哌啶CCR-3受体拮抗剂 本发明涉及若干哌啶季盐，它们是CCR-3受体拮抗剂，涉及包含它们的药用组合物，涉及它们的使用方法和制备这些化合物的方法。
组织嗜曙红细胞增多是许多病理状态例如哮喘、鼻炎、湿疹和寄生虫传染病的特征((参阅J.Bousquet等：N.Eng.J.Med.323：1033-1039(1990)and A.B.Kay和C.Corrigan：J.Br.Med.bull.48：51-64(1992))。哮喘时，嗜曙红细胞的积聚和活化与支气管上皮损伤及缩肌介体的过度响应有关。已经了解趋化因子如RANTES、eotaxin和MCP-3活化嗜曙红细胞((参阅M.Baggiolini和C.A.Dahinden：Jmmunol.Today.15：127-133(1994)，A.M.Rot等：J.Exp.Med.176，1489-1495(1992)和P.D.Ponath等：J.Clin.Invest.，97卷#3，604-612(1996))。然而，与也诱导其他类型白血球细胞迁移的RANTES和MCP-3不同，eotaxin选择性地对嗜曙红细胞有趋化性((参阅D.A.Griffith-Johnson等：Biochem.Biophy.Res.Commun.197：1167(1993)和P.J.Jose等：Biochem.Biophy.Res.Cornmun.207，788(1994))。无论通过皮下或腹膜内注射或气雾剂吸入，在eotaxin给药位置观察到特异的嗜曙红细胞的积聚。((参阅D.A.Griffith-Johnson等：Biochem.Biophy.Res.Comtnun.197：1167(1993)；P.J.Jose等J.Exp.Med.179，881-887(1994)；M.E.Rothenberg等：J.Exp.Med.181，1211(1995)及P.D.Ponath：J.Clin.Invest.，97卷，#3，604-612(1996))。
已使用糖肾上腺皮质激素如地塞米松、甲脱氢皮甾醇和氢化可的松治疗很多嗜曙红细胞相关的疾病，包括支气管哮喘(R.P.Schleimer等：Am.Rev.Respir.Dis.，141，559(1990))。认为糖肾上腺皮质激素抑制这些疾病中生存的IL-5，IL-3介导的嗜曙红细胞。然而，延长使用糖肾上腺皮质激素能导致副效应，如在患者中有青光眼、骨质疏松症和生长延迟((参阅N.A.Hanania等：J.Allergy and Clin.Immunol.，Vol.96，571-579(1995)和M.I.Saha等：Acta Paediatrica，Vol.86，#2，138-142(1997))。因此，需要有一种替代的方法来治疗嗜曙红细胞相关的疾病，而且不引起不受欢迎的副效应。
目前，CCR-3被认为是主要的趋化因子受体，这样嗜曙红细胞用于它们对eotaxin，RANTES和MCP-3的响应。当被感染鼠前-β淋巴瘤系时，CCR-3与eotaxin，RANTES和MCP-3结合并使得这些细胞对eotaxin，RANTES和MCP-3有趋化响应((参阅Ponath.P.D.et a1.J.Exp.Med.183，2437-2448(1996))。CCR-3受体在嗜曙红细胞、T-细胞(亚型Th-2)、嗜碱细胞、柱状细胞表面上表达并对eotaxin有高选择性。
研究表明用抗-CCR-3 mAb对嗜曙红细胞预处理能完全抑制嗜曙红细胞对eotaxin，RANTES和MCP-3的趋化现象((参阅H.Heath等：J.Clin.invest.，99卷，#2，178-184(1997))。WO98/04554公开了作为CCR-3受体拮抗剂地哌啶类。
阻滞CCR-3受体结合RANTES、MCP-3和eotaxin的能力，从而防止嗜曙红细胞的募集，这将对嗜曙红细胞介导的炎症疾病提供治疗。
因此本发明涉及新型的哌啶季盐，它们能够抑制eotaxin与CCR-3受体的结合，从而提供一种抗嗜曙红细胞诱导的疾病如哮喘的方法。
第一方面，本发明提供的化合物选自化学式(I)表达的这组化合物：其中：
T和U之一是-N+R5-，其中R5是烷基、卤代烷基、氰烷基、羟烷基、烷氧基烷基、羧基烷基、烷氧羰基烷基、酰胺烷基、磺酰氨基烷基、或芳烷基，及另一个是-CH-；
X-是制药可接受的抗衡离子；
R1和R2相互独立，是氢或烷基；
m是0～3的整数，条件是T是-N+R5-时m是至少1；
Ar和Ar1相互独立，是芳基或杂芳基；
F是亚烷基、亚烯基、或一个键；
R是氢或烷基；或R与R3或R4及与它们相连的原子一起形成碳环或杂环；
R3和R4相互独立，是氢、烷基、烯基、卤代烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环基、杂环烷基、杂烷基，或-(亚烷基)-C(O)-Z，其中Z是烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基、氨基、单取代或双取代氨基、芳基、芳烷基、芳氧基、芳烷氧基、杂芳基、杂芳氧基、或杂芳烷氧基；
E是-C(O)N(R6)-、-SO2N(R6)-、-N(R7)C(O)N(R6)-、-N(R7)SO2N(R6)-、-N(R7)C(S)N(R6)-、-N(R7)C(O)-或-N(R7)SO2-，其中：R6和R7相互独立，是氢、烷基、酰基、卤代烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、芳烯基、杂芳基、杂芳烷基、杂环烷基、杂烷基，或-(亚烷基)-C(O)-Z，其中Z是烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基、氨基、单取代或双取代氨基、芳基、芳烷基、芳氧基、芳烷氧基、杂芳基、杂芳氧基、或杂芳烷氧基；
Q是-CO-或一种亚烷基链，该链中任选包含-C(O)-、-NR8-、-O-、-S(O)0-2-、-C(O)N(R8)-、-N(R8)C(O)-、-N(R8)SO2-、-SO2N(R8)-、-N(R9)C(O)N(R10)-、-N(R9)SO2N(R10)-或-N(R9)C(S)N(R10)-，其中：R8，R9和R10相互独立，是氢、烷基、酰基、卤代烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、芳烯基、杂芳基、杂芳烷基、杂环烷基、杂烷基，或-(亚烷基)-C(O)-Z，其中Z是烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基、氨基、单取代或双取代氨基、芳基、芳烷基、芳氧基、芳烷氧基、杂芳基、杂芳氧基、或杂芳烷氧基；及
药物前体、单一异构体、异构体混合物、及它们的制药可接受的盐。
第二方面，本发明提供了药用组合物，它包括治疗有效量的化学式(I)化合物或其制药可接受的盐和制药可接受的赋形剂。
第三方面，本发明提供了治疗哺乳动物中一种疾病的方法，这是一种通过CCR-3受体拮抗剂给药可治疗的疾病，该方法包括使用治疗有效量的化学式(I)化合物或其制药可接受的盐。该疾病的状态包括呼吸疾病例如哮喘。
第四方面，本发明提供了制备化学式(I)的化合物的方法。
除非另外说明，在本说明书和权利要求书中使用的下列术语的含义如下：
“烷基”是指1～6个碳原子的直链饱和一价烃基或3～6个碳原子的支链饱和一价烃基，如甲基、乙基、丙基、2-丙基、戊基等。
“链烯基”是指含有至少一个双键的2～6个碳原子的直链一价烃基或3～6个碳原子的支链一价烃基，如乙烯基、丙烯基等。
“亚烷基”是指1～6个碳原子的直链饱和二价烃基或3～6个碳原子的支链饱和二价烃基，如亚甲基、亚乙基、亚丙基、2-甲基亚丙基、亚戊基等。
“亚烯基”是指含有至少一个双键的2～6个碳原子的直链二价烃基或3～6个碳原子的支链二价烃基，如亚乙烯基、2，4-亚戊二烯基等。
“酰基”是指-C(O)R基团，其中R是烷基、链烯基、环烷基、杂烷基、卤代烷基、芳基、芳烷基、杂芳烷基或杂芳基，如乙酰基、苯甲酰基、噻吩甲酰基等。
“酸基”是指-OC(O)R基团，其中R是氢、烷基、环烷基、杂烷基、卤代烷基或任选取代苯基，如乙酸基、苯甲酸基等。
“酰氨基”是指-NRC(O)R′基团，其中R是氢或烷基，及R′是烷基、环烷基、杂烷基、卤代烷基或任选取代苯基，如乙酰氨基、三氟乙酰氨基、苯甲酰氨基、甲基乙酰氨基等。
“卤”是指氟、氯、溴或碘，优选氟和氯。
“卤代烷基”是指由一个或多个、相同或不同的卤素原子取代的烷基，如-CH2Cl、-CF3、-CH2CF3、-CH2CCl3等。
“环烷基”是指3～6个环碳原子的饱和一价环烃基，如环丙基、环己基等。
“碳环”是指3～6个环原子的饱和环状基团，其中全部环原子是碳，如环戊基、环己基等。
“单取代氨基”是指-NHR基团，其中R是烷基、杂烷基、卤代烷基、环烷基、环烷基烷基、或任选取代苯基，如甲氨基、(1-甲基乙基)氨基、苯氨基等。
“双取代氨基”是指-NRR′基团，其中R和R′是独立的烷基、链烯基、杂烷基、卤代烷基、环烷基、环烷基烷基、或任选取代苯基，典型的实例包括但不限于二甲氨基、甲基乙基氨基、二(1-甲基乙基)氨基等。
“芳基”是指6～10个环原子的一价单环或双环芳香烃基，并由一个或多个独立的取代基任选取代，优选一、二或三个取代基，取代基选自烷基、卤代烷基、杂烷基、环烷基、环烷基烷基、卤素、氰基、硝基、酸基、烷氧基、任选取代的苯基、杂芳基、杂芳烷基、氨基、单取代氨基、双取代氨基、酰氨基、羟氨基、脒基、胍基、氰胍基、肼基、酰肼基、-OR[其中R是氢、卤代烷基、链烯基、环烷基、环烷基烷基、任选取代的苯基、杂芳基或杂芳烷基]、-S(O)nR[其中n是0～2的整数，及R是氢、烷基、卤代烷基、环烷基、环烷基烷基、任选取代苯基、杂芳基、杂芳烷基、氨基、单取代或双取代氨基]、-NRSO2R′(其中R是氢或烷基，及R′是烷基、氨基、单取代或双取代氨基)、-C(O)R(其中R是氢、烷基、环烷基、杂烷基、卤代烷基或任选取代苯基)、-COOR(其中R是氢、烷基、任选取代苯基、杂芳基或杂芳烷基)、-(亚烷基)COOR(其中R是氢、烷基、任选取代苯基、杂芳基或杂芳烷基)、亚甲二氧基、1，2-亚乙二氧基、-CONR′R″或-(亚烷基)CONR′R″(其中R′和R″独立地选自氢、烷基、环烷基、卤代烷基、环烷基烷基、任选取代苯基、杂芳基和杂芳烷基)。更明确地，术语芳基包括但不限于苯基、1-萘基、2-萘基和它们的衍生物。
“任选取代苯基”是指由一、二或三个独立的取代基任选取代的苯基，取代基选自烷基、卤代烷基、卤素、硝基、氰基、-OR(其中R是氢或烷基)、-NRR′(其中R和R′相互独立，是氢或烷基)，-COOR(其中R是氢或烷基)或-CONR′R″(其中R′和R″独立地选自氢或烷基)。
“杂芳基”是指一价的单环或双环芳香烃基，具有5～10个环原子，其中含有一、二或三个选自N、O或S的环杂原子，其余的环原子是C。该芳香烃基由一个或多个独立的取代基任选取代，优选一或两个取代基，取代基选自烷基、卤代烷基、杂烷基、环烷基、环烷基烷基、卤素、氰基、硝基、酸基、任选取代的苯基、氨基、单取代-或双取代氨基、酰氨基、羟氨基、脒基、胍基、氰胍基、肼基、酰肼基、-OR[其中R是氢、烷基、卤代烷基、环烷基、环烷基烷基或任选取代的苯基]、-S(O)nR[其中n是0～2的整数，及R是氢、烷基、卤代烷基、环烷基、环烷基烷基、任选取代苯基、氨基、单取代或双取代氨基]、-NRSO2R′(其中R是氢或烷基，及R′是烷基、氨基、单取代-或双取代氨基)、-C(O)R(其中R是氢、烷基、环烷基、杂烷基、卤代烷基或任选取代苯基)、-COOR(其中R是氢、烷基或任选取代苯基)、-(亚烷基)COOR(其中R是氢、烷基或任选取代苯基)、亚甲二氧基、1，2-亚乙二氧基、-CONR′R″或-(亚烷基)CONR′R″(其中R′和R″独立地选自氢、烷基、环烷基、卤代烷基、环烷基烷基、任选取代苯基)。更明确地，术语杂芳基包括但不限于吡啶基、吡咯基、噻吩、吡唑基、噻唑基、咪唑基、嘧啶基、噻二唑基、吲哚基、咔唑基、吖吲哚基、苯并呋喃基、苯并三唑基、苯并异噁唑基、嘌呤基、喹啉基、苯并吡喃基、和它们的衍生物。
“杂环”或“杂环基”是指3～8个环原子的饱和或不饱和环基，其中一或两个环原子是选自N、O或S(O)n(其中n是0～2的整数)的杂原子。该杂环基的环可任选由一个或多个独立的取代基取代，取代基选自烷基、卤代烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、卤素、氰基、酰基、酰氨基、氨基、单取代氨基、双取代氨基、-COOR(其中R是氢或烷基)、-XR(其中X是O或S(O)n，n是0～2的整数，及R是氢、烷基、卤代烷基、环烷基、芳烷基、芳基、杂芳基或杂芳烷基)或-CONR′R″(其中R′和R″独立地选自氢或烷基)。典型的实例包括但不限于四氢吡喃基、哌啶子基、1-(4-氯代苯基)哌啶子基等。
“杂烷基”是指如上定义的烷基、环烷基或环烷基烷基带有一种含杂原子的取代基，杂原子选自N、O、S(O)n，其中n是0～2的整数。典型的取代基包括-NRaRb，-ORa或-S(O)nRc，其中n是0～2的整数，Ra是氢、烷基、卤代烷基、环烷基、芳烷基、环烷基烷基、任选取代的苯基、吡啶基、-COR(其中R是烷基或烷氧基)或氨基烷基，Rb是氢、烷基、-SO2R(其中R是烷基或羟烷基)、-SO2NRR′(其中R和R′相互独立，是氢或烷基)、-CONR′R″(其中R′和R″独立地选自氢或烷基)，及Rc是氢、烷基、环烷基、环烷基烷基、任选取代的苯基、氨基、单取代或双取代氨基。典型的实例包括但不限于2-甲氧乙基、苄氧甲基等。
“羟烷基”是指有2～6个碳原子的直链一价烃基或3～6个碳原子的支链一价烃基被一个或两个羟基取代，条件是假如存在两个羟基，它们不在同一个碳原子上。典型的实例包括但不限于2-羟基乙基、2-羟基丙基、3-羟基丙基、1-(羟甲基)-2-甲基丙基、2-羟基丁基、3-羟基丁基、4-羟基丁基、2，3-二羟基丙基、1-(羟甲基)-2-羟基乙基、2，3-二羟基丁基、3，4-二羟基丁基和2-(羟甲基)-3-羟基丙基，优选2-羟基乙基、2，3-二羟基丙基和1-(羟甲基)-2-羟基乙基，优选2-羟基乙基、2-羟基丙基、3-羟基丙基、2，3-二羟基丙基和4-羟基丁基。
“氨基烷基”是指如上定义的烷基带有一个或两个氨基，例如2-氨基乙基、2-氨基丙基、3-氨基丙基、1-(氨基甲基)-2-甲基丙基等。
“酰氨基烷基”是指如上定义的烷基带有-NRCORa基团，其中R是氢或烷基，Ra是如上定义的烷基，例如-(CH2)2NHCOCH3、-(CH2)3NHCOCH3等。
“磺酰氨基烷基”是指如上定义的烷基带有-NRSO2Ra基团，如-(CH2)2NHSO2CH3，-(CH2)3NRSO2CH3，-(CH2)2NHSO2C2H5等。
“羧基烷基”是指如上定义的烷基带有羧基，如羧甲基、2-羧乙基、2-羧丙基、3-羧丙基、1-(羧甲基)-2-甲基-丙基等。
“烷氧基羰基烷基”是指如上定义的烷基带有-COOR，其中R是如上定义的烷基，如2-甲氧基羰基乙基、乙氧基羰基甲基、2-乙氧基羰基乙基、3-乙氧基羰基丙基、3-甲氧基羰基丙基等。
“烷氧基烷基”是指如上定义的烷基带有烷氧基，如甲氧基甲基、2-甲氧基乙基、2-甲氧基丙基、3-甲氧基丙基、1-(甲氧基甲基)-2-甲基丙基等。
“氰基烷基”是指如上定义的烷基带有氰基，如2-氰基乙基、3-氰基丙基、1-(氰基甲基)-2-甲基丙基等。
“环烷基烷基”是指一种-RaRb基团，其中Ra是亚烷基，及Rb是如上定义的环烷基，如环丙基甲基、环己基丙基、3-环己基-2-甲基丙基等。
“芳烷基”是指一种-RaRb基团，其中Ra是亚烷基，及Rb是如上定义的芳基，如苄基、苯乙基、3-(3-氯苯基)-2-甲基戊基等。
“杂芳烷基”是指一种-RaRb基团，其中Ra是亚烷基，及Rb是如上定义的杂芳基，如吡啶-3-基甲基、3-(苯并呋喃-2-基)丙基等。
“杂环烷基”是指一种-RaRb基团，其中Ra是亚烷基，及Rb是如上定义的杂环基，如四氢吡喃-2-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基乙基等。
“烷氧基”、“卤代烷氧基”、“芳氧基”、“杂芳氧基”、“芳烷氧基”或“杂芳烷氧基”各指一种-OR基，其中R分别为如上定义的烷基、卤代烷基、芳基、杂芳基、芳烷基或杂芳烷基，如甲氧基、苯氧基、吡啶-2-基氧基、苄氧基等。
“任选的”或“任选地”表示其后所描述的事件或情况可以发生、但不必须发生，以及该描述包括事件或情况发生的实例和不发生的实例。例如，“任选地被烷基单-或双-取代的杂环基”是指该烷基可以但不必须存在，以及该描述包括杂环基被烷基单-或双-取代的状态，和杂环基没有被烷基取代的状态。
“氨基-保护基”涉及一些有机基团，它们在合成过程中有意于保护氮原子防备不需要的反应，如苄基、苄氧羰基(CBZ)、叔丁氧羰基(BOC)、三氟乙酰基等。
有相同分子式但性质、或它们的原子键合的顺序、或它们的原子在空间排列不同的化合物称作“异构体”。它们的原子在空间排列不同的异构体称作“立体异构体”。彼此不成镜像的立体异构体称作“非对映异构体”，和相互成不可重叠镜像的立体异构体称作“对映异构体”。当一种化合物有一个不对称中心，例如一个碳原子连接四个不同的基团，可有一对对映异构体。对映异构体可通过其不对称中心的绝对构型来表征，通过Cahn和Prelog的R-和S-顺序规则，或通过该分子旋转偏振光平面的方式并标明为右旋或左旋(即分别为(+)或(-)-异构体)来描述。一种手性化合物可以以单独的对映异构体或以它们的混合物存在。含有相等比例对映异构体的混合物称作“外消旋混合物”。
本发明化合物可具有一个或多个不对称中心；因此可以以单独的(R)-或(S)-立体异构体或以它们的混合物来生产这样的化合物。例如，在化学式(I)化合物中，假如R3和R4取代基是不同的，则它们所连接的碳原子是一个不对称中心，化学式(I)化合物可存在(R)-或(S)-立体异构体。除非另外说明，在本说明书和权利要求书中，一个具体化合物的描述或命名意思是包括单独的对映异构体和它们的外消旋或其他混合物两者。本领域已熟知立体化学测定和立体异构体的分离方法(参阅J.March著的“高等有机化学”第4版第4章中的讨论，该书由John Wiley and Sons出版，纽约，1992年)。
“制药可接受的赋形剂”是指用于制备药用组合物的赋形剂，该组合物一般是安全的、无毒的、既在生物学上也在其他方面均符合要求的组合物，以及它包含的赋形剂对兽医使用和人类制药使用均是合格的。在本说明书和权利要求书中使用的“制药可接受的赋形剂”包括一种和多于一种这样的赋形剂两种情况。
“制药可接受的抗衡离子”是指一种离子，它具有与其与之缔合的实体相反的电荷，并是制药上合格的。典型的实例包括但不限于氯负离子、溴负离子、碘负离子、甲磺酸根离子、对甲苯磺酸根离子、三氟醋酸根离子、醋酸根离子等。
化合物的“制药可接受的盐”是指一种盐，它制药上是合格的，并具有该母体化合物合乎要求的药物活性。这样的盐包括：
(1)与无机酸或有机酸形成的酸加合盐，无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；有机酸如醋酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、丁二酸、苹果酸、顺丁烯二酸、反丁烯二酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)-苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯代苯磺酸、2-萘磺酸、4-对甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基双环-[2.2.2]-2-辛烯-1-羧酸、葡庚糖酸、4，4-亚甲基双-(3-羟基-2-烯-1-羧酸)、3-苯基丙酸、三甲基醋酸、叔丁基醋酸、月桂基硫酸、葡萄糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等；或
(2)母体化合物中存在的酸性质子被金属离子取代所形成的盐，金属离子如碱金属离子、碱土金属离子、或铝离子；或有机碱等同物如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、缓血酸胺、N-甲基葡糖胺等。
“离去基团”具有常规与合成有机化学关联的含义，即一种原子或基团能够被一种亲核试剂取代，它包括卤素、烷基磺酰氧基、芳基磺酰氧基、酯或氨基，如氯、溴、碘、甲磺酰氧基、对甲苯磺酰氧基、三氟磺酰氧基、甲氧基、N，O-二甲基羟基-氨基等。
“药物前体”是指对哺乳动物患者使用这种药物前体时在体内释放化学式(I)活性母体药物的任何化合物。制备化学式(I)化合物的药物前体是通过一种方法使化学式(I)化合物中存在的功能基团改性，使得改性物可在体内分解释放母体化合物。药物前体包括化学式(I)化合物，其中化合物(I)的羟基、巯基或氨基可与某种基团连接，这种基团可以是在体内分解分别再产生游离的羟基、氨基或巯基的任何基团。药物前体的实例包括但不限于化学式(I)化合物中羟基功能团的酯(例如醋酸酯、甲酸酯、及苯甲酸酯衍生物)、氨基甲酸酯(如N，N-二甲基氨基羰基)等。
疾病的“治疗”或“治疗法”包括：
(1)预防疾病，即促使疾病的临床症状不在哺乳动物中发展，这些哺乳动物可能暴露于或易患疾病，但目前没有感受或显示疾病的症状，
(2)抑制疾病，即阻止或减少疾病或其临床症状的发展，或
(3)解除疾病，即促使疾病或其临床症状退化。
“治疗有效量”是指用于哺乳动物治疗疾病的化合物量足以实现对该疾病的这种治疗。“治疗有效量”将依据化合物、疾病及其严重性、以及被治疗的哺乳动物的年龄和体重等来变化。
在本申请中使用的命名法一般以国际纯粹化学与应用化学联合会推荐书为基础，如：
化学式(I)的一种化合物，其中T是-N+R5-，U是碳，m是1，R、R1、R2 and R3是氢，R4是1-甲基乙基，R5是乙基，X是碘化物，E是-NHC(O)NH-，F是键，Q是-CH2-，Ar是3，4，5-三甲氧基苯基，Ar1是3，4-氯代苯基及R3和R4所连接的碳上的立体化学是R型，被称作4-(3，4-二氯苯基)-1-乙基-1-{3-甲基-2(R)-[3-(3，4，5-三甲氧基苯基)脲基]丁基}-哌啶鎓碘化物。
化学式(I)的一种化合物，其中T是-N+R5-、U是碳、m是1、R，R1，R2和R3是氢、R4是1-甲基乙基、R5是甲基、X是氯化物、E是-C(O)NH-、F是键、Q是-CH2-、Ar是4-(2-氨基乙基)苯基、Ar1是3，4-氯代苯基及R3和R4所连接的碳上的立体化学是R型，被称作1-{2-(R)-[4-(2-氨基乙基)-苯甲酰氨基]-3-甲基丁基}-4-(3，4-二氯苯基)-1-甲基-哌啶鎓氯化物。
本发明有代表性的化合物如下：I.化学式(I)的有代表性的化合物，其中T＝-N+R5-；U＝碳；m＝1；R＝R1＝R2＝R3＝氢；F＝键；Q＝-CH2-；E＝-C(O)NH-以及其他基团定义如下：化合物#立体化学Ar R4R5X-Ar1质谱m/e 1(R)4-甲基苯基1-甲基乙基甲基Cl3，4-二氯苯基461 2(R)4-甲基苯基1-甲基乙基甲基TF A3，4-二氯苯基461 3(R)4-[2-(叔丁氧基-酰氨基)-乙基]苯基1-甲基乙基乙基I3，4-二氯苯基604 4(R)4-(2-氨基乙基)苯基1-甲基乙基甲基Cl3，4-二氯苯基HCl490 5(S)4-甲基苯基1-甲基乙基甲基Cl3，4-二氯苯基461 6(R)4-(2-氨基乙基)苯基1-甲基乙基乙基Cl3，4-二氯苯基HCl504 7(S)4-[2-(叔丁氧基-酰氨基)-乙基]苯基1-甲基乙基乙基I3，4-二氯苯基604 8(S)4-(2-氨基乙基)苯基1-甲基乙基乙基Cl3，4-二氯苯基HCl504 9(S)4-(2-氨基乙基)苯基1-甲基乙基乙基Cl3，4-二氯苯基HCl490II.化学式(I)的有代表性的化合物，其中T＝碳；U＝-N+R5-；m＝0；R＝R1＝R2＝R3＝R4＝氢；F＝键；Q＝-CH2-；E＝-C(O)NH-以及其他基团定义如下：化合物#立体化学Ar R5X-Ar1质谱m/e 1(RS)4-氨基-5-氯-2-甲氧基苯基甲基I3，4-二氯苯基470III.化学式(I)的有代表性的化合物，其中T＝-N+R5-；U＝碳；m＝1；R＝R1＝R2＝R3＝氢；F＝键；Q＝-CH2-；E＝-NHC(O)NH-以及其他基团定义如下：化合物#立体化学Ar R4R5X-Ar1 M.Pt.℃质谱m/e 1(R)3，4，5-三甲氧基苯基1-甲基乙基乙基I3，4-二氯苯基566 2(R)3-甲氧基苯基1-甲基乙基乙基I3，4-二氯苯基506 3(R)3，5-二甲氧基苯基1-甲基乙基乙基I3，4-二氯苯基536 4(R)3-乙酰基苯基1，1-二甲基乙基乙基I3，4-二氯苯基 5(R)3，5-二甲氧基苯基1，1-二甲基乙基乙基I3，4-二氯苯基 6(R)3-乙酰基苯基1-甲基乙基乙基I3，4-二氯苯基520 7(R)3-甲氧基苯基1，1-二甲基乙基乙基I3，4-二氯苯基 8(R)3-甲氧基羰基苯基1-甲基乙基乙基I3，4-二氯苯基534 9(R)2，5-二甲氧基苯基1，1-二甲基乙基乙基I3，4-二氯苯基 10(R)2，3，4-三甲氧基苯基1-甲基乙基乙基I3，4-二氯苯基566 11(R)3-羧基苯基1-甲基乙基乙基I3，4-二氯苯基520 12(R)2-乙基苯基1，1-二甲基乙基乙基I3，4-二氯苯基 13(S)3-甲氧基苯基1-甲基乙基乙基I3，4-二氯苯基506 14(R)3，4，5-三甲氧基苯基1-甲基乙基甲基I3，4-二氯苯基 15(R)3-甲氧基苯基1-甲基乙基甲基I3，4-二氯苯基 16(R)3，4，5-三甲氧基苯基1-甲基乙基2-羟基乙基Cl3，4-二氯苯基 17(R)3，4，5-三甲氧基苯基1-甲基乙基乙氧基羰基甲基I3，4-二氯苯基 18(R)3，4，5-三甲氧基苯基1-甲基乙基苄基I3，4-二氯苯基131-207 19(R)3，4，5-三甲氧基苯基H甲基I3，4-二氯苯基102-108 20(R)3，4，5-三甲氧基苯基1-甲基乙基乙基I3，4-二氯苯基 21(R)3，4，5-三甲氧基苯基1-甲基乙基甲基I3，4-二氯苯基123.7-138 22(R)3，4，5-三甲氧基苯基1-甲基乙基羧甲基I3，4-二氯苯基
虽然上面给出了本发明最宽的定义，化学式(I)表示的一些化合物是优选的。
(I)优选的化合物组是其中：
T是-N+R5-，其中R5是烷基、羟基烷基、烷氧基羰基烷基，优选甲基、乙基、2-羟基乙基、3-羟基丙基、甲氧基羰基甲基、乙氧基羰基甲基，最优选甲基、乙基或2-羟基乙基；
m是1；
R、R1、R2和R3是氢；
F是键；
Q是亚烷基链，更优选亚甲基或亚乙基，最优选亚甲基。
在组(I)中，更优选的化合物组是其中：(A)E是-C(O)NH-；及
R4是烷基或杂烷基，优选1-甲基乙基、1，1-二甲基乙基、2-甲基丙基、3-羟基丙基、1-羟基乙基或2-羟基乙基，更优选1-甲基乙基或1，1-二甲基乙基。
在优选和更优选的组中，更加优选的化合物组是其中：
与R3和R4基团连接的碳原子的立体化学是(R)型；
Ar是杂芳基或芳环，优选吡啶-2-基、吡啶-3-基、喹啉-3-基或5-甲基噻吩-2-基环，或任选被一、二或三个取代基取代的苯环，取代基选自烷基、杂烷基、烷氧基、-COR(其中R是烷基)、-SO2R(其中R是烷基、氨基或单-或双取代氨基)、亚甲二氧基、羟基、卤代基、酰氨基、氨基、单-或双取代氨基、-CONR′R″、-(亚烷基)-CONR′R″(其中R′和R″是氢或烷基)、-COOR、-(亚烷基)-COOR(其中R是氢或烷基)或-NRSO2R′(其中R是氢或烷基及R′是烷基、氨基或单-或双取代氨基)，更优选任选被一、二或三个取代基取代的苯环，取代基选自甲基、甲氧基、氟、氯、二甲氨基、乙酰基、羟基、氨基、亚甲二氧基、-SO2Me、2-乙酰氨基乙基、2-[(R)-氨基-3-甲基丁酰-氨基]乙基、2-氨基乙基、氨基甲基、羟甲基、氨基羰基、二甲基氨基羰基、-COOH、羧甲基、甲氧基羰基甲基、氨基羰基甲基、二甲基氨基羰基甲基、乙酰氨基甲基、甲基磺酰氨基、甲基磺酰氨基甲基、二甲基氨基磺酰氨基甲基、或二甲氨基，最优选苯基、4-氯代苯基、3，4-二氟代苯基、4-甲基苯基、4-甲氧基苯基、4-羟基苯基、4-二甲基氨基苯基、4-氨基羰基苯基、4-乙酰基苯基、4-乙酰氨基苯基、3，4-亚甲二氧基苯基、4-甲基磺酰基苯基、4-[(2-乙酰氨基)乙基]苯基、4-{2-[(R)-氨基-3-甲基丁酰氨基]乙基}苯基、4-(2-氨基乙基)苯基、4-(氨基甲基)苯基、4-(羟甲基)苯基、2，5-二甲氧基苯基、3，5-二甲氧基苯基、3，4-二甲氧基苯基、3，4，5-三甲氧基苯基、4-氨基羰基-甲基苯基、4-乙酰氨基甲基苯基、4-甲基磺酰-氨基苯基、4-甲基磺酰氨基-甲基苯基或4-氨基苯基；及
Ar1是杂芳基或芳环，优选1-乙酰吲哚-3-基、3-甲基苯并-噻吩-2-基、5-硝基噻吩-3-基或任选被一、二或三个取代基取代的苯环，取代基选自烷基、杂烷基、烷氧基、卤代基、三氟甲基、硝基或单-或双取代氨基，更优选被一或两个取代基取代的苯环，取代基选自甲基、甲氧基、氯、氟、三氟甲基或硝基，最优选4-硝基苯基、4-三氟甲基苯基、4-氯代苯基、3，4-二氟代苯基、2，3-二氯代苯基、3-甲基-4-硝基苯基、3-氯-4-氟苯基或3，4-二氯代苯基。(B) 在组(I)中，另一个更优选的化合物组是其中：
E是-NHC(O)NH-；及
R4是烷基或杂烷基，优选1-甲基乙基、1，1-二甲基乙基、2-甲基丙基、3-羟基丙基、1-羟基乙基或2-羟基乙基，更优选1-甲基乙基或1，1-二甲基乙基。
在优选和更优选的组中，更加优选的化合物组是其中：
与R3和R4基团连接的碳原子的立体化学是(R)型；
Ar是杂芳基或芳环，优选吡啶-2-基、吡啶-3-基、喹啉-3-基或5-甲基噻吩-2-基环，或任选被一、二或三个取代基取代的苯环，取代基选自烷基、杂烷基、烷氧基、-COR(其中R是烷基)、-SO2R(其中R是烷基、氨基或单-或双取代氨基)、亚甲二氧基、羟基、卤代基、酰氨基、氨基、单-或双取代氨基、-CONR′R″、-(亚烷基)-CONR′R″(其中R′和R″是氢或烷基)、-COOR、-(亚烷基)-COOR(其中R是氢或烷基)或-NRSO2R′(其中R是氢或烷基，及R′是烷基、氨基或单-或双取代氨基)，更优选任选被一、二或三个取代基取代的苯环，取代基选自甲基、甲氧基、氟、氯、二甲氨基、乙酰基、羟基、氨基、亚甲二氧基、-SO2Me、2-乙酰氨基乙基、2-[(R)-氨基-3-甲基丁酰氨基]乙基、2-氨基乙基、氨基甲基、羟甲基、氨基羰基、二甲基氨基羰基、-COOH、羧甲基、甲氧基羰基甲基、氨基羰基甲基、二甲基氨基羰基甲基、乙酰氨基甲基、甲基磺酰氨基、甲基磺酰氨基甲基、二甲基氨基磺酰氨基甲基、或二甲氨基，最优选苯基、3-甲氧基苯基、3-甲基磺酰基苯基、3-二甲氨基苯基、3-乙酰氨基苯基、3-乙酰基苯基、3-[(2-乙酰氨基)乙基]-苯基、3-氨基羰基苯基、3-羧基苯基、2，5-二甲氧基苯基、3，5-二甲氧基苯基、3，4-二甲氧基苯基、3，4，5-三甲氧基苯基、3-氨基羰基甲基苯基、3-二甲氨基羰基苯基、3-乙酰氨基甲基苯基、3-羧甲基苯基、3-甲磺酰氨基苯基、3-甲磺酰氨基甲基苯基或3-氨基苯基；及
Ar1是杂芳基或芳环，优选1-乙酰吲哚-3-基、3-甲基苯并-噻吩-2-基、5-硝基噻吩-3-基或任选被一、二或三个取代基取代的苯环，取代基选自烷基、杂烷基、烷氧基、卤代基、三氟甲基、硝基或单-或双取代氨基，更优选被一或两个取代基取代的苯环，取代基选自甲基、甲氧基、氯、氟、三氟甲基或硝基，最优选4-硝基苯基、4-三氟甲基苯基、4-氯代苯基、3，4-二氟代-苯基、2，3-二氯代苯基、3-甲基-4-硝基苯基、3-氯-4-氟苯基或3，4-二氯代苯基。
(II)另一组优选的化合物组是其中：
R4是烷基或杂烷基，优选1-甲基乙基、1，1-二甲基乙基、2-甲基丙基、3-羟基丙基、1-羟基乙基或2-羟基乙基，更优选1-甲基乙基或1，1-二甲基乙基。
(III)再一组优选的化合物组是其中：
E是-C(O)N(R6)-或-N(R7)C(O)N(R6)-，优选-C(O)NH-或-NHC(O)NH-。
进一步优选的化合物是化学式I的化合物C，其中：
T是-N+R5-，其中R5是烷基；
F是一个化学键；及
R、R1、R2和R3是氢。
1. C的化合物C，其中：
m是1；
R5是甲基或乙基；及
Q是一种亚甲基链。
2. 1的化合物，其中E是-C(O)N(R6)-、-SO2N(R6)-、-N(R7)C(O)N(R6)-或-N(R7)C(O)-，其中R6和R7是氢。
3. 2的化合物，其中E是-C(O)NH-；及R4是烷基或杂烷基。
4. 3的化合物，其中Ar和Ar1是任选取代的芳环。
5. 4的化合物，其中：
Ar是任选被一、二或三个取代基取代的苯环，取代基选自烷基、杂烷基、烷氧基、-COR(其中R是烷基)、-SO2R(其中R是烷基、氨基或单-或双取代氨基)、亚甲二氧基、羟基、卤代基、酰氨基、氨基、单-或双取代氨基、-CONR′R″、-(亚烷基)-CONR′R″(其中R′和R″是氢或烷基)、-COOR、-(亚烷基)-COOR(其中R是氢或烷基)或-NRSO2R′(其中R是氢或烷基，及R′是烷基、氨基或单-或双取代氨基)；及
Ar1是任选被一、二或三个取代基取代的苯环，取代基选自烷基、杂烷基、烷氧基、卤代基、三氟甲基、硝基或单-或双取代氨基。
6. 5的化合物，其中：
R4是1-甲基乙基、1，1-二甲基乙基、2-甲基丙基、3-羟基丙基、1-羟基乙基或2-羟基乙基；及
Ar1是4-硝基苯基、4-三氟甲基苯基、4-氯代苯基、3，4-二氟代苯基、2，3-二氯代苯基、3-甲基-4-硝基苯基、3-氯-4-氟苯基或3，4-二氯代苯基。
7. 6的化合物，其中：
Ar是苯基、4-氯代苯基、3，4-二氟代苯基、4-甲基苯基、4-甲氧基苯基、4-羟基苯基、4-二甲基氨基苯基、4-氨基羰基苯基、4-乙酰基苯基、4-乙酰氨基苯基、4-二甲基氨基羰基苯基、3，4-亚甲二氧基苯基、4-甲基磺酰基苯基、4-[(2-乙酰氨基)乙基]苯基、4-{2-[(R)-氨基-3-甲基丁酰氨基]乙基}苯基、4-(2-氨基乙基)苯基、4-(氨基甲基)苯基、4-(羟甲基)苯基、2，5-二甲氧基苯基、3，5-二甲氧基苯基、3，4-二甲氧基苯基、3，4，5-三甲氧基苯基、4-氨基-羰基甲基苯基、4-乙酰氨基甲基苯基、4-甲基磺酰氨基苯基、4-甲基磺酰氨基甲基苯基或4-氨基苯基。
8. 2的化合物，其中E是-NHC(O)NH-；及R4是烷基或杂烷基。
9. 8的化合物，其中Ar和Ar1是被任选取代的芳环。
10. 9的化合物，其中：
Ar是任选被一、二或三个取代基取代的苯环，取代基选自烷基、杂烷基、烷氧基、-COR(其中R是烷基)、-SO2R(其中R是烷基、氨基或单-或双取代氨基)、亚甲二氧基、羟基、卤代基、酰氨基、氨基、单-或双取代氨基、-CONR′R″、-(亚烷基)-CONR′R″(其中R′和R″是氢或烷基)、-COOR、-(亚烷基)-COOR(其中R是氢或烷基)或-NRSO2R′(其中R是氢或烷基，及R′是烷基、氨基或单-或双取代氨基)；及
Ar1是任选被一、二或三个取代基取代的苯环，取代基选自烷基、杂烷基、烷氧基、卤代基、三氟甲基、硝基或单-或双取代氨基。
11. 10的化合物，其中：
R4是1-甲基乙基、1，1-二甲基乙基、2-甲基丙基、3-羟基丙基、1-羟基乙基或2-羟基乙基；及
Ar1是4-硝基苯基、4-三氟甲苯基、4-氯代苯基、3，4-二氟代苯基、2，3-二氯代苯基、3-甲基-4-硝基苯基、3-氯-4-氟苯基或3，4-二氯代苯基。
12. 11的化合物，其中：
Ar是苯基、3-甲氧基苯基、3-甲磺酰基苯基、3-二甲氨基苯基、3-乙酰氨基苯基、3-乙酰基苯基、3-二甲氨基羰基苯基、3-[(2-乙酰氨基)乙基]-苯基、3-氨基羰基苯基、3-羧基苯基、2，5-二甲氧基苯基、3，5-二甲氧基-苯基、3，4-二甲氧基-苯基、3，4，5-三甲氧基苯基、3-氨基-羰基甲基苯基、3-乙酰氨基-甲基苯基、3-羧甲基苯基、3-甲磺酰氨基苯基、3-甲磺酰氨基甲基苯基或3-氨基苯基。
13. 12的化合物，其中：
Ar1是3，4，5-三甲氧基苯基；
Ar是3，4-二氯代苯基；
R4是1-甲基乙基；
R5是甲基；
X-是碘化物，即4-(3，4-二氯代苄基)-1-甲基-1-{3-甲基-2-(R)-[3-(3，4，5-三甲氧基苯基)脲基]丁基}哌啶鎓碘化物。
更进一步优选的实施方案是化学式I的化合物D，其中：
T是-N+R5-，其中R5是羟烷基；
F是一个化学键；及
R，R1，R2和R3是氢。
1.化合物D，其中：
m是1；
R5是甲基或乙基；及
Q是一种亚甲基链。
此外优选的实施方案是化学式I的化合物E，其中：
T是-N+R5-，其中R5是烷氧基羰基烷基；
F是一个化学键；及
R，R1，R2和R3是氢。
1.化合物E，其中：
m是1；
R5是甲基或乙基；及
Q是一种亚甲基链。
本领域的技术人员了解可用很多方法制备本发明的化合物。优选的方法包括但不限于下面叙述的综合合成步骤。
用于制备这些化合物的原料和试剂或采用商业供应，如Aldrich化学公司(美国威斯康星州密尔沃基市)、Bachem(美国加里福尼亚州托伦斯市)、Emka-Chemie或Sigma(美国密苏里州圣路易斯市)，或通过本领域技术人员已知的方法按照文献阐述的步骤来制备，文献如Fieser和Fieser：“有机合成试剂”1-15卷(John Wiley and Sons，1991)、Rodd：“碳化合物化学”1-5卷及补篇(Elsevier Science出版社，1989)、“有机反应”1-40卷(John Wiley and Sons，1991)、March：“高等有机化学”(John Wileyand Sons，1992)及Larock：“有机转换大全”(VCH出版社，1989)。这些方案流程仅说明了可合成本发明化合物的一些方法，涉及这一公开内容的本领域技术人员可对这些方案流程进行修改或提出建议。
如果需要，原料和反应中间体可使用常规技术来分离和纯化，常规技术包括但不限于过滤、蒸馏、结晶、层析等。可使用常规方法对这些材料进行表征，常规方法包括物理常数和光谱数据。化学式(I)化合物的合成
通常化学式(I)化合物，其中m、R、R1、R2、R3、R4、R5、Q、Ar及Ar1按上述最宽意义定义，是通过将化学式II(a-b)的氨基烷基衍生物和化学式II(c-d)的羧基烷基衍生物转变为化学式(Ia)化合物，然后它再转变为化学式(I)的季盐来制备的，如下列图1所表示。图1
下文流程A-J详细地叙述了化学式II(a-d)化合物的合成和它们到化学式(Ia)和(I)化合物的转变。化学式II(a-d)化合物的合成化学式(IIa)化合物的制备
化学式(IIa)化合物，其中T是氮、m至少是1和R、R1、R2、R3、R4、R5、Q及Ar1按上述最宽意义定义，按照下列流程A的说明来制备。流程A
通常，化学式(IIa)化合物是通过两步制备的，如下文详细描述的，首先将化学式1化合物转变为化学式2的N-保护的氨基烷基衍生物，然后除去2的氨基保护基。
化学式2的N-保护的氨基烷基衍生物[其中PG是氨基保护基(如，叔丁氧基羰基(BOC)、苄氧基羰基(CBZ)、苄基等)及R6是氢]是通过化学式1化合物和化学式3化合物的反应来制备的：PG-N(R6)CR3R4(CHR)m-1X(3)
其中X是一种醛、酮(X＝-C(O)R其中R是烷基)，羧基或反应性羧基衍生物如酸的卤化物。制备2使用的反应条件取决于X基团的性质，假如X是醛或酮基，反应在还原氨基化反应条件下，即在室温在适合的还原剂(如氰基硼氢化钠、三乙酸基硼氢化钠等)和一种有机酸(如冰醋酸、三氟醋酸等)存在下进行，适合反应的溶剂是卤代烃(如1，2-二氯乙烷、氯仿等)。假如X是羧基，反应在适合的偶联试剂(如N，N-二环己基碳二亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺等)存在下在适合的有机溶剂(二氯甲烷、四氢呋喃等)中给出一种酰胺中间体。然后该酰胺中间体和适合的还原剂(如乙硼烷、氢化铝锂等)在醚类有机溶剂如乙醚或四氢呋喃中反应提供化学式2化合物。假如X是酸的衍生物如酸的氯化物，反应在适合的碱如三乙胺、吡啶存在下在有机溶剂(二氯甲烷、二氯乙烷、N，N-二甲基甲酰胺等)中进行给出酰胺中间体，如上所述酰胺中间体被还原为化合物2。
通常化学式3化合物可使用商品或它们可通过有机化学领域熟知的方法制备。下文详细说明和描述该步骤的一些实例。(i)化学式3的一种醛(X是-CHO，及m-1＝0)很容易由相应的化学式3的α-氨基酸制备，该α-氨基酸中X是羧基及m-1＝0，可以是天然的或人工合成的。首先把α-氨基酸转变为相应的酯，接着用适合的还原剂如DIBAL-H_将酯基还原为醛基。如果需要，化学式3的一种m-1＝1或2的醛可从化学式3的一种m-1＝0的醛或酮(X＝-COR其中R是烷基，)在Wittig反应条件下制备。例如，一种m-1＝1及R是氢或烷基的醛3，是将化学式3中相应的m-1＝0的醛或酮与一种Wittig试剂缩合，该Wittig试剂是由氯甲基甲基醚衍生的，接着酸性水解所生成的烯醇醚中间体来制备的。一种m-1＝2及R是氢或烷基的醛3，是通过将化学式3中相应的m-1＝0的醛或酮与分别由溴代乙酸酯或2-溴代丙酸酯衍生的Wittig试剂缩合，然后连续还原所生成的α，β-不饱和酯的双键和酯基来制备的。化学式3中m-1＝0的酮可由化学式3的α-氨基酸制备，先将α-氨基酸3的转变为Weinreb酰胺，然后用化学式为RMgBr其中R是烷基的Grignard试剂处理。或者醛可通过氧化α-氨基醇中的羟基来制备，α-氨基醇如2-氨基-1-丙醇等。
一般天然的和人工合成的氨基酸及它们相应的酯都可在商业上从供应商如Aldrich和Bachem处得到。人工合成氨基酸的实例包括高丝氨酸、高半胱氨酸、N-α-甲基精氨酸、正亮氨酸、N-甲基异亮氨酸、苯基甘氨酸、羟基脯氨酸、焦谷氨酸、鸟氨酸、2-氨基异丁酸、2-氨基丁酸、β-环己基丙氨酸、3-(1-萘基)丙氨酸、3-(2-萘基)丙氨酸、瓜氨酸、2-哌啶酸、哌嗪酸、4-氯苯基丙氨酸、4-氟苯基丙氨酸、肌氨酸、丝氨酸乙酯和丙氨酸甲酯，是商业上可得到的。(ii)X是羧基及m-1＞0的化学式3化合物由相应的化学式3的醛(X是-CHO)通过使用适合的氧化剂(如高锰酸钾等)使醛基氧化来制备，化学式3的醛(X是-CHO)的制备如上文(i)中所述。或者参阅(i)，它们可由Wittig反应形成的α，β-不饱和酯，通过本领域已知的方法，使双键还原然后酯基水解来制备。(iii)X是-C(O)R(其中是烷基)及m-1＝0、1或3的化学式3化合物由相应的化学式3的醛(X是-CHO)来制备，使用Grignard试剂使其烷基化，然后用适合的氧化剂如高锰酸钾等使所生成的醇氧化。或者，如上文(i)所述，它们可由相应的化学式3的酸来制备。(iv)X是酸衍生物如酸氯化物的化学式3化合物由相应的化学式3的酸(X是-COOH)通过使用适合的氯化试剂(如草酰氯、亚硫酰氯等)在适合的溶剂中使羧基氯化来制备，化学式3的酸(X是-COOH)的制备如上文(iii)中所述。
另外，化学式2化合物也可通过化学式1化合物和化学式4烷基试剂反应来制备：PG-N(R6)CR3R4(CHR)mY4其中Y是烷基化条件下的离去基团，如卤代基(如氯、溴或碘)或磺酰氧基(如甲磺酰氧基或4-甲基苯基磺酰氧基或三氟甲磺酰氧基)。反应在碱存在下进行，碱如碳酸钠、氢化钠、三乙胺等。适合的溶剂是非质子有机溶剂如四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺等。
通常，Y是卤代基或磺酰氧基的化学式4化合物可由化学式3化合物来制备，先将醛基、酮基或羧基还原为醇，接着分别用合适的卤化试剂(如亚硫酰氯、亚硫酰溴、三苯基膦参与的四溴化碳等)或磺酰化试剂(如甲基磺酰氯、对甲苯磺酰氯和三氟甲磺酸酐)处理，适合的醛基、酮基或羧基还原试剂包括氢化铝锂、硼烷等。
在一些实例中，化学式(IIa)的化合物可通过化学式1化合物与一种共轭硝基-烯烃在Michael加成反应条件下反应，然后在常规氢化反应条件下还原来制备。共轭硝基-烯烃可从商业上得到，或可通过已知的文献步骤来制备，文献如参阅E.J.Corey等：J.Am.Chem.Soc，100(19)，8294-5，(1978)。
N-保护的氨基烷基衍生物2通过除去氨基保护基而转变为化学式(IIa)的化合物，所使用的条件取决于保护基的本性。例如该保护基是叔丁氧基羰基，它在酸性水解条件下除去，同时如保护基是苄基，它在催化氢化反应条件下除去。
如果需要，R6不是氢的化学式(IIa)化合物可通过相应R6是氢的化学式(IIa)化合物的烷基化来制备，烷基化是使用烷基化试剂R6Y其中Y是离去基团，在烷基化状态下使用上述反应条件进行的。
化学式1化合物可通过已知步骤由适合的N-保护哌啶酮制备。下文叙述这些步骤的一些实例：(i)Q是-C(O)-或亚烷基链的化学式1化合物的制备是通过适合的N-保护-4-哌啶酮和一种Wittig试剂Br-(Ph)3P+-亚烷基-Ar1反应给出一种亚烷基中间体，用硼烷处理该亚烷基中间体，接着用氧化试剂如铬酸氧化所生成的烷基硼烷，氧化反应条件叙述在Garg Brown：J.Am.Chem.Soc.83，2951(1961)中，再除去N-保护基而提供了Q是-CO-的化学式1化合物。还原亚烷基中间体中的双键接着除去N-保护基提供了Q是亚烷基链的化学式1化合物。实施例1给出了用这种方法合成Q是亚烷基链的化学式1哌啶的详细叙述。
(ii)Q是-O-亚烷基-Ar1的化学式1化合物是通过4-羟基哌啶和烷基化试剂在上文定义的烷基化条件下反应来制备的，烷基化试剂的化学式为Ar1-Q-Y其中Y是离去基团。
(iii)Q是-NH-亚烷基-Ar1的化学式1化合物是在上述还原氨基化反应条件下通过N-保护-4-哌啶酮和化学式为NH2-亚烷基-Ar1的胺反应来制备的。
4-羟基哌啶和4-哌啶酮是商业上可得到的。化学式(IIb)化合物的制备
化学式(IIb)化合物，其中U是氮，m是1及R、R1、R2、R3、R4、R6、Q和Ar1如上文在其最宽意义上定义，可由化学式5化合物按照流程B的说明制备。流程B
m是1的化学式(IIb)化合物的制备如方法(a)所示，可通过化学式5化合物和化学式6膦酸酯内鎓盐在Wittig反应条件下，即在非亲核强碱(如氢化钠、氨基钠等)存在下在适宜的非质子溶剂中反应来给出化学式7的α，β-不饱和酯。首先将7转变为醛，接着用有机金属试剂如化学式分别为R4MgBr或R4Li的Grignard试剂或有机锂试剂处理，使该α，β-不饱和酯7转变为相应的醇衍生物8a(m＝1)。在氢化反应条件下使双键还原，用适宜的还原试剂如DIBAL-H_将酯基还原为醛基。然后通过将醇基氧化为酮基，接着用化学式为NH(R6)的氨在还原氨基化反应条件下处理使醇8a转变为化学式(IIb)化合物。该氧化反应是使用适合的氧化剂如重铬酸吡啶鎓盐在非质子溶剂如二甲基甲酰胺中实施的。
m是0的化学式(IIb)化合物，如方法(b)所示，可由化学式9化合物制备，通过将酯基还原为醛基，接着用适宜的有机金属试剂处理使9转变为相应的醇衍生物8b(m＝0)。然后使用上述反应条件通过实施氧化和还原氨基化步骤使化合物8b转变为m是0的化学式(IIb)化合物。m是0的化学式(IIb)化合物也可通过WO92/12128所叙述的方法制备。
化学式5或9化合物是在上文流程A中叙述的烷基化条件下，使用化学式为Ar1-Q-Y其中Y是离去基团的化合物使4-哌啶酮或3-哌啶甲酸乙酯的N-烷基化来制备的。化学式(IIc)化合物的制备
化学式(IIc)羧基烷基衍生物，其中T是氮，m、R1、R2、R3、R4、Q和Ar1如上文在其最宽意义上定义，可由化学式1化合物按照流程C的说明制备。流程C
如上所示，将化学式1化合物与化学式10其中Y是卤代基或磺酰氧基的烷基化试剂反应，接着水解酯基来制备化学式(IIc)羧基衍生物，该烷基化反应是在上述((参阅流程A)反应条件下实施的。该酯基的水解是在醇有机溶剂如甲醇、乙醇等中，在水成碱(如氢氧化钠、氢氧化锂等)存在下实施的。反应在室温或加热进行。
此外，R3是氢的化学式(IIc)羧基乙基衍生物的制备是将化学式1化合物与化学式11的α，β-不饱和酯在Michael加成反应条件下，即在适当的碱如甲醇盐的存在下及在非质子有机溶剂(如甲醇、乙醇等)中反应，给出化学式12的3-丙酸酯衍生物。然后水解12中的酯基提供相应的R3是氢的化学式(IIc)羧基乙基衍生物。
化学式1化合物的制备如在上文流程A中所述。化学式10和11的化合物或是可从商业得到，或可通过本领域已知的方法制备。例如卤代酸和α，β-不饱和酯如2-溴-2-甲基丙酸甲酯、2-溴丙酸甲酯、3-溴-2-甲基丙酸甲酯、α-溴代苯基乙酸甲酯、甲基丙烯酸甲酯是商业有售的。化学式(IId)化合物的制备
化学式(IId)羧基烷基衍生物，其中U是氮，m、R1、R2、R3、R4、Q和Ar1如上文在其最宽意义上定义，可分别由化学式5或13的化合物按照流程D的说明制备。流程D
如上文所述，化学式(IId)羧基烷基衍生物可通过化学式5或13的化合物与化学式为Br(Ph3P)(CHR)mCR3R4CO2Et(m＝1)的Wittig试剂反应，接着将所生成的酯14a或14b中的双键还原及酯基水解为酸来制备。由化学式II(a-d)化合物合成化学式(Ia)化合物
化学式(Ia)化合物，其中E是-C(O)N(R6)-，是按照流程E所述来制备的：流程E
化学式(Ia)化合物，其中E是酰氨基，其制备方法或是：
(i)将化学式II(a-b)化合物和酰化试剂Ar-F-C(O)L在酰化条件下反应，酰化试剂Ar-F-C(O)L中L是离去基团如卤代基(特别是Cl或Br)或咪唑基。适合反应的溶剂包括非质子溶剂(如二氯甲烷、四氢呋喃、二噁烷等)。当使用酰卤作酰化试剂时，反应是在非亲核性有机碱(如三乙胺或吡啶，优选吡啶)存在下实施的；
或
(ii)将化学式II(a-b)化合物与一种酸酐一起加热。适合反应的溶剂是四氢呋喃、二噁烷等。
化学式(Ia)化合物，其中E是-N(R7)C(O)N(R6)-或-N(R7)C(S)N(R6)-，是按照流程F所述来制备的：流程F
化学式(Ia)化合物，其中E是脲基/硫脲基，其制备方法无论是：
(i)将化学式II(a-b)化合物和活化试剂如碳酰二咪唑/硫代碳酰二咪唑反应，接着用一级胺或二级胺亲核置换咪唑基。反应在室温发生。适宜的溶剂包括极性有机溶剂(如四氢呋喃、二噁烷等)；
(ii)将化学式II(a-b)化合物和氨基甲酰卤/硫代氨基甲酰卤反应，反应在非亲核性有机碱存在下实施，适合反应的溶剂是二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、四氢呋喃或吡啶；或
(iii)将化学式II(a-b)化合物和异氰酸酯/硫代异氰酸酯在非质子有机溶剂(如苯、四氢呋喃、二甲基甲酰胺等)中反应。
实施例1给出了化学式(IIa)化合物转变为E是-NHC(O)NH-的化学式(Ia)化合物的详细说明。
E是-SO2N(R6)-的化学式(Ia)化合物是按照流程G所述来制备的：流程G
化学式(Ia)化合物，其中E是亚磺酰氨基，可通过化学式II(a-b)化合物和磺酰卤反应来制备，反应条件如流程E方法(i)中所述。磺酰卤采用商品或可按照文献中所述方法制备，这些文献是(1)R.F.Langer：Can.J.Chem.61，1583-1592，(1983)；(2)R.Aveta等：Gazetta Chimica Italiana，116，649-652，(1986)；(3)J.F.King和J.H.Hillhouse：Can.J.Chem，54，498，(1976)；及(4)M.J.Szymonifka和J.V.Heck：Tet.Lett.；30，2869-2872，(1989)。
E是-N(R7)SO2N(R6)-的化学式(Ia)化合物是按照流程H所述来制备的：流程H
化学式(Ia)化合物，其中E是氨磺酰氨基，可通过化学式II(a-b)化合物和氨磺酰卤反应来制备，反应条件如流程E方法(i)中所述。氨磺酰卤可采用商品或可按照文献中所述方法制备，这些文献是R.Graf：GermanPatent，931225(1952)及J.D.Catt和W.L.Matler：J.Org.Chem.，39，566-568，(1974)。
E是-N(R7)C(O)-的化学式(Ia)化合物是按照流程I所述来制备的：流程I
化学式(Ia)化合物，其中E是反转的酰胺，可通过化学式II(c-d)化合物和一种胺在适合的偶联试剂(如N，N-二环己基碳二亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺等)存在下、在适当的有机溶剂中反应来制备，适当的有机溶剂如二氯甲烷、四氢呋喃、二甲基甲酰胺等。由化学式(Ia)化合物合成化学式(I)化合物
T或U是-N+R5-的化学式(I)化合物可由化学式(Ia)化合物按流程J所示制备。流程J
通过将化学式(Ia)化合物与化学式为R5X的烷基化试剂反应使其转变为T或U是-N+R5-的化学式(I)化合物，其中R5的定义与本发明概述中定义相同，及X是离去基团如卤代基(溴或碘，优选碘)、对甲苯磺酸酯基、甲磺酸酯基等。烷基化试剂如碘甲烷、碘乙烷、甲苯磺酸乙酯、2-羟基碘乙烷等可利用商品。
使用适当的离子交换树脂如Dowex 1x8-50可将X-是碘化物的化学式(Ia)化合物转变为相应的X-是氯化物的化学式(I)化合物。
实施例1-3给出了化学式(Ia)化合物转变为E是-NHC(O)NH-的化学式(I)化合物的详细说明。
本发明化合物是CCR-3受体拮抗剂，因此将抑制趋化因子如RANTES、MCP-3和eotaxin引起的嗜曙红细胞、T细胞、嗜碱细胞及柱状细胞的补充。通常，本发明季铵盐比它们相应的非季铵化哌啶类似物更有效。因此，本发明化合物和含有它们的组合物在治疗嗜曙红细胞诱导的疾病例如哺乳动物特别是人类中的哮喘、鼻炎、湿疹和寄生虫传染病是有用的。
本发明化合物的CCR-3拮抗活性可通过体外试验测定，如配体结合试验和趋化性试验，在实施例5、6和7中有更详细的说明。也可通过Balb/c鼠模型中卵清蛋白诱导的哮喘进行体内试验，在实施例8中有更详细的说明。
通常，依据任何公认的适于相同应用药剂的给药模式，本发明化合物以治疗学上的有效量给药。本发明化合物即活性成分的实际数量将取决于诸多因素如被治疗疾病的严重性、所使用化合物的有效性、给药途径和形式及其他因素。
化学式(I)化合物治疗学上的有效量可以是接受者每千克体重每天大约0.005～20mg；优选大约0.01～10mg/kg/天。这样，给70kg重的人用药，最优选剂量范围为每天大约0.7mg～0.7g。
通常，本发明化合物作为药用组合物通过下列任何一个途径给药：口服、全身(如穿过皮肤、鼻内或通过栓剂)或注射(如肌肉、静脉或皮下)给药。优选给药方式是口服，使用常规的按日剂量服用，可根据病情程度调节。组合物可做成片剂、丸剂、胶囊、半固体、粉剂、持续释放配剂、溶液、酏剂、气雾剂或任何其他适当的组合物。
配方的选择取决于各种因素，如给药的模式(如口服，则优选片剂、丸剂或胶囊型配方)及该药物本体的生物可利用性。
用于注射或口服递送的药物的脂质配方中，药物及油脂溶解在适当的有机溶剂如叔丁醇、环己烷(1％乙醇)中。该溶液冷冻干燥，油脂混合物悬浮于水缓冲液中让其形成脂质体。如果需要脂质体的尺寸可通过超声处理来减小。(参阅Frank Szoka，Jr.and Demetrios Papahadjopoulos：“脂质囊(脂质体)的比较性质及制备方法”，Ann.Rev.Biophys.Bioeng.，9：467-508(1980)；和D.D.Lasic：“脂质体的新颖应用”Trends in Biotech.，16：467-608，(1998))。
目前，尤其对生物可利用性差的药物，以增加表面积即降低颗粒尺寸可提高生物可利用性的原理为基础发展制药配方。例如，美国专利4,107,288叙述了一种制药配方，具有颗粒尺寸在10～1,000 nm的范围，其中活性物质被支载在交联高分子基体上。美国专利5,145,684叙述了一种制药配方的生产，其中药物在表面改性剂存在下研磨成纳米颗粒(平均颗粒尺寸为400 nm)，然后分散在液体介质中给出一种制药配方，它显示了非常高的生物可利用性。
通常，上述组合物包括化学式(I)化合物，它与至少一种制药可接受的赋形剂混合。容许的赋形剂是无毒的，它帮助给药并且对化学式(I)化合物的治疗效益没有副效应。这样的赋形剂可以是本领域技术人员通常采用的任意固体、液体、半固体或在气雾剂组合物中为气体的赋形剂。
固体制药赋形剂包括淀粉、纤维素、滑石粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、凝胶、麦芽、大米、面粉、碳酸钙、硅胶、硬脂酸镁、硬脂酸钠、甘油单硬脂酸酯、氯化钠、撇取的干牛奶皮等。液体和半固体赋形剂可选自甘油、丙二醇、水、乙醇和各种油，这些油包括源于石油、动物、蔬菜和合成的油，如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。优选的液体载体，特别对注射溶液而言，包括水、盐水、水性右旋糖、及二醇类。
可使用被压缩的气体将本发明化合物分散在气雾剂型中。适合这个目的的惰性气体有氮气、二氧化碳等。在E.W.Martin编辑的“雷明顿制药科学”(Mack出版社，第18版，1990)中叙述了其它适合的制药赋形剂及它们的配方。
配方中化合物的水平可在本领域技术人员使用的全范围内变化。典型地，以总配方的重量百分数(wt％)为基础，该配方将包含大约0.01～99.99wt％的化学式(I)化合物，其余是一种或多种适合的赋形剂。优选该化合物的存在量在大约1～80 wt％的水平。实施例4叙述了含有化学式(I)化合物的典型制药配方。
实施例
实施例1
4-(3，4-二氯苄基)-1-乙基-1-{3-甲基-2-[3-(3，4，5-三甲氧基苯基)-脲基]丁基}哌啶鎓碘化物(表III，化合物1)步骤1
将正丁基锂(43.2ml，2M在戊烷中，108mmol)缓慢地加到用冰冷却的3，4-二氯苄基三苯基溴化鏻(54g，108mmol)(由等摩尔量的3，4二氯代溴化苄和三苯基膦在四氢呋喃中在65℃搅拌过夜来制备)的无水四氢呋喃(500ml)溶液中。15分钟后，让反应混合物升到室温并再搅拌2小时。加入1-叔-丁氧基羰基-4-哌啶酮(21.42g，108mmol)并继续搅拌过夜。加入己烷(21)，及搅拌反应物，然后过滤。减压浓缩滤液给出41.8g橙色胶状物。在0.5kg快速级二氧化硅上柱层析，用70％二氯甲烷/己烷～100％二氯甲烷梯度淋洗，接着用1％甲醇/二氯甲烷～5％甲醇/二氯甲烷梯度淋洗给出浅棕黄色油状1-(叔-丁氧基羰基)-4-(3，4-二氯亚苄基)哌啶(29g)。步骤2
将氧化铂(0.3g)加到1-(叔-丁氧基羰基)-4-(3，4-二氯亚苄基)哌啶(29g，84.7mmol)在乙酸乙酯(500ml)中的溶液中，及反应混合物在氢气氛围下搅拌过夜。反应混合物通过C盐过滤，浓缩滤液给出棕黄色油状1-(叔-丁氧基羰基)-4-(3，4-二氯苄基)哌啶(30g)。步骤3
将三氟乙酸(50ml)加到1-(叔-丁氧基羰基)-4-(3，4-二氯苄基)哌啶(24g，69.7mmol)在二氯甲烷(150ml)中的溶液中，反应混合物搅拌1小时，减压除去溶剂，接着加入乙酸乙酯(200ml)，所生成的混合物用1N氢氧化钠水溶液调成碱性，分离出有机层，用硫酸镁干燥，减压除去溶剂给出4-(3，4-二氯苄基)哌啶(17.1g)浅棕色固体。步骤4
将D-BOC-缬氨酸(1.3g，5.98mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基-碳二亚胺(1.15g，5.98mmol)加到4-(3，4-二氯苄基)哌啶(1.12g，4.57mmol)在二氯甲烷(15ml)的溶液中，反应混合物在室温在氩气氛围下搅拌，3小时后真空下除去溶剂，加入水(10ml)和乙酸乙酯(25ml)，分离出有机层，用硫酸镁干燥，减压浓缩，柱层析用15-20％乙酸乙酯/己烷淋洗给出粘性泡沫状1-(R)-[4-(3，4-二氯苄基)哌啶-1-基羰基]-N-(叔-丁氧基-羰基)-2-甲基丙胺(1.89g)。步骤5
在室温下往1-(R)-[4-(3，4-二氯苄基)哌啶-1-基羰基]-N-(叔-丁氧基-羰基)-2-甲基丙胺(5.9g.13.2mmol)在二氯甲烷(100ml)中的溶液中加入三氟乙酸(30ml)。4小时后，浓缩反应混合物，剩余物与乙酸乙酯(200ml)和水(100ml)搅拌，同时用15％氢氧化钠水溶液调节pH到8，分离有机层，水层用乙酸乙酯萃取两次，合并的有机部分用硫酸镁干燥，过滤及真空浓缩给出1-(R)-[4-(3，4-二氯苄基)哌啶-1-基羰基-2-甲基丙胺(4.53g)，是无色胶状体。步骤6
往1-(R)-[4-(3，4-二氯苄基)哌啶-1-基羰基-2-甲基-丙胺(4.53g，13.3mmol)在无水四氢呋喃(100ml)的溶液中加入乙硼烷(92.4ml，92.4mmol，1M在四氢呋喃中)，反应混合物在氩气下在65℃搅拌。3小时后，反应混合物在冰浴中冷却，并搅拌下缓慢加入盐酸水溶液(60ml，6N)。反应混合物在真空下浓缩，水溶液在100℃搅拌。1小时后反应混合物冷却到0℃，缓慢加入氢氧化钾小球直致使pH值达到8。溶液用乙酸乙酯(100ml)萃取两次，用硫酸镁干燥，及真空浓缩。将该无色液体(3.84g)层析分离，用含有1％NH4OH的2.5-10％MeOH/CH2Cl2淋洗。该游离胺溶于无水乙醚中，加入盐酸乙醚溶液，提供1-(R)-[4-(3，4-二氯苯基)哌啶-1-基甲基]-2-甲基丙胺的盐酸盐。步骤7
在氩气氛围下将3，4，5-三甲氧基苯基异氰酸酯(1.9g，9.11mmol)加入到1-(R)-[4-(3，4-二氯苯基)哌啶-1-基甲基]-2-甲基丙胺(2.5g，7.59mmol)在二氯甲烷(25ml)的溶液中。溶液在室温搅拌45分钟，接着在38℃搅拌30分钟。反应混合物在真空下浓缩。粗产物在硅胶柱上层析，用含1％NH4OH的1.5-2.5％MeOH/CH2Cl2淋洗给出1-{1-(R)-[4-(3，4-二氯苄基)哌啶-1-基甲基]-2-甲基丙基}-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)脲(3.7g)。步骤8
1-{1-(R)-[4-(3，4-二氯苄基)哌啶-1-基甲基]-2-甲基丙基}-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)脲(0.19g，0.353毫摩尔)的碘乙烷(4ml)溶液在氩气下在68℃搅拌过夜。该黄色混合物在真空下浓缩，及粗产物快速层析，用3％-4％甲醇/二氯甲烷淋洗给出4-(3，4-二氯苄基)-1-乙基-1-{3-甲基-2-[3-(3，4，5-三甲氧基苯基)脲基]丁基}哌啶鎓碘化物(0.18g)，是黄色固体，熔点125-133℃。
如上述实施例1进行，但在步骤8中使用碘甲烷(0.5ml)在二氯甲烷(20ml)中的溶液代替碘乙烷，反应混合物室温搅拌过夜，给出4-(3，4-二氯苄基)-1-甲基-1-{3-甲基-2-[3-(3，4，5-三甲氧基苯基)-脲基]丁基}哌啶鎓碘化物。熔点127-248℃。(表III，化合物14)
如上述实施例1进行，但在步骤8中使用碘代乙酸乙酯(5ml)代替碘乙烷，反应混合物室温搅拌5小时，给出4-(3，4-二氯苄基)-1-(乙氧基羰基甲基)-1-{3-甲基-2-[3-(3，4，5-三甲氧基苯基)脲基]丁基}哌啶鎓碘化物。熔点131-139℃。(表III，化合物17)
如上述实施例1进行，但在步骤8中在室温使用溴化苄(0.5mL在10mL二氯甲烷中的溶液代替碘乙烷，给出4-(3，4-二氯苄基)-1-苄基-1-{3-甲基-2-[3-(3，4，5-三甲氧基苯基)脲基]丁基}哌啶鎓碘化物。熔点131-207℃。(表III，化合物18)
如上述实施例1进行，但在步骤4中使用Boc-甘氨酸代替D-Boc-缬氨酸，及在步骤8中使用碘甲烷(0.5ml)在二氯甲烷(20ml)中的溶液代替碘乙烷，反应混合物室温搅拌过夜，给出4-(3，4-二氯苄基)-1-甲基-1-{2-[3-(3，4，5-三甲氧基苯基)脲基]乙基}哌啶鎓碘化物。熔点102-108℃。(表III，化合物19)
实施例2
4-(3，4-二氯苄基)-1-乙基-1-{3-甲基-2-[3-(3，4，5-三甲氧基苯基)-脲基]丁基}哌啶鎓氯化物(表III，化合物20)
4-(3，4-二氯苄基)-1-乙基-1-{3-甲基-2-[3-(3，4，5-三甲氧基苯基)脲基]丁基}哌啶鎓碘化物(0.2g)在甲醇(5ml)中的溶液缓慢地通过Dowex 1x8-50(3g)离子交换柱。淋洗产物在真空下浓缩给出4-(3，4-二氯苄基)-1-乙基-1-{3-甲基-2-[3-(3，4，5-三甲氧基苯基)脲基]丁基}哌啶鎓氯化物。
如上述实施例2进行，但用4-(3，4-二氯苄基)-1-甲基-1-{3-甲基-2-[3-(3，4，5-三甲氧基苯基)-脲基]丁基}哌啶鎓碘化物代替4-(3，4-二氯苄基)-1-乙基-1-{3-甲基-2-[3-(3，4，5-三甲氧基苯基)脲基]丁基}哌啶鎓碘化物，得到4-(3，4-二氯苄基)-1-甲基-1-{3-甲基-2-[3-(3，4，5-三甲氧基苯基)-脲基]丁基}哌啶鎓氯化物，熔点123.7-138℃。(表III，化合物21)
实施例3
4-(3，4-二氯苄基)-1-(2-羟乙基)-1-{3-甲基-2-[3-(3，4，5-三甲氧基-苯基)-脲基]丁基}哌啶鎓氯化物(表III，化合物16)
1-{1-(R)-[4-(3，4-二氯苄基)哌啶-1-基甲基]-2-甲基丙基}-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)脲(0.21g)溶于2-氯乙醇(5mL)中，溶液在油浴中加热到90℃，在氮气下搅拌1天后，将反应混合物冷却，然后直接倒到硅胶垫上，用含6％甲醇的二氯甲烷淋洗，再用含11％甲醇的二氯甲烷淋洗。然后从适当的级分中除去溶剂，给出4-(3，4-二氯苄基)-1-(2-羟乙基)-1-{3-甲基-2-[3-(3，4，5-三甲氧基苯基)脲基]丁基}哌啶鎓氯化物(41.6mg)，是油状物。
实施例4
1-{2-(4-甲基苯甲酰氨基)-3-甲基丁基}-4-(3，4-二氯苯基)-1-甲基-哌啶鎓氯化物(表I，化合物5)
室温往N-{1-(S)-[4-(3，4-二氯苯基)哌啶-1-基甲基]-2-甲基丙基}-4-甲基苯甲酰胺(0.104g.0.232毫摩尔)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入碘甲烷(1ml)并在室温搅拌过夜。N-{1-(S)-[4-(3，4-二氯苯基)哌啶-1-基甲基]-2-甲基丙基}-4-甲基苯甲酰胺的制备如1998年8月14日提出的美国共有未决专利申请序列号09/134,103中所述。除去溶剂，及剩余物在快速硅胶上快速层析，用2％～3％甲醇/二氯甲烷(含有1％氨水)梯度淋洗，得到1-{2-(4-甲基苯甲酰氨基)-3-甲基丁基}-4-(3，4-二氯苄基)-1-甲基-哌啶鎓碘化物固体(12mg)。将其溶于甲醇，通过一个包含2英寸Dowex 1X8-50离子交换树脂的玻璃柱(内径25mm)。甲醇流过该柱直至用薄层色谱检测不到产物为止。除去溶剂提供1-{2-(4-甲基苯甲酰氨基)-3-甲基丁基}-4-(3，4-二氯苄基)-1-甲基-哌啶鎓氯化物(8mg)。
实施例5
4-(3，4-二二氯苄基)-1-(2-羧乙基)-1-{3-甲基-2-[3-(3，4，5-三甲氧基-苯基)-脲基]丁基}哌啶(表III，化合物22)4-(3，4-二氯苄基)-1-(2-乙酯基乙基)-1-{3-甲基-2-[3-(3，4，5-三甲氧基苯基)脲基]丁基}哌啶鎓碘化物(0.27g，364毫摩尔，由上述实施例5制备)、甲醇(5ml)、水(5ml)、和氢氧化锂一水合物(30.6mg，0.728毫摩尔)的混合物在50度搅拌6小时。除去溶剂后，往粗剩余物中加入水(10ml)和乙酸乙酯(20ml)，用稀盐酸水溶液将pH调到pH7。分离出有机层，水层用更多乙酸乙酯洗，合并的有机部分干燥(无水硫酸镁)并除去溶剂，该粗剩余物在快速硅胶上用7％甲醇/二氯甲烷(含1％氨水)层析，得到所需产物4-(3，4-二氯苄基)-1-(2-羧乙基)-1-{3-甲基-2-[3-(3，4，5-三甲氧基-苯基)脲基]丁基}哌啶(90mg)。熔点180-184℃。
实施例6配方实施例
下文是有代表性的含有化学式(I)化合物的制药配方。片剂配方
均质混合下列成分，并将其压成单一模面的片剂。
成分 每片重量，mg
本发明化合物 400
玉米淀粉 50
croscarmellose钠 25
乳糖 120
硬脂酸镁 5胶囊配方
均质混合下列成分，并将其装入硬壳凝胶胶囊。
成分 每胶囊重量，mg
本发明化合物 200
乳糖，喷雾干燥 148
硬脂酸镁 2悬浮液配方
均质混合下列成分，并将其装入硬壳凝胶胶囊。
成分 量
本发明化合物 1.0g
反丁烯二酸 0.5g
氯化钠 2.0g
对羟基苯甲酸甲酯 0.15g
对羟基苯甲酸丙酯 0.05g
粒状糖 25.5g
山梨醇(70％溶液) 12.85g
Veegum K(Venderbilt公司) 1.0g
调味剂 0.035ml
色素 0.5mg
蒸馏水 补足到100ml注射剂配方
混合下列成分形成可注射的配方。
成分 量
本发明化合物 0.2g
乙酸钠缓冲溶液，0.4M 2.0ml
HCl(1N)或NaOH(1N) 数量补到适宜的pH
水(蒸馏，消毒) 数量补足到20ml脂质体配方
混合下列成分形成脂质体配方。
成分 量
本发明化合物 10mg
L-α-磷脂酰胆碱 150mg
叔丁醇 4ml
将样品冻干并冷冻干燥过夜，用1ml 0.9％的盐溶液重新组成样品。脂质体的尺寸可通过超声处理来减小。局部用药配方
用下列成分制备一种局部用药的配方。
成分 数量，g
本发明化合物 10
Span 60 2
TWEEN_60 2
矿物油 5
矿脂 10
对羟基苯甲酸甲酯 0.15
对羟基苯甲酸丙酯 0.05
BHA(丁基化的羟基苯甲醚) 0.01
水 数量补足到100
合并上述除了水以外的全部成分，在搅拌下加热到60～70℃。然后在激烈搅拌下加入足量的60℃的水，使成分乳化，再加水补到100g。栓剂配方
将本发明化合物和Witepsol_H-15(饱和蔬菜脂肪酸的甘油三酸酯；Riches-Nelson公司，纽约)混合制备总重量为2.5g栓剂，其组成如下：
本发明化合物 500mg
Witensol_H-15 余额
实施例7CCR-3受体结合试验-体外
本发明化合物的CCR-3拮抗活性通过它们抑制125I eotaxin对CCR-3 L1.2转染细胞的结合能力来测定，该细胞从LeukoSite(Cambridge，MA)得到。
试验在Costar 96-孔的聚丙烯圆底皿中进行。被试验的化合物溶于二甲亚砜，然后用结合缓冲液(50mMN-2-羟乙基呱嗪乙磺酸，1mM CaCl2，5mM MgCl2，0.5％牛血清白蛋白，0.02％叠氮化钠，pH7.24)稀释使得最终二甲亚砜浓度为2％。每孔加入25μl化验溶液或仅缓冲液加二甲亚砜(对照样品)，接着加入25μl 125I-eotaxin(100pmol)(NEX314，新英格兰核材料，Boston，MA)和在25μl结合缓冲液中1.5×105的CCR-3 L1.2转染细胞，最终反应体积为75μl。
反应混合物在室温保温1小时后，将反应混合物用聚氮丙啶处理的Packard Unifilter GF/C滤板(Packard，Chicago，Il.)过滤使反应终止。该过滤器用冰冷却的清洗缓冲液洗四次，清洗缓冲液含有10mm N-2-羟乙基呱嗪乙磺酸和0.5M氯化钠(pH 7.2)。然后在65℃干燥大约10分钟。加入25μl/孔Microscint-20TM闪烁液(Packard)，用Packard TopCountTM测定过滤器上保留的放射性。
本发明有代表性的化合物的IC50值(被试验化合物使125I-eotaxin结合CCR-3 L1.2转染细胞降低50％所需的浓度)是化合物#IC50，μM化合物#IC50，μM 1 0.21 12 0.19 8 7 4.37 14 1.32实施例8抑制Eotaxin介导的CCR-3 L1.2转染细胞的趋化性-体外试验
本发明化合物的CCR-3拮抗活性可通过使用一种少许改进的方法测量它们抑制eotaxin介导的CCR-3 L1.2转染细胞的趋化性来测定，在P.D.Ponath等：1996，“克隆人嗜曙红细胞化学引诱素，Eotaxin”，J.Clin.invest.97：604-612中叙述了该方法。试验在24-孔的化学趋化皿(协作生物医学产品)中进行。CCR-3 L1.2转染细胞，标明为10E6，在培养介质中生长，培养介质含有RPMI 1640培养液，10％HycloneTM胎牛血清，5.5％x10-5 2-巯基乙醇和G418(0.8mg/ml)。化验前18～24小时，用正丁酸以5mM/l×106细胞/ml的最终浓度处理转染细胞，分离该细胞并以1×107细胞/ml的水平重新悬浮在化验介质中，化验介质含有相等份的RPMI1640培养液和M199及0.5％牛血清白蛋白。
将1mg/ml悬浮在磷酸缓冲液(Gibco#14190-029)中的人eotaxin加入到底腔中，使最终浓度为100nm。将微孔尺寸为3微米的BiocoatTMTranswell培养插入物(Costar公司，Cambridge MA)插入每个孔，及Li.2细胞(1×106)以最终体积为100μl加到顶腔中。溶在二甲亚砜中的被试验化合物加到顶腔和底腔两腔中使得最终二甲亚砜体积为0.5％。化验是相对于两组对照进行的。正对照在顶腔中包含细胞，没有被试验化合物，并在下腔中仅有eotaxin。负对照在顶腔中包含细胞，没有被试验化合物，而在下腔中既无eotaxin，也无被试验化合物。趋化皿在37℃保温。4小时以后，从腔中移去插入物，迁移到底腔的细胞的计数是用移液管从下腔吸出500μl细胞悬浮液，移到1.2ml Cluster管(Costar)中在一个荧光激活细胞分检器上用30秒钟对它们计数。
实施例9抑制Eotaxin介导人嗜曙红细胞的趋化性-体外试验
本发明化合物抑制eotaxin介导的人嗜曙红细胞趋化性可使用一种稍微改进的程序来估算，该程序在M.W.Cam等：Proc.Natl.Acad.Sci.USA，91：3652-3656(1994)中有叙述。实验使用24-孔化学趋化皿(协作生物医学产品)进行。嗜曙红细胞使用在PCT申请公开号WO96/22371中叙述的方法从血液中分离。需使用的内皮细胞是内皮细胞系ECV 304，可从欧洲动物细胞培养标本(Porton Down，Salisbury，英国)处得到。内皮细胞在直径为6.5mm、微孔尺寸为3.0μM的Biocoat_Transwell组织培养插入物(Costar公司，Cambridge MA)上培养。ECV 304细胞的培养介质由M199，10％胎牛血清，L-谷氨酰胺和抗生素组成。化验介质由相等份的RPMI1640培养液和M199及0.5％牛血清白蛋白组成。化验前24小时，2×105 ECV 304细胞沉积到24-孔化学趋化皿的各插入物上并在37℃保温。将在化验介质中稀释的20 nM eotaxin加入到底腔，底腔最终体积是600μl。将内皮细胞覆盖的组织培养插入物插入每个孔中。将悬浮在100μl化验缓冲液中的106嗜曙红细胞加到顶腔中。被试验化合物溶在二甲亚砜中加到顶腔和底腔两处，使得各孔中最终二甲亚砜体积是0.5％。相对于两组对照进行化验。正对照在顶腔中含有细胞，并在下腔中有eotaxin。负对照在项腔中含有细胞，而在下腔中仅有化验缓冲液。趋化皿在5％CO2/95％空气中在37℃保温1～1.5小时。
迁移到底腔的细胞用流动细胞计数法计数。从下腔取500μl细胞悬浮液，移到一个管子中，通过一组30秒钟的时间周期取得的结果得到相对细胞计数。
实施例10在卵清蛋白敏化的balb/c鼠中CCR-3拮抗剂抑制嗜曙红细胞的趋化性-体内试验
本发明化合物的CCR-3拮抗活性是在卵清蛋白(OA)-敏化的balb/c鼠被气雾剂抗原激发后，测量嗜曙红细胞在该balb/c鼠支气管肺泡灌洗液体中聚集的抑制来测定的。简要地说，重量为20-25g的雄性balb/c老鼠用OA(10μg在0.2ml氢氧化铝溶液中)腹膜内敏化1和14天。一星期之后，老鼠被分为10组。服用试验化合物或赋形药(正对照组)。在1小时后面，老鼠被置于树脂玻璃箱内，被暴露在由PARISTARTM喷雾器产生的OA气雾剂中20分钟。未被敏化或者未被激发的老鼠被包括在内作为负对照。在24或72小时后，将老鼠麻醉(氨基甲酸乙酯，大约lg/kg，i.p.)，插入套管导管(PE 60管状材料)，用0.3ml磷酸缓冲液将肺灌洗4次。支气管肺泡灌洗液体被转移到塑料管中在冰箱保存。20μl的支气管肺泡灌洗液体等分试样中的总白血球用血球计和/或Coulter CounterTM测定，分类白血球计数使用一般形态标准由光显微镜在Cytospin显微载片上完成，该载片用修饰的Wright白血球着色剂(Diff-QuickTM)着色。