一种从花生根提取液中分离浓缩白藜芦醇的方法.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201610152119.X (22)申请日 2016.03.17 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 105669386 A (43)申请公布日 2016.06.15 (73)专利权人 河南省农业科学院 地址 450002 河南省郑州市金水区花园路 116号 (72)发明人 芦鑫张丽霞宋国辉孙强 黄纪念高锦鸿王静博 (74)专利代理机构 郑州联科专利事务所(普通 合伙) 41104 代理人 时立新杨海霞 (51)Int.Cl. C07C 37/68(2006.01)。

2、 C07C 37/82(2006.01) C07C 39/21(2006.01) (56)对比文件 CN 1903815 A,2007.01.31, CN 101597214 A,2009.12.09, 刘志昌等.膜分离技术纯化白藜芦醇的研 究. 时珍国医国药 .2009,第20卷(第1期), 黄纪念.超声提取花生根中白藜芦醇的工艺 研究. 中国食物与营养 .2010, (第10期), 蒋明廉等.膜分离法分离虎杖中白藜芦醇的 工艺研究与含量测定. 华夏医学 .2008,第21卷 (第4期), 审查员 承倩怡 (54)发明名称 一种从花生根提取液中分离浓缩白藜芦醇 的方法 (57)摘要 本发明属。

3、于农副产品深加工技术领域， 具体 涉及一种从花生根提取液中分离浓缩白藜芦醇 的方法， 具体为： 以花生根为原料， 粉碎除杂， 采 用醇溶液提取后， 提取液经过由超滤和纳滤组成 的膜分离系统进行分离浓缩， 再经过反渗透进一 步浓缩， 浓缩液经真空干燥后获得白藜芦醇。 相 较于传统的柱层析和大孔树脂吸附法， 本发明方 法具有产品纯度高、 处理量大、 操作简便、 成本低 等优点。 本发明方法为花生根中白藜芦醇的工业 化制备提供了可能， 这对于花生根的提质增效开 发开辟了新的途径， 也增加了天然白藜芦醇来 源， 具有积极经济价值。 权利要求书1页 说明书4页 附图3页 CN 105669386 B 2。

4、018.08.07 CN 105669386 B 1.一种从花生根提取液中分离浓缩白藜芦醇的方法， 其特征在于， 包括如下步骤： 1） 花生根预处理： 取新收获的花生根， 洗净、 干燥后， 用粉碎机粉碎至4080目， 装袋封口， 置于避光处， 备用； 2） 从花生根中提取白藜芦醇： 将步骤1） 粉碎后的花生根按料液比1kg： 820L加入醇溶液中， 然后转入超声波提取仪 中， 设定温度为3050， 先采用400900rpm的转速搅拌2060min， 再采用超声波提取 30150 min； 提取液过200400目筛， 分别收集滤液与滤渣， 将滤渣装入挤压机中， 挤压获 得的提取液再次过20040。

5、0目筛， 合并滤液， 备用； 3） 白藜芦醇的分离浓缩： 将步骤2） 获得的滤液采用超滤膜进行超滤分离， 收集超滤透过液； 将超滤透过液采用 纳滤膜进行分离浓缩， 收集纳滤透过液； 将纳滤透过液采用反渗透膜进一步浓缩， 浓缩至原 纳滤透过液体积的520%时， 结束反渗透， 所得浓缩液真空干燥后即得白藜芦醇； 步骤2） 中的超声波提取条件如下： 超声波频率为20kHZ、 59kHZ或其组合； 超声方式为间 歇式， 每次超声515min后， 暂停515min； 超声波强度为50300W/kg料液。 2.如权利要求1所述从花生根提取液中分离浓缩白藜芦醇的方法， 其特征在于， 步骤2） 中所述的醇溶液。

6、为甲醇溶液、 乙醇溶液或甲醇与乙醇的混合溶液， 醇溶液的浓度为40 90v%。 3.如权利要求1所述从花生根提取液中分离浓缩白藜芦醇的方法， 其特征在于， 步骤3） 中所述的超滤膜、 纳滤膜和反渗透膜为平膜或卷式膜； 其中超滤膜采用UE系列 的超滤膜， 截留分子量为100050000， 操作压力为0.53MPa； 纳滤膜采用NF系列的纳滤 膜， 对硫酸镁截留率大于90.0%， 操作压力为1.04.0MPa； 反渗透膜采用RO系列的反渗透 膜， 对氯化钠截留率大于99.00%， 操作压力为1.06.0 MPa。 权利要求书 1/1 页 2 CN 105669386 B 2 一种从花生根提取液中分。

7、离浓缩白藜芦醇的方法 技术领域 0001 本发明属于农副产品深加工与天然产物提取技术领域， 具体涉及一种从花生根提 取液中分离浓缩白藜芦醇的方法， 该方法通过超声波辅助提取、 超滤、 纳滤、 反渗透、 干燥等 工序制备获得白藜芦醇。 背景技术 0002 我国是花生的生产大国， 2015年花生产量为1700万吨， 居世界首位。 由于国内食用 油消费需求旺盛以及国家粮油供给安全需要， 国内花生产量还将持续上涨， 带动整个花生 产业发展。 花生在加工过程中会产生花生根、 花生茎、 花生叶、 花生壳等副产物， 由于加工技 术落后， 花生加工副产物利用率低， 大部分经过简单加工， 作为饲料、 燃料使用，。

8、 造成资源浪 费且污染环境。 0003 研究表明， 花生根中含有白藜芦醇。 白藜芦醇 （又名芪三酚） ， 化学名为3,5,4三 羟基二苯乙烯 （3,5,4trihydrolystilbene） ， 是含有芪类结构的非黄酮多酚类化合物， 具 有抑制癌细胞、 降低血脂、 预防心血管疾病、 抗氧化、 延缓衰老等有益功能， 因此具有极高的 开发价值。 相比于从虎杖、 桑葚、 买麻藤、 野鲜槐等植物中提取分离白藜芦醇， 从花生根茎中 提取白藜芦醇具有成本低、 原料充足、 不与药争源、 附加值高等优点， 更具产业化开发潜力。 0004 目前， 从花生根中分离纯化白藜芦醇主要采用柱层析、 大孔树脂吸附法。 。

9、柱层析分 离白藜芦醇虽然分离效果好， 但成本高、 处理量小且使用有机溶剂； 大孔树脂吸附虽然成本 低、 处理量大， 但白藜芦醇损失大且不能连续生产。 因此， 有必要开发新的分离纯化方法。 发明内容 0005 本发明目的在于克服现有技术缺陷， 提供一种从花生根提取液中分离浓缩白藜芦 醇的方法， 该方法具有生产效率高、 工艺简单、 条件温和、 绿色节能、 易于控制等优点。 0006 为实现上述目的， 本发明采用以下技术方案： 0007 一种从花生根提取液中分离浓缩白藜芦醇的方法， 其包括如下步骤： 0008 1） 花生根预处理： 0009 取新收获的花生根， 用水清洗干净以除去泥沙， 摊开， 采用。

10、鼓风干燥后， 用粉碎机 粉碎至4080目， 装袋封口， 置于避光处， 备用； 0010 其中， 清洗花生根的水可以是自来水、 蒸馏水、 去离子水。 鼓风干燥的条件为： 温度 4060， 时间1020h。 存放粉碎后花生根的袋子为真空袋。 0011 2） 从花生根中提取白藜芦醇： 0012 将步骤1） 粉碎后的花生根按料液比料液比1kg： 820L （m/V） 加入醇溶液中， 然后 转入超声波提取仪中， 设定温度为3050， 先采用400900rpm的转速搅拌2060min， 再 采用超声波提取30150 min； 提取液过200400目筛， 分别收集滤液与滤渣， 将滤渣装入 挤压机中， 挤压获。

11、得的提取液再次过200400目筛， 合并滤液， 备用； 0013 其中， 用于挤压滤渣的挤压机可以为液压挤压机， 于1030MPa挤压2040min。 存 说明书 1/4 页 3 CN 105669386 B 3 放滤液的容器材质可以为玻璃、 金属、 塑料， 但必须不透光， 滤液存放于阴凉避光处。 0014 3） 白藜芦醇的分离浓缩： 0015 将步骤2） 获得的滤液采用超滤膜进行超滤分离 （超滤分离至原滤液体积的520% 时， 结束超滤） ， 收集超滤透过液； 将超滤透过液采用纳滤膜进行分离浓缩 （浓缩至原超滤透 过液体积的520%时， 结束纳滤） ， 收集纳滤透过液； 将纳滤透过液采用反渗。

12、透膜进一步浓 缩， 浓缩至原纳滤透过液体积的520%时， 结束反渗透， 所得浓缩液真空干燥后即得白藜芦 醇。 其中， 真空干燥的条件为： 压力-0.08 -0.10MPa， 温度3060， 时间416h。 0016 具体的， 步骤2） 中所述的醇溶液可以是甲醇溶液、 乙醇溶液或甲醇与乙醇的混合 溶液， 醇溶液的浓度为4090v%。 0017 具体的， 步骤2） 中的超声波提取条件如下： 超声波频率为20kHZ、 40kHZ、 59kHZ或其 组合； 超声方式为间歇式， 每次超声515min后， 暂停515min； 超声波强度为50300W/kg 料液。 0018 具体的， 步骤3） 中所述的超。

13、滤膜、 纳滤膜和反渗透膜可为平膜或卷式膜； 其中， 超 滤膜采用UE系列的超滤膜， 截留分子量为100050000， 操作压力为0.53MPa； 纳滤膜采用 NF系列的纳滤膜， 对硫酸镁截留率大于90.0%， 操作压力为1.04.0MPa； 反渗透膜采用RO系 列的反渗透膜， 对氯化钠截留率大于99.00%， 操作压力为1.06.0 MPa。 0019 膜分离是20世纪新兴的分离技术， 由于兼有分离、 浓缩、 纯化和精制的功能， 又有 高效、 节能、 环保、 分子级过滤及过滤过程简单、 易于控制和放大等特征， 目前已广泛应用于 食品、 医药、 生物、 化学等多个领域， 产生了巨大的经济效益和社。

14、会效益。 根据膜孔径尺寸， 膜分离可分为微滤、 超滤、 纳滤与反渗透， 其中超滤截留尺寸在120nm的溶质， 常用于溶液 中蛋白、 多糖等大分子的除去、 大小分子间分离及大分子间的分级； 纳滤截留尺寸1nm以上 的溶质， 可以除去溶液中小分子或对小分子进行分级； 反渗透可以除去尺寸0.11nm的溶 质， 主要可以除去盐类。 本发明中将超滤、 纳滤和反渗透膜分离技术有机组合制备白藜芦醇 粗品， 在提高样品处理量和生产效率的同时， 简化了生产工艺， 降低了生产成本和减少环境 污染， 为花生根的高效增值的资源化利用提供可能。 0020 与现有技术相比， 本发明方法具有的优点与有益效果如下： 0021。

15、 1） 采用膜分离对芝麻蛋白进行分级， 高效节能、 处理量大且成本低； 同时， 截留液 中的花生根糖类、 黄酮等物质也可以回收利用， 提高原料利用率； 0022 2） 提取条件温和， 使用的化学试剂毒腐性小且易于回收处理， 减少了设备防腐和 治污处理成本； 0023 3） 制备的白藜芦醇品质好， 不但可以进一步纯化生产相关药物， 也可以作为原料 应用于食品、 化妆品等行业。 附图说明 0024 图1为实施例1中所得花生根提取液的高效液相色谱图， 图中峰3为白藜芦醇； 0025 图2为实施例1制备所得白藜芦醇粗品的高效液相色谱图， 图中峰2为白藜芦醇； 0026 图3为白藜芦醇标准品的高效液相色。

16、谱图。 具体实施方式 说明书 2/4 页 4 CN 105669386 B 4 0027 以下结合实施例对本发明的技术方案作进一步地详细介绍， 但本发明的保护范围 并不局限于此。 0028 实施例1 0029 一种从花生根提取液中分离浓缩白藜芦醇的方法， 其包括如下步骤： 0030 1） 花生根预处理： 0031 取新收获的花生根10 kg， 用自来水清洗除去泥沙， 摊开放入鼓风干燥箱中， 花生 根厚度为10cm， 于45干燥16h， 将干燥后的花生根用粉碎机粉碎至60目， 装入真空袋中， 密 封置于避光处， 备用； 0032 2） 从花生根中提取白藜芦醇： 0033 取1kg步骤1） 粉碎后。

17、的花生根， 按料液比1kg： 10L （m/V） 加入70v%甲醇溶液中， 然后 转入超声波提取仪中， 设定温度为40， 先采用500rpm的转速搅拌30min， 再采用功率为 1200W、 40kHZ的超声波间歇超声处理100min， 每次超声作用5min， 暂停5min。 将提取液过200 目筛， 分别收集滤液与滤渣； 将滤渣装入液压挤压机中， 于10MPa挤压40min， 挤压获得的提 取液再次过200目筛， 合并滤液即为花生根提取液 （其高效液相色谱图见图1） ， 备用； 0034 3） 白藜芦醇的分离浓缩： 0035 将步骤2） 获得的滤液采用普通平膜型UE010超滤膜进行超滤分离 。

18、（采用的超滤膜 截留分子量为10,000， 操作压力为1MPa， 浓缩至原滤液体积的10%时， 结束超滤） ， 收集超滤 透过液。 将超滤透过液采用平膜型NF3纳滤膜进行分离浓缩 （NF3纳滤膜对硫酸镁截留率大 于90.0%， 操作压力为3MPa， 浓缩至原超滤透过液体积的10%时， 结束纳滤） ， 收集纳滤透过 液。 将纳滤透过液采用平膜型RO2反渗透膜 （对氯化钠截留率大于99.00%） 进一步浓缩， 操作 压力为4MPa， 浓缩至原纳滤透过液体积的10%时， 结束反渗透， 将所得浓缩液放入真空干燥 箱， 于-0.10MPa、 40干燥10h获得0.3768g白藜芦醇粗品。 所得白藜芦醇粗。

19、品的高效液相色 谱图见图2。 0036 采用高效液相色谱法测定白藜芦醇标准品含量， 具体为： 采用C18反相柱 （250 4.6mm, i.d., 5 m） 进行检测， 甲醇水乙酸 （27:70:3, v/v/v） 作为流动相， 并采用0.45 m膜进行过滤， 采用303nm进行检测， 流速为1.0mL/min, 进样量为10 L， 柱温设定为30。 白藜芦醇标准品在此条件下的保留时间和峰型见图3。 由图1和2 可知， 经过膜分离可以有 效除去提取液中的杂质。 0037 实施例2 0038 一种从花生根提取液中分离浓缩白藜芦醇的方法， 其包括如下步骤： 0039 1） 花生根预处理： 0040。

20、 取新收获的花生根20kg， 用去离子水清洗除去泥沙， 摊开放入鼓风干燥箱中， 花生 根厚度为15cm， 采用50干燥14h， 将干燥后得到花生根用粉碎机粉碎至80目， 装入真空袋 中， 密封置于避光处， 备用； 0041 2） 从花生根中提取白藜芦醇： 0042 取0.5Kg步骤1） 粉碎后的花生根， 按料液比1kg： 20L （m/V） 加入60v%乙醇溶液中， 然 后转入超声波提取仪中， 设定温度为50， 先采用700rpm的转速搅拌50min， 再采用功率为 1500W、 59kHZ的超声波间歇超声处理120min， 每次超声作用10min， 暂停10min。 将提取液过 300目筛，。

21、 分别收集滤液与滤渣； 将滤渣装入液压挤压机中， 于20MPa挤压30min， 挤压获得的 说明书 3/4 页 5 CN 105669386 B 5 提取液再次过300目筛， 合并滤液， 备用； 0043 3） 白藜芦醇的分离浓缩： 0044 将步骤2） 获得的滤液采用切流型卷式UE030超滤膜进行超滤分离 （采用的超滤膜 截留分子量为30,000， 操作压力为2.5MPa， 浓缩至原滤液体积的10%时， 结束超滤） ， 收集超 滤透过液。 将超滤透过液采用卷式膜NF4纳滤膜进行分离浓缩 （NF4纳滤膜对硫酸镁截留率 大于90.0%， 操作压力为1.5MPa， 浓缩至原超滤透过液体积的10%时。

22、， 结束纳滤） ， 收集纳滤透 过液。 将纳滤透过液采用平膜型RO4反渗透膜 （对氯化钠截留率大于99.00%） 进一步浓缩， 操 作压力为5MPa， 浓缩至原纳滤透过液体积的5%时， 结束反渗透， 将所得浓缩液放入真空干燥 箱， 于-0.10MPa， 50干燥8h， 获得0.2615g白藜芦醇粗品。 0045 实施例3 0046 一种从花生根提取液中分离浓缩白藜芦醇的方法， 其包括如下步骤： 0047 1） 花生根预处理： 0048 取新收获的花生根5kg， 用去离子水清洗除去泥沙， 摊开放入鼓风干燥箱中， 花生 根厚度为10cm， 采用40干燥18h， 将干燥后的花生根用粉碎机粉碎至60目。

23、， 装入真空袋中， 密封置于避光处， 备用； 0049 2） 从花生根中提取白藜芦醇： 0050 取0.8Kg步骤1） 粉碎后的花生根， 按料液比1kg： 12L （m/V） 加入80%甲醇溶液中， 然 后转入超声波提取仪中， 设定温度为45， 先采用800rpm的转速搅拌60min， 再采用功率为 500W、 20kHZ的超声波间歇超声处理150min， 每次超声作用15min， 暂停10min。 将提取液过 400目筛， 分别收集滤液与滤渣； 将滤渣装入液压挤压机中， 于30MPa挤压15min， 挤压获得的 提取液再次过400目筛， 合并滤液， 备用； 0051 3） 白藜芦醇的分离浓缩。

24、： 0052 将步骤2） 获得的滤液通过切流型卷式UE005超滤膜进行超滤分离 （采用的超滤膜 截留分子量为5,000， 操作压力为0.5MPa， 浓缩至原滤液体积的10%时， 结束超滤） ， 收集超滤 透过液。 将超滤透过液采用平膜型NFM纳滤膜 （购自北京中科瑞阳膜技术公司） 进行分离浓 缩， 操作压力为4MPa， 浓缩至原超滤透过液体积的10%， 结束， 收集纳滤透过液。 将纳滤透过 液采用平膜型RO4反渗透膜进行浓缩， 操作压力为5MPa， 浓缩至原纳滤透过液体积的5%时， 结束反渗透， 将所得浓缩液放入真空干燥箱， -0.10MPa， 60干燥5h， 获得0.3028g白藜芦醇 粗品。 0053 综上可看出： 相较于传统的柱层析和大孔树脂吸附法， 本发明方法具有产品纯度 高、 处理量大、 操作简便、 成本低等优点。 本发明方法为花生根中白藜芦醇的工业化制备提 供了可能， 这对于花生根的提质增效开发开辟了新的途径， 也增加了天然白藜芦醇来源， 具 有积极经济价值。 说明书 4/4 页 6 CN 105669386 B 6 图1 说明书附图 1/3 页 7 CN 105669386 B 7 图2 说明书附图 2/3 页 8 CN 105669386 B 8 图3 说明书附图 3/3 页 9 CN 105669386 B 9 。