《奥贝胆酸杂质的制备方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《奥贝胆酸杂质的制备方法.pdf（8页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。
1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610064314.7 (22)申请日 2016.01.29 C07J 9/00(2006.01) (71)申请人 中国药科大学 地址 211198 江苏省南京市江宁区龙眠大道 639 号 (72)发明人 陈国华 舒伟 蔡澍 程伟 (54) 发明名称 奥贝胆酸杂质的制备方法 (57) 摘要 本 发 明 涉 及 的 是 奥 贝 胆 酸 三 个 杂 质 的 合成方法， 它对于合成高质量的奥贝胆酸具 有 重 要 意 义。 本 发 明 主 要 研 究 3， 7- 二 羟 基 -6- 乙 基 -5- 胆 烷 -24- 酸 (V) ； 3， 7。
2、- 二 羟 基 -6- 乙 基 -5- 胆 烷 -24- 醇 (VI) ； 3， 7- 二羰基 -6- 乙基 -5- 胆 烷 -24- 酸 (VII)。 本 发 明 的 合 成 路 线 如 下 ： (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书2页 说明书5页 CN 105646634 A 2016.06.08 CN 105646634 A 1.奥贝胆酸杂质的制备方法， 其特征在于以3 -羟基-6-亚乙基-7-羰基-5 -胆烷-24- 酸(II)为原料， 通过催化氢化、 还原得到3 ， 7 -二羟基-6-乙基-5 -胆烷-24-酸(V)； 以奥贝。
3、 胆酸(I)为原料， 在酸性条件下通过羧基酯化、 然后还原得到3 ， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆 烷-24-醇(VI)； 奥贝胆酸(I)通过氧化得到3， 7-二羰基-6 -乙基-5 -胆烷-24-酸(VII)。 2.根据权利要求1所述的3 ， 7 -二羟基-6-乙基-5 -胆烷-24-酸(V)的制备方法， 3 ， 7 -二羟基-6-乙基-5 -胆烷-24-酸(V)的制备是以3 -羟基-6-亚乙基-7-羰基-5 -胆烷-24- 酸(II)为原料， 在常压室温条件下通过钯炭催化氢化， 然后在-25-30下7位羰基还 原， 最后通过制备液相分离得到。 3.根据权利要求2所述的3 ， 7 -二。
4、羟基-6-乙基-5 -胆烷-24-酸(V)的制备方法， 氢化 所用溶剂选自甲醇、 乙醇、 异丙醇、 正丁醇、 丙酮、 丁酮、 四氢呋喃、 二氯甲烷、 氯仿、 乙腈、 乙 酸乙酯、 四氢吡咯、 吡啶、 哌啶、 N-甲基吡咯烷酮、 N， N-二甲基甲酰胺、 水、 氢氧化钠水溶液、 氢氧化钾水溶液、 碳酸钠水溶液、 碳酸氢钠水溶液、 碳酸钾水溶液、 碳酸氢钾水溶液， 以及两 种或以上的混合溶液， 本发明优先选用甲醇和氢氧化钠水溶液的混合溶液， 3 -羟基-6-亚 乙基-7-羰基-5 -胆烷-24-酸(II)与溶剂的重量体积比为12535。 4.根据权利要求2所述的3 ， 7 -二羟基-6-乙基-5 。
5、-胆烷-24-酸(V)的制备方法， 还原 剂选自Na、 K、 氯化亚锡、 硼氢化钠、 硼氢化钾、 红铝、 四氢铝锂、 三叔丁氧基氢化铝锂、 三氯化 铈， 以及硼氢化钠、 硼氢化钾等与路易酸复合还原剂。 本发明优先选用硼氢化钾和三氯化铈 作为还原剂。 5.根据权利要求1所述的杂质3， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆烷-24-醇(VI)的制备方 法， 3 ， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆烷-24-醇(VI)的制备以奥贝胆酸(1)为原料， 在酸性件 权利要求书 1/2 页 2 CN 105646634 A 2 下与醇酯化得到羧基酯化物， 然后再经还原制备得到。 所述的酸的种类和用量均可为本。
6、领 域此类反应的常规有机酸或无机酸和用量， 本发明优选下述酸和酸的用量： 其中， 所述的酸 较佳的为盐酸， 硫酸， 甲磺酸； 所述的酸的用量较佳的为0.20.4当量， 调节溶液pH至12。 酯化所用醇选自甲醇、 乙醇、 异丙醇、 正丁醇、 仲丁醇、 新戊醇、 苯甲醇、 乙二醇、 丙三醇。 本发 明优先选择甲醇进行酯化。 奥贝胆酸(I)与甲醇的重量体积比为1515； 酯化反应温度20 150。 6.根据权利要求5所述的杂质3， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆烷-24-醇(VI)的制备方 法， 还原剂选自Na、 K、 氯化亚锡、 硼氢化钠、 硼氢化钾、 红铝、 四氢铝锂、 三叔丁氧基氢化铝 锂。
7、、 三氯化铈， 以及硼氢化钠、 硼氢化钾等与路易酸复合还原剂。 本发明优先选用四氢铝锂 作为还原剂。 还原产物提取所用溶剂选自正丁醇、 异丙醇、 乙醇、 甲醇、 乙酸乙酯、 甲苯、 丙 酮、 二氯甲烷、 氯仿、 乙腈、 四氢呋喃。 本发明优选乙酸乙酯溶剂进行提取。 7.根据权利要求6所述的杂质3， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆烷-24-醇(VI)的制备方 法， 精制3 ， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆烷-24-醇(VI)采用硅胶柱层析方法， 洗脱剂采用石 油醚/乙酸乙酯体系， 优选乙酸乙酯石油醚146。 8.根据权利要求1所述的杂质3， 7-二羰基-6 -乙基-5 -胆烷-24-酸。
8、(VII)的制备方法， 3， 7-二羰基-6 -乙基-5 -胆烷-24-酸(VII)的制备以奥贝胆酸(I)为原料， 经氧化得到， 反 应温度-1030。 氧化试剂选自NBS、 过氧化氢、 过氧乙酸、 重铬酸钠、 三氧化铬、 硝酸、 高锰 酸钾、 过硫酸铵、 次氯酸钠。 本发明优先选用Jones试剂(三氧化铬)； 所用溶剂选自丙酮、 四 氢呋喃、 二氯甲烷、 氯仿、 乙腈、 乙酸乙酯、 四氢吡咯、 三乙胺、 吡啶、 哌啶、 N-甲基吡咯烷酮、 N， N-二甲基甲酰胺、 N， N-二甲基乙酰胺， 本发明优选丙酮作为溶剂； 奥贝胆酸(I)与溶剂的 重量体积比为11525。 9.根据权利要求8所述的3。
9、， 7-二羰基-6 -乙基-5 -胆烷-24-酸(VII)的制备方法， 制得 的3， 7-二羰基-6 -乙基-5 -胆烷-24-酸(VII)， 提取所用溶剂选自正丁醇、 乙酸乙酯、 甲苯、 二氯甲烷、 氯仿、 乙腈、 四氢呋喃， 本发明优选乙酸乙酯溶剂； 精制3， 7-二羰基-6 -乙基-5 - 胆烷-24-酸(VII)采用硅胶柱层析方法， 洗脱剂采用甲醇/二氯甲烷体系， 优选甲醇二氯甲 烷12030。 权利要求书 2/2 页 3 CN 105646634 A 3 奥贝胆酸杂质的制备方法 技术领域 0001 本发明涉及奥贝胆酸杂质的制备方法。 背景技术 0002 奥贝胆酸(Obeticholi。
10、cacid， I)， 化学名： 3 ， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆烷-24- 酸， 结构式如下。 它是一种法尼酯X受体(FXR)激动剂， 为鹅去氧胆酸的6-乙基衍生产物， 由 美国Intercept制药公司开发， 临床研究中用于原发性胆汁性肝硬化(PBC)和非酒精性脂肪 性肝炎等肝脏和肠道疾病的治疗， 目前原研公司对于PBC适应症已向FDA和EMA提交注册上 市的申请。 0003 0004 奥贝胆酸(I)的合成主要反应路线如下： 0005 (1)以鹅去氧胆酸为原料， 经过氯铬酸吡啶盐氧化， 再经过3， 4-二氢-2H-吡喃对3- 羟基进行保护， 在LDA、 正丁基锂催化下进行6位乙基化。
11、， 最后在硼氢化钠作用下还原制备得 到奥贝胆酸(I)。 0006 (2)以3-羟基-7-酮-5 -胆烷-24-酸为原料， 经过3， 4-二氢-2H-吡喃对3-羟基进行 保护， 以LDA为催化剂， 在-78下进行6位烷基化反应， 再在盐酸催化下进行羧基甲酯化反 应制备得到中间体， 中间体经硼氢化钠还原后， 在碱性条件下水解得到奥贝胆酸(I)。 0007 (3)以3-羟基-7-酮-5 -胆烷-24-酸为原料， 以次氯酸钠为氧化剂对7位羟基进行 氧化， 再以溴苄在碳酸铯作用下进行羧基保护， n-BuLi为催化剂， 采用三甲基氯硅烷在-78 下分别对3， 7位羟基进行硅烷化保护， 以三氟化硼乙醚溶液为。
12、催化剂， 在-60对6位进行 亚乙基取代， 再以硼氢化钠进行7位羰基还原， 最后以Pd/C对6位亚乙基进行还原同时脱掉 苄基制备得到奥贝胆酸(I)。 0008 (4)以3-羟基-7-酮-5 -胆烷-24-酸为起始原料， 经甲酯化进行羧基保护， 再以三 甲基氯硅烷对3， 7位羟基进行硅烷化保护， 以三氟化硼乙醚为催化剂， 和无水乙醛反应， 然 后在碱性条件下水解得到3 -羟基-6-亚乙基-7-酮-5 -胆烷-24-酸(II)， 最后经Pd/C催化 氢化以及硼氢化钠还原得到终产物奥贝胆酸(I)。 0009 其中， 奥贝胆酸合成关键在于杂质的控制， 因此奥贝胆酸杂质的合成研究具有重 要意义。 文献指。
13、出奥贝胆酸需要研究的杂质包括： 3 -羟基-6-亚乙基-7-酮-5 -胆烷-24-酸 (II)； 3 -羟基-6 -乙基-7-酮-5 -胆烷-24-酸(III)； 3 ， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆烷-24- 酸(IV)； 3 ， 7 -二羟基-6-乙基-5 -胆烷-24-酸(V)。 另外工艺研究过程中需要研究的杂质 包括： 3， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆烷-24-醇(VI)； 3， 7-二酮-6 -乙基-5 -胆烷-24-酸 (VII)。 国内外对于奥贝胆酸杂质的合成报道文献较少。 说明书 1/5 页 4 CN 105646634 A 4 0010 发明内容 0011 本发。
14、明涉及奥贝胆酸三个杂质： 3 ， 7 -二羟基-6-乙基-5 -胆烷-24-酸(V)； 3 ， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆烷-24-醇(VI)； 3， 7-二酮-6 -乙基-5 -胆烷-24-酸(VII)。 本发明 的合成路线如下： 0012 0013 杂质(V)以3 -羟基-6-亚乙基-7-酮-5 -胆烷-24-酸(II)为原料， 杂质(VI)和 (VII)以奥贝胆酸(I)为原料。 其中3 -羟基-6-亚乙基-7-酮-5 -胆烷-24-酸(II)是合成奥 贝胆酸(I)的关键中间体。 0014 本发明的合成步骤： 0015 (1)3 ， 7 -二羟基-6-乙基-5 -胆烷-24-酸(V。
15、)的制备 0016 3 ， 7 -二羟基-6-乙基-5 -胆烷-24-酸(V)以3 -羟基-6-亚乙基-7-酮-5 -胆 说明书 2/5 页 5 CN 105646634 A 5 烷-24-酸(II)为原料， 通过钯炭氢化加氢， 然后7位羰基还原得到， 氢化条件为常压室温， 还 原温度为-25-30， 制备液相分离得到。 0017 3 ， 7 -二羟基-6-乙基-5 -胆烷-24-酸(V)的制备方法中， 氢化所用溶剂选自甲 醇、 乙醇、 异丙醇、 正丁醇、 丙酮、 丁酮、 四氢呋喃、 二氯甲烷、 氯仿、 乙腈、 乙酸乙酯、 四氢吡 咯、 吡啶、 哌啶、 N-甲基吡咯烷酮、 N， N-二甲基甲酰。
16、胺、 水、 氢氧化钠水溶液、 氢氧化钾水溶 液、 碳酸钠水溶液、 碳酸氢钠水溶液、 碳酸钾水溶液、 碳酸氢钾水溶液， 以及两种或以上的混 合溶液。 本发明优先选用甲醇和氢氧化钠水溶液的混合溶液作为溶剂。 0018 3 ， 7 -二羟基-6-乙基-5 -胆烷-24-酸(V)的制备方法中， 3 -羟基-6-亚乙基-7- 酮-5 -胆烷-24-酸(II)与溶剂的重量体积比为12535。 0019 3 ， 7 -二羟基-6-乙基-5 -胆烷-24-酸(V)的制备方法中， 所用还原剂选自N 、 K、 氯化亚锡、 硼氢化钠、 硼氢化钾、 红铝、 四氢铝锂、 三叔丁氧基氢化铝锂、 三氯化铈， 以及硼 氢化钠。
17、、 硼氢化钾等与路易酸复合还原剂。 本发明优先选用硼氢化钾和三氯化铈作为还原 剂。 0020 3 ， 7 -二羟基-6-乙基-5 -胆烷-24-酸(V)的制备方法中， 3 ， 7 -二羟基-6-乙 基-5 -胆烷-24-酸采用制备液相分离。 0021 (2)3 ， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆烷-24-醇(VI)的制备 0022 3 ， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆烷-24-醇(VI)以奥贝胆酸(I)为原料， 在酸性条 件下经酯化得羧基酯化物， 酯化反应温度20150， 再经还原制备得到。 0023 3 ， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆烷-24-醇(VI)的制备方法中， 酯化。
18、所用溶剂选酯 化所用溶剂选自甲醇、 乙醇、 异丙醇、 正丁醇、 仲丁醇、 新戊醇、 苯甲醇、 乙二醇、 丙三醇。 本发 明优先选择甲醇作溶剂进行酯化。 0024 ， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆烷-24-醇(VI)的制备方法中， 奥贝胆酸(I)与溶剂的 重量体积比为1515； 0025 酸性条件下酯化后经还原制得的3 ， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆烷-24-醇(VI)， 其中， 所述的酸的种类和用量均可为本领域此类反应的常规溶剂和用量， 本发明优选下述 酸和酸的用量： 其中， 所述的酸较佳的为盐酸， 硫酸， 甲磺酸； 所述的酸的用量较佳的为0.2 0.4当量， 调节溶液 H至12。
19、。 0026 酸性条件下酯化后经还原制得的3 ， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆烷-24-醇(VI)， 其中， 所用还原剂选自Na、 K、 氯化亚锡、 硼氢化钠、 硼氢化钾、 红铝、 四氢铝锂、 三叔丁氧基氢 化铝锂、 三氯化铈， 以及硼氢化钠、 硼氢化钾等与路易酸复合还原剂。 本发明优先选用四氢 铝锂作为还原剂。 0027 奥贝胆酸酯化物经还原制得的3 ， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆烷-24-醇(VI)， 提 取所用溶剂选自正丁醇、 异丙醇、 乙醇、 甲醇、 乙酸乙酯、 甲苯、 丙酮、 二氯甲烷、 氯仿、 乙腈、 四氢呋喃。 本发明优选乙酸乙酯溶剂。 0028 3 ， 7 -二羟。
20、基-6 -乙基-5 -胆烷-24-醇(VI)的制备方法中， 3 ， 7 -二羟基-6 - 乙基-5 -胆烷-24-醇(VI)精制采用硅胶柱层析方法， 洗脱剂采用石油醚/乙酸乙酯体系， 优 选乙酸乙酯石油醚146。 0029 (3)3， 7-二酮-6 -乙基-5 -胆烷-24-酸(VII)的制备 0030 3， 7-二酮-6 -乙基-5 -胆烷-24-酸(VII)以奥贝胆酸(I)为原料， 经氧化得到， 说明书 3/5 页 6 CN 105646634 A 6 反应温度-1030。 0031 3， 7-二酮-6 -乙基-5 -胆烷-24-酸(VII)的制备方法中， 所用氧化试剂选自 NBS、 过氧。
21、化氢、 过氧乙酸、 重铬酸钠、 三氧化铬、 硝酸、 高锰酸钾、 过硫酸铵、 次氯酸钠。 本发 明优先选用Jones试剂(三氧化铬)。 0032 3， 7-二酮-6 -乙基-5 -胆烷-24-酸(VII)的制备方法中， 所用溶剂选自丙酮、 四 氢呋喃、 二氯甲烷、 氯仿、 乙腈、 乙酸乙酯、 四氢吡咯、 三乙胺、 吡啶、 哌啶、 N-甲基吡咯烷酮、 N， N-二甲基甲酰胺、 N， N-二甲基乙酰胺， 本发明优选丙酮作为溶剂。 本发明优先选用丙酮溶 剂。 0033 3， 7-二酮-6 -乙基-5 -胆烷-24-酸(VII)的制备方法中， 奥贝胆酸(I)与溶剂的重 量体积比为11525。 0034 。
22、Jones试剂氧化制得的3， 7-二酮-6 -乙基-5 -胆烷-24-酸(VII)， 提取所用溶剂 选自正丁醇、 异丙醇、 乙醇、 甲醇、 乙酸乙酯、 甲苯、 丙酮、 二氯甲烷、 氯仿、 乙腈、 四氢呋喃。 本 发明优选乙酸乙酯溶剂。 0035 3， 7-二酮-6 -乙基-5 -胆烷-24-酸(VII)的制备方法中， 3， 7-二酮-6 -乙基-5 -胆烷-24-酸(VII)精制采用硅胶柱层析方法， 洗脱剂采用甲醇/二氯甲烷体系， 优选甲醇 二氯甲烷12030。 具体实施方式 0036 下列实例进一步说明本发明， 但本发明并不受其限制。 0037 实施例1： 3 ， 7 -二羟基-6-乙基-5。
23、 -胆烷-24-酸(V)制备 0038 将2.0g3 -羟基-6-亚乙基-7-酮-5 -胆烷-24-酸置于100ml单口瓶中， 加入50ml甲 醇-30氢氧化钠水溶液(21)混合溶液， 搅拌溶解， 加入0.2g5 d/C， 通入H2， 于25下搅 拌反应， 常压吸氢至反应完全， 滤去钯炭， 滤液用磷酸调至酸性， 浓缩至有白色固体时， 倒入 20ml冰水中， 静置析出固体， 抽滤， 干燥， 得白色固体1.25g。 0039 在氮气保护下， 将上述白色固体0.95g， CeCl30.85g， 用10ml甲醇四氢呋喃的混合 溶液(v/v1/1)溶解， 待全溶后降温至-25， 然后快速加入硼氢化钾， 。
24、TLC监控反应至原料 消失， 加入10盐酸水溶液淬灭， 乙酸乙酯萃取， 饱和食盐水洗涤， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 浓缩物经柱层析得到白色泡沫状固体0.43g， 再经制备液相分离得到目标产物3 ， 7 -二羟 基-6-乙基-5 -胆烷-24-酸(V)0.12g。 0040 其结构鉴定数据如下： 0041 1H-NMR(300Mz， DMSO-d6) ： 0.60(s， 3H)， 2.06-2.18(m， 1H)， 2.22-2.26(m， 1H)， 3.11 (m， 1H)， 3.48(s， 1H)， 4.06(d， J4.7Hz， 1H)， 4.31(d， J4.4Hz， 1H)， 11.9。
25、7(s， 1H)。 0042 ESI-MS(m/z)： 443.3M+Na+， 419.25M-H-。 0043 实施例23 ， 7 -二羟基-6 -乙基-5 -胆烷-24-醇(VI)的制备 0044 将奥贝胆酸2.0g置于25ml反应瓶中， 加10ml甲醇搅拌溶解， 加入0.1ml浓盐酸， 室 温搅拌(25-30)24h， TLC监测至原料反应完全， 用2M氢氧化钠溶液调pH7左右， 减压浓缩， 残渣加二氯甲烷溶解， 分液， 饱和食盐水洗涤， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 滤液减压浓缩至干， 得奥贝胆酸甲酯1.8g； 0045 -10， 反应瓶中加入20ml干燥的四氢呋喃， 0.35g氢化铝锂，。
26、 氮气保护， 保持在-10 说明书 4/5 页 7 CN 105646634 A 7 条件下， 缓慢滴加奥贝胆酸甲酯(1.8g)的四氢呋喃(10ml)溶液， 滴毕， 升至室温反应10h。 依次缓慢滴加1ml水， 1ml15氢氧化钠水溶液， 3ml水进行淬灭， 过滤， 滤液加入15ml乙酸乙 酯， 分液， 饱和食盐水洗涤， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 浓缩物经柱层析分离得白的泡沫状固体 0.85g。 0046 其结构鉴定数据如下： 0047 1H-NMR(300Mz， CDCl3) ： 0.66(S， 3H)， 0.87-0.92(m， 6H)， 0.95(d， J6.5Hz， 3H)， 3.35。
27、-3.45(m， 1H)， 3.61(t， J6.2Hz， 2H)3.70(s， 1H)。 0048 ESI-MS(m/z)： 429.4M+Na+， 405.4M-H-。 0049 实施例33， 7-二酮-6 -乙基-5 -胆烷-24-酸(VII)的制备 0050 将3.75g奥贝胆酸置于250ml单口瓶， 室温下加入75ml丙酮， 搅拌溶解， 氮气保护， 冰水浴下， 缓慢滴加7mlJones试剂， 滴毕， 缓慢升至室温， 继续搅拌2h。 缓慢滴加30ml异丙 醇进行淬灭， 过滤， 滤液浓缩， 残渣加入40ml乙酸乙酯， 饱和碳酸氢钠洗涤， 饱和食盐水洗 涤， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 浓缩物经柱层析分离得到类白色固体1.52g。 0051 其结构鉴定数据如下： 0052 1H-NMR(300Mz， CDCl3) ： 0.69(S， 3H)， 0.80(t， J7.3Hz， 3H)， 0.94(d， J6.3Hz， 3H)， 1.48-1.77(m， 6H)， 2.3-2.5(m， 2H)， 2.73(m， 1H)。 0053 ESI-MS(m/z)： 439.3M+Na+， 415.3M-H-。 说明书 5/5 页 8 CN 105646634 A 8 。