一种孔雀石绿染料废水的处理方法.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201010290607.X

申请日:

2010.09.21

公开号:

CN101973640A

公开日:

2011.02.16

当前法律状态:

终止

有效性:

无权

法律详情:

未缴年费专利权终止IPC(主分类):C02F 3/34申请日:20100921授权公告日:20111116终止日期:20160921|||专利权的转移IPC(主分类):C02F 3/34变更事项:专利权人变更前权利人:东北电力大学变更后权利人:东北电力大学变更事项:地址变更前权利人:132012 吉林省吉林市长春路169号变更后权利人:132012 吉林省吉林市长春路169号变更事项:专利权人变更后权利人:中国大唐集团科学技术研究院有限公司登记生效日:20131211|||授权|||实质审查的生效IPC(主分类):C02F 3/34申请日:20100921|||公开

IPC分类号:

C02F3/34; C02F103/36(2006.01)N

主分类号:

C02F3/34

申请人:

东北电力大学

发明人:

乔楠; 于大禹; 张金榜; 关晓辉

地址:

132012 吉林省吉林市长春路169号

优先权:

专利代理机构:

吉林市达利专利事务所 22102

代理人:

张瑜声

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内容摘要

一种孔雀石绿染料废水的处理方法,经细菌纤维素膜的制备、细菌纤维素膜的改性处理、改性细菌纤维素膜对白腐菌的固定化,将得到的固定化白腐菌改性细菌纤维素膜,加到50mL孔雀石绿染料废水中,取20~40mg孔雀石绿,溶于1L白腐菌液体限制性培养基中,于28℃下在气浴恒温摇床上以120rpm处理5天,每隔24小时测定废水的色度,5天后,弃掉处理后的废水,保留固定化菌,再加入50mL新配制的相同浓度的染料废水,处理条件同上,每隔24小时测定废水的色度,以5天为一循环,如此重复5次,废水色度的去除率始终为86%以上。所涉及的木醋杆菌、白腐菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心。

权利要求书

1: 一种孔雀石绿染料废水的处理方法, 是由如下的过程和步骤组成 : (1) 细菌纤维素膜的制备 将 保 存 在 斜 面 上 的 菌 株 编 号 为 CGMCC NO : 1.1812 的 木 醋 杆 菌 Gluconacetobactcrxylinum 接入到 50mL 种子培养基中, 所述的种子培养基中各组分用 量占种子培养基质量用量的百分比分别为 : 葡萄糖 2 % ; 蛋白胨 0.5 % ; 酵母膏 0.3 % ; Na2HPO4·12H2O0.2% ; KH2PO40.1% ; MgSO4·7H2O 0.025% ; 柠檬酸 0.2% ; pH5.8 ; 气浴恒温 摇床上以 160rpm 培养 2 天, 得到活化好的木醋杆菌培养液, 取此木醋杆菌培养液 10mL 接 入到 125mL 发酵培养基中, 所述的发酵培养基中各组分用量占发酵培养基质量用量的百分 比分别为 : 葡萄糖 2% ; 蛋白胨 0.5% ; 酵母膏 0.3% ; Na2HPO4·12H2O 0.2% ; KH2PO40.1% ; MgSO4·7H2O 0.025% ; 柠檬酸 0.2% ; pH5.8 ; 30℃静置培养 7 天, 在液面生成淡黄色胶质膜, 将膜取出, 用蒸馏水反复冲洗, 除去膜表面培养基及杂质 ; 再将膜浸泡于 0.1mol/L 的 NaOH 溶液中, 80℃煮沸 60min, 去除菌膜内部的菌体和残留培养基, 然后用蒸馏水反复冲洗至中 性, 得到细菌纤维素膜 ; (2) 细菌纤维素膜的改性处理 将 40 ~ 60g 步骤 (1) 得到的细菌纤维素膜加入到 100 ~ 180mL 的 1mol/L 氢氧化钠溶 液中, 再加入 20 ~ 40mL 环氧氯丙烷, 于 60℃恒温水浴反应 30 ~ 60min 后, 取出膜用丙酮洗 涤; 水洗后, 再加入 5.5 ~ 9mL 的乙二胺和 49.5 ~ 81mL 的蒸馏水 ; 充分振摇后, 在 80℃恒 温水浴中加热 30 ~ 60min, 然后取出膜用蒸馏水洗至中性, 再用 1%的重量百分含量的盐酸 洗涤 3 遍后, 蒸馏水洗至中性, 再经丙酮润洗后, 真空干燥至恒重, 得到改性后的细菌纤维 素膜 ; (3) 改性细菌纤维素膜对菌株编号为 CGMCC NO : 5.776 的白腐菌的固定化 将 6 ~ 9g 步骤 (2) 得到的改性细菌纤维素膜加入到 80 ~ 105mL 的 pH = 7.0、 浓度为 0.2mol/L 的磷酸缓冲液中, 再加入 6 ~ 7mL 25%重量百分含量的戊二醛水溶液 ; 于 40℃下 轻微搅拌反应 30 ~ 60min, 取出膜依次用蒸馏水和 0.2mol/L, pH = 7.0 的磷酸缓冲液洗涤, 然后真空干燥 ; 干燥后的细菌纤维素膜加入到 110 ~ 130mL 的白腐菌液体限制性培养基中, 所述的白腐菌液体限制性培养基中各组分用量分别为 : KH2PO42g/L ; MgSO4·7H2O 0.25g/L ; MnSO40.5mg/L ; 无 水 FeSO40.1g/L ; NaCl1.0mg/L ; NH4NO32g/L ; CaCl20.1g/L ; 葡 萄 糖 15g/L ; VB15.0mg/L ; pH = 6.0 ~ 7.0 ; 灭菌后再加入 12 ~ 15mL 白腐菌孢子液 ; 于 28℃, 120rpm 摇 床上培养 48 小时, 取出膜后用无菌水反复冲洗三次, 此时膜表面形成了一层薄薄的白色菌 膜, 得到固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜 ; (4) 固定化菌株编号为 CGMCC NO : 5.776 的白腐菌的改性细菌纤维素膜对孔雀石绿染 料废水的处理 将 1 ~ 2g 步骤 (3) 得到的固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜, 加入到 50mL 孔雀石绿 染料废水中, 上述孔雀石绿染料废水的制备过程如下 : 称取 20 ~ 40mg 孔雀石绿, 溶于 1L 上 述步骤 (3) 所述的白腐菌液体限制性培养基中, 得到孔雀石绿染料废水 ; 于 28℃下, 在气浴 恒温摇床上以 120rpm 处理 5 天, 每隔 24 小时测定染料废水的色度, 5 天后, 弃掉处理后的染 料废水, 保留固定化菌, 再加入 50mL 新配制的相同浓度的染料废水, 处理条件同上, 每隔 24 小时测定染料废水的色度, 以 5 天为一循环, 如此重复 5 次, 染料废水色度的去除率始终维 持在 86%以上。

说明书


一种孔雀石绿染料废水的处理方法

    技术领域 本发明属于应用微生物与环境工程技术领域, 涉及利用一种新型固定化载体固定 化微生物处理染料废水的方法。 尤其涉及利用固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜处理孔雀 石绿染料废水。
     背景技术 孔雀石绿是一种有毒的三苯甲烷类化学物, 由苯甲醛和 N, N- 二甲基苯胺在盐酸 或硫酸中缩合生成四甲基代二氨基三苯甲烷的隐性碱体后, 在酸介质中被二氧化铅秘氧化 制得。目前, 孔雀石绿染料废水的处理主要采用光催化氧化法、 微波法、 铁氧电池法及硅藻 土多孔陶瓷法等, 但这些方法存在成本高、 周期长、 操作稳定性差、 容易引起二次污染等缺 点。
     自然界中白腐菌 (Phanerochaete chrysosporium) 是一种重要的生物资源, 能够 降解多环芳香烃类和毒性较大的有机污染物。 白腐菌在处理染料过程中会产生胞外过氧化 物酶如木素过氧化物酶 LiP 和锰过氧化物酶 MnP 等, 这些酶具有底物非特异性等特殊性能, 并能引发一系列的自由基反应, 从而对染料进行脱色、 降解和矿化。
     虽然白腐菌有诸多优点, 但其在悬浮培养降解体系中还存在处理效率低, 酶系统 稳定性差, 抗逆性、 抗毒性、 抗高负荷能力差、 固液分离困难等问题。
     固定化白腐菌常用的方法有包埋法、 吸附法等, 常用的固定化载体有木屑、 聚氨酯 泡沫、 活性炭、 聚乙烯醇、 海藻酸钙。但上述载体存在很多问题, 如制备过程较复杂、 固定化 效率低、 操作稳定性差、 废弃后易对环境造成二次污染。
     发明内容
     本发明的目的 : 通过对木醋杆菌产生的细菌纤维素膜进行改性处理, 使其成为固 定化微生物的优良载体, 进而用于固定化白腐菌, 建立一种处理孔雀石绿染料废水的简单、 有效的方法, 被改性细菌纤维素膜固定化的白腐菌在对孔雀石绿染料废水处理过程中活性 更加稳定, 抗干扰能力更强, 载体持久、 耐用, 能够重复使用多次。
     一种孔雀石绿染料废水的处理方法, 是由如下的过程和步骤组成 :
     (1) 细菌纤维素膜的制备
     将 保 存 在 斜 面 上 的 菌 株 编 号 为 CGMCC NO : 1.1812 的 木 醋 杆 菌 Gluconacetobacterxylinum 接入到 50mL 种子培养基中, 所述的种子培养基中各组分用 量占种子培养基质量用量的百分比分别为 : 葡萄糖 2 % ; 蛋白胨 0.5 % ; 酵母膏 0.3 % ; KH2PO40.1% ; MgSO4·7H2O 0.025% ; 柠檬酸 0.2% ; pH5.8 ; 气浴恒温 Na2HPO4·12H2O0.2% ; 摇床上以 160rpm 培养 2 天, 得到活化好的木醋杆菌培养液, 取此木醋杆菌培养液 10mL 接 入到 125mL 发酵培养基中, 所述的发酵培养基中各组分用量占发酵培养基质量用量的百分 比分别为 : 葡萄糖 2% ; 蛋白胨 0.5% ; 酵母膏 0.3% ; Na2HPO4·12H2O 0.2% ; KH2PO40.1% ; MgSO4·7H2O 0.025% ; 柠檬酸 0.2% ; pH5.8 ; 30℃静置培养 7 天, 在液面生成淡黄色胶质膜,将膜取出, 用蒸馏水反复冲洗, 除去膜表面培养基及杂质 ; 再将膜浸泡于 0.1mol/L 的 NaOH 溶液中, 80℃煮沸 60min, 去除菌膜内部的菌体和残留培养基, 然后用蒸馏水反复冲洗至中 性, 得到细菌纤维素膜 ;
     上述木醋杆菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心, 菌株编号为 CGMCC NO : 1.1812 ;
     (2) 细菌纤维素膜的改性处理
     将 40 ~ 60g 步骤 (1) 得到的细菌纤维素膜加入到 100 ~ 180mL 的 1mol/L 氢氧化 钠溶液中, 再加入 20 ~ 40mL 环氧氯丙烷, 于 60℃恒温水浴反应 30 ~ 60min 后, 取出膜用 丙酮洗涤 ; 水洗后, 再加入 5.5 ~ 9mL 的乙二胺和 49.5 ~ 81mL 的蒸馏水 ; 充分振摇后, 在 80℃恒温水浴中加热 30 ~ 60min, 然后取出膜用蒸馏水洗至中性, 再用 1%的重量百分含量 的盐酸洗涤 3 遍后, 蒸馏水洗至中性, 再经丙酮润洗后, 真空干燥至恒重, 得到改性后的细 菌纤维素膜 ;
     (3) 改性细菌纤维素膜对菌株编号为 CGMCC NO : 5.776 的白腐菌的固定化
     将 6 ~ 9g 步骤 (2) 得到的改性细菌纤维素膜加入到 80 ~ 105mL 的 pH = 7.0、 浓度 为 0.2mol/L 的磷酸缓冲液中, 再加入 6 ~ 7mL 25%重量百分含量的戊二醛水溶液 ; 于 40℃ 下轻微搅拌反应 30 ~ 60min, 取出膜依次用蒸馏水和 0.2mol/L, pH = 7.0 的磷酸缓冲液洗 涤, 然后真空干燥 ; 干燥后的细菌纤维素膜加入到 110 ~ 130mL 的白腐菌液体限制性培养基 中, 所述的白腐菌液体限制性培养基中各组分用量分别为 : KH2PO42g/L ; MgSO4·7H2O 0.25g/ L; MnSO40.5mg/L ; 无水 FeSO40.1g/L ; NaCl 1.0mg/L ; NH4NO32g/L ; CaCl20.1g/L ; 葡萄糖 15g/ L; VB15.0mg/L ; pH = 6.0 ~ 7.0 ; 灭菌后再加入 12 ~ 15mL 白腐菌孢子液 ; 于 28℃, 120rpm 摇床上培养 48 小时, 取出膜后用无菌水反复冲洗三次, 此时膜表面形成了一层薄薄的白色 菌膜, 得到固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜 ;
     上述白腐菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心, 菌株编号为 CGMCC NO : 5.776 ;
     (4) 固定化菌株编号为 CGMCC NO : 5.776 的白腐菌的改性细菌纤维素膜对孔雀石 绿染料废水的处理
     将 1 ~ 2g 步骤 (3) 得到的固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜, 加入到 50mL 孔雀 石绿染料废水中, 上述孔雀石绿染料废水的制备过程如下 : 称取 20 ~ 40mg 孔雀石绿, 溶于 1L 上述步骤 (3) 所述的白腐菌液体限制性培养基中, 得到孔雀石绿染料废水 ; 于 28℃下, 在 气浴恒温摇床上以 120rpm 处理 5 天, 每隔 24 小时测定染料废水的色度, 5 天后, 弃掉处理后 的染料废水, 保留固定化菌, 再加入 50mL 新配制的相同浓度的染料废水, 处理条件同上, 每 隔 24 小时测定染料废水的色度, 以 5 天为一循环, 如此重复 5 次, 染料废水色度的去除率始 终维持在 86%以上。
     本发明与现有技术相比存在显著的进步和积极的效果 :
     ①本发明为细菌纤维素膜应用提供了新的思路和途径。
     ②改性后的细菌纤维素膜韧性提高, 耐腐蚀能力增强, 并且减小了载体本身对白 腐菌处理孔雀石绿染料废水效果的干扰。
     ③固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜处理孔雀石绿染料废水的方法具有可操作 性, 并且操作简单, 处理效果明显及稳定性好, 受环境影响小。④改性细菌纤维素膜废弃后能被环境微生物降解, 并成为植物生长的肥料不会造 成二次污染。 具体实施方式
     实施例 1
     白腐菌孢子液的制备 :
     从保存菌株编号为 CGMCC NO : 5.776 的白腐菌的斜面上挑取少量菌体, 划线法接 种到固体培养基上, 所述的固体培养基中各组分用量占固体培养基质量用量的百分比分别 为: 马铃薯葡萄糖琼脂 3.8% ; KH2PO40.3% ; MgSO4·7H2O 0.15%, 30℃培养 5 天后, 白腐菌 孢子菌丝大量扩增, 向平皿中注入少量无菌水, 以推棒法刮下孢子粉, 经 4 层擦镜纸滤去菌 丝体, 得到的乳白色孢子悬浮液即为白腐菌孢子液, 4℃冰箱保存备用 ;
     上述步骤中白腐菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心, 菌株编号为 CGMCCNO : 5.776。
     实施例 2
     细菌纤维素膜的制备 :
     将 保 存 在 斜 面 上 的 菌 株 编 号 为 CGMCC NO : 1.1812 的 木 醋 杆 菌 Gluconacetobacterxylinum 接入到 50mL 种子培养基中, 所述的种子培养基中各组分用 量占种子培养基质量用量的百分比分别为 : 葡萄糖 2 % ; 蛋白胨 0.5 % ; 酵母膏 0.3 % ; Na2HPO4·12H2O0.2% ; KH2PO40.1% ; MgSO4·7H2O 0.025% ; 柠檬酸 0.2% ; pH5.8 ; 气浴恒温 摇床上以 160rpm 培养 2 天, 得到活化好的木醋杆菌培养液, 取此木醋杆菌培养液 10mL 接 入到 125mL 发酵培养基中, 所述的发酵培养基中各组分用量占发酵培养基质量用量的百分 比分别为 : 葡萄糖 2 % ; 蛋白胨 0.5 % ; 酵母膏 0.3 % ; Na2HPO4·12H2O0.2 % ; KH2PO40.1 % ; MgSO4·7H2O 0.025% ; 柠檬酸 0.2% ; pH5.8 ; 30℃静置培养 7 天, 在液面生成淡黄色胶质膜, 将膜取出, 用蒸馏水反复冲洗, 除去膜表面培养基及杂质 ; 再将膜浸泡于 0.1mol/L 的 NaOH 溶液中, 80℃煮沸 60min, 去除菌膜内部的菌体和残留培养基, 然后用蒸馏水反复冲洗至中 性, 得到细菌纤维素膜。
     上 述 步 骤 中 木 醋 杆 菌 购 自 中 国 普 通 微 生 物 菌 种 保 藏 管 理 中 心, 菌株编号为 CGMCCNO : 1.1812 ;
     实施例 3 :
     细菌纤维素膜的改性处理 :
     取细菌纤维素膜 40g 放入 100mL 的 1mol/L 氢氧化钠溶液中, 再加入 20mL 的环氧 氯丙烷, 于 60℃恒温水浴反应 30min 后, 取出膜用丙酮洗涤, 以除掉膜上残留的小分子有机 物; 水洗后, 再加入 5.5mL 的乙二胺和 49.5mL 蒸馏水, 充分振摇后, 在 80℃恒温水浴中加热 30min, 然后取出膜用蒸馏水洗至中性, 再用 1%的重量百分含量的盐酸洗涤 3 遍后, 蒸馏水 洗至中性, 再经丙酮润洗后, 真空干燥至恒重, 此时膜的柔韧性变强, 表面呈淡黄色, 光滑, 有光泽, 此即为改性后的细菌纤维素膜 ;
     改性细菌纤维素膜对菌株编号为 CGMCC NO : 5.776 的白腐菌的固定化 :
     取 6g 上述步骤得到的改性细菌纤维素膜放到含有 80mL 的磷酸缓冲液 (Phosphate Buffer, 0.2mol/L, pH = 7.0) 的锥形瓶中, 再加入 6mL 25%重量百分含量的戊二醛水溶液,40℃轻微搅拌反应 30min, 取出膜依次用蒸馏水和磷酸缓冲液 (Phosphate Buffer, 0.2mol/ L, pH = 7.0) 洗涤, 然后真空干燥 ; 将上述戊二醛处理后的细菌纤维素膜放到含有 110mL 白腐菌液体限制性培养基的锥形瓶中, 所述的白腐菌液体限制性培养基中各组分用量分别 为: KH2PO42g/L ; MgSO4·7H2O 0.25g/L ; MnSO40.5mg/L ; 无 水 FeSO40.1g/L ; NaCl 1.0mg/L ; NH4NO32g/L ; CaCl20.1g/L ; 葡 萄 糖 15g/L ; VB15.0mg/L ; pH = 6.0 ~ 7.0( 以 下 实 施 例 中 白 腐菌液体限制性培养基组成相同 ) ; 灭菌后再加入 12mL 实施例 1 得到的白腐菌孢子液, 于 28℃, 120rpm 摇床上培养 48 小时, 取出膜后用无菌水反复冲洗三次, 此时细菌纤维素膜表 面形成了一层薄薄的白色菌膜, 即为固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜。
     实施例 4 :
     细菌纤维素膜的改性处理 :
     取细菌纤维素膜 50g 放入 150mL 的 1mol/L 氢氧化钠溶液中, 再加入 30mL 的环氧 氯丙烷, 于 60℃恒温水浴反应 45min 后, 取出膜用丙酮洗涤, 以除掉膜上残留的小分子有机 物; 水洗后, 再加入 8.5mL 的乙二胺和 76.5mL 蒸馏水, 充分振摇后, 在 80℃恒温水浴中加热 45min, 然后取出膜用蒸馏水洗至中性, 再用 1%的重量百分含量盐酸洗涤 3 遍后, 蒸馏水洗 至中性, 再经丙酮润洗后, 真空干燥至恒重, 此时膜的柔韧性变强, 表面呈淡黄色, 光滑, 有 光泽, 此即为改性后的细菌纤维素膜 ; 改性细菌纤维素膜对菌株编号为 CGMCC NO : 5.776 的白腐菌的固定化 :
     取 7g 上述步骤得到的改性细菌纤维素膜放到含有 90mL 的磷酸缓冲液 (Phosphate Buffer, 0.2mol/L, pH = 7.0) 的锥形瓶中, 再加入 6.5mL 25%重量百分含量的戊二醛水溶 液, 40℃轻微搅拌反应 45min, 取出膜依次用蒸馏水和磷酸缓冲溶液 (Phosphate Buffer, 0.2mol/L, pH = 7.0) 洗涤, 然后真空干燥 ; 将上述戊二醛处理后的细菌纤维素膜放到含有 120mL 白腐菌液体限制性培养基的锥形瓶中 ; 灭菌后再加入 13mL 实施例 1 得到的白腐菌孢 子液, 于 28℃, 120rpm 摇床上培养 48 小时, 取出膜后用无菌水反复冲洗三次, 此时细菌纤维 素膜表面形成了一层薄薄的白色菌膜, 即为固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜。
     实施例 5 :
     细菌纤维素膜的改性处理 :
     取细菌纤维素膜 60g 放入 180mL 的 1mol/L 氢氧化钠溶液中, 再加入 40mL 的环氧 氯丙烷, 于 60 ℃恒温水浴反应 60min 后, 取出膜用丙酮洗涤, 以除掉膜上残留的小分子有 机物 ; 水洗后, 再加入 9mL 的乙二胺和 81mL 蒸馏水, 充分振摇后, 在 80 ℃恒温水浴中加热 60min, 然后取出膜用蒸馏水洗至中性, 再用 1%的重量百分含量的盐酸洗涤 3 遍后, 蒸馏水 洗至中性, 再经丙酮润洗后, 真空干燥至恒重, 此时膜的柔韧性变强, 表面呈淡黄色, 光滑, 有光泽, 此即为改性后的细菌纤维素膜 ;
     改性细菌纤维素膜对菌株编号为 CGMCC NO : 5.776 的白腐菌的固定化 :
     取 9g 上 述 步 骤 得 到 的 改 性 细 菌 纤 维 素 膜 放 到 含 有 105mL 的 磷 酸 缓 冲 液 (Phosphate Buffer, 0.2mol/L, pH = 7.0) 的锥形瓶中, 再加入 7mL 25%重量百分含量的 戊二醛水溶液, 40℃轻微搅拌反应 60min, 取出膜依次用蒸馏水和磷酸缓冲液 (Phosphate Buffer, 0.2mol/L, pH = 7.0) 洗涤, 然后真空干燥 ; 将上述戊二醛处理后的细菌纤维素膜放 到含有 130mL 白腐菌液体限制性培养基的锥形瓶中 ; 灭菌后再加入 15mL 实施例 1 得到的白 腐菌孢子液, 于 28℃, 120rpm 摇床上培养 48 小时, 取出膜后用无菌水反复冲洗三次, 此时细
     菌纤维素膜表面形成了一层薄薄的白色菌膜, 即为固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜。
     实施例 6 :
     固定化菌株编号为 CGMCC NO : 5.776 的白腐菌的改性细菌纤维素膜对孔雀石绿染 料废水的处理 :
     取 1g 固定化菌株编号为 CGMCC NO : 5.776 的白腐菌的改性细菌纤维素膜, 以及相 同质量的同定化白腐菌的聚乙烯醇海藻酸钠, 分别加入到含有 50mL 孔雀石绿染料废水的 锥形瓶中, 上述孔雀石绿染料废水的制备过程如下 : 称取 20mg 孔雀石绿, 溶于 1L 白腐菌液 体限制性培养基中, 即得到孔雀石绿染料废水 ; 于 28℃下, 在气浴恒温摇床上以 120rpm 摇 床处理 5 天, 每隔 24 小时测定染料废水的色度, 5 天后, 弃掉处理后的染料废水, 保留固定化 菌, 再向此锥形瓶中加入 50mL 新配制的 20mg/L 孔雀石绿染料废水, 处理条件同上, 每隔 24 小时测定染料废水的色度, 以 5 天为一循环, 如此重复 5 次, 即用同 1 批固定化白腐菌的改 性细菌纤维素膜连续处理 6 批次染料废水, 色度去除效果如表 1 所示 :
     表 1 固定化白腐菌的不同载体对 20mg/L 孔雀石绿染料废水的处理效果
     从表 1 中可以看出, 1g 固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜对 20mg/L 孔雀石绿染料 废水的处理效果明显优于相同质量的固定化白腐菌的聚乙烯醇 - 海藻酸钠, 且改性细菌纤 维素膜对白腐菌处理孔雀石绿染料废水效果的干扰明显小于聚乙烯醇 - 海藻酸钠。
     实施例 7 :
     固定化菌株编号为 CGMCC NO : 5.776 的白腐菌的改性细菌纤维素膜对孔雀石绿染 料废水的处理 :
     取 2g 固定化菌株编号为 CGMCC NO : 5.776 的白腐菌的改性细菌纤维素膜, 以及相
     同质量的固定化白腐菌的聚乙烯醇 - 海藻酸钠, 分别加入到含有 50mL 孔雀石绿染料废水的 锥形瓶中, 上述孔雀石绿染料废水的制备过程如下 : 称取 40mg 孔雀石绿, 溶于 1L 白腐菌液 体限制性培养基中, 即得到孔雀石绿染料废水 ; 于 28℃下, 在气浴恒温摇床上以 120rpm 摇 床处理 5 天, 每隔 24 小时测定染料废水的色度, 5 天后, 弃掉处理后的染料废水, 保留固定化 菌, 再向此锥形瓶中加入 50mL 新配制的 40mg/L 孔雀石绿染料废水, 处理条件同上, 每隔 24 小时测定染料废水的色度, 以 5 天为一循环, 如此重复 5 次, 即用同 1 批固定化白腐菌的改 性细菌纤维素膜连续处理 6 批次染料废水, 色度去除效果如表 1 所示 :
     表 2 固定化白腐菌的不同载体对 40mg/L 孔雀石绿染料废水的处理效果
     从表 2 中可以看出, 2g 固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜对 40mg/L 孔雀石绿染料 废水的处理效果明显优于相同质量的固定化白腐菌的聚乙烯醇 - 海藻酸钠, 且改性细菌纤 维素膜对白腐菌处理孔雀石绿染料废水效果的干扰明显小于聚乙烯醇 - 海藻酸钠。
     实施例 8 :
     固定化菌株编号为 CGMCC NO : 5.776 的白腐菌的改性细菌纤维素膜对孔雀石绿染 料废水的处理 :
     取 1.5g 固定化菌株编号为 CGMCC NO : 5.776 的白腐菌的改性细菌纤维素膜, 以及 相同质量的固定化白腐菌的聚乙烯醇 - 海藻酸钠, 分别加入到含有 50mL 孔雀石绿染料废水 的锥形瓶中, 上述孔雀石绿染料废水的制备过程如下 : 称取 30mg 孔雀石绿, 溶于 1L 白腐菌 液体限制性培养基中, 即得到孔雀石绿染料废水 ; 于 28℃下, 在气浴恒温摇床上以 120rpm 摇床处理 5 天, 每隔 24 小时测定染料废水的色度, 5 天后, 弃掉处理后的染料废水, 保留固定 化菌, 再向此锥形瓶中加入 50mL 新配制的 30mg/L 孔雀石绿染料废水, 处理条件同上, 每隔
     24 小时测定染料废水的色度, 以 5 天为一循环, 如此重复 5 次, 即用同 1 批固定化白腐菌的 改性细菌纤维素膜连续处理 6 批次染料废水, 色度去除效果如表 1 所示 :
     表 3 固定化白腐菌的不同载体对 30mg/L 孔雀石绿染料废水的处理效果
     从表 3 中可以看出, 1.5g 固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜对 30mg/L 孔雀石绿染 料废水的处理效果明显优于相同质量的固定化白腐菌的聚乙烯醇 - 海藻酸钠, 且改性细菌 纤维素膜对白腐菌处理孔雀石绿染料废水效果的干扰明显小于聚乙烯醇 - 海藻酸钠。
     注:
     上述实施例 6 ~实施例 8 中聚乙烯醇 - 海藻酸钠对白腐菌的固定化步骤为 :
     ①将 10g 聚乙烯醇和 0.5g 海藻酸钠加入到 100mL 蒸馏水中, 用沸水浴加热使之溶 解, 冷却至室温, 然后再将 0.1g 活性炭投入其中使之混合 ; 在无菌操作台中向上述所得混 合液中加入 10mL 实施例 1 得到的白腐菌孢子液, 混合充分 ;
     ②配置饱和硼酸溶液 100ml, 然后用碳酸钠溶液调节 pH 值至 6.7, 再向该混合液中 添加 2g 氯化钙, 充分混合 ;
     ③将①所得混合物打入注射器, 滴入到②的混合物中, 滴入过程中控制胶滴大小 在 2 ~ 3mm 左右。然后将胶滴置于在 4℃冰箱中保存 24h, 使其凝胶化, 最后用蒸馏水冲洗 至中性, 即得到固定化白腐菌的聚乙烯醇 - 海藻酸钠, 置于 4℃冰箱中待用, 用时吸净水分。
     9

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1、10申请公布号CN101973640A43申请公布日20110216CN101973640ACN101973640A21申请号201010290607X22申请日20100921C02F3/34200601C02F103/3620060171申请人东北电力大学地址132012吉林省吉林市长春路169号72发明人乔楠于大禹张金榜关晓辉74专利代理机构吉林市达利专利事务所22102代理人张瑜声54发明名称一种孔雀石绿染料废水的处理方法57摘要一种孔雀石绿染料废水的处理方法,经细菌纤维素膜的制备、细菌纤维素膜的改性处理、改性细菌纤维素膜对白腐菌的固定化,将得到的固定化白腐菌改性细菌纤维素膜,加到50。

2、ML孔雀石绿染料废水中,取2040MG孔雀石绿,溶于1L白腐菌液体限制性培养基中,于28下在气浴恒温摇床上以120RPM处理5天,每隔24小时测定废水的色度,5天后,弃掉处理后的废水,保留固定化菌,再加入50ML新配制的相同浓度的染料废水,处理条件同上,每隔24小时测定废水的色度,以5天为一循环,如此重复5次,废水色度的去除率始终为86以上。所涉及的木醋杆菌、白腐菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心。51INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书7页CN101973644A1/1页21一种孔雀石绿染料废水的处理方法,是由如下的过程和步骤组成1细菌纤维素膜的制。

3、备将保存在斜面上的菌株编号为CGMCCNO11812的木醋杆菌GLUCONACETOBACTCRXYLINUM接入到50ML种子培养基中,所述的种子培养基中各组分用量占种子培养基质量用量的百分比分别为葡萄糖2;蛋白胨05;酵母膏03;NA2HPO412H2O02;KH2PO401;MGSO47H2O0025;柠檬酸02;PH58;气浴恒温摇床上以160RPM培养2天,得到活化好的木醋杆菌培养液,取此木醋杆菌培养液10ML接入到125ML发酵培养基中,所述的发酵培养基中各组分用量占发酵培养基质量用量的百分比分别为葡萄糖2;蛋白胨05;酵母膏03;NA2HPO412H2O02;KH2PO401;M。

4、GSO47H2O0025;柠檬酸02;PH58;30静置培养7天,在液面生成淡黄色胶质膜,将膜取出,用蒸馏水反复冲洗,除去膜表面培养基及杂质;再将膜浸泡于01MOL/L的NAOH溶液中,80煮沸60MIN,去除菌膜内部的菌体和残留培养基,然后用蒸馏水反复冲洗至中性,得到细菌纤维素膜;2细菌纤维素膜的改性处理将4060G步骤1得到的细菌纤维素膜加入到100180ML的1MOL/L氢氧化钠溶液中,再加入2040ML环氧氯丙烷,于60恒温水浴反应3060MIN后,取出膜用丙酮洗涤;水洗后,再加入559ML的乙二胺和49581ML的蒸馏水;充分振摇后,在80恒温水浴中加热3060MIN,然后取出膜用蒸。

5、馏水洗至中性,再用1的重量百分含量的盐酸洗涤3遍后,蒸馏水洗至中性,再经丙酮润洗后,真空干燥至恒重,得到改性后的细菌纤维素膜;3改性细菌纤维素膜对菌株编号为CGMCCNO5776的白腐菌的固定化将69G步骤2得到的改性细菌纤维素膜加入到80105ML的PH70、浓度为02MOL/L的磷酸缓冲液中,再加入67ML25重量百分含量的戊二醛水溶液;于40下轻微搅拌反应3060MIN,取出膜依次用蒸馏水和02MOL/L,PH70的磷酸缓冲液洗涤,然后真空干燥;干燥后的细菌纤维素膜加入到110130ML的白腐菌液体限制性培养基中,所述的白腐菌液体限制性培养基中各组分用量分别为KH2PO42G/L;MGS。

6、O47H2O025G/L;MNSO405MG/L;无水FESO401G/L;NACL10MG/L;NH4NO32G/L;CACL201G/L;葡萄糖15G/L;VB150MG/L;PH6070;灭菌后再加入1215ML白腐菌孢子液;于28,120RPM摇床上培养48小时,取出膜后用无菌水反复冲洗三次,此时膜表面形成了一层薄薄的白色菌膜,得到固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜;4固定化菌株编号为CGMCCNO5776的白腐菌的改性细菌纤维素膜对孔雀石绿染料废水的处理将12G步骤3得到的固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜,加入到50ML孔雀石绿染料废水中,上述孔雀石绿染料废水的制备过程如下称取2040MG。

7、孔雀石绿,溶于1L上述步骤3所述的白腐菌液体限制性培养基中,得到孔雀石绿染料废水;于28下,在气浴恒温摇床上以120RPM处理5天,每隔24小时测定染料废水的色度,5天后,弃掉处理后的染料废水,保留固定化菌,再加入50ML新配制的相同浓度的染料废水,处理条件同上,每隔24小时测定染料废水的色度,以5天为一循环,如此重复5次,染料废水色度的去除率始终维持在86以上。权利要求书CN101973640ACN101973644A1/7页3一种孔雀石绿染料废水的处理方法技术领域0001本发明属于应用微生物与环境工程技术领域,涉及利用一种新型固定化载体固定化微生物处理染料废水的方法。尤其涉及利用固定化白腐。

8、菌的改性细菌纤维素膜处理孔雀石绿染料废水。背景技术0002孔雀石绿是一种有毒的三苯甲烷类化学物,由苯甲醛和N,N二甲基苯胺在盐酸或硫酸中缩合生成四甲基代二氨基三苯甲烷的隐性碱体后,在酸介质中被二氧化铅秘氧化制得。目前,孔雀石绿染料废水的处理主要采用光催化氧化法、微波法、铁氧电池法及硅藻土多孔陶瓷法等,但这些方法存在成本高、周期长、操作稳定性差、容易引起二次污染等缺点。0003自然界中白腐菌PHANEROCHAETECHRYSOSPORIUM是一种重要的生物资源,能够降解多环芳香烃类和毒性较大的有机污染物。白腐菌在处理染料过程中会产生胞外过氧化物酶如木素过氧化物酶LIP和锰过氧化物酶MNP等,这。

9、些酶具有底物非特异性等特殊性能,并能引发一系列的自由基反应,从而对染料进行脱色、降解和矿化。0004虽然白腐菌有诸多优点,但其在悬浮培养降解体系中还存在处理效率低,酶系统稳定性差,抗逆性、抗毒性、抗高负荷能力差、固液分离困难等问题。0005固定化白腐菌常用的方法有包埋法、吸附法等,常用的固定化载体有木屑、聚氨酯泡沫、活性炭、聚乙烯醇、海藻酸钙。但上述载体存在很多问题,如制备过程较复杂、固定化效率低、操作稳定性差、废弃后易对环境造成二次污染。发明内容0006本发明的目的通过对木醋杆菌产生的细菌纤维素膜进行改性处理,使其成为固定化微生物的优良载体,进而用于固定化白腐菌,建立一种处理孔雀石绿染料废水。

10、的简单、有效的方法,被改性细菌纤维素膜固定化的白腐菌在对孔雀石绿染料废水处理过程中活性更加稳定,抗干扰能力更强,载体持久、耐用,能够重复使用多次。0007一种孔雀石绿染料废水的处理方法,是由如下的过程和步骤组成00081细菌纤维素膜的制备0009将保存在斜面上的菌株编号为CGMCCNO11812的木醋杆菌GLUCONACETOBACTERXYLINUM接入到50ML种子培养基中,所述的种子培养基中各组分用量占种子培养基质量用量的百分比分别为葡萄糖2;蛋白胨05;酵母膏03;NA2HPO412H2O02;KH2PO401;MGSO47H2O0025;柠檬酸02;PH58;气浴恒温摇床上以160R。

11、PM培养2天,得到活化好的木醋杆菌培养液,取此木醋杆菌培养液10ML接入到125ML发酵培养基中,所述的发酵培养基中各组分用量占发酵培养基质量用量的百分比分别为葡萄糖2;蛋白胨05;酵母膏03;NA2HPO412H2O02;KH2PO401;MGSO47H2O0025;柠檬酸02;PH58;30静置培养7天,在液面生成淡黄色胶质膜,说明书CN101973640ACN101973644A2/7页4将膜取出,用蒸馏水反复冲洗,除去膜表面培养基及杂质;再将膜浸泡于01MOL/L的NAOH溶液中,80煮沸60MIN,去除菌膜内部的菌体和残留培养基,然后用蒸馏水反复冲洗至中性,得到细菌纤维素膜;0010。

12、上述木醋杆菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,菌株编号为CGMCCNO11812;00112细菌纤维素膜的改性处理0012将4060G步骤1得到的细菌纤维素膜加入到100180ML的1MOL/L氢氧化钠溶液中,再加入2040ML环氧氯丙烷,于60恒温水浴反应3060MIN后,取出膜用丙酮洗涤;水洗后,再加入559ML的乙二胺和49581ML的蒸馏水;充分振摇后,在80恒温水浴中加热3060MIN,然后取出膜用蒸馏水洗至中性,再用1的重量百分含量的盐酸洗涤3遍后,蒸馏水洗至中性,再经丙酮润洗后,真空干燥至恒重,得到改性后的细菌纤维素膜;00133改性细菌纤维素膜对菌株编号为CGMCCNO577。

13、6的白腐菌的固定化0014将69G步骤2得到的改性细菌纤维素膜加入到80105ML的PH70、浓度为02MOL/L的磷酸缓冲液中,再加入67ML25重量百分含量的戊二醛水溶液;于40下轻微搅拌反应3060MIN,取出膜依次用蒸馏水和02MOL/L,PH70的磷酸缓冲液洗涤,然后真空干燥;干燥后的细菌纤维素膜加入到110130ML的白腐菌液体限制性培养基中,所述的白腐菌液体限制性培养基中各组分用量分别为KH2PO42G/L;MGSO47H2O025G/L;MNSO405MG/L;无水FESO401G/L;NACL10MG/L;NH4NO32G/L;CACL201G/L;葡萄糖15G/L;VB15。

14、0MG/L;PH6070;灭菌后再加入1215ML白腐菌孢子液;于28,120RPM摇床上培养48小时,取出膜后用无菌水反复冲洗三次,此时膜表面形成了一层薄薄的白色菌膜,得到固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜;0015上述白腐菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,菌株编号为CGMCCNO5776;00164固定化菌株编号为CGMCCNO5776的白腐菌的改性细菌纤维素膜对孔雀石绿染料废水的处理0017将12G步骤3得到的固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜,加入到50ML孔雀石绿染料废水中,上述孔雀石绿染料废水的制备过程如下称取2040MG孔雀石绿,溶于1L上述步骤3所述的白腐菌液体限制性培养基中,得到。

15、孔雀石绿染料废水;于28下,在气浴恒温摇床上以120RPM处理5天,每隔24小时测定染料废水的色度,5天后,弃掉处理后的染料废水,保留固定化菌,再加入50ML新配制的相同浓度的染料废水,处理条件同上,每隔24小时测定染料废水的色度,以5天为一循环,如此重复5次,染料废水色度的去除率始终维持在86以上。0018本发明与现有技术相比存在显著的进步和积极的效果0019本发明为细菌纤维素膜应用提供了新的思路和途径。0020改性后的细菌纤维素膜韧性提高,耐腐蚀能力增强,并且减小了载体本身对白腐菌处理孔雀石绿染料废水效果的干扰。0021固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜处理孔雀石绿染料废水的方法具有可操作性,。

16、并且操作简单,处理效果明显及稳定性好,受环境影响小。说明书CN101973640ACN101973644A3/7页50022改性细菌纤维素膜废弃后能被环境微生物降解,并成为植物生长的肥料不会造成二次污染。具体实施方式0023实施例10024白腐菌孢子液的制备0025从保存菌株编号为CGMCCNO5776的白腐菌的斜面上挑取少量菌体,划线法接种到固体培养基上,所述的固体培养基中各组分用量占固体培养基质量用量的百分比分别为马铃薯葡萄糖琼脂38;KH2PO403;MGSO47H2O015,30培养5天后,白腐菌孢子菌丝大量扩增,向平皿中注入少量无菌水,以推棒法刮下孢子粉,经4层擦镜纸滤去菌丝体,得到。

17、的乳白色孢子悬浮液即为白腐菌孢子液,4冰箱保存备用;0026上述步骤中白腐菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,菌株编号为CGMCCNO5776。0027实施例20028细菌纤维素膜的制备0029将保存在斜面上的菌株编号为CGMCCNO11812的木醋杆菌GLUCONACETOBACTERXYLINUM接入到50ML种子培养基中,所述的种子培养基中各组分用量占种子培养基质量用量的百分比分别为葡萄糖2;蛋白胨05;酵母膏03;NA2HPO412H2O02;KH2PO401;MGSO47H2O0025;柠檬酸02;PH58;气浴恒温摇床上以160RPM培养2天,得到活化好的木醋杆菌培养液,取此木醋。

18、杆菌培养液10ML接入到125ML发酵培养基中,所述的发酵培养基中各组分用量占发酵培养基质量用量的百分比分别为葡萄糖2;蛋白胨05;酵母膏03;NA2HPO412H2O02;KH2PO401;MGSO47H2O0025;柠檬酸02;PH58;30静置培养7天,在液面生成淡黄色胶质膜,将膜取出,用蒸馏水反复冲洗,除去膜表面培养基及杂质;再将膜浸泡于01MOL/L的NAOH溶液中,80煮沸60MIN,去除菌膜内部的菌体和残留培养基,然后用蒸馏水反复冲洗至中性,得到细菌纤维素膜。0030上述步骤中木醋杆菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,菌株编号为CGMCCNO11812;0031实施例30032。

19、细菌纤维素膜的改性处理0033取细菌纤维素膜40G放入100ML的1MOL/L氢氧化钠溶液中,再加入20ML的环氧氯丙烷,于60恒温水浴反应30MIN后,取出膜用丙酮洗涤,以除掉膜上残留的小分子有机物;水洗后,再加入55ML的乙二胺和495ML蒸馏水,充分振摇后,在80恒温水浴中加热30MIN,然后取出膜用蒸馏水洗至中性,再用1的重量百分含量的盐酸洗涤3遍后,蒸馏水洗至中性,再经丙酮润洗后,真空干燥至恒重,此时膜的柔韧性变强,表面呈淡黄色,光滑,有光泽,此即为改性后的细菌纤维素膜;0034改性细菌纤维素膜对菌株编号为CGMCCNO5776的白腐菌的固定化0035取6G上述步骤得到的改性细菌纤维。

20、素膜放到含有80ML的磷酸缓冲液PHOSPHATEBUFFER,02MOL/L,PH70的锥形瓶中,再加入6ML25重量百分含量的戊二醛水溶液,说明书CN101973640ACN101973644A4/7页640轻微搅拌反应30MIN,取出膜依次用蒸馏水和磷酸缓冲液PHOSPHATEBUFFER,02MOL/L,PH70洗涤,然后真空干燥;将上述戊二醛处理后的细菌纤维素膜放到含有110ML白腐菌液体限制性培养基的锥形瓶中,所述的白腐菌液体限制性培养基中各组分用量分别为KH2PO42G/L;MGSO47H2O025G/L;MNSO405MG/L;无水FESO401G/L;NACL10MG/L;N。

21、H4NO32G/L;CACL201G/L;葡萄糖15G/L;VB150MG/L;PH6070以下实施例中白腐菌液体限制性培养基组成相同;灭菌后再加入12ML实施例1得到的白腐菌孢子液,于28,120RPM摇床上培养48小时,取出膜后用无菌水反复冲洗三次,此时细菌纤维素膜表面形成了一层薄薄的白色菌膜,即为固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜。0036实施例40037细菌纤维素膜的改性处理0038取细菌纤维素膜50G放入150ML的1MOL/L氢氧化钠溶液中,再加入30ML的环氧氯丙烷,于60恒温水浴反应45MIN后,取出膜用丙酮洗涤,以除掉膜上残留的小分子有机物;水洗后,再加入85ML的乙二胺和765。

22、ML蒸馏水,充分振摇后,在80恒温水浴中加热45MIN,然后取出膜用蒸馏水洗至中性,再用1的重量百分含量盐酸洗涤3遍后,蒸馏水洗至中性,再经丙酮润洗后,真空干燥至恒重,此时膜的柔韧性变强,表面呈淡黄色,光滑,有光泽,此即为改性后的细菌纤维素膜;0039改性细菌纤维素膜对菌株编号为CGMCCNO5776的白腐菌的固定化0040取7G上述步骤得到的改性细菌纤维素膜放到含有90ML的磷酸缓冲液PHOSPHATEBUFFER,02MOL/L,PH70的锥形瓶中,再加入65ML25重量百分含量的戊二醛水溶液,40轻微搅拌反应45MIN,取出膜依次用蒸馏水和磷酸缓冲溶液PHOSPHATEBUFFER,02。

23、MOL/L,PH70洗涤,然后真空干燥;将上述戊二醛处理后的细菌纤维素膜放到含有120ML白腐菌液体限制性培养基的锥形瓶中;灭菌后再加入13ML实施例1得到的白腐菌孢子液,于28,120RPM摇床上培养48小时,取出膜后用无菌水反复冲洗三次,此时细菌纤维素膜表面形成了一层薄薄的白色菌膜,即为固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜。0041实施例50042细菌纤维素膜的改性处理0043取细菌纤维素膜60G放入180ML的1MOL/L氢氧化钠溶液中,再加入40ML的环氧氯丙烷,于60恒温水浴反应60MIN后,取出膜用丙酮洗涤,以除掉膜上残留的小分子有机物;水洗后,再加入9ML的乙二胺和81ML蒸馏水,充分。

24、振摇后,在80恒温水浴中加热60MIN,然后取出膜用蒸馏水洗至中性,再用1的重量百分含量的盐酸洗涤3遍后,蒸馏水洗至中性,再经丙酮润洗后,真空干燥至恒重,此时膜的柔韧性变强,表面呈淡黄色,光滑,有光泽,此即为改性后的细菌纤维素膜;0044改性细菌纤维素膜对菌株编号为CGMCCNO5776的白腐菌的固定化0045取9G上述步骤得到的改性细菌纤维素膜放到含有105ML的磷酸缓冲液PHOSPHATEBUFFER,02MOL/L,PH70的锥形瓶中,再加入7ML25重量百分含量的戊二醛水溶液,40轻微搅拌反应60MIN,取出膜依次用蒸馏水和磷酸缓冲液PHOSPHATEBUFFER,02MOL/L,PH。

25、70洗涤,然后真空干燥;将上述戊二醛处理后的细菌纤维素膜放到含有130ML白腐菌液体限制性培养基的锥形瓶中;灭菌后再加入15ML实施例1得到的白腐菌孢子液,于28,120RPM摇床上培养48小时,取出膜后用无菌水反复冲洗三次,此时细说明书CN101973640ACN101973644A5/7页7菌纤维素膜表面形成了一层薄薄的白色菌膜,即为固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜。0046实施例60047固定化菌株编号为CGMCCNO5776的白腐菌的改性细菌纤维素膜对孔雀石绿染料废水的处理0048取1G固定化菌株编号为CGMCCNO5776的白腐菌的改性细菌纤维素膜,以及相同质量的同定化白腐菌的聚乙烯醇。

26、海藻酸钠,分别加入到含有50ML孔雀石绿染料废水的锥形瓶中,上述孔雀石绿染料废水的制备过程如下称取20MG孔雀石绿,溶于1L白腐菌液体限制性培养基中,即得到孔雀石绿染料废水;于28下,在气浴恒温摇床上以120RPM摇床处理5天,每隔24小时测定染料废水的色度,5天后,弃掉处理后的染料废水,保留固定化菌,再向此锥形瓶中加入50ML新配制的20MG/L孔雀石绿染料废水,处理条件同上,每隔24小时测定染料废水的色度,以5天为一循环,如此重复5次,即用同1批固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜连续处理6批次染料废水,色度去除效果如表1所示0049表1固定化白腐菌的不同载体对20MG/L孔雀石绿染料废水的处理。

27、效果00500051从表1中可以看出,1G固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜对20MG/L孔雀石绿染料废水的处理效果明显优于相同质量的固定化白腐菌的聚乙烯醇海藻酸钠,且改性细菌纤维素膜对白腐菌处理孔雀石绿染料废水效果的干扰明显小于聚乙烯醇海藻酸钠。0052实施例70053固定化菌株编号为CGMCCNO5776的白腐菌的改性细菌纤维素膜对孔雀石绿染料废水的处理0054取2G固定化菌株编号为CGMCCNO5776的白腐菌的改性细菌纤维素膜,以及相说明书CN101973640ACN101973644A6/7页8同质量的固定化白腐菌的聚乙烯醇海藻酸钠,分别加入到含有50ML孔雀石绿染料废水的锥形瓶中,上述。

28、孔雀石绿染料废水的制备过程如下称取40MG孔雀石绿,溶于1L白腐菌液体限制性培养基中,即得到孔雀石绿染料废水;于28下,在气浴恒温摇床上以120RPM摇床处理5天,每隔24小时测定染料废水的色度,5天后,弃掉处理后的染料废水,保留固定化菌,再向此锥形瓶中加入50ML新配制的40MG/L孔雀石绿染料废水,处理条件同上,每隔24小时测定染料废水的色度,以5天为一循环,如此重复5次,即用同1批固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜连续处理6批次染料废水,色度去除效果如表1所示0055表2固定化白腐菌的不同载体对40MG/L孔雀石绿染料废水的处理效果00560057从表2中可以看出,2G固定化白腐菌的改性细菌。

29、纤维素膜对40MG/L孔雀石绿染料废水的处理效果明显优于相同质量的固定化白腐菌的聚乙烯醇海藻酸钠,且改性细菌纤维素膜对白腐菌处理孔雀石绿染料废水效果的干扰明显小于聚乙烯醇海藻酸钠。0058实施例80059固定化菌株编号为CGMCCNO5776的白腐菌的改性细菌纤维素膜对孔雀石绿染料废水的处理0060取15G固定化菌株编号为CGMCCNO5776的白腐菌的改性细菌纤维素膜,以及相同质量的固定化白腐菌的聚乙烯醇海藻酸钠,分别加入到含有50ML孔雀石绿染料废水的锥形瓶中,上述孔雀石绿染料废水的制备过程如下称取30MG孔雀石绿,溶于1L白腐菌液体限制性培养基中,即得到孔雀石绿染料废水;于28下,在气浴。

30、恒温摇床上以120RPM摇床处理5天,每隔24小时测定染料废水的色度,5天后,弃掉处理后的染料废水,保留固定化菌,再向此锥形瓶中加入50ML新配制的30MG/L孔雀石绿染料废水,处理条件同上,每隔说明书CN101973640ACN101973644A7/7页924小时测定染料废水的色度,以5天为一循环,如此重复5次,即用同1批固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜连续处理6批次染料废水,色度去除效果如表1所示0061表3固定化白腐菌的不同载体对30MG/L孔雀石绿染料废水的处理效果00620063从表3中可以看出,15G固定化白腐菌的改性细菌纤维素膜对30MG/L孔雀石绿染料废水的处理效果明显优于相同。

31、质量的固定化白腐菌的聚乙烯醇海藻酸钠,且改性细菌纤维素膜对白腐菌处理孔雀石绿染料废水效果的干扰明显小于聚乙烯醇海藻酸钠。0064注0065上述实施例6实施例8中聚乙烯醇海藻酸钠对白腐菌的固定化步骤为0066将10G聚乙烯醇和05G海藻酸钠加入到100ML蒸馏水中,用沸水浴加热使之溶解,冷却至室温,然后再将01G活性炭投入其中使之混合;在无菌操作台中向上述所得混合液中加入10ML实施例1得到的白腐菌孢子液,混合充分;0067配置饱和硼酸溶液100ML,然后用碳酸钠溶液调节PH值至67,再向该混合液中添加2G氯化钙,充分混合;0068将所得混合物打入注射器,滴入到的混合物中,滴入过程中控制胶滴大小在23MM左右。然后将胶滴置于在4冰箱中保存24H,使其凝胶化,最后用蒸馏水冲洗至中性,即得到固定化白腐菌的聚乙烯醇海藻酸钠,置于4冰箱中待用,用时吸净水分。说明书CN101973640A。

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