发明概述
本发明的一个方面涉及式I化合物：
![]()
其中
R是芳基、环烷基或多卤代烷基，
R1是烷基、烷氧基、多氟代烷氧基、羟基或三氟代甲烷磺酰基氧基，
R2和R3的每个独立地代表氢或卤原子或烷氧基或多氟代烷氧基，
n是0，1或2。
优选的芳基R是苯基，优选的环烷基R是环己基，优选的多卤代烷基R
是三氟甲基。优选的烷基R1是有1-4个碳原子的低级烷基，特别是甲基，优
选的烷氧基R1是低级烷氧基，特别是甲氧基；优选的多氟代烷氧基R1是三氟
甲氧基或2，2，2-三氟乙氧基。R2优选的是氢或氟原子，R3优选的是氢或氯原
子或2，2，2-三氟乙氧基。n优选的是1。
本发明也包括这些化合物的N-氧化物和其药学上可接受的盐。
本发明进一步提供了含有式I化合物或这类化合物的N-氧化物或药学上
可接受的盐与药学上可接受的稀释剂或载体混合的药物组合物。这类药物组
合物可任选地进一步包含抗拟胆碱能药，例如一种或多种选自tolterodine、
奥昔布宁(oxybutinin)、darifenacin、alvameline和temiverine的药剂。
本发明的另一方面涉及预防尿道和下尿道的收缩(包括去甲肾上腺素介导
的收缩)，选择性地预防所述的收缩(不明显影响血压)的方法，所有这些都是
对需要这类治疗的哺乳动物(包括人)给予特定应用有效量的一种或多种选定
的式I化合物。
本发明的另一方面涉及通过向所述的受体环境，如向细胞外介质，(或通
过对具有所述受体的哺乳动物给予)有效量的本发明化合物来阻断α1受体的
方法，用该方法可缓解与所述受体过度活性有关的疾病。
发明详述
本申请引用的所有专利、专利申请和文献都全文并入本文供作参考。
本发明化合物的肾上腺素能拮抗活性使其可用作作用于特别富含α1-肾
上腺素能受体的机体组织，如前列腺和尿道的药物。因此，建立在其受体结
合特性基础上的本发明的抗肾上腺素能化合物是有用的治疗剂，用于治疗，
如与下尿道阻塞失调有关的排尿问题，包括，但不限于良性前列腺增生(BPH)。
良性前列腺增生是一种进行性疾病，其表征是前列腺组织的小结增大，
导致尿道阻塞。这引起排尿频率增加、夜尿、尿流不良、尿流开始迟缓。良
性前列腺增生的慢性后果包括膀胱平滑肌肥大、膀胱代偿机能失调和尿道感
染发生率增加。前列腺腺瘤引起膀胱出口阻塞的特定生化、组织学和药理学
的性质目前尚不了解。但是，良性前列腺增生的形成被认为是老年男性不可
避免的现象。在70岁以上的男性的约70％中可以观察到良性前列腺增生。目
前，世界上治疗良性前列腺增生的选择是进行手术。很显然，人们很需要代
替手术的医学方案。手术治疗良性前列腺增生的局限包括老年男性手术过程
中的发病率高，阻塞和刺激症状持续或再发生，以及手术费用高。
α-肾上腺素能受体(McGrath等，Med.Res.Rev.9，407-533(1989))是
位于遍布全身的组织和器官上的外周和中枢神经系统里的特定神经受体蛋
白。这些受体是控制许多生理功能的重要开关，因此代表了药物发展中重要
的靶标。事实上，在过去40年里已经开发出许多α-肾上腺素能药物。其例
子包括氯压定、苯氧苄胺和哌唑嗪、特拉唑嗪、阿夫唑嗪(alfuzosin)、多沙
唑嗪、tamsulosin(治疗高血压)，鼻眼净(鼻子解充血药)，和安普尼定(治疗
青光眼)。α-肾上腺素能药物可分为不同的两类：激动剂(氯压定和鼻眼净是
激动剂)，它们模拟内源性神经递质去甲肾上腺素的受体活化性质；拮抗剂(苯
氧苄胺和哌唑嗪、特拉唑嗪、阿夫唑嗪、多沙唑嗪、tamsulosin是拮抗剂)，
它们可阻断去甲肾上腺素的效应。这些药物中的许多药物是有效的，但会产
生不需要的副作用(例如，氯压定除了有抗高血压作用外，还会引起口腔干燥
和镇静)。上述报道的激动剂选择性地作用于α2肾上腺素能受体，而大多数
拮抗剂则选择性地作用于α1肾上腺素能受体，但tamsulosin除外，它对5-HT1A
受体也有相关的亲和性。许多上面引用的α1拮抗剂目前用于治疗良性前列腺
增生，但由于其不良的尿选择性，它们易产生心血管源的副作用。
最近的药理学、生物化学和放射性配体-结合研究证明，三种不同的α1-
受体亚型，即α1A-(α1a-)、α1B-(α1b-)和α1D-(α1d-)对哌唑嗪有很高的亲
和性，小写的下标用于重组受体，大写的下标用于天然组织里的受体(Hieble
等，Pharmacol.Rev.47，267-270，1995)。在功能研究中，与哌唑嗪亲和性
低的α1-受体也被鉴定并命名为α1L-受体(Flavahan和Vanhoutte，Trends
Pharmacol.Sci.7，347-349，1986；Muramatsu等，Pharmacol.Comm.6，23-
28，1995)。
一些研究显示，在下尿道组织里存在这些α1-肾上腺素能受体亚型，K.E.
Andersson在1997年7月2-5日巴黎举行的“第4届良性前列腺增生(BPH)国
际研讨会”上对此作了综述(601-609页)。
一些研究业已显示，人的前列腺接受交感神经系统和副交感神经系统的
神经支配。
肾上腺素能神经被认为通过释放去甲肾上腺素、刺激收缩介导的(mediate)
α肾上腺素能受体引起前列腺平滑肌紧张性。良性前列腺增生病人的总尿道
压的50％左右是由α-肾上腺素能受体介导的肌肉紧张引起的。功能研究表明，
在前列腺腺瘤组织和囊组织中发生重要的肾上腺素能受体功能。用典型的肾
上腺素能受体-选择性的拮抗剂(哌唑嗪)进行临床研究增强了α1-肾上腺素能
受体在控制前列腺平滑肌紧张性中的关键作用。这也得到实验室研究的证实，
该研究显示：虽然α1-和α2-肾上腺素能受体部在人前列腺中找到，但收缩性
质则主要由α1-肾上腺素能受体介导。许多临床研究证实，阻断α1-肾上腺素
能受体会减轻患有良性前列腺增生，贮存(刺激)型和排空(阻塞)型的病人的
下尿道的症状(LUTS)。
下尿道症状(LUTS)在女性中也会随着年龄的增加形成。像男性一样，女
性中的下尿道症状包括充盈的症状，如尿急、尿失禁和夜尿；和排空的症状，
如尿流细弱，迟缓，间隔，膀胱不能排空和腹部紧张。男性和女性相似地具
有高比例充盈性和排空性下尿道症状表明至少部分病因学可能是相同的。最
近的研究报道了用α1-拮抗剂减少女性下尿道症状的效果比抗拟胆碱能药物
的好(Serels，S.和Stein，M.，神经学和尿动力学17：31-36，1998)。作者断
言，α1-拮抗剂在治疗女性的下尿道症状中似乎有一定的作用。可用来解释
这些结果的可能的机理是：a)膀胱颈部和尿道的机能失调导致功能性的输出
阻塞，类似于良性前列腺引起的出口阻塞，继发地使逼肌活性过度；和b)逼
肌里α1-肾上腺素能受体活性的增加引起了尿频和尿急。在此基础上，α1-拮
抗剂在临床上用于治疗妇女的下尿道症状(Fitzpatrick，Brit。
J.Urol.Intl.85，Supp.2：1-5，2000；Kakizaki，M.等，Brit.J.Urol.Intl.85，
Supp.2：25-30，2000)。Serels结果也表明，α1-拮抗剂和抗拟胆碱能药物合
用可改善下尿道症状的治疗效果(Fitzpatrick，Brit.J.Urol.Intl.85，
Supp.2：1-5，2000中建议)。
α1-拮抗剂另一种可能的应用是治疗由于神经疾病或创伤引起的神经学
上的下尿道失调(NLUTD)。NLUTD会引起衰弱的症状和严重的并发症，包括排
尿频率增加，尿失禁，排空困难，复发性上尿道感染和上尿道退化。治疗NLUTD
可保持肾功能，避免泌尿道并发症。给予α1-拮抗剂通过缓解膀胱充盈时的
高逼肌压力(其表现为膀胱的依从性差，逼肌反射亢进)而使尿液便于储存，
来有利于患有NLUTD的病人。在患有耐抗拟胆碱药的脊索损伤的动物模型和
病人中，α1-拮抗剂可改善依从性(Kakizaki，M.等，Brit.J.Urol.Intl.
85，Supp.2：25-30，2000；Sundin，T.等，Invest Urol.14：322-328，1977；McGuire
等，神经学和尿动力学4：139-142，1985；Swrerzewski，S.J.等，J.
Urol.151：951，1994)。
已有人提出，在人前列腺中存在两种截然不同的α1-肾上腺素能受体亚
型，一类是对哌唑嗪有高亲和性(α1H)，一类对哌唑嗪有低亲和性(α1L)。业
已在前列腺基质组织中找到了分子克隆研究里发现的三类高亲和性的α1-肾
上腺素能受体。α1a亚型占主导，代表α1-肾上腺素能受体群中的约60-85％。
最近的发现提示，正常的和增生的前列腺之间亚型群可能存在差异，良性前
列腺增生中亚型α1a∶α1b∶α1d之比为85∶1∶14，而在非良性前列腺增生组织
中的亚型α1a∶α1b∶α1d之比为63∶6∶31。
据报道，α1A-肾上腺素能受体可体外介导人前列腺的收缩反应。Ford等
发现，α1A肾上腺素能受体可能不介导对去甲肾上腺素的收缩反应，提示它
是α1L肾上腺素能受体的候选物。Kenny等的发现(Br.J.
Pharmacol.118，871-878(1996))支持这样的观点：具有α1A肾上腺素能受体
的许多特性的α1L肾上腺素能受体介导人前列腺的收缩反应。
在妇女尿道中，α1亚型的mRNA占主导，经自动放射照相术证实了α1A
肾上腺素能受体占主导(Andersson，K.E.，Brit.J.Urol.Intl.85，
Supp.2：12-18，2000)。据报道α1A和α1D亚型在人的逼肌中存在，α1D亚型
占主导(Malloy，B.等，J.Urol.160：937-943，1998)。因此，α1肾上腺素能
受体拮抗剂可用于治疗男性和女性前列腺和非前列腺源的下尿道症状的证据
可用来支持本发明化合物在治疗这类症状中的应用，不管其是或不是阻塞性
的，也无需考虑病人的性别。
另一方面，业已提示，α1A和α1L肾上腺素能受体可代表相同受体的两个
截然不同的药理学位点。
本发明化合物对每个受体的亲和性可通过如下的受体结合试验进行分
析：
1)α1-肾上腺素能受体亚型：根据Testa等，Pharmacol.Comm.6，79-86，
1995，用特异性的配体3H-哌唑嗪，
2)5HT1A含血清素的受体：根据Fargin等，Nature335，358-360，1988，
使用特异性的配体3H-8-OH-DPAT。
α1L肾上腺素能受体尚未被克隆，因此，本发明化合物对该亚型的功能
亲和性可根据Testa等，J.Pharmacol.exp.Ther.281，1284-1293，1997报
道的用分离的器官准备进行分析。
实施例8和9揭示了本发明化合物对上述受体的体外试验。
目前用于治疗良性前列腺增生的具有α1-肾上腺素拮抗活性的药物对亚
型的选择性差，由于其降压活性，会引起相关的副作用。因此，人们很需要
选择性的α1-拮抗剂，它对良性前列腺增生病人进行治疗时没有明显的心血
管类型的副作用。
如实施例10所述，本发明化合物对尿道的极高选择性已在狗模型中进行
了试验，其中化合物A与另一种已知的α1-拮抗剂(哌唑嗪)相比，显示能拮
抗前列腺尿道的收缩的效果，对血压的作用很有限。
因此，本发明的一个主要目的是提供治疗类型前列腺增生，同时避免由
于急性低血压症产生的任何副作用的方法。
本发明的另一个方法是提供包含作为选择性的α1-肾上腺素能受体拮抗
剂的7-氧代-7H-噻吩并[3，2-b]吡喃-3-甲酰氨基衍生物的药物组合物。该组
合物能有效地治疗良性前列腺增生和下尿道的其它疾病，如下尿道症状和神
经性的下尿道失调。
本发明的另一个目的是提供用选择性的α1-肾上腺素能受体拮抗剂的7-
氧代-7H-噻吩并[3，2-b]吡喃-3-甲酰氨基衍生物治疗良性前列腺增生的方
法。
本发明的另一方面是新颖的化合物在降低眼内压和治疗心律失常和勃起
和性功能障碍上的应用。本技术领域的人员可从下列详细的描述和所附的权
利要求书中看到本发明的其它特征和优点。
本发明化合物的合成
本发明化合物一般可如下制备：
使酸1与ω-氨基烷基氨基衍生物2直接缩合(流程1)，得到本发明化合
物。
流程1
![]()
在缩合剂(如二环己基碳化二亚胺或氰基膦酸二乙酯)的存在下，在促进
剂(如N-羟基琥珀酰亚胺、4-二甲基氨基吡啶或N，N’-羰基二咪唑)任选地存
在下，在非质子性或氯代溶剂(如，N，N-二甲基甲酰胺或氯仿)中，在-10/140
℃下进行缩合(Albertson，Org.React.12，205-218(1962)；Doherty等，
J.Med.Chem.35，2-14(1992)；Ishihara，Chem.Pharm.Bull.39，3236(1991))。
在一些情况下可分离出活性酯或酰胺中间体(如N-羟基琥珀酰亚氨基酯或酰基
咪唑)，在非质子溶剂或氯代溶剂中、10/100℃下进一步与2反应转化为相应
的酰胺(I)。该类浓缩在实施例中作了详细说明。另一类可使用的活化中间
体是1的混合酸酐(使1与氯甲酸烷酯在叔胺(如三乙胺或N-甲基吗啉)存在下
反应得到)在0-80℃与2反应；任选地在加入胺前加入促进剂(如，1-羟基哌
啶)(Albertson，Org.React.12，157(1962))。
或者，不用溶剂，在150-220℃下进行缩合，或在高沸点的醚溶剂(如二
甘醇二甲醚)中进行缩合(Mitchell等，J.Am.Chem.Soc.53；1879(1931))。
另外，可通过制备和任选地分离1的反应性衍生物，如酰基卤来进行缩
合。这些最后的衍生物的制备和使用在文献中有很好的报道，是本技术领域
人员公知的。也可使用1的反应性稍差的衍生物，如烷酯，它在缩合剂(如三
甲基铝)存在下，在非质子和/或氯代溶剂(如己烷、二氯甲烷)里，在-10/80
℃下，或没有溶剂在80-180℃下转化为1(S.M.Weinreb等，Tetrahedron
Lett.4171(1977)；M.F.Lipton等，Org.Synth.59，49(1979))。
用上述报道的缩合的相同方法，以H2NCH2(CH2)nCH2X(X＝卤素或OH)作为试
剂，1可转化为3。对于X＝OH，然后用本技术领域公知的方法将醇基团转化为
合适的离去基团。化合物3(X＝卤素或烷基/芳基磺酰基氧基)接着可与苯基哌
嗪8反应。优选的(不是必须的)是在20-200℃下，在极性溶剂(如二甲基甲酰
胺、乙腈、甲醇或其它)或没有任何溶剂，通常在诸如碳酸钾的碱存在下进行
亲核取代。也可参见Patai中的Gibson章节“氨基基团的化学”第45页和
后续内容，Wiley International Science，美国纽约，1968。
文献中揭示了化合物2的制备，是本技术领域中公知的，包括用上述文
献揭示的使化合物3和8缩合方法，使苯基哌嗪8在N-(ω-卤代烷基)邻苯二
甲酰亚胺或合适的ω-卤代烷基腈或卤代烷基酰胺上进行亲核取代或通过α，
β-不饱和烷基腈或烷基酰胺在合适的溶剂中(如乙腈，N，N-二甲基甲酰胺，
氯代溶剂或其它非质子极性溶剂)在0℃和溶剂的回流温度之间的加成。对邻
苯二甲酰亚氨基进行标准的去保护或对酰氨基或氰基进行还原得到化合物2。
可以2-乙酰基-3-羟基噻吩-4-羧酸甲酯为起始物(根据J.Chem.Soc.
Perkin Trans I，507(1986)所述制备)合成本发明的酸1，其中R代表烷基、
环烷基或苯基(流程2)，然后可用本技术领域熟知的方法，用合适的烷酰氯或
芳酰氯进行酯化。替换的方法包括用上述相同的方法使1酰胺化，它也可用
于酯化步骤，得到4。
流程2
![]()
使4的甲基酮基团进行单溴化，得到5，5再与三苯基膦用普通过程(乙腈或
甲苯或其它非质子溶剂，回流)反应得到鏻盐6。接着对该底物进行分子内的
酯-Wittig反应，得到噻吩并[3，2-b]吡喃7。通过用本技术领域公知的酸或
碱催化方法来水解7的酯官能团，得到化合物1。
公知的水解方法包括在40-75℃下，使用在含水醇中的氢氧化钠或氢氧
化钾，或在40-100℃下，使用在含水二甲基甲酰胺或二噁烷或四氢呋喃中的
氢氧化锂。
可以2-乙酰基-3-羟基噻吩-4-羧酸酯为起始物，根据Riva，C.等，
Synthesis，195-201(1997)揭示的环化方法，在由1，8-二氮杂双环十一-7-烯
催化，在无水多氟代烷酰基酐存在下直接环化可制备化合物1，其中R是多氟
代烷基。
可这样合成R1是三氟甲烷磺酰基氧基的化合物1：以R1是羟基的化合物
1为起始物，通过已知的方法，包括使用三氟甲烷磺酸酐或N-苯基三氟甲烷-
磺酰胺，在非质子溶剂(如1，2-二氯乙烷或其它氯代溶剂或甲苯)中，在20℃
到溶剂的回流温度下进行反应(Hendickson J.B.等，Tetrahedron Letters，
4607-4510(1973))。可通过本技术领域已知的简单氧化方法来合成化合物1
的N-氧化物。P.Brougham在Synthesis，1015-1017(1987)里所述的氧化方
法使哌嗪环的两个氮原子可被区分，得到了N-氧化物和N，N’-二氧化物。
文献尚未知的苯基哌嗪8的制备在实验部分有记载，所用合成过程是本
技术领域公知的，包括通过标准反应合成合适的苯胺，然后根据Prelog方法
(Collect.Czech.Chem.Comm.5，497-502(1933))或其变体(Elworthy T.R.，
J.Med.Chem.40，2674-2687(1997)用双-(2-氯乙基)胺环化得到哌嗪。
本发明化合物合成详述
实施例1
N-{3-[4-(5-氯-2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]-丙基}-7-氧代-5-苯基-7H-
噻吩并[3，2-b]吡喃-3-甲酰胺
a)1-(5-氯-2-甲氧基苯基)-4-[3-(N-邻苯二甲酰氨基)-丙基]-哌嗪(化合
物1A)
使28.64克1-(5-氯-2-甲氧基苯基)-哌嗪、44.6克无水碳酸钾和33.65
克N-(3-溴丙基)-邻苯二甲酰亚胺在250毫升乙腈中的混合物回流搅拌8小
时。冷却到20-25℃后，搅拌下加入800毫升水，通过抽滤悬浮液得到黄色固
体，用300毫升水洗涤该固体，再用甲醇结晶，得到46.5克标题化合物，熔
点131-133℃。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：7.78-7.82，m，2H，邻苯二甲酰亚胺H3和H6；
7.64-7.78，m，2H，邻苯二甲酰亚胺H4和H5；6.92，dd，1H，甲氧基苯基
H4；6.65-6.78，m，2H，甲氧基苯基H3和H6；3.81，s，3H，CH3O；3.71-3.89，
m，2H，CH2N(CO)2；2.78-3.00，m，4H，3和5哌嗪CH2s；2.40-2.65，m，6H，2和6哌
嗪CH2s，CH2CH2CH2N(CO)2；1.80-2.03，m，2H，CH2CH2CH2。
b)三盐酸1-(3-氨基丙基)-4-(5-氯-2-甲氧基苯基)-哌嗪2.15H2O(化合
物1B)
使20.7克化合物1A和8.6毫升85％水合肼在300毫升乙醇中的溶液回
流3.5小时。此后，将反应混合物冷却到20-25℃，用400毫升水稀释，用37％
盐酸酸化(pH＝1)，并搅拌30分钟。通过过滤收集沉淀下来的固体，用1N盐
酸，然后用水洗涤。通过真空蒸发浓缩滤液，过滤，在0-5℃下加入35％氢氧
化纳使其成碱性，用乙醚萃取。有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，真空蒸
发至干，得到13.6克(96％)标题化合物的碱。用多于三当量的3N氯化氢乙醇
溶液酸化在氯仿中的碱溶液，然后真空蒸发至干，用乙醇∶乙醚10∶3使残留
物结晶，得到标题化合物，熔点200-202℃。
1H-NMR(200MHz，DMSO-d6，δ)：11.20-11.50，br，1H，NH+；8.10-8.40，br，
3H，NH3-；6.85-7.10，m，3H，苯基H3，H4和H6；5.10，br，
5.3H，NH+，2.15H2O；3.79，s，3H，CH3O；3.35-3.65，m，4H，2哌嗪CH2s；3.03-
3.35，m，6H，2哌嗪CH2s，CH2CH2CH2NH3+；2.80-3.03，m.2H，CH2CH2CH2NH3+；
1.95-2.22，m，2H，CH2CH2CH2NH3+。
c)2-乙酰基-3-苯甲酰基氧基噻吩-4-羧酸甲酯(化合物1C)
在20-25℃下将3.48毫升苯甲酰氯滴加入5.0克2-乙酰基-3-羟基噻吩-
4-羧酸甲酯(如J.Chem.Soc.Perkin Trans 1，1986，507)和3.66克4-二甲氨
基吡啶在100毫升二氯甲烷中的溶液里，使混合物搅拌2小时；此后用0.5N
盐酸、水(2×20毫升)、2.5％碳酸氢钠水溶液(2×40毫升)和水(2×20毫升)
洗涤。干燥有机层(硫酸钠)，真空蒸发至干，用快速层析纯化(氯仿∶乙酸乙
酯100∶1)，得到7.08克化合物1C的黄色容易潮解的固体，直接用于下个步
骤，无需进一步纯化。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：8.36，s，1H，噻吩H5；8.20-8.42，m，2H，苯基
H2，H6；7.52-7.78，m，3H，苯基H3，H4，H5；3.73，2，3H，CH3O；2.50，s，3H，CH3CO。
d)2-(2-溴乙酰基)-3-苯甲酰基氧基噻吩-4-羧酸甲酯(化合物1D)
在10分钟里将1.28毫升溴在24毫升四氯甲烷中的溶液滴加入回流下搅
拌的7.23克化合物1C在72毫升四氯甲烷中的溶液。再回流5分钟后，使混
合物冷却到20-25℃。滤得沉淀的固体，用冷四氯甲烷洗涤，得到7克(77％)
化合物1D，熔点115-118℃。该化合物被杂质1C和2-(2，2-二溴乙酰基)-3-
苯甲酰基氧基噻吩-4-羧酸甲酯污染(各自是2％和6％摩尔，用1H-NMR光谱测
定)，但可直接用于下个反应步骤，无需进一步纯化。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：8.43，s，1H，噻吩H5；8.20，m，2H，苯基
H2，H6；7.52-7.80，m，3H，苯基H3，H4，H5；6.70，s，0.06H，CHBr2；
4.30，s，1.84H，CH2Br；3.73，s，3H，CH3O；2.50，s，0.06H，CH3CO。
e)2-[(3-苯甲酰氧基-4-甲氧基羰基)-2-噻吩基]-2-氧代乙基三苯基鏻溴
化物半水合物(化合物1E)
使6.9克化合物1D和5.19克三苯基膦在45毫升乙腈中的溶液回流搅拌
4小时，然后冷却到20-25℃。滤得沉淀物，得到10.27克(88％)化合物1E，
熔点150-152℃，纯度足以用于下个反应。用异丙醇使0.27克粗制品结晶，
得到0.24克分析的样品。熔点(124)128-132℃。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：8.38-8.50，m，3H，PhCO H2，H6和噻吩基
H5；7.41-7,87，m，18H，(C6H5)3P和PhCO H3，H4，H5；6.35，d，2H，CH2P；
3.71，s，3H，CH3O。
f)7-氧代-5-苯基-7H-噻吩并[3，2-b]吡喃-3-羧酸甲酯(化合物1F)
将150毫升1M碳酸钠水溶液加到10.07克化合物1E在200毫升1，2-二
氯乙烷中的溶液里，使混合物在85℃下搅拌11小时。冷却后，分离有机层，
用水洗涤到中性，用无水硫酸钠干燥，真空蒸发至干，得到8.67克粗制品。
粗制品经快速层析纯化(石油醚/乙酸乙酯6∶4)得到4.1克(92％)化合物1F，
熔点169-171℃。用甲醇结晶，得到分析样品。熔点169-171℃。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：8.50，s，1H，H2；7.95-8.05，m，2H，苯基
2H，H6；7.50-7.60，m，3H，苯基H3，H4，H5；6.88，s，1H，H6；4.00，s，3H，CH3O。
g)7-氧代-5-苯基-7H-噻吩并[3，2-b]吡喃-3-羧酸(化合物1G)
在50℃下将26毫升0.6N氢氧化钠加到3.82克化合物1F在174毫升甲
醇和87毫升二噁烷中的搅拌着的溶液中。然后使混合物在相同的温度下搅拌
20分钟，冷却到20-25℃，用280毫升水稀释，过滤，用1N盐酸酸化到pH＝1。
沉淀凝胶的悬浮液在60℃下搅拌2小时，得到可过滤的固体。过滤该固体，
干燥得到3.4克标题化合物，直接用于下个步骤，无需进一步的纯化。用乙
醇结晶得到分析纯的样品，熔点282-283℃。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：13.39，bs，1H，COOH；8.50，s，1H，H2；8.00-
8.05，m，2H，苯基H2，H6；7.52-7.60，m，3H，苯基H3，H4，H5；7.13，s，1H，H6。
h)N-{3-[4-(5-氯-2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]-丙基}-7-氧代-5-苯基-
7H-噻吩并[3，2-b]吡喃-3-甲酰胺
在0℃下，将0.54毫升93％氰基膦酸二乙酯和0.46毫升三乙胺加到0.82
克化合物1G和0.94克化合物1B碱在15毫升无水甲基甲酰胺中的搅拌着的
溶液中。在20-25C下搅拌22小时后，将反应混合物倒入150毫升水中，倾
倒出母液，沉淀的糊状固体溶于60毫升氯仿，用水洗涤，用硫酸钠干燥，真
空蒸发至干。粗制品经快速层析(乙酸乙酯/甲醇9∶1)。蒸发得到纯的标题化
合物(1.2克；74％)，用乙酸乙酯结晶。熔点：165-166.5℃。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：8.45，s，1H，H2；7.90-8.02，m，2H，苯基
H2，H6；7.55-7.62，m，3H，苯基H3，H4，H5；7.45，t，1H，CONH；6.95，dd，1H，氯苯基
H4；6.83，s，1H，H6；6.65-6.75，m，2H，氯苯基H3，H6；3.81，s，
3H，CH3O；3.66，dt，2H，CONHCH2；2.74-2.92，m，4H，2 哌嗪CH2s；2.48-2.54，m，6H，
CH2N和2哌嗪CH2s；1.80-2.00，m，CH2CH2CH2。
实施例2
N-{3-[4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]丙基}-7-氧代-5-苯基-7H-噻吩并
[3，2-b]吡喃-3-甲酰胺
用1-(3-氨基丙基)-4-(2-甲氧基苯基)-哌嗪(如GB2161807所述制备)代
替化合物1B，如实施例1h所述制备标题化合物。将反应混合物倒入水后，用
乙酸乙酯萃取，合并的有机层用水洗涤(3×80毫升)，干燥(硫酸钠)，真空蒸
发至干。粗制品经快速层析(乙酸乙酯/甲醇8.5∶1.5)。通过蒸发收集的组分
得到的含有纯标题混合物的残留物经乙酸乙酯结晶，得到标题化合物，熔点
161-162℃。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：8.41，s，1H，H2；7.90-8.02，m，2H，苯基H2，H6；
7.50-7.65，m，4H，NHCO和苯基H3，H4，H5；6.80，s，1H，H6；6.70-7.05，m，4H，甲氧
基苯环的CHs；3.83，s，3H，CH3O；3.66，dt，2H，CONHCH2；2.80-3.00，m，4H，2哌
嗪CH2s；2.48-2.62，m，6H，CH2N和2哌嗪CH2s；1.80-2.00，m，2H，CH2CH2CH2。
实施例3
5-环己基-N-{3-[4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]-丙基}-7-氧代-7H-噻
吩并[3，2-b]吡喃-3-甲酰胺
a)2-乙酰基-3-环己烷羰基氧基噻吩-4-羧酸甲酯(化合物3A)
用环己烷碳酰氯代替苯甲酰氯，如实施例1中制备化合物1C的方法制备
该化合物。粗制品经快速层析纯化(石油醚∶乙酸乙酯梯度洗脱，从9∶1到
7∶3)，得到化合物3A(80％)。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：8.30，s，1H，噻吩H5；3.80，s，3H，CH3O；
2.50，s，3H，CH3CO；1.00-3.00，m，11H，环己烷CHs。
b)2-(2-溴乙酰基)-3-环己烷羰基氧基噻吩-4-羧酸甲酯(化合物3B)
在60分钟里将0.70毫升溴在3.45毫升乙酸中的溶液滴加入20-25℃下
搅拌的3.56克化合物3A在34.5毫升乙酸中的溶液中。在20-25℃下再搅拌
2.5小时后，将混合物倒入冰水中，用乙醚(2×80毫升)萃取。合并的有机层
用水(2×80毫升)、10％碳酸钠水溶液(100毫升)和水(3×80毫升)洗涤，用硫
酸钠干燥，真空蒸发至干。粗制品经快速层析(正己烷∶氯仿6∶4)纯化，得到
1.31克(29％)化合物3B。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：8.36，s，1H，噻吩H5；4.29，s，2H，CH2Br；
3.83，s，3H，CH3O；2.65-2.80，m，1H，环己烷CH；2.15-2.25，m，2H，2，6环己烷
CH3s。
c)2-[(3-环己烷羰基氧基-4-甲氧基羰基)-2-噻吩基]-2-氧代乙基三苯基
鏻溴化物(化合物3C)
使0.20克化合物3B和0.13克三苯基膦在1.25毫升乙腈中的溶液回流
搅拌2.5小时，然后冷却到0-5℃。滤得沉淀物，先用2∶1乙酸乙酯∶乙腈混
合物，然后用乙酸乙酯洗涤沉淀，得到0.19克(59％)化合物3C，熔点165-167
℃。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：8.31，s，1H，噻吩H5；7.55-8.00，m，
15H，(C6H5)3P；6.35，d，2H，CH2P；3.79，s，3H，CH3O；2.60-2.75，m，1H，环己烷
CH；1.95-2.05，m，2H，2，6环己烷CHs(eq.)；1.10-1.70，m，8H，其它环己烷CHs。
d)5-环己基-7-氧代-7H-噻吩并[3，2-b]吡喃-3-羧酸甲酯(化合物3D)
0.16克化合物3C、2毫升1，2-二氯乙烷和2毫升1M碳酸钠水溶液的混
合物在45℃下加热36小时。冷却到20-25℃后，加入5毫升氯仿，有机层用
水洗涤(2×10毫升)，用无水硫酸钠干燥，真空蒸发至干。粗制品经快速层析
纯化(石油醚∶乙酸乙酯1∶1)，得到0.05克(68％)化合物3D的白色固体，熔
点：114-119℃。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：8.43，s，1H，H2；6.20，s，1H，H6；
3.94，s，3H，COOCH3；2.55-2.70，m，1H，环己烷CH；1.15-2.15，m，10H，环己烷
CH2s。
e)5-环己基-7-氧代-7H-噻吩并[3，2-b]吡喃-3-羧酸(化合物3E)
在20-25℃下将0.3毫升1N氢氧化钠加到0.040克化合物3D在1.8毫
升甲醇和0.9毫升1，4-二噁烷中的搅拌着的溶液。然后使混合物在50℃下搅
拌3.5小时。冷却到20-25℃后，用水稀释混合物，用3N盐酸酸化到pH＝1。
通过过滤收集沉淀的固体，用水洗涤，得到0.028克(73.5％)标题化合物，熔
点269-275℃。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：13.30，bs，1H，COOH；8.78，s，1H，H2；6.23，
s，1H，H6；2.55-2.70，m，1H，环己烷CH；1.10-2.05，m，10H，环己烷CH2s。
f)5-环己基-N-{3-[4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]-丙基}-7-氧代-7H-
噻吩并[3，2-b]吡喃-3-甲酰胺
用化合物3E代替化合物1G，如实施例2所述制备标题化合物。粗制品
经快速层析纯化(乙酸乙酯∶2.7N氨甲醇溶液95∶5)。从含有纯标题化合物的
收集组分中蒸发溶剂，得到残留物，将残留物溶于5毫升甲醇，用活性炭使
乳白色的溶液澄清。蒸发溶剂得到黄色糊状固体的标题化合物(67％)。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：8.41，s，1H，H2；7.15，t，1H，NH；6.85-7.10，m，4H，
甲氧基苯基CHs；6.21，s，1H，H6；3.86，s，3H，OCH3；3.60，1，2H，NHCH2；2.55-
2.80，m，7H，2哌嗪CH2s，环己烷CH和CH2CH2CH2N；2.05，dt，2H，
CH2CH2CH2；1.20-1.95，m，10H，环己烷CH2s。
实施例4
N-{3-[4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]-丙基}-7-氧代-5-三氟甲基-7H-
噻吩并[3，2-b]吡喃-3-甲酰胺
a)7-氧代-5-三氟甲基-7H噻吩并[3，2-b]吡喃-3-羧酸甲酯
在0-5℃下将3.95毫升三氟乙酸酐和9.2毫升1，8-二氮杂双环[5.4.0]
十一碳-7-烯(DBU)加到4.10克2-乙酰基-3-羟基噻吩-4-羧酸甲酯和14ml吡
啶的混合物中。使混合物在80℃下加热27小时。此时再加入三批三氟乙酸酐
(总共9.9毫升)和DBU(9.2毫升)。冷却到20-25℃后，将混合物倒入冰(250
克)和37％盐酸(50毫升)的混合物里，用乙酸乙酯(2×80毫升)萃取。合并的
有机层用水洗涤，用硫酸钠干燥，真空蒸干。残留物溶于石油醚∶乙酸乙酯7∶3，
过滤。滤液经快速层析纯化(石油醚∶乙酸乙酯梯度7∶3到0∶1)。残留物溶于
乙醚，用5％碳酸钠水溶液和水洗涤，用硫酸钠干燥，真空蒸发至干，得到标
题产物(22％)，熔点148-158℃，它可直接用于下个步骤，无需进一步纯化。
用乙醇结晶得到分析纯样品。熔点163-164℃。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：8.58，s，1H，H2；6.80，s，1H，H6；
3.96，s，3H，COOCH3。
b)7-氧代-5-三氟甲基-7H-噻吩并[3，2-b]吡喃-3-羧酸(化合物4B)
使0.70克化合物4A、5.6毫升二噁烷和8.4毫升9N盐酸混合物回流搅
拌75分钟。冷却到20-25℃，滤得沉淀的固体，用二噁烷∶水1∶1.5和水洗
涤，得到0.46克标题化合物，灰色固体，熔点249-251℃。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：13.50，bs，1H，COOH；8.25，s，1H，H2；
7.19，s，1H，H6。
c)N-{3-[4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]-丙基}-7-氧代-5-三氟甲基-7H-
噻吩并[3，2-b]吡喃-3-甲酰胺
用化合物4B代替化合物1G，如实施例2所述制备标题化合物。粗制品
经快速层析纯化(乙酸乙酯∶2.7N氨甲醇溶液95∶5)得到淡褐色固体，熔点：
170-177℃(33％)。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：8.55，s，1H，H2；7.10，t，1H，NH；6.85-7.10，m，4H，
甲氧基苯基CHs；6.80，s，1H，H6；3.88，s，3H，OCH3；3.60，q，2H，NHCH2；2.90-
3，15，m，4H，2哌嗪CH2s；2.45-2.80，m，6H，2哌嗪CH2s，CH2CH2CH2N；1.88，dt，2H，
CH2CH2CH2。
实施例5
7-氧代-5-苯基-N-{3-[4-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)-苯基)-1-哌嗪基]-丙
基}-7H-噻吩并[3，2-b]吡喃-3-甲酰胺
a)N-(3-氯丙基)-7-氧代-5-苯基-7H-噻吩并[3，2-b]吡喃-3-甲酰胺(化合
物5A)
用3-氯丙胺盐酸盐代替化合物1B，三乙胺的用量加倍，用实施例1所述
的方法制备该化合物。用水稀释后，过滤沉淀出的固体，在滤器上用冰水∶
二甲基甲酰胺2∶1洗涤。然后将固体悬浮在10％碳酸钠水溶液中，搅拌，过滤，
用水洗涤到中性。70℃下真空干燥得到标题化合物(95％)。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：8.52，s，1H，H2；7.75-7.85，m，2H，苯基
H2，H6；7.50-7.60，m，3H，苯基H3，H4，H5；7.00，s，1H，NH；6.80，s，1H，H6；3.65-
3.80，m，4H，CH2CH2CH2；2.15，dt，2H，CH2CH2CH2。
b)7-氧代-5-苯基-N-[3-[4-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)苯基]-1-哌嗪基]丙
基}-7H-噻吩并[3，2-b]吡喃-3-甲酰胺
将0.17克化合物5A、0.13克1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)苯基]-哌嗪(如
EP 0748800所述制备)和0.07克碳酸钾的混合物在200℃下加热20分钟。冷
却到20-25℃后，粗制品经快速层析纯化(乙酸乙酯∶甲醇，95∶5到9∶1梯度)，
得到0.193克(70％)标题化合物，熔点152-158℃。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：8.45，s，1H，H2；7.80-7.95，m，2H，苯基
H2，H6；7.50-7.65，m，4H，CONH，苯基H3，H4，H5；6.80，s，1H，H6；6.75-7.10，m，4H，
三氟乙氧基苯基CHs；4.44，q，2H，CH2O；3.66，dt，2H，CONHCH2；2.90-3.05，m，4H，2
哌嗪CH2s；2.50-2.70，m，6H，CH2N和2哌嗪CH2s；1.80-2.00，m，2H，CH2CH2CH2。
实施例6
N-{3-[4-[2-甲氧基-5-(2，2，2-三氟乙氧基)苯基]-1-哌嗪基]-丙基}-7-
氧代-5-苯基-7H-噻吩并[3，2-b]吡喃-3-甲酰胺
a)1-叔丁氧基羰基-4-(5-羟基-2-甲氧基苯基)哌嗪(化合物6A)
将8克二氢溴酸1-(5-羟基-2-甲氧基苯基)-哌嗪和3.17克无水碳酸钾
在30毫升水中的溶液真空蒸发至干。向残留物里加入100毫升无水四氢呋喃
和5.18克97％二碳酸二叔丁酯，使混合物在20-25℃下搅拌2小时，然后加
入100毫升无水四氢呋喃。过滤悬浮液，真空蒸发除去溶剂。残留物溶于200
毫升氯仿。溶液用3×50毫升5％碳酸氢钠洗涤，用2×50毫升水洗涤，用硫
酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经快速层析纯化(石油醚∶乙酸乙酯75∶25)
得到1.91克(28.7％)化合物6A和1.58克(35.7％)1-叔丁氧基羰基-4-(5-叔丁
氧基羰基氧基-2-甲氧基苯基)-哌嗪。将该副产物在40毫升甲醇和6毫升1N氢
氧化钠中的溶液在20-25℃下放置过夜。用乙酸中和混合物；减压除去溶剂，
残留物溶于40毫升氯仿中。用3×10毫升水洗涤后，有机层用硫酸钠干燥，
真空蒸发溶剂，再得到1.15克(17.2％)化合物6A的稠厚油(总得率45.9％)。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：6.70，d，1H，苯环的H3；6.45-6.53，m，2H，苯
环的H4和H6；5.77，s，1H，OH；3.78，s，3H，CH3O；3.48-3.68，m，4H，2哌嗪CH2s；
2.82-3.05，m，4H，2哌嗪CH2s；1.48，s，9H，(CH3)3C。
b)1-叔丁氧基羰基-4-[2-甲氧基-5-(2，2，2-三氟乙氧基)苯基]哌嗪(化合
物6B)
使2.83克化合物6A、6.05克碳酸铯和2.95克对-甲苯磺酸2，2，2-三氟
乙酯在60毫升乙腈中的混合物回流搅拌16小时。减压蒸去溶剂；将90毫升
盐水加到残留物中，混合物用3×40毫升乙酸乙酯萃取。有机层用3×20毫
升水和20毫升盐水洗涤，用硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经快速层析
(石油醚∶乙酸乙酯95∶5到80∶20梯度)纯化。真空除去溶剂，得到1.86克(52％)
化合物6B的白色固体。熔点(98)102-105℃。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：6.77，d，1H，苯环的H3；6.45-6.63，m，2H，苯
环的H4和H6；4.28，q，2H，CF3CH2O；3.84，s，3H，CH3O；3.53-3.68，m，4H，2哌嗪
CH2s；2.90-3.06，m，4H，2哌嗪CH2s；1.48，s，9H，(CH3)3C。
c)1.9盐酸1-[2-甲氧基-5-(2，2，2-三氟乙氧基)-苯基]哌嗪·1.9氢氯化
物(化合物6C)
在3-5℃下将2.42毫升三氟乙酸在30毫升无水二氯甲烷中的溶液滴加
入1.17克化合物6B在40毫升无水二氯甲烷中的搅拌着的溶液里。使混合物
在20-25℃下保持过夜，用2×30毫升2N氢氧化钠洗涤，用3×15毫升2N盐
酸萃取。在5-10℃下酸性水层用2×20毫升乙醚洗涤，用37％氢氧化钠碱化，
用3×30毫升乙醚萃取。有机层用硫酸钠干燥，真空除去溶剂，得到0.78克
(89％)化合物6C碱的稠厚油。该碱在乙醚中的溶液用碳处理，过滤，通过加
入3.6N HCl乙醚溶液酸化，得到盐酸盐，通过过滤回收，用乙腈和乙醇结晶
得到分析纯的样品。熔点：(188)202-208℃(分解)。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：9.18，bs，2.9H，NH2+和NH+；6.90，d，1H，苯
基H3；6.67，dd，1H，苯基H4；6.59，d，1H，苯基H6；4.66，
q，2H，CF3CH2O；3.74，s，3H，CH3O；3.18，bs，8H，哌嗪CH2s。
d)N-{3-[4-[2-甲氧基-5-(2，2，2-三氟乙氧基)-苯基]-哌嗪基]-丙基}
-7-氧代-5-苯基-7H-噻吩并[3，2-b]吡喃-3-甲酰胺
除了用化合物6C代替1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)-苯基]哌嗪外，用实施
例5b揭示的方法来制备该化合物。冷却到20-25℃，粗制品经快速层析纯化(乙
酸乙酯∶2N氨的甲醇溶液98∶2)，得到标题化合物(60％)。熔点：156-158℃。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：8.50，s，1H，H2；7.80-7.95，m，2H，苯基2H，H6；
7.40-7.80，m，4H，CONH，苯基H3，H4，H5；6.85，s，1H，H6；6.75，d，1H，三氟乙
氧基苯基H3；6.40-6.55，m，2H，三氟乙氧基苯基H4，
H6；4.30，q，2H，CH2O；3.80，s，3H，CH3O；3.65，dt，2H，CONHCH2；2.50-3.10，m，10H，
哌嗪CH2s和CH2O；3.80，s，3H，CH3O；3.65，dt，2H，CONHCH2；2.50-3.10，m，10H，
哌嗪CH2s和CH2N；1.85-2.10，m，2H，CH2CH2CH2。
实施例7
N-{3-[4-[4-氟-2-(2，2，2-三氟乙氧基)-苯基]-1-哌嗪基]-丙基}-7-氧
基-5-苯代-7H-噻吩[3，2-b]吡喃-3-甲酰胺
除了用1-[4-氟-2-(2，2，2-三氟乙氧基)-苯基]哌嗪(如EP 0748800所述
制备)代替1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)-苯基]-哌嗪，其它按实施例5b所述制
备该化合物。冷却到20-25℃，粗制品经快速层析纯化(乙酸乙酯∶2N氨的甲
醇溶液95∶5)，得到标题化合物(74％)。熔点：189-191℃。
1H-NMR(200MHz，CDCl3，δ)：8.45，s，1H，H2；7.80-7.95，m，2H，苯基H2，
H6；7.45-7.65，m，4H，CONH，苯基H3，H4，H5；6.80，s，1H，H6；6.65-6.75，m，2H，三
氟乙氧基苯基CHs；6.60，dd，1H，三氟乙氧基苯基CH；
4.35，q，2H，CH2O；3.65，dt，2H，CONHCH2；2.80-3.00，m，4H，2哌嗪CH2s；2.50-
2.70，m，6H，CH2N和2哌嗪CH2s；1.90-2.00，m，2H，CH2CH2CH2。
实施例8
测定克隆的α1肾上腺素能受体和5-HT1A血清素激活的受体结合亲和力
在来自CHO细胞(中国仓鼠卵巢细胞)的膜上测定克隆的人α1-肾上腺素
能受体亚型的亲和力，所述的CHO细胞通过电穿孔用表达编码每一个α1-肾
上腺素能受体亚型的基因的DNA转染。如前所述进行α1-肾上腺素能受体基
因的克隆和稳定表达(Testa等，Pharmacol.Comm.6，79-86(1995))。使CHO-
细胞膜在50nM Tris，pH7.4中用0.2nM[3H]哌唑嗪(最终体积为1.02毫升)在
25℃下，在有或没有竞争性药物存在(1pM-10μM)下培养30分钟。在10μM酚
妥拉明存在下测定非特异性结合。通过加入冰冷的Tris缓冲液来停止培养，
通过0.2％-聚乙烯亚胺预处理的Schleicher & Schuell GF52滤器进行快速过
滤。
对于人5-HT1A血清素激活的受体的克隆-G-21基因组在人细胞系(HeLa)
里稳定转染(Fargin等，J.Biol.Chem.284，14848-14852(1989))。HeLa细
胞在Dulbecco修饰的Eagle介质(DMEM)中，补充10％胎牛血清和庆大霉素
(100g/ml)，5％CO2，37℃下生长成单层。用细胞刮刀从生长的烧瓶中剥离下
细胞，汇集率为95％，将所述的细胞溶于冰冷的Tris-5-mM和EDTA-5-mM缓冲
液中(pH7.4)。匀浆物离心40000×g×20分钟，将膜再悬浮于少量冰冷的
Tris-5-mM和EDTA-5-mM缓冲液(pH7.4)，马上冷冻，贮存在-70℃到使用。
在实验那天，将膜再悬浮于50mM Tris(pH7.4)、2.5mM MgCl2，10μM优
降宁的结合缓冲液中(Fargin等，Nature 335，358-360(1988))。膜用最终体
积为1毫升的1.2nM[3H]8-OH-DPAT，在有或没有竞争性药物的存在下，于30
℃下培养；在10μM 5-HT存在下测定非特异性结合。通过加入冰冷的Tris
缓冲液来停止反应，通过0.2％聚乙烯亚胺-预处理的Schleicher & Schuell
GF52滤器中快速过滤。
分析由试验的药物对放射性配体特异性结合的抑制，通过使用非线性曲
线-拟合程序Allfit(De Lean等，Am.J.Physiol.235，E97-E102(1978))来
评估IC50。用Cheng & Prusoff方程式(Biochem.Pharmacol.22，3099-
3108(1973))将IC50值转化为亲和常数(Ki)。数据表示为Ki的平均值。
如表1所示，本发明化合物对α1-肾上腺素能受体显示出所需的效力和
选择性。
表1对重组α1-肾上腺素能受体亚型和
5-HT1A受体试验的不同化合物的亲和力(Ki，nM)
实施例
克隆的受体
α1a
α1b
α1d
5-HT1A
1
0.58
2.53
4.12
2
0.10
7.52
2.46
4.48
4
0.60
23.16
3.60
26.21
5
0.045
4.34
1.01
7.59
6
3.19
39.31
48.17
1081.00
7
0.17
3.47
2.45
88.54
化合物A
0.60
3.29
2.84
4.53
哌唑嗪
0.61
0.42
0.23
＞10000
实施例9
对α1L-肾上腺素能受体的功能亲和力
根据Testa等的方法(J.Pharmacol.Exp.Ther.281，1284-1293(1997))
来评价试验化合物对去甲肾上腺素-(NA-)诱导的用氯乙基氯压定
(chloroethylclonidine)(α1L受体)预处理的兔子动脉收缩的功能性α1-拮抗
活性。使成年雄性新西兰兔颈部脱臼使其死亡。拿出大动脉，放在Krebs-
Henseleit缓冲液中，去除粘附的组织。每个动脉制成环(每个大动脉8个环，
约4-5毫米宽)，悬浮在20毫升含有下列组分(mM)的Krebs碳酸氢盐的缓冲
液器官浴中：NaCl 112.0，KCl 5.0，CaCl2 2.5，KH2PO4 1.0，MgSO4 1.2，NaHCO3
12.0和葡萄糖11.1，在37℃下用95％O2∶5％CO2平衡。向缓冲液加入去甲丙咪
嗪(0.1μM)和皮质甾类(1μM)阻断神经元和外神经元对NA的摄入，(±)-心得
安(1μM)阻断β肾上腺素能受体，育亨宾(0.1μM)阻断α2-肾上腺素能受体。
使组织接受2克的负载，用等容的传导器(Basile 7003)测定形成的张力。
让制品平衡60分钟，然后每30分钟用10μM NA灌注三次。动脉环然后
用烷化剂氯乙基氯压定(5×10-5)培养30分钟，然后在构建NA-浓度/反应曲
线前彻底地洗3次(在0.5小时里)。在洗去NA，使组织再平衡(45分钟)后，
加入被试验的药物，30分钟后，构建第二个NA-积聚的浓度/反应曲线。每个
拮抗剂浓度用来自不同兔子的2-3个动脉环试验。
在化合物的每个浓度计算剂量比(即在有或没有试验的拮抗剂存在下产生
半最大反应所需的去甲肾上腺素的浓度之比)。将这些剂量比-1的对数对化合
物浓度的对数作图(Schild图)以评价亲和常数Kb。当只用一个或两个试验化
合物浓度时，用式Kb＝[B]/(剂量比-1)计算表观Kb值，其中B是拮抗剂浓度。
结果
试验化合物显示出对α1L肾上腺素能受体亚型良好的亲和力。表2中的
数据表达为pKb。
表2
试验化合物对α1L-肾上腺素能受体亚型的功能亲和力
实施例
pKb
1
8.17
2
8.85
4
7.92
5
9.12
7
8.66
化合物A
8.64
哌唑嗪
8.11
实施例10
在对狗静注去甲肾上腺素后引起的对尿道收缩的作用和对血压的作用
根据Imagawa等的方法(J.Pharmacol.Mehods 22，103-111(1989))进行
试验，其明显的改变如下：用戊巴比妥钠(30毫克/kg静注，和2mg/kg/小时
静注)来麻醉体重8-10kg的成年雄性小猎犬，插入管子，自发地用室内空气
通讯。为了检测全身血压(BP)，将聚乙烯(PE)插管通过左股骨动脉插入大动
脉。左侧股骨静脉插管供输入麻醉剂，右侧股骨静脉的插管供给予化合物。
对于动脉内(i.a.)注射去甲肾上腺素(NA)，PE插管通过右侧外股骨动脉被引
入腹部大动脉的下端部分。通过这样的过程，NA被选择性地分布到下尿道。
从骨盆基部到中腹部区域、耻骨上方、靠近中央处作一垂直切口，露出膀胱
和前列腺。膀胱用注射器进行手工排空。前列腺尿压力用通过外界导尿管引
入膀胱的Mikro-tip插管(5F)检测，在压力传感器放入尿道的前列腺区域后
取出该插管。将绷带绕在膀胱颈和尿道之间以使尿道的反应被分离出来，避
免膀胱的任何干扰。另一个绷带绕在在外部导管处的Midro-tip插管上以固
定插管本身。
在手术后稳定一段时间(30分钟)后，动脉和前列腺压连续地处于基础值
时，以20分钟的间隔动脉注射NA。
所选定的NA剂量使尿道压力增加至少100％的增加。通过注射之间15-20
分钟间隔的积聚方式，静脉注射给予试验化合物。在试验化合物的每个剂量
以约10分钟的间隔给予后5分钟，重复动脉注射NA。为了比较给药化合物的
效应，通过计算机构建出剂量/反应曲线(对数剂量转换)。得到其峰值效应、
舒张压减少的百分数和由NA诱导的尿道压的增加抑制百分数。然后使用线形
回归等式来计算出理论效果，即ED25(舒张压减少25％时的有效剂量)和ID50(尿
道压增加被抑制50％时的剂量)。
结果
静脉给予实施例1、2和5化合物后得到的效果列于表3。涉及注射了哌
唑嗪和Rec 15/2739后得到的效果也列于表3。
表3
化合物
UC ID50NA
DBP ED25
比率
1
5.3
280
52.8
2
1.8
35.5
19.7
5
2.7
＞1000
＞370
哌唑嗪*
3.6
6.6
1.83
化合物A*
2.4
243
101.2
*数据来自Leonardi等，J.Pharmacol.Exp.Ther.281，1272-1283(1997)
药理结构证实，本发明化合物，特别与5-HT1A受体相比，是α1-肾上腺
素能受体拮抗剂，对α1肾上腺素能受体有良好的选择性，如体外数据显示，
对α1L亚型也有良好的亲和力。
体内药理试验结果证实，本发明的化合物对尿道的选择性很高，表明他
们可能用于治疗下尿道的阻塞疾病，包括良性前列腺增生。
有效量
下列是对用于下尿道阻塞疾病的口服、非胃肠道给药或静脉内给药的剂
量范围，表示为每天mg/kg体重
一般 0.001-20
优选 0.05-3
最佳 0.5-2
最优选的值指口服剂量。静脉内给药剂量应当低10到100倍。选择性使
用的剂量，即在下尿道有活性，对血压没有明显影响的剂量根据所用特定化
合物而定。一般来说，对于选择地抑制尿道收缩的化合物，可使用最高达ED50
四倍的量来抑制尿道收缩，而不会对血压有明显的作用。只用常规的实验可
确定进一步的精细剂量和优化剂量、本发明的化合物可口服，如与惰性赋形
剂或与可食载体一起，或它们被封入明胶胶囊，或它们被压成片剂。对于口
服给药，本发明的活性化合物可掺入赋形剂，以片剂、锭剂、胶囊剂、酏剂、
悬浮剂、糖浆剂、包药干糊片、咀嚼胶等形式给予。这些之际应当含至少0.5％
活性化合物，但活性化合物的量应当根据特定形式而定，常规地占剂型重量
的5％到约70％。这类组合物中活性化合物的用量应当是这样的，虽然通过多
剂给药也可得到所需的剂量。这样制备本发明优选的组合物和制剂，使口服
剂型含有1.0-300毫克活性化合物。片剂、丸剂、胶囊剂、锭剂等也可含有，
如，下列组分：诸如微晶纤维素、黄蓍胶或明胶的粘合剂；诸如淀粉或乳糖
的的赋形剂；诸如藻酸、淀粉乙醇酸钠、玉米淀粉之类的崩解剂；诸如硬脂
酸镁或氢化蓖麻油的润滑剂，诸如胶体二氧化硅的滑移剂；诸如蔗糖或糖精
的甜味剂，或诸如薄荷、水杨酸甲酯或橙味调味剂的甜味剂。当剂型单位是
胶囊时，除了上述类型外，它可含有诸如脂肪油的液体载体。其它剂型单位
可含有可修饰剂型物理性质的其它各种材料，如包衣。因此，片剂或丸剂可
用糖、虫胶或其它肠包衣剂。糖浆除了活性化合物外还含有蔗糖作为甜味剂
和特定的防腐剂、染料、着色剂和调味剂。用于制备这些各种组合物的材料
应当是药物纯的，其用量是无毒的。为了非胃肠道给药，本发明活性化合物
可掺入溶液或悬浮液。这些制剂应当含有至少0.1％活性化合物，可在占制剂
0.5％到30％重量范围内变化。这类组合物的活性化合物用量是这样的，以便得
到合适的剂型。这样制备本发明优选的组合物和制剂，使非胃肠道剂型含有
0.2-100毫克活性化合物。溶液或悬浮液也可包含下列组分：诸如注射用水、
盐水溶液、调和油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶剂的无菌稀释剂；
诸如苄基醇或对羟苯甲酸甲酯的抗菌剂；诸如抗坏血酸或亚硫酸氢钠的抗氧
剂；诸如乙二胺四乙酸的螯合剂；诸如乙酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐的缓冲剂，
和诸如氯化钠或右旋糖的用于调节张力的试剂。非胃肠道多剂小瓶可为玻璃
或塑料。通过各种途径给药的并含有本发明化合物的其它组合物也在本发明
的范围里。
本文预见的剂型、其它的组分和给药途径在美国专利US 4089969和US
5091182中有所揭示。