从罗汉果中提取分离多种成份的方法 (一)技术领域：
本发明涉及一种从罗汉果中提取分离多种成份如罗汉果多糖罗汉果黄酮、罗汉果甜甙的方法。(二)背景技术：
现在，人们普遍地只是从罗汉果中提取出罗汉果甜甙这种有效成份，使用的方法一般就是用水浸提，然后浓缩干燥水份即得到罗汉果甜甙。这种方法只能得到罗汉果中的一种有效成份，而且得到的产品成份复杂，总甙含量不高。(三)发明内容：
本发明的目的就是提供一种能从罗汉果中提取分离出多种有效成份，如罗汉果多糖、罗汉果黄酮、罗汉果甜甙的方法，该方法所得的产品其成份相对单一，且主要有效成份的含量高。
本发明的目的是通过下述的步骤实现的。
1)用水之后再用碱水处理破碎的罗汉果，
2)分离悬浮物并合并两种提取液，
3)用脂肪醇处理提取液，
4)分离得到沉淀物(I)和溶解液(II)，
5)用阴离子树脂柱处理沉淀物(I)的水溶解液，
6)收集阴离子树脂柱流出的和加水洗出的水溶解物(III)，
7)用脂肪醇处理水溶解物(III)，并分离出固体的罗汉果多糖，
8)蒸馏去除溶解液(II)中的脂肪醇，残留物用水稀释，
9)将水稀释液流过聚酰胺树脂柱，
10)用大孔树脂柱处理聚酰胺树脂柱中的流出液，
11)收集从大孔树脂柱中的流出液和由低到高浓度脂肪醇水溶液洗脱的洗脱液，
12)脂肪醇处理从大孔树脂柱中收集液的混合液，并分离出不溶物，
13)分离出不溶物地液体中浓缩干燥出罗汉果甜甙，
14)碱性脂肪醇洗涤流干水稀释液后的聚酰胺树脂柱，
15)聚酰胺树脂柱的洗涤液中浓缩干燥出罗汉果黄酮。
本发明的方法可处理罗汉果鲜果，也可处理罗汉果干果，罗汉果经破碎后有利于各种成份的充分溶出，一般将其破碎成直径约1～2cm比较适宜。先用自来水将破碎的罗汉果煮沸30～40min，分离出的悬浮物即渣再用PH＝8.5～9.5的碱水煮沸30～40min。自来水用量为8～12L/kg破碎罗汉果，碱水用量为6～10L/kg破碎罗汉果。
本发明的方法中，脂肪醇选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇和正丁醇。如选用乙醇，无论从价格、安全性、来源等考虑都是适宜的。用脂肪醇处理提取液时，脂肪醇的适宜用量是体积比5∶1～6∶1提取液。将提取液先经浓缩去除大量水份后，再加脂肪醇，也就大大减少了脂肪醇的总用量。
为了分离本发明的方法中某些步骤产生的溶解液和沉淀物或固体、不溶物的混合物，使用过滤、离心分离或沉降分离法。
阴离子树脂有脱色、脱盐、去杂质的功效，本发明的方法选用201×7苯乙烯系阴离子树脂、202×7苯乙烯系阴离子树脂，以201×7苯乙烯系阴离子树脂为最佳。
除最开始处理破碎的罗汉果用的水和碱水使用自来水外，其余工序因都属于纯化性质，故均采用蒸馏水。
从阴离子树脂柱中流出的且必要时加水洗出的水溶解物(III)最好先经浓缩去除大量水份，再用脂肪醇处理，无论浓缩与否，脂肪醇的用量按体积比9∶1～11∶1水溶解物(III)或其浓缩物，由此也可知，先经浓缩后，可大大减少脂肪醇的总用量。
本发明的方法中，去除脂肪醇的方法一般采用蒸馏法，最好是减压蒸馏。当去除了溶解液(II)中的脂肪醇后，稀释残留物的水与残留物中已有的水的总和水量为8～12L/kg破碎的罗汉果。
本发明的方法使用的大孔树脂选自D101、D102、AB-8以D101为最佳。用由低到高浓度的脂肪醇水溶液洗脱大孔树脂吸附的有效成份，主要是若直接用高浓度脂肪醇水溶液，将使某些有效成份沉着于柱中，不能洗出，利用由低到高浓度的变化，就能依次将各种分子量的有效成份(甜甙)顺序洗出，使得总甜甙的收率和含量均有效提高。低浓度脂肪醇水溶液的浓度最低为体积浓度40％，高浓度脂肪醇水溶液的最高浓度为体积浓度95％。从大孔树脂柱中得到的收集物的混合液，最好先经浓缩去除脂肪醇和大量水份，再加入脂肪醇进行处理。当然也可在混合液中直接加入脂肪醇进行处理。无论浓缩与否，加入的脂肪醇使脂肪醇在其中的总含量为体积含量70～80％。
本发明的方法使用碱性脂肪醇从流干水稀释液后的聚酰胺树脂柱中洗涤出聚酰胺树脂吸附的另一种有效成份——罗汉果黄酮。碱性脂肪醇的PH值控制为8.5～9.5，碱性脂肪醇为含65～75％体积脂肪醇的水溶液。
为了保持各种提取成份的天然风味和色泽及防止加工过程中的破坏和变质，本发明的方法中规定各种提取成份的干燥温度均低于85℃。
由本发明的方法，从罗汉果中提取分离出三种成份，它们是罗汉果多糖、罗汉果甜甙和罗汉果黄酮，而且罗汉果甜甙的总甙含量≥80％，比公知方法的70～75％高。罗汉果多糖主要是葡聚糖和甘露聚糖类的多糖物质。本发明提取的罗汉果黄酮含总黄酮≥15％。总甙、总糖和总黄酮含量的测定方法为通用的方法。三种提取成份均适宜作保健品和食品添加剂。罗汉果甜甙是优良的甜味剂，罗汉果多糖有降血压和提高免疫力的作用，罗汉果黄酮有消炎杀菌作用。(四)具体实施方式：
下面的实施例详述本发明。
取罗汉果干果100g，破碎成直径约1～2cm的碎片。先用1000ml自来水煮沸35min，用60目筛网过滤后，滤渣再用800ml碱水(用NaOH调PH＝9)煮沸35min，用60目筛网过滤，合并两种滤液得约1800ml提取液。在温度为60℃左右减压浓缩提取液，使至原体积的1/20(约90ml)。用500ml体积浓度80％乙醇与浓缩液充分混匀，静置1小时，任其沉淀，之后用滤纸真空抽滤，得到沉淀物(I)和溶解液(II)。
沉淀物(I)用500ml蒸馏水溶解，滤出不溶杂质后倒入装有100g201×7苯乙烯系阴离子树脂的玻璃柱(直径25毫米，高300毫米)中，待柱顶无液体后，加入100ml蒸馏水洗柱，收集全部流出液，得约600ml水溶解物(III)。在温度为60℃左右减压浓缩水溶解液(III)，使至原体积的1/20(约30ml)。用300ml体积浓度95％乙醇与浓缩液充分混匀，静置1h，任其沉淀，之后用滤纸真空抽滤得到沉淀物，将其在80℃温度下干燥，得到0.8g总糖含量≥30％的罗汉果多糖产品。
将溶解液(II)在60℃左右减压浓缩至原体积的1/20(约30ml)以去除乙醇和部分水，然后用1000ml蒸馏水稀释溶解，稀释液倒入装有100g聚酰胺树脂的玻璃柱(直径25毫米，高300毫米)中，任液体全部流干，收集从柱中的全部流出液。流出液又全部倒入内装有100gD101苯乙烯型共聚体大孔树脂的玻璃柱(直径25毫米，高300毫米)中，待柱顶无液体后，加入体积浓度50％乙醇水溶液300ml，又待柱顶无液体后，加入体积浓度90％乙醇水溶液200ml，可洗至大孔树脂柱下流出液无甜味。收集所有的从大孔树脂柱中的流出液并混匀之(约1400ml)，在60℃左右减压浓缩至原体积的1/20(约70ml)，以去除乙醇和大部分水，然后加入300ml体积浓度95％的乙醇水溶液使乙醇的总含量为体积含量77％，充分搅匀，静放1h，任其沉淀。用滤纸真空抽滤分离出不溶物，滤液(约370ml)在60℃左右减压浓缩至原体积1/20(约18ml)以去除乙醇和大部分水。浓缩液(约18ml)在80℃温度下干燥，得到1.2g总甙含量≥80％的罗汉果甜甙产品。
用500ml、PH＝9的体积含量或体积浓度70％的乙醇水溶液(用氨水调节PH值)，倒入流干后的聚酰胺树脂柱中，收集柱底流出的流出液，直至柱子再流干。全部流出液(约500ml)在60℃左右减压浓缩至原体积的1/20(约25ml)以去除乙醇、氨和水。浓缩液(约25ml)在80℃温度下干燥，得到0.1g总黄酮含量≥15％的罗汉果黄酮。