技术领域
本发明涉及新化合物，涉及含有所述化合物的药物组合物，以及涉及所 述化合物在治疗中的用途。本发明进一步涉及用于制备所述化合物的方法， 以及涉及在其制备中所用的新中间体。
背景技术
哺乳动物痛觉是由于激活感觉神经元(称为伤害性感受器)的特化群体 的末梢而引起的。辣椒辣素(Capsaicin)，尖辣椒中的活性成分，引起伤害性 感受器的持久活化，并还在人类中引起剂量依赖性痛觉。克隆香草素受体 1(VR1或TRPV1)表明，VR1是辣椒辣素及其类似物的分子靶标。(Caterina， M.J.等人Nature(1997)v.389 p 816-824)。使用VR1的功能研究表明，它还被 有害的热、组织酸化作用和其它炎症介质激活(Tominaga，M.等人Neuron (1998)v.21，p.531-543)。VR1的表达还在导致神经性疼痛的类型的外周神经 损伤后被调节。VR1的这些性质使它成为对于疼痛和对于包括炎症的疾病的 高度相关的靶标。尽管VR1受体的激动剂可通过伤害性感受器破坏而充当 镇痛药，但激动剂如辣椒辣素及其类似物的使用由于它们的剌激性、神经毒 性和低温麻醉(induction of hypothermia)作用而受到限制。但是，证明阻断 VR1活性的药物应当是更有用的。拮抗剂将保持止痛特性，但避免剌激性和 神经毒性副作用。
具有VR1抑制剂活性的化合物被认为在治疗和/或预防下述病症具有潜 在的应用，例如疼痛，特别是炎症性起源或创伤性起源(origin)的疼痛如关节 炎、局部缺血(ischaemia)、纤维肌痛、腰(背)痛和术后痛(Walker等人J Pharmacol Exp Ther.(2003)Jan；304(1)：56-62)。除此之外，内脏痛如慢性骨盆 痛，膀胱炎，过敏性肠综合征(irritable bowel syndrome，IBS)，胰腺炎等，以 及神经性疼痛如坐骨神经痛(sciatia)，糖尿病性神经病，HIV神经病，多发性 硬化症等(Walker等人，文献同上，J Pharmacol Exp Ther.(2003)Mar； 304(3)：940-8)是可利用VR1抑制作用来治疗的可能疼痛状态。这些化合物也 被认为可潜在性地用于炎症性疾病如哮喘、咳嗽、炎症性肠病(IBD)(Hwang 等人Curr Opin Pharmacol(2002)Jun；2(3)：235-42)。具有VR1阻断剂活性的化 合物也可用于瘙痒和皮肤病如银屑病以及用于胃食管回流病(GERD)、呕吐、 癌、尿失禁和膀胱活动过度症(hyperactive bladder)(Yiangou等人BJU Int (2001)Jun；87(9)：774-9，Szallasi Am J Clin Pathol(2002)118：110-21)。VR1抑 制剂还可潜在地用于治疗和/或预防暴露于VR1活化剂如辣椒辣素或催泪 气、酸或热的作用(Szallasi文献同上)。
进一步的潜在应用涉及对VR1活化剂耐受性的治疗。
VR1抑制剂还可用于治疗间质性膀胱炎及与间质性膀胱炎相关的疼痛。
VR1抑制剂还可用于治疗肥胖症和偏头痛。
WO2006/007851公开了VR1拮抗剂在治疗肥胖症中的用途
WO2004/100865公开了对香草素受体1(VR1)表现出抑制活性的化合 物。
发明内容
本发明的目的是提供对香草素受体1(VR1)表现出抑制活性的所述种类 的化合物，该化合物不仅表现出改善的效能(improved potency)，还表现出效 能与其它所希望性质(特别是溶解性)的最佳组合，以及良好的药物代谢作用 和药物动力学(DMPK)性质。
本发明提供式I化合物或其盐、溶剂化物或溶剂化盐(solvated salt)：
其中：
R1选自硝基、氰基、卤素和乙酰基；
R2选自苯基、杂芳基、苯甲基和苯氧基甲基(phenyloxymethyl)；
其中R2任选被一个或多个取代基Q取代，所述取代基Q选自C1-6烷基、 C1-6烷氧基、C1-6卤代烷基、卤素、C1-6卤代烷氧基、C3-7环烷氧基、C3-7环 烷基、C1-6炔基、C3-7环烷基烷氧基、C3-7杂环烷基氧基，和C1-3烷氧基C1-6烷氧基，所述一个或多个取代基Q与R2的芳族环和/或杂芳族环相连；
R3为H或F；
R4为甲基、甲氧羰基或乙基；或R2与R4可一起形成单环或二环环系。
本发明的一个实施方案涉及式I化合物，其中R1选自硝基、氰基、氟、 氯和乙酰基。
本发明的另一个实施方案涉及式I化合物，其中R1为硝基。
本发明进一步的实施方案涉及式I化合物，其中R1为氰基或卤素。
本发明进一步的实施方案涉及式I化合物，其中R1为氰基、氯或氟。
本发明的另一个实施方案涉及式I化合物，其中R2选自苯基、吡啶基、 噻吩基、苯甲基和苯氧基甲基。
本发明进一步的实施方案涉及式I化合物，其中R2为被一个或多个取 代基Q取代的苯基，其中一个取代基Q位于连接点的对位。
本发明的一个实施方案涉及式I化合物，其中R2为被一个或多个取代 基Q取代的吡啶-3-基，其中一个取代基Q为吡啶环6位的取代基。
本发明的另一个实施方案涉及式I化合物，其中R2为被一个或多个取 代基Q取代的吡啶-2-基，其中一个取代基Q为吡啶环5位的取代基。
本发明进一步的实施方案涉及式I化合物，其中R2为被一个或多个取 代基Q取代的噻吩-2-基，其中一个取代基Q为噻吩环5位的取代基。
本发明的一个实施方案涉及式I化合物，其中R2为苯甲基。
本发明的另一个实施方案涉及式I化合物，其中R2为苯氧基甲基。
本发明进一步的实施方案涉及式I化合物，其中Q选自(1-甲基丙-2-炔 -1-基)氧基、1-甲基丙氧基、2，2，2-三氟-乙氧基、2，2，3，3-四氟-丙氧基、2，2- 二氟-乙氧基、2-氟-1-氟甲基-乙氧基、2-氟乙氧基、2-甲氧基-1-甲基-乙氧基、 2-甲氧基-丙氧基、氯、氯(二氟)甲基、环戊基氧基、环丙基、环丙基甲氧基、 乙氧基、乙炔基苯基、氟、异丙氧基、异丙基、甲氧基、甲基哌啶基氧基、 丙氧基、叔丁基、三氟甲氧基和三氟甲基。
本发明的一个实施方案涉及式I化合物，其中R2被两个取代基Q取代， 其中一个取代基Q选自2-氟-1-氟甲基-乙氧基、2-氟乙氧基、环戊基氧基、 甲氧基、2-氟-1-氟甲基-乙氧基、2-甲氧基丙氧基和甲基哌啶基氧基；另一个 取代基Q选自氯、氟和三氟甲基。
本发明的另一个实施方案涉及式I化合物，其中R4为甲基。
本发明进一步的实施方案涉及式I化合物，其中R2和R4一起形成单环 或二环环系。
本发明的一个实施方案涉及式I化合物，其中R2和R4一起形成二环环 系。
本发明的另一个实施方案涉及式I化合物，其中R2和R4一起形成苯并 二氢吡喃基(chromanyl)。
本发明进一步的实施方案涉及式I化合物，其中
R1选自硝基、氰基、氯、氟和乙酰基；以及
R2为被一个或多个取代基Q取代的苯基，所述取代基Q选自(1-甲基丙 -2-炔-1-基)氧基、1-甲基丙氧基、2，2，2-三氟-乙氧基、2，2，3，3-四氟-丙氧基、 2，2-二氟-乙氧基、2-氟-1-氟甲基-乙氧基、2-氟乙氧基、2-甲氧基-1-甲基-乙 氧基、2-甲氧基-丙氧基、氯、氯(二氟)甲基、环戊基氧基、环丙基、乙氧基、 乙炔基苯基、氟、异丙基、甲基哌啶基氧基、丙氧基、叔丁基、三氟甲氧基 和三氟甲基，其一个取代基Q位于连接点的对位。具体而言，R1可选自硝 基、氰基和氟；R2的苯基可被一个或多个选自下列的取代基Q取代：(1-甲 基丙-2-炔-1-基)氧基、1-甲基丙氧基、2，2，2-三氟-乙氧基、2，2，3，3-四氟-丙氧 基、2-氟乙氧基、2-甲氧基-1-甲基-乙氧基、氯、环戊基氧基、环丙基、乙氧 基、乙炔基苯基、氟、异丙基、甲基哌啶基氧基、丙氧基、叔丁基、三氟甲 氧基和三氟甲基，其中一个取代基Q位于连接点的对位。
本发明进一步的实施方案涉及式I化合物，其中
R1选自硝基、氰基、氯和氟；以及
R2为被一个或多个取代基Q取代的吡啶基或噻吩基，所述取代基Q选 自2，2，2-三氟-乙氧基、2，2，3，3-四氟-丙氧基、2，2-二氟-乙氧基、2-氟-1-氟甲基 -乙氧基、2-氟乙氧基、2-异丙氧基、氯、环戊基氧基、环丙基甲氧基、异丙 氧基、叔丁基和三氟甲基。具体而言，R2可为被一个或多个取代基Q取代 的吡啶基或噻吩基，所述取代基Q选自2，2，2-三氟-乙氧基、2，2，3，3-四氟-丙 氧基、2，2-二氟-乙氧基、2-异丙氧基、氯、环戊基氧基、环丙基甲氧基、异 丙氧基、叔丁基和三氟甲基。
本发明进一步的实施方案涉及选自下列的化合物：
2-(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}乙酰胺，
2-(7-乙酰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-(1-{4-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]苯基} 乙基)乙酰胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-(1-{4-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]苯基}乙基) 乙酰胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-(1-{4-[氯(二氟)甲基]苯基}乙基)乙酰胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-[1-(4-乙炔基苯基)乙基]乙酰胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]乙基}乙 酰胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)苯基]乙基}乙 酰胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(2，2-二氟乙氧基)苯基]乙基}乙酰 胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}乙酰胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡啶-3-基]乙基} 乙酰胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[6-(2，2，3，3-四氟丙氧基)吡啶-3-基]乙基} 乙酰胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-[1-(6-异丙氧基-吡啶-3-基)-乙基]-乙酰胺，
2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-(1-{4-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]苯基}乙 基)乙酰胺，
2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-[1-(4-异丙基苯基)乙基]乙酰胺，
2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[3-氟-4-(三氟甲基)苯基]乙基}乙酰 胺，
2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(2，2，2-三氟乙氧基)苯基]乙基}乙 酰胺，
2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(三氟甲氧基)苯基]乙基}乙酰胺，
2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}乙酰胺，
2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{(1 S)-1-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}乙酰 胺，
2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-(1-{4-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]-2-(三氟 甲基)苯基]乙基}乙酰胺，
2-(7-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-N-[1-(4-异丙基苯基)乙基]乙酰胺，
2-(7-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}乙酰胺，
2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)苯基]乙基} 乙酰胺，
2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(2，2，2-三氟乙氧基)苯基]乙基}乙 酰胺，
2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(三氟甲氧基)苯基]乙基}乙酰胺，
2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}乙酰胺，
2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]丙基}乙酰 胺，
2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]乙基}乙酰 胺，
2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡啶-3-基]乙 基}乙酰胺，
2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[6-(2，2，3，3-四氟丙氧基)吡啶-3-基]乙 基}乙酰胺，
(4-叔丁基苯基){[(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰基]氨基}乙酸甲酯，
N-((1S)-1-{4-[(1-甲基丙-2-炔-1-基)氧基]苯基}乙基)-2-(7-硝基-1H-苯并 咪唑-1-基)乙酰胺，
N-((1S)-1-{4-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]苯基}乙基)-2-(7-硝基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺，
N-(1-{2-氯-4-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]苯基}乙基)-2-(7-氰基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺，
N-(1-{4-[氯(二氟)甲基]苯基}乙基)-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰 胺，
N-(1-{5-氯-6-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]吡啶-3-基}乙基)-2-(7-硝基-1H-苯 并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-(1-{6-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]吡啶-3-基}乙基)-2-(7-硝基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺，
N-[(1S)-1-(4-{[(1S)-1-甲基丙基]氧基}苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺，
N-[(1S)-1-(4-乙氧基苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[(1S)-1-(4-异丙氧基苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[(3R)-5-甲氧基-3，4-二氢-2H-苯并吡喃-3-基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑 -1-基)乙酰胺，
N-[(3R)-8-氟-5-甲氧基-3，4-二氢-2H-苯并吡喃-3-基]-2-(7-硝基-1H-苯并 咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(4-{[(2S)-2-甲氧基丙基]氧基}苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑 -1-基)乙酰胺，
N-[1-(4-环丙基苯基)乙基]-2-(7-硝基-1 H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(4-乙炔基苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(4-叔丁基苯基)乙基]-2-(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[(1S)-1-(4-叔丁基苯基)乙基]-2-(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(4-叔丁基苯基)乙基]-2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(5-异丙氧基吡啶-2-基)乙基]-2-(7-硝基-1 H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(5-叔丁基-2-噻吩基)乙基]-2-(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(5-叔丁基-2-噻吩基)乙基]-2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(5-叔丁基-2-噻吩基)乙基]-2-(7-氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(5-叔丁基吡啶-2-基)乙基]-2-(7-氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[2-(4-氯苯基)-1-甲基乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-{(1S)-1-[4-(2-氟乙氧基)苯基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰 胺，
N-{(1S)-1-[4-(2-甲氧基-1-甲基乙氧基)苯基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺，
N-{1-[3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基) 乙酰胺，
N-{1-[4-(2，2-二氟乙氧基)苯基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰 胺，
N-{1-[4-(环戊基氧基)-3-氟苯基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰胺，
N-{1-[4-[(1-甲基哌啶-4-基)氧基]-3-(三氟甲基)苯基]乙基}-2-(7-硝基 -1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-{1-[4-{[(2S)-2-甲氧基丙基]氧基}-3-(三氟甲基)苯基]乙基}-2-(7-硝基 -1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-{1-[5-(环丙基甲氧基)吡啶-2-基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基) 乙酰胺，
N-{1-[5-氯-6-(2-氟乙氧基)吡啶-3-基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基) 乙酰胺，
N-{1-[6-(2，2-二氟乙氧基)吡啶-3-基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基) 乙酰胺，
N-{1-[6-(2-氟乙氧基)吡啶-3-基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰胺，
N-{1-[6-(环戊基氧基)吡啶-3-基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰胺，和
N-{1-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯氧基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基) 乙酰胺。
本发明的另一实施方案涉及选自下列的化合物：
N-((1S)-1-{4-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]苯基}乙基)-2-(7-硝基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺，
2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[6-(2，2，3，3-四氟丙氧基)吡啶-3-基]乙 基}乙酰胺，
N-[1-(4-叔丁基苯基)乙基]-2-(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，和
N-[(1S)-1-(4-叔丁基苯基)乙基]-2-(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺。
本发明的又一实施方案涉及选自下列的化合物：
2-(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}乙酰胺，
2-(7-乙酰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-(1-{4-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]苯基} 乙基)乙酰胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-(1-{4-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]苯基}乙基) 乙酰胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-(1-{4-[氯(二氟)甲基]苯基}乙基)乙酰胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-[1-(4-乙炔基苯基)乙基]乙酰胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)苯基]乙基}乙 酰胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(2，2-二氟乙氧基)苯基]乙基}乙酰 胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}乙酰胺，
2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-(1-{4-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]苯基}乙 基)乙酰胺，
2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-[1-(4-异丙基苯基)乙基]乙酰胺，
2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[3-氟-4-(三氟甲基)苯基]乙基}乙酰 胺，
2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(2，2，2-三氟乙氧基)苯基]乙基}乙 酰胺，
2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(三氟甲氧基)苯基]乙基}乙酰胺，
2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}乙酰胺，
2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{(1 S)-1-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}乙酰 胺，
2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]-2-(三氟 甲基)苯基]乙基}乙酰胺，
2-(7-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-N-[1-(4-异丙基苯基)乙基]乙酰胺，
2-(7-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}乙酰胺，
2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)苯基]乙基} 乙酰胺，
2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(2，2，2-三氟乙氧基)苯基]乙基}乙 酰胺，
2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(三氟甲氧基)苯基]乙基}乙酰胺，
2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}乙酰胺，
(4-叔丁基苯基){[(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰基]氨基}乙酸甲酯，
N-((1S)-1-{4-[(1-甲基丙-2-炔-1-基)氧基]苯基}乙基)-2-(7-硝基-1H-苯并 咪唑-1-基)乙酰胺，
N-((1S)-1-{4-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]苯基}乙基)-2-(7-硝基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺，
N-(1-{2-氯-4-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]苯基}乙基)-2-(7-氰基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺，
N-(1-{4-[氯(二氟)甲基]苯基}乙基)-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰 胺，
N-[(1S)-1-(4-{[(1S)-1-甲基丙基]氧基}苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺，
N-[(1S)-1-(4-乙氧基苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[(1S)-1-(4-异丙氧基苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(4-{[(2S)-2-甲氧基丙基]氧基}苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑 -1-基)乙酰胺，
N-[1-(4-环丙基苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(4-乙炔基苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(4-叔丁基苯基)乙基]-2-(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[(1S)-1-(4-叔丁基苯基)乙基]-2-(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(4-叔丁基苯基)乙基]-2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-{(1S)-1-[4-(2-氟乙氧基)苯基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰 胺，
N-{(1S)-1-[4-(2-甲氧基-1-甲基乙氧基)苯基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺，
N-{1-[4-(2，2-二氟乙氧基)苯基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰 胺，
N-{1-[4-(环戊基氧基)-3-氟苯基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰胺，
N-{1-[4-[(1-甲基哌啶-4-基)氧基]-3-(三氟甲基)苯基]乙基}-2-(7-硝基 -1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，以及
N-{1-[4-{[(2S)-2-甲氧基丙基]氧基}-3-(三氟甲基)苯基]乙基}-2-(7-硝基 -1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺。
本发明的一个实施方案涉及选自下列的化合物：
N-{1-[6-(2-氟乙氧基)吡啶-3-基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰胺，
N-(1-{6-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]吡啶-3-基}乙基)-2-(7-硝基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺，
N-{1-[6-(环戊基氧基)吡啶-3-基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰胺，
N-(1-{5-氯-6-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]吡啶-3-基}乙基)-2-(7-硝基-1H-苯 并咪唑-1-基)乙酰胺，
2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]丙基}乙酰 胺，
2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]乙基}乙酰 胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]乙基}乙 酰胺，
N-{1-[3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基) 乙酰胺，
N-{1-[5-氯-6-(2-氟乙氧基)吡啶-3-基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基) 乙酰胺，
2-(7-氯-苯并咪唑-1-基)-N-[1-(6-异丙氧基-吡啶-3-基)-乙基]-乙酰胺，
N-[1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-{1-[5-(环丙基甲氧基)吡啶-2-基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基) 乙酰胺，
N-[1-(5-异丙氧基吡啶-2-基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(5-叔丁基吡啶-2-基)乙基]-2-(7-氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(5-叔丁基-2-噻吩基)乙基]-2-(7-氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(5-叔丁基-2-噻吩基)乙基]-2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡啶-3-基]乙 基}乙酰胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡啶-3-基]乙基} 乙酰胺，
2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[6-(2，2，3，3-四氟丙氧基)吡啶-3-基]乙 基}乙酰胺，
2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[6-(2，2，3，3-四氟丙氧基)吡啶-3-基]乙基} 乙酰胺，
N-{1-[6-(2，2-二氟乙氧基)吡啶-3-基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基) 乙酰胺，和
N-[1-(5-叔丁基-2-噻吩基)乙基]-2-(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺。
本发明进一步的实施方案涉及选自下列的化合物：
N-[1-(6-叔丁基-2-甲氧基吡啶-3-基)乙基]-2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基) 乙酰胺，
N-[1-(6-叔丁基-2-甲基吡啶-3-基)乙基]-2-(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基) 乙酰胺，
N-[1-(6-叔丁基-4-甲基吡啶-3-基)乙基]-2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰胺，
N-[1-(6-叔丁基-2-氯吡啶-3-基)乙基]-2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰 胺，
N-[1-(6-叔丁基吡啶-3-基)乙基]-2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，
N-[1-(4-叔丁基苯基)乙基]-2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺，和 2-(7-乙酰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-[(1S)-1-(4-叔丁基苯基)乙基]乙酰胺。
下面列出在说明书和权利要求中所使用的用来描述本发明的不同术语 的定义。
为了避免疑问，应当理解，在说明书中基团被限定为“上文中定义的”， “定义在上文中”或“上面定义的”时，所述基团包括首次出现和最宽的定义， 以及该基团的每个和所有其它定义。
为了避免疑问，应当理解，在说明书中‘C1-3’表示具有1、2或3个碳原 子的碳基团，‘C1-6’表示具有1、2、3、4、5或6个碳原子的碳基团，及‘C3-7’ 表示具有3、4、5、6或7个碳原子的碳基团。
在本说明书中，除非另有说明，术语“烷基”包括直链和支链烷基，并可 为但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁 基、正戊基、异戊基、叔戊基、新戊基、正己基、异己基或叔己基。
术语“氨”或“氨基”指的是通式-NRR’的基团，其中R和R’独立选自氢或 烃基。
术语“芳族基团(aromatic)”指的是具有一个或多个带有芳香特征(如， 4n+2个离域电子)的多不饱和碳环并且包含6个至多约14个碳原子的烃基。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“芳基”，指的是具有一个或多个带有 芳香特征(如，4n+2个离域电子)的多不饱和碳环并且包含5个至多约14个 碳原子的烃基，其中基团位于芳族环的碳上。
在本说明书中，除非另有说明，术语“环烷基”指的是任选取代的饱和环 烃环系。术语“C3-7环烷基”可为环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基。
术语“杂环”或“杂环的”或“杂环部分”指的是具有一个或多个杂原子作 为环结构部分以及环中包含至少3个至多约20个碳原子(优选5和6元环) 的含环的一价或二价基团，所述杂原子独立地选自N、O、P和S。杂环部 分可为饱和的或不饱和的，含有一个或多个双键，且杂环部分可含有不止一 个的环。
术语“杂环烷基氧基”表示3-至7-元非芳族的、部分或全部饱和的烃基， 其含有一个环和至少一个杂原子。所述杂环的实例包括但不限于吡咯烷基氧 基(pyrrolidinyloxy)、吡咯烷酮基氧基、哌啶基氧基、哌嗪基氧基、吗啉基氧 基、噁唑基氧基、2-噁唑烷酮基氧基或四氢呋喃基氧基。
在本说明书中，除非另有说明，术语“杂芳基”指的是任选取代的单环或 二环不饱和芳族环系，其含有至少一个独立地选自N、O或S的杂原子。“杂 芳基”的实例可为但不限于吡啶基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑 基、异噁唑基、噻唑基、吡唑基、苯并呋喃基、吲哚基、异吲哚基、苯并咪 唑基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、四唑基、三唑基或噁唑基。
在本说明书中，除非另有说明，术语“芳基烷基”和“杂芳基烷基”指的是 通过烷基与芳基或杂芳基相连的取代基。
在本说明书中，除非另有说明，术语“卤代(halo)”和“卤素(halogen)”可以 是氟、碘、氯或溴。
在本说明书中，除非另有说明，术语“卤代烷基”指的是被如上定义的卤 素所取代的如上定义的烷基。术语“C1-6卤代烷基”可包括但不限于氟甲基、 二氟甲基、三氟甲基、氟乙基、二氟乙基或溴丙基。
本发明涉及如上所定义的本发明化合物及其盐、溶剂化物或溶剂化盐。 用于药物组合物的盐可为药用的盐，但其它盐也可用于制备本发明的化合 物。
本发明化合物的合适药用的盐为例如酸加成盐，例如与无机酸或有机酸 形成的酸加成盐。此外，本发明化合物的合适的药用的盐为碱金属盐、碱土 金属盐或与有机碱形成的盐。
其它药用的盐和这些盐的制备方法可参见，例如Remington’s Pharmaceutical Sciences(18th Edition，Mack Publishing Co.)。
一些本发明化合物可具有手性中心和/或几何异构中心(E-和Z-异构体)， 并且应当理解本发明包括所有这样的旋光异构体、非对映异构体和几何异构 体。
本发明还涉及本发明化合物的任何以及所有互变异构形式。
制备方法
一些本发明化合物可按照PCT/SE2004/000738所述的方法来制备。
本发明另一方面提供了制备式I化合物或其盐、溶剂化物或溶剂化盐的 方法。
在下面对这些方法的描述中，应当理解，适当的时候，可按照有机合成 领域的普通技术人员容易理解的方式加入合适的保护基团，并随后从各种反 应物和中间体中除去保护基团。使用这些保护基团的常规操作以及合适的保 护基团的实例描述在，例如“Protective Groups in Organic Synthesis”，T.W. Green，P.G.M.Wuts，Wiley-Interscience，New York，(1999)中。有关其它合适反 应的文献和说明描述在有机化学教科书，例如“Advanced Organic Chemistry”， March，4th ed.McGraw Hill(1992)或“Organic Synthesis”，Smith，McGraw Hill， (1994)中。对于杂环化学的代表性实例，参见例如“Heterocyclic Chemistry”，J. A.Joule，K.Mills，G.F.Smith，3rd ed.Chapman和Hall(1995)，p.189-224以及 “Heterocyclic Chemistry”，T.L.Gilchrist，2nd ed.Longman Scientific and Technical(1992)，p.248-282。
术语“室温”和“环境温度”除非另有说明，表示16至25℃之间的温度。
制备方法
本发明的一个实施方案涉及根据一般方法A或B制备式I化合物的方 法，其中R1至R4如式I所定义的，所述方法包括：
方法A
其中式I的目标化合物如下获得：将式II的苯并咪唑乙酸或其脱质子化 形式转化为活化形式，即酰氯或混合酸酐的形式，然后进一步用合适的胺 NH2CHR2R4处理得到，其中酰氯形式是用草酰氯处理得到的，以及混合酸 酐是用O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基六氟磷酸盐处理得到 的。该反应可用本领域技术人员已知的任何方法进行。活化可用其它任何相 似的活化剂进行，如1，3-二环己基碳二亚胺、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基) 碳二亚胺盐酸盐或1，1′-羰二咪唑。用于该反应的合适溶剂可为卤代烃例如氯 仿、二氯甲烷和二氯乙烷，或芳族和杂芳族化合物例如苯、甲苯、二甲苯、 吡啶和二甲基吡啶(lutidine)，或醚例如乙醚、四氢呋喃和二噁烷，或疏质子 极性溶剂如乙腈和二甲基甲酰胺，或以上物质的任意混合物。也可使用催化 剂例如杂芳族的碱如吡啶和二甲基吡啶或叔胺如三乙胺、N-甲基吗啉和乙基 二异丙胺。温度可在-30至50℃之间，反应时间1至30h之间。
起始原料，式II的酸，可由市售的适当的1，2，3-三取代的苯和1，2，3，4- 四取代的苯开始，用下列合成实施例中详细描述的多步操作获得。
方法B
其中式Ia的目标化合物从式II的苯并咪唑乙酸或其脱质子化形式经两 步操作获得。第一步包括根据方法A的操作将酸II转化为中间体III，在第 二步中使用适当的醇R5OH在三信条件(Mitsunobu reaction)将中间体转化为 最终产物。
中间体
本发明进一步的实施方案涉及选自下列的化合物：
N-[(1S)-1-(4-羟基苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺
1-[6-(2-氟乙氧基)吡啶-3-基]乙胺，
1-[6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡啶-3-基]乙胺，
1-[6-(2，2-二氟乙氧基)吡啶-3-基]乙胺，
1-[6-(2，2，3，3-四氟丙氧基)吡啶-3-基]乙胺，
1-[6-(环戊基氧基)吡啶-3-基]乙胺，
1-(4-{[(2S)-2-甲氧基丙基]氧基}苯基)乙胺，
1-[4-(2，2，2-三氟乙氧基)苯基]乙胺，
1-[4-[(1-甲基哌啶-4-基)氧基]-3-(三氟甲基)苯基]乙胺，
1-[4-{[(2S)-2-甲氧基丙基]氧基}-3-(三氟甲基)苯基]乙胺，
(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酸，
[(5-叔丁基-2-噻吩基)甲基]胺，
[1-(5-叔丁基吡啶-2-基)乙基]胺，
6-叔丁基-4-甲基吡啶-3-腈，
[1-(6-叔丁基吡啶-3-基)乙基]胺，
[1-(6-叔丁基-2-氯吡啶-3-基)乙基]胺，
[1-(6-叔丁基-2-甲氧基吡啶-3-基)乙基]胺，
[1-(6-叔丁基-4-甲基吡啶-3-基)乙基]胺，
6-叔丁基-2-甲基吡啶-3-腈，以及
[1-(6-叔丁基-2-甲基吡啶-3-基)乙基]胺。
另一个实施方案涉及这些化合物作为中间体在制备本发明化合物中的 用途。
药物组合物
根据本发明的一个实施方案，提供了一种药物组合物，其包括作为活性 成分的治疗有效量的本发明化合物，或其盐、溶剂化物或溶剂化盐，以及结 合有一种或多种药用的稀释剂、赋形剂和/或惰性载体。
所述组合物可为适于口服给药的形式，例如为片剂、丸剂、糖浆剂、粉 剂、颗粒剂或胶囊剂，适于肠胃外注射(包括静脉内、皮下、肌内、血管内 或输注)给药的形式，为无菌溶液、混悬液或乳剂；适于局部给药的形式， 例如作为软膏剂、贴片(patch)或霜膏剂；或适于直肠给药的形式，例如为栓 剂。
通常，上述组合物可使用一种或多种常规的赋形剂、药用的稀释剂和/ 或惰性载体，用常规的方法制备。
在治疗哺乳动物包括人时，本发明化合物的合适日剂量，口服给药时为 约0.01至250mg/kg体重，肠胃外给药时为约0.001至250mg/kg体重。
活性成分的典型日剂量在宽范围内变化，并取决于各种因素，如相关的 适应症、所治疗的疾病的严重程度、给药途径、患者的年龄、体重和性别以 及所用的具体化合物，以及可由医师确定。
药物组合物的实例
以下说明含有本发明化合物，或其盐、溶剂化物或溶剂化盐(下文中化 合物X)的代表性的药物剂型，其用于哺乳动物的预防或治疗用途：
(a)：片剂 mg/片剂 化合物X 100 乳糖 182.75 交联羧甲基纤维素钠 12.0 玉米淀粉糊剂(5％w/v糊剂) 2.25 硬脂酸镁 3.0
(b)：胶囊 mg/胶囊 化合物X 10 乳糖 488.5 硬脂酸镁 1.5
(c)：注射剂 (50mg/ml) 化合物X 5.0％w/v 1M氢氧化钠溶液 15.0％v/v 0.1M盐酸 (pH调至7.6) 聚乙二醇400 4.5％w/v 注射用水 至100％
上述组合物可通过药学领域中熟知的常规操作制备得到。
医药用途
意料不到地，已发现本发明的化合物可用于治疗。本发明的化合物，或 其盐、溶剂化物或溶剂化盐以及它们相应的活性代谢产物对单独的香草素受 体1(VR1)组显示出高度的效能和选择性。因此，预期本发明的化合物可用 于治疗与香草素受体1(VR1)的刺激性激活(excitatory activation)有关的病症。
该化合物可用于在哺乳动物包括人中产生VR1的抑制作用。
VR1在外周神经系统和其它组织中被高度表达。因此，预期本发明化合 物很好地适于治疗VR1介导的病症。
预期本发明的化合物适于治疗急慢性疼痛(acute and chronic pain)、急慢 性神经性疼痛(acute and chronic neuropathic pain)和急慢性炎性疼痛(acute and chronic inflammatory pain)。
这类病症的实例可选自：腰背痛、术后痛、内脏痛如慢性骨盆痛等。
预期本发明的化合物还适于治疗急慢性伤害性疼痛。
进一步的有关病症可选自膀胱炎，包括间质性膀胱炎和与其相关的疼 痛、局部缺血、坐骨神经痛、糖尿病性神经病、多发性硬化症、关节炎、骨 关节炎、类风湿性关节炎、纤维肌痛，银屑病有关的疼痛和其它体征和症状， 癌、呕吐、尿失禁、膀胱活动过度和HIV神经病有关的疼痛和其它体征和症 状。
另外相关的病症可选自胃食管回流病(GERD)、过敏性肠综合征(IBS)、 炎症性肠病(IBD)和胰腺炎。
其它相关的病症是与呼吸系统疾病相关的，可选自哮喘、咳嗽、慢性阻 塞性肺部疾病，尤其是慢性阻塞性肺病(COPD)和肺气肿、肺纤维化和间质 性肺病。
其它相关的病症为肥胖症和肥胖症相关疾病或病症，或偏头痛。
在一个实施方案中肥胖症和肥胖症相关疾病或病症选自下列：1型糖尿 病、2型糖尿病、葡萄糖耐量降低、心血管疾病、高血压、胰岛素耐受、癌 和生殖疾病。
VR1抑制剂可经口服或吸入途径给药。呼吸系统疾病可为急性和慢性的 疾病，及可与感染和/或暴露在环境污染物中和/或刺激物有关。
本发明的化合物也可用作抗毒素以治疗在VR1活化剂如辣椒辣素、催 泪气、酸或热中的(过度-)暴露。对于热，VR1拮抗剂对(阳光-)烧伤引起的疼 痛，或由烧伤导致的炎性疼痛具有潜在作用。
该化合物还可进一步用于治疗对VR1活化剂的耐受。
本发明的一个实施方案涉及如上所定义的本发明化合物作为药物的用 途。
本发明的另一个实施方案涉及如上所定义的本发明化合物作为用于治 疗VR1介导的病症的药物的用途。
本发明的另一个实施方案涉及如上所定义的本发明化合物作为用于治 疗急慢性疼痛的药物的用途。
本发明的另一个实施方案涉及如上所定义的本发明化合物作为用于治 疗急慢性伤害性疼痛的药物的用途。
本发明的另一个实施方案涉及如上所定义的本发明化合物作为用于治 疗急慢性神经性疼痛的药物的用途。
本发明的另一个实施方案涉及如上所定义的本发明化合物作为用于治 疗急慢性炎性疼痛的药物的用途。
本发明的另一个实施方案涉及如上所定义的本发明化合物作为用于治 疗腰背痛、术后痛和内脏痛如慢性骨盆痛的药物的用途。
本发明的另一个实施方案涉及如上所定义的本发明化合物作为用于治 疗下列疾病的药物的用途：膀胱炎，包括间质性膀胱炎和与其相关的疼痛、 局部缺血、坐骨神经痛、糖尿病性神经病、多发性硬化症、关节炎、骨关节 炎、类风湿性关节炎、纤维肌痛，银屑病有关的疼痛和其它体征和症状，癌、 呕吐、尿失禁、膀胱活动过度和HIV神经病有关的疼痛和其它体征和症状。
本发明的另一个实施方案涉及如上所定义的本发明化合物作为用于治 疗下列疾病的药物的用途：胃食管回流病(GERD)、过敏性肠综合征(IBS)、 炎症性肠病(IBD)和胰腺炎。
本发明的另一个实施方案涉及如上所定义的本发明化合物作为用于治 疗选自下列的呼吸系统疾病的药物的用途：哮喘、咳嗽、慢性阻塞性肺病 (COPD)、慢性阻塞性肺部疾病、肺气肿、肺纤维化和间质性肺病。
本发明的一个实施方案涉及如上所定义的式I化合物在制备用于治疗 VR1介导的病症和治疗急慢性疼痛、急慢性神经性疼痛、急慢性炎性疼痛和 呼吸系统疾病，以及上述任何其它病症的药物中的用途。
本发明的另一个实施方案涉及治疗VR1介导的病症和急慢性疼痛、急 慢性神经性疼痛和急慢性炎性疼痛，和呼吸系统疾病，以及上述任何其它病 症的方法，所述方法包括将治疗有效量的如上所定义的本发明化合物给药于 需要所述治疗的哺乳动物(包括人)。
本发明另一个实施方案涉及一种药物组合物，其包括如上所定义的本发 明化合物，所述药物组合物用于治疗VR1介导的病症以及用于治疗急慢性 疼痛、急慢性神经性疼痛和急慢性炎性疼痛，和呼吸系统疾病，以及上述任 何其它病症。
在本说明书的上下文中，除非另有说明与此相反，术语“治疗(therapy)” 和“处置(treatment)”包括防止(prevention)和预防(prophylaxis)。术语“治疗”、 “治疗的”和“治疗地”也应相应地解释。
在本说明书中，除非另有说明，术语“抑制剂”和“拮抗剂”是指以任何方 式，部分或完全地，阻断导致产生配体响应的传导路径的化合物。
术语“病症”，除非另有说明，是指与香草素受体活性相关的任何病症和 疾病。
非医药用途
除用于治疗药物外，本发明的化合物、或其盐、溶剂化物或溶剂化盐还 用作药理学工具，用于在实验动物，如猫、狗、家兔、猴、大鼠和小鼠中评 价VR1相关活性的抑制剂作用的体外和体内测试系统的开发和标准化，作 为寻找新治疗剂的组成部分。
实施例
现将通过下面的非限定性实施例阐述本发明。
缩写
DCE 二氯乙烷
DCM 二氯甲烷
DMAP 二甲基氨基吡啶
EDC 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐
HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基六氟磷酸盐
HPLC 高效液相色谱
LC 液相色谱
MS 质谱
ret.Time保留时间
TFA 三氟乙酸
THF 四氢呋喃
DMF 二甲基甲酰胺
TMEDA 四甲基乙二胺
EtOAc 乙酸乙酯
一般方法
所有起始原料为市售的或在文献中有描述。1H NMR光谱于400MHz下 记录在Brucker；质谱利用电喷雾(LC-MS；LC：Waters 2790，柱XTerra MS C82.5μm 2.1X30mm，缓冲液梯度H2O+0.1％TFA：CH3CN+0.04％TFA，MS：微 质量ZMD//乙酸铵缓冲液)电离技术记录。
中间体的合成：7-取代的1H-苯并咪唑-1-基-乙酸，1)至5)
1)(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酸-其合成描述在WO2004/100865中。
2)(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)乙酸-其合成描述在WO2004/100865中。
3)(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酸
a)乙醇，氨基乙醇，b)Pd/C 10％，乙醇，乙酸乙酯c)1-甲酸，2-2NNH3乙醇
d)四甲基哌啶氧化物(TEMPO)，NaClO2，NaClO，MeCN，6.8磷酸盐缓冲液
A 2-[(2，3-二氟-6-硝基苯基)氨基]乙醇：将1，2，3-三氟-4-硝基苯(5.0g，28.2 mmol)和乙醇胺(1.72g，28.2mmol)于100ml乙醇中的溶液在室温搅拌过夜， 然后在70℃搅拌5小时。将反应混合物浓缩至干，并经硅胶快速色谱(梯度 为80/20至20/80庚烷/乙酸乙酯)进行纯化，得到橙色固体。收率(3.8g，62％)。 1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm 1.67(t，J＝5.08Hz，1H)3.77-3.83(m，2H) 3.88-3.94(m，2H)6.51(ddd，J＝9.77，8.59，7.03 Hz，1H)8.02(ddd，J＝9.77， 5.66，2.34 Hz，1H)8.21(s，1H)。
B 2-[(6-氨基-2，3-二氟苯基)氨基]乙醇：向2-[(2，3-二氟-6-硝基苯基)氨基] 乙醇(3.8g，17.4mmol)于70ml乙酸乙酯和30ml乙醇中的溶液中加入10％ Pd/C(380mg)。将反应物在50psi的氢气中摇动3小时。定时地将压力调至 50psi。反应物通过硅藻土过滤，用乙醇冲洗并浓缩。得到的物质没有进一 步纯化就用于下一步。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm 3.17-3.27(m，2H) 3.68-3.78(m，2H)6.38(ddd，J＝8.89，4.69，2.05 Hz，1H)6.61-6.70(m，1H)。
C 2-(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙醇：将2-[(6-氨基-2，3-二氟苯基)氨基] 乙醇于100ml甲酸中的溶液在100℃加热2小时。将反应物浓缩至干，吸收 于100ml 2N NH3的乙醇中并搅拌2.5小时。将反应物浓缩，并将其吸收在 乙酸乙酯中。过滤收集得到的沉淀物，并用冷的乙酸乙酯冲洗。将母液浓缩 并经硅胶快速色谱(使用乙酸乙酯/庚烷)纯化。基于3.8g 2-[(2，3-二氟-6-硝基 苯基)氨基]乙醇，两步的合并收率为3.2g或93％。1H NMR(400 MHz，CDCl3) δppm 4.06(dt，J＝4.78，0.98 Hz，2H)，4.39(t，J＝4.78 Hz，2H)，6.92(ddd， J＝11.03，8.89，7.42 Hz，1H)，7.12(ddd，J＝8.89，3.71，1.27 Hz，1H)，7.76(s，1 H)。
D(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酸：
将2-(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙醇(2.96g，15mmol)吸收于75ml MeCN和磷酸钠缓冲液(56ml，0.67 M，pH 6.8)中，将混合物加热至42℃。加 入TEMPO(165mg，1.05mol)，随后历时1.5h同时滴加NaClO2(3.38g，80％ 纯，30mmol在15ml水中)溶液和漂白粉(bleach)(350μL 6％的NaOCl于 7.5mL水中)溶液。48小时后，加入等量的NaClO2和漂白粉。再过24小时 后，加入TEMPO(165mg，1.05mol)，并将反应物搅拌72小时。将变黑的反 应物冷却至室温并随后滴加30ml饱和Na2SO3溶液(放热)。反应物变为几乎 无色。用2N NaOH使pH升至9.2，并将反应物用乙酸乙酯萃取4次。然后 用2N HCl使pH降至3.8，将溶液静置48小时。回收1.98g白色结晶物质。 将母液的体积减为一半，使其静置。又收集到260mg。(合并收率2.23g，70％)
1H NMR(400 MHz，DMSO-D6)δppm 5.19(s，2H)7.25(ddd，J＝11.62， 8.89，7.62 Hz，1H)7.49(ddd，J＝8.94，3.86，1.07 Hz，1H)8.13-8.28(m，1H) 13.38(s，1H)
4)(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酸-其合成描述在WO2004/100865，实 施例12中。
5)(7-乙酰基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酸
A.1-[1-(2-羟乙基)-1H-苯并咪唑-7-基]乙酮.
将1-(2-羟乙基)-1H-苯并咪唑-7-腈(0.29g，1.5mmol)于无水THF(6.2ml) 中的溶液冷却至-78℃并缓慢加入甲基锂(MeLi)(5.8mL，9.3mmol)。加完之 后将反应混合物温热至环境温度并保持这样30分钟。再次将温度降至-78℃， 缓慢加入水(4ml)。温热之后反应混合物酸化至pH 4，在50℃加热30分钟。 减压移除溶剂，残余物在乙酸乙酯和NaHCO3水溶液之间分配。将有机萃取 物进一步用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩。在快速硅胶柱上(使用乙 酸乙酯-甲醇作为洗脱剂)进行纯化。
收率0.25g(80％)。C11H12N2O3的分析计算值：m/z：204.23，实测值： 205.23[M+H]+。
1H NMR(400 MHz，DMSO-D6)δppm 2.67(s，3H)3.51(q，J＝5.1 Hz，2H) 4.41(t，J＝5.3 Hz，2H)4.77(t，J＝5.1 Hz，1H)7.29(t，J＝7.8 Hz，1H)7.78(dd， J＝7.6，1.0 Hz，1H)7.88(dd，J＝8.1，1.0 Hz，1H)8.20(s，1H)。
B.标题化合物：(7-乙酰基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酸按照合成(7-氰基-1H- 苯并咪唑-1-基)乙酸所述的操作(D部分)制备和分离，为三乙铵盐的形式。收 率116mg(30％)。C11H10N2O3的分析计算值：m/z：218.21，实测值219.16 [M+H]+。1H NMR(400 MHz，DMSO-D6)δppm 1.02(t，J＝7.1 Hz，9H)2.56(s， 3H)2.68-2.77(m，6H)4.91(s，2H)7.24(t，J＝7.8 Hz，1H)7.70(d，J＝7.6 Hz，1 H)7.81-7.85(m，1H)8.16(s，1H)。
中间体的合成：胺，6)至16)
6)N-[(1S)-1-(4-羟基苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺
标题化合物按照目标化合物合成的一般操作(参见下文)由(7-硝基-1 H- 苯并咪唑-1-基)乙酸和4-[(1S)-1-氨基乙基]苯酚合成。1H NMR(400 MHz， DMSO-d6)δppm 9.26(s，1H)8.55(d，J＝8.03 Hz，1H)8.40(s，1H)8.10(d， J＝8.03 Hz，1H)7.98(d，J＝7.53 Hz，1H)7.39(t，J＝8.03 Hz，1H)7.05-7.15(m， 2H)6.64-6.75(m，2H)5.19(s，2H)4.71-4.83(m，1H)1.32(d，J＝6.78 Hz，3H). MS(ESI)m/z：341[M+H]
7)1-[6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡啶-3-基]乙胺
A.6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡啶-3-腈
在0-5℃向6-氯吡啶-3-腈(0.30g，2.2mmol)中加入2，2，2-三氟乙醇(0.19 mL，2.6mmol)和叔丁醇钾(1M的THF溶液，2.5mL，2.5mmol)的混合物。 将所得混合物于环境温度搅拌1小时。加入水(20mL)，随后用乙酸乙酯(2× 20mL)萃取。有机层经硫酸钠干燥，真空浓缩得到6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡啶 -3-腈，0.42g(96％)。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δppm 8.76(d，J＝2.26Hz，1 H)8.28(dd，J＝8.53，2.26 Hz，1H)7.21(d，J＝8.78 Hz，1H)5.09(q，J＝8.95 Hz，2 H)。
B.在-78℃向6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡啶-3-腈(0.42 g，2.1mmol)于THF (4mL)的溶液中滴加甲基溴化镁(3M的乙醚溶液，1.4mL，4.2mmol)。将反 应混合物在环境温度搅拌3-5小时，然后冷却至-78℃。加入甲醇(10mL)， 随后加入硼氢化钠(0.24g，6.3mmol)，将反应混合物在环境温度搅拌过夜。 将混合物用水(20mL)稀释，浓缩并用氯仿(40mL)萃取。将混合物过滤以利 于各层的分离。分离有机相并用盐酸(5％，20mL)萃取。将水相真空浓缩至干 并用乙腈共蒸发两次，得到与盐酸成盐的标题产物(0.4g，75％)。通过用氯仿 从碱化的水溶液(pH 8-9)中萃取，将所得的产物转变为1-[6-(2，2，2-三氟乙氧 基)吡啶-3-基]乙胺的中性形式。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δppm 8.13(d， J＝2.26 Hz，1H)7.81(dd，J＝8.53，2.51 Hz，1H)6.91(d，J＝8.28 Hz，1H)4.96(q， J＝9.29 Hz，2H)4.00(q，J＝6.53 Hz，1H)1.24(d，J＝6.53 Hz，3H).MS(ESI) m/z：221[M+H]
8)1-[6-(2-氟乙氧基)吡啶-3-基]乙胺
标题化合物按照合成1-[6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡啶-3-基]乙胺所述的2- 步操作，由6-氯吡啶-3-腈和2-氟乙醇合成。
6-(2-氟乙氧基)吡啶-3-腈1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δppm 8.70(d， J＝2.51 Hz，1H)8.18(dd，J＝8.66，2.38 Hz，1H)7.07(d，J＝8.78 Hz，1H)4.49 -4.88(m，4H).MS(ESI)m/z：167[M+H]
1-[6-(2-氟乙氧基)吡啶-3-基]乙胺1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δppm 8.08(d，J＝2.26 Hz，1H)7.74(dd，J＝8.53，2.51 Hz，1H)6.80(d，J＝8.53 Hz，1H) 4.37-4.81(m，4H)3.97(q，J＝6.53 Hz，1H)1.24(d，J＝6.53 Hz，3H).MS(ESI) m/z：185[M+H]
9)1-[6-(2，2-二氟乙氧基)吡啶-3-基]乙胺
标题化合物按照合成1-[6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡啶-3-基]乙胺所述的2- 步操作，由6-氯吡啶-3-腈和2，2-二氟乙醇合成。
6-(2，2-二氟乙氧基)吡啶-3-腈：1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δppm 8.73 (d，J＝2.51 Hz，1H)8.23(dd，J＝8.78，2.51 Hz，1H)7.14(dd，J＝8.66，0.63 Hz，1 H)6.23-6.62(m，1H)4.58-4.74(m，2H)
1-[6-(2，2-二氟乙氧基)吡啶-3-基]乙胺：1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ ppm 8.11(d，J＝2.51 Hz，1H)7.77(dd，J＝8.53，2.51 Hz，1H)6.85(d，J＝8.53 Hz， 1H)6.19-6.54(m，1H)4.46-4.60(m，2H)3.99(q，J＝6.53 Hz，1H)1.24(d， J＝6.53 Hz，3H)
MS(ESI)m/z：203[M+H]
10)1-[6-(2，2，3，3-四氟丙氧基)吡啶-3-基]乙胺
标题化合物按照合成1-[6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡啶-3-基]乙胺所述的两步 操作，由6-氯吡啶-3-腈和2，2，3，3-四氟丙-1-醇合成。
6-(2，2，3，3-四氟丙氧基)吡啶-3-腈：1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δppm 8.75(d，J＝2.26 Hz，1H)8.26(dd，J＝8.53，2.26 Hz，1H)7.17(d，J＝8.78 Hz，1H) 6.51-6.84(m，1H)4.96(t，J＝14.18 Hz，2H)
1-[6-(2，2，3，3-四氟丙氧基)吡啶-3-基]乙胺：1H NMR(400 MHz，DMSO-d6) δppm 8.12(d，J＝2.51 Hz，1H)7.80(dd，J＝8.53，2.51 Hz，1H)6.88(d，J＝8.53 Hz，1H)6.48-6.82(m，1H)4.82(t，J＝14.30 Hz，2H)3.99(q，J＝6.61 Hz，1H) 1.24(d，J＝6.78 Hz，3H).MS(ESI)m/z：253[M+H]
11)1-[6-(环戊基氧基)吡啶-3-基]乙胺
标题化合物按照合成1-[6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡啶-3-基]乙胺所述的2- 步操作，由6-氯吡啶-3-腈和环戊醇合成。
6-(环戊基氧基)吡啶-3-腈：1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δppm 8.67(d， J＝1.76 Hz，1H)8.11(dd，J＝8.78，2.26 Hz，1H)6.93(d，J＝9.29 Hz，1H) 5.37-5.48(m，1H)1.84-2.05(m，2H)1.51-1.81(m，6H).MS(ESI)m/z：189 [M+H]
1-[6-(环戊基氧基)吡啶-3-基]乙胺：1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δppm 8.06(d，J＝2.51 Hz，1H)7.67(dd，J＝8.53，2.51 Hz，1H)6.67(d，J＝8.53 Hz，1H) 5.27-5.36(m，1H)3.95(q，J＝6.53 Hz，1H)1.85-2.00(m，2 H)1.53-1.77(m，6H) 1.23(d，J＝6.78 Hz，3H).MS(ESI)m/z：207[M+H]
12)1-[4-(2，2，2-三氟乙氧基)苯基]乙胺
标题化合物按照1-[6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡啶-3-基]乙胺合成所述的操 作，步骤B，由4-(2，2，2-三氟乙氧基)苄腈合成。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6) δppm 7.28-7.34(m，2H)6.94-7.00(m，2H)4.70(q，J＝8.78 Hz，2H)3.95(q， J＝6.53 Hz，1H)1.21(d，J＝6.78 Hz，3H).MS(ESI)m/z：220[M+H]
14)1-[4-[(1-甲基哌啶-4-基)氧基]-3-(三氟甲基)苯基]乙胺
A.4-[(1-甲基哌啶-4-基)氧基]-3-(三氟甲基)苄腈
将4-羟基-N-甲基哌啶(133mg，1.15mmol)和叔丁醇钾(150mg，1.27 mmol)于四氢呋喃(2.5mL)中的混合物在氮气下搅拌10分钟。加入4-氟 -3-(三氟甲基)苄腈(218mg，1.15mmol)，并将反应混合物在环境温度搅拌1h。 真空除去溶剂，并将残余物在1M NaOH溶液和乙酸乙酯之间分配。有机层 干燥(Na2SO4)，并对其进行蒸发。残余物经硅胶柱色谱纯化(洗脱剂： CHCl3/MeOH/浓NH3，95∶5∶0.5)得到0.18g(54％收率)纯品，其为无色固体。 MS(APCI)m/z 285[M+H].1H NMR(400 MHz，DMSO-D6)δppm 1.67-1.74 (m，2H)，1.89-1.95(m，2H)，2.16(s，3H)，2.26-2.31(m，2H)，2.44-2.48(m，2 H)，4.78-4.82(m，1H)，7.51(d，J＝8.8 Hz，1H)，8.08(dd，J＝8.8，2.0 Hz，1H)， 8.14(d，J＝2.0 Hz，1H)。
B.标题化合物按照合成1-[6-(2，2，2-三氟乙氧基)吡啶-3-基]乙胺所述的 操作，步骤B，由4-[(1-甲基哌啶-4-基)氧基]-3-(三氟甲基)苄腈合成。硅胶柱 色谱(洗脱剂：CHCl3/MeOH/浓NH3，80∶20∶1)纯化之后，收率为49mg，62％(油 状物)。MS(APCI)m/z 303[M+H].1H NMR(400 MHz，DMSO-D6)δppm 1.23 (d，J＝6.5 Hz，3H)，1.64-1.72(m，2H)，1.86-1.92(m，2H)，2.17(s，3H)， 2.21-2.27(m，2H)，2.47-2.55(m，与DMSO峰部分重叠，2H)，3.97-4.02(m，1 H)，4.55-4.60(m，1H)，7.21(d，J＝8.9 Hz，1H)，7.55(dd，J＝8.7，1.9 Hz，1H)， 7.60(d，J＝2.0 Hz，1H).
15)1-[4-{[(2S)-2-甲氧基丙基]氧基}-3-(三氟甲基)苯基]乙胺
标题化合物按照合成1-[4-[(1-甲基哌啶-4-基)氧基]-3-(三氟甲基)苯基]乙 胺所述的操作，A和B部分，由4-氟-3-(三氟甲基)苄腈和(S)-(+)-2-甲氧基丙 醇合成。硅胶柱色谱(洗脱剂：CHCl3/MeOH/浓NH3，92∶8∶0.5)纯化之后，收 率为39mg，30％(油状物)。MS(APCI)m/z 278[M+H].1H NMR(400 MHz， DMSO-D6)δppm 1.18(d，J＝6.5 Hz，3H)，1.22(d，J＝6.5 Hz，3H)，3.32(s， 与水峰重叠，3H)，3.62-3.68(m，1H)，3.98-4.08(m，3H)，7.18(d，J＝8.5 Hz，1 H)，7.55-7.58(m，1H)，7.60-7.61(m，1H).
16)1-(4-{[(2S)-2-甲氧基丙基]氧基}苯基)乙胺
A.[1-(4-羟基苯基)乙基]氨基甲酸叔丁酯
向1-(4-羟基苯基)乙胺(0.96g，7.0mmol)于THF(20mL)的溶液中加入 三乙胺(2.9mL，21mmol)，随后历时5分钟加入一缩二碳酸二叔丁酯 (di-tert-butyl dicarbonate)(1.8g，8.4mmol)于THF(20mL)中的溶液。将所得 混合物搅拌15小时，减压移除挥发物，残余物经硅胶柱色谱纯化(使用梯度 液庚烷∶乙酸乙酯9∶1至1∶1)，得到1.1g[1-(4-羟基苯基)乙基]氨基甲酸叔丁酯 (64％)。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δppm 9.18(s，1H)7.18(d，J＝7.78 Hz，1 H)7.03-7.11(m，J＝8.41 Hz，2H)6.63-6.72(m，2H)4.45-4.56(m，1H)1.35(s， 9H)1.25(d，J＝7.03 Hz，3H)
MS(ESI)m/z：23 8[M+H]
B.[1-(4-{[(2S)-2-甲氧基丙基]氧基}苯基)乙基]氨基甲酸叔丁酯
向[1-(4-羟基苯基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(0.31g，1.3mmol)于THF(10mL) 的溶液中加入(s)-(+)-2-甲氧基丙醇(0.14g，1.5mmol)，三苯基膦(0.36g，1.4 mmol)和偶氮二羧酸二异丙酯(0.27mL，1.4mmol)；将所得反应混合物于环境 温度搅拌21小时。减压除去挥发物，残余物经硅胶柱色谱(使用庚烷∶乙酸乙 酯4∶1)纯化，得到0.29g[1-(4-{[(2S)-2-甲氧基丙基]氧基}苯基)乙基]氨基甲 酸叔丁酯(74％)。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δppm 7.29(d，J＝8.28 Hz，1H) 7.15-7.21(m，J＝8.78 Hz，2H)6.84-6.89(m，J＝8.53 Hz，2H)4.50-4.60(m，1H) 3.84-3.93(m，2H)3.59-3.68(m，1H)3.30(s，3H)1.35(s，9H)1.26(d，J＝7.03 Hz，3H)1.15(d，J＝6.53 Hz，3H).MS(ESI)m/z：310[M+H]
C.1-(4-{[(2S)-2-甲氧基丙基]氧基}苯基)乙胺
将[1-(4-{[(2S)-2-甲氧基丙基]氧基}苯基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(0.29g， 0.94mmol)用三氟乙酸(2mL)于二氯甲烷(18mL)的溶液处理25分钟，减压 移除挥发物，残余物经硅胶柱色谱(使用二氯甲烷∶甲醇∶三乙胺98∶1∶1)纯化， 以0.12g(59％)的收率得到标题化合物。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ ppm 8.14(s，2H)7.34-7.41(m，J＝8.78 Hz，2H)6.97-7.03(m，2H)4.35(q， J＝6.78 Hz，1H)3.93(d，J＝5.02 Hz，2H)3.60-3.70(m，1H)3.30(s，3H)2.96(q， J＝7.11 Hz，1H)1.45(d，J＝6.78 Hz，3H)1.16(d，J＝6.27 Hz，3H)
中间体的合成：胺，19)至20)
19)[(5-叔丁基-2-噻吩基)乙基]胺
将1-(5-叔丁基-2-噻吩基)乙酮(410mg，2.2mmol)和Ti(OiPr)4(128mg， 4.5mmol)在2N NH3于乙醇(5.5ml，11mmol)的溶液中搅拌过夜。向该糊 剂中加入NaBH4(124mg，3.3mmol)，并再继续搅拌24小时。然后将反应物 用NH4OH稀释并搅拌1小时。将混合物经硅藻土过滤并用乙酸乙酯冲洗。 加入水和乙酸乙酯，并分离有机层。水层用乙酸乙酯萃取三次，并将合并的 有机物用1N HCl洗涤。分离水相，并用乙酸乙酯洗涤，用1N NaOH使之 变为碱性，然后用乙酸乙酯萃取三次。合并的有机层经MgSO4干燥，过滤 并浓缩。收率171mg，42％。
1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm 1.37(s，9H)，1.47(d，J＝6.64 Hz，3H)， 4.29(q，J＝6.64，1H)，6.64(d，J＝3.52 Hz，1H)，6.69(dd，J＝3.52，0.59 Hz，1H)。 20)[1-(5-叔丁基吡啶-2-基)乙基]胺
将1-(5-叔丁基吡啶-2-基)乙酮(2.2mmol)和Ti(OiPr)4(128mg，4.5 mmol)在2N NH3于乙醇(5.5ml，11mmol)的溶液中搅拌过夜。向该糊剂中 加入NaBH4(124mg，3.3mmol)，并再继续搅拌24小时。然后将反应物用 NH4OH稀释并搅拌1小时。混合物经硅藻土过滤并用乙酸乙酯冲洗。加入 水和乙酸乙酯并分离有机层。水层用乙酸乙酯萃取三次，并将合并的有机物 用1N HCl洗涤。分离水层并用乙酸乙酯洗涤，用1N NaOH使之变为碱性， 然后用乙酸乙酯萃取三次。合并的有机层经MgSO4干燥，过滤并浓缩。
中间体的合成：吡啶-3-腈，21)至24)
中间体21：R＝H，R′＝H
中间体22：R＝H，R′＝Cl
中间体23：R＝H，R′＝OCH3
中间体24：R＝CH3，R′＝H
a)(CH3)3CO3H，AgNO3，H2SO3(NH4)S2O4
21)6-叔丁基吡啶-3-腈
将新戊酸(144mol，5当量)和AgNO3(3.76mmol，0.13当量)加到3-氰基 吡啶(29mmol，1当量)于40ml H2O的混悬液中。将该混合物搅拌20min之 后，加入60ml 10％的H2SO4溶液中。将反应物再搅拌20min然后加热至 70℃。历时30分钟滴加(NH4)2S2O8(8.6mmol，1.3当量)的水溶液，并继续加 热2小时或直到TLC监测反应完全。在冰中冷却后，加入2N NaOH，反应 物用乙酸乙酯萃取三次，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。用乙酸乙酯/己烷在 硅胶上进行纯化。
22)6-叔丁基-2-氯吡啶-3-腈
标题化合物按照合成6-叔丁基吡啶-3-腈所述的操作，由2-氯吡啶-3-腈 (3.91g，28mmol)、新戊酸(14.4g，141mmol)、AgNO3(0.622g，3.66mmol)、 (NH4)2S2O8(8.36g，36.6mmol)和50ml 10％H2SO4合成。经正相色谱(使用 100庚烷至95/5庚烷/乙酸乙酯)纯化。(收率：42％，2.3g)。1H NMR(400 MHz， CDCl3)δppm 1.34(s，9H)，7.36(d，J＝8.20 Hz，1H)，7.88(d，J＝8.20 Hz，1H)。
23)6-叔丁基-2-甲氧基吡啶-3-腈
标题化合物按照合成6-叔丁基吡啶-3-腈所述的操作，由2-甲氧基吡啶 -3-腈(8.02g，5.98mmol)、新戊酸(3.05g，39.9mmol)、AgNO3(0.13g，0.78 mmol)、(NH4)2S2O8(1.78g，7.78mmol)和6ml 10％H2SO4合成。经正相色谱 (使用95/5至90/10庚烷/乙酸乙酯)纯化。(收率：80mg，7％)。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm 1.33(s，9H)，4.04(s，3H)，6.97(d，J＝7.81 Hz，2H)，7.78(d， J＝7.81 Hz，2H)。
中间体23也可由中间体22(100mg，0.5mmol)在K2CO3(140mg，1.02 mmol)于1.5ml的MeOH溶液的存在下，在160℃经微波处理30min制得。 (收率：68mg，72％)
24)6-叔丁基-4-甲基吡啶-3-腈
标题化合物按照合成6-叔丁基吡啶-3-腈所述的操作，由4-甲基吡啶-3- 腈(0.5g，4.23mmol)、新戊酸(2.2g，21.1mmol)、AgNO3(0.09g，0.55mmol)、 (NH4)2S2O8(1.25g，5.5mmol)和7.5ml10％的H2SO4合成。经正相色谱(使用 95/5至90/10庚烷/乙酸乙酯)纯化(收率：578mg，78％)。1H NMR(400 MHz， CDCl3)δppm 1.36(s，9H)，2.53(s，3H)，7.28(s，1H)，8.72(s，1H)。
中间体的合成：胺，25)至28)
中间体25：R＝H，R′＝H，R″＝CH3
中间体26：R＝H，R′＝Cl，R″＝CH3
中间体27：R＝H，R′＝OCH3，R″＝CH3
中间体28：R＝CH3，R′＝H，R″＝CH3
b)1.4M MeMgBr 75/25甲苯/THF，NaBH4
25)[1-(6-叔丁基吡啶-3-基)乙基]胺
历时5min将MeMgBr 1.4M 75/25的甲苯/THF(8.9ml，12.48mmol)溶液 滴入冷却的6-叔丁基吡啶-3-腈(中间体21)(1g，6.24mmol)于15mL THF的 溶液中。将反应物搅拌6hr，并用干冰浴冷却，然后滴入MeOH，随后增量 加入NaBH4(0.59g，15.9mmol)。将反应物搅拌过夜，然后加入水和CH2Cl2， 所得的糊剂经硅藻土过滤并用CH2Cl2冲洗。浓缩反应物以除去有机物，并 用乙酸乙酯萃取三次。合并的有机层用1N HCl萃取。水层用28％NH4OH 碱化并用乙酸乙酯萃取三次。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥， 过滤并浓缩。(收率：488mg，49％)。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm 1.36(s， 9H)1.40(d，J＝6.60 Hz，3H)4.15(q，J＝6.60 Hz，1H)7.31(d，J＝8.20 Hz，1H) 7.63(dd，J＝8.20，2.34 Hz，1H)8.52(d，J＝2.34 Hz，1H)。
26)[1-(6-叔丁基-2-氯吡啶-3-基)乙基]胺
标题化合物按照合成[1-(6-叔丁基吡啶-3-基)乙基]胺所述的操作，由6- 叔丁基-2-氯吡啶-3-腈(中间体22)(2.0g，10.3mmol)、MeMgBr(18ml，25.7 mmol)和NaBH4(970mg，25.7mmol)合成。得到的物质在后续的偶合步骤中 直接使用。(收率：1.76g，79％)1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm 1.34(s，9H) 1.39(d，J＝6.64 Hz，3H)4.47(q，J＝6.64 Hz，1H)7.26(d，J＝8.01 Hz，1H)7.78 (d，J＝8.01 Hz，1H)。
27)[1-(6-叔丁基-2-甲氧基吡啶-3-基)乙基]胺
标题化合物按照合成[1-(6-叔丁基吡啶-3-基)乙基]胺所述的操作，由6- 叔丁基-2-甲氧基吡啶-3-腈(中间体23)(66mg，0.347mmol)、MeMgBr 1.4M 75/25甲苯/THF(743L，1.04mmol)和NaBH4(32.8mg，0.87mmol)合成。在制 备中后处理分出的物质不经进一步纯化直接使用。
28)[1-(6-叔丁基-4-甲基吡啶-3-基)乙基]胺
标题化合物按照合成[1-(6-叔丁基吡啶-3-基)乙基]胺所述的操作，由6- 叔丁基-4-甲基吡啶-3-腈(中间体24)(250mg，1.43mmol)、MeMgBr 1.4M 75/25甲苯/THF(2.55ml，3.58mmol)和NaBH4(135mg，3.58mmol)合成。经 正相色谱(使用15至20％MeOH/CH2Cl2)纯化。(收率55mg，20％)。1H NMR (400 MHz，CDCl3)δppm 1.34(s，9H)1.42(d，J＝6.64 Hz，3H)2.35(s，3H) 4.34(q，J＝6.64 Hz，1H)7.07(s，1H)8.60(s，1H)。
中间体的合成：胺，29)至32)
a)HATU，DIPEA，NH3(g)，DMF b)氰尿酰氯c)(CH3)3CO3H，AgNO3，H2SO3(NH4)S2O4d)1.4M MeMgBr 75/25甲苯/THF，NaBH4
29)2-甲基烟酰胺
在0℃向2-甲基烟酸(0.537mg，3.9mmol)于20mL的DMF溶液中加入 HATU(1.56g，4.1mmol)，随后滴入DIPEA(0.72ml，4.1mmol)。然后向溶液 中通入NH3(气体)15分钟。将反应物搅拌过夜。将得到的糊剂过滤，用冷 DMF冲洗并丢弃。浓缩母液并经正相色谱(使用CH2Cl2/7N NH3的MeOH甲 醇溶液：93/7作为洗脱剂)纯化。得到白色固体(405mg，76％).1H NMR(400 MHz，氯仿-D)δppm 1.34(s，9H)，1.36(d，J＝6.64 Hz，3H)，2.56(s，3H)， 4.32-4.40(m，1H)，7.15-7.19(m，J＝8.20 Hz，1H)，7.68(d，J＝8.20 Hz，1H)
30)2-甲基-吡啶-3-腈
将氰尿酸(418mg，2.2mmol)一次性地加到2-甲基-烟酰胺(中间体29) (613mg，4.5mmol)在2.5ml冰冷却的DMF的混悬液中。将反应物搅拌2.5 小时然后倒入冰中。反应物用乙酸乙酯萃取直到有机层不再含有产物。合并 的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。经正相色谱纯化(梯度液先为乙酸乙 酯/庚烷0至50，然后为50/50EA/庚烷)，收率(216mg，41％)。1H NMR(400 MHz，氯仿-D)δppm 2.78(s，3H)，7.25(dd，J＝7.71，4.98 Hz，1H)，7.89(dd， J＝7.81，1.56 Hz，1H)，8.68(s，1H)
31)6-叔丁基-2-甲基吡啶-3-腈
标题化合物按照合成6-叔丁基吡啶-3-腈所述的操作，由2-甲基-吡啶-3- 腈(中间体30)(216mg，1.7mmol)、新戊酸(868mg，8.5mmol)、AgNO3(38.5 mg，0.23mmol)、(NH4)2S2O8(504mg，2.2mmol)和3.75ml 10％H2SO4合成。 经100％庚烷至90/10庚烷/EA的正相色谱纯化，得到240mg单叔丁基吡啶 和二叔丁基吡啶的混合物。该物质直接用于下面[1-(6-叔丁基-2-甲基吡啶-3- 基)乙基]胺(中间体32)的制备中。
32)[1-(6-叔丁基-2-甲基吡啶-3-基)乙基]胺
标题化合物按照合成6-叔丁基吡啶-3-腈所述的操作，由6-叔丁基-2-甲 基吡啶-3-腈(中间体31)(100mg，0.57mmol，从上述的说明中直接使用)， MeMgBr1.4M 75/25甲苯/THF(1.4ml，1.4mmol)和NaBH4(55mg，1.4mmol) 合成。经20％MeOH/CH2Cl2的正相色谱纯化。(收率31.5mg，29％)。1H NMR (400 MHz，氯仿-D)δppm 1.34(s，9H)，1.36(d，J＝6.64 Hz，3H)，2.56(s，3H)， 4.32-4.40(m，1H)，7.15-7.19(m，J＝8.20 Hz，1H)，7.68(d，J＝8.20 Hz，1H)。
目标化合物的合成
一般方法1.
向N-[(1S)-1-(4-羟基苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺 (0.25g，0.73mmol)于THF(10mL)的溶液中加入适当的市售乙醇(0.88mmol) 和三苯基膦(0.21g，0.80mmol)，随后加入偶氮二羧酸二异丙酯(160mL，0.80 mmol)。反应混合物室温搅拌18小时并移除挥发物。粗产品用反相制备性 HPLC纯化。
一般方法2.
向如上制备的7-取代(1H-苯并咪唑-1-基)乙酸(0.14mmol)、三乙胺(0.04 mL，0.28mmol)和适当的胺(市售的或在文献中有描述或上文有描述，0.15 mmol)于乙腈(1ml)的溶液中加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基 六氟磷酸盐(80mg，0.21mmol)。反应混合物室温搅拌0.5-3h。将混合物用 甲醇淬灭，真空移除挥发物。
在实施例7-51中，粗产物在XTerra C8柱(19×300mm)上(使用梯度液为 0.1M乙酸铵水溶液的乙腈溶液作为洗脱剂)，经制备HPLC纯化。
在实施例52-76中，粗产物在Phenomenex，Synersi 4μ Polar RP(或 Gemini 5μC18)柱上(使用梯度为0.05％的三氟乙酸水溶液和乙腈(或取决于 分离的最佳pH条件，使用碳酸氢铵水溶液10mM和乙腈)作为洗脱剂)，经 制备性HPLC纯化。
下表1的化合物按照一般方法1合成
表1
实施例 编号 名称 MW实 测值 [M+H] 1H NMR 起始 原料 1 N-[(1S)-1-(4-异丙氧基 苯基)乙基]-2-(7-硝基 -1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰胺 383.3 (400MHz，DMSO-d6)δppm 8.61(d， J＝7.83Hz，1H)8.40(s，1H)8.10(dd， J＝7.96，0.88Hz，1H)7.98(d，J＝8.08 Hz，1H)7.39(t，J＝7.96Hz，1H) 7.16-7.25(m，2H)6.81-6.88(m，2H) 5.20(s，2H)4.74-4.84(m，1H) 4.52-4.63(m，1H)1.34(d，J＝7.07Hz， 3H)1.25(d，J＝6.06Hz，6H) 异丙 醇 2 N-((1S)-1-{4-[2-氟 -1-(氟甲基)乙氧基]苯 基}乙基)-2-(7-硝基 -1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰胺 419.0 (400MHz，DMSO-d6)δppm 8.64(d， J＝7.83Hz，1H)8.40(s，1H)8.10(d， J＝7.07Hz，1H)7.98(d，J＝7.33Hz，1 H)7.39(t，J＝8.08Hz，1H)7.21-7.29 (m，2H)6.95-7.02(m，2H)5.21(s，2 H)4.54-4.98(m，6H)1.35(d，J＝7.07 Hz，3H) 1，3- 二氟 丙-2- 醇 3 N-{(1S)-1-[4-(2-氟乙 氧基)苯基]乙基}-2-(7- 硝基-1H-苯并咪唑-1- 基)乙酰胺 387 (400MHz，DMSO-d6)δppm 8.66(d， J＝8.08Hz，1H)8.41(s，1H)8.10(dd， J＝8.08，1.01Hz，1H)7.98(dd，J＝8.08， 0.76Hz，1H)7.39(t，J＝7.96Hz，1H) 7.20-7.28(m，2H)6.87-6.95(m，2H) 5.21(s，2H)4.63-4.86(m，3H)4.14 -4.28(m，2H)1.35(d，J＝6.82Hz，3H) 2-氟 乙醇 4 N-((1S)-1-{4-[(1-甲基 丙-2-炔-1-基)氧基]苯 基}乙基)-2-(7-硝基 -1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰胺 393.0 (400MHz，DMSO-d6).δppm 8.63(d， J＝8.08Hz，1H)8.40(s，1H)8.10(dd， J＝8.08，1.01Hz，2H)7.98(dd，J＝8.08， 0.76Hz，1H)7.40(t，J＝7.96Hz，1H) 7.19-7.28(m，2H)6.90-6.98(m，2H) 5.21(s，2H)5.02-5.11(m，1H) 4.75-4.87(m，1H)3.47-3.52(m，1H) 1.54(d，J＝6.57Hz，3H)1.35(d， J＝6.82Hz，3H) 丁-3- 炔-2- 醇 5 N-{(1S)-1-[4-(2-甲氧 基-1-甲基乙氧基)苯 基]乙基}-2-(7-硝基 -1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰胺 413 (400MHz，CD3OD)δppm 8.29(s，1 H)8.05(d，J＝8.08Hz，2H)7.42(t， J＝8.08Hz，1H)7.21-7.28(m，2H) 6.86-6.93(m，2H)5.24-5.35(m，2H) 4.90(q，J＝6.99Hz，1H)4.51-4.61(m， 1H)3.45-3.59(m，2H)3.38(s，3H) 1.46(d，J＝6.82Hz，3H)1.26(d， J＝6.06Hz，3H) 1-甲 氧基 丙-2- 醇 6 N-[(1S)-1-(4-乙氧基苯 基)乙基]-2-(7-硝基 -1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰胺 369.0 (400MHz，DMSO-d6)δppm 8.61(d， J＝8.08Hz，1H)8.40(s，1H)8.10(dd， J＝7.96，0.88Hz，1H)7.95-8.01(m，1 H)7.39(t，J＝7.96Hz，1H)7.18-7.25 (m，2H)6.82-6.90(m，2H)5.20(s，2 H)4.74-4.85(m，1H)4.00(q，J＝6.91 Hz，2H)1.25-1.39(m，6H) 乙醇
下表2的化合物根据一般方法2合成
表2
实施 例编号 名称 MW实测值 [M+H] 1H NMR 起始原料 7 2-(7-硝基-1H-苯并咪唑 -1-基)-N-{1-[6-(2，2，2-三 氟乙氧基)吡啶-3-基]乙 基}乙酰胺 424.0 (400MHz，DMSO-d6)δppm 8.77(d，J＝7.58Hz，1H)8.40(s， 1H)8.07-8.16(m，2H)7.97 (dd，J＝8.08，0.76Hz，1H)7.75 (dd，J＝8.46，2.40Hz，1H)7.39 (t，J＝7.96Hz，1H)6.96(d， J＝8.34Hz，1H)5.21(s，2H) 4.97(q，J＝9.26Hz，2H) 4.82-4.92(m，1H)1.39(d， J＝7.07Hz，3H) 1-[6-(2，2，2-三氟乙 氧基)吡啶-3-基] 乙胺 8 2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1- 基)-N-{1-[6-(2，2，2-三氟 乙氧基)吡啶-3-基]乙基} 乙酰胺 413.0 (400MHz，DMSO-d6)δppm 8.80(d，J＝7.83Hz，1H)8.20(s， 1H)8.14(d，J＝2.27Hz，1H) 7.77(dd，J＝8.59，2.53Hz，1H) 7.62(dd，J＝7.71，1.14Hz，1H) 7.14-7.25(m，2H)6.97(d， J＝8.59Hz，1H)5.13-5.26(m，2 H)4.89-5.03(m，3H)1.40(d， J＝6.82Hz，3H) 1-[6-(2，2，2-三氟乙 氧基)吡啶-3-基] 乙胺 9 N-{1-[6-(2，2-二氟乙氧 基)吡啶-3-基]乙 基}-2-(7-硝基-1H-苯并 咪唑-1-基)乙酰胺 406.0 (400MHz，DMSO-d6)δppm 8.75(d，J＝7.58Hz，1H)8.40(s， 1H)8.07-8.16(m，2H)7.97 (dd，J＝8.08，0.76Hz，1H)7.71 (dd，J＝8.59，2.27Hz，1H)7.39 (t，J＝8.08Hz，1H)6.89(d， J＝8.59Hz，1H)6.21-6.55(m，1 H)5.21(s，2H)4.80-4.91(m，1 H)4.45-4.61(m，2H)1.38(d， J＝7.07Hz，3H) 1-[6-(2，2-二氟乙 氧基)吡啶-3-基] 乙胺 10 2-(7-硝基-1H-苯并咪唑 -1-基)-N-{1-[6-(2，2，3，3- 四氟丙氧基)吡啶-3-基] 乙基}乙酰胺 456.0 (400MHz，DMSO-d6)δppm 8.76(d，J＝7.58Hz，1H)8.40(s， 1H)8.06-8.17(m，2H)7.97 (dd，J＝8.08，0.76Hz，1H)7.74 (dd，J＝8.59，2.53Hz，1H)7.39 (t，J＝7.96Hz，1H)6.92(d， J＝8.59Hz，1H)6.51-6.83(m，1 H)5.21(s，2H)4.77-4.94(m，3 H)1.38(d，J＝7.07Hz，3H) 1-[6-(2，2，3，3-四氟 丙氧基)吡啶-3- 基]乙胺 11 2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1- 基)-N-{1-[6-(2，2，3，3-四 氟丙氧基)吡啶-3-基]乙 基}乙酰胺 445.0 (400MHz，DMSO-d6)δppm 8.80(d，J＝7.83Hz，1H)8.20(s， 1H)8.14(d，J＝2.27Hz，1H) 7.77(dd，J＝8.59，2.27Hz，1H) 7.62(dd，J＝7.71，1.14Hz，1H) 7.13-7.26(m，2H)6.94(d， J＝8.34Hz，1H)6.50-6.84(m，1 H)5.13-5.26(m，2H)4.89-5.01 (m，1H)4.83(t，J＝14.27Hz，2 H)1.40(d，J＝7.07Hz，3H) 1-[6-(2，2，3，3-四氟 丙氧基)吡啶-3- 基]乙胺 12 N-{1-[6-(环戊基氧基)吡 啶-3-基]乙基}-2-(7-硝基 -1H-苯并咪唑-1-基)乙酰 胺 410.0 (400MHz，DMSO-d6)δppm 8.71(d，J＝7.58Hz，1H)8.40(s， 1H)8.04-8.14(m，2H)7.97 (dd，J＝8.08，0.76Hz，1H)7.61 (dd，J＝8.59，2.53Hz，1H)7.39 (t，J＝7.96Hz，1H)6.71(d， J＝8.59Hz，1H)5.28-5.36(m，1 H)5.20(s，2H)4.77-4.88(m，1 H)1.85-1.98(m，2H)1.50-1.75 (m，6H)1.37(d，J＝6.82Hz，3 H) 1-[6-(环戊基氧基) 吡啶-3-基]乙胺 13 N-[1-(4-{[(2S)-2-甲氧基 丙基]氧基}苯基)乙 基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺 413.0 (400MHz，DMSO-d6)δppm 8.62(d，J＝7.83Hz，1H)8.40(s， 1H)8.10(d，J＝7.83Hz，1H) 7.98(d，J＝7.33Hz，1H)7.39(t， J＝8.08Hz，1H)7.18-7.26(m， J＝8.59Hz，2H)6.85-6.93(m，2 H)5.21(s，2H)4.75-4.87(m，1 H)3.86-3.95(m，2H)3.60-3.70 (m，1H)3.31(s，3H)1.34(d， J＝7.07Hz，3H)1.16(d，J＝6.32 Hz，3H) 1-(4-{[(2S)-2-甲氧 基丙基]氧基}苯 基)乙胺 14 2-(7-硝基-1H-苯并咪唑 -1-基)-N-{1-[4-(2，2，2-三 氟乙氧基)苯基]乙基}乙 酰胺 423.0 (400MHz，DMSO-d6)δppm 8.68(d，J＝8.08Hz，1H)8.41(s， 1H)8.10(dd，J＝7.96，0.88Hz， 1H)7.98(dd，J＝7.96，0.63Hz， 1H)7.39(t，J＝8.08Hz，1H) 7.24-7.31(m，2H)6.97-7.04 (m，2H)5.21(s，2H)4.77-4.88 (m，1H)4.73(q，J＝8.84Hz，2 H)1.35(d，J＝7.07Hz，3H) 1-[4-(2，2，2-三氟乙 氧基)苯基]乙胺 15 N-[(1S)-1-(4-{[(1S)-1-甲 基丙基]氧基}苯基)乙 基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺 397.1 (400MHz，DMSO-d6)δppm 0.90(t，J＝7.4Hz，3H)1.20(d， J＝6.0Hz，3H)1.34(d，J＝7.0 Hz，3H)1.49-1.66(m，2H) 4.28-4.38(m，1H)4.72-4.83 (m，1H)5.19(s，2H)6.82-6.86 (m，2H)7.14-7.23(m，J＝8.8 Hz，2H)7.39(t，J＝8.0Hz，1H) 7.97(d，J＝7.8Hz，1H)8.09(d， J＝8.0Hz，1H)8.39(s，1H) 8.60(d，J＝8.0Hz，1H) (1S)-1-(4-{[(1S)-1- 甲基丙基]氧基} 苯基)乙胺 16 N-(1-{4-[氯(二氟)甲基] 苯基}乙基)-2-(7-硝基 -1H-苯并咪唑-1-基)乙酰 胺 409.1 (400MHz，DMSO-d6)δppm 1.40(d，J＝7.0Hz，3H)4.90(t， J＝7.3Hz，1H)5.25(s，2H) 7.39(t，J＝8.0Hz，1H)7.51(d， J＝8.5Hz，2H)7.66(d，J＝8.5 Hz，2H)7.98(d，J＝8.0Hz，1H) 8.10(dd，J＝7.9，0.9Hz，1H) 8.40(s，1H)8.83(d，J＝7.8Hz， 1H) 1-{4-[氯(二氟)甲 基]苯基}乙胺 17 2-(7-氟-1H-苯并咪唑-1- 基)-N-(1-{4-[氯(二氟)甲 基]苯基}乙基)乙酰胺 398.1 (400MHz，DMSO-d6)δppm 1.41(d，J＝7.0Hz，3H) 4.94-5.04(m，1H)5.22(s，2H) 7.17(t，J＝7.8Hz，1H)7.21-7.25 (m，1H)7.54(d，J＝8.3Hz，2H) 7.61(dd，J＝7.8，1.0Hz，1H) 7.67(d，J＝8.3Hz，2H)8.19(s， 1H)8.86(d，J＝7.8Hz，1H) 1-{4-[氯(二氟)甲 基]苯基}乙胺 18 2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1- 基)-N-{1-[4-(2，2-二氟乙 氧基)苯基]乙基}乙酰胺 394.2 (400MHz，DMSO-d6)δppm 1.37(d，J＝7.0Hz，3H)4.29(td， J＝14.7，3.5Hz，2H)4.85-4.95 (m，1H)5.19(s，2H)6.37(tt， J＝54.5，3.6Hz，1H)6.96(d， J＝8.8Hz，2H)7.17(t，J＝7.8Hz， 1H)7.21-7.25(m，1H) 7.26-7.31(m，2H)7.62(dd， J＝7.8，1.00Hz，1H)8.19(s，1 H)8.69(d，J＝8.0Hz，1H) 1-[4-(2，2-二氟乙 氧基)苯基]乙胺 19 N-{1-[4-(2，2-二氟乙氧 基)苯基]乙基}-2-(7-硝基 -1H-苯并咪唑-1-基)乙酰 胺 405.2 (400MHz，DMSO-d6)δppm 1.35(d，J＝6.8Hz，3H)4.29(td， J＝14.7，3.6Hz，2H)4.76-4.87 (m，1H)5.21(s，2H)6.37(tt， J＝54.6，3.5Hz，1H)6.92-6.99 (m，2H)7.23-7.28(m，2H)7.39 (t，J＝8.0Hz，1H)7.98(d，J＝8.0 Hz，1H)8.10(dd，J＝8.0，1.0Hz， 1H)8.40(s，1H)8.64(d，J＝8.0 Hz，1H) 1-[4-(2，2-二氟乙 氧基)苯基]乙胺 20 2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1- 基)-N-(1-{4-[2-氟-1-(氟- 甲基)乙氧基]苯基}乙基) 乙酰胺 408.2 (400MHz，DMSO-d6)δppm 1.37(d，J＝6.8Hz，3H) 4.55-4.80(m，4H)4.80-4.96 (m，2H)5.19(s，2H)6.97-7.02 (m，1H)7.17(t，J＝7.8Hz，1H) 7.20-7.24(m，1H)7.24-7.29 (m，J＝8.5Hz，2H)7.62(dd， J＝7.7，1.13Hz，1H)8.19(s，1 H)8.68(d，J＝7.8Hz，1H) 1-{4-[2-氟-1-(氟- 甲基)乙氧基]苯 基}乙胺 21 2-(7-乙酰基-1H-苯并咪 唑-1-基)-N-(1-{4-[2-氟 -1-(氟甲基)乙氧基]苯 基}乙基)乙酰胺 416.2 (400MHz，DMSO-d6).ppm 1.34(d，J＝7.0Hz，3H)2.44(s， 3H)4.54-4.78(m，4H) 4.78-4.96(m，2H)5.13(s，2H) 6.96-7.01(m，2H)7.21-7.30 (m，3H)7.72(d，J＝7.5Hz，1H) 7.87(dd，J＝8.0，0.8Hz，1H) 8.22(s，1H)8.54(d，J＝7.8Hz， 1H) 1-{4-[2-氟-1-(氟- 甲基)乙氧基]苯 基}乙胺 22 2-(7-硝基-1H-苯并咪唑 -1-基)-N-{1-[4-(1，1，2，2- 四氟乙氧基)苯基]乙基} 乙酰胺 441.2 (400MHz，DMSO-d6)δppm 1.38(d，J＝6.8Hz，3H) 4.82-4.92(m，1H)5.24(s，2H) 6.79(tt，J＝52.0，3.0Hz，1H) 7.19-7.25(m，2H)7.36-7.44 (m，3H)7.98(d，J＝8.0Hz，1H) 8.10(dd，J＝8.0，1.00Hz，1H) 8.40(s，1H)8.75(d，J＝7.8Hz， 1H) 1-[4-(1，1，2，2-四氟 乙氧基)苯基]乙胺 23 2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1- 基)-N-{1-[4-(1，1，2，2-四- 氟乙氧基)苯基]乙基}乙 酰胺 430.2 (400MHz，DMSO-d6)δppm 1.40(d，J＝7.0Hz，3H) 4.91-5.01(m，1H)5.21(s，2H) 6.79(tt，J＝51.9，2.9Hz，1H) 7.17(t，J＝7.8Hz，1H)7.20-7.26 (m，3H)7.41-7.46(m，2H)7.62 (dd，J＝7.8，1.25Hz，1H)8.20 (s，1H)8.79(d，J＝7.8Hz，1H) 1-[4-(1，1，2，2-四氟 乙氧基)苯基]乙胺 24 2-(7-氰基-1H-苯并咪唑 -1-基)-N-(1-{4-[2-氟 -1-(氟甲基)乙氧基]苯 基}乙基)乙酰胺 399.2 (400MHz，DMSO-d6)δppm 1.38(d，J＝7.0Hz，3H) 4.55-4.79(m，4H)4.80-4.96 (m，2H)5.16-5.28(m，2H) 6.95-7.00(m，2H)7.26-7.32 (m，2H)7.35(t，J＝7.9Hz，1H) 7.71(d，J＝7.5Hz，1H)8.02(dd， J＝8.0，0.8Hz，1H)8.35(s，1H) 8.75(d，J＝7.8Hz，1H) 1-{4-[2-氟-1-(氟- 甲基)乙氧基]苯 基}乙胺 25 2-(7-氰基-1H-苯并咪唑 -1-基)-N-{1-[4-(2，2，2-三 氟乙氧基)苯基]乙基}乙 酰胺 403.0 (400MHz，CD3OD)δppm 1.49 (d，J＝7.07Hz，3H)，4.40(q， J＝8.34Hz，2H)，5.00(q，J＝6.95 Hz，1H)，5.25(s，2H)，6.91(d， J＝8.59Hz，2H)，7.31(d，J＝8.59 Hz，2H)，7.37(t，J＝7.83Hz， 1H)，7.64(d，J＝7.33Hz，1H)， 7.96(d，J＝7.83Hz，1H)，8.16(s， 1H) 1-[4-(2，2，2-三氟乙 氧基)苯基]乙胺 26 N-(1-{5-氯-6-[2-氟 -1-(氟甲基)乙氧基]吡啶 -3-基}乙基)-2-(7-硝基 -1H-苯并咪唑-1-基)乙酰 胺 454.0 (400MHz，CD3OD)δppm 1.49 (d，J＝7.07Hz，3H)，4.66-4.69 (m，2H)，4.77-4.81(m，2H)， 4.88-4.95(m，1H)，5.30(s，2H)， 5.61(tt，J＝19.96，4.55Hz，1H)， 7.40(t，J＝8.08Hz，1H)，7.79(d， J＝2.02Hz，1H)，8.0-8.05(m， 3H)，8.29(s，1H) 1-{5-氯-6-[2-氟 -1-(氟甲基)乙氧 基]吡啶-3-基}乙 胺 27 2-(7-氰基-1H-苯并咪唑 -1-基)-N-{1-[4-[2-氟 -1-(氟甲基)乙氧 基]-2-(三氟甲基)苯基]乙 基}乙酰胺 467.0 (400MHz，CD3OD)δppm 1.48 (d，J＝6.82Hz，3H)，4.56-4.94 (m，5H)，5.28-5.35(m，1H)，5.33 (s，2H)，7.24(d，J＝2.53Hz，1H)， 7.30(dd，J＝8.59，2.78Hz，1H)， 7.37-7.41(t，J＝7.83Hz，1H)， 7.65-7.71(m，2H)，7.97(dd， J＝8.08，0.9Hz，1H)，8.25(s， 1H) 1-[4-[2-氟-1-(氟甲 基)乙氧基]-2-(三 氟甲基)苯基]乙胺 28 N-(1-{2-氯-4-[2-氟 -1-(氟甲基)乙氧基]苯 基}乙基)-2-(7-氰基-1H- 苯并咪唑-1-基)乙酰胺 433.0 (400MHz，CD3OD)δppm 1.46 (d，J＝7.07Hz，3H)，4.51-4.79 (m，5H)，5.27-5，34(m，1H)，5.31 (s，2H)，6.94(dd，J＝8.59，2.53 Hz，1H)，7.00(d，J＝2.78Hz， 1H)，7.36(t，J＝8.07Hz，1H)， 7.42(d，J＝8.59Hz，1H)，7.63 (br.d，J＝7.58Hz，1H)，7.95 (br.d，J＝8.08Hz，1H)，8.20(s， 1H) 1-{2-氯-4-[2-氟 -1-(氟甲基)乙氧 基]苯基}乙胺 29 2-(7-硝基-1H-苯并咪唑 -1-基)-N-{1-[5-(三氟甲 基)吡啶-2-基]丙基}乙酰 胺 408.0 (400MHz，CD3OD)δppm 0.99 (t，J＝7.33Hz，3H)，1.79-2.04 (m，2H)，4.84-4.90(m，1H)，5.40 (dd，J＝17.18，8.59Hz，2H)，7.40 (t，J＝8.08Hz，1H)，7.57(br.d， J＝8.34Hz，1H)，7.99-8.08(m， 3H)，8.30(s，1H)，8.80(br.s， 1H) 1-[5-(三氟甲基)吡 啶-2-基]丙-1-胺 30 2-(7-硝基-1H-苯并咪唑 -1-基)-N-{1-[5-(三氟甲 基)吡啶-2-基]乙基}乙酰 胺 394 (400MHz，CD3OD)δppm 1.53 (d，J＝7.07Hz，1H)，5.04(q， J＝7.07Hz，1H)，5.38(s，2H)， 7.39(t，J＝8.08Hz，1H)，7.60(d， J＝8.08Hz，1H)，8.00-8.08(m， 3H)，8.30(s，1H)，8.79(br.s， 1H) 1-[5-(三氟甲基)吡 啶-2-基]乙胺 31 2-(7-氟-1H-苯并咪唑-1- 基)-N-{1-[3-氯-5-(三氟- 甲基)吡啶-2-基]乙基}乙 酰胺 416.9 (400MHz，CD3OD)δppm 1.51 (d，J＝6.82Hz，3H)，5.34(dd， J＝17.4，10.1Hz，2H)，5.61(q， J＝6.82Hz，1H)，7.19-7.26(m， 2H)，7.61(dd，J＝7.07，1.8Hz， 1H)，8.15(s，1H)，8.20(d， J＝2.02Hz，1H)，8.80(br.s，1H) 1-[3-氯-5-(三氟甲 基)吡啶-2-基]乙 胺 32 N-{1-[3-氯-5-(三氟甲基) 吡啶-2-基]乙基}-2-(7-硝 基-1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰胺 427.9 (400MHz，CD3OD)δppm 1.49 (d，J＝6.82Hz，3H)，5.37(dd， J＝17.2，10.6Hz，2H)，5.51(q， J＝6.82Hz，1H)，7.42(t，J＝8.08 Hz，1H)，8.01-8.06(m，2H)， 8.18(d，J＝2.02Hz，1H)，8.31(s， 1H)，8.82(br.s，1H) 1-[3-氯-5-(三氟甲 基)吡啶-2-基]乙 胺 33 N-{1-[5-氯-6-(2-氟乙氧 基)吡啶-3-基]乙 基}-2-(7-硝基-1H-苯并 咪唑-1-基)乙酰胺 422.0 (400MHz，CD3OD)δppm 1.48 (d，J＝7.07Hz，3H)，4.53-4.56 (m，1H)，4.60-4.63(m，1H)， 4.66-4.69(m，1H)，4.78-4.81 (m，1H)，4.87-4.95(m，1H)，5.25 (s，2H)，7.38(t，J＝7.9Hz，1H)， 7.71(d，J＝2.02Hz，1H)，7.97(d， J＝2.3Hz，1H)，8.00-8.04(m， 2H)，8.20(s，1H) 1-[5-氯-6-(2-氟乙 氧基)吡啶-3-基] 乙胺 34 2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1- 基)-N-{1-[4-(三氟甲基) 苯基]乙基}乙酰胺 382.0 (400MHz，CD3OD)δppm 1.51 (d，J＝6.82Hz，3H)，5.10(q， J＝6.82Hz，1H)，5.29(dd， J＝17.2，3.8Hz，2H)，7.18-7.26 (m，2H)，7.53(d，J＝8.08Hz， 2H)，7.58-7.64(m，3H)，8.14(s， 1H) 1-[4-(三氟甲基)苯 基]乙胺 35 2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1- 基)-N-[1-(6-异丙氧基吡 啶-3-基)乙基]乙酰胺 373.1 (400MHz，CD3OD)δppm 1.31 (d，J＝6.06Hz，6H)，1.50(d， J＝6.82Hz，3H)，5.02(q，J＝6.92 Hz，1H)，5.15-5.23(m，1H)， 5.27(dd，J＝17.2，5.3Hz，2H)， 6.70(d，J＝8.59Hz，1H)， 7.20-7.27(m，2H)，7.61(dd， J＝7.33，1.8Hz，1H)，7.65(d， J＝8.59，2.5Hz，1H)，8.08(d， J＝2.5Hz，1H)，8.15(s，1H) 1-(6-异丙氧基吡 啶-3-基)乙胺 36 2-(7-硝基-1H-苯并咪唑 -1-基)-N-{1-[4-(三氟甲 氧基)苯基]乙基}乙酰胺 408.9 (400MHz，CD3OD)δppm 1.49 (d，J＝7.07Hz，3H)，4.97(q， J＝7.07Hz，1H)，5.34(s，2H)， 7.22(d，J＝8.08Hz，2H)， 7.40-7.45(m，3H)，8.05(d， J＝8.08，2H)，8.30(s，1H) 1-[4-(三氟甲氧基) 苯基]乙胺 37 2-(7-硝基-1H-苯并咪唑 -1-基)-N-{1-[4-(三氟甲 基)苯基]乙基}乙酰胺 392.9 (400MHz，CD3OD)δppm 1.51 (d，J＝6.82Hz，3H)，5.01(q， J＝6.82Hz，1H)，5.36(s，2H)， 7.42(t，J＝8.08Hz，1H)，7.52(d， J＝8.34Hz，2H)，7.62(d，J＝8.34 Hz，2H)，8.05(d，J＝8.08Hz， 2H)，8.30(s，1H) 1-[4-(三氟甲基)苯 基]乙胺 38 N-[1-(6-异丙氧基吡啶-3- 基)乙基]-2-(7-硝基-1H- 苯并咪唑-1-基)乙酰胺 384.0 (400MHz，CD3OD)δppm 1.31 (d，J＝6.06Hz，6H)，1.49(d， J＝7.07Hz，3H)，4.93(q，J＝7.07 Hz，1H)，5.14-5.22(m，1H)， 5.30(s，2H)，6.70(d，J＝8.59Hz， 1H)，7.43(t，J＝8.08Hz，1H)， 7.65(dd，J＝8.59，2.5Hz，1H)， 8.03-8.07(m，3H)，8.30(s，1H) 1-(6-异丙氧基吡 啶-3-基)乙胺 39 N-{1-[4-(环戊基氧基)-3- 氟苯基]乙基}-2-(7-硝基 -1H-苯并咪唑-1-基)乙酰 胺 426.9 (400MHz，CD3OD)δppm 1.45 (d，J＝6.82Hz，3H)，1.59-1.70 (m，2H)，1.75-1.95(m，6H)， 4.80-4.85(m，1H)，4.89(q， J＝6.82Hz，1H)，5.31(s，2H)， 6.96-7.10(m，3H)，7.43(t， J＝8.08Hz，1H)，8.05(d，J＝8.08 Hz，2H)，8.30(s，1H) 1-[4-(环戊基氧 基)-3-氟苯基]乙 胺 40 N-[1-(4-环丙基苯基)乙 基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺 365.0 (400MHz，氯仿-d)δppm 0.60-0.70(m，2H)0.88-0.98 (m，2H)1.48(d，J＝7.07Hz，3 H)1.77-1.91(m，1H)4.93-5.09 (t，J＝6.57H z，1H)5.21(s，2H) 6.34(s，1H)7.01(d，J＝6.06Hz， 2H)7.18(d，J＝8.08Hz，2H) 7.43(t，J＝8.21Hz，1H)8.10(d， J＝8.08Hz，1H)8.14(d，J＝8.08 Hz，1H)8.49(s，1H) 1-(4-环丙基苯基) 乙胺 41 N-[1-(4-乙炔基苯基)乙 基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺 349.1 (400MHz，CD3OD)δppm 1.37 (d，J＝7.07Hz，3H)3.35(s，1H) 4.85(q，J＝14.15，7.07Hz，1H) 5.23(s，2H)7.21(d，J＝8.34Hz， 2H)7.32(d，J＝8.34Hz，2H) 7.95(d，J＝7.83Hz，2H)8.26(s， 1H)8.68(d，J＝7.58Hz，1H) 1-(4-乙炔基苯基) 乙胺 42 2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1- 基)-N-[1-(4-乙炔基苯基) 乙基]乙酰胺 338.0 1H NMR(400MHz，CD3OD)δ ppm 1.39(d，J＝7.07Hz，3H) 3.36(s，1H)4.93(q，J＝14.15， 7.07Hz，1H)5.20(d，J＝4.55 Hz，2H)7.10-7.19(m，2H) 7.23(d，J＝8.34Hz，2H)7.32(d， J＝8.08Hz，2H)7.52(dd， J＝7.71，1.39Hz，1H)8.05(s，1 H) 1-(4-乙炔基苯基) 乙胺 43 N-{1-[5-(环丙基甲氧基) 吡啶-2-基]乙基}-2-(7-硝 基-1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰胺 396.0 (400MHz，CD3OD)δppm 0.22-0.32(m，2H)0.46-0.57 (m，2H)1.08-1.23(m，1H) 1.37(d，J＝6.82Hz，3H)3.78(d， J＝7.07Hz，2H)4.84(q，J＝6.99 Hz，1H)5.25(s，2H)7.23(d， J＝2.02Hz，2H)7.32(t，J＝8.08 Hz，1H)7.95(dd，J＝8.21，1.39 Hz，2H)8.03(t，J＝1.77Hz，1 H)8.21(s，1H) 1-[5-(环丙基甲氧 基)吡啶-2-基]乙 胺 44 N-[1-(5-异丙氧基吡啶-2- 基)乙基]-2-(7-硝基-1H- 苯并咪唑-1-基)乙酰胺 384.1 (400MHz，CD3OD)δppm 1.22 (d，J＝5.81Hz，6H)1.37(d， J＝7.07Hz，3H)4.45-4.61(m，1 H)4.84(q，J＝13.89，6.82Hz，1 H)5.25(s，2H)7.23(d，J＝1.77 Hz，2H)7.31(t，J＝8.08Hz，1 H)7.94(dd，J＝8.08，2.02Hz，2 H)8.00(t，J＝1.64Hz，1H)8.21 (s，1H)； 1-(5-异丙氧基吡 啶-2-基)乙胺 45 2-(7-乙酰基-1H-苯并咪 唑-1-基)-N-[(1S)-1-(4-叔 丁基苯基)乙基]乙酰胺 378.3 1H NMR(400MHz，甲醇-D4) δppm 1.29(s，9H)1.44(d， J＝7.03Hz，3H)2.41(s，3H) 4.88(q，J＝7.03Hz，1H)5.25(s， 2H)7.24(d，J＝8.20Hz，2H) 7.29-7.42(m，3H)7.75(d， J＝6.64Hz，1H)7.87(d，J＝8.98 Hz，1H)8.14(s，1H) (1S)-1-(4-叔丁基 苯基)乙胺 46 N-{1-[4-[(1-甲基哌啶-4- 基)氧基]-3-(三氟甲基)苯 基]乙基}-2-(7-硝基-1H- 苯并咪唑-1-基)乙酰胺 506.0 (400MHz，DMSO-D6)δppm 1.36(d，J＝7.0Hz，3H)， 1.63-1.71(m，2H)，1.85-1.93 (m，2H)，2.16(s，3H)， 2.22-2.27(m，2H)，2.46-2.48 (m，2H)，4.56-4.62(m，1H)， 4.81-4.87(m，1H)，5.21(s，2 H)，7.22(d，J＝8.5Hz，1H)， 7.39(t，J＝8.0Hz，1H)， 7.48-7.51(m，1H)，7.53-7.54 (m，1H)，7.96(d，J＝8.0Hz，1 H)，8.09(d，J＝8.0Hz，1H)， 8.39(s，1H)，8.74(d，J＝7.8 Hz，1H). 1-[4-[(1-甲基哌啶 -4-基)氧基]-3-(三 氟甲基)苯基]乙胺 47 N-{1-[4-{[(2S)-2-甲氧基 丙基]氧基}-3-(三氟甲 基)苯基]乙基}-2-(7-硝基 -1H-苯并咪唑-1-基)乙酰 胺 481.0 (400MHz，DMSO-D6)δppm 1.18(d，J＝6.5Hz，3H)，1.37 (d，J＝7.0Hz，3H)，3.32(s，3 H)，3.63-3.69(m，1H)， 3.99-4.10(m，2H)，4.83-4.90 (m，1H)，5.22(s，2H)，7.20(d，J ＝8.5Hz，1H)，7.39(t，J＝8.0 Hz，1H)，7.51-7.55(m，2H)， 7.97(d，J＝8.0Hz，1H)，8.09 (d，J＝8.0Hz，1H)，8.40(s，1 H)，8.73(d，J＝7.8Hz，1H). {1-[4-{[(2S)-2-甲 氧基丙基]氧 基}-3-(三氟甲基) 苯基]乙基}胺 48 N-{1-甲基-2-[3-(三氟甲 基)苯氧基]乙基}-2-(7-硝 基-1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰胺 423.0 (400MHz，DMSO-d6)δppm 8.39-8.47(m，2H)8.11(dd， J＝8.08，1.01Hz，1H)7.98(dd， J＝7.96，0.88Hz，1H)7.53(t， J＝7.83Hz，1H)7.40(t，J＝8.08 Hz，1H)7.23-7.33(m，3H) 5.19(s，2H)3.89-4.12(m，3H) 1.19(d，J＝6.57Hz，3H) 1-[3-(三氟甲基)苯 氧基]丙-2-胺 49 N-[2-(4-氯苯基)-1-甲基 乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并 咪唑-1-基)乙酰胺 373.0 (400MHz，DMSO-d6)δppm 8.39(s，1H)8.23(d，J＝7.83Hz， 1H)8.10(d，J＝8.08Hz，1H) 7.98(d，J＝7.33Hz，1H) 7.37-7.43(m，1H)7.29-7.35 (m，2H)7.21(d，J＝8.34Hz，2 H)5.06-5.18(m，2H)3.80-3.93 (m，1H)2.58-2.77(m，2H) 1.03(d，J＝6.57Hz，3H) 1-(4-氯苯基)丙-2- 胺 50 N-[(3R)-5-甲氧基-3，4-二 氢-2H-苯并吡喃-3- 基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺 383.0 (400MHz，DMSO-D6)δppm 2.50-2.55(m，1H)，2.81-2.87 (m，1H)，3.78(s，3H)， 3.80-3.84(m，1H)，4.00-4.10 (m，2H)，5.15-5.24(m，2H)， 6.45(d，J＝8.3Hz，1H)，6.55 (d，J＝8.0Hz，1H)，7.08(t，J＝ 8.3Hz，1H)，7.41(t，J＝8.0Hz， 1H)，7.99(d，J＝7.8Hz，1H)， 8.11(d，J＝8.0Hz，1H)，8.41 (s，1H)，8.49(d，J＝7.0Hz，1 H). (3R)-5-甲氧基苯 并二氢吡喃-3-胺 51 N-[(3R)-8-氟-5-甲氧基 -3，4-二氢-2H-苯并吡喃 -3-基]-2-(7-硝基-1H-苯 并咪唑-1-基)乙酰胺 401.0 (400MHz，DMSO-D6)δppm 2.53-2.59(m，1H)，2.83-2.89 (m，1H)，3.76(s，3H)， 3.93-3.97(m，1H)，4.07-4.16 (m，2H)，5.19(s，2H)，6.48(dd， J＝9.0，3.5Hz，1H)，7.02(dd，J ＝10.8，9.0Hz，1H)，7.41(t，J＝ 8.0Hz，1H)，8.0(d，J＝8.0Hz， 1H)，8.11(dd，J＝7.9，0.9Hz，1 H)，8.41(s，1H)，8.55(d，J＝7.0 Hz，1H). (3R)-8-氟-5-甲氧 基苯并二氢吡喃 -3-胺 52 N-[(1S)-1-(4-叔丁基苯 基)乙基]-2-(6，7-二氟 -1H-苯并咪唑-1-基)乙酰 胺 372.3 (400MHz，DMSO-D6)δ.ppm 1.16-1.26(m，9H)，1.35(d， J＝7.03Hz，3H)，4.81-4.90(m，1 H)，5.12-5.25(m，2H)， 7.21-7.26(m，2H)，7.26-7.34 (m，3H)，7.69(d，J＝7.42Hz，1 H)，7.98(d，J＝7.81Hz，1H)， 8.33(s，1H)，8.75(d，J＝7.81 Hz，1H) [(1S)-1-(4-叔丁基 苯基)乙基]胺 53 N-[1-(4-叔丁基苯基)乙 基]-2-(6，7-二氟-1H-苯并 咪唑-1-基)乙酰胺 372.0 (400MHz，DMSO-D6)δppm 1.26(s，9H)，1.37(d，J＝6.84 Hz，3H)，4.85-4.94(m，1H)， 5.05(s，2H)，7.17-7.26(m，3 H)，7.31-7.36(m，2H)， 7.43-7.48(m，1H)，8.19(s，1 H)，8.76(d，J＝7.81Hz，1H) [1-(4-叔丁基苯基) 乙基]胺 54 N-[1-(4-叔丁基苯基)乙 基]-2-(7-氰基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺 361.3 1H NMR(400MHz，甲醇-D4) δ.ppm 1.28(s，9H)1.48(d， J＝7.03Hz，3H)4.99(q，J＝7.03 Hz，1H)5.30(s，2H)7.27(d，2 H)7.34(d，2H)7.39(dd， J＝8.20，7.62Hz，1H)7.68(dd， J＝7.62，0.59Hz，1H)7.97(dd， J＝8.20，0.98Hz，1H)8.25(s，1 H). 1-(4-叔丁基苯基) 乙胺 55 2-(7-氰基-1H-苯并咪唑 -1-基)-N-[1-(4-异丙基苯 基)乙基]乙酰胺 347.0 (400MHz，CD3OD)δppm 1.19-1.22(m，6H)，1.48(d，J＝ 7.0Hz，3H)，2.77-2.91(m，1H)， 5.38(s，2H)，7.12-7.20(m，2H)， 7.23-7.31(m，2H)，7.45-7.54 (m，1H)，7.75-7.83(m，1H)，8.03 (dd，J＝1.0，8.2Hz，1H)，8.64 (s，1H)，8.87(br d，J＝7.4Hz， 1H) [1-(4-异丙基苯基) 乙基]胺 56 2-(7-氰基-1H-苯并咪唑 -1-基)-N-{1-[4-(三氟甲 基)苯基]乙基}乙酰胺 372.8 (400MHz，CD3OD)δppm 1.52 (d，J＝7.0Hz，3H)，5.08(q，J＝ 7.0Hz，1H)，5.35(s，2H)， 7.34-7.42(m，1H)，7.51-7.63 (m，4H)，7.63-7.70(m，1H)，7.97 (dd，J＝0.8，8.2Hz，1H)，8.27 (s，1H) {1-[4-(三氟甲基) 苯基]乙基}胺 57 2-(7-氟-1H-苯并咪唑-1- 基)-N-[1-(4-异丙基苯基) 乙基]乙酰胺 340.0 (400MHz，CD3OD)δppm 1.21 (d，J＝6.2Hz，6H)，1.48(d，J＝ 6.8Hz，3H)，2.80-2.92(m，1H)， 4.94-5.06(m，1H)，5.20-5.35 (m，2H)，7.14-7.21(m，2H)， 7.21-7.33(m，3H)，7.41-7.53 (m，1H)，7.60(d，J＝8.0Hz，1H)， 8.88-8.96(m，1H)，9.01(brs， 1H) [1-(4-异丙基苯基) 乙基]胺 58 2-(7-氰基-1H-苯并咪唑 -1-基)-N-{(1S)-1-[4-(三 氟甲基)苯基]乙基}乙酰 胺 372.8 (400MHz，CD3OD)δppm 1.52 (d，J＝7.0Hz，3H)，4.98-5.15 (m，1H)，5.35(s，2H)，7.32-7.45 (m，1H)，7.51-7.63(m，4H)，7.68 (dd，J＝0.9，8.2Hz，1H)，7.97 (dd，J＝1.0，8.2Hz，1H)，8.26 (s，1H) {(1S)-1-[4-(三氟- 甲基)苯基]乙基} 胺 59 2-(6，7-二氟-1H-苯并咪 唑-1-基)-N-{1-[4-(三氟- 甲基)苯基]乙基}乙酰胺 383.8 (400MHz，CD3OD)δppm 1.52 (d，J＝7.0Hz，3H)，5.05-5.12 (m，1H)，5.18-5.27(m，2H)， 7.24-7.36(m，1H)，7.46-7.56 (m，3H)，7.58-7.66(m，2H)，8.59 (brs，1H)，9.02(br d，J＝7.4Hz， 1H) {1-[4-(三氟甲基) 苯基]乙基}胺 61 2-(7-氰基-1H-苯并咪唑 -1-基)-N-{1-[4-(三氟甲 氧基)苯基]乙基}乙酰胺 388.8 (400MHz，CD3OD)δppm 1.51 (d，J＝7.0Hz，3H)，4.96-5.12 (m，1H)，5.40(s，2H)，7.15-7.26 (m，2H)，7.39-7.55(m，3H)，7.78 (dd，J＝0.8，7.6z，1H)，8.02(dd， J＝1.0，8.4Hz，1H)，8.60(s， 1H)，8.90-8.99(m，1H) {1-[4-(三氟甲氧 基)苯基]乙基}胺 62 (4-叔丁基苯基){[(6，7-二 氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰基]氨基}乙酸甲酯 415.8 (400MHz，DMSO-D6)δppm 1.25(s，9H)，3.59(s，3H)， 5.05-5.17(m，2H)，5.36(d， J＝6.84Hz，1H)，7.15-7.25(m， 1H)，7.27-7.33(m，2H)， 7.39-7.46(m，3H)，8.18(s，1 H)，9.23(d，J＝7.03Hz，1H) 氨基(4-叔丁基苯 基)乙酸甲酯 63 2-(7-氟-1H-苯并咪唑-1- 基)-N-{1-[4-(三氟甲基) 苯基]乙基}乙酰胺 365.8 (400MHz，CD3OD)δppm 1.50 (d，J＝7.0Hz，3H)，5.05-5.19 (m，3H)，7.00(dd，J＝8.1，11.4 Hz，1H)，7.14-7.23(m，1H)， 7.46(d，J＝8.2Hz，1H)， 7.48-7.54(m，2H)，7.55-7.63 (m，2H)，8.11(s，1H) {1-[4-(三氟甲基) 苯基]乙基}胺 64 N-[1-(5-叔丁基吡啶-2- 基)乙基]-2-(7-氰基-1H- 苯并咪唑-1-基)乙酰胺 362.0 (400MHz，氟仿-D)δppm 1.34 (s，9H)，1.50(d，J＝6.84Hz，3 H)，5.08-5.16(m，1H)， 5.12-5.26(m，2H)，7.15(d， J＝7.81Hz，1H)，7.35(dd， J＝8.11，7.71Hz，1H)，7.45(d， J＝6.44Hz，1H)，7.61(dd， J＝7.62，0.98Hz，1H)，7.66(dd， J＝8.20，2.54Hz，1H)，8.05(s，1 H)，8.07(dd，J＝8.20，0.98Hz，1 H)，8.49(dd，J＝2.54，0.59Hz，1 H) [1-(5-叔丁基吡啶 -2-基)乙基]胺 68 2-(7-氰基-1H-苯并咪唑 -1-基)-N-{1-[3-氟-4-(三 氟甲基)苯基]乙基}乙酰 胺 390.8 (400MHz，CD3OD)δppm 1.52 (d，J＝7.0Hz，3H)，5.01-5.12 (m，1H)，5.35-5.49(m，2H)， 7.30-7.38(m，2H)，7.45-7.53 (m，1H)，7.61(t，J＝7.7Hz， 1H)，7.78(dd，J＝1.0，7.6Hz， 1H)，8.03(dd J＝1，8.2Hz，1H)， 8.61(s，1H)，9.03-9.12(m，1H) {1-[3-氟-4-(三氟- 甲基)苯基]乙基} 胺 69 N-[1-(5-叔丁基-2-噻吩 基)乙基]-2-(6，7-二氟 -1H-苯并咪唑-1-基)乙酰 胺 377.8 (400MHz，DMSO-D6)δppm 1.27(s，9H)，1.42(d，J＝7.03 Hz，3H)，4.97-5.07(m，2H)， 5.04-5.14(m，1H)，6.66(d， J＝3.52Hz，1H)，6.72(dd， J＝3.61，1.07Hz，1H)，7.17-7.26 (m，1H)，7.42-7.46(m，1H)， 8.21(s，1H)，8.81(d，J＝8.40 Hz，1H). [1-(5-叔丁基-2-噻 吩基)乙基]胺 70 N-[1-(5-叔丁基-2-噻吩 基)乙基]-2-(7-氟-1H-苯 并咪唑-1-基)乙酰胺 360.0 (400MHz，DMSO-D6).δppm 1.27(s，9H)，1.42(d，J＝6.84 Hz，3H)，4.99-5.13(m，3H)， 6.67(d，J＝3.52Hz，1H)，6.72 (dd，J＝3.61，1.07Hz，1H)， 7.02-7.11(m，1H)，7.14-7.25 (m，1H)，7.49(d，J＝8.01Hz，1 H)，8.38(s，1H)，8.81(d，J＝8.20 Hz，1H). [1-(5-叔丁基-2-噻 吩基)乙基]胺 71 N-[1-(5-叔丁基-2-噻吩 基)乙基]-2-(7-氰基-1H- 苯并咪唑-1-基)乙酰胺 367.0 (400MHz，甲醇-D4)δppm 1.32(s，9H)，1.56(d，J＝6.84 Hz，3H)，5.18-5.27(m，1H)， 5.26-5.37(m，2H)，6.65(d， J＝3.52Hz，1H)，6.79(d，J＝3.52 Hz，1H)，7.44(t，J＝7.03Hz，1 H)，7.72(d，J＝7.42Hz，1H)， 8.03(s，1H)，8.49(s，1H)，8.86 (d，J＝7.62Hz，1H). [1-(5-叔丁基-2-噻 吩基)乙基]胺
实施例72：N-[1-(6-叔丁基-2-甲氧基吡啶-3-基)乙基]-2-(7-氰基-1H-苯并 咪唑-1-基)乙酰胺
标题化合物根据合成2-甲基烟酰胺所述的方法，由[1-(6-叔丁基-2-甲氧 基吡啶-3-基)乙基]胺(中间体27)(85mg，0.48mmol)，7-氰基苯并咪唑-1-乙酸 (96mg 0.48mmol)、HATU(173mg，0.5mmol)和DIPEA(209μl，1.20mmol)合 成。过滤回收产物，随后加水形成沉淀。(收率27mg，46％)。1H NMR(400 MHz，DMSO-D6)δppm 1.27(s，9H)，1.32(d，J＝6.84 Hz，3H)，3.86(s，3H)， 5.02(t，J＝7.03 Hz，1H)，5.25(d，J＝4.69 Hz，2H)，6.91(d，J＝7.62 Hz，1H)， 7.31-7.37(m，1H)，7.62(dd，J＝7.62，0.39 Hz，1H)，7.71(dd，J＝7.71，1.07 Hz，1 H)，8.01(dd，J＝8.20，0.98 Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.78-8.83(m，J＝7.81 Hz，1H). MS[MH+]。分析计算值：392.2086，实测值：392.3.
实施例73：N-[1-(6-叔丁基-2-甲基吡啶-3-基)乙基]-2-(6，7-二氟-1H-苯并 咪唑-1-基)乙酰胺
标题化合物根据合成2-甲基烟酰胺所述的操作，由[1-(6-叔丁基-2-甲基 吡啶-3-基)乙基]胺(中间体32)(31.5mg，0.16mmol)，6，7-二氟苯并咪唑-1-乙 酸(35mg 0.16mmol)、HATU(38mg，0.18mmol)和DIPEA(71μl，0.41mmol) 合成。加入水并浓缩反应物。将混合物在乙酸乙酯和水之间分配，并用乙酸 乙酯萃取至少3次。产物经丙酮/己烷的硅胶快速色谱纯化(收率25mg，40 ％)。1H NMR(400MHz，CD3OD-D4)d ppm 1.32(s，9H)，1.47(d，J＝7.03 Hz，3 H)，2.53-2.57(m，3H)，5.04-5.15(m，2H)，5.15-5.22(m，1H)，7.16(ddd， J＝11.43，8.79，7.52 Hz，1H)，7.28(d，J＝8.20 Hz，1H)，7.41(dd，J＝8.89，3.61 Hz， 1H)，7.68(d，J＝8.20 Hz，1H)，8.11(s，1H)MS[MH+]分析计算值：387.1996， 实测值：387.3。
实施例74：N-[1-(6-叔丁基-4-甲基吡啶-3-基)乙基]-2-(7-氰基-1H-苯并咪 唑-1-基)乙酰胺
标题化合物根据合成2-甲基烟酰胺所述的操作，由[1-(6-叔丁基-4-甲基 吡啶-3-基)乙基]胺(中间体28)(52mg，0.27mmol)，7-氰基苯并咪唑-1-乙酸 (54.4mg，0.27mmol)，HATU(108mg，0.28mmol)和DIPEA(117μL，2.5 mmol)合成。加水使反应物沉淀然后经反相色谱纯化。(收率31.3mg，31％). 1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 1.27(s，9H)，1.42(d，J＝7.03 Hz，3H)， 2.29(s，3H)，5.03-5.12(m，1H)，5.13-5.27(m，2H)，7.17(s，1H)，7.34(dd， J＝8.11，7.71 Hz，1H)，7.71(dd，J＝7.62，0.78 Hz，1H)，8.01(dd，J＝8.01，0.98 Hz， 1H)，8.34(s，1H)，8.47(s，1H)，8.88(d，J＝7.81 Hz，1H).MS[MH+]分析计算 值：376.2137实测值：376.3。
实施例75：N-[1-(6-叔丁基-2-氯吡啶-3-基)乙基]-2-(7-氰基-1H-苯并咪唑 -1-基)乙酰胺
标题化合物根据合成2-甲基烟酰胺所述的操作，由[1-(6-叔丁基-2-氯吡 啶-3-基)乙基]胺(中间体26)(100mg，0.47mmol)、7-氰基苯并咪唑-1-乙酸 (0.42mmol)、HATU(191mg，0.5mmol)和DIPEA(182μL，1.41mmol)合成。 过滤回收产物，随后加水形成沉淀。收率111mg，67％。1H NMR(400MHz， DMSO-D6)δppm 1.27(s，9H)，1.38(d，J＝7.03 Hz，3H)，5.05-5.13(m，1H)， 5.21-5.32(m，2H)，7.34(dd，J＝8.01，7.62 Hz，1H)，7.43(d，J＝8.01 Hz，1H)， 7.71(dd，J＝7.62，0.98 Hz，1H)，7.86(d，J＝8.01 Hz，1H)，8.01(dd，J＝8.01，0.98 Hz，1H)，8.34(s，1H)，9.06(d，J＝7.23 Hz，1H)。MS[MH+]分析计算值： 396.1591实测值：396.3。
实施例76：N-[1-(6-叔丁基吡啶-3-基)乙基]-2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1- 基)乙酰胺
标题化合物根据合成2-甲基烟酰胺所述的操作，由[1-(6-叔丁基吡啶-3- 基)乙基]胺(中间体25)(93mg，0.52mmol)、7-氰基苯并咪唑-1-乙酸(100mg， 0.5mmol)、HATU(198mg，0.52mmol)和DIPEA(226μL，1.3mmol)合成。加 水使反应物沉淀然后经反相色谱纯化。1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 1.26(s，9H)，1.39(d，J＝7.03 Hz，3H)，4.87-4.97(m，1H)，5.12-5.27(m，2H)， 7.32(dd，J＝8.01，7.62 Hz，1H)，7.35(d，J＝8.20 Hz，1H)，7.66(dd，J＝8.30，2.25 Hz，1H)，7.69(dd，J＝7.52，0.88 Hz，1H)，7.99(dd，J＝8.20，0.98 Hz，1H)，8.32(s， 1H)，8.45(d，J＝2.54 Hz，1H)，8.85(d，J＝7.42 Hz，1H)。MS[MH+]分析计算 值：362.1981实测值：362.3。
药理学
1.hVR1FLIPR(荧光成像板读数计)筛选测定
在实验前24-30小时，在黑色的透明底384板(Greiner)中，将稳定表达 hVR1的转染CHO细胞(15,000细胞/孔)接种在50μL培养基中，并在加湿的 培养箱(37℃，2％CO2)中生长。
随后，通过倒置将培养基从细胞板中除去，并使用多点加样器(multidrop) (Labsystems)加入2μM Fluo-4。于37℃和2％CO2下避光染色培养40分钟后， 使用EMBLA(Scatron)洗掉存在的细胞外染料，在40μL试验缓冲液(1X HBSS，10mM D-葡萄糖，1mMCaCl2，10mM HEPES，10X 7.5％NaHCO3和 2.5mM丙磺舒)中剩余细胞。
FLIPR测定-IC50测定方案
对于IC50测定，使用FLIPR滤波器1(em 520-545nM)读取荧光。记录 细胞基线30秒，随后通过加入20μL的10种滴定半对数稀释浓度的试验化 合物，得到细胞浓度范围为3μM至0.1nM。再收集数据5分钟，每2秒收 集一次，然后通过FLIPR移液器加入VR1激动剂溶液：20-50nM的辣椒辣 素溶液。FLIPR继续再收集数据4分钟。对hVR1具有拮抗特性的化合物将 抑制响应于辣椒辣素加入的细胞内钙的增加。因而，与没有化合物的缓冲液 对照相比，这导致荧光信号的减少并产生了减少的荧光读数。数据由FLIPR 程序导出，为通过加入辣椒辣素的曲线所计算的荧光的总和。对于每种化合 物得到最大抑制作用、Hill斜率和IC50数据。
2.对HEK T-REX hVR1的hVR1FLIPR(荧光成像板读数计)筛选测 定
在补加性DMEM培养基(10％FBS，2mM谷氨酰胺，5μg/ml杀稻瘟菌素 (Blasticidine)&350μg/ml Zeocin)中生长HEK T-REX hVR1可诱导性的细胞。 加湿的培养箱(5％CO2，37℃)中，于无选择性试剂的DMEM培养基中，，将 HEK细胞以10000细胞/孔/50μl铺板于384-黑色聚赖氨酸涂覆的板(Costar) 中24小时或以5,500细胞/孔铺板于384-黑色聚赖氨酸涂覆的板中48小时。 在实验前16小时，用0.1μg/ml四环素诱导HEK T-Rex hVR1细胞。
随后，通过倒置将培养基从细胞板中除去，并使用多点加样器 (Labsystems)加入2μM Fluo-4。于37℃和2％CO2下避光染色培养30至40 分钟后，使用Microplate Washer Skatron Embla 384洗掉存在的细胞外染料， 在25μL试验缓冲液(1X HBSS，无Ca++/Mg++/钠的碳酸氢盐，1mM CaCl2&5 mM D-葡萄糖)中剩余细胞。
FLIPR测定-IC50测定方案
对于IC50测定，使用FLIPR滤波器1(em 520-545nM)读取荧光。记录 细胞基线10秒，随后通过加入12.5μL的10点3倍稀释浓度的试验化合物， 得到细胞浓度范围为22.5μM至0.1nM。再收集数据5分钟，每2秒收集一 次，然后通过FLIPR移液器加入VR1激动剂溶液：20nM(或50nM)的辣椒 辣素溶液。FLIPR继续再收集数据4分钟。对hVR1具有拮抗特性的化合物 将抑制响应于辣椒辣素加入的细胞内钙的增加。因而，与没有化合物的缓冲 液对照相比，这导致荧光信号的减少并提供了减少的荧光读数。数据由 FLIPR程序导出，为通过加入辣椒辣素的曲线所计算的荧光的总和。对于每 种化合物得到最大抑制作用、Hill斜率和IC50数据。
3.从成年的Sprague Dawley大鼠(100-300gr)中剖下DRGs，并置于冰 冷却的L15Leibovitz培养基中。在37℃，神经节用溶于DMEM+5％血清中 的胶原蛋白酶80U/ml+分散酶34U/ml进行酶处理过夜。次日，细胞用烧边 巴斯德吸管研磨，并接种于涂覆有聚-D赖氨酸(1mg/ml)的58mm直径的 Nunc细胞皿的中心。DRGs在不含胎牛血清的确定成分培养基中培养，该培 养基含有无L-谷氨酰胺但有吡哆素(pyridoxine)的Dulbecco′sMEM/NUT MIX F-12(1∶1)，6mg/mL D(+)-葡萄糖，100μg/mL脱辅基转铁蛋白，1mg/mL BSA，20μg/mL胰岛素，2mM L-谷氨酰胺，50IU/mL青霉素，50μg/mL 链霉素和0.01μg/mL NGF-7S。
当使细胞生长两天至四周时，试验完成。根据尺寸和轴突的存在选择细 胞。使用带有长突起的小细胞(最可能是C神经元，具有天然VR1受体)记录。
使用下列溶液(不含钙离子)，利用常规的全细胞电位钳膜片钳(whole cell voltage clamp patch clamp)记录细胞：
细胞外溶液，组成如下(mM)：NaCl137，KCl 5，MgCl2*H2O 1.2，HEPES 10，葡萄糖10，EGTA 5，蔗糖50，pH用NaOH调至7.4。
细胞内溶液，组成如下：K-葡萄糖酸140，NaCl 3，MgCl2*H2O 1.2， HEPES 10，EGTA 1，pH用KOH调至7.2。当细胞用抽吸法穿透时，用一股 辣椒辣素(500nM)来确定该细胞是否表达VR1受体。如果没有，则选择一个 新的细胞。如果有，则在辣椒辣素脉冲(500nM)之前加入增加剂量的化合物 来测定IC50值。
缩略语表
VR1 香草素受体1
IBS 过敏性肠综合征
IBD 炎症性肠病
GERD 胃食管回流病
DRG 背根神经节
BSA 牛血清白蛋白
HEPES 4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-乙磺酸
EGTA 乙二醇-双(2-氨基乙基醚)-N，N，N′，N′-四乙酸
DMEM Dulbeccos改良伊格尔培养基
结果
在上述测定中所测量的典型IC50值为150nM或更低。在本发明的一个 方面，IC50低于10nM。
表3.hVR1FLIPR的样本结果
样本 编号 名称 IC50 1 N-[(1S)-1-(4-异丙氧基苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺 1nM 4 N-((1S)-1-{4-[(1-甲基丙-2-炔-1-基)氧基]苯基}乙基)-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰胺 3nM 12 N-{1-[6-(环戊基氧基)吡啶-3-基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺 5nM 15 N-[(1S)-1-(4-{[(1S)-1-甲基丙基]氧基}苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰 胺 1nM 16 N-(1-{4-[氯(二氟)甲基]苯基}乙基)-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺 10nM 22 2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)苯基]乙基}乙酰胺 5nM 36 2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(三氟甲氧基)苯基]乙基}乙酰胺 9nM 37 2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}乙酰胺 6nM 39 N-{1-[4-(环戊基氧基)-3-氟苯基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺 1nM 40 N-[1-(4-环丙基苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺 3nM 47 N-{1-[4-{[(2S)-2-甲氧基丙基]氧基}-3-(三氟甲基)苯基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑 -1-基)乙酰胺 8nM 48 N-{1-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯氧基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺 7nM
表4.水溶性试验的样本结果
样本 编号 名称 Ph7.4时的 水溶性 3 N-{(1S)-1-[4-(2-氟乙氧基)苯基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺 90μM 5 N-{(1S)-1-[4-(2-甲氧基-1-甲基乙氧基)苯基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑 -1-基)乙酰胺 97μM 6 N-[(1S)-1-(4-乙氧基苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺 72μM 9 N-{1-[6-(2，2-二氟乙氧基)吡啶-3-基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙 酰胺 98μM 14 2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[4-(2，2，2-三氟乙氧基)苯基]乙基}乙酰胺 63μM 19 N-{1-[4-(2，2-二氟乙氧基)苯基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺 75μM 24 2-(7-氰基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-(1-{4-[2-氟-1-(氟甲基)乙氧基]苯基}乙基)乙 酰胺 94μM 29 2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]丙基}乙酰胺 92μM 30 2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]乙基}乙酰胺 97μM 31 2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-{1-[3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]乙基}乙酰胺 87μM 32 N-{1-[3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰 胺 87μM 35 2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-[1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙基]乙酰胺 100μM 38 N-[1-(6-异丙氧基吡啶-3-基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺 86μM 41 N-[1-(4-乙炔基苯基)乙基]-2-(7-硝基-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺 82μM 42 2-(7-氯-1H-苯并咪唑-1-基)-N-[1-(4-乙炔基苯基)乙基]乙酰胺 77μM 46 N-{1-[4-[(1-甲基哌啶-4-基)氧基]-3-(三氟甲基)苯基]乙基}-2-(7-硝基-1H-苯 并咪唑-1-基)乙酰胺 100μM
生物学试验
体内试验
使用两种经典的NSAID-敏感性的炎症模型--角叉藻聚糖模型和 Freund’s完全佐剂(FCA)模型--测定了本发明一些化合物的体内药理性质。
在角叉藻聚糖模型中，将角叉藻聚糖-γ(藻类衍生的多糖，IV型，100μl， 来自Sigma-Aldrich)溶于0.9％的无菌盐水中，浓度为1％；在FCA模型中， 将FCA(25μl，来自Sigma-Aldrich，(1ml FCA含有1mg热灭杀和干燥的结 核分枝杆菌，0.85ml矿物油和0.15ml二缩甘露醇单油酸，参照Nagakura等 人的Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics，2003；306(2)： 490-497))注入大鼠左后爪的跖面下(跖肌内；i.pl.)的皮下区。这产生了炎症应 答，伴随有水肿、发红和痛觉增敏。对于角叉藻聚糖，经3小时完全发生热 (和机械)痛觉增敏，并保持稳定6小时，而对于FCA，经24h完全发生并保 持稳定数周。为评价痛觉增敏的程度，选择了热趾肌试验，因为它是一个有 力的、一致的、可重现的终末点(基于评价伤害感受的Hargreaves方法，参 照Pain，1988；32(1)：77-88)。将大鼠置于玻璃表面上单独的有机玻璃盒中， 维持在30℃，热源(热增长比率：～1.1℃/s)集中在受患爪的跖面上。记录从 开始加热到动物缩爪的时间。相对于未接受过试验的动物(animal)，缩 爪潜伏期(Paw Withdrawal Latency，PWL)的减少表明了痛觉过敏状态。
痛觉过敏的翻转程度用化合物将PWL恢复至正常水平的能力来测定。
在确定的炎性状态中，口服给药实施例52的N-[(1S)-1-(4-叔丁基苯基) 乙基]-2-(6，7-二氟-1H-苯并咪唑-1-基)乙酰胺、实施例10的2-(7-硝基-苯并咪 唑-1-基)-N-{1-[6-(2，2，3，3-四氟-丙氧基)-吡啶-3-基]-乙基}-乙酰胺的活性更好 的对映体和实施例2的N-{(S)-1-[4-(2-氟-1-氟甲基-乙氧基)-苯基]-乙基}-2-(7- 硝基-苯并咪唑-1-基)-乙酰胺(实施例7的2-(7-硝基-苯并咪唑-1- 基)-N-{1-[6-(2，2，2-三氟-乙氧基)-吡啶-3-基]-乙基}-乙酰胺的活性更好的对映 体经皮下注射给药)，并测定它们各自的Tmax。所述活性更好的对映体如下 获得：由中间体制备所述化合物，所述中间体经酶法拆分并与酸偶合以产生 有约90％对映纯度的目标化合物。目标化合物进一步经手性色谱的方式纯 化。每种动物的PWL测定两次，取两次的平均数作为应答。然后将给定组 的所有动物应答进行平均，计算每组的标准差和平均值的标准误差(SEM)。 数据表示为平均值±SEM。用T-试验评价统计学显著性来比较未接受过试验 的组和处理过的组，用单向ANOVA随后经Holm-Sidak多重比较对照(媒介 物)组试验来测定药效。统计学显著性水平设定为p＜0.05。使用GraphPad Prismversion 4进行原始数据的非线性回归分析(用不同斜率S形方程模型) 来计算ED50，EC50，EC80和Emax。
在进行任何操作之前，将7-9组大鼠(150-175g，Charles River，St.Constant， 加拿大)圈养在温控室(22±1.5℃，30-80％湿度，12h光照/黑暗周期)，并在 使用前至少一天使之在动物装置中适应新环境。所有实验方案由阿斯利康 动物关爱委员会提供(AstraZeneca Animal Care Committee)。实验在周期的光 照阶段进行，房间用300勒克斯亮度照亮。动物随意进食进水。
受试化合物在伤害性疼痛中的体内效力和效能概述于下表5。试验化合 物对反转角叉藻聚糖和FCA诱导的热痛觉过敏是有力及有效的。
表5.实验化合物在角叉藻聚糖和FCA模型中的体内效力和效能