本发明涉及生产〔4S-(4α，12aα)〕-9-氨基-4-(二甲基氨基)-1，4， 4a，5，5a，6，11，12a-八氢-3，10，12，12a-四羟基-1，11-二氧代-2-并四 苯羧基酸胺(以下简称9-氨基-6-脱甲基-6-脱氧四环素)，该化合物 是合成四环素有价值的中间体。
众所周知，9-氨基-6-脱甲基-6-脱氧四环素，不论作为最终产 物，还是作为合成取代的四环素的中间体，都是很有用的。〔US Patent 3，219，671 and 3，226，436；Journal of the American Chemi- cal Society，82，1253(1960)〕。
在本发明之前，9-氨基-6-脱甲基-6-脱氧四环素的制造是通过硝 化6-脱甲基-6-脱氧四环素，然后催化还原，得到所需产物(Boothe， J.H.et al.，Journal of the American Chemical Society，82，1253 (1960))。然而，这个方法产生1∶1.5的7-和9-硝基-6-脱甲基-6-脱 氧四环素的混合物，而这两者是很难分离的。使用传统的提纯技术 时，例如使用结晶法或柱色谱层析法，9-硝基-6-脱甲基-6-脱氧四环 素的得率为39％。然而，甚至那些传统的提纯技术也不能提供纯度 100％的9-硝基-6-脱甲基-6-脱氧四环素。一些7-硝基-6-脱甲基-6- 脱氧四环素仍作为杂质存在。
如此得到的9-硝基产物随后被还原，生成9-氨基-6-脱甲基-6- 脱氧四环素。然而，因为正如前面提及的，很难将7-硝基-6-脱甲基- 6-脱氧四环素从9-硝基-6-脱甲基-6-脱氧四环素中分开，所以也产 生了部分7-氨基-6-脱甲基-6-脱氧四环素。
现在已发现，能高纯度地和高得率地制造9-氨基-6-脱甲基-6- 脱氧四环素无机酸盐4，即通过将6-脱甲基-6-脱氧四环素1与卤化 试剂在一定浓度的无机酸中反应(US.专利3,036,129)，得到7-卤- 6-脱甲基-6-脱氧四环素无机酸盐2，而只有少量的7，9-二卤-6-脱甲 基-6-脱氧四环素杂质。至少，用结晶的方法，7，9-二卤-6-脱甲基-6- 脱氧四环素是易于从所期望的7-卤-6-脱甲基-6-脱氧四环素无机酸 盐2中分离出去的。
接着7-卤-6-脱甲基-6-脱氧四环素无机酸盐2，硝化形成7-卤- 9-硝基-6-脱甲基-6-脱氧四环素无机酸盐3。因为7-位被卤素原子 占据，所以，硝化反应以极高的纯度和产率提供7-卤-9-硝基-6-脱 甲基-6-脱氧四环素无机酸盐。
最好地，卤化反应和硝化反应在一步中进行，即将6-脱甲基-6- 脱氧四环素无机酸盐1与卤化试剂，在一定浓度的无机酸中反应， 接着，加入硝化试剂，从而提供基本上纯净的7-卤-9-硝基-6-脱甲 基-6-脱氧四环素无机酸盐3。
7-卤-9-硝基-6-脱甲基-6-脱氧四环素无机酸盐3，随后被还原， 以高产率形成极高纯度的9-氨基-6-脱甲基-6-脱氧四环素无机酸盐 4。此还原反应在一步中既脱除了卤原子又将NO2还原，从而提供所 期望的9-氨基-6-脱甲基-6-脱氧四环素无机酸盐4。 图解I
参见图解I，通过前面文献所提及的方法而得到的6-脱甲基-6- 脱氧四环素1，在诸如浓无机酸之类的溶剂中，用卤化试剂，例如 溴，N-溴丁二酰亚胺，N-氯丁二酰亚胺，一氯化碘或苯基三甲基铵 二氯碘酸盐(benzyltrimethylammonium dichloriodate)(用Shoji Kajigaeshi et al.，Chem Lett，2109-2112(1987)的方法制备)。反应 在温度范围0°-20℃之间进行，直至反应完成。反应混合物滴加于 冷的乙醚中然后收集。粗产品经重结晶以去除所有形成的7，9-二卤 -6-脱甲基-6-脱氧四环素，从而得到纯净的7-卤-6-脱甲基-6-脱氧四 环素无机酸盐2。
纯的7-卤-6-脱甲基-6-脱氧四环素无机酸盐2，溶于冷的浓无机 酸中，例如硫酸，接着在约-15℃-+15℃温度范围下，用稍过量 的硝化试剂，例如“混合酸”或金属硫酸盐，处理1-2小时。反应产 物滴加于冷的乙醚中，并收集得到7-卤-9-硝基-6-脱甲基-6-脱氧四 环素无机酸盐3。
最好地，6-脱甲基-6-脱氧四环素1经一步直接转化成7-卤-9-硝 基-6-脱甲基-6-脱氧四环素无机酸盐3。将6-脱甲基-6-脱氧四环素1 溶于冷的溶剂中，例如浓无机酸中，然后用诸如溴，N-溴丁二酰亚 胺，N-氯丁二酰亚胺或苯基三甲基铵基二氯碘酸盐(用Shojo Kaji- gaeshi et al.的方法制备)之类的硝化试剂处理。反应在0℃-20℃ 搅拌45分钟。加入稍过量的固体金属硝酸盐或“混合酸”，并在-15 ℃-+15℃继续搅拌30分钟至2小时。反应产物滴加于冷的乙醚 中。收集所得到的固体，用乙醇研磨，过滤，滤液加入到乙醚中。收 集黄色固体，得到纯净的7-卤-9-硝基-6-脱甲基-6-脱氧四环素无机 酸盐3，产率93％。
7-卤-9-硝基-6-脱甲基-6-脱氧四环素无机酸盐3，溶于一混合溶 剂，例如2-甲氧基乙醇，甲醇或乙醇与1N硫酸或1N盐酸组成的 混合溶剂，用10-30％重量比的VIII族金属催化剂，它们的盐或稀有 金属氧化物，在1-40磅/平方英寸压力的氢气氛中催化还原。反应 产物经过滤，缓慢加于异丙醇中，收集，得到纯净的9-氨基-6-脱甲 基-6-脱氧四环素无机酸盐4。
结合下列实施例，更详尽地阐述本发明。
实施例1
〔4S-(4α，12aα)〕-7-溴-4-(二甲基氨基)-1，4，4a，5，5a，6，11， 12a-八氢-3，10，12，12a-四羟基-1，11-二氧代-2-并四苯羧基酰胺硫 酸盐。
用文献提及的方法制得的4.14克6-脱甲基-6-脱氧四环素和1. 99克N-溴丁二酰亚胺溶于50ml浓硫酸中，在0℃搅拌45分钟，或 者直至形成溶液。反应混合物滴加于2升冷的乙醚中。收集得到的 沉淀并干燥。固体溶于2-甲氧基乙醇，用甲醇研磨，收集，用甲醇和 乙醚洗涤，然后干燥，得到6.22g粗产品。固体从2-甲氧基乙醇和 甲醇中重结晶出，得到3.1g纯产品。
MS(FAB)：m/z493(M+H).
1H NMR(CD3SOCD3)：d4.3(s，1H，4-H)，6.8(d，1H，9- H)和7.75(d，1H，8-H).
实施例2
〔4S-(4α，12aa)〕-7-溴-4-(二甲基氨基)-1，4，4a，5，5a，6，11， 12a-八氢-3，10，12，12a-四羟基-9-硝基-1，11-二氧代-2-并四苯羧基 酰胺硫酸盐。
将由实施例1制得的产物1.1g溶于10ml冷的浓硫酸中，加入 1.2ml含10％硝酸的浓硫酸。反应在0℃搅拌1.5小时，然后滴加 于500ml冰冷的乙醚中，收集得到的固体，用乙醚洗三次，真空干 燥，得到1.06g所期望的产物(90％)。
MS(FAB)：m/z538(M+H).
1H NMR(CD3SOCD3)：d4.3(s，1H，4-H)和8.48(s，1H，8 -H).
实施例3
〔4S-(4α，12aα)〕-7-溴-4-(二甲基氨基)-1，4，4a，5，5a，6，11， 12a-八氢-3，10，12，12a-四羟基-9-硝基-1，11-二氧代-2-并四苯羧基 酰胺硫酸盐
将0.196克N-溴丁二酰亚胺加到0℃的由0.414g 6-脱甲基-6- 脱氧四环素和10ml浓硫酸组成的溶液中。反应在0℃搅拌45分钟。 随后加入0.11g固体硝酸钾。混合物在0℃搅拌30分钟，然后倒入 到500ml冷的乙醚中。收集固体，用乙醚洗涤，干燥，得到0.72g粗 产品。产品用甲醇和异丙醇研磨以纯化，过滤，滤液加入冷的乙醚 中，收集黄色固体，得到0.59g所期望的产物(93％)。
MS(FAB)：m/z538(M+H).
1H NMR(CD3SOCD3)：d4.3(s，1H，4-H)和8.48(s，1H，8 -H)。
实施例4
〔4S-(4α，12aα)〕-9-氨基-4-(二甲基氨基)-1，4，4a，5，5a，6，11， 12a-八氢-3，10，12，12a-四羟基-1，11-二氧代-2-并四苯羧基酰胺硫 酸盐
得自实施例2或3的1.272g产物(溶于50ml 2-甲氧基乙醇和 10ml 1N硫酸)与0.30g 10％钯/碳组成的混合物，在帕尔还原器 中在40磅/平方英寸压力下氢化还原1小时。反应产物用硅藻土垫 板过滤，滤液缓慢倒入500ml异丙醇和乙醚(1∶4)中。收集黄色固 体，用乙醚洗涤，干燥，得到1.02g所期望的产物(97％)。
MS(FAB)：m/z430(M+H).
1H NMR(CD3SOCD3)：d4.3(s，1H，4-H)，6.8(d，1H，7-H) 和7.45(d，1H，8-H)。