技术领域
本发明涉及微生物工程技术领域，特别是涉及一种超富硒酵母及其应用。
背景技术
硒是动物生长不可缺少的微量元素，在动物体内，硒是谷胱甘肽过氧化物酶、 甲状腺5’-脱碘酶的必需组成部分,同时又是体内许多蛋白质的组成成分,对 动物机体抗氧化、抗应激、提高免疫力等起着重要的作用。
全世界有四十多个国家和地区属于缺硒地区。我国是一个缺硒大国，据《中 华人民共和国地方疾病与环境因素图集》揭示，从东北三省起斜穿至云贵高原， 占我国国土面积的72%地区存在一条低硒地带，其中30%为严重缺硒地区，粮食 等天然食物硒含量较低。华北、东北、西北等大中城市都属于缺硒地区。
缺硒可能导致癌症、心肌梗塞等多种疾病的发生,通过膳食摄取足够的硒可 起到预防有关疾病的作用。天然食物中的硒含量普遍较低,仅靠天然食物中的硒 并不能满足人体的正常需要。而无机硒毒性高，吸收率低，硒的有机态和无机态 相比,具有吸收率高、生物活性强、环境污染小等特点，有机硒是今后补硒的主 要方式。目前有机硒源主要为酵母，且应用较为广泛，但目前所用富硒酵母大多 为人工培育菌株，稳定性较差，且富集硒能力有限，生产成本较高。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于提供一种能够高效稳定低成本生产富硒酵 母的菌株。
本发明提供一种超富硒酵母，其特征在于从恩施渔塘坝硒矿区中分离的超富 硒酵母，该菌分类学命名为异常威克汉姆酵母Wickerhamomycesanomala，命名 为XS-1，于2013年11月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生 物中心，保藏号为CGMCCNo.8475；所述的超富硒酵母的rRNA基因序列为：
AACCTGCGGAAGGATCATTATAGTATTCTATTGCCAGCGCTTAATTGCGCGGCGATAAACCTTACACACATTGTCTAAGTTT TTTTGAACTTTGCTTTGGGTGGTGAGCCTCGGCTTACTCGCCCAAAGGTCTAAACACATTTTTTTTAATGTTAAAACCTTTAACCAA TAGTCATGAAAATTTTTAACAAAAATTAAAATCTTCAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTCGCAACGATGAAGAACGCAGC GAAATGCGATACGTATTGTGAATTGCAGATTTTCGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCACCCTCTGGTATTCCAGAGGGT ATGCCTGTTTGAGCGTCATTTCTCTCTCAAACCTTCGGGTTTGGTATTGAGTGATACTCTGTCAAGGGTTAACTTGAAATATTGACT TAGCAAGAGTGTACTAATAAGCAGTCTTTCTGAAATAATGTATTAGGTTCTTCCAACTCGTTATATCAGCTAGGCAGGTTTAGAAGT ATTTTAGGCTCGGCTTAACAACAATAAACTAAAAGTTTGACCTCAAATCAGGTAGGACTACCCGCTGAACTTAAGCATACGGGGG。
本发明超富硒酵母在制备富硒酵母中的应用。
本发明提供超富硒酵母，分类学命名为异常威克汉姆酵母Wickerhamomyces anomala，命名为XS-1。
本发明所述的菌株是从世界硒都恩施双河渔塘坝采用微生物分离纯化技术 分离获得。经微生物分类学鉴定为异常威克汉姆酵母Wickerhamomycesanomala； 该菌株己保藏，于2013年11月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普 通微生物中心，保藏号为CGMCCNo.8475。保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1 号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101。
本发明所述菌株固体培养特征：PDA琼脂培养基上菌落生长较快，25℃黑暗 条件下培养7d，菌落直径10-15mm，正反面和边缘、中央部位的颜色均为白色， 质地均匀，边缘整齐。
本发明所述菌株显微特征：菌株形态为球状，直径25.0-50.0μm，无鞭毛， 不能游动，专性或兼性好氧生活，多边芽殖。
本发明所述菌株rRNA基因序列（包括18SrRNA片段，ITS1、5.8SrRNA、 ITS2的全序列及28SrRNA序列片断）为：
AACCTGCGGAAGGATCATTATAGTATTCTATTGCCAGCGCTTAATTGCGCGGCGATAAACCTTACACACATTGTCTAAGTTT TTTTGAACTTTGCTTTGGGTGGTGAGCCTCGGCTTACTCGCCCAAAGGTCTAAACACATTTTTTTTAATGTTAAAACCTTTAACCAA TAGTCATGAAAATTTTTAACAAAAATTAAAATCTTCAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTCGCAACGATGAAGAACGCAGC GAAATGCGATACGTATTGTGAATTGCAGATTTTCGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCACCCTCTGGTATTCCAGAGGGT ATGCCTGTTTGAGCGTCATTTCTCTCTCAAACCTTCGGGTTTGGTATTGAGTGATACTCTGTCAAGGGTTAACTTGAAATATTGACT TAGCAAGAGTGTACTAATAAGCAGTCTTTCTGAAATAATGTATTAGGTTCTTCCAACTCGTTATATCAGCTAGGCAGGTTTAGAAGT ATTTTAGGCTCGGCTTAACAACAATAAACTAAAAGTTTGACCTCAAATCAGGTAGGACTACCCGCTGAACTTAAGCATACGGGGG
本发明的另一目的是提供了超富硒酵母的应用。
本发明所述菌株，经发酵培养可得高硒含量酵母，其工艺包括菌种活化、种 子培养、发酵培养、固液分离、检测分析、成品制备六个步骤。各工艺步骤参数 如下：
（1）菌种活化：将本发明所述菌株XS-1接入蛋白胨酵母膏培养基，平板活 化培养24h，温度为28±1℃；
（2）种子培养：菌株XS-1活化完毕后转接入麦芽汁培养基，摇瓶培养18 小时，温度为28±1℃；
（3）发酵培养：制备发酵培养基，培养基包括以下组分：
将培养基投入到发酵罐中搅拌均匀后高压灭菌，灭菌完毕，接种酵母种子至 发酵罐进行培养，接种量为5—10%，发酵温度28±2℃，PH5.0～5.4，发酵时间 为48—96h。
所述无机硒水溶液为各种含硒元素无机物的水溶液；所述含氨基氮的有机氮 源为各类生物源蛋白质或氨基酸等。
（4）固液分离：发酵罐中的混合液体通过离心、洗涤、过滤等步骤，制得 酵母泥。
（5）检测分析：取酵母泥5g检测分析硒含量，根据发酵时间长短及硒添加 量，可获得硒含量在500-40000ppm浓度范围内的硒酵母产品，其中无机硒转化 率为96～99%，硒代蛋氨酸占有机硒总量的50～60wt%，硒代半胱氨酸占有机硒 总量的30～40wt%。
（6）成品制备:将所述酵母泥调浆，根据不同需求可制成粉末或颗粒。干燥 制粉末，干燥温度为160℃～180℃，或在4～6Kpa的压力下进行蒸汽压力滚筒 干燥，得到淡黄色粉末，其水分含量小于5wt%；将所述酵母泥通过挤压造粒制 成颗粒，再采用温度分级段流化干燥，制得淡黄色颗粒，该颗粒的水分含量小于 6wt%。
本发明生产富硒酵母，酵母产率可达80～120g/L，其中硒转化率为96～99%， 硒代蛋氨酸占有机硒总量的50～60wt%，硒代半胱氨酸占有机硒总量的30～ 40wt%。使用本发明方法制得的产品经恩施州产品质量监督检测所检测，富硒酵 母产品硒含量达34782.52ppm，远远高于现有富硒酵母产品硒含量。另外，经检 测，该富硒酵母中还含有高含量硒代半胱氨酸，具有潜在的原料药开发价值。
本发明通过工业发酵生产高硒含量酵母，技术方案易于实施，控制精度高， 产品质量稳定，同现有产品相比具有极大的竞争优势。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但发明的实施方式不限于 此。
实施例1：
（1）菌种活化：将本发明所述菌株XS-1接入蛋白胨酵母膏培养基，平板活 化培养24h，温度为28±1℃；
（2）种子培养：菌株XS-1活化完毕后转接入麦芽汁培养基，摇瓶培养18 小时，温度为28±1℃；
（3）发酵培养：制备发酵培养基，培养基包括以下组分：
将培养基投入到发酵罐中搅拌均匀后高压灭菌，灭菌完毕，接种酵母种子至 发酵罐进行培养，接种量为5%，发酵温度28±2℃，PH5.0，发酵时间为48h。
（4）固液分离：发酵罐中的混合液体通过离心、洗涤、过滤等步骤，制得 酵母泥.
（5）检测分析：取酵母泥5g检测分析硒含量，硒含量为2342.6ppm，其中 无机硒转化率为97%，硒代蛋氨酸占有机硒总量的52wt%，硒代半胱氨酸占有机 硒总量的31wt%。
（6）成品制备:将所述酵母泥调浆。干燥制粉末，干燥温度为160℃，得到 淡黄色粉末，其水分含量为4.5wt%；
实施例2
（1）菌种活化：将本发明所述菌株XS-1接入蛋白胨酵母膏培养基，平板活 化培养24h，温度为28±1℃；
（2）种子培养：菌株XS-1活化完毕后转接入麦芽汁培养基，摇瓶培养18 小时，温度为28±1℃；
（3）发酵培养：制备发酵培养基，培养基包括以下组分：
将培养基投入到发酵罐中搅拌均匀后高压灭菌，灭菌完毕，接种酵母种子至 发酵罐进行培养，接种量为8%，发酵温度28±2℃，PH5.3，发酵时间为72h。
（4）固液分离：发酵罐中的混合液体通过离心、洗涤、过滤等步骤，制得 酵母泥.
（5）检测分析：取酵母泥5g检测分析硒含量，硒含量为14521.3ppm，其 中无机硒转化率为97%，硒代蛋氨酸占有机硒总量的56wt%，硒代半胱氨酸占有 机硒总量的40wt%。。
（6）成品制备:将所述酵母泥调浆，在5Kpa的压力下进行蒸汽压力滚筒干 燥，得到淡黄色粉末，其水分含量为4.1wt%。
实施例3
（1）菌种活化：将本发明所述菌株XS-1接入蛋白胨酵母膏培养基，平板活 化培养24h，温度为28±1℃；
（2）种子培养：菌株XS-1活化完毕后转接入麦芽汁培养基，摇瓶培养18 小时，温度为28±1℃；
（3）发酵培养：制备发酵培养基，培养基包括以下组分：
将培养基投入到发酵罐中搅拌均匀后高压灭菌，灭菌完毕，接种酵母种子至 发酵罐进行培养，接种量为10%，发酵温度28±2℃，PH5.4，发酵时间为96h。
（4）固液分离：发酵罐中的混合液体通过离心、洗涤、过滤等步骤，制得 酵母泥.
（5）检测分析：取酵母泥5g检测分析硒含量，硒含量为35981.6ppm，其 中无机硒转化率为99%，硒代蛋氨酸占有机硒总量的60wt%，硒代半胱氨酸占有 机硒总量的35wt%。。
（6）成品制备:将所述酵母泥调浆，挤压造粒制成颗粒，再采用温度分级段 流化干燥，制得淡黄色颗粒，水分含量为3.9wt%。