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1、(10)申请公布号 CN 102757904 A (43)申请公布日 2012.10.31 CN 102757904 A *CN102757904A* (21)申请号 201110103229.4 (22)申请日 2011.04.25 C12N 1/16(2006.01) (71)申请人 广州珠江啤酒股份有限公司 地址 510315 广东省广州市新港东路磨碟沙 (72)发明人 李惠萍 田小群 陈江 梁奋 涂京霞 (74)专利代理机构 广州新诺专利商标事务所有 限公司 44100 代理人 李德魁 李国钊 (54) 发明名称 利用啤酒废酵母制备酵母培养基的方法 (57) 摘要 本发明公开了一种利用。
2、啤酒废酵母制备酵母 培养基的方法。 其由如下步骤组成 ： A、 按每300毫 升水加入 0.1 0.3 毫升啤酒复合酶， 调节 pH 值 为5.66.0， 然后加入2060克啤酒废酵母， 在 3846的温度下保温60120分钟， 得混合物 A， 其中啤酒废酵母的含水量为 75 80 ； B、 于 混合物 A 中加入 60 80 克大米粉、 0.24 0.36 克氯化钙、 0.24 0.36 克氯化镁和 0.2 0.5 毫 升液化酶， 搅拌均匀并调节 pH 值为 6.2 6.4， 然后升温至 92 95并保持不少于 30 分钟， 得 混合物 B ； C、 将混合物 B 降温至 60 65， 加入。
3、 2.0 4.0 毫升糖化酶， 调整 pH 为 4.5 5.0， 在 此温度保持 3 4 小时， 得混合物 C ； D、 混合物 C 经碘检合格后， 过滤除渣得清液。本发明的酵母 培养基营养成份全面， 可取代日常检测酵母菌的 12 P 麦汁培养基， 降低了检测成本。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 3 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 3 页 1/1 页 2 1. 利用啤酒废酵母制备酵母培养基的方法， 其特征在于， 由如下步骤组成 ： A、 按每 300 毫升水加入 0.1 0.3 毫升啤酒复合酶， 调节 pH 值为。
4、 5.6 6.0， 然后加 入 20 60 克啤酒废酵母， 在 38 46的温度下保温 60 120 分钟， 得混合物 A， 其中啤 酒废酵母的含水量为 75 80 ； B、 于混合物 A 中加入 60 80 克大米粉、 0.24 0.36 克氯化钙、 0.24 0.36 克氯化 镁和 0.2 0.5 毫升液化酶， 搅拌均匀并调节 pH 值为 6.2 6.4， 然后升温至 92 95并 保持不少于 30 分钟， 得混合物 B ； C、 将混合物 B 降温至 60 65， 加入 2.0 4.0 毫升糖化酶， 调整 pH 为 4.5 5.0， 在此温度保持 3 4 小时， 得混合物 C ； D、 。
5、混合物 C 经碘检合格后， 过滤除渣得清液。 2. 根据权利要求 1 所述的方法， 其特征在于， A 步骤中， 采用磷酸调节 pH 值， 磷酸的用 量为 0.01 0.05 毫升。 3. 根据权利要求 1 所述的方法， 其特征在于， A 步骤中， 啤酒复合酶内至少包含 - 葡 聚糖酶和蛋白酶。 4.根据权利要求3所述的方法， 其特征在于， A步骤中， 啤酒复合酶还包含木聚糖酶、 纤 维素酶和淀粉酶。 5. 根据权利要求 1 所述的方法， 其特征在于， B 步骤中， 采用磷酸或碳酸钠调节 pH 值。 6. 根据权利要求 1 所述的方法， 其特征在于， C 步骤中， 采用磷酸调节 pH 值。 权 。
6、利 要 求 书 CN 102757904 A 2 1/3 页 3 利用啤酒废酵母制备酵母培养基的方法 技术领域 0001 本发明属于生化提取领域， 具体涉及一种利用啤酒废酵母溶解产生氨基酸并以此 氨基酸作为氮源制备酵母培养基的的方法。 背景技术 0002 啤酒废酵母是啤酒酿造过程产生的副产物， 生产 100 吨吨啤酒可得到含水分 75 80的啤酒废酵母约 1.5 吨。酵母含有丰富的蛋白质和各种分解酶系， 通过酵母溶 解可以获得丰富的氨基酸， 是一种营养好、 价格低的蛋白质源 ； 此外啤酒酵母细胞内还含有 各种维生素、 麦角子甾醇及铬、 硒等微量元素。然而， 目前尚无相关技术对啤酒废酵母进行 处。
7、理以废物利用。 发明内容 0003 本发明的目的在于提供一种利用啤酒废酵母制备酵母培养基的方法， 以进行废物 利用， 降低啤酒的生产成本， 增加附加值。 0004 为达到上述目的， 本发明采用如下技术方案 ： 0005 利用啤酒废酵母制备酵母培养基的方法， 由如下步骤组成 ： 0006 A、 按每 300 毫升水加入 0.1 0.3 毫升啤酒复合酶， 调节 pH 值为 5.6 6.0， 然后 加入 20 60 克啤酒废酵母， 在 38 46的温度下保温 60 120 分钟， 得混合物 A， 其中 啤酒废酵母的含水量为 75 80 ； 0007 B、 于混合物A中加入6080克大米粉、 0.24。
8、0.36克氯化钙、 0.240.36克氯 化镁和 0.2 0.5 毫升液化酶， 搅拌均匀并调节 pH 值为 6.2 6.4， 然后升温至 92 95 并保持不少于 30 分钟， 得混合物 B ； 0008 C、 将混合物 B 降温至 60 65， 加入 2.0 4.0 毫升糖化酶， 调整 pH 为 4.5 5.0， 在此温度保持 3 4 小时， 得混合物 C ； 0009 D、 混合物 C 经碘检合格后， 过滤除渣得清液。 0010 作为优选， A 步骤中， 采用磷酸调节 pH 值， 磷酸的用量为 0.01 0.05 毫升。 0011 作为优选， A 步骤中， 啤酒复合酶内至少包含 - 葡聚糖。
9、酶和蛋白酶。进一步优 选， 啤酒复合酶还包含木聚糖酶、 纤维素酶和淀粉酶。该啤酒复合酶的适用温度为 40 65， 最适 pH 值为 5.5 6.5。 0012 作为优选， B 步骤中， 采用磷酸或碳酸钠调节 pH 值。 0013 作为优选， C 步骤中， 采用磷酸调节 pH 值。 0014 通过本发明获得的酵母培养基营养成份全面， 可取代日常检测酵母菌的 12 P 麦 汁培养基， 降低了检测成本。 具体实施方式 0015 本发明所使用的啤酒废酵母的含水量为 75 80。本发明的啤酒复合酶采用 说 明 书 CN 102757904 A 3 2/3 页 4 广州裕立宝生物科技有限公司的啤酒复合酶 。
10、； 液化酶采用杰能科公司的耐高温淀粉酶 ； 糖 化酶采用广州裕立宝生物科技有限公司的糖化复合酶。 0016 实施例 1 0017 酵母培养基的制备步骤为 ： 0018 A、 在烧杯中加入 300ml 水， 添加啤酒复合酶 0.1 0.3ml， 用磷酸 ( 用量 0.01 0.05 毫升 ) 调整 pH 为 5.6 6.0， 啤酒废酵母的添加量为 20 克， 于 38 46的温度下保 温 120 分钟 ； 0019 B、 加入 70 克大米粉， 0.3 克氯化钙， 0.3 克氯化镁和 0.4 毫升液化酶， 用磷酸或碳 酸钠调节 pH 值 6.2 6.4， 搅拌均匀， 升温至 92 95， 在此温。
11、度保持 30 分钟 ； 0020 C、 降温至60-65， 加入3.0毫升糖化酶， 调整pH为4.55.0， 在此温度保持3-4 小时 ； 0021 D、 碘检合格后， 过滤除渣得清液。 0022 经检测上述清液的氨基氮含量为约 11.6mg/100ml， 收得率为 0.67。 0023 实施例 2 0024 A、 在烧杯中加入 300ml 水， 添加啤酒复合酶 0.1 0.3ml， 用磷酸 ( 用量 0.01 0.05 毫升 ) 调整 pH 为 5.6 6.0， 啤酒废酵母的添加量为 40 克， 于 38 46的温度下保 温 120 分钟 ； 0025 B、 加入 70 克大米粉， 0.3 。
12、克氯化钙， 0.3 克氯化镁和 0.4 毫升液化酶， 用磷酸或碳 酸钠调节 pH 值 6.2 6.4， 搅拌均匀， 升温至 92 95， 在此温度保持 30 分钟 ； 0026 C、 降温至60-65， 加入3.0毫升糖化酶， 调整pH为4.55.0， 在此温度保持3-4 小时 ； 0027 D、 碘检合格后， 过滤除渣得清液。 0028 经检测上述清液的氨基氮含量为约 15.1mg/100ml， 收得率为 0.55。 0029 实施例 3 0030 A、 在烧杯中加入 300ml 水， 添加啤酒复合酶 0.1 0.3ml， 用磷酸 ( 用量 0.01 0.05 毫升 ) 调整 pH 为 5.。
13、6 6.0， 啤酒废酵母的添加量为 40 克， 于 38 46的温度下保 温 120 分钟 ； 0031 B、 加入 70 克大米粉， 0.3 克氯化钙， 0.3 克氯化镁和 0.4 毫升液化酶， 用磷酸或碳 酸钠调节 pH 值 6.2 6.4， 搅拌均匀， 升温至 92 95， 在此温度保持 30 分钟 ； 0032 C、 降温至60-65， 加入3.0毫升糖化酶， 调整pH为4.55.0， 在此温度保持3-4 小时 ； 0033 D、 碘检合格后， 过滤除渣得清液。 0034 经检测上述清液的氨基氮含量为约 17.9mg/100ml， 收得率为 0.48。 0035 将上述实施例 1 3 。
14、所述清液及 12 P 麦汁 ( 氨基氮含量为约 13.1mg/100ml) 分 别制成琼脂平板， 对酵母菌进行 25培养。结果见表 1。 0036 表 1 ： 不同培养基对酵母生长的影响 0037 说 明 书 CN 102757904 A 4 3/3 页 5 0038 从表1可知， 本发明的酵母培养基与12P麦汁培养基的功效相当， 可取代12P 麦汁培养基作为实验室常用的酵母培养基。 0039 本发明利用啤酒废酵母在适当的温度条件下， 借助啤酒复合酶的作用， 溶解酵母 产生氨基酸等营养物质， 所得的含氮溶液与大米粉糊相混合， 按照糊化、 液化、 糖化的温 度曲线将大米粉糖化完全， 制成营养成份全面的培养基， 可取代日常检测酵母菌常用的 12 P 麦汁培养基， 降低了检测成本。 0040 以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述， 并非对本发明的构 思和范围进行限定， 在不脱离本发明涉及方案前提下， 本领域技术人员对本发明的技术方 案作出的各种变型和改进， 均应落入本发明的保护范围。 说 明 书 CN 102757904 A 5 。