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1、(10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201210053019.3 (22)申请日 2012.03.02 C12Q 3/00(2006.01) (73)专利权人 云南绿 A 生物产业园有限公司 地址 674202 云南省丽江市永胜县程海镇河 北村 (72)发明人 陈建荣 杜伟春 鸭乔 张瑶 (74)专利代理机构 北京泛华伟业知识产权代理 有限公司 11280 代理人 郭广迅 张晓丽等 . 国产雨生红球藻藻粉质量安全性 评价 .饲料工业 .2007, 第 28 卷 ( 第 02 期 ), 郭清泉等 . 功能性食用天然色素 .中国食 品添加剂 .2003,( 第 01 期 ), 。
2、汪洪涛 . 虾青素的性质与开发 .食品工 程 .2006,( 第 04 期 ), (54) 发明名称 一种雨生红球藻养殖过程中重金属的控制方 法 (57) 摘要 本发明提供一种雨生红球藻养殖过程中重金 属的控制方法, 包括以下步骤 : 1) 将雨生红球藻 泥与清洗剂按 1 1 1 8 的质量体积比混合 为混合物 ; 2) 将步骤 1) 中所得混合物置于摇床 上, 清洗 1-15h ; 3) 将步骤 2) 中清洗后的混合物 离心, 去除上清, 收集藻泥 ; 4)再将步骤3)收集的 藻泥用水洗 2 3 次 ; 5) 将步骤 4) 中清洗后的藻 泥离心, 收集藻泥 ; 6) 再将步骤 5) 中收集的。
3、藻泥 烘干粉碎, 检测其 Pb、 Cd 含量 ; 本发明的方法应用 于雨生红球藻粉的生产, 可将雨生红球藻粉 Pb 含 量控制在 2.0mg/Kg 以下, Cd 含量控制在 0.1mg/ Kg 以下 ; 经分光光度法检测虾青素含量未受明显 影响, 经 HPLC 检测, 顺反式虾青素结构均无明显 变化。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 王鑫 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书4页 说明书8页 附图1页 (10)授权公告号 CN 102586490 B (45)授权公告日 2015.04.01 CN 102586490 B 1/4 页 2 1. 一。
4、种雨生红球藻养殖过程中重金属的控制方法, 包括以下步骤 : 1) 将雨生红球藻泥与清洗剂按 1 : 1 1 : 8 的质量体积比混合为混合物 ; 其中, 所述清洗剂为体积比为 0.5 4的 HCl 或 HNO3; 2) 将步骤 1) 中所得混合物置于摇床上, 清洗 1 15h ; 3) 将步骤 2) 中清洗后的混合物离心, 去除上清液, 收集藻泥 ; 4) 再将步骤 3) 收集的藻泥用水洗 2 3 次 ; 5) 将步骤 4) 中清洗后的藻泥离心, 收集藻泥 ; 6) 再将步骤 5) 中收集的藻泥烘干, 粉碎为雨生红球藻粉, 检测所述雨生红球藻粉中 Pb、 Cd 含量。 2.根据权利要求1所述的。
5、方法, 其特征在于, 在步骤1)中, 将所述雨生红球藻泥与清洗 剂按 1 : 4 的质量体积比混合。 3. 根据权利要求 1 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 1) 中, 所述 HCl 或 HNO3为体积比 为 1的 HCl 或 HNO3。 4. 根据权利要求 2 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 1) 中, 所述 HCl 或 HNO3为体积比 为 1的 HCl 或 HNO3。 5. 根据权利要求 1 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 2) 中, 所述清洗于 3000r/ min-4000r/min 转速下进行。 6. 根据权利要求 2 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 2) 中, 所。
6、述清洗于 3000r/ min-4000r/min 转速下进行。 7. 根据权利要求 3 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 2) 中, 所述清洗于 3000r/ min-4000r/min 转速下进行。 8. 根据权利要求 4 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 2) 中, 所述清洗于 3000r/ min-4000r/min 转速下进行。 9.根据权利要求5所述的方法, 其特征在于, 在步骤2)中, 所述清洗于3500r/min转速 下进行。 10. 根据权利要求 6 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 2) 中, 所述清洗于 3500r/min 转 速下进行。 11. 根据权利要求 7 。
7、所述的方法, 其特征在于, 在步骤 2) 中, 所述清洗于 3500r/min 转 速下进行。 12. 根据权利要求 8 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 2) 中, 所述清洗于 3500r/min 转 速下进行。 13. 根据权利要求 1 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 4) 中, 用水清洗的具体步骤为 : 将雨生红球藻泥与水按 1 : 4 的质量体积比混合为混合物, 所述混合物经 3500r/min 转速离 心, 去除上清液, 收集藻泥。 14. 根据权利要求 2 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 4) 中, 用水清洗的具体步骤为 : 将雨生红球藻泥与水按 1 : 4 的质量体积比。
8、混合为混合物, 所述混合物经 3500r/min 转速离 心, 去除上清液, 收集藻泥。 15. 根据权利要求 3 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 4) 中, 用水清洗的具体步骤为 : 将雨生红球藻泥与水按 1 : 4 的质量体积比混合为混合物, 所述混合物经 3500r/min 转速离 权 利 要 求 书 CN 102586490 B 2 2/4 页 3 心, 去除上清液, 收集藻泥。 16. 根据权利要求 4 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 4) 中, 用水清洗的具体步骤为 : 将雨生红球藻泥与水按 1 : 4 的质量体积比混合为混合物, 所述混合物经 3500r/min 转速离 。
9、心, 去除上清液, 收集藻泥。 17. 根据权利要求 5 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 4) 中, 用水清洗的具体步骤为 : 将雨生红球藻泥与水按 1 : 4 的质量体积比混合为混合物, 所述混合物经 3500r/min 转速离 心, 去除上清液, 收集藻泥。 18. 根据权利要求 6 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 4) 中, 用水清洗的具体步骤为 : 将雨生红球藻泥与水按 1 : 4 的质量体积比混合为混合物, 所述混合物经 3500r/min 转速离 心, 去除上清液, 收集藻泥。 19. 根据权利要求 7 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 4) 中, 用水清洗的具体步骤为 。
10、: 将雨生红球藻泥与水按 1 : 4 的质量体积比混合为混合物, 所述混合物经 3500r/min 转速离 心, 去除上清液, 收集藻泥。 20. 根据权利要求 8 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 4) 中, 用水清洗的具体步骤为 : 将雨生红球藻泥与水按 1 : 4 的质量体积比混合为混合物, 所述混合物经 3500r/min 转速离 心, 去除上清液, 收集藻泥。 21. 根据权利要求 9 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 4) 中, 用水清洗的具体步骤为 : 将雨生红球藻泥与水按 1 : 4 的质量体积比混合为混合物, 所述混合物经 3500r/min 转速离 心, 去除上清液, 。
11、收集藻泥。 22. 根据权利要求 10 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 4) 中, 用水清洗的具体步骤为 : 将雨生红球藻泥与水按 1 : 4 的质量体积比混合为混合物, 所述混合物经 3500r/min 转速离 心, 去除上清液, 收集藻泥。 23. 根据权利要求 11 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 4) 中, 用水清洗的具体步骤为 : 将雨生红球藻泥与水按 1 : 4 的质量体积比混合为混合物, 所述混合物经 3500r/min 转速离 心, 去除上清液, 收集藻泥。 24. 根据权利要求 12 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 4) 中, 用水清洗的具体步骤为 : 将雨生红球。
12、藻泥与水按 1 : 4 的质量体积比混合为混合物, 所述混合物经 3500r/min 转速离 心, 去除上清液, 收集藻泥。 25. 根据权利要求 1 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 6) 中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 26. 根据权利要求 2 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 6) 中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 27. 根据权利要求 3 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 6) 中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 28. 根据权利要求 4 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 6) 中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 29. 根据权利要求 5 所述的方法, 其。
13、特征在于, 在步骤 6) 中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 30. 根据权利要求 6 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 6) 中, 通过石墨炉原子吸收光谱 权 利 要 求 书 CN 102586490 B 3 3/4 页 4 法检测。 31. 根据权利要求 7 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 6) 中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 32. 根据权利要求 8 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 6) 中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 33. 根据权利要求 9 所述的方法, 其特征在于, 在步骤 6) 中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 34.根据权利要求10所述的方法。
14、, 其特征在于, 在步骤6)中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 35.根据权利要求11所述的方法, 其特征在于, 在步骤6)中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 36.根据权利要求12所述的方法, 其特征在于, 在步骤6)中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 37.根据权利要求13所述的方法, 其特征在于, 在步骤6)中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 38.根据权利要求14所述的方法, 其特征在于, 在步骤6)中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 39.根据权利要求15所述的方法, 其特征在于, 在步骤6)中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 40.根据权利要求16所述的方法。
15、, 其特征在于, 在步骤6)中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 41.根据权利要求17所述的方法, 其特征在于, 在步骤6)中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 42.根据权利要求18所述的方法, 其特征在于, 在步骤6)中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 43.根据权利要求19所述的方法, 其特征在于, 在步骤6)中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 44.根据权利要求20所述的方法, 其特征在于, 在步骤6)中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 45.根据权利要求21所述的方法, 其特征在于, 在步骤6)中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 46.根据权利要求22所述的方法。
16、, 其特征在于, 在步骤6)中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 47.根据权利要求23所述的方法, 其特征在于, 在步骤6)中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 48.根据权利要求24所述的方法, 其特征在于, 在步骤6)中, 通过石墨炉原子吸收光谱 法检测。 49. 根据权利要求 1 至 48 中任一项所述的方法, 其特征在于, 所述雨生红球藻粉中 Pb 的含量为 0.98 1.86mg/kg, 所述雨生红球藻粉中 Cd 的含量为 0.01 0.08mg/kg。 权 利 要 求 书 CN 102586490 B 4 4/4 页 5 50. 根据权利要求 49 所述的方法, 其特征在于,。
17、 所述雨生红球藻粉中 Pb 的含量为 1.46mg/kg, 所述雨生红球藻粉中 Cd 的含量为 0.04mg/kg。 权 利 要 求 书 CN 102586490 B 5 1/8 页 6 一种雨生红球藻养殖过程中重金属的控制方法 技术领域 0001 本发明涉及一种重金属的控制方法, 尤其涉及一种雨生红球藻养殖过程中重金属 的控制方法, 属于生物工程技术领域。 背景技术 0002 雨 生 红 球 藻 (Haematococcus pluvialis) 属 于 绿 藻 门 (Chiorophata), 绿 藻 纲 (Chiorophyceae), 团藻目 (Volvocales), 红球藻科 (H。
18、aematococcaceae), 红球藻属 (Haematococcus)。在特定生态环境中能形成厚壁孢子, 积累大量的虾青素, 是自然界中最 能够大量合成和积累虾青素的生物, 也是自然界中天然虾青素含量最高的生物。虾青素是 一种生物抗氧化剂, 具有极强的去除自由基的能力, 保护细胞和组织免受脂质氧化和过氧 化的损伤, 在人类功能食品、 药品和珍贵水产品养殖方面具有广阔的应用前景。 大规模养殖 雨生红球藻生产天然虾青素 (Astaxanthin) 是国际上近年来兴起的微藻生物技术产业。由 于受培养条件及雨生红球藻的生理及生长特性等因素的影响, 在规模化养殖雨生红球藻过 程中, 将会富集一定的。
19、重金属。 重金属在人体内超过一定浓度后将会对人体产生毒害作用, 它可以导致人体致癌、 慢性中毒、 致突变、 致畸形。因此, 控制雨生红球藻产品的重金属含 量, 已成为雨生红球藻规模化养殖过程中必须解决的问题。 目前暂未发现相关的技术报道。 发明内容 0003 因此, 本发明的目的是针对目前对雨生红球藻规模化养殖过程中重金属控制的不 足, 提供一种雨生红球藻养殖过程中重金属的控制方法, 以使雨生红球藻产品的重金属浓 度得到有效地控制, 能够更好地满足人们使用。 0004 针对上述目的, 本发明的技术方案如下 : 0005 本发明提供一种雨生红球藻养殖过程中重金属的控制方法, 包括以下步骤 : 0。
20、006 1) 将雨生红球藻泥与清洗剂按 1 1 1 8 的质量体积比混合为混合物 ; 0007 2) 将步骤 1) 中所得混合物置于摇床上, 清洗 1 15h ; 0008 3) 将步骤 2) 中清洗后的混合物离心, 去除上清, 收集藻泥 ; 0009 4) 再将步骤 3) 收集的藻泥用水洗 2 3 次 ; 0010 5) 将步骤 4) 中清洗后的藻泥离心, 收集藻泥 ; 0011 6) 再将步骤 5) 中收集的藻泥烘干, 粉碎为雨生红球藻藻粉, 检测制得的雨生红球 藻藻粉中 Pb、 Cd 含量。 0012 优选地, 在步骤 1) 中, 将所述雨生红球藻泥与清洗剂按 1 4 的质量体积比混合。。
21、 0013 优选地, 在步骤 1) 中, 所述清洗剂为 HCl 或 HNO3, 更优选地, 所述 HCl 或 HNO3为体 积比为 0.25 4的 HCl 或 HNO3, 最优选地, 所述 HCl 或 HNO3为体积比为 1的 HCl 或 HNO3。 0014 优选地, 在步骤 2) 中, 清洗于 3000r/min 4000r/min 转速下进行。 0015 优选地, 在步骤 2) 中, 所述清洗于 3500r/min 转速下进行。 说 明 书 CN 102586490 B 6 2/8 页 7 0016 优选地, 在步骤4)中, 用水清洗的具体步骤为 : 将雨生红球藻泥与水按14的质 量体积。
22、比混合为混合物, 所述混合物经 3500r/min 转速离心, 去除上清液, 收集藻泥。 0017 优选地, 在步骤 6) 中, 通过石墨炉原子吸收光谱法检测。 0018 优选地, 在步骤 6) 中, 所述雨生红球藻藻粉中 Pb 的含量为 0.98 1.86mg/kg, 所 述雨生红球藻藻粉中 Cd 的含量为 0.01 0.08mg/kg。 0019 优选地, 在步骤6)中, 所述雨生红球藻藻粉中Pb的含量为1.46mg/kg, 所述雨生红 球藻藻粉中 Cd 的含量为 0.04mg/kg。 0020 本发明的方法简单, 易于操作, 没有副作用 ; 并且将其应用于实际雨生红球藻粉的 培养, 可将。
23、雨生红球藻粉Pb含量控制在2.0mg/Kg以下, Cd含量控制在0.1mg/Kg以下 ; 采用 本发明的方法生产的雨生红球藻粉, 经分光光度法检测, 未发现虾青素含量有明显降低情 况 ; 经比较分光光度法及 HPLC 方法所检测虾青素含量, 未发现虾青素含量有明显差异 ; 经 HPLC 方法检测比较虾青素结构变化, 从检测图谱看 : 顺反式虾青素与正常生产藻粉比较, 结构均无明显变化。 附图说明 0021 以下, 结合附图来详细说明本发明的实施方案, 其中 : 0022 图 1 为常规方法获得的雨生红球藻中顺反式虾青素检测结果 ; 0023 图 2 为本发明所述的方法获得的雨生红球藻中顺反式虾。
24、青素检测结果。 具体实施方式 0024 除非特别指明, 以下实施例中的雨生红球藻藻粉均通过石墨炉原子吸收光谱法检 测 Pb、 Cd 含量, 该方法参见中国药典 2010 版第一部附录 IXB 铅、 镉、 砷、 汞、 铜测定方法。 0025 除非特别指明, 以下实施例中分光光度法参见 Spectrophotometric andHPLC Analysis Method for Determinig Astaxanthin Content in-PZAF, FUJI chemical industry CO., LTD, V4.APR28.2009。 0026 实施例 1 试验设置 0027 表 。
25、1 用于试验的各参数 0028 0029 操作方法 : 0030 将雨生红球藻孢子(藻泥)添加不同浓度及比例的清洗剂将样品在摇床上摇动 清洗不同的时间将样品离心后收集藻泥为防止清洗剂在藻泥中残留, 将藻泥用清水清 洗 3 次将样品离心后收集藻泥将藻泥进行烘干、 粉碎后, 制得雨生红球藻藻粉, 将雨生 说 明 书 CN 102586490 B 7 3/8 页 8 红球藻藻粉通过石墨炉原子吸收光谱法 ( 参见中国药典 2010 版第一部附录 IXB 铅、 镉、 砷、 汞、 铜测定方法 ) 检测 Pb、 Cd 含量。 0031 实施例 2 确定清洗剂的种类及浓度 0032 表 2 不同清洗剂在不同操。
26、作条件下的雨生红球藻的藻粉中重金属和虾青素含量 的试验结果 0033 0034 * 未加清洗剂处理。 0035 根据试验设置情况及试验结果可看出 : 0036 1. 采用 CH3COOH 清洗将雨生红球藻泥, 未发现 Pb、 Cd 含量有明显降低情况。 0037 2. 采用 HCl、 HNO3清洗将雨生红球藻泥, 在体积比为 1浓度情况下 Pb、 Cd 含 量明显降低, 与对照相比较, Pb 含量分别降低了 87.22及 87.09 ; Cd 含量分别降低了 90.91。 0038 3. 适合的清洗剂种类为 HCl、 HNO3; 适合的清洗剂浓度为 1体积比。 0039 实施例 3 确定适合的。
27、红球藻孢子 ( 藻泥 ) 与清洗剂的比例及清洗的时间 0040 表 3 红球藻孢子 ( 藻泥 ) 与清洗剂比例 ( 质量体积比 ) 为 1 4 在不同清洗时间 说 明 书 CN 102586490 B 8 4/8 页 9 下的雨生红球藻的藻粉中重金属和虾青素含量的试验结果 0041 0042 * 未加清洗剂处理。 0043 表 4 清洗时间为 12h 下, 不同红球藻孢子 ( 藻泥 ) 与清洗剂比例 ( 质量体积比 ) 的雨生红球藻的藻粉中重金属和虾青素含量的试验结果 0044 说 明 书 CN 102586490 B 9 5/8 页 10 0045 0046 * 未加清洗剂处理。 0047 。
28、根据以上试验结果可看出 ( 同上 ) : 0048 1. 清洗时间为大于 4 小时其效果较好 ; 清洗时间为 8h、 12h 及 15h, Pb、 Cd 含量差 异不明显 ; 0049 2. 雨生红球藻孢子 ( 藻泥 ) 与清洗剂比例为 1 4 时其效果较好。 0050 因而, 本发明采用酸性清洗剂漂洗雨生红球藻降低重金属含量是可行的 ; 适合的 清洗剂种类为HCl、 HNO3; 适合的清洗剂浓度为1体积比 ; 适合的红球藻孢子(藻泥)与清 洗剂比例为 1 4 ; 适合的漂洗时间为大于 4 小时。 0051 具体试验实施例 0052 1. 确定经清洗剂漂洗后对红球藻虾青素含量的影响 0053 。
29、根据以上试验设置及试验结果得出 : 红球藻孢子 ( 藻泥 ) 经清洗剂清洗后未发 现虾青素含量 ( 经分光光度法 (Spectrophotometric and HPLCAnalysis Method for Determinig Astaxanthin Content in-PZAF, FUJI chemical industry CO., LTD, V4.APR28.2009 检测 ) 有明显降低情况, 以下按照该分光光度法对虾青素的其他 参数进行测定。 0054 表 5 清洗剂漂洗对雨生红球藻粉中虾青素组成和含量的影响 0055 说 明 书 CN 102586490 B 10 6/8 页。
30、 11 0056 根据以上检测结果说明 : 通过试验研究建立的清洗剂清洗控制雨生红球藻重金属 含量的方法, 经分光光度法检测虾青素含量未受明显影响, 经 HPLC 检测, 顺反式虾青素结 构均无明显变化。 0057 2. 室外小试情况 0058 操作方法 : 0059 雨生红球藻泥与清洗剂按 1 4 的质量体积比在塑料桶 ( 约 50L 装 ) 中进行搅拌 混合均匀用空气压缩泵将空气通入雨生红球藻泥与清洗剂混合物中进行充气漂洗漂 洗 4h 后停止空气通入, 将样品进行静置, 去除上清液将藻泥用水清洗 2 次 ( 清洗方式为 : 按雨生红球藻泥与水 1 4 的质量体积比加入水并搅拌均匀将样品 3。
31、500r/min 离心后收 集藻泥 ) 将收集的藻泥进行烘干、 粉碎后, 制得雨生红球藻藻粉, 检测其虾青素、 Pb、 Cd 含 量。 0060 表 6 室外小试的雨生红球藻的藻粉中重金属和虾青素含量的试验结果 0061 说 明 书 CN 102586490 B 11 7/8 页 12 0062 * 未加清洗剂处理。 0063 3. 将本发明的方法进行雨生红球藻养殖的中试 0064 将本发明的方法进行雨生红球藻养殖的中试, 分为 12 个批次, 操作方法为 : 0065 雨生红球藻泥与清洗剂按14的质量体积比在大型塑料容器中(约200L装)中 进行搅拌混合均匀用空气压缩泵将空气通入雨生红球藻泥。
32、与清洗剂混合物中进行充气 漂洗漂洗 4h 后停止空气通入, 将样品进行静置, 去除上清液将藻泥用水清洗 3 次 ( 清 洗方式为 : 按雨生红球藻泥与水 1 4 的质量体积比加入水并搅拌均匀将样品 3500r/ min离心后收集藻泥)将收集的藻泥进行烘干、 粉碎后, 制得雨生红球藻藻粉, 检测其Pb、 Cd 含量。 0066 表7室外中试的雨生红球藻的藻粉中重金属和虾青素含量的试验结果(清洗剂种 类为 HCl) 0067 0068 说 明 书 CN 102586490 B 12 8/8 页 13 0069 结果表明, 最终获得的雨生红球藻粉 Pb 平均含量为 1.46mg/Kg, 最低为 0.。
33、98mg/ Kg, 最高为1.86mg/Kg ; Cd平均含量为0.04mg/Kg, 最低为0.01mg/Kg, 最高为0.08mg/Kg ; 雨 生红球藻粉 Pb 含量控制在了 2.0mg/Kg 以下, Cd 含量控制在了 0.1mg/Kg 以下。 0070 因而本发明的方法, 能够应用于雨生红球藻规模化养殖过程中重金属控制。并且 由于食品安全问题日益受到国际社会的普遍重视, 食品的重金属含量是食品生产企业重点 控制的质量安全指标, 在雨生红球藻规模化养殖过程中应用广泛。 说 明 书 CN 102586490 B 13 1/1 页 14 图 1 图 2 说 明 书 附 图 CN 102586490 B 14 。