脂肪酶法酪蛋白的生产方法 【技术领域】
本发明涉及生物化学酶水解领域，具体地说是一种以分离酥油后的牛奶粗蛋白(藏族牧民称“曲拉”)为原料用脂肪酶水解酪蛋白中残留的脂肪从而达到纯化酪蛋白的生产方法。
背景技术
目前，国内酪蛋白系列产品研究领域或生产厂家均以机械分离法(碟式分离机：采用比重差的原理)进行脱脂、分离、纯化生产酪蛋白(商品名：干酪素)，机械分离法所生产的酪蛋白一般脂肪含量在2.0～2.5％之间，由于受原料中脂肪高等因素的限制，酪蛋白产品中的脂肪含量很难通过机械分离法将其降到1.0％以下。脂肪含量高低直接影响到酪蛋白系列产品质量等级，其具体工艺过程为：粗酪蛋白(曲拉)→粉碎→溶解(固∶液＝1∶10)+10％NaOH溶液调pH值9～11，温度：50～65℃→过滤→碟式分离机脱脂→酸化(15％HCL溶液调pH值4.6)→脱水→造粒→干燥→产品→检验包装。这样的生产工艺由于原料中脂肪含量高低不同，生产出的产品脂肪含量也高低不同，致使产品在市场上缺乏竞争力。
【发明内容】
本发明的目的在于为了解决上述机械分离法生产酪蛋白工艺的不足，提供一种脂肪酶水解酪蛋白中残留的脂肪，从而彻底解决酪蛋白系列产品受原料中脂肪含量高低不同、机械分离法生产限制导致酪蛋白系列产品中脂肪含量高低不一致，而提供一种脂肪酶法酪蛋白的生产方法。
发明的技术方案是是：一种脂肪酶法酪蛋白的生产方法，主要以粗酪蛋白(曲拉)为原料，脂肪含量高低直接影响到产品质量等级，因此采用脂肪酶在酪蛋白含量为10～15％、温度20～50℃、pH值6～11的溶液中，加入酶剂量为2～5KLU/g脂肪的Lipozyme TL 100L(诺维信脂肪酶TL 100L)，时间0.5～1.5小时将脂肪水解，然后加入氯化钙(CaCl2)或硫酸镁(MgSO4)沉淀后用排渣式分离机分离，酸化、脱水、造粒、干燥后从而得到脂肪含量≤0.5％的酪蛋白产品。
所述的脂肪酶法酪蛋白的生产方法，其特征是生产方法步骤如下：
(a)、溶解
准确称取1份粗酪蛋白(曲拉)加入到一定体积的容器中，然后依次加入水10～15份边搅拌边升温35～45℃，再加入1～5份10～50％NaOH溶液调pH值9～11持续搅拌30～50min，使其完全溶解，然后加入1～5KLU/g油脂的Lipozyme TL 100L脂肪酶(KLU：千克脂肪酶单位)，边搅拌边升温，最高温度达到50℃时，持续恒温搅拌水解0.5～1.5hr，待脂肪水解彻底后加入含10～50％CaCl2或含10～50％MgSO4的溶液1～10份；搅拌均匀后静置10～15min，准备过滤；
(b)、过滤
将(a)步水解好的溶液用80～120目尼龙网过滤备用，回收残杂；
(c)、分离
将上述过滤液分次加入到离心管中，在3000～6000r/min下进行离心分离10～15min，停止离心取出离心管，倾倒出上清液合并到一定体积的容器中备用，回收沉淀物；
(d)、酸化
将上述离心分离好的溶液预热到38～50℃之间，加入1～3份4～12mol/L的盐酸搅拌酸化，调pH值至酪蛋白等电点4.6为终点，静置10～15min；
(e)、清洗
过滤上述酸化蛋白中的酸性溶液，加入等体积38～50℃之间的热水，浸泡10～15min，准备过滤；
(f)、过滤
(f)、过滤
将上述清洗好的蛋白与清洗液用80～120目尼龙网过滤过，挤压使蛋白中的水分含量降到55～60％，准备造粒；
(h)、造粒、干燥
上述过滤好的含水率55～60％酪蛋白过30目分样筛，使湿酪蛋白目数最大不超过30目；然后将其置于鼓风式干燥箱中干燥，最终产品含水率不超过12％。
本发明的优点和效果是：
产品指标：
1、理化指标：
感观：乳白或淡黄色小颗粒状或粉末；
气味：无特殊气味；
含氮量：≥14.5％
水分：≤12.0％
灰分：≤2.0％
pH值：5.5～6.0
脂肪：≤0.5％
2、微生物指标：
细菌总数 ≤30cfu/g
大肠菌群MPN/100g ≤40
致病菌 不得检出
3、重金属指标：
砷(以As计)≤0.0002％
铅(以Pb计)≤0.002％
本发明解决了机械分离法生产酪蛋白产品中脂肪含量高的问题，该工艺简单、可操作性强，可将脂肪含量降低到0.5％以下、可工厂规模化生产，不论从溶解时间、能耗、产品质量、生产成本均优于传统工艺。
【附图说明】
附图为本发明的生产工艺流程图。
以下结合附图和实施例对本发明作进一步详细说明。
【具体实施方式】
实施例1
1、水解
准确称取1份粗酪蛋白加入到一定体积的容器中，然后依次加入水10份边搅拌边升温35℃，再加入1份50％NaOH溶液调pH值9.0，安装上冷凝管、电动搅拌、电热套，边搅拌边升温，当温度达到50℃时溶液整体持续恒温搅拌50min待粗酪蛋白完全溶解，然后加入1KLU/g油脂的Lipozyme TL 100L脂肪酶(KLU：千克脂肪酶单位)，持续恒温搅拌水解1.5hr，待脂肪水解彻底后加入含10％CaCl2的溶液10份；搅拌均匀后静置10min，准备过滤。
2、过滤
将第1步水解好的酪蛋白溶液用80目尼龙网过滤，回收残杂。
3、离心分离
将上述过滤好的酪蛋白溶液分次加入到离心管中，在3600r/min下进行离心15min，停止离心取出离心管，倾倒出上清液合并到一定体积的容器中备用，回收沉淀物。
4、酸化
将上述离心分离好的溶液预热到38℃，加入1份12mol/L的盐酸搅拌酸化，调pH值至酪蛋白等电点4.6为终点，静置10min。
5、清洗
过滤上述酸化液中的酸性溶液，加入等体积38℃的热水，浸泡15min，准备过滤。
6、过滤
将上述清洗好的蛋白与清洗液用80目尼龙网过滤过，挤压使蛋白中的水分含量降到55％，准备造粒。
7、造粒、干燥
上述过滤好的含水率55％酪蛋白过30目分样筛，使湿酪蛋白目数最大不超过30目；然后将其置于鼓风式干燥箱中干燥，最终产品含水率不超过12％。
实施例2
1、水解
准确称取1份粗酪蛋白加入到一定体积的容器中，然后依次加入水15份边搅拌边升温45℃，再加入10份50％NaOH溶液调pH值11.0，安装上冷凝管、电动搅拌、电热套，边搅拌边升温，当温度达到50℃时溶液整体持续恒温搅拌30min待粗酪蛋白完全溶解，然后加入5KLU/g油脂的Lipozyme TL 100L脂肪酶(KLU：千克脂肪酶单位)，持续恒温搅拌水解0.5hr，待脂肪水解彻底后加入含50％CaCL2的溶液1份；搅拌均匀后静置15min，准备过滤。
2、过滤
将第1步水解好的酪蛋白溶液用120目尼龙网过滤，回收残杂。
3、离心分离
将上述过滤好的酪蛋白溶液分次加入到离心管中，在6000r/min下进行离心10min，停止离心取出离心管，倾倒出上清液合并到一定体积的容器中备用，回收沉淀物。
4、酸化
将上述离心分离好的溶液预热到38℃，加入3份4mol/L的盐酸搅拌酸化，调pH值至酪蛋白等电点4.6为终点，静置15min。
5、清洗
过滤上述酸化液中的酸性溶液，加入等体积50℃的热水，浸泡10min，准备过滤。
6、过滤
将上述清洗好的蛋白与清洗液用120目尼龙网过滤过，挤压使蛋白中的水分含量降到55％，准备造粒。
7、造粒、干燥
上述过滤好地含水率60％酪蛋白过30目分样筛，使湿酪蛋白目数最大不超过30目；然后将其置于鼓风式干燥箱中干燥，最终产品含水率不超过12％。
实施例3
1、水解
准确称取1份粗酪蛋白加入到一定体积的容器中，然后依次加入水10份边搅拌边升温35℃，再加入1份50％NaOH溶液调pH值9.0，安装上冷凝管、电动搅拌、电热套，边搅拌边升温，当温度达到50℃时溶液整体持续恒温搅拌50min待粗酪蛋白完全溶解，然后加入1KLU/g油脂的Lipozyme TL 100L脂肪酶(KLU：千克脂肪酶单位)，持续恒温搅拌水解1.5hr，待脂肪水解彻底后加入含10％MgSO4的溶液10份；搅拌均匀后静置10min，准备过滤。
2、过滤
将第1步水解好的酪蛋白溶液用80目尼龙网过滤，回收残杂。
3、离心分离
将上述过滤好的酪蛋白溶液分次加入到离心管中，在3600r/min下进行离心15min，停止离心取出离心管，倾倒出上清液合并到一定体积的容器中备用，回收沉淀物。
4、酸化
将上述离心分离好的溶液预热到38℃，加入1份12mol/L的盐酸搅拌酸化，调pH值至酪蛋白等电点4.6为终点，静置10min。
5、清洗
过滤上述酸化液中的酸性溶液，加入等体积38℃的热水，浸泡15min，准备过滤。
6、过滤
将上述清洗好的蛋白与清洗液用80目尼龙网过滤过，挤压使蛋白中的水分含量降到55％，准备造粒。
7、造粒、干燥
上述过滤好的含水率55％酪蛋白过30目分样筛，使湿酪蛋白目数最大不超过30目；然后将其置于鼓风式干燥箱中干燥，最终产品含水率不超过12％。
实施例4
1、水解
准确称取1份粗酪蛋白加入到一定体积的容器中，然后依次加入水15份边搅拌边升温45℃，再加入10份50％NaOH溶液调pH值11.0，安装上冷凝管、电动搅拌、电热套，边搅拌边升温，当温度达到50℃时溶液整体持续恒温搅拌30min待粗酪蛋白完全溶解，然后加入5KLU/g油脂的Lipozyme TL 100L脂肪酶(KLU：千克脂肪酶单位)，持续恒温搅拌水解0.5hr，待脂肪水解彻底后加入含50％MgSO4的溶液1份；搅拌均匀后静置15min，准备过滤。
2、过滤
将第1步水解好的酪蛋白溶液用120目尼龙网过滤，回收残杂。
3、离心分离
将上述过滤好的酪蛋白溶液分次加入到离心管中，在6000r/min下进行离心10min，停止离心取出离心管，倾倒出上清液合并到一定体积的容器中备用，回收沉淀物。
4、酸化
将上述离心分离好的溶液预热到38℃，加入3份4mol/L的盐酸搅拌酸化，调pH值至酪蛋白等电点4.6为终点，静置15min。
5、清洗
过滤上述酸化液中的酸性溶液，加入等体积50℃的热水，浸泡10min，准备过滤。
6、过滤
将上述清洗好的蛋白与清洗液用120目尼龙网过滤过，挤压使蛋白中的水分含量降到55％，准备造粒。
7、造粒、干燥
上述过滤好的含水率60％酪蛋白过30目分样筛，使湿酪蛋白目数最大不超过30目；然后将其置于鼓风式干燥箱中干燥，最终产品含水率不超过12％。