技术领域：
本发明涉及药物领域，具体涉及用于预防和治疗或预防类风湿性关节炎的多 肽。
背景技术：
类风湿关节炎的病因和发病机制尚未完全明了，主要是机体对自身免疫系统 的免疫应答，引起的炎性关节炎。以慢性、对称性、多滑膜关节炎和关节外病变 为主要临床表现，属于自身免疫炎性疾病。其基本病理特点是血管炎和滑膜炎。 关节内滑膜血管增生，形成血管翳，导致滑膜增厚，渗出增多，分泌多种细胞因 子，侵犯软骨并引起骨质损害。对其周围的肌腔、韧带、腱鞘以及肌肉等组织也 均可侵蚀，从而影响关节的稳定，容易发生关节畸形而出现功能障碍。
核苷酸结合寡聚化结构域样受体(nucleotide-binding oligomerization domain like receptors，NOD-like receptors，NLR)家族是近年发现的细胞质内的模式识 别受体(pattern recognitionreceptors，PRR)。NLR家族的分子结构在进化中高度 保守，在宿主防御中也发挥着重要作用并且可与Toll样受体(Tolllike receptors， TLR)蛋白家族的免疫防御功能互补。在哺乳动物中NLR家族有20多个成员， 尽管这些受体的配体及其功能尚不清楚，但它们的主要作用在于识别胞质内病原 相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns，PAMP)和损伤相关分子模 式(damage-associated molecular patterns，DAMP)，从而诱导免疫应答。
其中，NOD1(又名CARD4)是NLR族中最早发现的细胞内PRR之一。 NOD1的蛋白为胞浆内模式识别受体，能识别进入胞内的细菌胞壁及其降解产物 的致病特性，发出警报，向RIP2等其他的蛋白发送信号，告知细胞处于危险之 中。最终，这一信号传导到NF-κB蛋白，这一转录因子会指示基因组启动一种 免疫反应，激活与炎症、中性粒细胞和其他免疫功能相关的基因。而NF-κB蛋 白，与类风湿关节炎中炎症的发生，软骨损伤，细胞迁移以及血管翳的形成都有 重要的关系。NOD1蛋白成为对抗类风湿关节炎的新靶点。尽管如此，并没有成 熟开发的NOD1蛋白多肽抑制多肽问世，用于治疗RA。
发明内容：
本发明目的是针对现有治疗类风湿关节炎的特点，设计一种NOD1蛋白抑 制多肽，可以用于治疗或预防类风湿关节炎。
本发明技术方案是提供一种NOD1蛋白抑制多肽，其序列为 MKNMWKSARKIDAFQHM，及在治疗或预防类风湿性关节炎药物中的应用。 其用途可通过多种给药方式治疗和预防类风湿关节炎疾病，包括皮下或肌肉注射， 静脉注射或者静脉滴注，口服给药如药丸、胶囊等，鼻喷剂等。
有益结果：
本发明中的NOD1蛋白抑制多肽序列MKNMWKSARKIDAFQHM，可以靶 向抑制NOD1蛋白，抑制NOD1蛋白受体产生的生理或病理的效应，达到预防 或治疗类风湿性关节炎的效果。
发明人经过大量实验获知NOD1蛋白抑制多肽能够抑制佐剂型大鼠类风湿 关节炎和DBA/1小鼠胶原型类风湿性关节炎的发展，体内实验证明具有显著的 治疗类风湿型关节炎的效果。说明本发明设计的NOD1蛋白抑制多肽科学、合 理、可行有效，能作为治疗或预防类风湿性关节炎药物。
具体实施方式
实施例1
NOD1蛋白抑制多肽在胶原诱导小鼠关节炎动物模型体内免疫保护作用
构建胶原型小鼠关节炎动物模型，研究NOD1蛋白抑制多肽对小鼠胶原诱导 性关节炎(collagen induced arthritis，CIA)的治疗作用。采用小鼠作为受试动物， SPF级DBA/1小鼠60只(由上海西普尔-必凯实验动物有限公司(Sino-British SIPPR Lab.Animal Ltd)提供，动物生产许可证号码：SCXK(沪)2008-0016)，雄 性，7-8周龄，体重为18-22g，随机分成6组，分别是正常对照组，模型对照组， 多肽低中高3个剂量组(1，2，4mg/kg)和阳性药对照组(甲氨蝶呤2mg/kg)。除 正常组外，第0天各实验组建立小鼠CIA模型，方法是鸡软骨Ⅱ型胶原(cⅡ)用0.1 mol/l醋酸溶解成4mg/ml的溶液，于4℃冰箱过夜。实验当天用Ⅱ型胶原与含4 mg/ml Myeobaeterium tuberculosis strain H37Rv的完全弗氏佐剂(CFA)等体积充分 乳化，待DBA/1小鼠麻醉后，于其尾部皮内每只注射乳化剂50μl进行致敏，21d 后用4mg/ml的Ⅱ型胶原(cⅡ)与不完全弗氏佐剂(IFA)等体积充分乳化后以相同 剂量的乳化剂于尾部进行再次免疫。造模第30d起皮下注射给药：多肽的3个剂 量组(1，2，4mg/kg)：每日两次，连续7天；阳性药对照组(甲氨蝶呤2mg/kg)： 每3天一次，连续3次；正常对照组和模型对照组(生理盐水)：连续7天。分别于 造模后第38天测关节评分、分别检测左右后足足踝直径来观察药物对小鼠胶原型 关节炎的影响。
NOD1蛋白抑制多肽在胶原诱导小鼠关节炎动物模型体内免疫保护作用具体 结果如下：NOD1蛋白抑制多肽对小鼠胶原型关节肿胀度的影响，阳性对照组、 NOD1蛋白抑制多肽高、中、低剂量组关节肿胀度与模型组比较，均有极显著性 差异(P<0.01)实验结果具有统计学意义。NOD1蛋白抑制多肽对小鼠胶原型关 节炎足爪肿胀度的影响，阳性对照组、NOD1蛋白抑制多肽高、中、低剂量组足 爪肿胀度与模型组比较，均有极显著性差异(P<0.01)，实验结果具有统计学意 义。多肽对胶原型关节炎小鼠关节评分的影响，多肽低、中、高剂量组四肢评分 显著低于模型对照组(P＜0.01)，与模型对照组比较极显著性差异，实验结果具 有统计学意义。
表1 NOD1蛋白抑制多肽对胶原型关节炎的影响(means±SD)
·*P<0.05；**P<0.01(和模型组比较)
结论：NOD1蛋白抑制多肽对小鼠胶原型关节炎具有治疗作用。
实施例2
NOD1蛋白抑制多肽对佐剂型大鼠关节炎动物模型体内免疫保护作用
构建佐剂型大鼠关节炎动物模型，研究多肽对佐剂性关节炎(Adjuvant arthritis，AA)大鼠的治疗作用。采用大鼠作为受试动物，SPF级SD大鼠60 只(由上海西普尔-必凯实验动物有限公司(Sino-British SIPPR Lab.Animal Ltd) 提供，动物生产许可证号码：SCXK(沪)2008-0016)，雄性，体重为140g-160g， 随机分成6组，分别是正常对照组，模型对照组，NOD1蛋白抑制多肽低中高3 个剂量组(0.5，1，2mg/kg)和阳性药对照组(甲氨蝶呤1mg/kg)。除正常组 外，第0天各实验组建立大鼠AA模型，方法是在大鼠的左侧后足足跎注射含灭 活的结核分枝杆菌(H37RA，10mg/ml)完全弗氏佐剂0.1ml造成大鼠佐剂性关节 炎模型。造模第10天起皮下注射给药：多肽的3个剂量组(0.5，1，2mg/kg)： 每日两次，连续7天；阳性药对照组(甲氨蝶呤1mg/kg)：每3天一次，连续3 次；正常对照组和模型对照组(生理盐水)：连续7天。造模后第18天，关节评 分、分别检测左右后足足踝直径来观察药物对大鼠佐剂型关节炎的影响。
多肽在佐剂性大鼠关节炎动物模型体内免疫保护作用，具体结果如下：NOD1 蛋白抑制多肽对大鼠原发性关节炎足爪肿胀度的影响，大鼠阳性对照组、NOD1 蛋白抑制多肽的低、中、高剂量组左后足踝直径与模型组比较，有极显著性差异 (P<0.01)；NOD1蛋白抑制多肽对大鼠继发性关节炎右后足踝直径的影响，大 鼠阳性对照组、NOD1蛋白抑制多肽低、中、高剂量组右后足踝直径与模型组比 较，有显著性差异(P<0.05)。NOD1蛋白抑制多肽对佐剂型关节炎大鼠关节评 分的影响，多肽低、中、高剂量组四肢评分显著低于模型对照组(P＜0.05)，与 模型对照组比较差异均有统计学意义。
表2 NOD1蛋白抑制多肽对佐剂型关节炎的影响(means±SD)
·*P<0.05；**P<0.01(和模型组比较)
结论：NOD1蛋白抑制多肽对AA大鼠关节炎的鱼具有治疗作用。
SEQUENCE LISTING
<110> 苏州普罗达生物科技有限公司
<120> NOD1蛋白抑制多肽及其应用
<130>
<160> 1
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<400> 1
Met Lys Asn Met Trp Lys Ser Ala Arg Lys Ile Asp Ala Phe Gln His
1 5 10 15
Met