一种用于诱导母羊发情的阴道海绵栓 本发明一种用于诱导母羊发情的阴道海绵栓，属于药物栓，用于诱导动物发情，提高动物生殖能力，提高动物繁殖力。
在绵羊和山羊生产中，提高母羊生殖能力关重要的。人工诱导母羊发情，可以缩短产羔间隔，减少母羊空怀时间，从而降低饲养成本；人工诱导发情，可以在一定时间内有效地对羊群进行有计划地配种，从而使配种、产羔、羔羊饲养等生产措施便于管理；在胚胎移植过程中，可以使供体和受体同步发情。
国内外目前采用的人工诱导发情方法有：一、注射前列腺素F2α或其类似物(如氯前列烯醇、15甲基前列腺素F2α等)可使母羊卵巢上的黄体溶解，从而诱导母羊发情；二、皮下埋植黄体酮及其类似物，一定时间后撤去药物可以诱导发情；三、国外采用黄体酮及黄体酮类似物，以医用橡胶管或塑料管作载体，置于母羊阴道内，一定时间后撤去药物可以诱导母羊发情，现已商品化生产，如澳大利亚英特威公司生产的Chrono-gest45阴道海绵，是采用45mg的醋酸氟孕酮；四、注射雌激素或其类似物，如己烯雌酚。方法一需二次注射前列腺素F2α及其类似物，操作较烦，使用成本较高(约4元/只)，而且发情率不高(30-80％)，尤其对于卵巢上无活性黄体的母羊无效；方法二、三诱导发情效果较好，但方法二需进行皮下埋植，而且不易取出，操作烦琐。方法三需从国外进口，价格较高，尽管采用黄体酮类似物所需药物少、有较强的抑制发情的作用，但对促进卵泡发育的效果不如黄体酮，第一情期受胎率低。方法四虽可以使母羊发情，但大多没有排卵。黄体酮化学名为孕甾-4烯-3，20二酮，据中华人民共和国兽药典(中华人民共和国兽药典，农业出版社，1990，一部，第192页)介绍，黄体酮的作用与用途是具安胎作用，用于预防流产。
本发明的目的是现有技术中分别存在的第一情期受胎率低、操作烦琐地缺陷，提供一种用作诱导母羊发情的阴道海绵栓，能最大限度地吸附药物，置于阴道深部后，阴道粘膜能吸收有抑制发情和促进卵泡发育的药物，可以诱导母羊发情。所用药物对母羊没有副作用；无论在发情季节或乏情季节都有诱导发情的效果；使用方便，价格低廉。
本发明所提供的一种用作诱导母羊发情的阴道海绵栓，其特征在于：将诱导发情的药物黄体酮，用量为200-500mg添加到海绵中，制成孕酮阴道海绵栓，置于母羊阴道内10-20天。其中可将黄体酮200-500mg溶于2mL脱毒色拉油，加于海绵中或称取200-500mg黄体酮干粉，直接加到海绵中。孕酮阴道海绵栓为直径2-5厘米、高3-4厘米的圆柱形、圆锥形，长2-5厘米、宽3-4厘米的方形或相同体积的不规则形状。海绵栓带一根线绳。
本发明所提供的阴道海绵栓，置于母羊阴道内，释放诱导发情的药物黄体酮，撤栓后2-6天即可以有效诱导母羊发情。适用于所有母羊的人工诱导发情。作用时间为适合于羊的发情季节和乏情季节。经临床应用，取得意想不到的效果。与现有技术相比，本发明的优点和积极效果如下：
1、海绵易于切割加工，所以海绵栓容易生产；现有技术中氯前列烯醇法每只羊处理成本需4元药费，本发明中黄体酮价格为1500元/公斤，每只孕酮阴道海绵栓的药物成本低于0.5元；由于海绵中孔隙较丰富，对药物的吸附能力强，使本发明方法操作简单。
2、本发明诱导发情率达80％，特别是第一情期受胎率达77.2％，显著高于现有技术中应用孕激素类似物诱导50％母羊发情的水平。可提高羊群的配种管理水平，人工缩短母羊的产羔间隔，提高母羊的繁殖率。
3、随着放栓时间的延长，栓中的药物水平不断下降，一直到撤栓后，黄体酮的水平一直下降，这与发情周期中，在发情后期，随黄体的溶解，黄体酮水平不断下降是一致的。现代生殖生理学研究表明，一定剂量的黄体酮及其逐步下降是卵泡的发育成熟所必须的，其机制模拟了自然的发情周期，起到促进卵泡发育的效果。
4、通过对江苏徐州205头当地羊、江苏宿迁畜禽良种繁育中心30头波尔山羊、南京溧水种羊场8头波尔山羊等多头母羊多点试验，采用本发明没有发现所用药物对母羊的妊娠、胚胎发育、下一个发情周期等副作用。在发情季节(春季、秋季)或乏情季节(夏季、冬季)都有诱导发情的效果，都能达到80％；
5、海绵栓中的药物可以通过阴道粘膜而被吸收。如果黄体酮通过口服，则不易被胃肠道消化吸收。本发明采用孕酮阴道海绵栓，可以将孕酮阴道海绵放在母羊阴道内，药物可以通过阴道粘膜而容易被吸收。
6、现有胚胎工程技术中，用氯前列烯醇法诱导母羊发情后，可以使母羊黄体溶解，从而诱导母羊发情。但由于卵泡发育需要一定量的孕酮，故应用氯前列烯醇法时，第一情期受胎率往往较低。在胚胎工程中，第 次发情不能配种处理，需等到第二个情期才能进行超数排卵(使一只母羊卵巢上产上超过正常数量的卵子)。试验结果表明，本发明方法在胚胎工程中应用效果好，处理后第一次发情前就可以进行超数排卵，平均每头母羊产生10.75枚可以移植的胚胎，并且本发明可以进一步简化胚胎工程的操作步骤，将胚胎移植的工作时间从43天缩短为20天左右；
7、本发明方法可以使一群母羊可以集中在2-3天内发情(该技术称同期发情)，发情率达80％，而现有技术只有50％；同期发情处理时，第一情期受胎率达100％，而现有技术为70％。
所有海绵栓，其制作过程如下：
将医用海绵切割成规格一致的圆柱形或圆锥形或方形，然后有两种制作方法：一、栓线沿纵轴缝在海绵球上，栓线长度在10cm左右，将黄体酮溶于脱毒色拉油或其它溶剂后，以溶解状态添加到海绵球中，可制成油性孕酮阴道海绵栓，能挥发的溶剂可以将溶剂挥发后制成干性孕酮阴道海绵栓。二、将上述海绵球沿横轴切成两半，中间挖出一空洞，将一定量的黄体酮粉添加到小洞内，再用栓线将两半缝合，并打结，栓线长度在10cm左右。
实施例1 对普通山羊诱导发情的效果：
孕酮阴道栓中黄体酮用量为250-350mg。
1、用新洁尔灭或高锰酸钾消毒水将母羊的外阴洗净；
2、撒青霉素或链霉素粉于制成的孕酮阴道海绵栓上，并用阴道海绵钳夹住海绵球，插入母羊的阴道深部，将栓线留在阴户外2-3cm。
3、15天后，通过牵拉栓线，撤出孕酮阴道海绵栓。
4、撤栓后2-6天内采用公羊试情法确定母羊发情，即可配种。
孕酮用量为250-350mg(在此范围，黄体酮用量不需精确计量)，制成油性孕酮阴道海绵栓，在徐州市雎宁王集镇采用本发明方法处理205头当地母羊，直接将孕酮阴道海绵栓放入母羊阴道深部，对普通山羊在产后30-60天的诱情率达89.2％；在产后60-90天的诱情率可达80.8％，而采用氯前列烯醇法处理210头当地山羊，产后30-60天的诱情率为50％；在产后60-90天的诱情率可达40％。由此可见，本发明可以有效地缩短母羊的产羔间隔，提高羊的产羔率。
产后30-60天 产后60-90天 产后90天以上
发情 情期
发情
头 发 发 率 受胎组别 头 发情 头 率 头 发情 发情率
数 情 情 (％ 率
数 (％) 数 (％ 数 数 (％)
数 数 ) (％)
)处理 205 37 33 89.2 99 80 80.8 69 52 75.4 80.5 77.2对照 210 80 40 50％ 80 32 40 50 24 48 45.7 30
实施例2 在不同的季节诱导波尔山羊同期发情的应用：
1、用新洁尔灭或高锰酸钾消毒水将母羊的外阴洗净；
2、撒青霉素或链霉素粉于制成的孕酮阴道海绵栓上，并用阴道海绵钳夹住海绵球，插入母羊的阴道深部，将栓线留在阴户外2-3cm。
3、在第13天，肌肉注射垂体促卵泡素50单位(加缓释剂)。
4、15天后，通过牵拉栓线，撤出孕酮阴道海绵栓，同时肌注氯前列烯醇0.2mg。5、撤栓后1-4天内采用公羊试情法确定母羊发情，即可配种。
波尔山羊发情不明显，不利于种羊场的配种管理，容易延误配种时间。采用本发明方法，在江苏宿迁畜禽良种繁育中心选取30头波尔山羊用150-250mg黄体酮(在此范围，黄体酮用量不需精确计量)按上述方法制成油性孕酮阴道海绵栓，放入母羊阴道内15天，第13天注射50单位的促卵泡素，15天撤去海绵栓，此方法可在发情季节和乏情季节诱导波尔山羊同期发情，而且第一情期受胎率达100％，而采用氯前列烯醇法则不能在羊的乏情季节诱导母羊发情。
发情率(％、 第一情期受胎率季节 发情时间
头数/总数) (％、头数/总数)发情季节 85.7％(12/14) 100％(12/12) 撤栓当天至第三天乏情季节 93.8％(15/16) 100％(15/15) 撤栓当天至第三天
实例3
本发明方法在胚胎工程中的应用：
1、用新洁尔灭或高锰酸钾消毒水将母羊的外阴洗净；
2、撒青霉素或链霉素粉于制成的孕酮阴道海绵栓上，并用阴道海绵钳夹住海绵球，插入母羊的阴道深部，将栓线留在阴户外2-3cm。
3、在放栓后第13天、第14天、第15天，分别肌肉注射垂体促卵泡素60、50、40单位。
4、15天后，通过牵拉栓线，撤出孕酮阴道海绵栓，同时肌注氯前列烯醇0.2mg。
5、撤栓后1-4天内采用公羊试情法确定母羊发情，配种前2小时注射促排2号50单位。
6、配种后72小时左右冲取胚胎。
目前波尔山羊的胚胎工程中，主要采用氯前列烯醇法诱导发情后，确定母羊的情期，在发情前注射促卵泡素，往往用药时间不易掌握，成功率为50％，而且个体差异较大，处理时间长，一般需两个情期，即40天左右。应用本发明方法，在南京溧水种羊场选用8只波尔山羊，4只波尔山羊用本发明方法处理，黄体酮用量为200mg/只，制成油性孕酮阴道海绵栓。在撤栓前3天采用递减法，注射促卵泡素(促进卵泡成熟的药物)150单位，撤栓后，经鉴定母羊发情时，配种前2小时注射促排素(促卵子从卵巢表面排出的药物)，配种后3天剖腹取胚胎并用显微镜检查胚胎质量；另外4只波尔山羊作对照，用氯前列烯醇法诱导发情后，在下一次发情前3天注射促卵泡素，注射促卵泡素(促进卵泡成熟的药物)150单位，撤栓后，经鉴定母羊发情时，配种前2小时注射促排素(促卵子从卵巢表面排出的药物)，配种后3天剖腹取胚胎并用显微镜检查胚胎质量。在本次试验研究中，我们从4只波尔山羊中取得43枚可用胚，100％的羊产生超排，显著高于对照组可用胚29枚和有效率50％，这个结果是意想不到的，并且从操作时间上看，本发明方法仅需20天左右，而现有技术需43天左右。
可 冲取 卵巢 1细 4细 8细 16 异常羊 用 排卵点 胚胎 发育 颜色 胞 胞 胞 细胞 囊胚号 胚 数 情况
数 左 右 左 右 左 右 左 右 左 右 左 右 左 右1 良好 9 鲜红 13 15 6 3 3 3 0 0 0 0 3 0 0 02 良好 14 鲜红 15 17 8 17 2 9 5 8 0 0 0 0 1 03 良好 16 鲜红 4 8 6 10 0 0 0 0 6 10 0 0 0 04 良好 4 鲜红 2 4 4 0 1 0 3 0 0 0 0 0 0 05 肿大 0 鲜红 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 06 良好 17 鲜红 12 11 9 17 3 3 5 9 0 0 0 0 1 57 正常 0 鲜红 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 08 良好 12 鲜红 8 10 7 11 5 3 2 8 0 0 0 0 0 0注：表中1-4为处理，5-8为对照。