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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201711316015.9 (22)申请日 2017.12.12 (71)申请人 蚌埠市华东生物科技有限公司 地址 233000 安徽省蚌埠市淮上区沫河口 工业园淝河北路20号 (72)发明人 邢飞邢伟张志华庞正银 (74)专利代理机构 合肥市长远专利代理事务所 (普通合伙) 34119 代理人 杨霞翟攀攀 (51)Int.Cl. C07H 15/24(2006.01) C07H 1/08(2006.01) (54)发明名称 一种从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法 (57)摘要 本发。
2、明公开了一种从甜叶菊中提取甜菊糖 苷的方法， 包括如下步骤： 将甜叶菊干叶粉碎， 加 入水浸泡， 加入纤维素酶酶解， 调节体系pH值为 5.6-6.5， 升温浸提， 冷却， 沉降离心， 过滤得到浸 提液； 将浸提液进行水浴加热， 加入絮凝剂搅拌 均匀， 调节体系pH值为7.5-8.2， 絮凝处理， 离心 沉降， 过滤， 加入复合吸附剂， 常压回流状态煮 制， 过滤， 浓缩得到浓缩液； 将浓缩液上硅胶层析 柱， 然后用混合溶剂洗脱， 收集馏分， 真空浓缩， 真空干燥得到甜菊糖苷。 本发明工艺简单， 成本 低， 操作性强， 适合工厂生产， 有机溶剂残留量极 低， 所得甜菊糖苷呈白色或米白色粉末， 。
3、纯度和 收率高。 权利要求书1页 说明书3页 CN 108047286 A 2018.05.18 CN 108047286 A 1.一种从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法， 其特征在于， 包括如下步骤： S1、 将甜叶菊干叶粉碎， 加入水浸泡， 加入纤维素酶酶解， 调节体系pH值为5.6-6.5， 升 温浸提， 冷却， 沉降离心， 过滤得到浸提液； S2、 将浸提液进行水浴加热， 加入絮凝剂搅拌均匀， 调节体系pH值为7.5-8.2， 絮凝处 理， 离心沉降， 过滤， 加入复合吸附剂， 常压回流状态煮制， 过滤， 浓缩得到浓缩液； S3、 将浓缩液上硅胶层析柱， 然后用混合溶剂洗脱， 收集馏分， 真。
4、空浓缩， 真空干燥得到 甜菊糖苷。 2.根据权利要求1所述从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法， 其特征在于， S1中， 甜叶菊干 叶、 水、 纤维素酶的重量比为70-90： 400-550： 0.2-0.4。 3.根据权利要求1或2所述从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法， 其特征在于， S1中， 酶解时 间为30-50h。 4.根据权利要求1-3任一项所述从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法， 其特征在于， S1中， 调节体系pH值为5.6-6.5， 升温至50-60浸提4-8h。 5.根据权利要求1-4任一项所述从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法， 其特征在于， S2中， 浸提液、 絮凝剂、 复合吸附剂的重量比为24。
5、0-320： 1-2： 4-6。 6.根据权利要求1-5任一项所述从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法， 其特征在于， S2中， 水浴温度为80-90； 絮凝处理时间为20-40min； 常压回流状态煮制时间为4-8h。 7.根据权利要求1-6任一项所述从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法， 其特征在于， S2中， 复合吸附剂采用如下如下工艺制备： 将椰壳炭粉、 蛭石粉、 海泡石粉、 麦饭石粉、 膨润土混合 均匀， 煅烧， 降至室温， 粉碎， 加入水混合研磨， 喷雾干燥得到复合吸附剂。 8.根据权利要求7所述从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法， 其特征在于， S2的复合吸附剂 制备工艺中， 椰壳炭粉、 蛭石粉、 海。
6、泡石粉、 麦饭石粉、 膨润土的重量比为15-25： 4-10： 3-7： 4-6： 2-4。 9.根据权利要求7或8所述从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法， 其特征在于， S2的复合吸 附剂制备工艺中， 煅烧温度为550-600， 煅烧时间为20-30min； 研磨时间为50-70min。 10.根据权利要求1-9任一项所述从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法， 其特征在于， S3中， 将浓缩液上硅胶层析柱， 然后用体积比为13-17： 83-87的乙醇和乙酸乙酯的混合溶剂洗脱 45-55min， 收集馏分， 真空浓缩， 真空干燥得到甜菊糖苷。 权利要求书 1/1 页 2 CN 108047286 A 2 。
7、一种从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法 技术领域 0001 本发明涉及甜菊糖苷技术领域， 尤其涉及一种从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法。 背景技术 0002 甜叶菊别名甜菊、 糖草， 属菊科， 含有14种微量元素、 32种营养成分， 在体内不代 谢、 不蓄积、 不致癌、 无毒性， 其安全性已经得到国际FAO和WHO以及美国FAD等组织的认可， 因此它既是极好的糖源， 又是良好的营养来源。 0003 甜菊糖苷是甜叶菊中的有效成分， 属于天然低热量的高倍甜味剂。 由于甜菊糖苷 具有上述高甜度、 低热量的特性， 长期食用不会使人发胖， 因此， 目前甜菊糖苷已作为一种 甜味剂替代蔗糖， 它是继蔗糖甜菜糖之外， 。
8、第三种具有开发价值和健康推崇的天然替代品。 0004 然而， 传统的甜叶菊中甜菊糖苷的提取过程中存在杂质含量高， 步骤较多， 整体工 艺繁琐的技术问题， 不利于应用。 发明内容 0005 基于背景技术存在的技术问题， 本发明提出了一种从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方 法， 工艺简单， 成本低， 操作性强， 适合工厂生产， 有机溶剂残留量极低， 所得甜菊糖苷呈白 色或米白色粉末， 纯度和收率高。 0006 本发明提出的一种从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法， 包括如下步骤： 0007 S1、 将甜叶菊干叶粉碎， 加入水浸泡， 加入纤维素酶酶解， 调节体系pH值为5.6- 6.5， 升温浸提， 冷却， 沉降离。
9、心， 过滤得到浸提液； 0008 S2、 将浸提液进行水浴加热， 加入絮凝剂搅拌均匀， 调节体系pH值为7.5-8.2， 絮凝 处理， 离心沉降， 过滤， 加入复合吸附剂， 常压回流状态煮制， 过滤， 浓缩得到浓缩液； 0009 S3、 将浓缩液上硅胶层析柱， 然后用混合溶剂洗脱， 收集馏分， 真空浓缩， 真空干燥 得到甜菊糖苷。 0010 优选地， S1中， 甜叶菊干叶、 水、 纤维素酶的重量比为70-90： 400-550： 0.2-0.4。 0011 优选地， S1中， 酶解时间为30-50h。 0012 优选地， S1中， 调节体系pH值为5.6-6.5， 升温至50-60浸提4-8h。
10、。 0013 优选地， S2中， 浸提液、 絮凝剂、 复合吸附剂的重量比为240-320： 1-2： 4-6。 0014 优选地， S2中， 水浴温度为80-90； 絮凝处理时间为20-40min； 常压回流状态煮制 时间为4-8h。 0015 优选地， S2的浓缩具体操作如下： 将滤液过装有20mLAB-8型大孔吸附树脂的树脂 柱(高径比为6： 1)， 其中在吸附流速为2BV/h、 pH值为8进行脱色吸附， 然后用体积分数55- 65的乙醇溶液作为洗脱液， 其中洗脱流速0.5BV/h， 洗脱液用量为1BV， 室温下进行洗脱， 洗脱液用截留分子量400Da的纳滤膜纳滤， 操作压力为1.2Mpa。
11、， 然后在真空压力2Pa、 温度60 浓缩至38波美度得到浓缩液。 0016 优选地， S2中， 复合吸附剂采用如下如下工艺制备： 将椰壳炭粉、 蛭石粉、 海泡石 说明书 1/3 页 3 CN 108047286 A 3 粉、 麦饭石粉、 膨润土混合均匀， 煅烧， 降至室温， 粉碎， 加入水混合研磨， 喷雾干燥得到复合 吸附剂。 0017 优选地， S2的复合吸附剂制备工艺中， 椰壳炭粉、 蛭石粉、 海泡石粉、 麦饭石粉、 膨 润土的重量比为15-25： 4-10： 3-7： 4-6： 2-4。 0018 优选地， S2的复合吸附剂制备工艺中， 煅烧温度为550-600， 煅烧时间为20- 3。
12、0min； 研磨时间为50-70min。 0019 优选地， S3中， 将浓缩液上硅胶层析柱， 然后用体积比为13-17： 83-87的乙醇和乙 酸乙酯的混合溶剂洗脱45-55min， 收集馏分， 真空浓缩， 真空干燥得到甜菊糖苷。 0020 本发明所得甜菊糖苷呈白色或米白色粉末状， 纯度极高， 其中一次通过酶解、 浸 提、 絮凝除杂及浓缩向结合， 可有效提高甜叶菊糖苷的最大浸出量， 同时使得甜叶菊中的杂 质溶出量最小化， 方便后续纯化； 在除杂过程中， 首先采用无机盐絮凝剂絮凝处理， 去除大 部分杂质， 然后加入复合吸附剂， 一方面脱色效果极好， 溶液澄清， 另一方面可对剩余的杂 质进一步吸。
13、附， 杂质去除程度高， 便于后续浓缩处理， 同时可降低成本， 还能便于浓缩过程 的顺利进行； 在复合吸附剂中， 椰壳炭粉蛭石粉、 海泡石粉、 麦饭石粉、 膨润土配合经过炭化 处理， 活性炭孔隙结构发达， 比表面积大， 吸附速度快， 对杂质的吸附能力优良。 0021 本发明工艺简单， 成本低， 操作性强， 适合工厂生产， 有机溶剂在最终产品中的残 留量控制在100ppm以下， 相对于现有技术中使用的对人体有害的有机溶剂更加环保安全； 所得产品呈白色或米白色粉末， 经高效液相色谱法检测， 甜菊糖苷的纯度为99.1， 甜菊糖 苷的最终收率为90.8。 具体实施方式 0022 下面， 通过具体实施例对。
14、本发明的技术方案进行详细说明。 0023 实施例1 0024 一种从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法， 包括如下步骤： 0025 S1、 将70kg甜叶菊干叶粉碎， 加入550kg水浸泡30min， 加入0.4kg纤维素酶酶解 30h， 调节体系pH值为5.6-6.5， 升温至60浸提4h， 冷却， 沉降离心， 离心转速为3000r/min， 过滤得到浸提液； 0026 S2、 将240kg浸提液进行水浴加热， 水浴温度为90， 加入1kg絮凝剂搅拌均匀， 调 节体系pH值为7.5-8.2， 絮凝处理40min， 离心沉降， 离心转速为12000r/min， 过滤， 加入6kg 复合吸附剂， 常压回。
15、流状态煮制4h， 过滤， 浓缩得到浓缩液； 0027 复合吸附剂采用如下如下工艺制备： 将25kg椰壳炭粉、 4kg蛭石粉、 7kg海泡石粉、 4kg麦饭石粉、 4kg膨润土混合均匀， 550煅烧30min， 降至室温， 粉碎， 加入25kg水混合研磨 70min， 喷雾干燥得到复合吸附剂； 0028 S3、 将浓缩液上硅胶层析柱， 然后用体积比为13： 87的乙醇和乙酸乙酯的混合溶剂 洗脱45min， 收集馏分， 真空浓缩， 真空干燥得到甜菊糖苷。 0029 实施例2 0030 一种从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法， 包括如下步骤： 0031 S1、 将90kg甜叶菊干叶粉碎， 加入400kg水。
16、浸泡50min， 加入0.2kg纤维素酶酶解 50h， 调节体系pH值为5.6-6.5， 升温至50浸提8h， 冷却， 沉降离心， 离心转速为2500r/min， 说明书 2/3 页 4 CN 108047286 A 4 过滤得到浸提液； 0032 S2、 将320kg浸提液进行水浴加热， 水浴温度为80， 加入2kg絮凝剂搅拌均匀， 调 节体系pH值为7.5-8.2， 絮凝处理20min， 离心沉降， 离心转速为15000r/min， 过滤， 加入4kg 复合吸附剂， 常压回流状态煮制8h， 过滤， 浓缩得到浓缩液； 0033 复合吸附剂采用如下如下工艺制备： 将15kg椰壳炭粉、 10kg。
17、蛭石粉、 3kg海泡石粉、 6kg麦饭石粉、 2kg膨润土混合均匀， 600煅烧20min， 降至室温， 粉碎， 加入35kg水混合研磨 50min， 喷雾干燥得到复合吸附剂； 0034 S3、 将浓缩液上硅胶层析柱， 然后用体积比为17： 83的乙醇和乙酸乙酯的混合溶剂 洗脱55min， 收集馏分， 真空浓缩， 真空干燥得到甜菊糖苷。 0035 实施例3 0036 一种从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法， 包括如下步骤： 0037 S1、 将75kg甜叶菊干叶粉碎， 加入500kg水浸泡35min， 加入0.35kg纤维素酶酶解 32h， 调节体系pH值为5.6-6.5， 升温至58浸提5h， 冷。
18、却， 沉降离心， 离心转速为2800r/min， 过滤得到浸提液； 0038 S2、 将280kg浸提液进行水浴加热， 水浴温度为88， 加入1.2kg絮凝剂搅拌均匀， 调节体系pH值为7.5-8.2， 絮凝处理35min， 离心沉降， 离心转速为13000r/min， 过滤， 加入 5.5kg复合吸附剂， 常压回流状态煮制5h， 过滤， 浓缩得到浓缩液； 0039 复合吸附剂采用如下如下工艺制备： 将22kg椰壳炭粉、 6kg蛭石粉、 6kg海泡石粉、 4.5kg麦饭石粉、 3.5kg膨润土混合均匀， 560煅烧28min， 降至室温， 粉碎， 加入28kg水混合 研磨65min， 喷雾干燥。
19、得到复合吸附剂； 0040 S3、 将浓缩液上硅胶层析柱， 然后用体积比为14： 86的乙醇和乙酸乙酯的混合溶剂 洗脱48min， 收集馏分， 真空浓缩， 真空干燥得到甜菊糖苷。 0041 实施例4 0042 一种从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法， 包括如下步骤： 0043 S1、 将85kg甜叶菊干叶粉碎， 加入450kg水浸泡45min， 加入0.25kg纤维素酶酶解 45h， 调节体系pH值为5.6-6.5， 升温至52浸提7h， 冷却， 沉降离心， 离心转速为2600r/min， 过滤得到浸提液； 0044 S2、 将300kg浸提液进行水浴加热， 水浴温度为82， 加入1.8kg絮凝剂搅。
20、拌均匀， 调节体系pH值为7.5-8.2， 絮凝处理25min， 离心沉降， 离心转速为14000r/min， 过滤， 加入 4.5kg复合吸附剂， 常压回流状态煮制7h， 过滤， 浓缩得到浓缩液； 0045 复合吸附剂采用如下如下工艺制备： 将18kg椰壳炭粉、 8kg蛭石粉、 4kg海泡石粉、 5.5kg麦饭石粉、 2.5kg膨润土混合均匀， 580煅烧22min， 降至室温， 粉碎， 加入32kg水混合 研磨55min， 喷雾干燥得到复合吸附剂； 0046 S3、 将浓缩液上硅胶层析柱， 然后用体积比为16： 84的乙醇和乙酸乙酯的混合溶剂 洗脱52min， 收集馏分， 真空浓缩， 真空干燥得到甜菊糖苷。 0047 以上所述， 仅为本发明较佳的具体实施方式， 但本发明的保护范围并不局限于此， 任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内， 根据本发明的技术方案及其 发明构思加以等同替换或改变， 都应涵盖在本发明的保护范围之内。 说明书 3/3 页 5 CN 108047286 A 5 。