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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710720082.0 (22)申请日 2017.08.21 (71)申请人 广西肽王生物科技有限公司 地址 530007 广西壮族自治区南宁市高新 区高新大道东段25号南宁市科技企业 孵化基地B栋厂房一楼东侧 (72)发明人 雷少玲梁鲁琦周昕 (74)专利代理机构 北京中誉威圣知识产权代理 有限公司 11279 代理人 朱志宽 (51)Int.Cl. C12P 21/06(2006.01) C07K 1/34(2006.01) (54)发明名称 一种辣木籽外壳制备多肽的方。
2、法 (57)摘要 本发明公开了一种辣木籽外壳制备多肽的 方法， 本发明包括以下步骤： 将辣木籽外壳干燥、 粉碎、 调制悬浮液、 微波处理、 碱性酶酶解、 胰酶 酶解、 离心过滤、 微波真空干燥， 通过上述步骤， 可从辣木籽外壳中获得丰富的多肽， 同时一级滤 渣干燥后可作纤维性饲料或食用菌的培养料； 二 级滤渣和三级滤渣浓缩干燥后可作饲料添加剂， 充分利用废弃物， 提高辣木籽深加工企业的经济 效益； 辣木籽外壳经细胞破壁和酶解处理过后， 用作饲料的效果大幅度提高； 利用微波技术与传 统的酶解技术相比较， 节约能耗1518， 时 间缩短6670， 提高了生产效率， 降低成本； 工艺简单易于操作。 。
3、权利要求书1页 说明书4页 CN 107365820 A 2017.11.21 CN 107365820 A 1.一种辣木籽外壳制备多肽的方法， 包括以下步骤： (1)将辣木籽外壳通过太阳晒或烘干方法除湿至干脆； (2)将所述外壳粉碎至可通过80100目筛， 得外壳粉； (3)将所述外壳粉按固液质量比1:12， 用无离子水调成悬浮液， 再用稀NaOH溶液将所述 悬浮液的pH值调节在9.710.0之间； (4)将所述悬浮液置于微波罐， 调节微波频率为2450MHz， 功率为9kW， 保持所述悬浮液 恒温6265， 微波时间30分钟38分钟， 再将所述悬浮液保温在5562之间， 保温 时间1小时2。
4、小时， 每隔120秒检测一次所述悬浮液的pH值， 当pH值小于9.0， 终止微波并直 接进入下一步酶解； (5)将上述微波处理过后所得的悬浮液， 加入稀NaOH溶液调悬浮液pH值9.0， 按所述 悬浮液中含所述外壳粉质量的3.23.5， 添加酶活为100000u/g的碱性酶形成酶解液， 将所述酶解液放进微波罐中进行第一次微波辅助酶解， 微波罐功率3kW， 控制所述悬浮液温 度为60， 微波时间20分钟25分钟， 每隔120秒检测一次检测所述酶解液的pH值， 当所述 酶解液pH值下降至小于8.0时， 按所述酶解液中含所述外壳粉重量的2.83添加胰酶， 进行第二次微波辅助酶解， 将所述酶解液控温在。
5、57， 微波时间为20分钟， 在5057之 间保温15分钟20分钟， 结束酶解， 启动微波罐最大功率升温所述酶解液至8590， 保 持8分钟， 消灭酶的活性， 在将所述酶解液静置冷却， 待冷却至小于60时， 排出微波罐待 用； (6)将上述灭酶活处理过后的所述酶解液， 用带有120目滤布的三足离心机过滤2次后， 所述酶解液分离成粗滤透过液和一级滤渣； 优选的， 将所述粗滤透过液用带有600目陶瓷膜或中空纤维膜三足离心机进行微滤， 所 述粗滤透过液分离成微滤透过液和二级滤渣； (7)将所述微滤透过液用能拦截分子量10kDa的超滤膜进行超滤， 所述微滤透过液分离 成超滤透过液和三级滤渣； (8)将。
6、所述超滤透过液进行脱盐后， 置于可深度冷冻的冰柜或冰库中， 冷冻至-22， 并 保持12小时， 然后放置于微波真空干燥机中， 控制温度60进行恒温干燥， 干燥后得到所 述多肽。 权利要求书 1/1 页 2 CN 107365820 A 2 一种辣木籽外壳制备多肽的方法 技术领域 0001 本发明涉及本发明属于蛋白多肽领域， 特别涉及一种辣木籽外壳制备多肽的方 法。 背景技术 0002 辣木有 “生命之树” 的美誉， 几乎全身是宝， 它的根、 茎、 枝、 叶、 花、 豆荚、 果实 (籽) 等都有药用价值， 这些部位都可以比较充分的开发和利用。 辣木籽的外壳占辣木籽的 28-34。 根据分析外壳含。
7、蛋白质13-15、 氨基酸8.5-9.8、 多糖1.5-1.8、 黄 酮0.75-0.82。 从含蛋白质的数量和可降解为氨基酸的降解率看， 是优质蛋白质原材 料。 然而辣木籽外壳含的蛋白质与纤维紧密结合， 作为鸡鸭牛羊的饲料直接饲喂， 鸡鸭难以 细胞破壁， 牛羊能破壁但也不完全细胞破壁， 对鸡鸭的饲喂效果甚微， 对牛羊的饲喂效果较 好但仍不理想。 0003 对做辣木籽深入开发， 利用辣木籽深加工时产生的外壳废弃物、 使废弃物减量化 和资源化， 通过对辣木籽外壳细胞进行破壁， 让外壳中的蛋白质释放出来， 再选择酶解方法 形成多肽的技术未见有相关报道。 发明内容 0004 为了解决上述问题， 本发。
8、明采提供一种辣木籽外壳制备多肽的方法， 包括以下步 骤： (1)将辣木籽外壳通过太阳晒或烘干方法除湿至干脆； (2)将所述外壳粉碎至可通过80100目筛， 得外壳粉； (3)将所述外壳粉按固液质量比1:12， 用无离子水调成悬浮液， 再用稀NaOH溶液将所述 悬浮液的pH值调节在9.710.0之间； (4)将所述悬浮液置于微波罐， 调节微波频率为2450MHz， 功率为9kW， 保持所述悬浮液 恒温6265， 微波时间30分钟38分钟， 再将所述悬浮液保温在5562之间， 保温 时间1小时2小时， 每隔120秒检测一次所述悬浮液的pH值， 当pH值小于9.0， 终止微波并直 接进入下一步酶解；。
9、 (5)将上述微波处理过后所得的悬浮液， 加入稀NaOH溶液调悬浮液pH值9.0， 按所述 悬浮液中含所述外壳粉质量的3.23.5， 添加酶活为100000u/g的碱性酶形成酶解液， 将所述酶解液放进微波罐中进行第一次微波辅助酶解， 微波罐功率3kW， 控制所述悬浮液温 度为 60， 微波时间20分钟25分钟， 每隔120秒检测一次检测所述酶解液的pH值， 当所述 酶解液pH值下降至小于8.0时， 按所述酶解液中含所述外壳粉重量的2.83添加胰酶， 进行第二次微波辅助酶解， 将所述酶解液控温在57， 微波时间为20分钟， 在5057之 间保温15分钟20分钟， 结束酶解。 启动微波罐最大功率升。
10、温所述酶解液至8590， 保 持 8分钟， 消灭酶的活性， 在将所述酶解液静置冷却， 待冷却至小于60时， 排出微波罐待 用； (6)将上述灭酶活处理过后的所述酶解液， 用带有120目滤布的三足离心机过滤2次后， 说明书 1/4 页 3 CN 107365820 A 3 所述酶解液分离成粗滤透过液和一级滤渣； 优选的， 将所述粗滤透过液用带有600目陶瓷膜或中空纤维膜三足离心机进行微滤， 所 述粗滤透过液分离成微滤透过液和二级滤渣； (7)将所述微滤透过液用能拦截分子量10kDa的超滤膜进行超滤， 所述微滤透过液分离 成超滤透过液和三级滤渣； (8)将所述超滤透过液进行脱盐后， 置于可深度冷冻。
11、的冰柜或冰库中， 冷冻至-22， 并 保持12小时， 然后放置于微波真空干燥机中， 控制温度60进行恒温干燥， 干燥后得到所 述多肽。 0005 采用上述方案， 可从辣木籽外壳中获得丰富的多肽， 同时一级滤渣干燥后可作纤 维性饲料或食用菌的培养料； 二级滤渣和三级滤渣浓缩干燥后可作饲料添加剂， 充分利用 废弃物， 提高辣木籽深加工企业的经济效益； 辣木籽外壳经细胞破壁和酶解处理过后， 用作 饲料的效果大幅度提高； 利用微波技术与传统的酶解技术相比较， 节约能耗1518， 时 间缩短6670， 提高了生产效率， 降低成本； 工艺简单易于操作。 具体实施方式 0006 下面对本发明的具体实施方式作。
12、进一步说明， 在此需要说明的是， 对于这些实施 方式的说明用于帮助理解本发明， 但并不构成对本发明的限定， 此外， 下面描述的本发明的 各个实例实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以互相组合。 0007 实施例1： 一种辣木籽外壳制备多肽的方法， 包括以下步骤： (1)先将辣木籽外壳通过太阳晒或烘干方法除湿至干脆； (2)将所述外壳粉碎至可通过80目筛， 得外壳粉； (3)将所述外壳粉按固液质量比1:12， 用无离子水调成悬浮液， 再用稀NaOH溶液将所述 悬浮液的pH值调节在10.0； (4)将所述悬浮液置于微波罐， 调节微波频率为2450MHz， 功率为9kW， 保持所述悬。
13、浮液 恒温62， 微波时间38分钟， 再将所述悬浮液保温在5562之间， 每隔120秒检测一次 所述悬浮液的pH值， 当pH值小于9.0， 终止微波； (5)将上述微波处理过后所得的悬浮液， 加入稀NaOH溶液调悬浮液pH值9.0， 按所述 悬浮液中含所述外壳粉质量的3.5， 添加酶活为100000u/g的碱性酶形成酶解液， 将所述 酶解液放进微波罐中进行第一次微波辅助酶解， 微波罐功率3kW， 控制所述悬浮液温度为60 ， 每隔120秒检测一次检测所述酶解液的pH值， 当所述酶解液pH值下降至小于8.0时， 按所 述酶解液中含所述外壳粉重量的3添加胰酶， 进行第二次微波辅助酶解， 将所述酶解。
14、液控 温在57， 微波时间为20分钟后在5057之间保温15分钟20分钟， 结束酶解， 启动微 波罐最大功率升温所述酶解液至8590， 保持8分钟， 消灭酶的活性， 在将所述酶解液 静置冷却， 待冷却至小于60时， 排出微波罐待用； (6)将上述灭酶活处理过后的所述酶解液， 用带有120目滤布的三足离心机过滤2次后， 所述酶解液分离成粗滤透过液和一级滤渣； (7)将所述粗滤透过液用带有600目陶瓷膜或中空纤维膜三足离心机进行微滤， 所述粗 滤透过液分离成微滤透过液和二级滤渣； 说明书 2/4 页 4 CN 107365820 A 4 (8)将所述微滤透过液用能拦截分子量10kDa的超滤膜进行超。
15、滤， 所述微滤透过液分离 成超滤透过液和三级滤渣； (9)将所述超滤透过液进行脱盐后， 置于可深度冷冻的冰柜或冰库中， 冷冻至-22， 并 保持12小时， 然后放置于微波真空干燥机中， 控制温度60进行恒温干燥， 干燥后得到所 述多肽。 0008 实施例2： 一种辣木籽外壳制备多肽的方法， 包括以下步骤： (1)先将辣木籽外壳通过太阳晒或烘干方法除湿至干脆； (2)将所述外壳粉碎至可通过90目筛， 得外壳粉； (3)将所述外壳粉按固液质量比1:12， 用无离子水调成悬浮液， 再用稀NaOH溶液将所述 悬浮液的pH值调节在9.8； (4)将所述悬浮液置于微波罐， 调节微波频率为2450MHz， 。
16、功率为9kW， 保持所述悬浮液 恒温63， 微波时间35分钟， 再将所述悬浮液保温在5562之间， 每隔120秒检测一次 所述悬浮液的pH值， 当pH值小于9.0， 终止微波； (5)将上述微波处理过后所得的悬浮液， 加入稀NaOH溶液调悬浮液pH值9.0， 按所述 悬浮液中含所述外壳粉质量的3.3， 添加酶活为100000u/g的碱性酶形成酶解液， 将所述 酶解液放进微波罐中进行第一次微波辅助酶解， 微波罐功率3kW， 控制所述悬浮液温度为60 ， 每隔120秒检测一次检测所述酶解液的pH值， 当所述酶解液pH值下降至小于8.0时， 按所 述酶解液中含所述外壳粉重量的2.9添加胰酶， 进行第。
17、二次微波辅助酶解， 将所述酶解液 控温在57， 微波时间为20分钟后在5057之间保温15分钟20分钟， 结束酶解， 启动 微波罐最大功率升温所述酶解液至8590， 保持8分钟， 消灭酶的活性， 在将所述酶解 液静置冷却， 待冷却至小于60时， 排出微波罐待用； (6)将上述灭酶活处理过后的所述酶解液， 用带有120目滤布的三足离心机过滤2次后， 所述酶解液分离成粗滤透过液和一级滤渣； (7)将所述粗滤透过液用带有600目陶瓷膜或中空纤维膜三足离心机进行微滤， 所述粗 滤透过液分离成微滤透过液和二级滤渣； (8)将所述微滤透过液用能拦截分子量10kDa的超滤膜进行超滤， 所述微滤透过液分离 成。
18、超滤透过液和三级滤渣； (9)将所述超滤透过液进行脱盐后， 置于可深度冷冻的冰柜或冰库中， 冷冻至-22， 并 保持12小时， 然后放置于微波真空干燥机中， 控制温度60进行恒温干燥， 干燥后得到所 述多肽。 0009 实施例3： 一种辣木籽外壳制备多肽的方法， 包括以下步骤： (1)先将辣木籽外壳通过太阳晒或烘干方法除湿至干脆； (2)将所述外壳粉碎至可通过100目筛， 得外壳粉； (3)将所述外壳粉按固液质量比1:12， 用无离子水调成悬浮液， 再用稀NaOH溶液将所述 悬浮液的pH值调节在9.7； (4)将所述悬浮液置于微波罐， 调节微波频率为2450MHz， 功率为9kW， 保持所述悬。
19、浮液 恒温65， 微波时间30分钟， 再将所述悬浮液保温在5562之间， 每隔120秒检测一次 说明书 3/4 页 5 CN 107365820 A 5 所述悬浮液的pH值， 当pH值小于9.0， 终止微波； (5)将上述微波处理过后所得的悬浮液， 加入稀NaOH溶液调悬浮液pH值9.0， 按所述 悬浮液中含所述外壳粉质量的3.0， 添加酶活为100000u/g的碱性酶形成酶解液， 将所述 酶解液放进微波罐中进行第一次微波辅助酶解， 微波罐功率3kW， 控制所述悬浮液温度为60 ， 每隔120秒检测一次检测所述酶解液的pH值， 当所述酶解液pH值下降至小于8.0时， 按所 述酶解液中含所述外壳。
20、粉重量的2.8添加胰酶， 进行第二次微波辅助酶解， 将所述酶解液 控温在57， 微波时间为20分钟后在5057之间保温15分钟20分钟， 结束酶解， 启动 微波罐最大功率升温所述酶解液至8590， 保持8分钟， 消灭酶的活性， 在将所述酶解 液静置冷却， 待冷却至小于60时， 排出微波罐待用； (6)将上述灭酶活处理过后的所述酶解液， 用带有120目滤布的三足离心机过滤2次后， 所述酶解液分离成粗滤透过液和一级滤渣； (7)将所述粗滤透过液用带有600目陶瓷膜或中空纤维膜三足离心机进行微滤， 所述粗 滤透过液分离成微滤透过液和二级滤渣； (8)将所述微滤透过液用能拦截分子量10kDa的超滤膜进行超滤， 所述微滤透过液分离 成超滤透过液和三级滤渣； (9)将所述超滤透过液进行脱盐后， 置于可深度冷冻的冰柜或冰库中， 冷冻至-22， 并 保持12小时， 然后放置于微波真空干燥机中， 控制温度60进行恒温干燥， 干燥后得到所 述多肽。 说明书 4/4 页 6 CN 107365820 A 6 。