新单乙酰代邻-苯二胺类衍生物 本发明的目的为新的单乙酰代邻-苯二胺类衍生物及其药学上可接受的盐。本发明还涉及这些通式I的化合物的制备方法、含有这类化合物的药物组合物及其在制备用于治疗诸如癌症这类疾病的药物中的应用。
癌症是主要的死亡原因之一，超过了心脑血管疾病，因此花费大量费用和时间进行了征服癌症的许多研究。然而，尽管有各种疗法，诸如外科手术、放疗和化疗，仍然存在对改进的抗癌疗法地巨大需求。在这些疗法中，化疗是用于治疗癌症主要领域的疗法之一。大部分药物通过从表达其细胞毒性抑制DNA且作为结果损伤肿瘤细胞而表现出其作用。然而，化疗缺乏选择性且结果是不足以在肿瘤细胞与正常细胞之间区分且由此在正常细胞中表现出的不良反应限制了它们在疗法中的应用。迄今为止，认为尚没有发现令人满意的药物且由此非常需要具有降低的毒性、更好的耐受性和高治疗作用的抗癌药。
本发明的化合物是组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)抑制剂且由此表现出抗增殖和诱导分化的活性，从而导致对肿瘤细胞增殖的抑制、诱导编程性细胞死亡并抑制侵害。
转录调节是细胞分化、增殖和编程性细胞死亡中的主要事件。一组基因的转录活化决定细胞的目标且因这种原因而导致转录受到各种因素的紧密调节。它在该过程中涉及的调节机制之一在于DNA三级结构的改变，它通过调节转录因子易进入其靶DNA片段的能力而影响转录。核小体的完整性受到核心组蛋白的乙酰化状态调节。在低乙酰化状态的情况下，核小体紧密结合且由此不允许转录。另一方面，核心组蛋白乙酰化松弛了核小体，导致允许转录。组蛋白的乙酰化状态受到组蛋白乙酰基转移酶(HAT)和组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)平衡的控制。近来，已经发现HDAC抑制剂抑制生长并诱导几种类型的癌细胞编程性细胞死亡，包括结肠癌细胞、T-细胞淋巴瘤细胞和红白血病细胞。由于编程性细胞死亡是癌症发展的关键因素，所以HDAC抑制剂是作为编程性细胞死亡有效诱导物用于癌症疗法的理想试剂(Koyama，Y.等，Blood 96(2000)1490-1495)。
本发明的化合物令人意外地表现出低毒性与有效的抗增殖和细胞分化活性，其特征在于因HDAC抑制而导致乙酰化得到促进。
EP-A 0 847 992中描述了作为细胞分化诱导物的单乙酰代邻苯二胺衍生物。相同类型的化合物也是EP-A 0 242 851的主题。这些申请中所述的化合物几乎仅为使用苯甲酸衍生物单乙酰代的邻亚苯基衍生物。然而，仍然存在对提供具有改善特性的化合物的需求，诸如增加的耐受性、低毒性和低副作用。
单乙酰代邻苯二胺类在本领域中已知作为制备相应的苯并咪唑类的前体，这类制备方法描述在下列文献中：例如DE-A 2 062 265；FR 2 167 954；Rastogi，R.和Sharma，S.，Indian J.Chem.，Sect.B，21B(5)(1982)485-487；Moll，R.等，Z.Chem.17(1977)133-134；和Hassan，H.等，Indian J.Chem.39B(2000)764-768。
已经发现本发明的化合物是具有抗增殖和诱导分化活性的HDAC抑制剂，所述的活性可以导致肿瘤细胞增殖抑制、诱导编程性细胞死亡并抑制侵害。这些化合物由此用于治疗人或动物中诸如癌症这类疾病。可以治疗的肿瘤实例为：结肠癌；乳腺癌(包括晚期乳腺癌)；肺癌(例如腺癌且包括非小细胞肺癌)；前列腺癌，包括晚期疾病；胰腺癌；淋巴样谱系的造血肿瘤(例如急性淋巴细胞白血病、B-细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤)；髓细胞性白血病(例如急性髓性白血病(AML))；甲状腺滤泡癌；骨髓增生异常综合征(MSD)；来源于间充质细胞的肿瘤；黑素瘤；畸胎癌；神经母细胞瘤；神经胶质瘤；皮肤良性肿瘤(例如角化棘皮瘤)；肾癌；卵巢癌；膀胱癌；和表皮癌，但不限于它们。
本发明涉及通式A的新化合物及其药学上可接受的盐：
其中：
Ar为噻吩-2，5-二基、吡啶-2，5-二基、吡啶-5，2-二基、吡啶-2，6-二基、吡啶-2，4-二基或1，4-亚苯基；
R1、R2彼此独立地表示氢、C1-12-烷基、C2-12-链烯基、C2-12-炔基、C3-12-环烷基，所述的烷基、链烯基、炔基和环烷基任选被羟基、卤素、C3-12-环烷基、烷氧基、烷基硫烷基、酰氧基、烷氧羰基、酰基、C1-6-烷基-NH-C(O)-、C1-6-烷基-C(O)NH-或-NR3R4单取代或多取代；或备选地
R1为氢；且
R2为羟基、烷氧基、C2-C12-链烯氧基或苯氧基，该苯氧基任选被甲基、甲氧基、卤素、硝基、氰基、三氟甲基、乙烯基或-C(O)-O-CH3取代，条件是如果R2为羟基，那么Ar不为噻吩-2，5-二基；且
R3和R4彼此独立地表示氢或C1-6-烷基；或其中
R3和R4与它们所连接的氮原子一起形成环，该环被氧代单取代且该环可以含有另一个杂原子。
尤其优选通式I的化合物及其药学上可接受的盐：
其中：
Ar为噻吩-2，5-二基、吡啶-2，5-二基、吡啶-5，2-二基或1，4-亚苯基；
R1、R2彼此独立地表示氢、C1-12-烷基、C2-12-链烯基、C2-12-炔基、C3-12-环烷基，所述的烷基、链烯基、炔基和环烷基任选被羟基、卤素、C3-12-环烷基、烷氧基、烷基硫烷基、酰氧基、烷氧羰基、酰基、C1-6-烷基-NH-C(O)-、C1-6-烷基-C(O)NH-或-NR3R4单取代或多取代；
R3和R4彼此独立地表示氢或C1-6-烷基；或其中
R3和R4与它们所连接的氮原子一起形成环，该环被氧代单取代且该环可以含有另一个杂原子。
本发明还包括通式A或通式I化合物的药学上可接受的盐或前体药物以及这些化合物、盐和前体药物在生产药剂中的应用。
下列用于本说明书中的一般术语的定义与该术语是单独出现还是以组合方式出现无关。
术语“C1-C12-烷基”表示含有1-12个碳原子的饱和直链或支链烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、2-丁基、叔丁基、戊基、己基、庚基等。术语“C1-C6烷基”表示含有1-6个碳原子的饱和直链或支链烷基。烷基可以任选被羟基、卤素、C3-12-环烷基、烷氧基、烷基硫烷基、酰氧基、烷氧羰基、酰基、C1-6-烷基-NH-C(O)-、C1-6-烷基-C(O)NH-或-NR3R4单取代或多取代。取代的烷基残基的实例例如有三氟甲基、五氟乙基、2-二甲氨基-乙基、2-二乙氨基-乙基、2-二丁氨基-乙基、2-二异丙氨基-乙基、2-甲氧基-乙基、2-乙氧基-乙基、2-丙氧基-乙基、3-二甲氨基-丙基、3-二乙氨基-丙基、3-二丁氨基-丙基、3-二异丙氨基-丙基、3-甲氧基-丙基、3-乙氧基-丙基、3-丙氧基-丙基、2-乙酰氨基-乙基、3-乙酰氨基-丙基(proyl)、2-甲氧基-1-甲基-乙基(以其(R)、(S)和(R，S)形式)、环丙基甲基、3-二甲氨基-2，2-二甲基丙基、3-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-丙基或2-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-乙基。
术语″烷氧基″表示这类基团，其中烷基残基如上述所定义且通过氧原子连接。
术语″烷基硫烷基″表示这类基团，其中烷基残基如上述所定义且通过硫原子连接。
术语″酰氧基″表示基团烷基-C(O)-O-，其中烷基残基如上述所定义。
术语″烷氧羰基″表示基团烷基-O-C(O)-，其中烷基残基如上述所定义。
术语″酰基″表示基团烷基-C(O)-，其中烷基残基如上述所定义。
术语″C2-C12-链烯基″指的是含有2-12个碳原子和至少一个双键的不饱和烷基，优选烯丙基或戊二烯基。
术语″C2-C12-炔基″指的是含有2-12个碳原子和至少一个三键的不饱和烷基，诸如丙-2-炔基，优选丙炔基。
术语″C2-C12-链烯氧基″表示这类基团，其中链烯基残基如上述所定义且通过氧原子连接，优选烯丙氧基。
本发明中所用的术语″C3-12-环烷基″表示含有3-12个碳原子的饱和碳环，诸如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。
术语″与它们所连接的氮原子一起形成环，该环被氧代单取代且该环可以含有另一个杂原子″指的是杂环，诸如吡咯烷酮-1-基或哌啶酮-1-基。
术语″卤素″表示氯、碘、氟和溴。
术语″药学上可接受的酸加成的盐″包括与无机酸和有机酸形成的盐，所述的无机酸和有机酸诸如有盐酸、硝酸、硫酸、磷酸、柠檬酸、甲酸、富马酸、马来酸、乙酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、环己烷氨基酸磺酸等。
本发明的化合物可以含有一个或多个手性中心且由此可以以外消旋或旋光形式存在。可以按照公知方法将外消旋物分离成对映体。优选通过与旋光酸反应由外消旋混合物形成可以通过结晶分离的非对映体盐，所述的旋光酸诸如：例如D-或L酒石酸、扁桃酸、苹果酸、乳酸或樟脑磺酸。此外，可以通过分析级、半制备或制备级色谱法、使用合适的旋光固定相与合适的洗脱剂将外消旋化合物分离成其对映体。合适的旋光固定相包括、但不限于二氧化硅(例如ChiraSper，Merck；Chiralpak OT/OP，Baker)、纤维素酯类或氨基甲酸酯类(例如Chiracel OB/OY，Baker)或其它(例如Crownpak，Daicel或Chiracel OJ-R，Baker)。
通式A或I的对映体、非对映异构体和外消旋物及其药学上可接受的盐也是本发明的组成部分。
优选组的通式I或A的化合物为：化合物，其中R1为氢或或烷基且R2为氢、C1-12-烷基、C2-12-链烯基、C2-12-炔基，所述的烷基、链烯基和炔基任选被羟基、卤素、烷氧基、烷基硫烷基、酰氧基、烷氧羰基、酰基、C1-6-烷基-NH-C(O)-、C1-6-烷基-C(O)NH-或-NR3R4单取代或多取代；其中R3R4上述所定义；
通式I或A的化合物，其中R1为氢且R2为链烯基或炔基；
化合物，其中R1为氢且R2为未被取代的直链或支链C1-12-烷基或被烷氧基、烷基硫烷基、酰氧基、烷氧羰基、酰基、C1-6-烷基-NH-C(O)-或C1-6-烷基-C(O)NH-单取代或多取代的烷基；
通式I或A的化合物，其中R1为氢且R2为被-NR3R4单取代或多取代的C1-12-烷基，其中R3和R4彼此独立地表示氢或C1-6-烷基；和
权利要求1的通式I或A的化合物，其中R1为氢且R2为被-NR3R4单取代或多取代的烷基，其中R3和R4与它们所连接的氮原子一起形成环，该环被氧代单取代且该环可以含有另一个杂原子。
优选通式I的化合物，其中Ar为通式I-A的噻吩-2，5-二基：
其中：
R1为氢或C1-6-烷基；且
R2为氢、C1-12-烷基、C2-12-链烯基、C2-12-炔基，所述的烷基、链烯基和炔基任选被羟基、卤素、烷氧基、烷基硫烷基、酰氧基、烷氧羰基、酰基、C1-6-烷基-NH-C(O)-、C1-6-烷基-C(O)NH-或-NR3R4单取代或多取代；其中R3R4如上述所定义。
这类化合物的实例为：
实施例序号 化合物
1-19 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-(丁基-甲
基-酰胺)
1-34 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-二乙酰胺
1-36 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-(甲基-丙
-2-炔基-酰胺)
1-37 噻吩-2，5-二羧酸2-(烯丙基-甲基-酰胺)5-[(2-氨基-
苯基)-酰胺]
1-38 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-二甲
氨基乙基)-乙基-酰胺]
1-39 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-二丙酰胺
1-40 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-(甲基-戊
基-酰胺)
1-41 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-二乙
氨基乙基)-甲基-酰胺]
1-42 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[双-(2-甲
氧基-乙基)-酰胺]
1-44 噻吩-2，5-二羧酸2-酰胺5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]
另外优选通式I或A或I-A的化合物，其中R1为氢且R2为链烯基或炔基。
这类化合物例如有：
实施例序号 化合物
1-30 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-丙-2-炔基-酰
胺
1-32 噻吩-2，5-二羧酸2-烯丙基酰胺5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]
另外优选通式I或A或I-A的化合物，其中R1为氢且R2为未被取代的直链或支链C1-12-烷基或被烷氧基、烷基硫烷基、酰氧基、烷氧羰基、酰基、C1-6-烷基-NH-C(O)-或C1-6-烷基-C(O)NH-单取代或多取代的烷基。
这类化合物的实例为：
实施例序号 化合物
1-1 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(1-甲基-丁
基)-酰胺]
1-6 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(1-甲基-己
基)-酰胺]
1-9 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(3-甲氧基-丙
基)-酰胺]
1-10 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-乙酰氨基乙基)-酰胺]5-[(2-氨基-
苯基)-酰胺]
1-11 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-乙基-己
基)-酰胺]
1-13 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(1，5-二甲基-
己基)-酰胺]
1-15 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-甲氧基-1-
甲基-乙基)-酰胺]
1-20 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-戊酰胺
1-21 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-丁酰胺
1-23 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(3-乙氧基-丙
基)-酰胺]
1-24 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-仲-丁酰胺
1-25 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-庚酰胺
1-26 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-壬酰胺
1-27 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-辛酰胺
1-28 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-(1-甲基-庚
基)-酰胺]
1-29 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-(异丁酰胺)
1-31 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-丙酰胺
1-35 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-甲基-丁
基)-酰胺]
另外优选通式I或A或I-A的化合物，其中R1为氢且R2为被-NR3R4单取代或多取代的C1-12-烷基，其中R3和R4彼此独立地表示氢或C1-6-烷基。
这类化合物的实例为：
实施例序号 化合物
1-2 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(4-二乙氨基
-1-甲基-丁基)-酰胺]
1-3 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(3-二乙氨基-
丙基)-酰胺]
1-4 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(3-二丁氨基-
丙基)-酰胺]
1-5 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(3-二甲氨基
丙基)-酰胺]
1-8 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(3-二异丙氨
基乙基)-酰胺]
1-17 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(3-二甲氨基
-2，2-二甲基丙基)-酰胺]
1-18 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-二甲氨基
乙基)-酰胺]
另外优选通式I或A或I-A的化合物，其中R1为氢且R2为被-NR3R4单取代或多取代的烷基，其中R3和R4与它们所连接的氮原子一起形成环，该环被氧代单取代且该环可以含有另一个杂原子。
这类化合物的实例为：
实施例序号 化合物
1-22 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-{[3-(2-氧代-
吡咯烷-1-基)-丙基]-酰胺}
另外优选通式I或A或I-A的化合物，其中R1为氢或烷基且R2为被环烷基取代的环烷基或烷基。这类化合物例如为：
1-7 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-环庚酰胺
1-12 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-环辛酰胺
1-14 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-环戊酰胺
1-33 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-环丁酰胺
1-43 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-(环丙基甲基-
丙基-酰胺)
1-16 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-环丙基甲基-
酰胺
另外优选通式I或A的化合物，其中Ar为通式I-B的吡啶-2，5-二基：
其中：
R1为氢或烷基；且
R2为氢、C1-12-烷基、C2-12-链烯基、C2-12-炔基，所述的烷基、链烯基和炔基任选被羟基、卤素、烷氧基、烷基硫烷基、酰氧基、烷氧羰基、酰基、C1-6-烷基-NH-C(O)-、C1-6-烷基-C(O)NH-或-NR3R4单取代或多取代；其中R3R4如上述所定义。
这类化合物的实例为：
2-3 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-(丁基-甲基-酰
胺)
2-14 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-二丙酰胺
2-16 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-(甲基-戊基-酰
胺)
2-17 吡啶-2，5-二羧酸2-(烯丙基-甲基-酰胺)5-[(2-氨基-苯基)-
酰胺]
2-18 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-[双-(2-甲氧基-
乙基)-酰胺]
2-19 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-[(2-二乙氨基乙
基)-甲基-酰胺]
另外优选通式I或A或I-B的化合物，其中R1为氢且R2为链烯基或炔基。
这类化合物的实例为：
2-4 吡啶-2，5-二羧酸2-烯丙基酰胺5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]
另外优选通式I或A或I-B的化合物，其中R1为氢且R2为未被取代的直链或支链C1-12-烷基或被羟基、卤素、烷氧基、烷基硫烷基、酰氧基、烷氧羰基、酰基、C1-6-烷基-NH-C(O)-或C1-6-烷基-C(O)NH-单取代或多取代的烷基。
这类化合物的实例为：
2-2 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-己基酰胺
2-7 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-[(2-甲氧基-乙
基)-酰胺]
2-8 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-[(3-丁氧基-丙
基)-酰胺]
2-9 {[5-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-吡啶-2-羰基]-氨基}-乙酸
甲酯
2-10 3-{[5-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-吡啶-2-羰基]-氨基}-丙
酸叔丁酯
2-11 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-[(2，2，3，3，3-五氟
-丙基)-酰胺]
2-12 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-[(2，2，3，3，4，4，4-
七氟-丁基)-酰胺]
2-13 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-[(1，5-二甲基-己
基)-酰胺]
2-15 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-[(1-甲基-己基)-
酰胺]
2-20 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-乙酰氨基乙基)-酰胺]5-[(2-氨基-苯
基)-酰胺]
另外优选通式I或A或I-B的化合物，其中R1为氢且R2为被-NR3R4单取代或多取代的烷基，其中R3和R4彼此独立地表示氢或C1-6-烷基。
这类化合物的实例为：
2-1 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-[(2-二异丙氨基
-乙基)-酰胺]
2-6 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-[(3-二丁氨基-
丙基)-酰胺]
另外优选通式I或A或I-B的化合物，其中R1为氢且R2为环烷基。
这类化合物的实例为：
2-5 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-环辛酰胺
另外优选通式I或A的化合物，其中Ar表示通式I-C的吡啶-5，2-二基：
其中：
R1为氢或烷基；且
R2为氢、C1-12-烷基、C2-12-链烯基、C2-12-炔基，所述的烷基、链烯基和炔基任选被羟基、卤素、烷氧基、烷基硫烷基、酰氧基、烷氧羰基、酰基、C1-6-烷基-NH-C(O)-、C1-6-烷基-C(O)NH-或-NR3R4单取代或多取代；其中R3R4如上述所定义。
这类化合物的实例为：
3-23 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-(丁基-甲基-酰
胺)
3-24 吡啶-2，5-二羧酸5-(烯丙基-甲基-酰胺)2-[(2-氨基-苯基)-酰
胺]
3-25 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-(甲基-丙-2-炔基-
酰胺)
3-26 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[双-(2-甲氧基乙
基)-酰胺]
3-27 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-(甲基-戊基-酰
胺)
3-29 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-二丙酰胺
3-30 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-二乙氨基乙
基)-甲基-酰胺]
另外优选通式I或A或I-C的化合物，其中R1为氢且R2为链烯基或炔基。
这类化合物的实例为：
3-2 吡啶-2，5-二羧酸5-烯丙基酰胺2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]
另外优选通式I或A或I-C的化合物，其中R1为氢且R2为未被取代的烷基或被羟基、卤素、烷氧基、烷基硫烷基、酰氧基、烷氧羰基、酰基、C1-6-烷基-NH-C(O)-或C1-6-烷基-C(O)NH-单取代或多取代的烷基。
这类化合物的实例为：
3-3 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-己基酰胺
3-6 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-乙酰氨基-乙基)-酰胺]2-[(2-氨基-苯
基)-酰胺]
3-7 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2，2，3，3，3-五氟-
丙基)-酰胺]
3-8 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2，2，3，3，4，4，4-七
氟-丁基)-酰胺]
3-9 3-{[6-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-丁酸
乙酯
3-10 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-羟基-丙基)-
酰胺]
3-11 2-{[6-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-3-甲
基-丁酸甲酯
3-12 3-{[6-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-丙酸
乙酯
3-13 {[6-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-乙酸甲
酯
3-14 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-甲氧基-乙
基)-酰胺]
3-15 2-{[6-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-4-甲
基硫烷基-丁酸甲酯
3-16 3-{[6-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-丙酸
叔丁酯
3-17 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2，3-二羟基-丙
基)-酰胺]
3-18 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(3-丁氧基-丙
基)-酰胺]
3-21 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-仲-丁酰胺
3-22 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(1，5-二甲基-己
基)-酰胺]
3-31 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(1-甲基-己基)-
酰胺]
另外优选通式I或A或I-C的化合物，其中R1为氢且R2为被-NR3R4单取代或多取代的烷基，其中R3和R4彼此独立地表示氢或C1-6-烷基。
这类化合物的实例为：
3-1 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-二异丙氨基-
乙基)-酰胺]
3-5 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-二甲氨基-乙
基)-酰胺]
3-19 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(4-二乙氨基-1-
甲基-丁基)-酰胺]
3-20 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(3-二丁氨基-丙
基)-酰胺]
另外优选通式I或A或I-C的化合物，其中R1为氢或烷基且R2为环烷基。
这类化合物的实例为：
3-4 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-环辛酰胺
3-28 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-(环丙基甲基-丙
基-酰胺)
另外优选通式I或A的化合物，其中Ar表示1，4-亚苯基，即通式I-D的化合物
其中：
R1为氢或烷基；且
R2为氢、C1-12-烷基、C2-12-链烯基、C2-12-炔基，所述的烷基、链烯基和炔基任选被羟基、卤素、烷氧基、烷基硫烷基、酰氧基、烷氧羰基、酰基、C1-6-烷基-NH-C(O)-、C1-6-烷基-C(O)NH-或-NR3R4单取代或多取代；其中R3R4如上述所定义。
这类化合物的实例为：
4-13 N-(2-氨基-苯基)-N′-丁基-N′-甲基-对苯二甲酰胺
另外优选通式I或A或I-D的化合物，其中R1为氢且R2为链烯基或炔基。
这类化合物例如为：
4-11 N-烯丙基-N′-(2-氨基-苯基)-对苯二甲酰胺
另外优选通式I或A或I-D的化合物，其中R1为氢且R2为未被取代的直链或支链烷基或被烷氧基、烷基硫烷基、酰氧基、烷氧羰基、酰基、C1-6-烷基-NH-C(O)-或C1-6-烷基-C(O)NH-单取代或多取代的烷基。
这类化合物的实例为：
4-5 N-(2-氨基-苯基)-N′-(2-甲氧基-1-甲基-乙基)-对苯二甲酰胺
4-7 N-(2-氨基-苯基)-N′-(3-乙氧基-丙基)-对苯二甲酰胺
4-12 N-(2-氨基-苯基)-N′-丁基-对苯二甲酰胺
另外优选通式I或A或I-D的化合物，其中R1为氢且R2为被-NR3R4单取代或多取代的烷基，其中R3和R4彼此独立地表示氢或C1-6-烷基。
这类化合物的实例为：
4-1 N-(2-氨基-苯基)-N′-(2-二异丙氨基-乙基)-对苯二甲酰胺
4-2 N-(2-氨基-苯基)-N′-(3-二丁氨基-丙基)-对苯二甲酰胺
4-3 N-(2-氨基-苯基)-N′-(4-二乙氨基-1-甲基-丁基)-对苯二甲酰
胺
4-4 N-(2-氨基-苯基)-N′-(3-二乙氨基-丙基)-对苯二甲酰胺
4-8 N-(2-氨基-苯基)-N′-(2-二甲氨基-乙基)-对苯二甲酰胺
4-10 N-(2-氨基-苯基)-N′-(3-二甲氨基-2，2-二甲基-丙基)-对苯二
甲酰胺
另外优选通式I或A或I-D的化合物，其中R1为氢且R2为被-NR3R4单取代或多取代的烷基，其中R3和R4与它们所连接的氮原子一起形成环，该环被氧代单取代且该环可以含有另一个杂原子。
这类化合物的实例为：
4-9 N-(2-氨基-苯基)-N′-[3-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-丙基]-对苯二
甲酰胺
另外优选通式I或A或I-D的化合物，其中R1为氢、烷基或链烯基且R2为被环烷基取代的环烷基或烷基。
这类化合物例如为：
4-6 N-(2-氨基-苯基)-N′-环丙基甲基-对苯二甲酰胺
本发明的另一个实施方案为通式I-E的化合物：
其中：
Ar为噻吩-2，5-二基、吡啶-2，5-二基、吡啶-2，6-二基、吡啶-2，4-二基、吡啶-5，2-二基或1，4-亚苯基；且
R2表示羟基、烷氧基、C2-C12-链烯氧基或苯氧基，条件是如果R2为羟基，那么Ar不为噻吩-2，5-二基。
这类化合物的实例为：
5-1 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-(甲氧基-酰胺)
5-2 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-(乙氧基-酰胺)
5-3 噻吩-2，5-二羧酸2-(烯丙氧基-酰胺)5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]
5-4 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-(苯氧基-酰胺)
5-5 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-羟基酰胺
5-6 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-羟基酰胺
5-7 吡啶-2，6-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]6-羟基酰胺
5-8 吡啶-2，4-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]4-羟基酰胺
本发明的另一个实施方案为通式I或A的化合物：
噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-(叔-丁氧基-酰胺)；
吡啶-2，5-二羧酸2-(烯丙基-环戊基-酰胺)5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]；
吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-(环丙基甲基-丙基-酰胺)；
吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-仲-丁酰胺；
吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-羟基-乙基)酰胺]；
吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-{[2-(2-羟基-乙氧基)-乙基]-酰胺}；
吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(1-环己基甲基-2-羟基-乙基)-酰胺]；
吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(4-羟基-丁基)酰胺]；
吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(1-羟基甲基-2-甲基-丁基)-酰胺]；
吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(4-羟基环己基)-酰胺]；
吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-({2-[双-(2-羟基-乙基)-氨基]-乙基}-酰胺)；
吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-[(2-二甲氨基-乙基)-酰胺]；
吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-二甲氨基乙基)-乙基-酰胺]。
可以通过已知用于制备化学上相关的化合物的任意方法制备通式I或A的芳族二羧酸衍生物或其药学上可接受的盐。将用于制备通式I或A的芳族二羧酸衍生物或其药学上可接受的盐的这类方法作为本发明的另一个特征提供且通过下列有代表性的实施例来解释，其中除非另有说明，Ar、R1和R2具有上述含义。可以通过标准有机化学步骤获得原料。这类原料的制备描述在所附的实施例中。另一方面，可以通过与属于有机化学领域普通技术人员解释相类似的步骤获得必要的原料。
(a)用于生产通式I或A的一种优选方法包括使通式II的化合物与通式III的化合物反应，其中通式II化合物的结构式如下：
其中Ar、R1和R2如上述所定义；
其中通式III化合物的结构式如下：
其中Y表示氢或合适的氨基保护基。
已知用于氨基的保护基来自肽化学，这类保护基例如为苄氧羰基(通过氢化或在乙酸中的氢溴酸裂解)、叔-丁氧羰基(用强酸裂解，诸如纯三氟乙酸或在二氯甲烷中的三氟乙酸或在二噁烷中的HCl)、9-芴甲氧羰基(用仲胺类裂解，诸如哌啶)。
如果通式A上的R2为OH，那么该羟基可以带有用于如下所述HNR1R2与化合物V或VI反应的保护基。其中羟基保护基为可以通过氢化裂解的苄醚。某些O-被保护的HNR1R2基团、诸如O-苄基羟基胺是商购的。
该反应一般包括两步一罐步骤。在第一个步骤中，通过使通式II的羧酸酯在有活化剂存在的惰性溶剂或稀释剂、例如二氯甲烷、二噁烷或四氢呋喃中反应而活化该化合物。
合适的酸的反应性衍生物为：例如酰基卤，例如通过使酸与无机酰氯、例如亚硫酰氯或草酰二氯反应形成的酰基氯；混合的酸酐，例如通过使酸与氯甲酸酯、诸如氯甲酸异丁酯反应形成的酸酐；活性酯，例如通过使酸与苯酚、诸如五氟苯酚反应形成的酯；通过使酸与N-羟基苯并三唑反应形成的活性酯；酰基叠氮，例如通过使酸与叠氮化物、诸如二苯基磷酰基氮化物反应形成的叠氮化物；酰腈，例如通过使酸与氰化物、诸如二乙基磷酰基氰化物反应形成的氰化物；或酸与碳二亚胺、诸如N-3-二甲氨基丙基N-乙基碳二亚胺或二环己基碳二亚胺反应的产物；或酸与N，N′-羰二咪唑的反应产物；或酸与脲阳离子盐、诸如O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基四氟硼酸硝鎓的反应产物；或酸与基于磷的试剂、例如双-(2-氧代-3-噁唑烷基)-磷酰氯的反应产物。该反应在-30℃-60℃、通常在低于0℃下进行。
在第二个步骤中，将化合物III加入到含有活化酸的溶液中。如果Y为保护基，那么最终必须将其裂解(方法参见上文)以得到化合物I。为了获得R2为羟基的化合物，氨基-和羟基保护基可以存在于分子上。在这种情况中，必须使用上述方法在氨基保护基前裂解羟基保护基。
这些方法是本领域技术人员众所周知的。原则上用于合成作为如″Methoden der organischen Chemie(Houben-Weyl)″B和XV/1和XV/2中所述肽化学中所用酰胺类的所有方法也是适用的。未被保护的苯二胺的单乙酰化描述在EP0974576中。
(b)可以通过从通式IV的化合物水解制备通式II的化合物：
其中R3为烷基或芳烷基，优选甲基、乙基、叔-丁基、苄基。
根据基团R3性质的不同，实施裂解的条件不同。当R3为烷基、诸如甲基或乙基时，反应在有碱存在的惰性溶剂或稀释剂中进行，所述的碱例如为氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾，所述的惰性溶剂或稀释剂例如为MeOH、乙醇、二噁烷、THF、水。当R3为叔-丁基时，反应在有酸、例如盐酸在惰性溶剂、诸如乙醚或二噁烷或在二氯甲烷中的三氟乙酸中的溶液存在下进行。当R3为苄基时，反应通过在有贵金属催化剂、诸如钯或铂/合适的载体、诸如碳存在下氢化来进行。用于酯水解的方法当然取决于残基R1和R2的性质。
(c)由通式V的化合物制备通式IV的化合物，其中Ar和R3具有上述含义。
该反应一般包括两步一罐步骤。在第一个步骤中，通过使用(a)中所述的方法活化通式V的羧酸酯。
在第二个步骤中，在用于活化的温度下将R1和R2具有上述含义的通式HNR1R2的胺加入到溶液中并将温度缓慢调节至环境温度。可以将合适的清除剂碱、如三乙胺或二异丙基乙胺加入到反应混合物中。这些方法是本领域技术人员众所周知的。原则上用于合成作为如″Methoden derorganischen Chemie(Houben-Weyl)″B和XV/1和XV/2中所述肽化学中所用酰胺类的所有方法也是适用的。
(d)当然存在几种文献中所述的通式V的化合物。例如，对苯二酸一甲酯描述在Holba，V.等，Z.Phys.Chem.262(1981)445-448中。它也可以为商购的。吡啶-2，5-二羧酸5-甲酯例如描述在WO 93/21146中。噻吩-2，5-二羧酸一甲酯例如描述在US 2,680,731中。通常通过选择性皂化二酯制备这些一酯类，但也可以使用其它方法且这些方法也是本领域技术人员众所周知的。
(e)用于生产通式I或A化合物的另一种优选方法包括使通式VI的化合物与通式HNR1R2的胺反应，其中通式VI化合物的结构式如下：
其中Ar如上述所定义且Y为如(a)中所述的合适的保护基；
在通式HNR1R2的胺中，R1和R2具有上文定义的含义。
该反应一般包括两步一罐步骤且按照(a)中所述的方法进行。
最终必须通过如上所述的方法裂解Y而得到化合物I。如上所述，如果氨基-和羟基保护基存在于分子上，那么应在氨基保护基前裂解羟基保护基。
(f)可以如(b)所述通过从通式VII的化合物水解制备通式VI的化合物：
其中R3和Y具有上述含义。
g)由通式V的化合物与通式III的化合物制备通式VII的化合物，其中A和R3具有上文定义的含义，其中通式V化合物的结构式如下：
其中通式III化合物的结构式如下：
其中Y表示如(a)中所述的合适的保护基。
该反应一般包括如(a)中所述的两步一罐步骤。
通式I或A的化合物及其药物上有用的加成盐具有有价值的药理特性。已经发现它们具有抗增殖和诱导分化的活性，这类活性可以导致肿瘤细胞增殖抑制、诱导编程性细胞死亡并抑制侵害，这些化合物用于治疗人和动物中诸如癌症这类疾病。
使用细胞乙酰化试验证实本发明化合物作为HDAC抑制剂的活性。其中监测PC3细胞中的组蛋白乙酰化。高度乙酰化与化合物抑制组蛋白脱乙酰基酶有关。平行监测细胞存活率以评估化合物的细胞毒性。
将PC3细胞、即人前列腺癌细胞系以1800个细胞/孔接种在384-孔微量滴定板中的RPMI 1640(包括5％FCS、2mM谷氨酰胺和青霉素/链霉素)内。
在37℃下48小时后，加入预稀释的化合物至终浓度为1uM。用二甲亚砜(DMSO)预稀释化合物，得到0.5％DMSO/孔的终浓度。
在保温24小时后，通过加入细胞增殖试剂WST-1(Roche MolecularBiochemicals)测定细胞存活率。再经过60分钟后，测定光密度(OD)(450nm与690nm)。
测定后，制备细胞层用于ELISA反应。抽吸培养基并将细胞在-20℃下固定在乙醇中60分钟。用PBS/Tween洗涤后，加入封闭溶液(PBS/5％FCS/Tween)并再次洗涤细胞层。在37℃下加入按1∶200稀释的抗乙酰化组蛋白H3或H4的抗体(兔多克隆IgG，Upstate Biotechnologie)，持续60分钟。使用山羊抗兔IgG(H+L)人IgG吸附的HRP偶联物(Dako)作为二次抗体(按1∶2000稀释)。将细胞洗涤3次并使过氧化物酶底物ABTS在37℃下反应30-60分钟。在405nm处测定OD。
计算扣除空白O.D.后的乙酰化百分比：
实施例序号化合物名称 细胞乙酰化 (PC3，1μM) [控制％]参比化合物4-乙酰氨基-N-(2-氨基-苯基)-苯甲酰胺 1521-1噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(1-甲基-丁基)-酰胺] 137.21-4噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(3-二丁氨基-丙基)-酰胺] 195.71-6噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(1-甲基-己基)-酰胺] 122.91-17噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(3-二甲氨基-2，2-二甲基丙基)-酰胺] 149.81-18噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-二甲氨基乙基)-酰胺] 233.91-19噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰 118.8胺]5-(丁基-甲基-酰胺)1-24噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-仲-丁酰胺 211.21-35噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-甲基-丁基)-酰胺] 135.41-44噻吩-2，5-二羧酸2-酰胺5-[(2-氨基-苯基)-酰胺] 185.62-1吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-[(2-二异丙氨基-乙基)-酰胺] 206.63-1吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-二异丙氨基-乙基)-酰胺] 244.83-5吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-二甲氨基-乙基)-酰胺] 154.63-93-{[6-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-丁酸乙酯 211.63-20吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(3-二丁氨基-丙基)-酰胺] 223.84-1N-(2-氨基-苯基)-N′-(2-二异丙氨基-乙基)-对苯二甲酰胺 399.3
通式I或A的新化合物及其药学上可接受的盐可以用作药物，即药物制剂形式。可以通过直肠或肠胃外以液体或固体形式给予这些药物制剂。在这方面，所有常用的给药剂型均应考虑，诸如，例如：片剂、胶囊、包衣片、糖浆剂、溶液、混悬剂、栓剂等。含有诸如稳定剂、增溶剂和缓冲剂这类常用于注射溶液的添加剂优选用作注射介质。
这类添加剂例如为：酒石酸盐和柠檬酸盐缓冲液、乙醇、配位剂(诸如乙二胺四乙酸及其非毒性的盐)、用于调节粘度的高分子聚合物(诸如液体聚乙二醇类)。用于注射溶液的液体载体物质必须是无菌的且优选将其配入安瓿。固体载体物质例如为淀粉、乳糖、甘露糖醇、甲基纤维素、滑石、高分散硅酸、高分子量脂肪酸(诸如硬脂酸)、明胶、琼脂、磷酸钙、硬脂酸镁、动物和植物油、固体高分子聚合物(诸如聚乙二醇类)；用于口服应用的合适的制剂还可以任选含有增香剂和增甜剂。
含有通式I或A的化合物或其药学上可接受的盐和治疗惰性载体的药剂也是本发明的目的，作为其生产方法，包括将一种或多种通式I或A的化合物和/或其药学上可接受的酸加成盐且如果需要还将一种或多种其它治疗上有价值的物质与一种或多种治疗惰性载体一起制成盖仑给药剂型。
本发明通式I或A的化合物及其药学上可接受的盐基于HDAC抑制和由此的抗增殖和诱导分化活性用于控制或预防疾病，所述的活性可以导致肿瘤细胞增殖抑制、诱导编程性细胞死亡并抑制侵害，这些化合物用于治疗人或动物中诸如诸如癌症这类疾病且用于生产相应的药物。
剂量取决于各种因素，诸如给药方式、种类、年龄和/或个体健康状况。每日给药剂量约为5-400mg/kg、优选约10-100mg/kg且可以单次给药或分配在几次给药过程中。
现在用下列实施例解释本发明，其中除非另有说明，按照下列步骤进行：
i)通过在真空中旋转蒸发进行蒸发并在通过过滤除去诸如干燥剂这类残余固体后完成后加工步骤；
(ii)在环境温度、即18-25℃下和惰性气体、诸如氩气或氮气环境中进行操作；
(iii)使用获自E.Merck，Darmstadt，Germany的Merck Kieselgel硅胶或Merck Lichroprep RP-18反相硅胶进行柱色谱法(通过急骤法)和高效液相色谱法(HPLC)；
(iv)产率仅用于解释目的且不必为可获得的最大值；
(v)使用Mettler SP62自动熔点仪、油浴设备或Kofler热板仪测定熔点；
(vi)通过核(一般为质子)磁共振(NMR)和质谱技术(使用APCI的Micromass Platform II型机或使用电雾化的Micromass Platform ZMD)证实通式I或A产物的结构；
(vii)一般不完全表征中间体且通过薄层色谱法估计纯度；
(viii)使用下列缩写：
DMF N，N-二甲基甲酰胺
DMSO 二甲亚砜
THF 四氢呋喃
MeOH 甲醇
HCl 盐酸
NaH 氢化钠
CH2Cl2 二氯甲烷
H2SO4 硫酸
sat. 饱和
sol. 溶液
h 小时
d 天
rt 室温
eq 当量
实施例1
通式I-A化合物的制备
步骤1：5-(2-叔-丁氧羰基氨基-苯基氨基甲酰基)-噻吩-2-甲酸甲酯
在氩气环境中将21.0g(129mmol)羰二咪唑加入到24.1g(129mmol)噻吩-2，5-二羧酸一甲酯在600ml THF中的溶液中。在rt下2h后，加入26.9g(129mmol)(2-氨基-苯基)-氨基甲酸叔丁酯并将该反应混合物在rt下再搅拌4h。蒸发溶剂并将残余物溶于500ml乙酸乙酯。用100ml饱和NaHCO3水溶液将有机相洗涤3次、用水洗涤2次并用硫酸钠干燥。将溶剂减少至80ml，此时开始结晶。12h后，过滤出晶体并用少量冰冷的叔丁基甲基醚和冷庚烷洗涤。在高度真空中干燥而得到38.9g(103.4mmol)5-(2-叔-丁氧羰基-氨基-苯基氨基甲酰基)-噻吩-2-甲酸甲酯，1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.45(s，9H)，3.87(s，3H)，7.14(m，1H)，7.22(m，1H)，7.46(m，1H)，7.59(m，1H)，7.89(m，1H)，7.96(m，1H)，8.73(br，1H)，10.02(s，1H)。
步骤2：5-(2-叔-丁氧羰基氨基-苯基氨基甲酰基)-噻吩-2-甲酸
在20分钟内向18.5g(50mmol)5-(2-叔-丁氧羰基氨基-苯基-氨基甲酰基)-噻吩-2-甲酸甲酯在500ml MeOH中的混悬液中加入5.6g(100mmol)氢氧化钾在100ml水中的溶液。将该反应混合物在室温下搅拌2d。蒸发MeOH并用乙酸乙酯将剩余水溶液提取3次且用3N HCl水溶液酸化。过滤出沉淀、用水洗涤并在45℃和高度真空中干燥而得到14.5g(40mmol)5-(2-叔-丁氧羰基氨基-苯基氨基甲酰基)-噻吩-2-甲酸，1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.45(s，9H)，7.14(m，1H)，7.22(m，1H)，7.46(m，1H)，7.59(m，1H)，7.90(m，2H)，8.72(s，1H)，9.99(s，1H)，13.54(s，1H)。
步骤3：(2-{[5-(1-甲基-丁基氨基甲酰基)-噻吩-2-羰基]-氨基}-苯基)-氨基甲酸叔-丁酯
向4.4g(12.1mmol)5-(2-叔-丁氧羰基氨基-苯基氨基甲酰基)-噻吩-2-甲酸在80ml THF中的溶液中加入2.2g(13.6mmol)羰二咪唑。将该反应混合物在45℃下搅拌1h且然后冷却至rt。在加入1.05g(12mmol)2-戊胺后，将该反应混合物在rt下保持12h。蒸发溶剂并将残余物溶于150ml CH2Cl2。各用150ml水将该溶液洗涤两次并用乙醚洗涤残余物而得到(2-{[5-(1-甲基-丁基氨基甲酰基)-噻吩-2-羰基]-氨基}-苯基)-氨基甲酸叔-丁酯，为白色固体，mp.183℃。
步骤4：噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(1-甲基-丁基)-酰胺](化合物1-1)
在冷却条件下向3.3g(7.65mmol)(2-{[5-(1-甲基-丁基氨基甲酰基)-噻吩-2-羰基]-氨基}-苯基)-氨基甲酸叔-丁酯在80ml MeOH中的溶液中加入16ml的4M HCl在二噁烷中的溶液。将该溶液在rt下搅拌3h后，蒸发溶剂。向残余物中加入50ml二氯甲烷和50ml的1M NaHCO3水溶液。在rt下搅拌30分钟后，过滤出沉淀、用水洗涤并干燥至得到2.3g(6.9mmol)噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(1-甲基-丁基)-酰胺]，mp.192℃，计算值MW(M+H)332.14，测定值(M+H)332.2；1H-NMR(400MHz，(CH3)2SO)：δ＝9.77(s，1H)，8.33(d，J＝8.6Hz，1H)，7.92(m，1H)，7.78(m，1H)，7.13(m，1H)，6.99(m，1H)，6.78(m，1H)，6.59(m，1H)，4.96(s，2H)，3.97(m，1H)，1.57-1.39(m，2H)，1.36-1.26(m，2H)，1.14(d，J＝6.6Hz，3H)，0.88(t，J＝7.1Hz，3H)。
如果制备下列化合物，那么按照与实施例1的步骤1-4类似的方式、使用合适的原料进行： 序号 名称 计算值 MW (M+H) 测定值 MW (M+H) 1-2 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-[(4-二乙氨基-1-甲基-丁 基)-酰胺]；H-NMR(400MHz， (CH3)2SO)：δ＝9.75(s，1H)，8.33(d， 403.22 403.1 J＝8.6Hz，1H)，7.91(m，1H)，7.78 (m，1H)，7.13(m，1H)，6.98(m， 1H)，6.78(m，1H)，6.59(m，1H)， 4.93(s，2H)，3.97(m，1H)， 2.46-2.33(m，6H)，1.53-1.38(m， 4H)，1.15(d，J＝6.6Hz，3H)，0.93 (t，J＝7.1Hz，6H)； 1-3 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-[(3-二乙氨基-丙基)-酰胺]； 1H-NMR(400MHz，(CH3)2SO)：δ＝ 9.76(s，1H)，8.65(t，J＝5.05Hz， 1H)，7.92(m，1H)，7.71(m，1H)， 7.13(m，1H)，6.99(m，1H)，6.78 (m，1H)，6.59(m，1H)，4.93(s，2H)， 3.27(m，2H)，2.46(q，J＝7.07HZ， 4H)，2.43(t，J＝7.83，2H)，1.64(m， 2H)，0.95(t，J＝7.33Hz，6H) 375.19 375.1 1-4 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-[(3-二丁氨基-丙基)-酰胺] 431.25 431.1 1-5 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-[(3-二甲氨基丙基)-酰胺] 347.15 347.3 1-6 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-[(1-甲基-己基)-酰胺]； 1H-NMR(400MHz，(CH3)2SO)：δ＝ 9.75(s，1H)，8.31(d，J＝8.6Hz， 1H)，7.91(m，1H)，7.78(m，1H)， 7.14(m，1H)，6.98(m，1H)，6.78 (m，1H)，6.59(m，1H)，4.93(s，2H)， 3.95(m，1H)，1.57-1.41(m，2H)， 1.34-1.22(m，6H)，1.14(d，J＝6.6 Hz，3H)，0.86(t，J＝6.8Hz，3H) 360.17 360.3 1-7 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-环庚酰胺 358.16 358.2 1-8 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-[(3-二异丙氨基乙基)-酰 胺] 389.20 389.3 1-9 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-[(3-甲氧基-丙基)-酰胺] 334.12 334.2 1-10 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-乙酰氨基乙 基)-酰胺]5-[(2-氨基-己基)-酰胺] 347.12 347.2 1-11 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-[(2-乙基-己基)-酰胺] 374.19 374.2 1-12 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-环辛酰胺 372.17 372.2 1-13 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-[(1，5-二甲基-己基)-酰胺] 374.19 374.2 1-14 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-环戊酰胺 330.13 330.2 1-15 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-[(2-甲氧基-1-甲基-乙基)- 酰胺] 334.12 334.2 1-16 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-环丙基甲基-酰胺 316.11 316.2 1-17 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-[(3-二甲氨基-2，2-二甲基丙 基)-酰胺] 375.19 375.2 1-18 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-[(2-二甲氨基乙基)-酰胺]； 1H-NMR(400MHz，(CH3)2SO)：δ＝ 9.84(s，1H)，8.84(t，J＝5.6Hz， 1H)，7.96(m，1H)，7.74(m，1H)， 7.12(m，1H)，6.99(m，1H)，6.78 (m，1H)，6.59(m，1H)，4.96(s，2H)， 3.57(m，2H)，3.19(m，2H)，2.80(s， 6H)； 333.14 333.2 1-19 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-(丁基-甲基-酰胺) 332.14 332.3 1-20 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-戊酰胺 332.14 332.2 1-21 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-丁酰胺 318.13 318.2 1-22 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-{[3-(2-氧代-吡咯烷-1-基)- 丙基]-酰胺} 387.15 387.1 1-23 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-[(3-乙氧基-丙基)-酰胺] 348.14 348.2 1-24 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-仲-丁酰胺；1H-NMR(400 MHz，(CH3)2SO)：δ＝9.77(s，1H)， 318.13 318.2 8.32(d，J＝8.1Hz，1H)，7.92(m， 1H)，7.80(m，1H)，7.13(m，1H)， 6.98(m，1H)，6.78(m，1H)，6.59 (m，1H)，4.94(s，2H)，3.87(m，1H)， 1.59-1.44(m，2H)，1.15(d，J＝ 6.6Hz，3H)，0.87(t，J＝7.3Hz，3H) 1-25 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-庚酰胺 360.17 360.2 1-26 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-壬酰胺 388.21 388.3 1-27 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-辛酰胺 374.19 374.3 1-28 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-(1-甲基-庚基)-酰胺] 374.19 374.3 1-29 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-(异丁酰胺) 318.13 318.2 1-30 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-丙-2-炔基-酰胺 300.08 300.1 1-31 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-丙酰胺 304.11 304.2 1-32 噻吩-2，5-二羧酸2-烯丙基酰胺 5-[(2-氨基-苯基)-酰胺] 302.10 302.2 1-33 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-环丁酰胺 316.11 316.2 1-34 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-二乙酰胺 318.13 318.2 1-35 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-[(2-甲基-丁基)-酰胺]； 1H-NMR(400MHz，(CH3)2SO)：δ＝ 9.79(s，1H)，8.61(t，J＝5.8Hz，1H)， 7.93(m，1H)，7.77(m，1H)，7.12 (m，1H)，6.99(m，1H)，6.78(m， 1H)，6.59(m，1H)，4.95(s，2H)， 3.21-3.15(m，1H)，3.08-3.02(m， 1H)，1.67-1.57(m，1H)， 1.46-1.36(m，1H)，1.17-1.07(m， 1H)，0.89(t，J＝7.3Hz，3H)，0.86(d，J ＝6.6Hz，3H) 332.14 332.2 1-36 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-(甲基-丙-2-炔基-酰胺) 314.10 314.1 1-37 噻吩-2，5-二羧酸2-(烯丙基-甲基- 酰胺)5-[(2-氨基-苯基)-酰胺] 316.11 316.3 1-38 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-[(2-二甲氨基乙基)-乙基- 酰胺] 361.17 361.2 1-39 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-二丙酰胺 346.16 346.2 1-40 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-(甲基-戊基-酰胺) 346.16 346.2 1-41 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-[(2-二乙氨基乙基)-甲基- 酰胺] 375.19 375.3 1-42 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-[双-(2-甲氧基-乙基)-酰胺] 378.15 378.1 1-43 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)- 酰胺]5-(环丙基甲基-丙基-酰胺) 358.16 358.2 1-44 噻吩-2，5-二羧酸2-酰胺5-[(2-氨基 -苯基)-酰胺] 262.07 262.2
实施例2
通式I-B化合物的制备
步骤1：6-(2-二异丙氨基-乙基氨基甲酰基)-烟酸甲酯
将1.1g(5mmol)5-甲氧羰基-吡啶-2-甲酸钾、0.9ml(12mmol)亚硫酰氯和0.1ml DMF在5ml二氯甲烷中的混悬液在回流状态下加热2h。向该反应混合物中加入5ml CH2Cl2并蒸发溶剂。将该步骤重复3次。将残余物悬浮于5ml CH2Cl2中并在冰冷却下加入9.95ml(5.5mmol)2-二乙丙氨基乙胺、0.97ml(7mmol)三乙胺、0.1ml DMF在5ml CH2Cl2中的溶液。在rt下搅拌12h后，用水、5％柠檬酸和NaHCO3水溶液提取有机相并用硫酸镁干燥。在蒸发溶剂后，使残余物进行根据硅胶色谱(20％MeOH和1％在乙酸乙酯中的三乙胺)而得到1.15g(3.7mmol)6-(2-二异丙氨基-乙基氨基甲酰基)-烟酸甲酯；确切的计算值MW[M+H]：308.20；MW测定值[M+H]：308.20。
步骤2：6-(2-二异丙氨基-乙基氨基甲酰基)-烟酸
向1100mg(3.6mmol)6-(2-二异丙氨基-乙基氨基甲酰基)-烟酸甲酯在10ml THF和3.0ml MeOH中的溶液中加入3.6ml 2N的NaOH水溶液。在rt下4h后，蒸发溶剂。用1N HCl酸化残余物、过滤出来并用水洗涤而得到936mg(3.2mmol)6-(2-二异丙氨基-乙基氨基甲酰基)-烟酸；确切的MW[M+H]计算值：294.18；MW测定值[M+H]：209.15。
步骤3：吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-[(2-二异丙氨基-乙基)-酰胺]化合物(2-1)
将936mg(3.2mmol)6-(2-二异丙氨基-乙基氨基甲酰基)-烟酸和518mg(3.2mmol)羰二咪唑在8ml THF中的溶液在45℃下加热1h且然后冷却至rt。加入1.38g(12.8mmol)苯二胺和0.5ml(6.4mmol)三氟乙酸并在rt下搅拌20h。蒸发溶剂并向残余物中加入氨水溶液。用CH2Cl2提取水相并从合并的有机相中蒸发溶剂。使残余物进行硅胶色谱(乙酸乙酯、然后20％MeOH和1％在乙酸乙酯中的三乙胺)而得到404mg(1.06mmol)吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]2-[(2-二异丙氨基-乙基)-酰胺]；确切的MW[M+H]计算值：384.24；MW测定值[M+H]：384.23。
按照实施例2步骤1-3中所述的方法制备了下列化合物。 序号 名称 计算值 MW(M+H) 测定值 MW(M+H) 2-1 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-[(2-二异丙氨基-乙 基)-酰胺]；1H-NMR(400MHz， (CH3)2SO)：δ＝9.93(s，1H)，9.16 (m，1H)，8.84(t，J＝5.8Hz，1H)， 8.50(m，1H)，8.15(m，1H)，7.17 (m，1H)，6.99(m，1H)，6.78(m， 1H)，6.59(m，1H)，5.2(s，2H)， 3.29(m，2H)，3.00(m，2H)，2.58(t， J＝7.3Hz，2H)，0.99(d，J＝6.6Hz， 12H) 384.24 384.2 2-2 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-己基酰胺 341.20 341.2 2-3 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-(丁基-甲基-酰胺) 327.18 327.2 2-4 吡啶-2，5-二羧酸2-烯丙基酰胺 5-[(2-氨基-苯基)-酰胺] 297.14 297.2 2-5 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 367.21 367.2 基)-酰胺]2-环辛酰胺 2-6 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-[(3-二丁氨基-丙基)- 酰胺] 426.29 426.3 2-7 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-[(2-甲氧基-乙基)-酰 胺] 315.15 315.1 2-8 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-[(3-丁氧基-丙基)-酰 胺] 371.21 371.3 2-9 {[5-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-吡 啶-2-羰基]-氨基}-乙酸甲酯 329.12 329.1 2-10 3-{[5-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)- 吡啶-2-羰基]-氨基}-丙酸叔丁酯 385.19 385.3 2-11 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-[(2，2，3，3，3-五氟-丙 基)-酰胺] 389.10 389.1 2-12 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-[(2，2，3，3，4，4，4-七氟- 丁基)-酰胺] 439.10 439.1 2-13 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-[(1，5-二甲基-己基)- 酰胺] 369.23 369.3 2-14 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-二丙酰胺 341.20 341.3 2-15 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-[(1-甲基-己基)-酰胺] 355.21 355.4 2-16 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-(甲基-戊基-酰胺) 341.20 341.2 2-17 吡啶-2，5-二羧酸2-(烯丙基-甲基- 酰胺)5-[(2-氨基-苯基)-酰胺] 311.15 311.3 2-18 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-[双-(2-甲氧基-乙基)- 酰胺] 373.19 373.3 2-19 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-[(2-二乙氨基乙基)-甲 基-酰胺] 370.22 370.4 2-20 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-乙酰氨基 342.16 342.1 乙基)-酰胺]5-[(2-氨基-苯基)-酰 胺] 2-21 吡啶-2，5-二羧酸2-(烯丙基-环戊 基-酰胺)5-[(2-氨基-苯基)-酰胺] 365.45 365.3 2-22 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-(环丙基甲基-丙基-酰 胺) 353.44 353.3 2-23 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-仲-丁酰胺 313.38 313.23 2-24 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-[(2-二甲氨基-乙基)- 酰胺] 328.39 328.16
实施例3
通式I-C化合物的制备
按照与实施例1中所述类似的方式并使用如文献中所述的公知方法(例如标准教科书，诸如Houben-Weyl，″Methoden der Organischen Chemie，Georg Thieme Verlag′，Stuttgart；Organic Reactions，John Wiley & Sons，Inc.，New York)制备下列化合物： 序号 名称 计算值 MW(M+H) 测定值 MW(M+H) 3-1 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-[(2-二异丙氨基-乙 基)-酰胺]；1H-NMR(400MHz， (CH3)2SO)：δ＝10.1(s，1H)，9.09 (m，1H)，8.77(t，J＝5.3Hz，1H)， 8.41(m，1H)，8.22(m，1H)，7.47 (m，1H)，6.97(m，1H)，6.83(m， 1H)，6.65(m，1H)，4.92(s，2H)， 3.27-3.23(m，2H)，2.99(m，2H)， 2.56(t，J＝7.3Hz，2H)，0.99(d， J＝6.6Hz，12H)； 384.24 384.2 3-2 吡啶-2，5-二羧酸5-烯丙基酰胺 2-[(2-氨基-苯基)-酰胺] 297.14 297.2 3-3 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 341.20 341.3基)-酰胺]5-己基酰胺 3-4吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-环辛酰胺 367.21 367.3 3-5吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-二甲氨基-乙基)-酰胺]；1H-NMR(400MHz，(CH3)2SO)：δ＝10.11(s，1H)，9.09(m，1H)，8.77(t，J＝5.3Hz，1H)，8.41(m，1H)，8.22(m，1H)，7.48(m，1H)，6.97(m，1H)，6.83(m，1H)，6.66(m，1H)，4.91(s，2H)，3.41(m，2H)，2.44(t，J＝6.8Hz，2H)，2.20(s，6H) 328.18 328.2 3-6吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-乙酰氨基-乙基)-酰胺]2-[(2-氨基-苯基)-酰胺] 342.16 342.2 3-7吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2，2，3，3，3-五氟-丙基)-酰胺] 389.10 389.1 3-8吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2，2，3，3，4，4，4-七氟-丁基)-酰胺] 439.10 439.1 3-93-{[6-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-丁酸乙酯 371.17 371.2 3-10吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-羟基-丙基)-酰胺] 315.15 315.2 3-112-{[6-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-3-甲基-丁酸甲酯 371.17 371.2 3-123-{[6-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-丙酸乙酯 357.16 357.1 3-13{[6-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-乙酸甲酯 329.12 329.1 3-14吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯基)-酰胺]5-[(2-甲氧基-乙基)-酰胺] 315.15 315.1 3-15 2-{[6-(2-氨基-苯基氨基甲酰 基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-4-甲基 硫烷基-丁酸甲酯 403.14 403.1 3-16 3-{[6-(2-氨基-苯基氨基甲酰 基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-丙酸叔 丁酯 385.19 385.3 3-17 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-[(2，3-二羟基-丙基)- 酰胺] 331.14 331.2 3-18 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-[(3-丁氧基-丙基)-酰 胺] 371.21 371.3 3-19 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-[(4-二乙氨基-1-甲 基-丁基)-酰胺] 398.26 398.3 3-20 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-[(3-二丁氨基-丙基)- 酰胺] 426.29 426.3 3-21 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-仲-丁酰胺 313.17 313.2 3-22 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-[(1，5-二甲基-己基)- 酰胺] 369.23 369.3 3-23 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-(丁基-甲基-酰胺) 327.18 327.3 3-24 吡啶-2，5-二羧酸5-(烯丙基-甲 基-酰胺)2-[(2-氨基-苯基)-酰胺] 311.15 311.3 3-25 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-(甲基-丙-2-炔基-酰 胺) 309.14 309.1 3-26 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-[双-(2-甲氧基乙基)- 酰胺] 373.19 373.2 3-27 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-(甲基-戊基-酰胺) 341.20 341.2 3-28 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-(环丙基甲基-丙基- 酰胺) 353.20 353.2 3-29 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-二丙酰胺 341.20 341.3 3-30 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-[(2-二乙氨基乙基)- 甲基-酰胺] 370.22 370.4 3-31 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-[(1-甲基-己基)-酰 胺] 355.21 355.3 3-32 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-[(2-羟基-乙基)-酰 胺] 301.32 301.13 3-33 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-{[2-(2-羟基-乙氧 基)-乙基]-酰胺} 345.38 345.13 3-34 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-[(1-环己基甲基-2- 羟基-乙基)-酰胺] 397.5 397.15 3-35 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-[(4-羟基-丁基)-酰 胺] 329.38 329.11 3-36 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-[(1-羟甲基-2-甲基- 丁基)-酰胺] 357.43 357.15 3-37 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-[(4-羟基-环己基)-酰 胺] 355.42 355.13 3-38 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-({2-[双-(2-羟基-乙 基)-氨基]-乙基}-酰胺) 388.45 388.2 3-39 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-[(2-二甲氨基-乙基)- 乙基-酰胺] 356.45 356.3
实施例4
通式I-D化合物的制备
按照与实施例1中所述类似的方式制备通式I-D的对苯二甲酰胺衍生物： 序号 名称 计算值 MW(M+H) 测定值 MW(M+H) 4-1 N-(2-氨基-苯基)-N′-(2-二异 丙氨基-乙基)-对苯二甲酰 胺；1H-NMR(400MHz， (CH3)2SO)：δ＝9.77(s，1H)， 8.54(t，J＝5.3Hz，1H)，8.06 (m，1H)，7.95(m，2H)，7.18 (m，1H)，6.99(m，1H)，6.79 (m，1H)，6.60(m，1H)，4.94(s， 2H)，3.23(m，2H)，2.98(m， 2H)，2.54(t，J＝7.3Hz，2H)， 0.99(d，J＝6.6Hz，12H) 383.24 383.3 4-2 N-(2-氨基-苯基)-N′-(3-二丁 氨基-丙基)-对苯二甲酰胺 425.29 425.3 4-3 N-(2-氨基-苯基)-N′-(4-二乙 氨基-1-甲基-丁基)-对苯二 甲酰胺 397.26 397.2 4-4 N-(2-氨基-苯基)-N′-(3-二乙 氨基-丙基)-对苯二甲酰胺 369.23 369.3 4-5 N-(2-氨基-苯基)-N′-(2-甲氧 基-1-甲基-乙基)-对苯二甲 酰胺 328.17 328.2 4-6 N-(2-氨基-苯基)-N′-环丙基 甲基-对苯二甲酰胺 310.16 310.2 4-7 N-(2-氨基-苯基)-N′-(3-乙氧 基-丙基)-对苯二甲酰胺 342.18 342.3 4-8 N-(2-氨基-苯基)-N′-(2-二甲 氨基-乙基)-对苯二甲酰胺 327.18 327.3 4-9 N-(2-氨基-苯基)-N′-[3-(2-氧 代-吡咯烷-1-基)-丙基]-对苯 二甲酰胺 381.19 381.3 4-10 N-(2-氨基-苯基)-N′-(3-二甲 氨基-2，2-二甲基-丙基)-对苯 二甲酰胺 369.23 369.3 4-11 N-烯丙基-N′-(2-氨基-苯基)- 对苯二甲酰胺 296.14 296.2 4-12 N-(2-氨基-苯基)-N′-丁基-对 312.17 312.2 苯二甲酰胺 4-13 N-(2-氨基-苯基)-N′-丁基-N′- 甲基-对苯二甲酰胺 326.19 326.3
实施例5
通式I-E化合物的制备
按照与实施例1步骤1-4中所述类似的方式并使用相应的原料制备下列化合物： 序号 名称 计算值 MW(M+H) 测定值 MW(M+H) 5-1 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-(甲氧基-酰胺) 292.08 292.2 5-2 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-(乙氧基-酰胺) 306.09 306.1 5-3 噻吩-2，5-二羧酸2-(烯丙氧基- 酰胺)5-[(2-氨基-苯基)-酰胺]； 1H-NMR(400MHz， (CH3)2SO)：δ＝11.90(s，1H)， 9.82(m，1H)，7.93(m，1H)， 7.78(m，1H)，7.65(m，1H)， 7.12(m，1H)，6.99(m，1H)， 6.78(m，1H)，6.59(m，1H)， 6.05-5.95(m，1H)，5.39-5.35(m， 1H)，5.30-5.28(m，1H)，4.95(s， 2H)，4.42(d，J＝6.1Hz，1H) 318.09 318.2 5-4 噻吩-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-(苯氧基-酰胺) 354.09 354.2 5-5 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-羟基酰胺； 1H-NMR(400MHz， (CH3)2SO)：δ＝11.61(s，1H)， 10.12(s，1H)，9.36(s，1H)， 9.02(m，1H)，8.35(m，1H)， 8.21(m，1H)，7.47(m，1H)， 6.97(m，1H)，6.83(m，1H)， 6.66(m，1H)，4.94(s，2H) 273.10 273.2 5-6 吡啶-2，5-二羧酸5-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]2-羟基酰胺 273.10 273.1 5-7 吡啶-2，6-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]6-羟基酰胺 273.10 273.1 5-8 吡啶-2，4-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]4-羟基酰胺 273.10 273.1 5-9 吡啶-2，5-二羧酸2-[(2-氨基-苯 基)-酰胺]5-(叔-丁氧基-酰胺) 334.41 334.2
实施例6
a)片剂(湿法制粒)：
项目 组分 mg/片
1. 通式I或A的 5 25 100 500
化合物
2. 无水乳糖DTG 125 105 30 150
3. Sta-Rx1500 6 6 6 30
4. 微晶纤维素 30 30 30 150
5. 硬脂酸镁 1 1 1 1
总计 167 167 167 831
制备步骤：
1.混合第1、2、3和4项并使用纯水制粒。
2.在50℃下干燥颗粒。
3.将颗粒通过合适的研磨设备。
4.加入第5项并混合3分钟；在合适的压片机上压制。
b)胶囊剂：
项目 组分 mg/粒胶囊
1. 通式I或A的化合 5 25 100 500
物
2. 无水乳糖 159 123 148 ---
3. 玉米淀粉 25 35 40 70
4. 滑石 10 15 10 25
5. 硬脂酸镁 1 2 2 5
总计 200 200 300 600
制备步骤
1.在合适的混合器中将第1、2和3项混合30分钟。
2.加入第4和5项并混合3分钟。
3.填充入合适的胶囊。
可以通过下列试验进一步评价本发明化合物的作用：
方法
给年龄为8-10周的雄性NMRI nu/nu-小鼠(n＝15/组)皮下注射5*106PC-3前列腺癌细胞。在第10天时，将带有约150mm3肿瘤体积的动物随机分入治疗组。将测试化合物作为在7,5％明胶-0,22％NaCl中的微混悬液-含有基于实际体重的10ml/kg施用体积的微混悬液给药。从约第10天开始到第27天进行每天一次、基于每周5-7次治疗方案的口服治疗。
根据下列等式确定肿瘤体积：
肿瘤体积＝1/2ab2，其中″a″和″b″分别为肿瘤的长和短直径。
参考文献目录
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