用作细胞增生抑制剂的氰基酰胺类 本发明涉及迄今未知的一类化合物，这类化合物显示对不需要的细胞增生如皮肤细胞和癌细胞有很强的抑制活性，及含有这种化合物的药物制剂，这种制剂的剂量单位，以及它们在治疗和预防以异常的细胞分化和/或细胞增生为特征的疾病，如牛皮癣和癌症方面的用途。
本发明化合物由通式I或其互变异构形式表示，与吡啶的连接在2-、3-或4-位上，其中R1代表一个或多个相同或不同的取代基，包括：氢，卤素，氨基，三氟甲基，硝基，氰基，羧基，或碳原子数为1-4的烷基，烷氧基或烷氧羰基；Q代表C4-C9二价烃基，它可以是直链、支链、饱和或不饱和烃基；X代表亚甲基，氧，硫或氮；及R代表氢，或代表一个或多个相同或不同的取代基，包括：羟基，氨基，卤素，三氟甲基，氰基，硝基，羧基，氨基甲酰基，亚甲基二氧基，或碳原子数为1-4的烷基，烷氧基，烷硫基，烷基氨基或烷氧羰基。
如果本发明化合物含有一个或多个不对称碳原子，则这些化合物可以构成光学异构体或非对映体。本发明还包括这些异构体及其混合物。
本化合物可以其盐的形式使用，该盐由化合物与可药用无机酸或有机酸形成，这些酸如盐酸，氢溴酸，氢碘酸，磷酸，硫酸，硝酸，4-甲苯磺酸，甲磺酸，甲酸，乙酸，丙酸，柠檬酸，酒石酸，琥珀酸，苯甲酸和马来酸。
即使本化合物在肠道给药后可以被很好地吸收，但在一些情况下，将本化合物制成适当的生物可逆衍生物形式会更有利，例如，制成所谓前药，优选衍生物形式，其生理化学性质将促进改善所说化合物在生理pH下的溶解性和/或吸收性和/或生物利用度。
例如，所说衍生物是本发明化合物的吡啶基N-氧化物衍生物，例如，在惰性溶剂如二氯甲烷中，用适当氧化剂如3-氯过苯甲酸对吡啶基N进行氧化来制备这些化合物。
也可以使用其它适于改善所说化合物的生理化学性质和/或溶解性的方法。
英国专利1,489,879中所述N-烷基-N’-氰基-吡啶基胍是有效的钾通道活化剂，其作为非常有效的前毛细血管舒张药，可减少动物和人整个(血管)末梢的阻力，因此被用作抗高血压药。已经报道具有相同生物活性与N-烷基-N’-氰基-吡啶甲脒密切相关地一系列化合物见(Nakajima，T.等人，《化学药物通讯(Chem.Pharm.Bull.)》，42，2475-2490(1994)，和美国专利5,223,508)。如国际专利PCT/DK93/00291(申请日1993年9月13日，公开号WO 94/06770)所述，将含芳氧基的基团引入上述UK专利所说脂肪基团得到对分离的组织和细胞更具特殊药物效果的结构，而且，与上述UK专利所述化合物的已有作用相比，该结构对来自钾通道的86Rb-射流无作用或作用可忽略。
以与现有技术中最佳化合物类似的浓度，用本发明化合物对培养基中的各种肿瘤细胞系的增生进行抑制(见表1)。与现有技术中的化合物相比，本发明化合物明显延长了患肿瘤鼠的存活时间。因此，本化合物非常利于用作抗肿瘤化疗药物。
用不同类型的人体癌细胞系对抑制肿瘤细胞增生进行研究。用于研究的细胞系是小细胞肺癌(NYH)和乳腺癌(MCF-7)，通用研究方法如下：
在含有被研究化合物的培养基中体外培养上述细胞24小时。通过加入[3H]胸腺嘧啶核苷对DNA的合成进行测量，计算化合物的半抑制浓度IC50。结果示于表1。表1本发明下列实施例所述化合物对人体小细胞肺癌(NYH)和乳腺癌(MCF-7)的肿瘤细胞增生抑制的体外研究化合物 半抑制浓度(IC50，nM) NYH MCF-7实施例1实施例2实施例3 39 340 350 350 540 740现有化合物A现有化合物B现有化合物C 未试验 380 45 10000 920 250A：N2-氰基-N1-辛基-3-吡啶甲脒，《化学药物通讯(Chem.Pharm.Bull.)》，42，2475-2490(1994)B：N-氰基-N’-(4-苯氧基丁基)-N”-4-吡啶基胍，PCT/DK93/00291的实施例14C：N-氰基-N’-(5-苯氧基苯基)-N”-4-吡啶基胍，PCT/DK93/00291的实施例18
结果表明，以与现有技术已知化合物(见表1)相同或可比浓度，本发明化合物能够体外抑制肿瘤细胞增生。
延长患肿瘤鼠存活时间的研究在用2×107个Yoshida肉瘤细胞接种的LEW/Mol同系繁殖的雌鼠中进行。移植肿瘤细胞3天后给患肿瘤鼠(每组6个)每日口服一次，直到鼠死亡，或者直到由于肿瘤增生使体重增加10％。处理过的鼠的存活天数与未处理的存活天数之比被用于计算ILS(增加的寿命时间)。ILS＝((处理过的平均存活天数/对照组的平均存活天数)-1)×100％。结果示于表2。表2用本发明实施例1化合物处理过的患Yoshida肿瘤鼠的存活率 处理 化合物剂量(mg/kg，口服) 增加的寿命时间(ILS)#％ 无 - - 0.0* 本发明化合物 实施例1 10 20 30 60 90 102 现有化合物C 50 35#：ILS＝((处理过的平均存活天数/对照组的平均存活天数)-1)×100％*：未处理过的带有肿瘤的动物在7-9日之间死亡C：N-氰基-N’-(5-苯氧基苯基)-N”-4-吡啶基胍，PCT/DK93/00291的实施例18
结果表明，与PCT/DK93/00291的实施例18化合物相比，本发明化合物能够以更低浓度获得更高ILS，即更有效地延长患Yoshida肿瘤鼠的存活时间。
本发明化合物有很好的耐受性和无毒性，并且表现为对系统血压无效或仅有极小影响的有益活性。总之，它们可以口服，静脉内，腹膜内，鼻内或经皮给药。
本发明还涉及通式I化合物的制备方法。式I化合物一般可以用本领域标准方法制备。制备方法可用下列路线概括。路线1：通式I化合物的合成其中，R1，Q，X和R的定义如通式I化合物中的定义。路线1的注释a) 甲醇，20℃，1-24小时(见一般方法1)
本化合物还被用于用来治疗上述疾病的药物组合物。
当然，式I化合物(以后称为活性成分)的治疗有效量将根据具体所用的化合物，给药途径和需要治疗的哺乳动物而定。用于全身治疗的式I化合物的合适剂量为0.1-400mg/kg(体重)，最优选剂量是1.0-100mg/kg哺乳动物体重例如，5-20mg/kg；每日给药一次或多次。
成年人的日剂量可以从1mg到10000mg，优选70-5000mg；对于兽医治疗，相应的日剂量为0.1-400mg/kg。
虽然可以将化合物原料作为活性成分单独给药，但优选将其制成药物制剂。通常，活性成分占制剂重量的0.1-99％，且单位制剂含有0.5mg-1g活性成分。对于局部给药，制剂优选含有1-20wt％活性成分，但也可以达到50％w/w。适于经鼻或颊给药的制剂可以含有0.1-20％w/w，例如，约2％w/w活性成分。
术语“剂量单位”指单元的，即能够给患者给药的单个剂量形式，它可以很容易地被处理和包装，保留着物理和化学上稳定的单位剂型，该剂型既可以仅由活性成分组成，也可以由活性成分与固体或液体药用稀释剂或载体的混合物组成。
不论是用于兽医还是人类医用，本发明制剂都由活性成分连同可药用载体构成，以及任选其它治疗成分。载体必须在与制剂的其它成分的配伍性方面是“可接受的”，并且对患者无害。
制剂包括适于口服，直肠，胃肠外(包括皮下，肌内，静脉内和腹膜内)给药的制剂。
制剂通常被制成单位剂量形式，可以用制药领域熟知的方法制备。所有方法都包含将活性成分与载体混合之步骤，而载体由一种或多种辅助成分构成。总之，制剂是通过将活性成分均匀紧密地与液体载体或精细固体载体或二者混合，然后，如果需要，将产物加工成所需形状的制剂。
适于口服给药的本发明制剂可以制成离散形式剂量单位，如胶囊剂，香囊，片剂或锭剂，每种含有预定量的活性成分；粉状或颗粒状形式；在水性或非水性液体中的溶液或悬浮液形式；或是油于水的乳液或水于油的乳液形式。活性成分也可以大丸剂，干药糖剂或糊剂形式给药。
直肠给药的制剂可以是混有活性成分和载体如可可油的栓剂形式，或灌肠剂形式。
适于胃肠外给药的制剂通常优选对患者的血液等渗的活性成分的灭菌油状或水状制剂。
除了上述成分外本发明制剂还可以含有一种或多种其它成分，如稀释剂，缓冲液，矫味剂，粘合剂，表面活性剂，增稠剂，润滑剂，防腐剂如羟基苯甲酸甲酯(包括抗氧剂)，乳化剂等。
组合物还可以进一步含有其它常用于治疗上述病理疾病的有治疗活性的化合物，例如，对肿瘤细胞有协同作用的抗肿瘤药。
现在，通过下列一般方法和实施例进一步阐述本发明。
例举的化合物列于表3。
所有熔点都未加修正。除非另有说明，对于13C核磁共振(NMR)谱(300MHz)用化学位移值(δ)表示，同样，氘化氯仿(deuteriochloroform)(CDCl3)和六氘二甲亚砜(DMSO-d6)溶液与内标四甲基甲硅烷(δ0.00)或氯仿(δ76.81(13C NMR))相关。色谱分析在硅胶上进行。表3通式I化合物举例
化合物 实施例
2，3或4
R1 Q X R
吡啶基
101 1 3 H (CH2)6 O 4-Cl
102 2 3 H (CH2)6 O 2-OCH3
103 3 3 H (CH2)6 O 3，4-OCH2O
104 4 3 H (CH2)6 O 2，4，6，-三-Cl
105 5 3 H (CH2)6 O 4-F
106 6 3 H (CH2)6 O 3，5-二-OCH3
107 7 3 H (CH2)6 O 3-Cl
108 8 3 H (CH2)6 O 2-NO2
109 9 3 H (CH2)6 O 2-Cl
110 10 3 H (CH2)6 O 2，3-二-Cl
111 11 3 H (CH2)6 O 4-Cl，3-CH3
112 12 3 H (CH2)8 CH2 H
113 13 3 H (CH2)4 O H
114 14 3 H (CH2)7 O 4-Cl
115 15 3 H (CH2)5 O 4-Cl
116 16 2 H (CH2)6 O 4-Cl
117 17 4 H (CH2)6 O 4-Cl一般方法1：通式II化合物与通式IIIa，IIIb或IIIc化合物偶联合成通式I化合物
将通式IIIa，IIIb或IIIc化合物(5mmol)溶解于甲醇(10ml)，然后加入通式II化合物(10mmol)的甲醇(10ml)。将反应混合物在室温搅拌约18小时。真空蒸发反应混合物，得到粗产物。例如，用结晶法或快速色谱法纯化粗产物，得到标题化合物。实施例1N2-氰基-N1-(6-(4-氯苯氧基)己基)-3-吡啶甲脒(化合物101)
一般方法1
起始化合物II：6-(4-氯苯氧基)己胺
起始化合物IIIb：N-氰基-3-吡啶羧基亚氨酸异丙酯
纯化：色谱分离，用甲醇/二氯甲烷1∶20作洗脱剂，然后用乙醚研磨
Mp：69℃升华
13C NMR(CDCl3)：δ168.0，157.6，152.5，147.5，135.3，129.3，
128.7，125.4，123.6，117.1，115.8，68.0，42.9，29.0，28.3，26.6，25.7实施例2N2-氰基-N1-(6-(2-甲氧基苯氧基)己基)-3-吡啶甲脒(化合物102)
一般方法1
起始化合物II：6-(2-甲氧基苯氧基)己胺
起始化合物IIIb：N-氰基-3-吡啶羧基亚氨酸异丙酯
纯化：色谱分离，用甲醇/二氯甲烷1∶20作洗脱剂，然后用乙醚研磨
Mp：87-88℃
13C NMR(CDCl3)：δ167.9，152.4，149.3，148.4，147.6，135.2，
128.7，123.5，121.1，121.0，117.2，113.3，112.0，68.8，55.9，42.8，28.9，
28.1，26.5，25.6实施例3N2-氰基-N1-(6-(3，4-亚甲基二氧基苯氧基)己基)-3-吡啶甲脒(化合物103)
一般方法1
起始化合物II：6-(3，4-亚甲基二氧基苯氧基)己胺
起始化合物IIIb：N-氰基-3-吡啶羧基亚氨酸异丙酯
纯化：色谱分离，用甲醇/二氯甲烷1∶20作洗脱剂，然后从甲醇结晶
Mp：130-131℃
13C NMR(DMSO-d6)：δ167.7，154.0，151.9，147.8，147.7，
140.9，135.4，128.6，123.4，117.3，107.9，105.5，100.8，97.6，68.0，
41.9，28.5，27.5，26.0，25.1实施例4N2-氰基-N1-(6-(2，4，6-三氯苯氧基)己基)-3-吡啶甲脒(化合物104)
一般方法1
起始化合物II：6-(2，4，6-三氯苯氧基)己胺
起始化合物IIIb：N-氰基-3-吡啶羧基亚氨酸异丙酯
纯化：色谱分离，用乙酸乙酯作洗脱剂，然后从氯仿/乙醚结晶
13C NMR(DMSO-d6)：δ167.7，152.0，150.2，147.7，135.5，
129.3，128.8，128.6，123.4，117.3，73.5，41.9，29.3，27.5，26.0，24.9实施例5N2-氰基-N1-(6-(4-氟苯氧基)己基)-3-吡啶甲脒(化合物105)
一般方法1
起始化合物II：6-(4-氟苯氧基)己胺
起始化合物IIIb：N-氰基-3-吡啶羧基亚氨酸异丙酯
纯化：色谱分离，用二氯甲烷/甲醇/氨(水)95∶5∶1作洗脱剂
Mp：99-101℃
13C NMR(DMSO-d6)：δ167.8，157.9，154.9，154.7，153.2，
152.3，152.0，147.8，135.5，128.6，123.4，117.3，115.8，115.6，115.5，
115.5，67.8，41.9，28.5，27.5，26.0，25.1实施例6N2-氰基-N1-(6-(3，5-二甲氧基苯氧基)己基)-3-吡啶甲脒(化合物106)
一般方法1
起始化合物II：6-(3，5-二甲氧基苯氧基)己胺
起始化合物IIIb：N-氰基-3-吡啶羧基亚氨酸异丙酯
纯化：色谱分离，用二氯甲烷/甲醇/氨(水)95∶5∶1作洗脱剂
13C NMR(DMSO-d6)：δ167.7，161.1，160.5，152.0，147.7，
135.4，128.6，123.4，117.3，93.1，92.7，67.3，55.0，41.9，28.5，27.5，
26.0，25.1实施例7N2-氰基-N1-(6-(3-氯苯氧基)己基)-3-吡啶甲脒(化合物107)
一般方法1
起始化合物II：6-(3-氯苯氧基)己胺
起始化合物IIIb：N-氰基-3-吡啶羧基亚氨酸异丙酯
纯化：色谱分离，用二氯甲烷/甲醇/氨(水)95∶5∶1作洗脱剂，然后在乙醚中研磨
Mp：77-79℃
13C NMR(DMSO-d6)：δ167.7，159.6，152.0，147.8，135.5，
133.7，130.7，128.6，123.4，120.2，117.3，114.3，113.5，67.7，41.9，
28.3，27.5，26.0，25.1实施例8N2-氰基-N1-(6-(2-硝基苯氧基)己基)-3-吡啶甲脒(化合物108)
一般方法1
起始化合物II：6-(2-硝基苯氧基)己胺
起始化合物IIIb：N-氰基-3-吡啶羧基亚氨酸异丙酯
纯化：色谱分离，用二氯甲烷/甲醇/氨(水)95∶5∶1作洗脱剂，然后在乙醚中研磨
Mp：103-106℃
13C NMR(DMSO-d6)：δ167.9，152.1，151.3，147.9，139.7，
135.6，134.4，128.8，124.9，123.5，120.4，117.4，115.1，69.1，42.1，
28.3，27.7，26.0，25.0实施例9N2-氰基-N1-(6-(2-氯苯氧基)己基)-3-吡啶甲脒(化合物109)
一般方法1
起始化合物II：6-(2-氯苯氧基)己胺
起始化合物IIIb：N-氰基-3-吡啶羧基亚氨酸异丙酯
纯化：色谱分离，用二氯甲烷/甲醇/氨(水)95∶5∶1作洗脱剂，然后在氯仿/乙醚1∶4中研磨
Mp：108-109℃
13C NMR(DMSO-d6)：δ167.9，154.0，152.1，147.9，135.6，
129.9，128.7，128.3，123.5，121.4，121.3，117.4，113.9，68.4，42.0，
28.4，27.7，26.1，25.2实施例10N2-氰基-N1-(6-(2，3-二氯苯氧基)己基)-3-吡啶甲脒(化合物110)
一般方法1
起始化合物II：6-(2，3-二氯苯氧基)己胺
起始化合物IIIb：N-氰基-3-吡啶羧基亚氨酸异丙酯
纯化：从甲醇结晶
Mp：141-142℃
13C NMR(DMSO-d6)：δ167.7，155.5，152.0，147.8，135.5，
132.2，128.6，128.4，123.4，121.8，120.0，117.3，112.2，69.0，41.9，
28.3，27.5，25.9，25.0实施例11N2-氰基-N1-(6-(4-氯-3-甲基苯氧基)己基)-3-吡啶甲脒(化合物111)
一般方法1
起始化合物II：6-(4-氯-3-甲基苯氧基)己胺
起始化合物IIIb：N-氰基-3-吡啶羧基亚氨酸异丙酯
纯化：色谱分离，用二氯甲烷/甲醇/氨(水)95∶5∶1作洗脱剂，然后在乙醚中研磨
Mp：91-92℃
13C NMR(CDCl3)：δ167.9，157.5，152.4，147.6，136.9，135.2，
129.5，128.6，125.6，123.5，117.2，117.0，113.0，67.9，42.8，29.1，28.3，
26.6，25.7，20.3实施例12N2-氰基-N1-(9-苯基壬基)-3-吡啶甲脒(化合物112)
一般方法1
起始化合物II：9-苯基壬胺
起始化合物IIIb：N-氰基-3-吡啶羧基亚氨酸异丙酯
纯化：色谱分离，用二氯甲烷/甲醇/氨(水)90∶10∶1作洗脱剂，然后在戊烷中研磨
Mp：54-57℃
13C NMR(CDCl3)：δ167.9，152.5，147.5，142.8，135.3，128.7，
128.4，128.2，125.6，123.5，117.1，43.0，36.0，31.5，29.4，29.3，29.2，
28.4，26.9实施例13N2-氰基-N1-(4-苯氧基丁基)-3-吡啶甲脒(化合物113)
一般方法1
起始化合物II：4-苯氧基丁胺
起始化合物IIIb：N-氰基-3-吡啶羧基亚氨酸异丙酯
纯化：色谱分离，用二氯甲烷/甲醇/氨(水)90∶10∶1作洗脱剂
13C NMR(CDCl3)：δ168.0，158.6，152.5，147.6，135.2，129.6，
128.7，123.5，121.0，117.2，114.5，67.2，42.6，26.6，25.3实施例14N2-氰基-N1-(7-(4-氯苯氧基)庚基)-3-吡啶甲脒(化合物114)
一般方法1
起始化合物II：7-(4-氯苯氧基)庚胺
起始化合物IIIb：N-氰基-3-吡啶羧基亚氨酸异丙酯
纯化：色谱分离，用甲醇/二氯甲烷1∶20作洗脱剂
13C NMR(DMSO-d6)：δ167.7，157.4，152.0，147.7，135.4，
129.1，128.6，123.9，123.4，117.3，116.1，67.7，42.0，28.4，28.3，27.5，
26.2，25.3实施例15N2-氰基-N1-(5-(4-氯苯氧基)戊基)-3-吡啶甲脒(化合物115)
一般方法1
起始化合物II：5-(4-氯苯氧基)戊胺
起始化合物IIIb：N-氰基-3-吡啶羧基亚氨酸异丙酯
纯化：色谱分离，用甲醇/二氯甲烷1∶20作洗脱剂
13C NMR(DMSO-d6)：δ167.8，157.4，152.0，147.7，135.4，
129.1，128.6，124.0，123.4，117.3，116.1，67.6，41.8，28.1，27.3，22.8实施例16N2-氰基-N1-(6-(4-氯苯氧基)己基)-2-吡啶甲脒(化合物116)
一般方法1
起始化合物II：6-(4-氯苯氧基)己胺
起始化合物IIIa：N-氰基-2-吡啶羧基亚氨酸甲酯
纯化：在甲醇和乙醚中研磨
Mp：80-81℃
13C NMR(CDCl3)：δ160.7，157.7，148.5，147.3，137.9，129.3，
126.9，125.4，123.1，116.8，115.8，68.0，42.2，29.3，29.0，26.5，25.7实施例17N2-氰基-N1-(6-(4-氯苯氧基)己基)-4-吡啶甲脒(化合物117)
一般方法1
起始化合物II：6-(4-氯苯氧基)己胺
起始化合物IIIc：N-氰基-4-吡啶羧基亚氨酸异丙酯
纯化：在甲醇和乙醚中研磨
Mp：117-118℃
13C NMR(DMSO-d6)：δ168.0，157.5，150.2，139.6，129.1，
124.0，121.6，116.9，116.1，67.7，41.8，28.4，27.5，26.0，25.1实施例18胶囊剂1胶囊剂含有：
N2-氰基-N1-(6-(4-氯苯氧基)己基)-3 100mg
-吡啶甲脒(活性化合物)
聚乙二醇 962mg
明胶胶囊No.00，明胶 122mg实施例19片剂制作10,000片I
N2-氰基-N1-(6-(4-氯苯氧基)己基)-3 10.000kg
-吡啶甲脒(活性化合物)
交联羧甲纤维素钠 0.300kgII
羟基丙基甲基纤维素，低粘度型 0.200kg
吐温 0.010kg
纯水 q.s.(补
足)III
交联羧甲纤维素钠 0.200kg
胶体的无水氧化硅 0.050kg
硬脂酸镁 0.050kg
将成分I在一个快剪切(highshear)搅拌器中充分混合，然后用成分II湿润，并加工成潮湿的颗粒。将潮湿颗粒在流床式干燥机中，在60℃惰性气体中干燥，直到干燥颗粒中水分为0.3-0.4(相当于与30-40％RH气体平衡)。
用850微米目开放式筛子将干燥过的颗粒过筛。
最后，过筛后的颗粒在圆锥形混合器中与成分III混合。
将所得颗粒压制成1071mg的足够硬的片剂。