提高降压肽比活性的分离纯化方法.pdf

本发明公开了一种能够实现产业化的提高降压肽比活性的分离纯化方法。本发明提高降压肽比活性的分离纯化方法，通过下述技术方案予以实现，将降压肽组分配成浓度为0.1～1mg/ml的水溶液进行超滤，采用采用超滤膜在0.1-0.15MPa压力下进行超滤，当超滤液达到原液3/4体积时结束。利用超滤方法可以实现降压肽产业化分离纯化，并且大量实验结果发现超滤可以提高原料的活性，大幅度提高原料的比活性；当超滤液达到原液3/4体积时，分离纯化的效果比较好，同时提高超滤液中小分子量多肽的含量。

1.  一种提高降压肽比活性的分离纯化方法，其特征是，将降压肽组分配成浓度为0.1～1mg/ml的水溶液进行超滤，采用超滤膜在0.1-0.15MPa压力下进行超滤，当超滤液达到原液3/4体积时结束。

2.  根据权利要求1所述的提高降压肽比活性的分离纯化方法，其特征是，所述降压肽为大豆肽、玉米醇溶蛋白、玉米肽、花生肽、白蛋白多肽、绿豆肽中的任意一种。

提高降压肽比活性的分离纯化方法
技术领域
本发明涉及多肽的分离纯化领域，更具体地说，是涉及一种提高降压肽比活性的分离纯化方法。
背景技术
多肽的分离纯化方法很多：如凝胶层析、离子交换层析和HPLC等，这些都能达到很好的分离效果，但是在工业生产过程中很难实现。1.上述分离方法得率低，会大幅度提高生产成本，很难达到工业生产标准，适合研究；2.上述分离方法相对复杂的多，这会大幅度提高技术难度；3.对设备要求也很高。随着多肽被越来越多的应用，其产业化分离纯化的实现显得尤为重要。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是，克服现有技术中存在的不足，提供一种能够实现产业化的提高降压肽比活性的分离纯化方法。
本发明提高降压肽比活性的分离纯化方法，通过下述技术方案予以实现，将降压肽组分配成浓度为0.1～1mg/ml的水溶液进行超滤，采用采用超滤膜在0.1-0.15MPa压力下进行超滤，当超滤液达到原液3/4体积时结束。
本发明所述降压肽为大豆肽、玉米醇溶蛋白、玉米肽、花生肽、白蛋白多肽、绿豆肽中的任意一种。
利用超滤方法可以实现降压肽产业化分离纯化，并且大量实验结果发现超滤可以提高原料的活性，大幅度提高原料的比活性；当超滤液达到原液3/4体积时，分离纯化的效果比较好，同时提高超滤液中小分子量多肽的含量。下面以绿豆肽分离纯化的实验数据(表1)加以说明：
表1

具体实施方式
下面结合对本发明做进一步描述。
以绿豆肽分离纯化为例详述本发明：称取一定量的多肽粉，在蒸馏水中溶解成浓度为1mg/ml的多肽液，连接超滤装置(超滤膜包或超滤设备)，如用vivaflow超滤膜包超滤(超滤膜可以采用聚偏氟乙烯(PVDF)、聚砜、聚醚砜、聚丙烯、聚乙烯、醋酸纤维素等材料)或膜分离装置，在0.1-0.15MPa压力下，进行超滤分离，不同时间收集超滤组分和残留组分，然后在已建立好的酶筛选平台上测定ACE抑制活性，测定多肽浓度(具体数据见表2)，测定多肽分子量分布，进行氨基酸组成分析。
表2

利用上述方法分别测定大豆肽0.2mg/ml、0.5mg/ml、1mg/ml浓度多肽液进行超滤分离，不同时间收集超滤组分和残留组分，然后在已建立好的酶筛选平台上测定ACE抑制活性，测定多肽浓度(具体数据见表3)。
表3


通过选用不同浓度的多肽，不同种类的多肽，不同时间点的组分分析，结果发现，当超滤液达到总体积3/4时，酶活和比活性提高，特别是比活大幅度提高，显著降低组分的分子量，提高组分的功效活性和品质。本发明是一种基于酶、细胞和动物筛选平台的，适合于工业化生产的，多肽分离纯化和改善品质的研发工艺。