发明领域
本发明涉及一种制备作为凝血因子Xa的抑制剂的5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[4-(5,6-二氢-4H-[1,2,4]三嗪-1-基)苯基]-1,3-唑烷-5-基}-甲基)噻吩-2-羧酰胺衍生物的新方法及其制备中所使用的新中间体。
发明背景
式(A)的5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[4-(5,6-二氢-4H-[1,2,4]三嗪-1-基)苯基]-1,3-唑烷-5-基}-甲基)噻吩-2-羧酰胺已知作为凝血因子Xa的抑制剂并用于治疗和预防血栓形成、心肌梗死、动脉硬化、炎症、卒中、心绞痛、血管成形术后再发性狭窄和血栓栓塞如间歇性跛行。
本发明人已经提交的韩国专利申请2008-64178公开了所述化合物作为凝血因子Xa的抑制剂的用途及其制备方法。所述制备方法包括如反应方案1中所示从4-硝基苯胺开始制备环状氨基腙的步骤：
反应方案1
具体而言，环状氨基腙(A)通过如下步骤制备：用4-硝基苯胺制备化合物(B)；用叔-丁氧基羰基胺保护基团处理化合物(B)制得化合物(C)；用NaNO2向化合物(C)中引入亚硝基，然后用锌还原制得化合物(D)；和依次用盐酸和原甲酸酯处理化合物(D)。
但上面的制备方法复杂且化合物(A)的收率低(例如总收率为9%)，其还需要使用柱色谱纯化步骤，这限制环状氨基腙的大规模生产。特别地，从化合物(C)制备化合物(D)的步骤需要使用含有害重金属的物质如锌汞齐，该步骤收率低，不能令人满意，并且化合物(D)的分离步骤不容易进行。
发明概述
本发明的主要目的是提供一种以高收率简单并且经济地制备高纯度5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[4-(5,6-二氢-4H-[1,2,4]三嗪-1-基)苯基]-1,3-唑烷-5-基}-甲基)噻吩-2-羧酰胺的新方法。
本发明的另一目的是提供一种用于制备5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[4-(5,6-二氢-4H-[1,2,4]三嗪-1-基)苯基]-1,3-唑烷-5-基}-甲基)噻吩-2-羧酰胺的中间体及其制备方法。
根据本发明的一个方面，提供一种制备式(I)的唑烷酮衍生物或其可药用盐的方法，所述方法包括如下步骤：
向式(V)的环状氨基腙引入氨基保护基团以获得式(VI)化合物；
还原式(VI)化合物的硝基以获得式(VII)化合物；
使式(VII)化合物与5-氯-N-(((S)-环氧乙烷-2-基)甲基)噻吩-2-羧酰胺反应以获得具有氯噻吩基团的式(VIII)化合物；
使用光气等效物进行式(VIII)化合物的羰基化以获得式(IX)的唑烷酮；和
从式(IX)唑烷酮的氨基腙环脱去氨基保护基团，
其中，
R’为氢、C1-C7烷基、C3-C7环烷基、C6-C12芳基或包含1-4个选自 氧、硫和氮的杂原子的C4-C12杂芳基；其中R’可任选地被一个或多个选自C1-C7烷基、C1-C7卤代烷基、C1-C7烷氧基和卤素的取代基取代；和
PG为甲酰基、(C1-C7烷基)羰基、(C1-C7卤代烷基)羰基、(C6-C12芳基)羰基、(C1-C7烷氧基)羰基、(C6-C12芳基)(C1-C7烷氧基)羰基、或三苯甲基。
根据本发明的另一方面，提供式(V)的环状氨基腙：
其中，
R’为氢、C1-C7烷基、C3-C7环烷基、C6-C12芳基或包含1-4个选自氧、硫和氮的杂原子的C4-C12杂芳基；其中R’可任选地被一个或多个选自C1-C7烷基、C1-C7卤代烷基、C1-C7烷氧基和卤素的取代基取代。
发明详述
下文给出本发明的详细描述。
本文中所用的术语“烷基”指直链或带支链饱和烃基。本文中所用的“烷基”的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基和己基。
本文中所用的术语“环烷基”指具有3-7个碳原子的饱和或部分不饱和的单-、二-或三-环烃环。本文中所用的“环烷基”的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。
本文中所用的术语“芳基”指任选地被取代的单-、二-、三-环芳环体系。示例性的任选取代基包括取代的C1-C3烷基、取代的C2-C3烯基、取代的C2-C3炔基、杂芳基、杂环基、芳基、任选具有一到三个氟取代基的烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、酰基、芳酰基、杂芳酰基、酰氧基、芳酰氧基、杂芳酰氧基、硫烷基、亚磺酰基、磺酰基、氨基磺酰基、磺酰基氨基、羧基氨基、氨基羰基、羧基、氧代、羟基、巯基、氨基、 硝基、氰基、卤素和脲基。这样的环或环体系可任选地稠合到任选具有一个或多个取代基的芳环(例如苯环)、碳环、或杂环。“芳基”的实例包括但不限于苯基、萘基、四氢萘基、联苯基、茚满基、蒽基和菲基及其取代的衍生物。
本文中所用的术语“杂芳基”指含一个或多个选自S、SO、SO2、O、N和N-氧化物的杂原子取代的任选地被取代的单环五-到六-元芳环；或指稠合到一个或多个各具有任选的取代基的环如杂芳环、芳环、杂环和碳环(例如二环或三环体系)的这类芳环。
任选的取代基的实例选自取代的C1-3烷基、取代的C2-3烯基、取代的C2-3炔基、杂芳基、杂环基、芳基、任选具有一到三个氟取代基的C1-3烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、酰基、芳酰基、杂芳酰基、酰氧基、芳酰氧基、杂芳酰氧基、硫烷基、亚磺酰基、磺酰基、氨基磺酰基、磺酰基氨基、羧基氨基、氨基羰基、羧基、氧代、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、卤素和脲基。本文中所用的“杂芳基”的实例包括但不限于苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并噻吩基、苯并吡嗪基、苯并三唑基、苯并[1,4]二氧六环基、苯并呋喃基、9H-a-咔啉基、噌啉基、呋喃基、呋喃并[2,3-b]吡啶基、咪唑基、咪唑烷基、咪唑并吡啶基、异唑基、异噻唑基、异喹啉基、吲哚基、吲唑基、吲嗪基、萘啶基、唑基、噻二唑基、二唑基、酞嗪基、吡啶基、吡咯基、嘌呤基、蝶啶基、吩嗪基、吡唑基、吡啶基、吡唑并嘧啶基、吡咯烷基、哒嗪基(pyridazyl)、吡嗪基、嘧啶基、4-氧代-1,2-二氢-4H-吡咯并[3,2,1-ij]-喹啉-4-基、喹喔啉基、喹唑啉基、喹啉基、喹嗪基、噻吩基、三唑基、三嗪基、四唑并嘧啶基、三唑并嘧啶基、四唑基、噻唑基、噻唑烷基及其取代的衍生物。
本文中所用的术语“卤代”或“卤素”指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)或碘(I)。
本文中所用的术语“烷氧基”指基团-ORa，其中Ra为如上所定义的烷基。可用于本发明中的示例性烷氧基包括但不限于甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基和叔丁氧基。
本文中所用的术语“烷基羰基”指基团–(C=O)Ra，其中Ra为如上所定义的烷基。可用于本发明中的示例性烷基羰基包括但不限于甲基羰 基、乙基羰基、正丙基羰基、异丙基羰基、正丁基羰基和异丁基羰基。
本文中所用的术语“卤代烷基羰基”指基团–(C=O)Rb，其中Rb为被一个或多个卤素取代的烷基，所述烷基具有与上述相同的含义。可用于本发明中的卤代烷基羰基的实例包括但不限于氯乙酰基、三氟乙酰基和五氟丙酰基。
本文中所用的术语“芳基羰基”指基团–(C=O)Rc，其中Rc为如上所定义的芳基。可用于本发明中的示例性芳基羰基包括但不限于苯基羰基、萘基羰基和茚满基羰基。
本文中所用的术语“烷氧基羰基”指基团–(C=O)Rd，其中Rd为如上所定义的烷氧基。可用于本发明中的示例性烷氧基羰基包括但不限于甲氧基羰基、乙氧基羰基和丙氧基羰基。
本文中所用的术语“芳基烷氧基羰基”指基团–(C=O)Re，其中Re为被芳基取代的烷氧基，烷氧基和芳基具有与上述相同的含义。可用于本发明中的示例性芳基烷氧基羰基包括但不限于苄氧基羰基、2-苯基乙氧基羰基、3-苯基丙氧基羰基等。优选的芳基烷氧基羰基为苄氧基羰基。
本文中所用的术语“烷基磺酰氧基”指基团–O(SO2)Ra，其中Ra为如上所定义的烷基。可用于本发明中的示例性烷基磺酰氧基包括但不限于甲基磺酰氧基、乙基磺酰氧基、丙基磺酰氧基和丁基磺酰氧基。
本文中所用的术语“芳基磺酰氧基”指基团–O(SO2)Rc，其中Rc为如上所定义的芳基。可用于本发明中的示例性芳基磺酰氧基包括但不限于苯基磺酰氧基、α-萘基磺酰氧基、β-萘基磺酰氧基、对-甲基苯基磺酰氧基、4-叔丁基苯基磺酰氧基和6-乙基-a-萘基磺酰氧基。
应理解，本发明还包括本发明化合物的可药用盐和加成盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐或三氟乙酸盐加成盐、钠、钾和镁盐。
在本发明的一个方面中，提供通过使用由1-氟-4-硝基苯制得的式(V)中间体来制备可用于抑制凝血因子Xa的式(I)唑烷酮衍生物的本发明方法，如反应方案2中所示：
反应方案2
其中，R’具有与上述相同的含义。
可以以各类盐的形式制备式(I)化合物，因此本发明还涵盖式(I)化合物的盐。
根据本发明的制备式(I)化合物的方法包括如下步骤：
使1-氟-4-硝基苯与2-羟乙基肼在碱的存在下缩合以获得式(II)化合物；
用具有离去基团X的试剂处理式(II)化合物以获得在式(II)化合物中羟基位置处具有所述离去基团X的式(III)化合物；
使式(III)化合物与式(IV)的甲亚胺酯进行反应以获得式(V)的环状氨基腙；
向式(V)的环状氨基腙引入氨基保护基团以获得式(VI)化合物；
还原式(VI)化合物的硝基以获得式(VII)的苯胺；
使式(VII)化合物与5-氯-N-(((S)-环氧乙烷-2-基)甲基)噻吩-2-羧酰胺反应以获得具有氯噻吩基团的式(VIII)化合物；
使用光气等效物进行式(VIII)化合物的羰基化反应以获得式(IX)的 唑烷酮；和
从式(IX)的唑烷酮的氨基腙环脱去氨基保护基团，如反应方案3中所示：
反应方案3
其中，
X为卤素、(C1-C2烷基)磺酰氧基、取代的(C1-C2烷基)磺酰氧基、(C6-C12芳基)磺酰氧基或取代的(C6-C12芳基)磺酰氧基；
R’为氢、C1-C7烷基、C3-C7环烷基、C6-C12芳基或包含1-4个选自氧、硫和氮的杂原子的C4-C12杂芳基；其中R’可任选地被一个或多个选自C1-C7烷基、C1-C7卤代烷基、C1-C7烷氧基和卤素的取代基取代；
R’’为C1-C7烷基、C3-C7环烷基或C6-C12芳基；和
PG为氨基保护基团，选自甲酰基、(C1-C7烷基)羰基、(C1-C7卤代烷基)羰基、(C6-C12芳基)羰基、(C1-C7烷氧基)羰基、(C6-C12芳基)(C1-C7烷氧基)羰基和三苯甲基，但不限于此。优选PG为甲酰基、乙酰基、三氟乙酰基、甲氧基羰基、乙氧基羰基、叔丁氧基羰基、苄氧基羰基、三苯甲基或苯甲酰基。
反应方案3仅是通过其可制备本发明化合物的制备方法的示例，并非意在限制如所附权利要求所限定的本发明的范围。
下文将对反应方案3中示出的制备方法的每一步骤进行详细描述。
<步骤1>
通过在碱的存在下进行1-氟-4-硝基苯与2-羟乙基肼的缩合来制备式(II)化合物。
缩合在溶剂中于20-150℃的温度下、优选于能使溶剂回流的温度40-100℃下、更优选于60-90℃下进行。
作为所述溶剂，优选惰性溶剂。反应中使用的溶剂的实例包括但不限于腈如乙腈；氯代烃如二氯甲烷或1,2-二氯乙烷；醚如四氢呋喃、二异丙醚、二氧六环或1,2-二甲氧基乙烷；芳烃如苯或甲苯；酰胺如二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺；和其混合物。
2-羟乙基肼和碱分别基于1摩尔式(II)化合物以1-3摩尔的量使用。
对碱没有具体限制，只要反应不受阻即可。碱的实例包括但不限于碱金属或碱土金属的碳酸盐(例如碳酸钠、碳酸钾和碳酸钙)；乙酸盐(例如乙酸钠和乙酸铵)；碱金属的碳酸氢盐(例如碳酸氢钠和碳酸氢钾)；碱金属的氢氧化物(例如氢氧化钠和氢氧化锂)；有机碱(例如三乙胺、吡啶、甲基吡啶和四乙基氢氧化铵)；和其混合物。
任选地，该反应可使用不与反应物和水混溶的溶剂在相转移催化剂(例如四丁基溴化铵和苄基三乙基碘化铵)的存在下以两相体系进行。
在本发明的一个实施方案中，该反应使用碳酸钾作为碱在乙腈中于2-羟乙基肼(1-1.5当量)的存在下在回流下进行。分离和纯化反应产物的后处理通过萃取方法(使用不与水混溶的溶剂)和胺盐沉淀方法进行。优选萃取中使用乙酸乙酯。将所得萃取物冷却至约10℃，用盐酸或溴酸、优选溴酸处理，并简单过滤得到呈固体的式(II)化合物的盐酸盐或氢溴酸盐。
<步骤2>
通过用具有离去基团X的试剂处理式(II)化合物来制备式(III)化合物。结果，式(II)化合物中的羟基转变成离去基团X。
离去基团X为卤素或磺酰氧基，包括(C1-C2烷基)磺酰氧基、取代 的(C1-C2烷基)磺酰氧基、(C6-C12芳基)磺酰氧基和取代的(C6-C12芳基)磺酰氧基。离去基团X的实例包括但不限于氯、溴、碘、甲基磺酰氧基、乙基磺酰氧基、三氟甲基磺酰氧基、苯基磺酰氧基、对-甲基苯基磺酰氧基、对-溴苯基磺酰氧基和对-硝基苯基磺酰氧基，优选溴。
使羟基变成离去基团X的方法在相关领域中是众所周知的。例如，当离去基团X为溴时，式(III)的烷基溴或其盐可通过使式(II)化合物或其盐与溴化试剂进行反应来制备。溴化试剂的实例包括但不限于磷化合物如溴化磷(例如三溴化磷和五溴化磷)；和二溴化三苯基膦。该反应在醚溶剂如四氢呋喃、二异丙醚、二氧六环或1,2-二甲氧基乙烷中于-20到120℃的温度下进行。对可用于该反应中的溶剂没有具体限制，只要反应不受阻即可。该反应可在常规有机溶剂如二氯甲烷、氯仿或苯中进行。
在本发明的一个实施方案中，该反应使用1,2-二甲氧基乙烷(作为溶剂)和三溴化磷(1.2当量)进行。后处理通过洗涤方法(使用水，其导致pH改变)、萃取方法(使用不与水混溶的溶剂)和胺盐沉淀方法进行。特别地，反应完成后，浓缩所得产物并将所得式(III)的粗溴酸盐溶解在水中。向其中加入碱，优选氢氧化钠或碳酸氢钠，至pH为2-10、优选pH为4-7。过滤所得反应混合物，获得呈固体的式(III)的氢溴酸盐。随后，用常规方法中和式(III)的氢溴酸盐以获得呈游离碱的式(III)化合物。
<步骤3>
通过进行式(III)化合物的氨基腙环化来制备式(V)化合物。
特别地，将式(III)化合物与溶剂混合，并于-20℃到30℃的温度下基于1摩尔式(III)化合物以1-1.5摩尔的量向其中加入式(IV)的甲亚胺酯或其盐酸盐，然后于20-150℃的温度下加入碱。
使用甲亚胺乙酯盐酸盐作为式(IV)的甲亚胺酯，其是市售的或者可用熟知的制备方法(US5,948,785)制得。
作为所述溶剂，优选惰性溶剂。其中使用的溶剂的实例包括但不限于腈如乙腈；酯如乙酸乙酯；氯代烃如二氯甲烷或1,2-二氯乙烷；醚如四氢呋喃、二异丙醚、二氧六环或1,2-二甲氧基乙烷；芳烃如苯或甲 苯；酰胺如二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺；及其混合物。
对碱没有具体限制，只要反应不受阻即可。碱的实例包括但不限于碱金属或碱土金属的碳酸盐(例如碳酸钠、碳酸钾和碳酸钙)；乙酸盐(例如乙酸钠和乙酸铵)；碱金属的碳酸氢盐(例如碳酸氢钠和碳酸氢钾)；有机碱(例如三乙胺、吡啶和甲基吡啶)；及其混合物。
在本发明的一个实施方案中，该反应通过在1,2-二甲氧基乙烷中混合式(III)化合物与甲亚胺乙酯盐酸盐(1-1.5当量)和乙酸钠(1.5-2.5当量)来进行。优选将式(III)化合物完全溶解在1,2-二甲氧基乙烷中，并于-20℃到30℃、更优选10-25℃的温度下向其中加入甲亚胺乙酯盐酸盐。将所得悬浮液搅拌5-30分钟、优选10分钟并向其中加入乙酸钠，然后于回流下搅拌6-50小时、优选15小时。后处理通过萃取方法(其包括在酸性条件下将反应物溶解在水中的工艺和使用有机溶剂(例如乙酸乙酯))来进行。如此获得的水溶液用碱(例如碳酸钠和碳酸氢钠)处理至pH为8-10、优选8-9并过滤得到呈固体的式(V)化合物。
<步骤4>
通过进行式(V)化合物的氨基腙环的亲核性氮的保护反应来制备式(VI)化合物。
PG为氨基保护基团，其实例包括但不限于酰基如甲酰基、烷酰基(例如(C1-C7烷基)羰基如乙酰基；(C1-C7卤代烷基)羰基如三氟乙酰基；(C1-C7烷氧基)羰基如甲氧基羰基、乙氧基羰基或叔-丁氧基羰基；和(C6-C12芳基)(C1-C7烷氧基)羰基如苄氧基羰基)、芳酰基如(C6-C12芳基)羰基(例如苯甲酰基)和三苯甲基，优选叔-丁氧基羰基。
亲核性氮的保护反应是有机合成领域中熟知的(例如，L.Paquette，ed.Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis，John Wiley and Sons(1995);T.W.Greene and P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，第2版，John Wiley and Sons，New York，第7章，1991)。
该反应在20-150℃的温度下、优选在能使溶剂回流的温度40-100℃下、更优选在60-90℃下进行。
作为溶剂，优选惰性溶剂。反应中使用的溶剂的实例包括但不限 于腈如乙腈；酯如乙酸乙酯；氯代烃如二氯甲烷或1,2-二氯乙烷；醚如四氢呋喃、二异丙醚、二氧六环或1,2-二甲氧基乙烷；芳烃如苯或甲苯；酰胺如二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺；及其混合物。
在本发明的一个实施方案中，该反应通过使式(V)化合物与作为保护试剂的焦炭酸二叔丁酯(Boc2O，1-2当量)和作为活化剂的4-二甲基氨基吡啶(0.03-0.07当量)在四氢呋喃中于回流下反应1-5小时、优选1.5小时来进行。后处理通过萃取方法(其包括在酸性条件下将4-二甲基氨基吡啶溶解在水中的工艺和使用不与水混溶的溶剂(例如二氯甲醇))来进行。浓缩所得有机层，如此获得的固体残余物用非极性有机溶剂优选环己烷进行研磨，然后过滤获得式(VI)化合物。
<步骤5>
通过在惰性溶剂中还原式(VI)化合物的硝基来制备式(VII)的苯胺。
对惰性溶剂没有具体限制，只要反应不受阻即可。溶剂的实例包括但不限于醇如甲醇、乙醇或丙醇；醚如四氢呋喃、二异丙醚、二氧六环或1,2-二甲氧基乙烷；有机酸如乙酸；无机酸如盐酸；水；及其混合物。
硝基的还原通过使用还原剂或金属进行化学计量氢化来进行。可用于其中的还原剂的实例包括但不限于硼烷络合物、乙硼烷、硼氢化钠、硼氢化锂、硼氢化钠-氯化锂、氢化铝锂、二异丁基氢化铝或氯化锌。此外，金属的实例包括但不限于过渡金属如锌、铁或锡，优选锌，其在酸性条件下使用。由于锌可在中性或碱性条件下使用，因此优选在化学计量氢化中使用锌。优选化学计量氢化通过在氯化铵的存在下用锌处理式(VI)化合物来进行。化学计量氢化可用Raney镍；钯炭；氧化钯；铂；铂黑；氧化铂；碳载硫酸铂；和过渡金属如铑、钌或铝在常压下进行。在进行还原时，优选使用甲酸铵、磷酸二氢钠或肼作为产氢剂。在酸性条件下，该反应使用化学计量量或更多的还原剂，优选使用过量的还原剂来进行。在化学计量氢化中，优选以基于式(VII)化合物的总重量的5-30重量%的量使用Raney镍并以基于式(VII)化合物的总重量的0.02-30重量%的量使用贵金属如铂或钯。该反应在0-150℃、优选10-100℃的温度下进行。反应时间取决于反应物的量或 反应温度，优选几分钟到48小时。
在酸性条件下完成反应后，向包含所期望化合物的所得溶液中加入冰水并用碱性溶剂萃取法分离所期望化合物。此外，在完成化学计量氢化后，通过对包含所期望化合物的所得溶液进行过滤以去除所用还原剂或金属并进行滤液浓缩和任选地重结晶来分离式(VII)化合物。
对于结晶工艺中的溶剂，使用可与水混溶的溶剂，其实例包括但不限于C1-C4醇如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或异丁醇；环状醚如四氢呋喃或二氧六环；酰胺如二甲基甲酰胺或N-甲基吡咯烷酮；乙腈；二甲亚砜；其混合物；及上述溶剂与水的混合溶剂。
可使用式(VII)化合物的籽晶。
此外，可使用水和至少一种不与水混溶的溶剂的溶剂体系。所述不与水混溶的溶剂的实例包括但不限于烃如甲苯或二甲苯；C4-C8酯如乙酸乙酯；C4-C8醚如叔丁基甲基醚或异丙醚；氯代溶剂如二氯甲烷、二氯乙烷或氯苯；及其混合物。当使用不与水混溶的溶剂时，过滤式(VII)化合物并以有机相或水相分离。对于重结晶工艺中的溶剂，可优选异丙醇。
在本发明的一个实施方案中，该反应通过使式(VI)化合物在钯炭的存在下在醇类溶剂优选甲醇中于氢气和搅拌下反应1-5小时、优选2小时来进行。在后处理中，过滤所得溶液以除去所用还原剂或金属，并将如此获得的粗产物重结晶得到式(VII)化合物。
<步骤6>
通过在溶剂中使式(VII)化合物与5-氯-N-(((S)-环氧乙烷-2-基)甲基)噻吩-2-羧酰胺进行亲核取代反应来制备式(VIII)化合物。
5-氯-N-(((S)-环氧乙烷-2-基)甲基)噻吩-2-羧酰胺可从韩国的RStech Corporation购得。优选基于1摩尔式(VII)化合物以1-2摩尔的量使用5-氯-N-(((S)-环氧乙烷-2-基)甲基)噻吩-2-羧酰胺。但在反应中可使用其化学计量量。
反应中使用的溶剂为惰性溶剂。溶剂的实例包括但不限于醇如异丙醇或异丁醇；腈如乙腈；酯如乙酸乙酯；氯代烃如二氯甲烷或1,2- 二氯乙烷；醚如四氢呋喃、二异丙醚、二氧六环或1,2-二甲氧基乙烷；芳烃如苯或甲苯；酰胺如二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺；及其混合物。
该反应在包含溶剂沸点的范围，优选20-180℃的温度下进行。
在本发明的另一实施方案中，该反应通过在5-氯-N-(((S)-环氧乙烷-2-基)甲基)噻吩-2-羧酰胺(1-1.5当量)的存在下在异丁醇中于回流下搅拌式(VII)化合物5-30小时、优选10-20小时来进行。在后处理中，浓缩所得溶液，固体残余物用非极性有机溶剂优选乙酸乙酯在-10℃到40℃、优选-5℃到10℃的温度下研磨并过滤得到式(VIII)化合物。
<步骤7>
通过使用光气等效物作为缩合剂进行式(VIII)的连位氨基醇的羰基化反应来制备式(IX)的唑烷酮。
可用于该反应中的缩合剂的实例包括但不限于氯甲酸乙酯、1,1’-羰基二咪唑及其混合物。
该反应中还使用活化剂，其实例包括但不限于二(C1-C4烷基)氨基吡啶(例如4-二甲基氨基吡啶)、N-杂环烷基吡啶(例如4-吡咯烷基吡啶)及其混合物。
缩合剂基于1摩尔式(VIII)化合物以1-3摩尔的量使用，活化剂基于式(VIII)化合物以化学计量量或更少的量使用。该反应在20-150℃的温度下、优选在能使溶剂回流的温度40-100℃下、更优选在60-90℃下进行。
反应中使用的溶剂的实例包括但不限于腈如乙腈；酯如乙酸乙酯；氯代烃如二氯甲烷或1,2-二氯乙烷；醚如四氢呋喃、二异丙醚、二氧六环或1,2-二甲氧基乙烷；芳烃如苯或甲苯；酰胺如二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺；及其混合物。
在本发明的另一实施方案中，该反应通过使式(VIII)化合物与1,1’-羰基二咪唑(1-1.5当量)在4-二甲基氨基吡啶(0.03-0.06当量)的存在下在异丁醇中于回流下反应1-40小时、优选10-25小时来进行。后处理通过萃取方法(其包括在酸性条件下将咪唑和4-二甲基氨基吡啶溶解在水中的工艺和使用不与水混溶的溶剂如乙酸乙酯)来进行。更优选在回 流下搅拌所得混合物直至反应完成以使式(IX)化合物结晶，冷却至10-60℃、优选30℃的温度，并过滤获得式(IX)化合物。或者，可通过在反应1-5小时后向所得混合物中加入式(IX)化合物的籽晶使式(IX)化合物结晶。
<步骤8>
通过从式(IX)化合物脱去氨基保护基团来制备式(I)的5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[4-(5,6-二氢-4H-[1,2,4]三嗪-1-基)苯基]-1,3-唑烷-5-基}-甲基)噻吩-2-羧酰胺。根据保护基团的种类进行氨基保护基团的去保护。例如，式(IX)化合物中的酰基或芳酰基通过用碱金属氢氧化物如氢氧化锂或氢氧化钠进行水解而脱去。或者，酰基如叔-丁氧基羰基用酸如盐酸、硫酸、三氟乙酸或酸性阳离子交换树脂脱去。并且芳基烷氧基羰基如苄氧基羰基通过用催化剂如钯炭进行氢化或通过与路易斯酸如三(三氟乙酸)硼烷进行反应而脱去。氨基保护基团的去保护方法在有机合成领域是熟知的(T.W.Greene and P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，第2版，John Wiley and Sons，New York，第7章，1991)。
当式(IX)化合物中的PG为叔-丁氧基羰基时，去保护用1-6N的盐酸、优选3N的盐酸在醚如四氢呋喃、二异丙醚、二氧六环或1,2-二甲氧基乙烷、优选四氢呋喃的溶液中于20-150℃的温度下、优选于能使溶剂回流的温度40-100℃下、更优选于60-90℃下于回流下进行0.5-3小时、优选1小时来进行。
对可用于该反应中的溶剂没有具体限制，只要反应不受阻即可。溶剂的实例包括但不限于二氯甲烷、氯仿、苯和四氢呋喃。
后处理通过萃取方法(包括将具有环状氨基腙基团的式(I)的唑烷酮盐酸盐转化为游离盐形式的式(I)衍生物的工艺和使用不与水混溶的溶剂如乙酸乙酯)来进行。更优选在回流下搅拌所得混合物直至反应完成以使式(I)衍生物结晶，冷却至10-70℃、优选30℃的温度，并过滤获得式(I)化合物。或者，可通过在反应0.5-1小时后向所得混合物中加入式(I)衍生物的籽晶使式(I)衍生物结晶。
应理解，本发明还包括本发明化合物的可药用盐，所述盐通过处理可药用游离酸来制备。所述游离酸包括无机酸如盐酸、溴酸、硫酸 或磷酸；和有机酸如柠檬酸、乙酸、乳酸、马来酸、富马酸、葡糖酸、甲磺酸、琥珀酸、4-甲苯磺酸、三氟乙酸、半乳糖醛酸、扑酸、谷氨酰胺或天冬氨酸。
本发明还包括式(I)的盐的所有水合物。特别地，当该盐具有吸湿性时，优选该盐以结晶水合物的形式使用。
本发明中使用的溶剂和试剂可用相关领域中熟知的功能性替代物或衍生物替代，反应时间和温度被适当控制以优化反应条件。此外，本发明还包括从所述反应得到的产物的分离方法，任选的常规纯化方法如萃取、结晶和研磨。
本发明的5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[(5,6-二氢-4H-[1,2,4]三嗪-1-基)苯基]-1,3-唑烷-5-基}-甲基)-2-噻吩羧酰胺为凝血因子的抑制剂，其可用于治疗或预防血栓形成、心肌梗死、动脉硬化、炎症、卒中、心绞痛、血管成形术后再发性狭窄或血栓栓塞如间歇性跛行。
根据本发明的使用式(V)的环状氨基腙作为中间体的方法，可以以高收率经济地制得高纯度5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[4-(5,6-二氢-4H-[1,2,4]三嗪-1-基)苯基]-1,3-唑烷-5-基}-甲基)噻吩-2-羧酰胺。此外，本发明的制备方法适合于大规模生产，这是因为该制备方法包括能大规模地进行分离和精制的结晶和萃取工艺。
在下面提供的实施例中进一步描述和示意本发明，但这些实施例并不意在限制本发明的范围。
制备实施例1：甲亚胺乙酯盐酸盐的制备
0℃下向苯甲酰氯(1212g，8.62mol，1当量)在无水乙醚(5.8L)中的溶液中逐滴加入甲酰胺(388g，8.62mol，1当量)在EtOH(396g，8.60mol，0.998当量)中的溶液，持续1小时。将如此得到的混合物于0℃下搅拌30分钟。过滤固体，用乙醚(3L)和EA(3L)洗涤。将该固体于高真空下干燥。
收率：625g(66%)
实施例1：5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[(5,6-二氢-1H-[1,2,4]三嗪-4-基)苯基]-1,3-唑烷-5-基}-甲基)-2-噻吩羧酰胺盐酸盐
步骤1：2-[N-(4-硝基-苯基)-肼基]-乙醇的制备
将1-氟-4-硝基苯(7.1g，50mmol)溶解在CH3CN(70ml)中，并向其中加入2-羟乙基肼(纯度：90%，Aldrich，5.0g，66mmol)和K2CO3(7.6g，55mmol)。将如此得到的悬浮液于回流下搅拌4小时。减压浓缩(回流冷凝器，10托，40℃)所得橙色悬浮液，并向其中加入乙酸乙酯(EA，90ml)和水(18ml)。所得混合物于室温下强力搅拌10分钟。萃取有机层并用饱和盐水(10ml)洗涤。将所得溶液冷却至10℃并在搅拌下向其中逐滴加入48%的HBr溶液(3.7ml)。过滤如此得到的浅黄色固体并于高真空下干燥(1托，40℃)以得到标题化合物作为中间体。
收率：7.1g(51%)
TLC:Rf=0.62(EA/MeOH/AcOH=20/1/0.5)
1H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ8.17(d，J=9.0Hz，2H)，7.12(d，J=9.0Hz，2H)，3.82(t，J=5.4Hz，2H)，3.69(t，J=5.4Hz，2H)
LCMS:198(M+H+)(C8H11N3O3)
步骤2：1-溴-2-[N-(4-硝基-苯基)-肼基]-乙烷的制备
将步骤1中得到的化合物(38.9g，0.140mol)悬浮在无水的1,2-二甲氧基乙烷(585ml)中。将所得悬浮液冷却至0℃并向其中逐滴加入PBr3(15.9ml，0.168mol)，持续30分钟。将如此得到的混合物于60℃ 搅拌4小时。减压浓缩(回流冷凝器，10托，45℃)如此得到的浅黄色溶液。用水(150ml)悬浮所得残余物(油)并搅拌。向所得悬浮液中加入饱和NaHCO3水溶液(150ml)至pH为4。所得混合物搅拌30分钟以沉淀出浅黄色沉淀物。过滤沉淀物并用水(100ml)洗涤。将所得固体与水(100ml)、饱和NaHCO3水溶液(70ml)和CH2Cl2(500ml)混合。所得混合物搅拌10分钟，然后静置以使有机层和水层分离。用20g MgSO4干燥有机层并过滤。减压浓缩(回流冷凝器，10托，40℃)所得滤液，得到呈浅黄色固体的标题化合物。
收率：31.3g(86%)
TLC:Rf=0.91(EA/MeOH/AcOH=20/1/0.5)
1H NMR(600MHz，CDCl3)δ8.14(d，J=10.2Hz，2H)，6.92(d，J=10.2Hz，2H)，4.00(t，J=7.2Hz，2H)，3.65(t，J=7.2Hz，2H)
LCMS:261(M+H+)(C8H10BrN3O2)
步骤3：4-(5,6-二氢-4H-[1,2,4]三嗪-1-基)-1-硝基苯的制备
将步骤2中得到的化合物(13.0g，50.0mmol)完全溶解在无水1,2-二甲氧基乙烷(200ml)中，该无水1,2-二甲氧基乙烷通过混合1,2-二甲氧基乙烷(纯度：99%，Junsei Co.Ltd)与所需量的分子筛4A并在不时的搅拌下静置5小时或更长时间制得。向其中加入甲亚胺乙酯HCl盐(5.8g，52.5mmol)。如此得到的悬浮液于25℃下搅拌10分钟。向其中加入无水乙酸钠(NaOAc，8.6g，105mmol)并在回流下搅拌15小时。减压浓缩(10托，50℃)如此得到的橙色悬浮液。将如此得到的橙色残余物与1N HCl(140ml)、EA(50ml)和己烷(100ml)混合并于室温下搅拌10分钟。少量不溶悬浮固体保留在水层中并过滤。所得水层用EA(30ml)和己烷(60ml)的混合物洗涤。向所得溶液中加入12g碳酸钠至pH为8.5。减压过滤如此得到的橙色固体，用水(15ml)洗涤并真空干燥得到标题化合物。
收率：7.7g(75%)
TLC:Rf=0.45(EA/MeOH/AcOH=20/1/0.5)
HPLC:Rt=8.65(梯度A)，纯度91.1%
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.03(d，J=9.6Hz，2H)，7.16(d，J=9.6Hz，2H)，7.12(br s，1H)，7.01(d，J=4.0Hz，2H)，3.77(t，J=5.2Hz，2H)，3.43-3.40(m，2H)
LCMS:207(M+H+)(C9H10N4O2)
步骤4：4-(5,6-二氢-4-叔-丁氧基羰基-[1,2,4]三嗪-1-基)-1-硝基苯的制备
向通过将步骤3中得到的化合物(12.4g，60mmol)悬浮在四氢呋喃(THF，200ml)中所制得的橙色悬浮液中加入4-二甲基氨基吡啶(DMAP，0.367g，3mmol)和二碳酸二叔丁酯(Boc2O，19.6g，90mmol)并在回流下搅拌1.5小时。减压浓缩(回流冷凝器，10托，40℃)如此得到的黄色悬浮液以除去溶剂。将所得黄色残余物完全溶解在CH2Cl2(700ml)中并用1N HCl(700ml)洗涤。萃取有机层，用25g MgSO4干燥并减压浓缩(冷凝器，10托，40℃)。将所得黄色残余物溶解在环己烷(250ml)中并于室温下强力搅拌30分钟。减压浓缩所得混合物，获得黄色固体。干燥(1托，50℃)该固体，得到所期望的化合物。
收率：15.6g(85%)
TLC:Rf=0.93(EA/MeOH/AcOH=20/1/0.5)
1H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ8.14(d，J=9.6Hz，2H)，7.62(brs，1H)，7.30(d，J=9.6Hz，2H)，3.89(br s，2H)，3.79(br s，2H)，1.50(s，9H)
LCMS:307(M+H+)(C14H18N4O4)
步骤5：4-(5,6-二氢-4-叔-丁氧基羰基-[1,2,4]三嗪-1-基)苯胺的制备
向通过将步骤4中得到的化合物(19.9g，65mmol)悬浮在甲醇(200ml)中所制得的黄色悬浮液中加入10%的钯炭(4.0g)。所得混合物经真空脱气并在连接有氢气球的烧瓶中于室温下搅拌2小时。于减压下通过硅藻土545过滤所得混合物以移除钯炭。减压浓缩(回流冷凝器，10托，40℃)滤液。将所得浅棕色残余物溶解在异丙醇(140ml)中并回流以完全溶解。所得溶液于0℃静置2小时以便冷却，搅拌30分钟并减压过滤。真空干燥所得象牙色结晶固体，得到标题化合物(15.8g，88%)。
TLC:Rf=0.38(EA/MeOH/AcOH=20/1/0.5)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.34(br s，1H)，6.91(d，J=12.0Hz，2H)，6.51(d，J=12.0Hz，2H)，6.64(br s，2H)，3.74(br s，2H)，3.41(br s，2H)，1.48(s，9H)
LCMS:277(M+H+)(C14H20N4O2)
步骤6：N-(3-(5,6-二氢-4-叔-丁氧基羰基-[1,2,4]三嗪-1-基)苯胺基-(2R)-2-羟丙基)-5-氯-2-噻吩羧酰胺的制备
将步骤5中得到的化合物(19.3g，70mmol)和5-氯-N-(((S)-环氧乙烷-2-基)甲基)噻吩-2-羧酰胺(19.1g，88mmol)悬浮在异丁醇(350ml)中并在回流下搅拌18小时。减压浓缩(回流冷凝器，10托，50℃)如此得到的深蓝色溶液。向如此得到的黄色固体残余物中加入乙酸乙酯(200ml)，所得混合物于室温下搅拌30分钟，并于0℃下再强力搅拌30分钟。减压过滤如此得到的悬浮固体并真空干燥(1托，50℃)，得到为象牙色粗产物的标题化合物。
收率：25.9g(75%)
TLC:Rf=0.34(EA/MeOH/AcOH=20/1/0.5)
粗样品的1H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ8.62(t，J=5.4Hz，1H)， 7.69(d，J=3.6Hz，1H)，7.36(br s，1H)，7.18(d，J=4.2Hz，1H)，6.95(d，J=9.0Hz，2H)，6.54(d，J=9.0Hz，2H)，5.10(t，J=6.6Hz，1H)，5.05(d，J=5.4Hz，1H)，3.81-3.75(m，3H)，3.44(br s，2H)，3.37-3.34(m，1H)，3.25-3.21(m，1H)，3.08-3.04(m，1H)，2.94-2.89(m，1H)，1.48(s，9H)
LCMS:494(M+H+)(C22H28ClN5O4S)
步骤7：5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[(5,6-二氢-4-叔-丁氧基羰基-[1,2,4]三嗪-1-基)苯基]-1,3-唑烷-5-基}-甲基)-2-噻吩羧酰胺的制备
将步骤6中得到的化合物(25.2g，51mmol)完全溶解在THF(325ml)中，并向其中加入1,1’-羰基二咪唑(10.8g，66mmol)和DMAP(0.31mg，2.6mmol)。所得混合物于回流下搅拌18小时。将所得浅黄色悬浮液冷却至室温、减压浓缩并真空干燥(1托，50℃)，得到呈象牙色固体的标题化合物。
收率：23.3g(88%)
TLC:Rf=0.75(EA/MeOH/AcOH=20/1/0.5)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.97(t，J=5.4Hz，1H)，7.69(d，J=4.2Hz，1H)，7.43(br s，1H)，7.41(d，J=9.0Hz，2H)，7.20(d，J=4.2Hz，1H)，7.19(d，J=9.0Hz，2H)，4.82-4.77(m，1H)，4.12(t，J=9.0Hz，1H)，3.80-3.78(m，3H)，3.62(br s，2H)，3.59(t，J=6.0Hz，2H)，1.49(s，9H)
LCMS:520(M+H+)(C23H26ClN5O5S)
步骤8：5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[(5,6-二氢-4H-[1,2,4]三嗪-1-基)苯基]-1,3-唑烷-5-基}-甲基)-2-噻吩羧酰胺盐酸盐的制备
将步骤7中得到的化合物(16.1g，31mmol)完全溶解在THF(193ml)中，向其中加入3N HCl(193ml)。所得溶液于回流下搅拌1小时。将如此得到的白色悬浮液冷却至室温、减压浓缩并真空干燥(1托，40℃)，得到呈白色固体的标题化合物。
收率：13.4g(95%)
TLC:Rf=0.82(MC/MeOH/AcOH=10/1/0.5)
HPLC:Rt=12.39(梯度A)，纯度99.5%
1H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ12.12(br s，1H)，10.20(br s，1H)，9.08(t，J=6.0Hz，1H)，8.60(d，J=5.2Hz，1H)，7.74(d，J=4.2Hz，1H)，7.53(d，J=9.0Hz，2H)，7.20(d，J=4.2Hz，1H)，7.13(d，J=9.0Hz，2H)，4.85-4.81(m，1H)，4.15(t，J=8.8Hz，1H)，3.85(dd，J=6.0，9.2Hz，1H)，3.66(t，J=4.8Hz，2H)，3.63-3.56(m，2H)，3.19(br s，2H)
LCMS:420(M+H+)(C18H18ClN5O3S)
实施例2：5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[(5,6-二氢-4H-[1,2,4]三嗪-1-基)苯基]-1,3-唑烷-5-基}-甲基)-2-噻吩羧酰胺的制备
将实施例1中得到的HCl盐(6.9g，15mmol)完全溶解在33%的甲醇水溶液(1.1L)中并在搅拌的同时加热至50℃。向所得无色溶液中加入0.6M的Na2CO3水溶液(25ml)，并将如此得到的白色悬浮液于0℃静置0.5小时以便冷却。减压浓缩如此得到的白色固体，用H2O(150ml)洗涤并真空干燥(1托，40℃)，得到标题化合物(收率：5.5g，87%)。将该标题化合物溶解在甲醇(330ml)中并在回流下搅拌。将如此得到的浅黄色 溶液于0℃静置2小时以便冷却。减压浓缩所得白色固体、用甲醇(10ml)洗涤并真空干燥(1托，40℃)，得到标题化合物的晶体(收率：5.0g，80%)。
HPLC:Rt=12.37(梯度A)，纯度99.7%
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.97(t，J=6.0Hz，1H)，7.69(d，J=4.0Hz，1H)，7.32(d，J=9.2Hz，2H)，7.20(d，J=4.0Hz，1H)，7.12(d，J=9.2Hz，2H)，6.79(d，J=4.0Hz，1H)，6.52(br s，1H)，4.80-4.75(m，1H)，4.10(t，J=8.8Hz，1H)，3.77(dd，J=6.0，9.2Hz，1H)，3.58(t，J=5.6Hz，2H)，3.33(s，4H)
LCMS:420(M+H+)(C18H18ClN5O3S)
实施例3：5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[(5,6-二氢-4H-[1,2,4]三嗪-1-基)苯基]-1,3-唑烷-5-基}-甲基)-2-噻吩羧酰胺甲磺酸盐的制备
向实施例2中得到的化合物(3.3g，7.9mmol)中加入MeOH/CH2Cl2(1/4v/v，70ml)的混合溶液并在回流下搅拌。将如此得到的浅黄色溶液冷却至0℃并向其中加入甲磺酸(0.56ml，8.6mmol)。减压浓缩(回流冷凝器，10托，40℃)所得混合物，得到浅黄色泡沫状固体。向所得固体中加入无水乙醇(20ml)，所得混合物于回流下搅拌以便固体明显溶解。将所得溶液冷却至0℃，保持2小时。减压浓缩所得白色固体、用无水EtOH(5ml)洗涤并真空干燥(1托，40℃)，得到结晶甲磺酸盐。
收率：3.8g(93%)
HPLC:Rt=12.35(梯度A)，纯度99.8%
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.97(br s，1H)，10.07(br s，1H)，8.99(t，J=6.0Hz，1H)，8.59(d，J=6.0Hz，1H)，7.70(d，J=4.0Hz，1H)，7.53(d，J=9.2Hz，2H)，7.20(d，J=4.0Hz，1H)，7.13(d，J=9.2Hz，2H)，4.86-4.80(m，1H)，4.16(t，J=9.2Hz，1H)， 3.82(dd，J=6.0，9.2Hz，1H)，3.67(m，2H)，3.60(t，J=5.6Hz，2H)，3.20(br s，2H)，2.31(s，3H)
LCMS:420(M+H+)(C18H18ClN5O3S)
实施例4：(S)-5-氯-N-((3-(4-(5,6-二氢-1,2,4-三嗪-1(4H)-基)苯基)-2-氧代 唑烷-5-基)甲基)噻吩-2-羧酰胺甲磺酸盐的制备
步骤1：(2-[N-(4-硝基-苯基)-肼基]-乙醇)氢溴酸盐的制备
将1-氟-4-硝基苯(428g，3.03mol，Aldrich F11204)溶解在CH3CN(4.3L)中，并向其中加入2-羟乙基肼(300g，3.94mol，1.3当量，从中国进口，>98%)和K2CO3(461g，3.34mol，1.1当量，Aldrich347825)。如此得到的混合物于80℃搅拌19小时。将混合物冷却至室温并蒸发除去溶剂。用EA(1.5L)和H2O(1L)溶解残余物。萃取有机层并用H2O(500mL)和盐水(200mL)洗涤。将萃取的EA层冷却至0℃，并于0℃下在搅拌的同时向其中逐滴加入48%的HBr溶液(360mL，Aldrich244260)。所得混合物于0℃下搅拌1小时。过滤如此得到的固体并用EA(5L)洗涤。在高真空下干燥所得固体，得到标题化合物。
收率：531g(63%)
TLC:Rf=0.62(EA/MeOH/AcOH=20/1/0.5)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.94(d，J=9.6Hz，2H)，7.12(brs，2H)，6.63(d，J=9.2Hz，2H)，3.53(t，J=5.8Hz，2H)，3.19(t，J=5.8Hz，2H)
LCMS:198(M+H+)(C8H11N3O3)
步骤2：1-溴-2-[N-(4-硝基-苯基)-肼基]-乙烷的制备
将步骤1中得到的化合物(531g，1.90mol)悬浮在无水1,2-二甲氧基乙烷(4.5L)中。将所得悬浮液冷却至0℃并于0℃下向其中逐滴加入PBr3(220mL，2.29mol，1.2当量，Aldrich256536)。将如此得到的混合物温热至室温并于60℃搅拌15小时。
将混合物冷却至室温并过滤除去残留的不溶固体。用1,2-二甲氧基乙烷(700mL)洗涤如此得到的滤饼，真空浓缩滤液。将所得残余物悬浮在H2O(2.5L)中，搅拌并冷却至0℃。于0℃下向其中加入2N NaOH水溶液(1.7L)以中和悬浮液混合物(pH6-7)。过滤固体并用H2O(5L)洗涤。将滤出的固体空气干燥5小时。
用CH2Cl2(3L)溶解该经空气干燥的固体，并向其中加入饱和NaHCO3水溶液(1.5L)和H2O(700mL)。所得混合物搅拌15分钟并静置以使有机层和水层分离。不溶于有机层和H2O的不溶固体保留在混合物中。过滤混合物除去不溶固体，用CH2Cl2(700mL)洗涤滤饼。萃取有机层，用MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。所得固体于高真空下干燥，得到标题化合物。
收率：383g(77%：当将产物溶解在CDCl3中以核查1H NMR谱时，不溶固体仍保留在CDCl3中)
TLC:Rf=0.91(EA/MeOH/AcOH=20/1/0.5)
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.12(d，J=9.6Hz，2H)，6.92(d，J=9.2Hz，2H)，4.00(t，J=6.6Hz，2H)，3.65(t，J=6.6Hz，2H)
LCMS:261(M+H+)(C8H10BrN3O2)
步骤3：4-(5,6-二氢-4H-[1,2,4]三嗪-1-基)-1-硝基苯的制备
将步骤2中得到的化合物(384g，1.48mol)溶解在无水1,2-二甲氧基乙烷(4L)中，并于室温下向其中加入甲亚胺乙酯HCl盐(322g，2.94mol，2当量)。所得混合物于室温下搅拌30分钟。向混合物中加入NaOAc(364g，4.44mol，3.0当量，Aldrich110191)，混合物于75℃下搅拌15小时。
将混合物冷却至室温并蒸发除去溶剂。将所得残余物悬浮在EA(2L)和1,2-二甲氧基乙烷(1L)中。向悬浮液中加入3N HCl水溶液(2.5L)。不溶固体保留在所得混合物中。过滤固体两次以除去不溶固体。向滤液中加入乙醚(3L)以有效地使有机层和水层分离。分离水层并用混合有机溶液(EA(1L)+己烷(500mL))洗涤。合并的有机层应保留以回收产物。
(水层的处理)
将水层冷却至0℃并向其中缓慢加入6N NaOH水溶液(2.2L)以碱化H2O层(pH～9)。所得悬浮液于室温下搅拌12小时。过滤固体、用H2O(3L)洗涤并于高真空下干燥。
(合并的有机层的处理)
真空浓缩合并的有机层。所得残余物用3N HCl水溶液(500mL)酸化。进行过滤以除去不溶固体。用乙醚(700mL×2)洗涤如此得到的滤液(H2O层)。搅拌水层并冷却至0℃。向经冷却的水层中加入5N NaOH水溶液(1L)以便碱化(pH～9)。如此得到的混合物于室温下搅拌12小时。过滤如此得到的固体并用H2O(1.5L)洗涤。于高真空下干燥固体，得到标题化合物。
收率：187g(62%)
TLC:Rf=0.45(EA/MeOH/AcOH=20/1/0.5)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.99(d，J=9.6Hz，2H)，7.16(d，J=9.6Hz，2H)，7.09(br s，1H)，6.97(d，J=3.6Hz，2H)，3.73(t，J=5.0Hz，2H)，3.45-3.46(m，2H)
LCMS:207(M+H+)(C9H10N4O2)
步骤4：4-(5,6-二氢-4-叔-丁氧基羰基-[1,2,4]三嗪-1-基)-1-硝基苯的制备
将步骤3中得到的化合物(187g，0.907mol)悬浮在无水THF(2.2L)中并向其中加入Boc2O(300g，1.36mol，1.5当量，Aldrich205249)和DMAP(6g，0.045mol，0.05当量，Aldrich107700)。如此得到的混合物于65℃下搅拌5小时。
将混合物冷却至0℃。于0℃下向混合物中加入MeOH(1.5L)并于0℃下搅拌1小时。过滤如此得到的固体，用MeOH(750mL)洗涤并于高真空下干燥。
真空浓缩如此得到的滤液。在搅拌的同时向所得残余物中加入MeOH(1L)。将如此得到的混合物于室温下搅拌12小时。过滤如此得到的固体，用MeOH(500mL)洗涤并于高真空下干燥，得到标题化合物。
收率：182g(65%)
TLC:Rf=0.93(EA/MeOH/AcOH=20/1/0.5)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.17(d，J=9.6Hz，2H)，7.57(brs，1H)，7.19(d，J=9.6Hz，2H)，3.93-3.86(m，2H)，3.83-3.745(m，2H)，1.56(s，9H)
LCMS:307(M+H+)(C14H18N4O4)
步骤5：4-(5,6-二氢-4-叔-丁氧基羰基-[1,2,4]三嗪-1-基)苯胺的制备
于室温下将步骤4中得到的化合物(134g，438mmol)悬浮在MeOH(1.3L)中，并于室温下以15分钟的间隔分6次加入NH4Cl(12g，0.5当量，Aldrich A4514)和Zn(15g，0.5当量，Aldrich209988)(NH4Cl的总量=73g(1356mmol，3.1当量)，Zn的总量=88g(1356mmol，3.1当量))。
将所得混合物的温度逐步升至65℃，混合物于65℃下搅拌12小时。将混合物冷却至40℃并向其中加入NH4Cl(12g，0.5当量，AldrichA4514)和Zn(15g，0.5当量，Aldrich209988)。将所得混合物的温度逐步升至65℃并将混合物于65℃下搅拌1小时。
将混合物冷却至室温并通过硅藻土垫过滤。用MeOH(700mL)和THF(700mL)洗涤滤饼并浓缩滤液。将如此得到的粗产物于高真空下干燥并不经进一步纯化而使用。
收率：124g(定量)
TLC:Rf=0.38(EA/MeOH/AcOH=20/1/0.5)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.31(br s，1H)，6.86(d，J=12.0Hz，2H)，6.48(d，J=12.0Hz，2H)，4.60(s，2H)，3.71(br s，2H)，3.38(br s，2H)，1.44(s，9H)
LCMS:277(M+H+)(C14H20N4O2)
步骤6：N-(3-(5,6-二氢-4-叔-丁氧基羰基-[1,2,4]三嗪-1-基)苯胺基-(2R)-2-羟丙基)-5-氯-2-噻吩羧酰胺的制备
将步骤5中得到的化合物(120g，435mmol)和5-氯-N-(((S)-环氧乙烷-2-基)甲基)噻吩-2-羧酰胺(123g，566mmol，1.3当量，购自RStech(韩国Daejeon))悬浮在无水EtOH(1450mL)中。如此得到的混合物于85℃下搅拌16小时。将混合物冷却至室温并真空蒸发除去溶剂。所得残余物于高真空下干燥18小时。将经干燥的固体悬浮在EA(2L)中。如此得到的悬浮液于室温下搅拌1小时。过滤如此得到的固体并用EA(500mL)和乙醚(500mL)洗涤。滤出的固体于高真空下干燥，得到标题化合物。
粗产物中含苯胺(原料)、环氧化物、反应过度的副产物。
收率：158g(74%)
TLC:Rf=0.34(EA/MeOH/AcOH=20/1/0.5)
粗样品的1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.57(t，J=5.4Hz，1H)，7.65(d，J=3.6Hz，1H)，7.32(br s，1H)，7.14(d，J=4.2Hz，1H)，6.90(d，J=9.0Hz，2H)，6.51(d，J=9.0Hz，2H)，5.04(t，J=6.6Hz，1H)，5.00(d，J=5.4Hz，1H)，3.87-3.65(m，3H)，3.40(br s，2H)，3.37-3.34(m，1H)，3.25-3.21(m，1H)，3.17-2.96(m，1H)，2.94-2.84(m，1H)，1.44(s，9H)
LCMS:494(M+H+)(C22H28ClN5O4S)
步骤7：5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[(5,6-二氢-4-叔-丁氧基羰基-[1,2,4]三嗪-1-基)苯基]-1,3-唑烷-5-基}-甲基)-2-噻吩羧酰胺的制备
将步骤6中得到的化合物(158g，320mmol)悬浮在THF(1000mL)中，并向其中加入1,1-羰基二咪唑(68g，416mmol，1.3当量，Aldrich115533)和DMAP(2g，16mmol，0.05当量，Aldrich107700)。将如此得到的混合物于75℃下搅拌3小时，冷却至室温，并真空蒸发除去溶剂。将所得残余物悬浮在EtOH(1300mL)中。将如此得到的悬浮液于0℃下搅拌1小时。过滤如此得到的固体并用冷EtOH(800mL)和冷MeOH(300mL)洗涤。滤出的固体于高真空下干燥，得到标题化合物。
收率：101g(61%)
TLC:Rf=0.75(EA/MeOH/AcOH=20/1/0.5)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.93(t，J=5.4Hz，1H)，7.66(d，J=4.2Hz，1H)，7.43-7.33(m，3H),7.29-7.12(m，3H)，4.82-4.73(m，1H)，4.09(t，J=9.0Hz，1H)，3.82-3.70(m，3H)，3.65-3.52(m，4H)，1.45(s，9H)
LCMS:520(M+H+)(C23H26ClN5O5S)
步骤8：5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[(5,6-二氢-4H-[1,2,4]三嗪-1-基)苯 基]-1,3-唑烷-5-基}-甲基)-2-噻吩羧酰胺盐酸盐的制备
将步骤7中得到的化合物(101g，194mmol)悬浮在3N HCl水溶液(1.1L)和THF(1.1L)中并于80℃下搅拌3小时。将如此得到的混合物冷却至室温。过滤如此产生的固体，用THF(700mL)洗涤并于高真空下干燥，得到标题化合物。
收率：75g(85%)
TLC:Rf=0.82(MC/MeOH/AcOH=10/1/0.5)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.12(br s，1H)，10.32(br s，1H)，9.13(t，J=6.0Hz，1H)，8.57(d，J=5.2Hz，1H)，7.75(d，J=4.2Hz，1H)，7.49(d，J=9.0Hz，2H)，7.15(d，J=4.2Hz，1H)，7.09(d，J=9.0Hz，2H)，4.85-4.74(m，1H)，4.11(t，J=8.8Hz，1H)，3.85(dd，J=6.0，9.2Hz，1H)，3.62(t，J=4.8Hz，2H)，3.59-3.49(m，2H)，3.15(br s,2H)
LCMS:420(M+H+)(C18H18ClN5O3)
实施例5：5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[(5,6-二氢-4H-[1,2,4]三嗪-1-基)苯基]-1,3-唑烷-5-基}-甲基)-2-噻吩羧酰胺的制备
将实施例4中得到的化合物(20g，43.8mmol)悬浮在MeOH/H2O(1/2wt/wt，3.2L)中，并于100℃下搅拌直至该实施例4中得到的化合物明显溶解。向其中加入0.6M的Na2CO3水溶液(75mL)。将如此得到的混合物于0℃静置2小时。过滤如此产生的固体，用H2O(400mL)洗涤并于高真空下干燥，得到标题化合物。
收率：17g(93%)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.93(t，J=6.0Hz，1H)，7.66(d，J=4.0Hz，1H)，7.29(d，J=9.2Hz，2H)，7.16(d，J=4.0Hz，1H)，7.08(d，J=9.2Hz，2H)，6.76(d，J=4.0Hz，1H)，6.48(br s，1H)，4.78-4.69(m，1H)，4.07(t，J=8.8Hz，1H)，3.74(dd，J=6.0，9.2Hz，1H)，3.54(t，J=5.6Hz，2H)，3.38(s，4H)
LCMS:420(M+H+)(C18H18ClN5O3)
实施例6：5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[(5,6-二氢-4H-[1,2,4]三嗪-1-基)苯基]-1,3-唑烷-5-基}-甲基)-2-噻吩羧酰胺甲磺酸盐的制备
将实施例5中得到的化合物(16.7g，39.8mmol)悬浮在MeOH/CH2Cl2(1/4v/v，350mL)中，并于50℃下搅拌直至该实施例5中得到的化合物明显溶解。将如此得到的混合物冷却至0℃，并于0℃下向其中加入甲磺酸(2.9mL，43.8mmol，1.3当量，Aldrich471356)。真空蒸发所得混合物以除去溶剂。将所得固体悬浮在无水EtOH(100mL)中并于90℃下搅拌悬浮液以使固体明显溶解。将所得混合物冷却至0℃并于0℃下搅拌2小时。过滤如此产生的固体，用无水EtOH(100mL)洗涤并于高真空下干燥，得到标题化合物。
收率：18.4g(89.7%)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.93(br s，1H)，10.03(br s，1H)，8.94(t，J=6.0Hz，1H)，8.55(d，J=6.0Hz，1H)，7.66(d，J=4.0Hz，1H)，7.49(d，J=9.2Hz，2H)，7.16(d，J=4.0Hz，1H)，7.08(d，J=9.2Hz，2H)，4.93-4.87(m，1H)，4.10(t，J=9.2Hz，1H)，3.77(dd，J=6.0，9.2Hz，1H)，3.63(m，2H)，3.57(t，J=5.6Hz，2H)，3.16(br s，2H)，2.28(s，3H)
LCMS:420(M+H+)(C18H18ClN5O3)
虽然已针对上述具体实施方案描述了本发明，但应认识到本领域技术人员可以对本发明作出各种修改和改变，这些修改和改变也落在由所附权利要求所限定的本发明的范围内。