消除人体内有毒成份的中药提取物及制造方法 【技术领域】
本发明属于消除人体内有害成份的高级功能性食品及制造技术，具体地涉及一种以天然中药三白草、尼泊尔老鹳草、兔丝子、忍冬藤、决明子、甘草、川椒等为主要原料配合制造的消除人体内有毒成份的中药提取物及制造方法。
背景技术
危害人类健康的物质与因素非常繁多，而其中危害最大的就是烟。烟为现代最大的可以预防的死亡原因。对吸烟与疾病关系的集中研究始于20世纪中期以后，吸烟危害健康的证据积累得越来越多，如肺癌等多种疾病。实际上人们很早从烟雾中分离出约4,000多种成份，而目前则推定主要烟叶中所含成份超过10万种。
这些成份中约有4,000多种约占主要烟叶总量的95％，其余几千种成份以极微量存在。烟雾经烟叶不完全燃烧产生，如果完全燃烧，则只产生水与二氧化碳。不完全燃烧起因于一些烟叶成份的不完全燃烧性、不充足的氧气供应、燃烧时的温差，此外，还通过燃烧时的蒸馏、升华、热分解、热合成、挥发过程而产生。
烟雾为气体混有液体或微粒子的混合体温润剂，其中通过剑桥玻璃纤维过滤法(能滤出99％以上的直径大于0.1μm地粒子的标准)的物质叫做气体或蒸汽成份，这种成份由氮(59％)、氧(13.5％)、二氧化碳(13.5)、一氧化碳(3.2％)等组成，还包括对支气管纤毛作用具有毒性的低分子量挥发性成份如酫、酮、酒精、酯等成份。经剑桥玻璃纤维过滤法滤出的物质叫做粒状物质，这些物质约占烟雾的8％，含有包括焦油在内的至少38种致癌物、可能致癌物、尼古丁以及多种无机、有机化学物质。
据研究报告称，进入21世纪后烟将依然是危害人类健康的最大危险因素，而且其规模也将继续扩大。
但是，嗜烟者戒烟并非一件易事，目前没有行之有效的简易方法既可继续抽烟又能消除抽烟引起的各种疾病的药物、食品和方法。
发明内容本发明所要解决的技术问题
本发明人着眼于能否利用食品既防止烟雾的危害又消除抽烟引起的人体内有毒成份。因为食用食物无需戒烟，而且吸烟者易于食用。
本发明人经研究多种中药配方，发现对人体内有毒成份具有解毒效果的特殊配方，从而完成本发明。
发明的另一个目的是将以上解毒成份分离成提取液并经过浓缩干燥制造功能性食品的原料。本发明技术方案是：
一种消除人体内有毒成份的中药提取物是：由以下的方法得到的中药提取物：即以三白草、尼泊尔老鹳草、菟丝子、忍冬藤、决明子、甘草、川椒的中药混合物，加以重量计算的5-50倍的水性溶媒，在25℃-100℃室温加热0.5-5小时，得到提取有效成份的溶液，再以30-50mmHg减压浓缩，然后再喷雾干燥，即得到消除人体内有毒成份的中药提取物。
这种消除人体内有毒成份的中药提取物的制造方法是：(1)采用三白草(Houttuynia cordata thund<poly condata Bueck>)、尼泊尔老鹳草(Geraniumnepalense sweet<Gthundergii siebola et Zuccarini>)、菟丝子(Cuscuta japonicachoigy)、忍冬藤(Lonicera japonica Thund)、决明子(Cassia obtusifolia L.)、甘草(Glycyrrhiza glabra L)、川椒(Rubia cordifolia L.var.mungistaMiquel<R.akane Nakai>)各自的粉末；(2)以上粉末的混合物加以重量计算的5-50倍的水性溶媒，在25℃-100℃室温加热0.5-5小时，除去固形物，得到提取有效成份的溶液；(3)将(2)阶段所得到的有效成份的溶液以30-50mmHg减压浓缩，然后再喷雾干燥，即可制造除去人体内有毒成份的中药提取物。
将中药提取物制造成以下形态：粉末、颗粒、片剂或胶囊；饼干类或饮料；烟的添加物；动物饲料。具体操作：
取以消除人体内有毒成份的中药
(1)三白草，(2)尼泊尔老鹳草，(3)兔丝子，(4)忍冬藤，(5)
决明子，(6)甘草，(7)川椒。
将以上成份(1)、(2)、(3)、(4)、(5)、(6)、(7)的各个材料同时或分别同水性溶媒，(单用水或同亲水性有机溶媒如甲醇、乙醇、丙酮等混合用)混合，水性溶媒的过剩量(以重量计算)为5-50倍，即水性溶媒的量是浸泡材料量(以重量计算)的5-50倍，并且以10-20倍为宜，将混合液在100℃温度下，以40℃-90℃为宜，浸泡充足时间为0.5-5小时，以1-4小时为宜，除去固体，将提取液减压浓缩。
以上各成份的含有量的比例原则上可在广泛范围内任意选择，但每种材料重量应占全部整体材料重量的5-70％为宜。
以上混合物可以直接用做本发明功能食品的材料，但可根据需要同赋形剂(乳糖、玉米淀粉、微细结晶质、纤维素、硬脂酸盐镁等)混合使用，生产出粉末、颗粒、片剂、胶囊等通常使用的各种剂型的内服药。也可以配入酸乳酪、冰糖、烧饼、凝胶、口香糖等饼干类或清凉饮料饮食，特别是能跟医药、草药配合使用。本发明的有益效果
食用本发明的功能食品的吸烟人，能够降低人体血液中的尼古丁数量，并可从尿中排出尼古丁成份。此外，人体处在一氧化碳环境时，能够降低血液中CO-血红蛋白的浓度。本发明的功能食品降低吸烟的危害，降低血液中的尼古丁数量，从而能够排出吸烟引起的人体内有毒成份，预防各种疾病。
特别是本发明的功能食品以食品或药剂型食品的方式吸收，因此，不必停止吸烟习惯或在吸烟时不必使用其他物品或追加其他动作，从而可在不影响吸烟习惯，不采取强硬措施的情况下达到目的，而且由于没有毒性，因而可以随时安全服用。药理作用
成份(1)三白草(Hout tuynia cordata Thunb(Polypara cordataBueck))又叫中药草、蕺草、鱼腥草，药用部位茎叶。
其主成份为CH3(CH2)8COCH3(癸酰乙醛的氧化生成物)，C10H16(月桂烯)，C11H23CHO(月桂醛)，C9H19CHO(癸醛)，C6H9N3O4(咖呋尔酸)，此外还有许多成份，叶有槲皮甙与溶解于水的无机成份2.7％。
槲皮甙有利尿作用(10万倍浓度)与强心作用，对大肠菌、伤寒菌、副伤寒菌、赤痢菌、淋菌、葡萄球菌、丝状菌具有抗菌作用，还能增强毛细血管功能。
癸酰乙醛除非病原性霉菌以外，还对白癣菌、脚气菌具有抗菌作用，还能抑制葡萄球菌、淋菌、抗酸性菌。对葡萄球菌的抵抗力为1∶40,000，强于磺胺剂。
全草用做消炎药、利尿解毒药的原料，用于淋病、尿道炎、膀胱炎、子宫炎、肺炎、支气管炎、水肿、脚气、脱肛、恶疮、风毒、缩浓症等。
作为民间处方，药汁外用可治疮、脚气、痔疮、蛇毒、漆毒，叶茎用于浮肿、脚气等症的利尿药，粉剂用于风毒、疮毒。
成份(2)尼泊尔老鹳草(Geranium nepalense Sweet.(G.thunbergiiSiebold et Zuccarini)使用茎叶。
主要成份如下，全草有焦棓酚丹宁、没食子酸、琥珀酸、檞皮酮及其皂甙，还有山柰酚与C27H30O1431/2H(柰甙，即出柰酚的二鼠李糖甙)。
据其他资料介绍，有以没食子丹宁的一种鞣质为主成份的丹宁质，全草上又分离出原儿茶酸、焦棓酚、没食子酸、老鹳草素、鞣云实精等。
丹宁含量为全草4.7％，叶20.3％，茎3.8％，根据4.6％。叶的含量至6～8月最高，冬季最低。
其主要作用为全草的水提取物或酒精提取物提高肠的紧张度，止泻作用同铋化物一样非常明确，大量使用也无副作用，不影响食欲。
对赤痢菌、伤寒菌、大肠菌具有杀菌作用。
成份(3)菟丝子(cuscuta japonica choisy)使用晾干的成熟种子。
成份有，种子上有树脂状糖甙、液化酶、维生素原A约40mg％，还有糖，全草有山柰酚。
东医作为强壮剂用于阳萎、遗精、腰痛，也用为镇定剂、止痛剂、止泻剂。
民间用全草汁洗面部以除丘疹，还用为止痰、止血剂、出汗、驱风、出胆汁、驱出剂，对肺炎、肾炎、高血压等有疗效。
成份(4)忍冬藤(Lonicera japonica Thunb)又叫金银花，药用部位茎叶。
花有木犀草素C15H10O6(5，7，3，4-四羟基黄酮)、肌醇C6H12O6，花的甜味来自肌醇，此外还有腊样物质(固醇、十六醇、花生酸、肉豆蔻酸、反油酸、亚油酸、亚麻酸)
叶茎有5～8％的丹宁，叶有Loganin(C10H62O10)与约19％的含氮物质、木犀草素-7-鼠李葡萄糖苷C27H30O152H2O(忍冬甙)。
作用为花的水煎剂能够利尿、增加血糖，对赤痢菌、伤寒菌、葡萄球菌、肺炎双球菌具有强力抑制作用，还能预防消化性胃溃疡，兴奋交感神经，麻痹平滑肌。
东医将花叶茎用做解热、解毒、利尿、冷血剂，用于风毒初热、肿疮、肿毒、疮毒、化脓，煎剂外洗各种脓疮，烧如炭者用做止血剂。
民间用于癌的治疗，水煎常饮如茶，利于胃癌，特别对子宫内膜炎、淋巴结核漏孔、口腔炎可做漱洗之用。
成份(5)决明子(Cassia obtusifolia L)使用植物决明的种子，此外还使用草决明(鸡冠草)与石决明(大鲍的外壳)。
种子到秋天成熟后变黑，每100粒重1.7～2.7g。决明意为明目，决明子的起源植物还有亚洲热带地区的小决明(C.Tona.L.)，叶尖凹陷。每100粒种子重1.6～2.0g，没有润泽。
种子有大黄素、美决明子素、决明素C18H16O7、黄决明素Chryso-obtusinC19H18O7、橙黄决明素C17H14O7及其皂甙，根据T.L.C确认大黄酚、大黄酚黄酮、芦荟大黄素、大黄酸。
还分离出红镰玫素、去甲基红镰玫素、红镰玫素龙胆二糖甙，
叶还有山柰酚-3-二糖苷C27H30O162H2O。
种子的水或酒精提取物在动物试验中显示降压作用。
东医用于祛风降热剂，补肾，泻肝热，治伤风头痛及眼病。
民间饮用如茶，具有轻微的下泻、强壮作用，润肠通便，降压效果良好。
成份(6)甘草(Glycyrrhiza glabra L.)用植物的根。秋天采挖根茎与根，除去茎基，水洗后晒干。
根茎与根的甘草甜素含量秋天高于夏天。二年生甘草的甘草甜素含量为4月份3.8％，5月份3.7％，7月份3.3％，8月份3.8％，9月份5％，10月份6％。
甘草甜素在根的各个部位上的含量为二年生甘草主根6.91％，细根8.04％。因此，不仅要药用主根与根茎，还要利用细根。而且皮部(13.06％)的含量高于木质部与髓部。扒皮时应该只剥去栓皮化的外皮，而要保存好内皮。根部与茎部的甘草甜素(甘草酸的钾盐或钙盐)为5～14％C多则23％)，还有C30H46O5(甘草亭酸)。甘草酸C42H62O16为三萜皂甙，溶点205℃，分解点220℃，[d]D20+58.5，易溶于酒精与热水，不溶于醚。热水溶液凉后变成硬胶。进行水分解后变成无味的甘草次酸C30H46O4与2分子的葡萄糖醛酸C6H10O7。甘草次酸有α，β两种，容易发生变化。但是其酯则不发生互变。α甘草次酸为板状结晶(稀醇)，溶点283℃[α]D20+140。(乙醇)，溶于乙醇、脱氧酸、氯仿。β甘草次酸为针状结晶(乙醇)，溶点296～300℃[α]D20+86。(醇)，溶于乙醇、吡啶、草酸，不易溶于石油醚。
此外有黄酮类皂甙甘草甙C21H22O9、新甘草甙、鼠李甘草甙(其非糖部分均为甘草甙元)及与此相应的异甘草甙、新异甘草甙、异鼠李甘草甙、异甘草甙元(其非糖部分均为异甘草甙元)。
在甘草根中用色层分析法确认27种类黄酮物质。
在炒甘草根中分离出β谷甾醇、刺芒炳花素、甘草西定、甘草利酮、甘草新木脂素等。开花季节的干茎叶含有蛋白质14～22％、油脂2～5％、无氮物质36～62％、灰粉5～20％，可做牲畜饲料。
甘草的类黄酮含量因生长时期而变。根部在秋季、叶茎在结果时期含量最高。秋季异甘草甙元含量约为0.5％。异甘草甙元约占总类黄酮的10％。
茎叶有肥皂草素、Gluconic(C6C12O7)、Bithinol(C12H6C14O2s)等。肥皂草素约点类黄酮总量的50％，结果时期全草含有3％。
还有带苦味的甘草酸(甘草甜素的苦味部分)、(溶点135-136℃)、β谷甾醇、挥发油(0.03％)、抗坏血酸11～30mg％、天冬酰胺(1～4％)、果糖(2.4～6.5％)、葡萄糖(2～4％)、甘露醇、淀粉(14～30％)、橡胶(1.5～4％)、黄色素、苹果酸、油脂、树脂、丹宁、蛋白质。氨基酸有天冬氨酸、脯氨酸、丙氨酸、苏氨酸、丝氨酸、甘氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、γ-氨基丁酸。苦味物质最多时占8％，其中水溶性物质占2.5～3％。
甘草的有效成份甘草甜素比糖的甜味强40～50倍，在10万倍稀释液中仍可感觉到其甜味。水溶液经摇晃产生泡沫，但轻于一般皂甙，没有或有轻微的溶血作用(钾盐1∶400)。甘草甜素经水分解产生的甘草亭酸没有甜味，具有溶血作用。据估计甘草的祛痰作用来自甘草亭酸。甘草甜素还能缓和呼吸器官。
甘草根提取液、甘草甜素没有毒性，缓解Troxerutin(C33H42O19)、马线子碱、育亨宾、柯卡因、吗啡、可待因、阿托品、Luminol(C8H7N3O2)等的中毒。还缓解细菌素、病毒的毒，如破伤风毒素、白喉毒素、蛇毒。
拮抗乙酰胆碱、组胺及引起过敏的物质，还具有近似于肾上腺素的强心作用。
甘草甜素的解毒作用与水分解产物葡萄糖醛酸有关。葡萄糖醛酸广泛存在于动植物中，在肝脏内同有毒物结合，形成葡萄醛酸盐，通过小便排出体外。因此，葡萄糖醛酸广泛用于药物中毒、酒精中毒、食物中毒、黄疸、肝硬化、慢性肝炎、类风湿、关节痛、神经痛等。甘草甜素的解毒作用可能不只源于葡萄糖醛酸，而且同甘草甜素具有近似于肾上腺素的作用也有关。甘草甜素具有同肾上腺激素脱氧皮质甾酮一样的效果。
甘草亭酸在动物试验中减少钠、氯的小便排出量，增加钾的排出量，即降氏Na/K的比例。这样，对钾的代谢产生不利影响，但能够促进钠的代谢。同时，减少肾上腺的抗坏血酸含量，为加强肾上腺激素对水与氯的代谢创造条件。这种作用在甘草提取物与甘草甜素也有反映，在人体也显示同样作用。
甘草根提取物甘草甜素具有抗炎作用，在诱发试验性甲醛水关节炎的动物身上产生疗效，控制血清转氨酶的活性，提高肝脏三磷酸腺甙酶的活性，甘草甜素近似于脱氧皮质甾酮的抗炎作用可能来自分解产物甘草亭酸。
也有一些人认为甘草甜素的肾上腺激素样作用源于控制类皮质激素在生体内非活性物△4-3酮部分的还原。
甘草根提取物在动物试验中对胃肠平滑肌产生类似于罂粟碱的向肌肉性镇痉作用。这种作用起因于黄酮类成份。甘草的黄酮类至今没有使用过，后来发现其镇痉作用、抗炎作用之后得到开发。黄酮类成份异甘草甙元的镇痉作用比罂粟碱强三倍，还有抗炎症、抗溃疡活性。还具有对乙酰胆碱、组胺的拮抗作用。
1950年代人们已经发现甘草根提取物对消化性胃溃疡有疗效。于是进行许多试验从甘草根中寻找抗溃疡性物质。到1960年代发现黄酮类物质，确认这些成份具有镇痉作用。最近通过许多试验，还了解到除镇痉作用以外还具有抗炎症、抗溃疡作用。
甘草界面活性强，同其他草药一起煎服，可以促进其他草药成份容易溶于水，促进其吸收。此外，减少其他草药的毒性，改换味道。最近其雌激素作用也受到关注。
甘草根对葡萄球菌、大肠菌、赤痢菌有一定的抑制作用。据报告将甘草酸与抗癌药Ethionamide(C8H10N2S)一起使用，其抗癌活性可达85～95％。
甘草根具有化痰、缓和、抗炎症、镇痉、抗组胺作用。作为咳痰药可用于呼吸道疾病。根据其甜味，也可用做药品的转性药。还用做解毒药、赋形剂，最近广泛用于胃十二脂肠溃疡、艾迪斯病、支气管喘息、黄疸、胆炎、湿疹及皮肤病等。
甘草酸用做提高抗癌药活性的辅助药品。
东医将甘草根主要用于缓解、调和其他草药方面，即同热药同用，可以缓解热性，同寒药同用，可以缓解寒性。
甘草用于缓解药、止痛镇痉药、化痰药、止咳药、解毒药以及胃痛、咽喉痛、胃溃疡、十二指肠溃疡等症，也用做有毒处方的配方。
成份(7)川椒(Rubia cordifolia L.var.mungista Miquel(R.akaneNakai)使用植物的花与叶。
川椒根有羟基蒽醌色素羟基茜草素C14H8O5、Purpurin(C14H8O5)-糖甙等。
R.tinctorum L.与Cordifolia L.的根有茜草素C14H8O2及其糖甙茜草酸C25H26O13、C15H8H7、异茜草素CH14H8O4、1，3＝羟基-2-甲基蒽醌皂甙等。此外有柠檬酸、苹果酸、葡萄酸、糖分、果胶。叶有有机酸及少量生物碱、类黄酮。
根子的煎液使肾、膀胱的结石逐渐膨胀使之破碎。这种作用机制来自茜根酸使小便酸性化从而溶解磷酸钙即肾石。最近认为存在于根部的化学性质相似的色素物质使磷酸钙溶解，并由茜根酸使小便酸性化从而加速草酸盐的溶解速度。
根制剂不影响动脉压及呼吸，而加强心脏的收缩，但不影响心脏节律。加强肠的振子运动，提高紧张度，有利尿作用，对球菌具有抑菌作用。降低肾盂及膀胱平滑肌的紧张度，加强肌肉纤维的蠕动性收缩，解除结石移动时的疼痛。因此，该制剂对尿道平滑肌的痉挛特别有效。
根部的提取物的干粉、根粉、总皂甙及茜根酸的比较试验说明干提取物的疗效最佳，其次为根粉。比起其他制剂，该制剂利尿作用好，有明显的镇痉作用。还延长凝血时间。
该药用于肾结石治疗、结石手术后防止复发、炎症性磷酸盐尿，对磷酸镁、磷酸钙结石有显著疗效。
服用此药后结石变粗糙，细孔增多，呈粉红色。服药过3～4小时，小便即变成红色。要服用足够数量以促进小便呈蔷薇色。
东医用做净血、痛经药、没有月经时的止血药，还用于子宫内膜炎、吐血、鼻血、尿血等症。
民间对伴有浮肿的麻痹症用做利尿药，对肺肝发热症用做解热药，对感冒、肺炎、咽喉炎用做化痰药，还用来促进血液循环、治疗赤痢。还用做止痛、镇痛、防腐药，据说对恶性肿瘤也有效果。此外还有抗炎、提高雌激素、止血、镇痉、祛痰、强壮、降压、吸收水银等作用。
具体实施方式(实施例1)
三白草干粉1g加10倍40％乙醇，在25℃浸泡12小时，过滤除去固体残余物，将提取液在45℃-50℃减压(30-50mmHg)浓缩，使固形物含量达到70％，得到0.3g-0.4g的提取液。该生成物可直接用做本发明的功能食品，也可同其他成份配合使用，生产药剂型产品或各种形态的食物。 (实施例2)
尼泊尔老鹳草1g加15倍精制水，在90℃温下浸泡5小时，过虑除去残留固体物，在45℃-50℃减压(30-50mmHg)浓缩，使固形物含量达到约70％，得到0.4g-0.5g提取液。该生成物可直接用做本发明功能食品，也可同其他成份配合使用，生产药剂型产品或各种形态的食物。 (实施例3)
兔丝子干粉1g加10倍40％乙醇，在70℃浸泡5小时，放置首次生成物，再加7倍40％乙醇，在70℃浸泡5小时，过滤除去固体物，将两次提取液在45℃-50℃减压(30-50mmHg)浓缩，使固形物含量达到约70％，得到0.4-0.5g提取液。该生成物可以直接用做本发明功能食品，也可同其他成份配合使用，生产药剂型产品或各种形态的食物。(实施例4)
忍冬藤干粉1g加15倍精制水，在90℃浸泡5小时，过滤除去固体残留物，将提取液在45℃-50℃减压(30-50mmHg)浓缩，使固形物含量达到70％，得到0.4-0.5g提取液。该生成物可以直接用做本发明的功能食品，也可同其他成份配合生产药剂型产品或各种形态的食物。(实施例5)
决明子干粉1g加10倍40％乙醇，在70℃浸泡5小时，放置首次生成物，再加7倍40％乙醇，在70℃浸泡5小时，将两次生成物过滤除去固体残留物，将提取液在45℃-50℃减压(30-50mmHg)浓缩，使固形物含量达到约70％，得到0.4-0.5g提取液。该生成物可以直接用做本发明的功能食品，也可同其他成份配合生产药剂型产品或各种形态的食物。(实施例6)
甘草干粉1g加15倍40％乙醇，其25℃浸泡12小时，过滤除去固体残留物，将提取液在45℃-50℃减压(30-50mmHg)浓缩，使固形物达到约70％，得到0.35-0.4g提取物。该生成物可以直接用做本发明的功能食品，也可同其他成份配合生产出药剂型产品或各种形态的食物。
(实施例7)
川椒粉末1g加15倍精制水，在90℃浸泡5小时，放置首次生成物，再加7倍精制水，在90℃浸泡5小时，过滤除去固体残留物，将两次提取液在45℃-50℃减压(30-50mmHg)浓缩，使固形物含量达到约70％，得到0.4-0.5g提取物。该生成物可直接用做本发明的功能性食品，也可同其他成份配合，生产出药剂型产品或各种形态的食物。
(实施例8)血液中尼古丁浓度的测定
(1)试验动物Wister strain雄性白鼠(6周)ICR Movse
(2)试验环境在每个铁丝笼子里饲养5只动物，供固体饲料与水，使
之自由摄入。室温24±1℃，温度55±5％，换气次数12回/小
时，照明时间12小时/日(早8时开灯，晚8时熄灯)。
(3)投药方法在试验环境适应二周后，在8周龄进行试验。将本发明
品掺入固体饲料口服。将本发明品0.5ml/只掺入固体饲料，与水
一起投入，使之随意食用。
(4)投入时间：下午2时投入，共投7天。投放终结及试验终结时，
为测定尼古丁从心脏抽血1ml。
(5)观察方法：投药日在投药之后与晚上、其余日期于早晚观察。从
饲养场外面细心观察动物。
(6)血液中尼古丁浓度的测试结果：用稀释氨水将血液调到PH9，在
EXTRELUT COLUMN.(Merck公司产品)上放置15分钟，用15ml
乙酸乙酯溶解，然后在减压下蒸馏除去溶解的乙酸盐，在生成的
残丝加上100ml乙酸乙酯加以溶解并做为试料。
分析使用煤气色层分析法(美国HP公司5890SERIESH，FID附着)。蒸馏塔使用长2m、直径3mm的填有2％Tharmon/1000＋1％KOH Chromo-sorb WAM(8/100Mesh)的玻璃圆柱。圆柱温度为100℃，运送气体使用N2，流速为60ml/分。参考事项：G1：全投放本发明品后投入尼古丁。
G2：全投放本发明品后投入尼古丁，然后投放本发明品。
G3：对照组，投入尼古丁。
G4：对照组，投入尼古丁后投放本发明品。
试验个体各组均为5只。
(7)剖尸
投放终结时进行剖尸结果，在各个恢复的个体上肉眼未
发观异常变化，而在死亡个体上肉眼发现异常现象。
(实施例9)尿中尼古丁浓度的测定
(1)试验动物wister strain雄性白鼠(6周)ICR Mouse
(2)试验环境在每个铁丝笼子里饲养5只动物，供固体饲料与水，
使之自由摄入。室温24±1℃，温度55±5％，换气次数12回
/小时，照明时间12小时/日(早8时开灯，晚8时熄灯)。
(3)投药方法在试验环境适应二周后，在8周龄进行试验。将本发
明品掺入固体饲料口服。将本发明品0.5ml/只掺入固体饲料，与
水一起投入，使之随意食用。
(4)投入时间下午2时投入，共投7天。投放终结及试验终结时，为
测定尼古丁从膀胱抽血1ml。
(5)观察方法投药日在投药之后与晚上、其余日期于早晚观察。从
饲养场外面细心观察动物。
(6)尿中尼古丁浓度的测试结果
用稀释氨水将血液调到PH9，在EXTRELUT COLUMN.(Merck公司
产品)上放置15分钟，用15ml乙酸乙酯溶解，然后在减压下蒸馏除去
溶解的乙酸盐，在生成的残丝加上100ml乙酸乙酯加以溶解并做为试
料。
分析使用煤气色层分析法(美国HP公司5890 SERIESH，FID附着)。蒸馏塔使用长2m、直径3mm的填有2％Tharmon/1000＋1％KOHChromosorb WAM(8/100Mesh)的玻璃圆柱。
圆柱温度为100℃，运送气体使用N2，流速为60ml/分。(实施例10)血液中一氧化碳浓度的测定(1)wisetr strain雄性白鼠(6周)ICR Mouse(2)试验环境在每个铁丝笼子里饲养5只动物，供固体饲料与水，使之 自由摄入。室温24±1℃，温度55±5％，换气次数12回/小时， 照明时间12小时/日(早8时开灯，晚8时熄灯)。(3)投药方法：在试验环境适应二周后，在8周龄进行试验。将本发明 品掺入固体饲料口服。将本发明品0.5ml/只掺入固体饲料，与水一起 投入，使之随意食用。(4)CO暴露方法：投放终结后第二天，将各组动物收容到暴露用容器(日 本国sugiyamage公司产品)内，用气泵引进O221％、CO100ppm 混合气体使之吸入5分钟。容器内的浓度用一氧化碳测定器(com-4， 日本国Komei Rikagaku Kogyo公司产品)检查。(5)血液中CO-Hb浓度的测定：暴露终结后从心脏采血0.5ml，放入5ml 容量的反应瓶内，滴入一滴乙醇及铁氰化钾饱和水溶液0.25ml。盖 上盖子振荡5分钟后用做气相分析试料。分析用煤气色层分析法(美国HP公司5890 SERIESH，TCD附着)。试验塔用填有分子体5A(3/60Mesh)的长2m、直径3mm的玻璃圆柱。试验塔温度为60℃，运送气体使用H2，流速为50ml/分。试验后测定血液中CO浓度结果如表3。
表3投放本发明品7天后的结果 3 69.1 4 68.5 5 68.9 G4 1 61.5 2 60.8 3 62.9 4 62.1 5 61.8(7)剖尸 投放终结时经剖尸在各对照组各个体上肉眼未发现异常现象。(实施例11)对焦油的试验(1)试验动物wister strain雄性白鼠(6周)ICR Moues(2)试验环境在每个铁丝笼子里饲养5只动物，供固体饲料与水，使之 自由摄入。室温24±1℃，温度55±5％，换气次数12回/小时， 照明时间12小时/日(早8时开灯，晚8时熄灯)。(3)投药方法在试验环境适应二周后，在8周龄进行试验。将本发明品 掺入固体饲料口服。将本发明品0.5ml/只掺入固体饲料，与水一起投 入，使之随意食用。焦油通过胃管投入胃内。(4)观察方法投放日在投放之后与晚上、其余日期于早晚观察。从饲养 场外面细心观察动物。(5)结果 试验后测定焦油的结果如表4。5生存生存生存生存生存生存生存G21生存生存生存生存生存死亡死亡2生存生存死亡死亡死亡死亡死亡3生存生存生存生存生存生存生存4生存生存生存死亡死亡死亡死亡5生存生存生存生存生存死亡死亡参考事项：G1：将本发明品掺入一般饲料投放后投入焦油。
G2：对照组，投放一般饲料的同时投入焦油。
各组试验个体数均为5只。