假多晶型2－[2－[4－[双(4－氟苯基) 甲基]－1－哌嗪基]乙氧基]乙酸二盐酸化物 本发明涉及新的假多晶型2－[2－[4－[双(4－氟苯基)甲基]－1－哌嗪基]乙氧基]乙酸二盐酸化物，涉及它们的制备方法和包含它们的药物组合物。
2－[2－[4－[双(4－氟苯基)甲基]－1－哌嗪基]乙氧基]乙酸(也是已知的并在下文被称为“efletirizine”(INN：国际非专利商标名))是下式的化合物：
Efletirizine包含于申请人的欧洲专利No．58146的通式Ⅰ中，它涉及取代二苯甲基哌嗪衍生物。
与2－[2－[4－[(4－氯苯基)苯甲基]－1－哌嗪基]乙氧基]乙酸(也是已知的并在下文被称为“西替利嗪”(INN))一样，发现了efletirizine也具有优异的抗组胺特性。它属于第二代组胺H1受体拮抗剂的药理类并表现出对H1受体的体外高亲和性和选择性。与西替利嗪一样，它适用作抗过敏剂、抗组胺剂、支气管扩张剂和镇痉剂。最近的临床研究证实了当以喷鼻剂形式施药时，efletirizine在治疗过敏性鼻炎和鼻结膜炎方面的效用(J．－F．Dessanges等，变态反应和临床免疫学新闻(Allergy and Clin．Immunol．News)(1994)，副刊n°2，摘要1864；C．De Vos等，变态反应和临床免疫学新闻(1994)，副刊n°2，摘要428)。
另一最近的临床药理研究(即将公开)证实了，efletirizine在治疗荨麻疹、特应性皮炎和瘙痒(prurit)方面给出意想不到的良好结果。
由于对efletirizine的治疗兴趣日益增大，所以我们已着手制备含efletirizine的药物组合物。
efletirizine是一种非晶形固体。但是，迫切需要处理具有可再现的特性的产品，该产品在加工制剂的过程中总是表现为相同的方式，特别是为了适应规定的要求。出于这些原因，我们尝试了制备结晶形式的efletirizine。虽然已研究了efletirizine的治疗效用，但尚未注意到这样的结晶形式。
本发明源于对efletirizine二盐酸化物的两种假多晶型物(即无水efletirizine二盐酸化物和一水合efletirizine二盐酸化物)的意外发现。为辨别起见，无水efletirizine二盐酸化物在下文将被称为“A型”，一水合efletirizine二盐酸化物在下文将被称为“B型”。
按另一实施方案，本发明提供了制备这些新假多晶型物的方法，并且进一步提供了将A型转化成B型和将B型转化成A型地方法。
本发明还源于这一发现，即这两种新的假多晶型物具有不同的特性。具体地说，我们发现了，含A型efletirizine二盐酸化物的固体药物组合物比含B型的固体药物组合物表现出更好的随时间的贮存稳定性。该更好的贮存稳定性似乎是由于同常用于这类固体药物组合物中的固体载体和稀释剂更好的相容性。
因此，本发明还涉及药物组合物，该组合物包含与其合适的药物赋形剂、载体或稀释剂组合的A型或B型，优选涉及含A型的固体药物组合物。
至于这些假多晶型efletirizine二盐酸化物的制备方法，B型可通过2－[4－[双(4－氟苯基)甲基]－1－哌嗪基]乙氧基乙酰胺在含水介质中在盐酸存在下，在40 ℃和反应混合物的回流温度之间的温度下水解而得。然后就可在含水的酸中或者含水溶剂和盐酸的混合物中使B型重结晶。
然后，B型可在溶剂(例如丙酮或丁酮)中通过加热至回流而转化成A型。任选地，可通过在盐酸水溶液中重结晶使A型变回B型。
如下实施例阐述了按本发明制备efletirizine二盐酸化物A型和B型的方法。在这些实施例中，差示热分析图是在PERKINELMER差示扫描量热计DSC 7上在20℃／min的温度梯度时记录的。
1．2－[4－[双(4－氟苯基)甲基]－l－哌嗪基]乙氧基乙酰胺和2－[4－[双(4－氟苯基)甲基]－1－哌嗪基]乙氧基乙酰胺二盐酸化物的制备。
将11．0g(0．038mol)1－[双－(4－氟苯基)甲基]哌嗪、10．5g(0．076mol)2－(2－氯乙氧基)乙酰胺和8．1g无水碳酸钠在40ml二甲苯中的悬浮液在140℃回流下加热4小时。滤出形成的沉淀，再用甲苯洗涤。合并滤液和甲苯洗涤液。用80ml 1N盐酸水溶液萃取形成的有机相，用甲苯洗涤水相两次。往形成的水相中添加甲苯，再添加80ml 1N氢氧化钠水溶液，用甲苯萃取该含水混合物一次。用水洗涤有机相一次，在无水硫酸钠上干燥，用旋转蒸发器蒸去溶剂至干。在该步骤，蒸发残余物含2－[4－[双(4－氟苯基)甲基]－1－哌嗪基]乙氧基乙酰胺，可按如下方法将它转变成它的二盐酸盐：用50ml异丙醇溶解蒸发残余物并过滤；往该异丙醇溶液中添加4．38N乙醇盐酸溶液(17．5ml)，让该混合物结晶。滤出沉淀，用异丙醇和乙醚洗涤，再真空干燥。这样，获得15．8g(90％)2－[4－[双(4－氟苯基)甲基]－1－哌嗪基]乙氧基乙酰胺二盐酸化物。
熔点：229．51℃
质谱：389(游离碱M+)，345和2032．efletirizine的制备。
在装有机械搅拌器、氮入口和冷凝器的圆底烧瓶内，将30g(0．065摩尔)2－[4－[双(4－氟苯基)甲基]－1－哌嗪基]乙氧基乙酰胺二盐酸化物加到325ml乙醇、130ml 1N氢氧化钠水溶液和62ml 6．3N氢氧化钠水溶液的混合物中。在回流下和在氮气氛中加热该混合物达1．5小时。然后将该反应混合物冷却到室温，用78ml 5N盐酸水溶液调节它的pH至5。添加水，应用旋转蒸发器在真空下蒸去乙醇。用二氯甲烷提取形成的水相。在无水硫酸钠上干燥有机相，蒸发至干给出25g粗的efletirizine非晶形固体，取5g该物质在乙腈中重结晶。
对C21H24F2N2O3的分析：
计算值：C：64．60 H：6．19 N：7．17 F：9．73
实测值：C：64．45 H：6．27 N：7．24 F：9．443．一水合efletirizine二盐酸化物(B型)的制备。
将37％(w／w)盐酸水溶液(6．38l)加到2．76kg(7．1摩尔)2－[4－[双(4－氟苯基)甲基]－1－哌嗪基]乙氧基乙酰胺在6．4l水中的悬浮液中。在65℃下加热该反应混合物1小时。再将它冷却到约0℃让它结晶。在0℃下滤出形成的沉淀，用HCl 6N(1．5l)洗涤，得粗的一水合efletirizine二盐酸化物。
然后通过在60℃下13．5l水中加热而溶解该粗产物，用1l甲苯洗涤该溶液两次。再用16l37％(w／w)盐酸水溶液酸化水相并冷却到0℃。在0℃下滤出形成的沉淀，用6N HCl(2．4l)洗涤，在约50℃干燥该产物4天。得一水合efletirizine二盐酸化物白色固体(产量：3．14kg；92％)。
B型的差示扫描热分析图表明，第一个吸热峰在155－170℃之间，第二个吸热峰在210～235℃之间。4．无水efletirizine二盐酸化物(A型)的制备；B型至A型的转化。
配制3．143kg(6．53mol)在实施例3中制备的B型于35l丁酮中的悬浮液。将该混合物加热至回流温度达2小时。在2小时50分钟内回流温度下除去水，同时逐渐添加5l丁酮。使形成的混合物冷却到25℃，搅拌－夜，再过滤，用丁酮(10l)洗涤。这样，得无水efletirizine二盐酸化物(A型)，将它在50℃的真空下干燥(产率：98．6％，2983g)。
对C21H24F2N2O3·2HCl的分析：
计算值：C：54．44 H：5．66 N：6．05 Cl：15．30 F：8．19
实测值：C：54．80 H：5．68 N：5．86 Cl：15．50 F：8．21
A型的差示扫描热分析图显示在220和235℃之间的一个吸热峰。5．A型至B型的转化。
配制699g在实施例4中制备的A型于3l水中的悬浮液。在60℃下加热该混合物直至完全溶解并立即过滤。在50℃下30min内往该溶液中添加37％(w／w)盐酸水溶液(3l)。然后用少量B型晶体引发结晶。冷却该混合物，在室温下搅拌1小时，再在0℃下搅拌2小时。滤出形成的固体，用0．6 l6N盐酸水溶液洗涤，在50℃的真空下干燥。(产量：676g；93％)。
对C21H25F2N2O3·2HCl·H2O的分析：
计算值：C：52．41 H：5．86 N：5．82 Cl：14．73 F：7．89
实测值：C：52．08 H：6．03 N：5．44 Cl：14．55 F：7．83
通过它们各自的X－射线粉末衍射光谱和固有溶出率进一步表征了A型和B型假多晶型efletirizine二盐酸化物。Ⅰ．X射线粉末衍射光谱。
应用CuKα发射光作光源在PHILIPS PWl710衍射计上记录X射线粉末衍射光谱。将待分析的粉末样品注入样品盒(未研磨或混合)。在室温下以1°／min的扫描速度记录2θ=4°至2θ=50°的光谱°
关于A型，在如下2θ值时观测到特征衍射峰：13．7°±0．5；13．9°±0．5；16．3°+0．5；18．0°+0．5；18．6°±0．5；19．1°±0．5；23．1°±0．5；24．1°±0．5；25．6°±0．5；和30．2°±0．5。
关于B型，在如下2θ值时观测到特征衍射峰：7．5°±0．5；9．7°±0．5；10．5°±0．5；10．7°±0．5；15．7°±0．5；18．9°±0．5；19．6°±0．5；19．9°±0．5；20．4°±0．5；20．9°±0．5；22．2°±0．5；22．5°+0．5；24．6°±0．5；24．7°±0．5；25．9°±0．5；和29．3°±0．5。Ⅱ．固有溶出率
药物生物利用率研究表明，低于0．1mg／cm2／min的固有溶出率(IDR)通常可预测在人体中的限制溶出率吸收。所以，IDR是生物利用率的预测参数。该参数依赖于各种物理化学特性，包括化学形式(盐、溶剂化物)，晶形，溶解性和润湿性。
IDR的测定是按下列方法进行的。将待测试的型式均匀地研磨并与微晶纤维素AVICEL PH102(改善压片特性的干粘合剂)混合。所述物质：赋形剂混合比是70∶30(w／w)。将等分样(500mg)压成片，即通过压缩直至最后施加10吨的负荷以便获得孔隙率为零的恒定、已知的表面积。
溶出试验是在37℃时应用500ml水性介质在三个不同的pH值(旨在覆盖预期的人胃肠pH值的范围，即1．2，4．0和7．5)下进行的。匀速且可再现的血流动力学条件是通过应用USP ⅩⅩⅡ装置N°2(美国药典，1990)进行试验而获得的，其中，应用桨叶作为搅拌部件(50rpm)并将所述片的组合体置于容器底部(静态圆片法)。选定所有重复的溶出曲线的统计估测(p＜0．05)线性部分进行后续的IDR计算。
结果如表1中所示，表1示出了在测试的三个pH值下以mg／cm2／min表示的A型和B型的IDRs。
表1－固有溶出率
固有溶出率(mg／cm2／min)
pH A型 B型
1．2 5．04+0．34 4．05+0．64
4．0 5．43+0．32 3．58+0．50
7．5 4．52+0．34 3．31+0．04
表1的结果表明，A型和B型在测试的三个pH值下都具有高于0．1mg／cm2／min的IDRs。这启示了，在含A型或B型的固体药物组合物的体内吸收过程中，溶出可能不是限速步骤。但是，B型的IDRs显著低于A型。这意味着，如果从治疗角度考虑需要最快速可能溶出的固体剂型，则A型是应用于固体药物组合物的优选晶型。
本发明还涉及药物组合物，该组合物包含与其合适的药物赋形剂组合的A型或B型。就固体药物组合物来说，意外地，应用A型比B型更有利。我们确实发现了，包含与其常用载体和稀释剂(例如山梨糖醇)组合的A型的固体药物组合物比包含B型的那些表现出更好的贮存稳定性。
下列研究的结果阐明了这一点，该研究旨在检验在D－山梨糖醇的存在下，在应力温度条件(即在40或60℃的密封小瓶内)下两种假多晶型物的贮存稳定性。
在该研究中，对下列几个样品进行了HPLC分析：A型、B型、D－山梨糖醇和A型或B型与D－山梨糖醇的1∶1(w／w)混合物。
将每个样品均匀地研磨并混合。在1吨的施加负荷(它是药物片剂通常的抗压强度)下将等分样(500mg)压成直径为13mm的片。立即将每颗压紧的片磨成细粉，将等分样贮存在40或60℃密封的玻璃小瓶内。在0、4、16和24周后通过HPLC分析样品。
在第一系列分析中，应用装备了UV检测器的300型KontronHPLC系统收集HPLC／UV谱。应用的柱是Supercosil RP－ABZ250×4．6mm I．D．5μm粒径，应用的流动相由乙腈／水25∶75(v／v)混合物构成，该水中含770mg／l乙酸铵。将待分析的样品以2mg／ml的浓度溶于乙腈／水25∶75(v／v)，取10μl这些溶液注入HPLC系统。
在比较关于单个的组分和关于二元混合物测得的HPLC谱时，把检测到的新峰视为与D－山梨糖醇相互作用的指示物。当存在时，定量分析这些新峰，并且应用联接到Kontron HPLC系统的VG Quattro分光计通过HPLC／MS分析进一步鉴定。
通过HPLC／UV，对于在40°或60℃下贮存4、16或24周后的纯A型和B型未观测到光谱图的改变。用HPLC／UV未检测到纯D－山梨糖醇。至于二元混合物，在与纯A型或B型的谱图比较时，光谱图中出现了新峰。对于已在60℃下贮存过的B型来说，新峰特别显著。
在HPLC／MS中，对所述二元混合物所观测到的新峰被鉴定为山梨糖醇－efletirizine单酯和山梨糖醇－efletirizine单酯的脱水形式。后者是在比前者更长的贮存期后出现的。
表2示出了定量测定在40°或60℃下贮存的二元混合物中形成的山梨糖醇－efletirizine单酯的结果。单酯的相对定量分析是通过HPLC－UV分析进行的。
表2－山梨糖醇－efletirizine单酯随时间的定量分析
相对％面积
40℃ 60C时间(周) A型 B型 A型 B型
0 0 0 0．03 0．04
4 0．04 0．13 0．29 0．87
16 0．07 0．16 0．45 2．69
24 0．13 0．23 0．46 2．95
表2表明了，当将A型或B型与D－山梨糖醇一起压成片并在40°或60℃下贮存时，以随时间递增的量形成山梨糖醇－efletirizine单酯。此外，它还表明了对于在40℃和60℃下贮存的A型以及在40℃下贮存的B型来说，单酯形成量很低。但是，对于在60℃下贮存的B型来说，单酯形成很显著。
这些结果表明，A型efletirizine盐酸化物与常用于固体药物组合物中的羟基化赋形剂、载体或稀释剂的相互作用更少，所以它比B型更适合制备这样的组合物。
本发明进一步涉及药物组合物，该组合物包含与其合适的赋形剂、稀释剂或载体组合的A型或B型或者A型和B型的混合物。本发明的药物组合物可具有各种形式。缓释制剂是尤其令人关注的，更优选的组合物包含与环糊精组合的缓释赋形剂。
这类组合物的一个实施例如下：30mg无水2－[2－[4－[双(4－氟苯基)甲基]－1－哌嗪基]乙氧基]乙酸二盐酸化物；14．7mgEncompress；82．3mg环糊精；70mg MethocelK15MCR；1mgAerosil200；2mg硬脂酸镁。