XRPD 峰 角 2-θ° 6.4 9.3 12.8 14.1 d值 埃 13.75 9.53 6.93 6.29 强度 ％ 100 9.8 4.1 16.2 * Pick供：
*34101925597 A CN 101925599说15.4 19.8 20.4 20.7 22.1 24.2 26.9 27.7 5.76 4.48 4.35 4.28 4.02 3.67 3.32 3.22明书5.7 2.8 7.7 7.3 3.2 4.1 13.8 4.8 *20/51 页如通过 DSC 所观察， IA 型的特征在于 Tm 为约 270℃。当进行分级等温研究 ( 例如， DVS) 时， 如相对湿度从 5％至 95％时所观察到的， IA 型一般增重约 8％。IA 型在 pH 约 1 时 溶解度为约 2mg/mL。
IA 型的特征在于如图 6 所示的 ss13C-NMR 图。如以 ppm 测定， 示例性的峰包括下 列中的一个或多个 ： 162.3， 158.8， 157.0， 149.5， 142.0， 137.5， 136.0， 131.8， 125.9， 119.3， 114.7， 35.9 和 16.3。
在各种条件， 包括在 40℃ /75％ RH 下 ( 例如， 在开放容器中 )， IA 型一般在至少约 2 周 ( 例如， 至少约 4 周， 2 个月， 3 个月或 6 个月 ) 是化学和物理稳定的。如本文所述， 例如 用 HPLC 观察时， 化学稳定的化合物在特定条件下几乎不乃至完全不分解。例如用 XRPD 观 察时， 物理稳定的化合物一般不会在特定条件下转化为不同的固体形式。当进行轻度机械 应激例如碾磨时， IA 型一般也是化学和物理稳定的。
IIA 型
制备 IIA 型， 包括在加热和搅拌下将化合物 1 溶于 EtOH/CH2Cl2 的混合物中， 并向 该混合物中加入 1 当量的乙磺酸。开放溶剂进行蒸发， 直至开始形成结晶。然后可以加入 更多的溶剂， 以溶解所形成的结晶。然后用具有三个小孔的铝箔封闭该瓶， 搅拌下 ( 例如， 温和搅拌， 例如小于 100rpm) 保持在室温。继续搅拌该混合物， 直至溶剂蒸发并形成固体物 质。然后过滤所得物质并干燥。也可以采用上述一般性操作方法， 用下列任意的溶剂系统 制备 IIA 型 ： 乙腈 / 水 ； 乙腈 / 甲醇 ； MIK/ 甲醇， 氯仿 ； 甲苯 / 甲醇， 己烷 / 甲醇， 以及， 丙酮 / 水。在一些情况中， 当必要时， 加入其它溶剂， 同时加热以溶解初始化合物。在一些情况 中， 可以将 EtOH/CH2Cl2 的溶液加入到乙醚的搅拌溶液中， 以制备 IIA 型。
IIA 型的代表性的 XRPD 在图 7 中提供。图 7 的 XRPD 中代表性的峰在下表 2 中提 供：
表2： IIA 型的代表性的 XRPD 峰
35101925597 A CN 101925599说角 2-θ° 6.5 7.2 12.6 14.4 15.6 18.6 19.6 21.7 22.6 25.4 27.1 d值 埃 13.57 12.35 7.01 6.14 5.66 4.78 4.53 4.10 3.93 3.50 3.28明书强度 ％ 16.3 100 22.9 11 23.2 28.1 15.4 13.4 11.9 14.2 40.5 * * * Pick21/51 页如通过 DSC 所观察， IIA 型的特征在于 Tm 为约 215℃。当进行分级等温研究 ( 例 如， DVS) 时， 例如相对温度从 5％至 95％时所观察到的， IIA 型一般增重约 10％。IIA 型在 pH 约 / 大约 1.2-1.6 时溶解度为约 150mg/ml-250mg/ml， 例如， 在 pH 约 1.6 下溶解度为＞ 150mg/ml。
IIB 型
IIB 型可以通过将 IIA 型转化为 IIB 型来制备。例如， 可以通过将 IIA 型置于 40℃ /75％的条件下约 24 小时或约 2 周， 以将其转化为 IIB 型。
IIB 型的代表性的 XRPD 在图 11 中提供。XRPD 中观察到的代表性的峰在下表 3 中 提供 ：
表3： IIB 型的代表性的 XRPD 峰
角 2-θ° 6.2d值 埃 14.28强度 ％ 21.1Pick*36101925597 A CN 101925599说7.4 8.1 12.4 13.2 14.5 16.3 17.1 17.8 18.6 19.8 21.0 21.5 22.9 25.0 26.0 27.2 27.9 11.93 10.91 7.14 6.71 6.11 5.43 5.17 4.98 4.76 4.48 4.24 4.13 3.88 3.56 3.43 3.28 3.20明书100 20.1 16 15.2 26.2 67.2 33 22 24.9 18.8 18 25.2 20.3 22.3 30.8 51.8 38.3 * *22/51 页IIB 型的特征在于 Tm 为约 214-216℃。IIB 型在 pH 约 / 大约 1.2-1.6 时， 溶解度 为约 150mg/ml-250mg/ml， 例如， 在 pH 约 1.6 下， 溶解度为＞ 150mg/ml。
IIC 型
制备 IIC 型， 包括在加热和搅拌下将化合物 1 溶于 EtOH/CH2Cl2 的混合物中， 向该 混合物中加入 1 当量的乙磺酸， 并在较高温度 ( 例如， 40℃ ) 下加热直至溶解。 过滤该溶液， 真空浓缩， 用 CH2Cl2 稀释， 并滴加乙醚的搅拌溶液。过滤所得固体并干燥， 产生固体 I。然 后溶解固体 I 并在乙腈、 甲醇或乙醇之一中重结晶， 产生 IIC 型的固体。
IIC 型的代表性的 XRPD 在图 13 中提供。XRPD 中观察到的代表性的峰在下表 4 中
提供 ：
表4： IIC 型的代表性的 XRPD 峰 角 2-θ° 8.2 9.6 10.3 12.4 16.5 18.4 20.4 22.2 24.8 26.0 d值 埃 10.78 9.24 8.54 7.14 5.37 4.81 4.34 4.01 3.58 3.43 强度 ％ 100 81.7 28.6 8.7 7.3 46.9 7.5 13 35.8 16.3 * * * Pick如通过 DSC 所观察， IIC 型的特征在于 Tm 为约 216° -220℃。当进行分级等温研 究 ( 例如， DVS) 时， 例如相对温度从 5％至 95％时所观察到的， IIC 型一般增重约 4％。IIC 型在 pH 约 1.6 时在水溶液中的溶解度为＞ 150mg/ml。
IIC 型的特征在于如图 17 所示的 ss13C-NMR 图。 如以 ppm 测定， 示例性的峰包括下 列中的一个或多个 ： 160.9， 159.2， 157.1， 151.7， 146.3， 142.0， 139.0， 135.4， 131.0， 129.7， 127.5， 124.1， 119.8， 113.7， 106.4， 14.1 和 9.1。
在各种标准贮存条件下， 包括在 40℃ /75％ RH( 例如， 在开放容器中 ) 下， IIC 型 一般在至少约 2 周 ( 例如， 至少约 4 周， 至少约 2 个月， 至少约 3 个月， 至少约 4 个月或至少 约 6 个月 ) 是化学和物理稳定的， 由此可以预计， 在室温下， IIC 型在至少约上述时间内是 稳定的。
IID 型
可以用与制备 IIA 型类似的方法来制备 IID 型， 其中溶剂系统是乙醇 / 甲醇溶剂 系统。
IID 型的代表性的 XRPD 在图 18 中提供。XRPD 中观察到的代表性的峰在下表 5 中 提供 ：
表5： IID 型的代表性的 XRPD 峰 角 2-θ° 8.0 9.3 11.3 13.2 16.1 16.6 17.3 19.0 19.4 19.8 21.2 21.5 22.1 24.0 26.9 d值 埃 11.00 9.55 7.85 6.69 5.49 5.34 5.13 4.66 4.58 4.47 4.20 4.13 4.03 3.71 3.31 强度 ％ 95.1 100 21 12.1 14.9 20.9 24.9 37.4 33.2 39.1 24.1 42.8 65.4 94.3 41.1 * * Pick*如通过 DSC 所观察， IID 型的特征在于 Tm 为约 205℃。IID 型在 pH 约 1.6 时， 在水 溶液中的溶解度为＞ 150mg/ml。
IIIB 型
制备 IIIB 型， 包括将化合物 1 混悬于 EtOH/CH2Cl2 中， 向该混悬液中加入甲磺酸， 并搅拌所得混合物直至溶解。然后过滤该溶液， 真空浓缩， 将所得油性残渣再溶解于 CH2Cl2
中。将所得溶液滴加到乙醚的搅拌溶液中， 得到灰白色沉淀。
如在单晶结构数据中所观察到的那样， IIIB 型具有 P21/n 空间群和下列晶胞大小：
α ＝ 90°。 β ＝ 95.340(3)°。 γ ＝ 90°。 体积R1 ＝ 0.0304， wR2 ＝ 0.0832。
IIIB 型的单晶结构如图 25 所示。
IIIB 型的代表性的 XRPD 在图 21 中提供。XRPD 中观察到的代表性的峰在下表 7 中提供 ：
表7： 所收集的 IIIB 型的 XRPD 数据的峰列表 角 2-θ ° 8.7 10.6 11.6 12.0 13.4 15.6 16.4 17.7 20.1 21.2 d值 埃 10.20 8.31 7.65 7.34 6.61 5.66 5.40 5.02 4.42 4.19 强度 ％ 27.9 21.5 23.2 54.8 64.2 50.2 48.9 38.1 100 49.9 * * Pick40101925597 A CN 101925599说21.9 24.7 27.0 30.5 33.0 4.05 3.60 3.30 2.93 2.71明书69.6 70.2 71.2 40.1 31.6 *26/51 页如通过 DSC 所观察， IIIB 型的特征在于 Tm 为约 215 ℃。当进行分级等温研究 ( 例如， DVS) 时， 例如在 25℃下相对湿度从 5％至 95％时所观察到的， IIIB 型一般增重约 4.6％。IIIB 型在 pH 约 4.4 时溶解度为约＞ 12mg/ml， 在模拟胃液 (SGF) 中为＞ 12mg/ml。 13
IIIB 型的特征在于如图 27 所示的 ss C-NMR 图。 如以 ppm 测定， 示例性的峰包括下 列中的一个或多个 ： 161.7， 159.9， 157.9， 153.6， 146.5， 140.6， 133.8， 132.6， 130.0， 127.9， 125.8， 122.8， 119.3， 117.8， 107.4， 39.5， 38.0 和 15.8。
在一般贮存条件 ( 例如， 环境 ) 或在加速条件下， 例如包括在 40℃ /75％相对湿度 下， IIIB 型一般在至少约 2 周 ( 例如， 至少约 1 个月 ) 是稳定的 ( 例如， 化学稳定和物理稳 定的 )。
IIIC 型
IIIC 型的制备， 包括将化合物 1 悬浮在氯仿中， 并加入甲磺酸的水溶液。 研磨所得 浆体， 过滤并干燥 ( 例如， 风干 )， 得到 IIIC 型。
IIIC 型的代表性的 XRPD 在图 28 中提供。XRPD 中观察到的代表性的峰在下表 8 中提供 ：
表8： 所收集的 IIIC 型的 XRPD 数据的峰列表
角 2-θ° 7.0 13.3 14.1 14.7 16.5 18.5d值 埃 12.53374 6.6372 6.28705 6.00595 5.37128 4.7822541强度 ％ 100 4.6 6.7 4.5 15.3 5.8Pick*101925597 A CN 101925599说19.5 20.8 21.2 23.1 23.6 4.53932 4.2649 4.19497 3.8404 3.77215明书5.2 12 11.8 5.8 4.2 * *27/51 页如用 DSC 所观察， IIIC 型的特征在于 Tm 为约 235℃。
化合物 1 及其固体形式的使用方法
本文所述的化合物 1 的固体形式一般用于体内控制细菌感染。可以通过本发明的 组合物和方法控制的细菌有机体的例子包括但不限于下列有机体 ： 肺炎链球菌、 化脓链球 菌、 粪肠球菌、 屎肠球菌、 肺炎克雷伯菌、 肠杆菌属、 变形杆菌属、 绿脓杆菌、 大肠杆菌、 粘质 沙雷氏菌、 金黄色葡萄球菌、 凝固酶阴性葡萄球菌、 流感嗜血杆菌、 炭疽杆菌、 肺炎支原体、 粘膜炎莫拉菌、 肺炎衣原体、 嗜肺军团病杆菌、 结核分枝杆菌、 幽门螺旋杆菌、 腐生性葡萄球 菌或表皮葡萄球菌。
化合物 1 的固体形式， 例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型， 例如包含化合 物 1 的固体形式的组合物， 可以用于治疗革兰氏阳性感染。例如， 该组合物可以是固体、 液 体 ( 例如， 混悬液 ) 或注射液 ( 例如， 化合物 1 的一种形式溶于液体， 而以静脉注射形式施 用 ) 组合物。 包含化合物 1 的组合物可以与其他抗生素联合施用， 所述抗生素例如是天然青 霉素、 耐青霉素酶青霉素、 抗假单胞菌青霉素、 氨基青霉素、 第一代头孢菌素、 第二代头孢菌 素、 第三代头孢菌素、 第四代头孢菌素、 碳青霉烯、 头霉素、 单酰胺菌素、 喹诺酮、 氟喹诺酮、 氨基糖苷、 大环内酯、 酮内酯、 四环素、 糖肽、 链阳性菌素、 噁唑烷二酮、 利福霉素或磺胺甲噁 唑。包含化合物 1 的固体形式例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型的组合物可以口 服， 其他抗生素， 例如天然青霉素、 耐青霉素酶青霉素、 抗假单胞菌青霉素、 氨基青霉素、 第 一代头孢菌素、 第二代头孢菌素、 第三代头孢菌素、 第四代头孢菌素、 碳青霉烯、 头霉素、 单 酰胺菌素、 喹诺酮、 氟喹诺酮、 氨基糖苷、 大环内酯、 酮内酯、 四环素、 糖肽、 链阳性菌素、 噁唑 烷二酮、 利福霉素或磺胺甲噁唑可以静脉注射施用。
化合物 1 的固体形式， 例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型， 例如包含化合 物 1 的固体形式的组合物， 可以用于治疗革兰氏阴性感染。例如， 该组合物可以是固体、 液 体 ( 例如， 混悬液 ) 或注射液 ( 例如， 化合物 1 的一种形式溶于液体， 而以静脉注射形式施 用 ) 组合物。包含化合物 1 的组合物可以与其他抗生素联合施用， 所述抗生素选自 ： 天然青 霉素、 耐青霉素酶青霉素、 抗假单胞菌青霉素、 氨基青霉素、 第一代头孢菌素、 第二代头孢菌 素、 第三代头孢菌素、 第四代头孢菌素、 碳青霉烯、 头霉素、 单酰胺菌素、 喹诺酮、 氟喹诺酮、 氨基糖苷、 大环内酯、 酮内酯或四环素。包含化合物 1 的固体形式例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型的组合物可以口服， 其他抗生素， 例如天然青霉素、 耐青霉素酶青霉素、 抗假单胞菌青霉素、 氨基青霉素、 第一代头孢菌素、 第二代头孢菌素、 第三代头孢菌素、 第四 代头孢菌素、 碳青霉烯、 头霉素、 单酰胺菌素、 喹诺酮、 氟喹诺酮、 氨基糖苷、 大环内酯、 酮内
酯或四环素也可以是口服的。或者， 其他治疗剂可以静脉注射施用。
本文所述的化合物 1 的固体形式用于， 例如控制、 治疗或减轻医源性或非医源性 感染的发展、 严重度或作用。医源性感染应用的例子包括但不限于泌尿道感染、 肺炎、 手术 伤口感染、 骨和关节感染、 及血流感染。非医源性应用的例子包括但不限于泌尿道感染、 肺 炎、 前列腺炎、 皮肤和软组织感染、 骨和关节感染、 腹腔内感染、 脑膜炎、 脑脓肿、 感染性腹泻 和胃肠道感染、 外科手术预防以及发热性中性白细胞减少症患者的治疗。 术语 “非医源性感 染” 也称作社区获得性感染。
根据另一个实施方案， 本发明的方法用于治疗兽医学领域的患者， 包括但不限于， 动物园动物、 实验室动物、 人类陪伴动物， 以及农场动物， 包括灵长类、 啮齿类、 爬行类和鸟 类。所述动物的例子包括但不限于， 豚鼠、 仓鼠、 沙鼠、 大鼠、 小鼠、 兔、 狗、 猫、 马、 猪、 绵羊、 牛、 山羊、 鹿、 猕猴、 猴、 罗望子 (tamarinds)、 猿、 狒狒、 大猩猩、 黑猩猩、 猩猩、 长臂猿、 鸵鸟、 小鸡、 火鸡、 鸭和鹅。
本发明的药物组合物包含本文所述的化合物 1 的固体形式例如， IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型和药学可接受的载体。这些组合物任选可以包含其他治疗剂。所 述治疗剂包括但不限于， 抗生素、 抗炎剂、 基质金属蛋白酶抑制剂、 脂氧合酶抑制剂、 细胞因 子拮抗剂、 免疫抑制剂、 抗癌剂、 抗病毒剂、 细胞因子、 生长因子、 免疫调节剂、 前列腺素或抗 血管过度增殖化合物。 术语 “药学可接受的载体” 是指非毒性载体， 可以与本发明的化合物一起施用于患 者， 而不会破坏后者的药理学活性。
在本发明的药物组合物中可以使用的药学可接受的载体包括但不限于， 离子交换 剂、 氧化铝、 硬脂酸铝、 卵磷脂、 血清蛋白质类例如人血清白蛋白、 缓冲物质例如磷酸盐、 甘 氨酸、 山梨酸、 山梨酸钾、 饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、 水、 盐、 或电解质类例如硫酸 鱼精蛋白、 磷酸氢二钠、 磷酸氢钾、 氯化钠、 锌盐、 胶体硅、 三硅酸镁、 聚乙烯吡咯烷酮、 纤维 素类物质、 聚乙二醇、 羧甲基纤维素钠、 聚丙烯酸酯类、 蜡类、 聚乙烯 - 聚氧丙烯 - 嵌段聚合 物、 羊毛脂和自乳化药物递送系统 (SEDDS) 例如 α- 生育酚、 聚乙二醇 1000 琥珀酸酯或其 他类似的聚合物递送基质。
在仅包含本文所述的化合物 1 的固体形式例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型作为活性成分的药物组合物中， 施用这些组合物的方法还包括给患者施用其他药物的步 骤。这些药物包括但不限于， 抗生素、 抗炎剂、 基质金属蛋白酶抑制剂、 脂氧合酶抑制剂、 细 胞因子拮抗剂、 免疫抑制剂、 抗癌剂、 抗病毒剂、 细胞因子、 生长因子、 免疫调节剂、 前列腺素 或抗血管过度增殖化合物。
术语 “药学有效量” 是指有效治疗或改善患者细菌感染的量。术语 “预防有效量” 是指有效预防或基本上减轻患者细菌感染的量。
本发明的化合物可以以常规方式用于控制体内细菌感染水平， 并治疗疾病或减轻 细菌介导的作用的发展或严重度。 本领域普通技术人员可以由可用的方法和技术选择这些 治疗方法、 它们的给药水平和需要。
例如， 可以以药学可接受的方式并以有效减轻感染或疾病严重度的量， 将本文所 述的化合物 1 的固体形式例如， IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型与药学可接受的佐 剂联合施用于患有细菌感染或疾病的患者。
可替代地， 本文所述的化合物 1 的固体形式， 例如， IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型可以在用于在较长时间治疗或保护个体免受细菌感染或疾病危害的组合物和方法 中使用。这些化合物可以单独或与本发明的其他化合物一起， 以与药物组合物中酶抑制剂 的常规用法相符的方式使用在组合物中。例如， 本发明的化合物可以与常规用于疫苗的药 学可接受的佐剂组合， 以预防有效量施用， 从而保护患者在较长时间免受细菌感染或疾病 的危害。
化合物 1 的固体形式， 例如， IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型也可以与其他 抗生素联合施用， 以增强治疗或预防各种细菌感染的效果。当本发明的化合物与其他药物 在联合治疗中施用时， 它们可以相继或同时施用于患者。 可替代地， 本发明的药物组合物或 预防性组合物包含本文所述的化合物 1 的固体形式和另一种治疗性或预防性药物的组合。
本发明的药物组合物可以口服、 胃肠外、 通过吸入喷雾、 局部、 通过眼用溶液或软 膏、 经直肠、 鼻、 舌下、 阴道或通过植入型药盒施用。 本发明的药物组合物可以包含任何常规 的无毒性药学可接受的载体、 佐剂或赋形剂。在一些情况下， 可以用药学可接受的酸、 碱或 缓冲液调节制剂的 pH， 以增强所配制化合物或其递送形式的稳定性。本文使用的术语 “胃 肠外” 包括皮下、 皮内、 静脉内、 肌内、 关节内、 滑膜内、 胸骨内、 鞘内、 创口内和颅内注射或输 注技术。
药物组合物可以是无菌可注射制剂的形式， 例如作为无菌可注射水或油性混悬 液。该混悬液可以根据本领域已知的技术， 使用适当的分散剂或湿润剂 ( 例如， 吐温 80) 和 助悬剂来配制。 无菌可注射制剂也可以是在非毒性胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌 可注射溶液或混悬液， 例如在 1， 3- 丁二醇中的溶液。可以使用的可接受的载体和溶剂是甘 露醇、 水、 林格溶液和等渗氯化钠溶液。 此外， 无菌不挥发性油一般用作溶剂或助悬介质。 为 此， 可以使用任何刺激性小的不挥发性油， 包括合成型甘油一或二酯。 脂肪酸例如油酸及其 甘油酯衍生物可以用于注射剂的制备， 例如天然型药学可接受的油， 例如橄榄油或蓖麻油， 特别是它们的聚氧乙基化形式。这些油性溶液或混悬液也可以包含长链醇稀释剂或分散 剂， 例如在 Pharmacopeia Helvetica 中描述的那些或类似的醇。
本发明的药物组合物可以以任何口服可接受的剂型口服， 这些剂型包括但不限 于， 胶囊、 片剂及水性混悬液和溶液。在口服使用片剂的情况中， 一般使用的载体包括乳糖 和玉米淀粉。典型地也加入润滑剂例如硬脂酸镁。对于胶囊形式的口服， 有用的稀释剂包 括乳糖和干玉米淀粉。 当口服水性混悬液、 溶液和丙二醇时， 将活性成分与乳化剂和助悬剂 组合。如果需要， 可以加入某些甜味和 / 或调味和 / 或着色剂。
本发明的药物组合物也可以以栓剂的形式直肠给药。制备这些组合物， 包括将本 发明的化合物与适当的在室温下是固体但在直肠温度下是液体的无刺激性赋形剂混合， 因 此在直肠中熔化， 释放出活性组分。这些物质包括但不限于， 可可脂、 蜂蜡和聚乙二醇。
当所需的治疗涉及局部应用于易接近的区域或器官时， 局部施用本发明的药物组 合物是特别有用的。对于皮肤的局部应用， 应当用包含悬浮或溶解于载体中的活性组分的 适当软膏配制该药物组合物。 用于局部施用本发明化合物的载体包括但不限于， 矿物油、 液 体石蜡、 白矿物油、 丙二醇、 聚氧乙烯聚氧丙烯化合物、 乳化蜡和水。可替代地， 可以用适当 的包含悬浮或溶解于载体中的活性化合物的洗剂或乳膏来配制该药物组合物。 适当的载体 包括但不限于， 矿物油、 脱水山梨醇单硬脂酸酯、 聚山梨酯 60、 十六烷基酯蜡、 鲸蜡硬脂醇、2- 辛基十二烷醇、 苯甲醇和水。本发明的药物组合物也可以通过直肠栓剂或适当的灌肠剂 局部应用于下肠道。局部施用的透皮贴剂也包括在本发明内。
本发明的药物组合物可以通过鼻腔喷雾或吸入剂施用。 这些组合物是根据药物制 剂领域公知的技术制备的， 可以使用苯甲醇或其他适当的防腐剂、 用以提高生物利用度的 吸收促进剂、 氟碳化合物和 / 或本领域已知的其他增溶剂或分散剂， 制备成盐水中的溶液。
对于预防和治疗由细菌例如肺炎链球菌、 化脓链球菌、 粪肠球菌、 屎肠球菌、 肺炎 克雷伯菌、 肠杆菌属、 变形杆菌属、 绿脓杆菌、 大肠杆菌、 粘质沙雷氏菌、 金黄色葡萄球菌、 凝 固酶阴性葡萄球菌、 流感嗜血杆菌、 炭疽杆菌、 肺炎支原体、 粘膜炎莫拉菌、 肺炎衣原体、 嗜 肺军团病杆菌、 结核分枝杆菌、 幽门螺旋杆菌、 腐生性葡萄球菌或表皮葡萄球菌导致的细菌 感染的单一治疗， 活性成分化合物的剂量水平约 0.01- 约 100mg/kg 体重 / 日， 优选 0.5- 约 75mg/kg 体重 / 日， 最优选约 1-50mg/kg 体重 / 日是特别有用的。
典型地， 本发明的药物组合物是每天 1-5 次施用的， 或者可替代地， 连续输注。这 种施用可以用于慢性或急性治疗。 可以与载体物质组合产生单独剂型的活性成分的量可以 各不相同， 这取决于所要治疗的宿主和具体的施用方式。典型的制剂包含约 5％ - 约 95％ 的活性化合物 (w/w)。优选地， 该制剂包含约 20％ - 约 80％的活性化合物。
当本发明的组合物包含化合物 1 的固体形式， 例如 IA、 IIA、 IIB、 IIC、 IID、 IIIB 或 IIIC 型与一种或多种其他治疗或预防剂的组合时， 该化合物和其他药物应当以在单一治疗 方案常用剂量的约 10％ -80％的剂量水平存在。
随着患者情况的改善， 如果必要， 可以施用本发明的化合物、 组合物或组合的维持 剂量。然后， 可以调节剂量、 剂型或施用频率， 或者都进行调节。但是在一些情况中， 由于任 意的复发或疾病症状， 患者需要长期的间歇治疗。
也可以要求比上述更低或更高的剂量。任意特定患者的具体剂量和治疗方案将 取决于各种因素， 包括所使用具体化合物的活性、 年龄、 体重、 一般健康状况、 性别、 饮食、 施 用时间、 清除速率、 药物组合、 疾病的严重度和阶段、 以及患者对疾病的看法、 主治医师的判 断。
本发明的一个实施方案提供了一种在患者中治疗或预防细菌感染或疾病的方法， 包括给该患者施用本文所述的任意化合物、 药物组合物或组合和药学可接受的载体的步 骤。
实施例
实施例 1 ： 化合物 6， IA 型的合成
用下面提供的合成路线和实验制备化合物 6， IA 型。如在合成路线后提供的实验， 通过从水溶液中沉淀合成的产物 ( 即， 中和水溶液 ) 来提供 IA 型。
在下面整个实验过程中使用的分析方法包括 ：
(A)HPLC， 在 Waters XBridge Phenyl 柱上， 4.6x75mm， 3.5 微米。 流动相 A 是水 /1M 甲酸铵， pH 7.0(99 ∶ 1)。流动相 B 是 ACN/ 水 /1M 甲酸铵， pH 7.0(90 ∶ 9 ∶ 1)。在 10-12 分钟为 10-100％ B 的梯度。流速 1.2mL/ 分钟。在 UV 245nm 检测。T ＝ 30℃。
(B)LC， 在 Agilent RP18 上， 4.6x250mm 柱。流动相 ACN/H2O/TFA(60 ∶ 40 ∶ 0.1)。 在 265nm 检测。流速 1.0mL/ 分钟。运行时间 22 分钟。
(C)GC， 在 HP-5 柱上。使用 H2 作为载气， 温度梯度为 8-2-10-240。流速 1.4mL/ 分钟。运行时间 24 分钟。
(D)HPLC， 在 Altima C18 4.6x250mm 柱上。流动相 ACN/H2O(7 ∶ 3)。在 220nm 检 测。流速 1.0mL/ 分钟。环境温度。运行时间 21 分钟。
(E) 同 (D)， 流动相 ACN/H2O/TFA(70 ∶ 30 ∶ 0.1)， 在 250nm 检测。
(F)LC， 在 Agilent HC-C18 4.6x250mm 柱上。 流动相 ACN/H2O/TFA(50 ∶ 50 ∶ 0.1)。 在 250nm 检测。流速 1.0mL/ 分钟。环境温度。运行时间 25 分钟。
(G) 同 (E)， 但流速较低， 为 0.8ml/ 分钟， 流动相 70 ∶ 30 ∶ 0.1％。
(H)GC， 在 J&W DB-1 柱上， 60mx0.32mm i.d.， 膜厚度 3.0mm。载气为 He。运行时间 17.0 分钟。初始温度为 40℃， 保持在 40℃共 5 分钟。加热至 100℃ (10℃ / 分钟 )， 然后加 热至 240℃ (35℃ / 分钟 )， 保持在 240℃共 2 分钟。柱流速 2.5mL/ 分钟氦气 ( 恒定 )。FID 检测器。分流比 30 ∶ 1。
下列定义描述了本文使用的术语和缩写 ：
Ac 乙酰基
Bu 丁基
Et 乙基
Ph 苯基
Me 甲基
THF 四氢呋喃
DCM 二氯甲烷
CH2Cl2 二氯甲烷
EtOAc 乙酸乙酯
CH3CN 乙腈
EtOH 乙醇
MeOH 甲醇
MTBE 甲基叔丁基醚
DMF N， N- 二甲基甲酰胺
DMA N， N- 二甲基乙酰胺
DMSO 二甲亚砜
HOAc 乙酸
TFA 三氟乙酸
Et3N 三乙胺
DIPEA 二异丙基乙胺
DIEA 二异丙基乙胺
K2CO3 碳酸钾
Na2CO3 碳酸钠
Cs2CO3 碳酸铯
NaHCO3 碳酸氢钠
NaOH 氢氧化钠
Na2SO4 硫酸钠K3PO4 磷酸钾
NH4Cl 氯化铵
LC/MS 液相色谱 / 质谱
HPLC 高效液相色谱
GC 气相色谱
LC 液相色谱
Hr 或 h 小时
aTm 大气压
rt 或 RT 室温
TLC 薄层色谱
HCl 盐酸
H2O 水
EtNCO 异氰酸乙酯
Pd/C 钯碳
NaOAc 乙酸钠
H2SO4 硫酸
N2 氮气
H2 氢气
n-BuLi 正丁基锂
Piv 新戊酰基
DI 去离子
Pd(OAc)2 乙酸钯 (II)
PPh3 三苯膦
i-PrOH 异丙醇
NBS N- 溴琥珀酰亚胺
Pd[(Ph3)P]4 四 ( 三苯膦 ) 钯 (II)
PTFE 聚四氟乙烯
NLT 不小于
NMT 不超过
rpm 每分钟转数
SM 原料
Equiv. 当量 1
H-NMR 质子核磁共振 13
ss C-NMR 固体碳核磁共振
TGA 热重分析法
DSC 差示扫描量热法
MIK 甲基异丙基酮
本文使用的其他缩写、 符号和约定与当代科学文献中所使用的那些是一致的。参 见， 例如， Janet S.Dodd， ed.， The ACS Style Guide ： A Manual for Authors and Editors，第 2 版， Washington， D.C. ： American Chemical Society， 1997， 将它们以整体通过参考引 入本文。
合成路线 1 ：
在合成路线 1 中， 化合物 2 是由 3- 溴 -5- 氟吡啶 ( 下面的合成路线 3) 制备的， 或 者可替代地， 是市购的 ( 例如， HonestJoy(CAS#719268-92-5))。化合物 3 可以根据下面的 合成路线 4 和下面描述的实验方法制备。可替代地， 化合物 3 可以根据 WO 05/012292 所述 的方法制备， 将其通过参考引入本文。 在适当的温度 ( 例如， 40℃～ 120℃ ) 下， 使用适当的 过渡金属催化剂 ( 例如， 乙酸钯 (II))、 适当的膦催化剂 ( 例如， 三苯膦 ) 和适当的相转移 催化剂 ( 例如， 溴化十六烷基三甲基铵 )， 将式 2 的硼酸酯与式 3 的芳基溴在无机碱 ( 例如 碱金属的碱例如碳酸钾或磷酸钾 ) 的水溶液和适当的有机溶剂 ( 例如， 1， 2- 二甲氧基乙烷 或乙醇 ) 的双相混合物中交叉偶联， 得到式 4 的化合物。在还原条件 ( 例如， 在钯催化剂存 在下、 在适当的氢气气氛 ) 下， 在适当的溶剂 ( 例如， N， N- 二甲基乙酰胺 ) 中将式 4 化合物 的硝基转化为苯胺， 得到所需的式 5 的二胺。在适当的温度 ( 例如， 40℃～ 120℃ ) 下， 式5 的二胺的酸性水溶液 ( 例如， 乙酸钠溶于水， 用适当的酸例如浓硫酸将 pH 调节至 3-4) 与在 有机溶剂 ( 例如， 1， 2- 二甲氧基乙烷 ) 中的式 8 化合物的溶液反应， 得到化合物 1。化合物 8 可以根据下面的合成路线 2 和下面所述的实验方法制备。
合成路线 2 ：
在合成路线 2 中， 制备式 8a 的异硫脲， 包括将在适当溶剂 ( 例如， 丙酮 ) 中的式 8c 的硫脲加入到在适当溶剂 ( 例如， 丙酮 ) 中的式 8d 的溴化物的混合物中。在水和有机溶剂 ( 例如， 1， 2- 二甲氧基乙烷 ) 的适当混合物中， 用过量的异氰酸乙酯处理式 8a 的异硫脲， 得 到式 8 的假硫脲。
合成路线 3 ：
在合成路线 3 中， 制备式 2b 的硼酸， 包括在硼酸酯 ( 例如， 硼酸异丙酯 ) 的存在 下， 在适当的疏质子溶剂 ( 例如， 四氢呋喃 ) 中将市购的式 2a 的 3- 溴 -5- 氟吡啶与强锂碱 ( 例如， 正丁基锂 ) 反应。然后用无机酸水溶液 ( 例如， 9％ HCl 水溶液 ) 使中间体硼酸酯 混合物停止反应并水解， 得到硼酸 2b。随后， 在 80℃～ 150℃的较高温度下， 在适当的溶剂 ( 例如， 甲苯 ) 中， 用频哪醇酯化式 2b 的硼酸， 得到式 2 的化合物。
合成路线 4 ：
至于合成路线 4， 制备式 3b 的新戊酰胺， 包括在 -20℃～ 25℃的温度下， 在适当的 碱 ( 例如， 有机叔胺碱例如三乙胺 ) 存在下， 在适当的疏质子溶剂 ( 例如， 二氯甲烷 ) 中用
新戊酰氯处理式 3a 的溴苯胺。实现式 3c 的相应的硼酸的制备， 包括在适当的疏质子溶剂 ( 例如， 四氢呋喃 ) 中将式 3b 的溴化物与强锂碱 ( 例如， 正丁基锂 ) 反应， 然后在适当的温 度 ( 例如， -45℃～ -100℃ ) 下加入适当的硼酸酯 ( 例如硼酸异丙酯 )。制备二芳基中间体 3d， 包括在适当的温度 ( 例如， 25℃～ 120℃ ) 下， 使用适当的过渡金属催化剂 ( 例如， 四(三 苯膦 ) 钯 (0))， 将硼酸 3c 与 2- 氯嘧啶在无机碱 ( 例如碱金属的碱例如碳酸钠 ) 的水溶液 和适当的有机溶剂 ( 例如， 乙二醇二甲醚 ) 的二相混合物中发生交叉偶联反应。然后在适 当的温度 ( 例如， 25℃～ 80℃ ) 下， 在冰乙酸中用适当的溴化剂 ( 例如， NBS 或 N- 溴琥珀酰 亚胺 ) 溴化式 3d 的化合物， 得到式 3e 的芳基溴。完成 3e 的硝化， 包括在适当的酸 ( 例如， 硫酸 ) 中将 3e 的冷水溶液 ( 例如， -20℃～ 10℃ ) 与硝酸反应， 得到式 3f 的化合物。在适 当的温度 ( 例如， 30℃～ 120℃ ) 下， 在有机溶剂 ( 例如， 无水乙醇 ) 中用适当的酸 ( 例如， 盐酸 ) 实现对新戊酰保护基的去除， 得到式 3 的化合物。
实验方法 ：
5- 氟吡啶 -3- 硼酸 (2b) 的制备 ：
将 3- 溴 -5- 氟吡啶 (2a)(25kg， 142 摩尔， 1.0 当量 )， THF(222.5kg) 和硼酸异丙酯 (28kg， 149.3 摩尔， 1.05 当量 ) 加入到 700L 低温反应器中。在搅拌的同时将所得混合物冷 却至 -90℃～ -80℃。然后在将温度保持在 -87℃以下的同时滴加 (2kg/h)n-BuLi(40.2kg， 2.5M， 142 摩尔， 1.0 当量 )。在加入完成后， 将该混合物保持在 -88 ～ -83 ℃下 2.5 小时。 当通过 HPLC 分析确认反应完成后， 加入 9 ％ HCl 水溶液 (7.7kg) 使反应停止。将该混合 物转移到 1000L 玻璃衬里的反应器中， 将温度恢复至 -20 ～ -10℃。然后再加入 HCl 溶液 (122.3kg)， 直至 pH 调节至 1-2， 同时保持温度为 0 ～ 10℃。然后将该混合物静置 0.5 小时 以使其分层。分离有机层， 用饱和盐水 (38kg) 洗涤。搅拌 0.5 小时， 然后再静置 0.5 小时 以分层。分离水层， 用 EtOAc 将合并的水层萃取两次 (51+25kg)。分离有机相， 用 30％ NaOH 水溶液 (27.4kg) 调节 pH 值为 6。在该 pH 下沉淀出了固体。离心过滤该浆体， 并在 40 ～ 45℃下在盘式干燥器中干燥。得到呈白色固体的标题化合物 (2b)(17.5kg， 87.4％， 纯度 ： 98.6％ AUC， 使用方法 B)。
5- 氟吡啶 -3- 硼酸频哪醇酯 (2) 的制备 ：
向 1000L 玻璃衬里的反应器中加入甲苯 (20L/kg)， 然后加入 5- 氟吡啶 -3- 硼酸 (2a)(19.45kg， 138 摩尔， 1.0 当量 ) 和频哪醇 (16.3kg， 138 摩尔， 1.0 当量 )。将所得混 合物加热至 114-118℃， 并在相同温度下保持 21 小时。通过 TLC 监测反应， 直至检测不到 SM。然后将该混合物冷却至 80℃， 并继续冷却至 20-25℃。在该点用真空过滤器过滤。在 T ≤ 80℃且 P ＜ -0.08MPa 下真空浓缩滤液， 直至蒸馏不出馏分。然后在将该混合物冷却至 60℃， 加入环己烷 (27.4kg)， 并在相同条件下再次蒸发该混合物， 直至观察不到蒸馏。保持 温度为 55-65℃， 加入异丙醇 (20.8kg)， 将所得混合物加热至 70-80℃， 使产物在 5-15℃下 结晶 12 小时。过滤所得浆体， 将滤饼在 37-43℃下在盘式干燥器上干燥， 得到呈白色固体 的产物 (25kg， 81.2％， 纯度 ： 98％ AUC， 通过方法 C 确定 )。产物 (2) 的典型保留时间是 9.6 分钟。 1
H NMR(CDCl3， 300MHz) ： δ8.75(1H， s)， 8.53(1H， d)， 7.75(1H， m)， 1.96(12H， s) ppm。
2-(4- 硝基苄基 ) 异硫脲氢溴化物 (8a) 的制备 ：在氮气氛下， 将硫脲 (8c)(1.55kg) 和丙酮 (30L) 加入到 72-L 反应器中。搅动该 混合物。向另一个烧瓶中加入 4- 硝基苯基甲基溴 (8d)(4.00kg) 和丙酮 (15L)。搅拌该混 合物， 直至该溴化物溶解 ( 可能需要加热 )。将该溴化物溶液加入到硫脲的混合物中， 保持 温度在 40℃以下。在 30 分钟内形成了稠密溶液。在搅拌 2 小时后， 该混合物的 HPLC 分析 表明＞ 99％已经转化。过滤该混合物， 用 1 ∶ 1 的 MTBE ∶丙酮溶液 (8L) 冲洗滤饼。干燥 该固体， 得到呈白色固体的 5.09kg(93％收率 ) 的所需产物 (8a)。
N， N- 二乙基脲氨 -2-(4- 硝基苄基 )-2- 硫代假脲 (8) 的制备 ：
将 2-(4- 硝基苄基 ) 异硫脲氢溴化物 (8a)(748g， 2.56 摩尔， 1.0 当量 )、 水 (1.0L， 1.4vol) 和 DME(2L， 2.8L) 装入到 10L morton 烧瓶中， 该烧瓶配有顶置式搅拌器和热电偶。 向该澄清的黄色溶液中加入异氰酸乙酯 (800mL， 10.2 摩尔， 4.0 当量 )， 在 15-25℃下将所 得二相混合物 (EtNCO 层和水 /DME 层 ) 剧烈搅拌 21-24 小时。在反应结束时， 该混合物包 括澄清且无色的水上层和澄清且黄色的有机下层。除去水层， 并向该 Morton 烧瓶中加入 DME(2L， 2.8vol)， 然后在 35-40℃下减压浓缩至 2.8vol。再重复该蒸馏 1 次， 然后将包含式 (8) 化合物的剩余混合物直接用于下一步骤。在进行下一步骤前， 分析该混合物 ( 方法 H) 以确保所有异氰酸酯已被除去 ( 如果不是这样， 需要再进行蒸馏 )。
N， N- 二乙基脲氨 -2-(4- 硝基苄基 )-2- 硫代假脲 (8) 的可替代分离法 ：
向 2-(4- 硝基苄基 ) 异硫脲氢溴化物 (8a)(2.15g， 7.33mmol) 的 pH 7.0 缓冲溶液 (3.0mL) 的混悬液和 1， 2- 二甲氧基乙烷 (4.0mL) 中加入异氰酸乙酯 (2.40mL， 30.6mmol)。 将该二相溶液搅拌 18 小时， 在该点观察到了白色混悬液。过滤该固体。用水洗涤该滤饼， 然后用乙醚洗涤， 在风干后得到呈白色固体的标题化合物 (8)(1.76g， 68％ )。标题化合物 存在旋转异构体的混合物。 1
H NMR ： δ12.00(bs， 1NH)， 8.15(d， 2H， J ＝ 8.1Hz)， 7.95(bs， 1NH)， 7.69(d， 2H， J＝ 8.3Hz)， 7.64(app t， 1NH)， 4.29(s， 2H)， 3.10(5 重峰， 2H， J ＝ 6.6Hz)， 3.01(5 重峰， 2H， J＝ 7.0Hz)， 1.07(t， 3H， J ＝ 7.1Hz)， 1.00(t， 3H， J ＝ 7.2Hz)ppm。
N-(2- 溴苯基 ) 新戊酰胺 (3b) 的制备 ：
在 0℃下， 将 DCM(670Kg) 和 Et3N(76.4Kg) 加入到 1000L 玻璃衬里的反应器中。然 后在搅拌下加入 2- 溴苯胺 (3a)(100Kg， 581 摩尔， 1.0 当量 )。 将所得混合物冷却至 0-10℃， 并在保持相同温度的同时滴加 (5kg/h) 新戊酰氯 (77.1kg， 640 摩尔， 1.1 当量 )。将该混 合物在该温度下搅拌 1 小时 25 分钟。通过 HPLC 监测反应进程。当确认反应完成时， 以 2kg/ 分钟的速度加入 5％ Na2CO3 的水溶液 (120kg) 使反应停止。加入后， 将该混合物搅拌 1.5 小时， 测定 pH 值为 7-8。将反应放置 20-30 分钟， 分离出有机相。水层用 DCM 萃取 2 次 (60x2kg)。在每次萃取期间， 将该二相混合物搅拌 15-20 分钟， 然后静置在 15 ～ 20℃以使 其分层。合并所有的有机层， 加入 3％ HCl 水溶液 (251.8kg)， 调节 pH 值为 5-6。然后分离 水层， 用饱和 NaHCO3(150L) 洗涤有机层。在洗涤期间， 将该二相混合物搅拌 30 分钟， 静置 30 分钟。分离有机相， 搅拌下用 Na2SO4(50kg) 干燥 13 小时。用 50L 真空过滤器真空过滤所 得浆体。滤饼用 DCM 洗涤 2 次 (25kgx2)。在大气压和 T ≤ 50℃下， 蒸发浓缩滤液， 直至不 再蒸馏出溶剂。然后在 65-70℃下再一次真空 (P ≤ MPa) 蒸发浓缩。在浓缩后， 将该混合物 冷却至 55-60℃， 加入 THF(993kg)。然后在上述相同条件下再蒸发浓缩该混合物。使用方 法 F， 通过 GC 监测 DCM 的含量， 直至＜ 0.1％。在 N2 下将该混合物冷却至 20-30℃， 然后通过硅胶 (8kg) 真空过滤以进行干燥。硅塞用 THF 洗涤 2 次 (20kgx2)， 得到粗 (3b) 的溶液， 将其转移到 200L 圆筒中， 用于下一步骤。原料 (3a) 的典型保留时间是 8.0 分钟， 产物 (3b) 是 8.9 分钟。
N-(2， 2- 二甲基 - 丙酰胺 )-1- 苯基 - 硼酸 (3c) 的制备 ：
在 N2 下， 在 1500L 钛反应器中， 将上述 N-(2- 溴苯基 ) 新戊酰胺 (3b) 的 THF(278kg) 溶液与 THF(102.7kg) 混合。在搅拌下， 将所得溶液冷却至 -65 ～ -70℃。然后在保持相同 的温度范围下， 滴加 n-BuLi(2.5M， 73.4kg， 2.4 当量 )(2.5/3.0kg/h)。在加入后， 将反应在 该温度下搅拌 45 分钟。然后加入剩余的 n-BuLi(73.4kg)， 在第二次加入后， 将该混合物 在 -60 ～ -70 ℃下搅拌 1 小时。通过 HPLC 监测反应， 直至检测到锂化比率＞ 96 ％。然后 在 -60 ～ -70℃下以 10-15kg/h 的速率加入硼酸异丙酯 (105.9kg， 563 摩尔， 2.6 当量 )。将 所得混合物在相同温度下搅拌 4 小时 20 分钟。通过 HPLC 监测反应， 直至完成。加入石油 醚 (241.2kg) 使反应混合物停止反应， 并将其加热至 0-5℃， 并在该温度下保持 2 小时。通 过洗涤、 离心过滤所得混合物， 搅拌下用饱和 NH4Cl 水溶液 (159kg) 洗涤该滤饼 1 小时。然 后再离心过滤该洗涤混合物， 在 T ≤ 35℃和 P ≤ -0.09MPa 下真空浓缩合并的滤液， 直至不 再蒸馏出馏分。将该混合物冷却至 27℃， 并再次离心。用水 (150kg) 洗涤该滤饼 0.5-1 小 时， 并再次离心。用 MTBE(114kg) 洗涤该滤饼 0.5-1 小时， 并离心过滤。在干燥后， 得到呈 灰白色固体的硼酸 (3c)(51kg， 98.6％ )。SM(3b) 的典型保留时间是 2.3 分钟。
N-(2- 嘧啶 -2- 基 ) 苯基 ) 新戊酰胺 (3d) 的制备 ：
在 N2 下， 向 500L 玻璃衬里的反应器中加入乙二醇二甲醚 (152.3kg， 5L/kg)。然 后在搅拌下加入 2- 氯嘧啶 (18.4kg， 160 摩尔， 1.01 当量 )， 然后加入 Pd[(Ph3)P]4(3.65kg， 3.2 摩尔， 0.02 当量 )。将所得混合物在 15-25℃下搅拌 20-30 分钟， 然后整份加入 N-(2， 2- 二甲基 -1- 丙酰胺 )- 苯基 - 硼酸 (3c)(35Kg 的产物， 包含 11kg 另外的盐， 158 摩尔， 1.0 当量 )。在加入后， 迅速加入 Na2CO3 水溶液 (132.8kg， 2M)， 将该混合物加热至 78-83℃， 并 回流 3h。使用方法 H 通过 HPLC 监测反应， 直至 SM(3c) ＜ 3％。然后将该混合物轻微冷却 至 70-75℃， 加入冷的纯净水 (5-10℃， 525kg) 使反应停止， 在 0-10℃下继续搅拌 1-2 小时。 然后离心过滤该混合物， 用纯净水洗涤滤饼。合并 4 批次 ( 规模为 7， 35 和 35kg) 的湿润 产物， 在盘式干燥器上干燥 1 周， 然后在旋转式圆锥形干燥器上干燥， 但是仍有一些水 ( 至 少 3％重量 ) 无法除去。得到呈黄色湿润固体的标题化合物 (3d)(157kg， ＞ 100％， 纯度＞ 98％， 通过方法 F 确定 )。该产物的典型保留时间是 15.9 分钟。
N-(4- 溴 -2-( 嘧啶 -2- 基 ) 新戊酰胺 (3e) 的制备 ：
将乙酸 (367.5kg) 装入到 500L 反应器中。然后加入 N-(2-( 嘧啶 -2- 基 ) 苯基 ) 新戊酰胺 (3d)(35kg 的产物， 包含水， 137.3 摩尔， 1.0 当量 )， 然后加入 NBS(26.9kg， 151.1 摩尔， 1.1 当量 )。将所得混合物加热至 50-55℃并搅拌 5 小时。通过 HPLC( 方法 I) 监测 反应进程， 直至 (3d) ＜ 2％。将反应液倒入预先冷却至 0-5℃的纯净水 (350kg) 中使反应 停止。搅拌下， 将该混合物保持在 0-10℃下 1-2 小时。然后离心过滤该混合物。将 3 批次 ( 分别为 35kg 的 3d) 的合并滤饼在搅拌下用纯净水洗涤 2 次 (550+500kg)， 共 0.5-1 小时。 在第二次离心过滤并干燥后， 得到呈淡黄色固体的标题产物 (3e)(105.6kg， 80％， 80％， 纯 度： 99.3％， 通过分析方法 G 确定 )。SM(3d) 的典型保留时间是 7.5 分钟， 产物 (3e) 是 15.1 分钟。N-(4- 溴 -2- 硝基 -6- 嘧啶 -2- 基 ) 苯基 ) 新戊酰胺 (3f) 的制备 ：
将水 (7.4Kg) 装入 200L 反应器中。在冷却至 0-5 ℃后， 在 T ≤ 30 ℃下加入浓 H2SO4(138kg， 98％， 3.77L/kg)。将所得混合物再冷却至 0-5℃， 分 4 份加入 N-(4- 溴 -2- 嘧 啶 -2- 基 ) 苯基 ) 新戊酰胺 (3e)(20kg， 59.8 摩尔， 1.0 当量 )， 同时保持温度恒定。在加入 后， 将该混合物在 5-10℃下搅拌 0.5-1 小时， 直至固体完全溶解。在冷却至 -10 ～ -5℃后， 保持该温度并滴加 (2kg/h)HNO3(12kg， 98％， 0.4L/kg)。在加入后， 将该混合物在相同温度 下搅拌 30 分钟。通过 TLC 监测反应进程， 直至检测不到 SM(3e)。在保持温度为 -10 ～ -0℃ 的同时， 通过将其倒入在 1000L 玻璃衬里的反应器中的碎冰 (280kg) 和自来水 (420kg) 的 混合物中来停止反应。 然后将该混合物保持在 0-10℃下 0.5-1 小时。 离心过滤该混合物， 洗 涤滤饼， 直至其 pH 为 6-7。将所得产物在 50-60℃下干燥。合并若干批次 ( 规模为 3x20kg) 的粗产物， 溶解于 DCM(469kg)， 搅拌下用 Na2SO4(25kg) 干燥 4 小时， 通过硅胶 (40kg) 加压过 滤。 硅塞用 DCM 洗涤 2 次 (90kgx2)。 在 T ＜ 50℃下真空浓缩合并的滤液， 以除去溶剂。 然后 加入石油醚 (141.7kg)， 在 40-50℃下再次浓缩该溶液， 直至蒸馏不出馏分。离心过滤所得 粗产物。合并滤饼， 得到呈浅灰棕色固体的标题化合物 (3f)(62kg， 91％， 纯度 ： ＞ 92.7％， 通过方法 G 确定 )。产物 (3f) 的典型保留时间是 11.3 分钟。
4- 溴 -2- 硝基 -6- 嘧啶 -2- 基 - 苯胺 (3) 的制备 ：
将 EtOH(87.4kg， 3.12kg/kg) 装入到 500L 容器中。 然后在搅拌下， 加入 HCl 的 EtOH 溶液 (168kg， 35 ％， 6kg/kg)。最后， 整份加入 N-(4- 溴 -2- 硝基 -6- 嘧啶 -2- 基 ) 苯基 ) 新戊酰胺 (3f)(28kg， 73.8 摩尔， 1.0 当量 )。在加入后， 将该混合物加热至 80-88℃， 并回 流 49 小时。通过 HPLC( 方法 I) 监测反应进程， 直至 (3f) ≤ 3％。再加入 HCl/EtOH 溶液 (50.5kg)， 将该混合物再继续回流 9.5 小时。将该混合物冷却至 30 ～ 40℃， 并倒入冷的纯 净水 (280kg) 中使反应停止。 离心过滤该混合物， 搅拌下， 用水洗涤滤饼 2 次 (450kgx2)， 共 1 小时。在 N2 和 40-50℃下， 干燥所得固体， 得到呈褐黄色固体的标题化合物 (3)(20.9kg， 96％， 纯度 ： 99.0％， 通过方法 G 确定 )。(3) 的典型保留时间是 10.1 分钟。 1
H NMR(CDCl3， 300MHz) ： δ9.00(1H， d)， 8.85(1H， d)， 8.46(1H， d)， 7.29(2H， m)ppm。
4-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-2- 硝基 -6-( 嘧啶 -2- 基 ) 苯胺 (4) 的制备 ：
3L 圆底烧瓶配有机械顶置式搅拌器、 回流冷凝器和温度计， 并用 N2 吹扫。加 入 3- 氟 -5-(4， 4， 5， 5- 四 甲 基 -1， 3， 2- 二 氧 杂 环 戊 硼 烷 -2- 基 ) 吡 啶 (2)(95.0g， 421mmol， 1.2 当 量 )， 4- 溴 -2- 硝 基 -6-( 嘧 啶 -2- 基 ) 苯 胺 (3)(104.55g， 354mmol， 1.0 当量 )， K3PO4(93.1g， 438mmol， 1.25 当量， Riede1-deHaen#S29375-366)， Pd(OAc)2(0.80g， 3.5mmol， 1mol ％， Aldrich#06410JE)， 十 六 烷 基 三 甲 基 溴 化 铵 (1.28g， 3.5mmol， 1mol ％， Aldrich#0823CE) 和 PPh3(3.74g， 14mmol， 4mol％， Fluka#1093859)， 然后加入 EtOH(10vol) 和水 (1.1vol)。剧烈搅拌 ( ＞ 300rpm) 该异质反应混合物， 并加热回流 (80℃ )。6 小时后， 取出样品， 用于分析反应是否完成 ( 方法 C)。在判断反应完成后， 将该混合物冷却至 30℃， 然后加入水 (10vol)， 将该反应搅拌 2 小时。 过滤所得浆体， 用水 (2x5vol) 和乙腈 (2x5vol) 洗涤滤饼。然后将滤饼再装回烧瓶中， 加入水 (10vol)。将该浆体在 30℃下搅拌 3 小时， 并 再次过滤。然后将滤饼转移到盘中， 在 60-80℃下真空干燥 12 小时， 得到呈桔色粉末的化 合物 (4)(104.87g， 88％， 纯度 ： 96.14％ AUC， 使用方法 A 确定 )。SM(2) 典型的保留时间是 7.9 分钟， 产物 (4) 是 6.9 分钟。5-(5- 氟吡啶 3- 基 )-3-( 嘧啶 -2- 基 ) 苯 -1， 2- 二胺 (5) 的制备 ：
向 配 有 Büchi 气 体 控 制 器 和 Huber 温 度 控 制 器 的 20L Büchi 氢 化 器 中 加 入 4-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-2- 硝基 -6-( 嘧啶 -2- 基 ) 苯胺 (4)(1095g， 3.581mol， 1.00 当量 )， 5％ Pd/C(438g， 50％湿度 ) 和 DMAc(N， N- 二甲基乙酰胺， 11.0L， 10vol)。 用氮气吹扫该反应 器 (3 次 )， 然后用氢气吹扫 (3 次 )。将反应温度设置为 23℃， 使用氢气将反应器的压力设 置为 50psi。以 1350rpm 搅动该该混合物。通过氢吸收曲线监测反应进程， 所述曲线在 1.7 小时后开始变平坦。再继续氢化 2 小时。用氮气吹扫该反应器 (3 次 )。取出等分部分， 通 过 HPLC( 方法 A) 分析， 得到 (4) 的 NMT 1％ AUC。再继续氢化 0.5 小时， 然后释放压力， 并 用 N2 吹扫 (3 次 )。通过硅藻土垫 (400g， 用 1.50L 的 DMAc 湿润 ) 和 #3 WhaTman 滤纸过滤 反应混合物。用 DMAc(1.10L) 洗涤该氢化器， 并通过硅藻土垫过滤。用 0.300L 的 DMAc 洗 涤滤饼。合并所得滤液， 并用活性炭处理 2 次 ( 每次 493g)。在第二次洗涤后， 过滤除去活 性炭， 通过 #3 滤纸过滤滤液。缓慢加入水 (20.0L)， 以保持温度为 NMT 40℃， 沉淀出黄色固 体。在室温下通过 #3WhaTman 滤纸过滤该浆体， 并用 6.0L 的水洗涤该黄色固体。在 60℃ 下在真空干燥箱中干燥该黄色固体， 得到呈白色粉末的标题化合物 (5)(671g， 68％， 99.2％ AUC， 使用方法 A)。SM(4) 的典型保留时间是 7.08 分钟， 产物 (5) 是 5.03 分钟。
1- 乙基 -3-(5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-7-( 嘧啶 -2- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 基 ) 脲 (6)， IA 型的制备 ：
将 NaOAc(1040g， 12.7 摩尔， 6.0 当量 ) 和水 (16L， 10.5vol) 装入到 22L Morton 烧 瓶中， 该烧瓶配有顶置式搅拌器、 pH 探针、 热电偶和两个回流冷凝器。该溶液的 pH 读数是 8.3。加入 H2SO4 的浓溶液 (328mL， 3.94 摩尔， 0.547vol)， 直至该溶液的 pH 读数是 3.5。然 后加入 5-(5- 氟吡啶 -3- 基 )-3-( 嘧啶 -2- 基 ) 苯 -1， 2- 二胺 (5)(600g， 2.13 摩尔， 1.0 当 量 )。然后向该黄色混悬液中直接加入上述实施例 3 得到的 (8)(1.2 当量 ) 的 DME 溶液。 剧烈搅拌 (200-250rpm) 该异质混合物， 并加热回流 (80℃ )。在反应过程中， 该黄色混悬 液首先转变成黑黄色混悬液， 然后变成了黄褐色混悬液。4 小时后， 将该反应混合物冷却至 22-35℃。过滤该黄褐色混悬液， 用水 (8x2L)、 EtOAc(5x4L) 洗涤滤饼， 在 40-50℃下真空干 燥， 得到呈浅褐色粉末的化合物 (6)(747g， 93％， 纯度 ： 99.32％ AUC， 通过方法 A)。典型保 留时间 ： 假异硫脲中间体 (8)7.3 分钟， 产物 (6)6.3 分钟， SM(5)5.4 分钟。
用下列分析方法评价 IA 型的各种物理特征 ：
X- 射线粉末衍射 (XRPD) ： IA 型的 XRPD 图是在室温下使用配有密封管放射源和 Hi-Star 区域检测器 (Bruker AXS， Madison， WI) 的 Bruker D8 Discover 系统， 以反射模式 记录的。X- 射线发生器是在 40kV 的电压和 35mA 的电流下操作的。将粉末样品置于零 - 背 景的硅片上。分别用 120 秒的暴露时间记录两个帧。然后在 3° -41° 2θ 的范围， 以步长 0.02°整合数据， 并合并到一个连续图中。IA 型的示例性的 XRPD 在图 2 中提供。
差示扫描量热法 (DSC) ： DSC 是在 IA 型的样品上， 使用 DSC 2920 差示扫描量热 计 (TA Instruments， New Castle， DE) 进行的。该仪器是用铟校准的。将约 1-2mg 的样品 在铝盘中称重， 该铝盘用没有小孔或有 4 个小孔的盖封闭。以 10 ℃ / 分钟的加热速率从 25℃ -275℃扫描 DSC 样品。通过 Thermal Advantage Q SeriesTM 软件收集数据， 并通过 Universal Analysis 软件 (TA Instruments， New Castle， DE) 分析。IA 型的代表性的 DSC 描迹线在图 3 中提供。在 DSC 数据中， 对应于 IA 型的熔化仅看到一个尖锐的吸热事件。熔点较高， 为～ 270℃。如 TGA 所观察， 熔化时化合物分解。
热重量分析 (TGA) ： 使用 Model Q500 热重量分析仪 (TAInstruments， New Castle， DE) 进行 TGA 测定。以 10℃ / 分钟的加热速率从 25℃ -300℃扫描重量约 3-5mg 的 IA 型样 品。通过 ThermalAdvantage Q SeriesTM 软件收集数据， 并通过 Universal Analysis 软件 (TA Instruments， New Castle， DE) 分析。IA 型的示例性的 TGA 描迹线在图 4 中提供。当 以 10℃ / 分钟的加热速率从室温至最高～ 175℃加热 IA 型粉末时， TGA 数据显示重量损失 为～ 0.8％。从～ 200℃开始， 样品重量的显著降低与样品的分解相关。与上述 DSC 数据的 比较表明， 当熔化时化合物分解。
动态蒸汽吸收 (DVS) ： 分级等温研究 (25℃ ) 是在 IA 型的代表性的样品中， 使用 VTI SGA 100 均衡性蒸汽吸收分析仪进行的。在开放的铂皿上称取约 10mg 的一份， 并在 25℃下暴露于不同的湿度水平。相对湿度 (RH) 的级别是从 5％ -95％ ( 吸收 ) 和以 5％ RH 为增量的从 95％ -5％ ( 解吸 )。平衡标准是 5 分钟内变化为 0.0100wt％， 最大平衡时间为 180 分钟。IA 型的示例性的 DVS 描迹线在图 5 中提供。在 95％相对湿度 (RH) 下， 样品吸收 了～ 8wt％水分。吸收的所有水都在解吸阶段被释放。该化合物没有形成水合物。这些数 据表明， 该化合物只有轻度的吸湿性。
ss13C-NMR ： IA 型的 ss13C-NMR 谱是用 4500Hz MAS 装置获得的， 在临放入样品前通 过使用六甲基苯收集光谱来归零。在运行样品前， 六甲基苯的甲基峰校准为 17.35ppm。IA 13 型的示例性的 ss C-NMR 谱在图 6 中提供。
溶解度 ： 在环境条件下确定 IA 型在各种介质中的溶解度， 通过在振荡床上使药 物粉末部分和溶剂保持平衡 24 小时来进行。离心样品， 然后分离药物的饱和溶液， 并通过 HPLC 分析。样品体积是 100μL， 靶浓度是 10mg/mL。适当稀释该饱和溶液， 并通过 HPLC 分 析。溶解度数据是用 HPLC 法获得的 (HPLC 柱 ： Waters C18， 3.5μm， 75mm ； 流速 1.7mL/ 分 钟， 流动相 ： A(85％水， 包含 0.1％ H3PO4) 和 B(15％乙腈， 包含 0.1％ H3PO4) 的混合物， 使用 梯度法 ： B 的 15-35％梯度， 共 6 分钟 ； 然后是 B 的 35-15％梯度， 共 30 秒 ； 然后保持 15％ B 1.5 分钟 ； 保留时间 ： 4.0 分钟， 波长 ： 284nm。下表 9 和 10 提供了 IA 型在各种示例性溶剂 系统中的代表性溶解度。表 9 和 10 提供的数据是代表性的。具体样品的不同批次之间可 能会有一定程度的差异， 例如， 约 10％。
表9： IA 型在各种水性和有机介质中的溶解度
*NA 是指由于技术问题， 用小 pH 探针没有检测出来。 表 10 IA 型在不同 pH 的 0.05M 缓冲液中的溶解度 pH 1 VX-883 FB Lot 3(mg/mL) 2.24介质 氯化钾 盐酸56101925597 A CN 101925599说3 5 7 9明书0.07 ＜ 0.001 ＜ 0.001 ＜ 0.00142/51 页邻苯二甲酸氢钾 氢氧化钠 邻苯二甲酸氢钾 氢氧化钠 磷酸二氢钾 - 氢氧化钠 磷酸二氢钾 - 氢氧化钠
实施例 3 ： IIA 型的物理特征
IIA 型是用下面两种结晶方法制备的。
方法 I ： 向化合物 1 游离碱 (173.5mg) 的 EtOH/CH2Cl2(1 ∶ 1， 20mL) 混悬液中加入 乙磺酸 (95％， 得自 Aldrich， 1.0 当量， 38μL)。在～ 45℃下搅拌该混合物， 直至溶解。然 后过滤该溶液， 真空浓缩， 将所得油状残渣再溶解于 CH2Cl2(10mL)， 将该溶液滴加到乙醚的 搅拌溶液 ( ～ 100mL) 中。过滤所得灰白色沉淀， 在氮气下用乙醚洗涤， 然后在～ 40-45℃ 和高真空下干燥该固体过夜， 得到呈棕色粉末的 IIA 型 (174.6mg) ： HPLC ： Rt ＝ 4.92 分钟。 溶剂 D ： 0.1％ TFA/MeCN。梯度为 10％ D 至 90％ D， ( 方法 ： 溶剂 B ： 0.1％ TFA/1％ MeCN/ 水， 共 8 分钟。流速为 1mL/ 分钟。方法时长 12 分钟。柱 1(YMC 3x150)。 1
H NMR(CD3OD， 500MHz)9.04(d， J ＝ 4.9Hz， 2H)， 8.83(q， J ＝ 1.6Hz， 2H)， 8.56(d， J ＝ 2.6Hz， 2H)， 8.09-8.07(m， 2H)， 8.04(d， J ＝ 1.6Hz， 2H)， 7.52(t， J ＝ 4.9Hz， 2H)， 3.39(q， J ＝ 7.3Hz， 2H)， 2.82(q， J ＝ 7.4Hz， 2H)， 1.31(t， 3H)， 1.25(t， 3H)， 0.00(TmS)ppm。 + +
MS(ES )m/z(M +1)378.3。
方法 II ： 向化合物 1 游离碱 (3.12g) 的 EtOH/CH2Cl2(1 ∶ 1， 80mL) 混悬液中加入 乙磺酸 (95％， 得自 Aldrich， 1.0 当量， 677μL)。在～ 40℃下搅拌该混合物， 直至溶解。然 后过滤所得黑色溶液， 真空浓缩至～ 10mL， 用 CH2Cl2(30mL) 稀释， 将该溶液滴加到乙醚的搅 拌溶液 ( ～ 450mL) 中。过滤所得灰白色沉淀， 在氮气下用乙醚洗涤， 然后在 45℃和高真空 下干燥该固体过夜， 得到呈浅褐色粉末的 IIA 型 (3.64g) ： HPLC ： Rt ＝ 4.80 分钟。( 方法 ： 溶剂 B ： 0.1％ TFA/1％ MeCN/ 水， 溶剂 D ： 0.1％ TFA/MeCN。梯度为 10％ D 至 90％ D， 共8分 钟。流速 1mL/ 分钟。方法时长 12 分钟。柱 1(YMC 3x150)。 1
H NMR(CD3OD， 500MHz)8.99(d， J ＝ 4.9Hz， H)， 8.78(t， J ＝ 1.5Hz， H)， 8.71(d， J ＝ 1.6Hz， H)， 8.54(d， J ＝ 2.6Hz， H)， 8.04(dt， J ＝ 9.7， 2.2Hz， H)， 7.95(d， J ＝ 1.6Hz， H)， 7.48(t， J ＝ 4.9Hz， H)， 3.37(q， J ＝ 7.3Hz， H)， 3.31(qn， J ＝ 1.6Hz， 甲醇 -d4)， 2.87(q， J ＝ 7.4Hz， H)， 1.34(t， J ＝ 7.4Hz， H)， 1.25(t， J ＝ 7.3Hz， H)ppm。 + +
MS(ES )m/z(M +1)378.14。
用下列分析方法评价 IIA 型的各种物理特征 ：
X- 射线粉末衍射 (XRPD) ： IIA 型的 XRPD 图是在室温下用 X- 射线发生器 (Rigaku/ MSC RUH3R) 和 X- 射线检测器 (Rigaku/MSC Raxis IIC)， 以传输方式记录的。 在 50KVx100mA 下使用 Cu Kα 辐射， 2θ 增大速率为 1° /s。在 0-40° 2θ 的范围运行扫描， 步长 1°， 每 步时间 1 秒。将粉末样品放置于直径 2mm 的毛细管试样架上 (Hampton Research， Laguna Niguel， CA)。IIA 型的示例性的 XRPD 在图 7 中提供。差示扫描量热法 (DSC) ： DSC 是在 IIA 型的样品上， 使用 DSC Q100 差示扫描热量计 (TA Instruments， New Castle， DL) 进行的。该装置是用铟校准的。将约 2mg 的样品在铝 盘中称重， 该铝盘用有 1 个小孔的盖封闭。所使用的 DSC 方法的加热速率是 10℃ / 分钟， 有 TM 至 300℃。使用 Thermal Advantage Q Series 软件收集数据， 并通过 UniversalAnalysis 软件分析。IIA 型的代表性的 DSC 描迹线在图 8 中提供。对应于化合物的熔化仅观察到一 个尖锐的吸热事件。熔点是～ 216℃。如下述采用 TGA 也观察到的那样， 确定化合物熔化时 分解。
热重量分析 (TGA) ： 使用 Model Q500 热重量分析仪 (TAInstruments， New Castle， DL) 进行 IIA 型样品的 TGA 测定。将重约 3-8mg 的样品放置于铂盘中。所使用的 TGA 方法 的加热速率是 10℃ / 分钟， 至 300℃。 通过 Thermal Advantage Q Series 软件收集数据， 并 通过 Universal Analysis 软件分析。当以 10℃ / 分钟的加热速率从室温至最高～ 180℃ 加热该药物粉末时， TGA 数据显示重量损失为～ 0.5％。IIA 型的示例性的 TGA 描迹线在图 9 中提供。从～ 200℃开始， 样品重量的显著降低与样品的分解相关。与 DSC 数据的比较表 明， 当熔化时化合物分解。
动态蒸汽吸收 (DVS) ： 分级等温研究 (25℃ ) 是在 IIA 型的样品中， 使用 VTI SGA 100 均衡性蒸汽吸收分析仪进行的。在开放的铂皿上称取约 10mg 的部分， 并在 25℃下暴 露于不同的湿度水平。相对湿度 (RH) 的级别是 5％ -95％ ( 吸收 ) 和以 5％ RH 为增量的 95％ -5％ ( 解吸 )。IIA 型的示例性的 DVS 描迹线在图 10 中提供。平衡标准是 5 分钟内变 化为 0.0100wt％， 最大平衡时间 180 分钟。在 95％相对湿度 (RH) 下， 样品吸收了～ 11wt％ 水分。吸收的所有水不都在解吸阶段释放出来。
实施例 4 ： IIB 型的物理特征
获得 IIB 型， 包括在较高温度和湿度 (40℃ /75％ RH) 下将 IA 型在开放容器中静 置 1 周。用下列分析方法评价 IIB 型的各种物理特征 ：
X- 射 线 粉 末 衍 射 (XRPD) ： XRPD 图 是 在 室 温 下 用 X- 射 线 发 生 器 (Rigaku/MSC RUH3R) 和 X- 射线检测器 (Rigaku/MSC Raxis IIC)， 以传输模式记录的。在 50KVx100mA 下使用 Cu Kα 辐射， 2θ 增大速率为 1° /s。在 0-40° 2θ 的范围运行扫描， 步长 1°， 每 步时间 1 秒。将粉末样品放置于直径 2mm 的毛细管试样架上 (Hampton Research， Laguna Niguel， CA)。IIB 型的示例性的 XRPD 在图 11 中提供。
差示扫描量热法 (DSC) ： DSC 是使用 DSC Q100 差示扫描热量计 (TAInstruments， New Castle， DL) 进行的。 该装置是用铟校准的。 将约 2mg 的样品在铝盘中称重， 该铝盘用有 1 个小孔的盖封闭。所使用的 DSC 方法的加热速率是 10℃ / 分钟， 至 300℃。使用 Thermal TM Advantage Q Series 软件收集数据， 并通过 Universal Analysis 软件分析。IIB 型的示 例性 DSC 描迹线在图 12 中提供。尽管由于残留的有机溶剂附着在原物质上而没有显著的 重量损失， 但是在～ 70℃下观察到的吸热事件主要与水丧失有关。在～ 216℃下观察到的 第二个尖锐的吸热事件与熔化转化有关。
实施例 5 ： IIC 型的物理特征
IIC 型是通过下列结晶方法之一制备的。
向化合物 1 游离碱 (2.16g) 的 EtOH/CH2Cl2(1 ∶ 1， 60mL) 混悬液中加入乙磺酸 (95％， 得自 Aldrich， 1.0 当量， 491μL)。在～ 40℃下搅拌该混合物， 直至溶解。然后过滤所得黑色溶液， 真空浓缩至～ 10mL， 用 CH2Cl2(30mL) 稀释， 将该溶液滴加到乙醚的搅拌溶液 ( ～ 450mL) 中。过滤所得灰白色沉淀， 在氮气下干燥 (30 分钟 )， 得到 VX-883- 单乙磺酸的 灰白色固体 I(2.545g)。
固体 I 用作下列 4 种方法的原料。
方法 1 ： IIC 型的制备 ：
向圆底烧瓶中装入固体 I(835mg) 和乙腈 (106mL)。将该混悬液在～ 40℃下搅拌 10 分钟。加入去离子水 (5mL) 溶解该混悬液。将所得溶液在室温下缓慢搅拌， 并在缓慢的 氮气流下缓慢蒸发至干 (6 天 )。在高真空下再干燥 (5 天 ) 残留固体， 得到呈灰白色固体的 IIC 型 (842mg) ： HPLC ： Rt ＝ 2.87 分钟。( 方法 ： 溶剂 B ： 0.1 ％ TFA/1 ％ MeCN/ 水， 溶剂 D ： 0.1％ TFA/MeCN。梯度为 10％ D-90％ D， 共 4 分钟。流速 1mL/ 分钟。方法时长 7 分钟。柱 2(Lighting， 3μm， 2.1mmx50mm)。 1
H NMR(CD3OD， 500MHz)9.05-9.04(m， 2H)， 8.84(dd， J ＝ 1.4， 4.2Hz， 2H)， 8.56(d， J ＝ 2.5Hz， 1H)， 8.09(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 8.04(d， J ＝ 1.4Hz， 1H)， 7.53(m， 1H)， 3.39(q， J＝ 7.3Hz， 2H)， 2.81(q， J ＝ 7.4Hz， 2H)， 1.33-1.24(m， 6H)， ppm。 + +
MS(ES )m/z(M +1)378.14。
方法 2 ： IIC 型的制备 ：
向圆底烧瓶中装入固体 I(830mg) 和甲醇 (46mL)。将该混悬液在～ 30℃下搅拌 5 分钟。 然后在室温下缓慢搅拌该澄清溶液， 并在缓慢的氮气流下缓慢蒸发至干 (7 天 )。 在高 真空下再干燥 (5 天 ) 残留固体， 得到呈灰白色固体的 IIC 型 (840mg) ： HPLC ： Rt ＝ 2.86 分 钟。( 方法 ： 溶剂 B ： 0.1％ TFA/1％ MeCN/ 水， 溶剂 D ： 0.1％ TFA/MeCN。梯度为 10％ D-90％ D， 共 4 分钟。流速 1mL/ 分钟 . 方法时长 7 分钟。柱 2(Lighting， 3μm， 2.1mmx50mm)。 1
H NMR(CD3OD， 500MHz)9.02(d， J ＝ 3.3Hz， 2H)， 8.80(d， J ＝ 13.0Hz， 2H)， 8.55(s， 1H)， 8.07(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 8.00(s， 1H)， 7.50(m， 1H)， 3.38(q， J ＝ 7.2Hz， 2H)， 2.85(q， J ＝ 6.8Hz， 2H)， 1.32(t， J ＝ 7.4Hz， 3H)， 1.25(t， J ＝ 7.2Hz， 3H)ppm。 + +
MS(ES )m/z(M +1)378.14。
方法 3 ： IIC 型的制备 ：
向圆底烧瓶中装入固体 I(880mg)， 乙醇 (41mL) 和甲醇 (27mL)。将该混悬液在～ 40-45℃下搅拌 10 分钟。然后在室温下缓慢搅拌该澄清溶液， 在缓慢的氮气流下缓慢蒸发 至干 (7 天 )。在高真空下再干燥 (5 天 ) 残留固体， 得到呈灰白色固体的 IIC 型 (898mg) ： HPLC ： Rt ＝ 2.87 分钟。( 方法 ： 溶剂 B ： 0.1％ TFA/1％ MeCN/ 水， 溶剂 D ： 0.1％ TFA/MeCN。 梯度为 10％ D-90％ D， 共 4 分钟。流速 1mL/ 分钟。方法时长 7 分钟。柱 2(Lighting， 3μm， 2.1mmx50mm)。 1
H NMR(CD3OD， 500MHz)9.02(d， J ＝ 4.4Hz， 2H)， 8.81(s， 1H)， 8.78(s， 1H)， 8.55(s， 1H)， 8.06(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 8.00(s， 1H)， 7.50(m， 1H)， 3.38(q， J ＝ 7.2Hz， 2H)， 2.85(q， J ＝ 7.3Hz， 2H)， 1.32(t， J ＝ 7.4Hz， 3H)， 1.25(t， J ＝ 7.2Hz， 3H)ppm。 + +
MS(ES )m/z(M +1)378.14。
方法 4 ： 根据上述方法 2， 由 7.06g 的化合物 1 游离碱开始， 使用乙磺酸 (1.6mL) 和 甲醇 (480mL) 制备 IIC 型， 得到呈浅褐色固体的 8.58g 的 IIC 型 ： HPLC ： Rt ＝ 2.86 分钟。 ( 方法 ： 溶剂 B ： 0.1％ TFA/1％ MeCN/ 水， 溶剂 D ： 0.1％ TFA/MeCN。梯度为 10％ D-90％ D，共 4 分钟。流速 1mL/ 分钟。方法时长 7 分钟。柱 2(Lighting， 3μm， 2.1mmx50mm)。 1
H NMR(CD3OD 和 DMSO-d6， 500MHz)9.02(d， J ＝ 4.8Hz， H)， 8.84(s， H)， 8.76(d， J＝ 1.5Hz， H)， 8.59(d， J ＝ 2.5Hz， H)， 8.10(dd， J ＝ 2.0， 9.7Hz， H)， 8.02(d， J ＝ 1.4Hz， H)， 7.51(t， J ＝ 4.9Hz， H)， 3.37(q， J ＝ 7.2Hz， H)， 2.81(q， J ＝ 7.4Hz， H)， 1.31-1.23(m， H) ppm。
MS(ES+)m/z(M++1)378.14。
用下列分析方法评价 IIC 型的各种物理特征 ：
X- 射线粉末衍射 (XRPD) ： IIC 型的 XRPD 图是在室温下用配有密封管放射源和 Hi-Star 区域检测器 (Bruker AXS， Madison， WI) 的 BrukerD8 Discover 系统， 以反射模式 记录的。X- 射线发生器是在 40kV 的电压和 35mA 的电流下操作的。将粉末样品置于零 - 背 景的硅片上。分别用 120 秒的暴露时间记录两个帧。然后在 3° -41° 2θ 的范围， 以步长 0.02°记录数据， 并合并到一个连续图中。示例性的 XRPD 在图 13 中提供。
差示扫描量热法 (DSC) ： DSC 是在 IIC 型的样品上， 使用 DSC 2920 差示扫描热量 计 (TA Instruments， New Castle， DE) 进行的。该装置是用铟校准的。将约 1-2mg 的样品 在铝盘中称重， 该铝盘用没有小孔或有 4 个小孔的盖封闭。以 10 ℃ / 分钟的加热速率从 25℃ -275℃扫描 DSC 样品。通过 Thermal Advantage Q SeriesTM 软件收集数据， 并通过 Universal Analysis 软件 (TA Instruments， New Castle， DE) 分析。示例性的 DSC 描迹线 在图 14 中提供。在 DSC 数据中， 对应于该化合物的熔化仅看到一个尖锐的吸热事件。熔点 为～ 220℃， 伴随着分解。熔化时化合物分解 ( 用 TGA 确认 )。
热重量分析 (TGA) ： 使用 Model Q500 热重量分析仪 (TAInstruments， New Castle， DE) 进行 TGA 测定。以 10℃ / 分钟的加热速率从 25℃ -300℃扫描重量约 3-5mg 的 IIC 型 样品。通过 ThermalAdvantage Q SeriesTM 软件收集数据， 并通过 Universal Analysis 软 件 (TA Instruments， New Castle， DE) 分析。示例性的 TGA 描迹线在图 15 中提供。当以 10℃ / 分钟的加热速率从室温至最高～ 175℃加热该药物粉末时， TGA 数据显示重量损失 为～ 0.26％。从～ 190-200℃开始， 样品重量的显著降低与样品的分解相关。与 DSC 数据 的比较表明， 当熔化时化合物分解。
动态蒸汽吸收 (DVS) ： 在分级等温研究 (25℃ ) 是在 IIC 型的样品中， 使用 VTI SGA 100 均衡性蒸汽吸收分析仪进行的。在开放的铂皿上称取约 10mg 的部分， 并在 25℃下暴露 于不同的湿度水平。相对湿度 (RH) 的级别是从 5％ -95％ ( 吸收 ) 和以 5％ RH 为增量的 95％ -5％ ( 解吸 )。平衡标准是 5 分钟内变化为 0.0100wt％， 最大平衡时间为 180 分钟。 IIC 型的示例性的 DVS 扫描在图 16 中提供。在 95％相对湿度 (RH) 下， 样品吸收了～ 4wt％ 水分。吸收的所有水都在解吸阶段释放出来。所观察到的滞后类型启示， 水的吸附仅是在 该物质的表面。该化合物没有形成水合物。
ss13C-NMR ： ss13C-NMR 谱是在 IIC 型的样品上， 使用 5500Hz MAS 装置收集的， 在临 放入样品前通过使用六甲基苯收集光谱来使峰归零。在运行样品前， 六甲基苯的甲基峰校 13 准为 17.35ppm。IIC 型的示例性的 ss C-NMR 谱在图 17 中提供。
溶解度 ： 在环境条件下确定 IIC 型在各种介质中的溶解度， 通过在振荡床上使药 物粉末部分和溶剂保持平衡 24 小时来进行。旋转样品， 并小心地分离上清液， 用稳定性指 示法在 24 小时的时间点通过 HPLC 分析。表 11 和 12 提供 IIC 型在各种溶剂和缓冲系统中的示例性溶解度。表 11 提供的数据是代表性的。具体样品的不同批次之间可能会有某种 程度的差异。
表 11 ： IIC 型在各种水性和有机介质中的溶解度 (24h 平衡 )
靶浓度 水性介质 水 四甘醇∶水 (1 ∶ 1) 0.1N HCl pH7 的 Tris 缓冲液 0.9％氯化钠 1.2％氯化钠 0.5％甲基纤维素 (MC)/ 0.5％十二烷基硫酸钠 (SLS) 10％维生素 E TPGS 10％ Cremophor 1％ SLS 10％吐温 80 1％吐温 80 1％ Pluronic F108 1％ Pluronic F68 20％ Captisol 20％ Captisol， 在 pH 3 的缓冲液中 (mg/mL) 150 50 100 100 100 100 100实际浓度 (mg/mL) 152 29.6 105 30.0 33.6 太粘稠， 以致无法分析 * 94.8pH1.60 2.08 1.10 无足够样品 无足够样品 NA 1.58150 150 150 150 150 150 150 150 150138 137 126 144 130 159 155 太粘稠， 以致无法分析 * 太粘稠， 以致无法分析 *1.58 1.64 1.56 1.64 1.60 1.58 1.57 NA NA61101925597 A CN 101925599说100明书太粘稠， 以致无法分析 * NA47/51 页20％ Captisol， 在 pH 7 的缓冲液中 30％ Captisol 40％ Captisol 10％ Solutol 30％ Solutol 10％聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)K30 1％去氧胆酸钠盐 (DOSS) 1％多库酯钠 4％甘油
150 150 150 150 150太粘稠， 以致无法分析 * 太粘稠， 以致无法分析 * 170 太粘稠， 以致无法分析 * 152NA NA 1.61 NA 1.70150 150 150125 159 1621.71 1.58 1.59* 由于形成了凝胶， 样品太过粘稠而无法对其进行适当分析。 表 12 ： IIC 型在不同 pH 的 0.05M 缓冲液中的溶解度 (24 小时平衡 ) 实际浓度 (mg/mL) 113 NA NA 48.2 67.0 实验 pH 1.01 NA NA 无足够样品 1.75介质 (0.05M 缓冲液 ) 氯化钾 盐酸， pH 1 邻苯二甲酸氢钾 氢氧化钠， pH 3 邻苯二甲酸氢钾 氢氧化钠， pH 5 磷酸二氢钾 - 氢氧化钠， pH 7 磷酸二氢钾 - 氢氧化钠， pH 9
NA- 未检测出， 由于形成了凝胶， 样品太过粘稠而无法对其进行适当分析
实施例 6 ： IID 型的物理特征
用下列分析方法评价 IID 型的各种物理特征 ：
X- 射线粉末衍射 (XRPD) ： IID 型的 XRPD 图是在室温下用 X- 射线发生器 (Rigaku/ MSC RUH3R) 和 X- 射线检测器 (Rigaku/MSC Raxis IIC)， 以传输模式记录的。 在 50KVx100mA 下使用 Cu Kα 辐射， 2θ 增大速率为 1° /s。在 0-40° 2θ 的范围运行扫描， 步长 1°， 每步时间 1 秒。将粉末样品放置于直径 2mm 的毛细管试样架上 (HamptonResearch， Laguna Niguel， CA)。示例性的 XRPD 在图 18 中提供。
差示扫描量热法 (DSC) ： DSC 是在 IID 型的样品上， 使用 DSC Q100 差示扫描热量计 (TA Instruments， New Castle， DL) 进行的。该装置是用铟校准的。将约 2mg 的样品在铝 盘中称重， 该铝盘用有 1 个小孔的盖封闭。所使用的 DSC 方法的加热速率是 10℃ / 分钟， 至 TM 300℃。使用 Thermal Advantage Q Series 软件收集数据， 并通过 UniversalAnalysis 软 件分析。IID 型的示例性的 DSC 图在图 19 中提供。在 DSC 数据中， 仅观察到一个尖锐的吸 热事件对应于化合物的熔化。熔点是～ 205℃。通过 TGA 确认了熔化时化合物分解。
热重量分析 (TGA) ： 使用 Model Q500 热重量分析仪 (TAInstruments， New Castle， DL) 进行 IID 型样品的 TGA 测定。 将重约 3-8mg 的样品放置于铂盘中。 所使用的 TGA 方法的 加热速率是 10℃ / 分钟， 至 300℃。 通过 Thermal Advantage Q Series 软件收集数据， 并通 过 Universal Analysis 软件分析。示例性的 TGA 描迹线在图 20 中提供。当以 10℃ / 分钟 的加热速率从室温至最高～ 175℃加热该药物粉末时， TGA 数据显示重量损失为～ 0.6％。 从～ 180-190℃开始， 样品重量的显著降低与样品的分解相关。
实施例 8 ： IIIB 型的物理特征
向化合物 1 游离碱 (162.9mg) 的 EtOH/CH2Cl2(1 ∶ 1， 20mL) 混悬液中加入甲磺酸 (28μL)。在～ 45℃下搅拌该混合物， 直至溶解。然后过滤该溶液， 真空浓缩， 将所得油状 残渣再溶解于 CH2Cl2(10mL) 中， 将该溶液滴加到乙醚的搅拌溶液 ( ～ 100mL) 中。过滤所得 灰白色沉淀， 在氮气下用乙醚洗涤， 然后将固体在高真空和～ 40-45℃下干燥过夜， 得到呈 浅褐色粉末的 IIIB 型 (164.2mg) ： HPLC ： Rt ＝ 4.91 分钟。( 方法 ： 溶剂 B ： 0.1 ％ TFA/1 ％ MeCN/ 水， 溶剂 D ： 0.1％ TFA/MeCN。梯度为 10％ D-90％ D， 共 8 分钟。流速 1mL/ 分钟。方 法时长 12 分钟。柱 1(YMC3x150)。 1
H NMR(CD3OD， 500MHz)9.02(d， J ＝ 4.9Hz， 2H)， 8.83-8.80(m， 2H)， 8.57(d， J ＝ 2.6Hz， 1H)， 8.11-8.08(m， 1H)， 8.01(d， J ＝ 1.6Hz， 1H)， 7.51(t， J ＝ 4.9Hz， 1H)， 3.38(q， J ＝ 7.3Hz， 2H)， 2.74(s， 3H， MsOH)， 1.25(t， J ＝ 7.3Hz， 3H)， 0.00(TmS)ppm。 + +
MS(ES )m/z(M +1)378.3。
用下列分析方法评价 IIIB 型的各种物理特征 ：
X- 射线粉末衍射 (XRPD) ： IIIB 型的 XRPD 图是在室温下用配有密封管放射源和 Hi-Star 区域检测器 (Bruker AXS， Madison， WI) 的 Bruker D8 Discover 系统 (Asset Tag V012842)， 以反射模式记录的。 X- 射线发生器是在 40kV 的电压和 35mA 的电流下操作的。 将 粉末样品置于零 - 背景硅片上。 分别用 120 秒的暴露时间记录两个帧。 然后在 3° -41° 2θ 的范围， 以步长 0.02°整合记录数据， 并合并到一个连续图中。IIIB 型的示例性的 XRPD 在 图 21 中提供。
差示扫描量热法 (DSC) ： DSC 是在 IIIB 型的样品上， 使用 Q200 DSC 差示扫描热量 计 (TA Instruments， New Castle， DE) 进行的。该装置是用铟校准的。将约 3-7mg 的样品 在铝盘中称重， 该铝盘用有 4 个小孔的盖封闭。使用改进的方法， 以 2℃ / 分钟的加热速率 从 35℃ -350℃扫描 DSC 样品。通过 Thermal Advantage Q SeriesTM 软件收集数据， 并通过 Universal Analysis 软件 (TA Instruments， New Castle， DE) 分析。IIIB 型样品示例性的 DSC 描迹线在图 22 中提供。在约 215℃观察到吸热， 熔化时样品分解。热 重 量 分 析 (TGA) ： 使 用 Model Q5000 热 重 量 分 析 仪 (TAInstruments， New Castle， DE) 进行 TGA 测定。以 10 ℃ / 分钟的加热速率从 35 ℃ -400 ℃扫描重量约 5-9mg 的 IIIB 型样品。通过 Thermal Advantage Q SeriesTM 软件收集数据， 并通过 Universal Analysis 软件 (TA Instruments， New Castle， DE) 分析。IIIB 型样品的示例性的 TGA 在图 23 中提供。
水蒸汽吸收分析 ： IIIB 型样品的蒸汽吸收分析是用 SGA-100 蒸汽吸收分析仪 (VTI， Hialeah， FL) 进行的。在 25℃下等温测定重约 7-12mg 的样品。通过 Isotherm 软件 收集数据， 并用 VTI macro(VTI， Hialeah， FL) 通过 Microsoft Excel 分析。IIIB 型样品示 例性的 DVS 描迹线提供在图 24 中。从 5-95％ RH(25℃ )， 样品增重约 4.6％。
单晶衍生是在室温下， 在 Bruker APEX II CCD 衍射仪上， 使用 Cu Kα 辐射进行 的， 包括使用从母液中取出的单晶并将其放置在玻璃纤维上。在 ω 轴周围以 4φ 角摄取 震荡图像。用 APEX 软件将数据指数化， 积分并标示刻度。结构分解并用 SHELX-TL 程序 包精制。晶体显示了具有 P21/n 空间群的单晶胞。晶胞参数为 α ＝ 90 °， β ＝ 95.340(3) °， γ ＝ 90 °。 精制得到的最后结果 ： R1 ＝ 3.04％， wR2 ＝ 8.32％。1 H NMR ： H NMR 谱是在 DMSO 中的 IIIB 型样品上， 用 500MHzBruker 装置收集的。 1 IIIB 型的示例性的 H NMR 在图 26 中提供。
ss13C-NMR ： ss13C-NMR 谱是使用 5500Hz MAS 装置， 在 IIIB 型的样品上收集的。在 临放入样品前通过使用六甲基苯收集光谱来使峰归零。在运行样品前， 六甲基苯的甲基峰 13 校准为 17.35ppm。IIIB 型的示例性的 ss C-NMR 在图 27 中提供。
溶解度 ： 在环境条件下确定 IIIB 型在各种介质中的溶解度， 通过在振荡床上使药 物粉末部分和介质保持平衡 24 小时。离心样品， 然后分离药物的饱和溶液， 并通过 HPLC 分 析。 样品体积是 100μL， 靶浓度是 10mg/mL。 适当稀释该饱和溶液， 并通过 HPLC 分析。 Lot 3 的溶解度数据是用一般性 HPLC 法获得的 ： (HPLC 柱 ： Waters C18， 3.5m， 75mm ； 流量 ： 1.7ml/ 分钟， 流动相 ： A(85％水， 包含 0.1％ H3PO4) 和 B(15％乙腈， 包含 0.1％ H3PO4) 的混合物， 使 用梯度法 ： B 的 15-35％梯度， 共 6 分钟 ； 然后是 B 的 35-15％梯度， 共 30 秒 ； 然后保持 15％ B1.5 分钟 ； 保留时间 ： 4.0 分钟， 波长 ： 284nm。 该报告中所包括的其余溶解度数据是用 IIIB 型的稳定性指示法得到的。表 13 提供了 IIIB 型在各种介质中的示例性的溶解度。
表 13 ： IIIB 型在各种水性和有机介质中的溶解度
1
介质 溶解度 SV， Captisol 20％ 溶解度 SV， 乙醇 溶解度 SV， HCl， 0.1N 溶解度 SV， Miglyol 810总浓度 (mg/mL) 3.81 0.439 12.2 0.021964101925597 A CN 101925599说明书0.0584 0.729 ＞ 12.0 5.74 0.623 0.0276 11.5 ＞ 12.0 0.634 ＞ 12.0 0.0284 ＞ 12.050/51 页溶解度 SV， 辛醇 溶解度 SV， PEG 400 溶解度 SV， Pluronic F108， 1％ 溶解度 SV， 丙二醇 溶解度 SV， 十二烷基硫酸钠， 1％ 溶解度 SV， Tris 缓冲液， pH 7 溶解度 SV， 维生素 E TPGS， 10％ 溶解度 SV， 水 溶解度 SV， Captisol， 30％， pH 7 溶解度 SV， SGF 溶解度 SV， SIF 溶解度 SV， 维生素 E TPGS， 10％ ； 1％ HPMC
实施例 9 ： IIIC 型的物理特征
IIIC 型是通过将 37.3mg 的游离碱悬浮于 6ml 的氯仿中制备的。向所得混悬液中 加入 1.98ml 的 0.05M 甲磺酸水溶液。将所得浆体研磨 10 分钟。结果得到了 IIIC 型， 将其 过滤分离并风干。
用下列分析方法评价示例性的 IIIC 型的各种物理特征 ：
X- 射线粉末衍射 (XRPD) ： IIIC 型样品的 XRPD 图是在室温下用配有密封管放射源 和 Hi-Star 区域检测器 (Bruker AXS， Madison， WI) 的 Bruker D8 Discover 系统， 以反射模 式记录的。X- 射线发生器是在 40kV 的电压和 35mA 的电流下操作的。将粉末样品置于 Si 零 - 背景圆片上。分别用 120 秒的暴露时间记录两个帧。然后在 3° -41° 2θ 的范围， 以 步长 0.02°记录整合数据， 并合并到一个连续图中。IIIC 型的示例性的 XRPD 在图 28 中提 供。
差示扫描量热法 (DSC) ： DSC 是在 IIIC 型样品上， 使用 DSC Q1000 差示扫描热量计 (TA Instruments， New Castle， DE) 进行的。该装置是用铟校准的。将约 3-7mg 的样品在 铝盘中称重， 该铝盘用有 1 个小孔的盖封闭。使用加热速率为 2℃ / 分钟， 30℃～ 300℃的 TM 加热速率方式来扫描 DSC 样品。通过 Thermal Advantage Q Series 软件收集数据， 并通 过 Universal Analysis 软件 (TA Instruments， New Castle， DE) 分析。IIIC 型的示例性 的 DSC 扫描图在图 29 中提供。
热重量分析 (TGA) ： 使用 Model Q500 热重量分析仪 (TAInstruments， New Castle， DE) 进行 TGA 测定。以 10℃ / 分钟的加热速率从 20℃～ 400℃扫描重量约 5-9mg 的 IIIC型样品。通过 ThermalAdvantage Q SeriesTM 软件收集数据， 并通过 Universal Analysis 软件 (TA Instruments， New Castle， DE) 分析。IIIC 型的示例性的 TGA 扫描图提供在图 30 中。
已经描述了本发明很多的实施方案。 但是， 应当理解， 可以做出各种改变而不脱离 本发明的精神和范围。因此， 其他实施范围也在下列权利要求的范围之内。