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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610352128.3 (22)申请日 2016.05.24 (71)申请人 广州市澳键丰泽生物科技股份有限 公司 地址 510760 广东省广州市经济技术开发 区东区宏明路139号 (72)发明人 秦艳康林芝云帆王娜 唐惠奇 (74)专利代理机构 广州科粤专利商标代理有限 公司 44001 代理人 莫瑶江 (51)Int.Cl. C09B 61/00(2006.01) A23L 33/10(2016.01) A23K 10/30(2016.01) A23K 20/105(。
2、2016.01) (54)发明名称 一种蛹虫草黄色素粉的制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种蛹虫草黄色素粉的制备 方法。 本发明所述蛹虫草黄色素粉是以蛹虫草为 原料， 经过特定复合酶酶解后， 再经提取、 干燥而 得。 本发明通过复合酶将蛹虫草进行酶解这一步 骤， 可以大大提高蛹虫草黄色素的得率， 所得的 蛹虫草黄色素的稳定性好， 具有较高的生理活 性， 总黄酮含量高。 本发明方法步骤简单易于操 作， 相对于现有的蛹虫草黄色素的提取方法而 言， 本发明所述方法成本低， 时间短， 得率高， 适 合推广应用。 权利要求书1页 说明书4页 CN 106046845 A 2016.10.26 CN 。
3、106046845 A 1.一种蛹虫草黄色素粉的制备方法， 其特征在于所述制备方法包括如下步骤： (1)蛹虫草的前处理： 将蛹虫草子实体在50烘箱中烘干至恒重后， 粉碎成粉末， 过50 目筛； (2)蛹虫草的酶解： 将步骤(1)所述粉末与复合酶解液按照1:11:6的质量比充分混 合， 在3060下酶解1030min； (3)蛹虫草黄色素的提取： 将步骤(2)所得酶解产物按照料液质量比1:101:20补水 后， 2560下恒温水浴提取0.52h， 然后过滤、 取滤液， 加入质量分数为6080的乙 醇， 静置24h， 取上层清液， 50下旋转蒸发除去乙醇； (4)蛹虫草黄色素的干燥： 将步骤(3)。
4、所得产物进行喷雾干燥， 得到蛹虫草黄色素粉； 其中， 步骤(2)中所述复合酶解液的制备方法是： 将几丁质酶、 纤维素酶和半纤维素酶 按照2:1:15:1:1的质量比混合， 用水配制为质量百分比为0.20.6的复合酶解液， 并 将其pH调节为4.06.0。 2.根据权利要求1所述的蛹虫草黄色素粉的制备方法， 其特征在于所述复合酶解液的 pH的调节是通过柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液进行调节； 柠檬酸溶液的浓度为0.1mol/L， 磷酸 氢二钠溶液的浓度为0.2mol/L。 3.根据权利要求1所述的蛹虫草黄色素粉的制备方法， 其特征在于步骤(4)中， 所述喷 雾干燥是在除去乙醇的蛹虫草黄色素提取液中添加。
5、质量分数为515的麦芽糊精后进行 喷雾干燥， 喷雾干燥的条件为： 进口温度100120， 热风量为0.801.30m3/min， 进料流 量为0.030.06cm3/min， 喷头转速为1500020000r/min。 权利要求书 1/1 页 2 CN 106046845 A 2 一种蛹虫草黄色素粉的制备方法 技术领域 0001 本发明涉及黄色素粉的制备工艺领域， 具体涉及一种从蛹虫草中提取黄色素并将 其制成粉的方法。 背景技术 0002 蛹虫草(Cordycepsmilitaris)又名北虫草， 属于子囊菌亚门麦角菌科虫草属， 具 有扩张气管、 镇静、 抗炎症、 降血压、 抗病原微生物、 抗。
6、恶性肿瘤等多种药理活性。 蛹虫草能 呈现出橙黄色就是因为其自身所含的黄色素造成的， 蛹虫草黄色素是一种类胡萝 卜素。 迄今 为止发现的类胡萝 卜素绝大部分是脂溶性的类胡萝 卜素， 不易被人体吸收且有些遇光热不稳 定， 蛹虫草黄色素是迄今为止发现的一类罕见的水溶性类胡萝 卜素。 0003 类胡萝 卜素是全球生态系统中的一大类色素， 在自然的分布非常广泛， 类胡萝 卜素 作为维生素A的前体， 有助于预防和根治维生素A缺乏症， 同时， 类胡萝 卜素还具有多种生物 活性， 比如抗炎、 抗癌、 抗氧化的功效。 类胡萝 卜素作为重要的营养素来源， 不仅能增加机体 防病保健、 免疫功能， 而且在医药工业、 。
7、食品、 饲料等方面用途广泛。 蛹虫草黄色素作为类胡 萝 卜素的一类， 与传统的类胡萝 卜素相比， 其理论上具有更强的潜在生理活性。 0004 目前蛹虫草黄色素的提取方法中， 主要有两种： 一种是先采用大孔吸附树脂法对 粗提液进行粗分， 再采用正相硅胶柱层析进行分离纯化。 另一种是经初步纯化后， 采用制备 液相进行分离得到。 前者步骤繁琐， 得率不高， 且正相硅胶负载量小， 回收利用难。 后者成本 高， 不能实现大规模生产。 发明内容 0005 本发明的目的在于根据现有的蛹虫草黄色素的提取方法中存在的上述不足之处， 现提供一种新的蛹虫草黄色素粉的制备方法， 该方法成本低、 耗时短， 且得到的蛹虫。
8、草黄色 素粉的得率高， 稳定性好， 具有较高的生理活性。 0006 本发明上述目的通过以下技术方案予以实现： 0007 一种蛹虫草黄色素粉的制备方法， 具体包括如下步骤： 0008 (1)蛹虫草的前处理： 将蛹虫草子实体在50烘箱中烘干至恒重后， 粉碎成粉末， 过50目筛； 0009 (2)蛹虫草的酶解： 将步骤(1)所述粉末与复合酶解液按照1:11:6的质量比充分 混合， 在3060下酶解1030min； 0010 (3)蛹虫草黄色素的提取： 将步骤(2)所得酶解产物按照料液质量比1:101:20补 水后， 2560下恒温水浴提取0.52h， 然后过滤、 取滤液， 加入质量分数为6080的乙。
9、 醇， 静置24h， 取上层清液， 50下旋转蒸发除去乙醇； 0011 (4)蛹虫草黄色素的干燥： 将步骤(3)所得产物进行喷雾干燥， 得到蛹虫草黄色素 粉； 0012 其中， 步骤(2)中所述复合酶解液的制备方法是： 将几丁质酶、 纤维素酶和半纤维 说明书 1/4 页 3 CN 106046845 A 3 素酶按照2:1:15:1:1的质量比混合， 用水配制为质量百分比为0.20.6的复合酶解 液， 并将其pH调节为4.06.0。 0013 作为进一步的优选技术方案， 所述复合酶解液的pH的调节是通过柠檬酸-磷酸氢 二钠缓冲液进行调节； 柠檬酸溶液的浓度为0.1mol/L， 磷酸氢二钠溶液的。
10、浓度为0.2mol/L。 0014 作为更进一步的优选技术方案， 步骤(4)中， 所述喷雾干燥是在除去乙醇的蛹虫草 黄色素提取液中添加质量分数为515的麦芽糊精后进行喷雾干燥， 喷雾干燥的条件为： 进口温度100120， 热风量为0.801.30m3/min， 进料流量为0.030.06cm3/min， 喷头转 速为1500020000r/min。 0015 本发明方法制备得到的蛹虫草黄色素粉可以作为类胡萝 卜素应用于任何需要类胡 萝 卜素的产品中。 0016 与现有技术相比， 本发明具有如下有益效果： 0017 (1)本发明采用生物-物理法制备蛹虫草黄色素粉， 其中， 通过选用几丁质酶、 纤。
11、维 素酶和半纤维素， 将其按照特定比例配制得到的复合酶解液， 对蛹虫草的细胞壁进行酶解 后提取蛹虫草中的黄色素， 可以大大提高蛹虫草黄色素的得率， 同时， 制备得到的蛹虫草黄 色素粉具有较高的生理活性， 总黄酮含量高； 0018 (2)本发明所使用的几丁质酶、 纤维素酶和半纤维素， 将其按照特定比例配制得到 的复合酶解液， 是特别适用于蛹虫草黄色素提取的酶解液， 具有酶解时间短且酶解充分的 优点； 0019 (3)本发明所述制备方法与现有的蛹虫草黄色素的提取方法相比， 成本大大降低， 且具有耗时短的优点； 0020 (4)本发明采用喷雾干燥对蛹虫草黄色素提取液进行干燥， 制得的黄色素粉色泽 鲜。
12、艳， 纯度高。 具体实施方式 0021 以下结合实施例对本发明作进一步的描述， 但实施例并不对本发明做任何形式的 限定。 0022 以下实施例中， 如无特别说明， 所使用的原料均为市面上在售的原料， 所使用的方 法均为本领域技术人员熟知的方法。 0023 实施例1 0024 将蛹虫草子实体在50烘箱中烘干至恒重， 用高速粉碎机粉碎成粉末； 0025 选用几丁质酶、 纤维素酶与半纤维素酶， 按照几丁质酶、 纤维素酶与半纤维素酶质 量比2:1:1配制复合酶， 再用水配制质量百分比为0.2的复合酶液， 并用0.1mol/L柠檬酸 溶液、 0.2mol/L磷酸氢二钠溶液缓冲溶液调节复合酶液的pH至4.。
13、0； 0026 将预处理后的蛹虫草粉末与复合酶解液按照1:1的质量比混合， 在30下酶解 30min； 酶解完后的蛹虫草-复合酶混合液按照料液质量比1:10补水， 在40下提取1h， 过 滤， 取滤液， 加入质量分数为80的乙醇， 静置24h， 取上层清液， 50下旋转蒸发除去乙醇； 0027 除去乙醇的蛹虫草黄色素提取液添加质量分数为5麦芽糊精后进行喷雾干燥， 喷雾干燥的条件为： 进口温度为100， 热风量为0.8m3/min， 进料流量为0.03cm3/min， 喷头 转速为15000r/min。 经喷雾干燥制得的即为蛹虫草黄色素粉末。 说明书 2/4 页 4 CN 106046845 A。
14、 4 0028 用紫外分光光度法测定， 蛹虫草黄色素含量为92.68， 总黄酮含量为90.70。 稳 定性研究结果表明， 制备的蛹虫草黄色素低温下热稳定性好， 酸性条件下稳定性好， 且具有 较好的金属稳定性和耐氧性。 0029 实施例2 0030 将蛹虫草子实体在50烘箱中烘干至恒重， 用高速粉碎机粉碎成粉末； 0031 选用几丁质酶、 纤维素酶与半纤维素酶， 按照几丁质酶、 纤维素酶与半纤维素酶质 量比3.5:1:1配制复合酶， 再用水配制质量百分比为0.4的复合酶液， 并用0.1mol/L柠檬 酸溶液、 0.2mol/L磷酸氢二钠溶液缓冲溶液调节复合酶液的pH至5.0； 0032 将预处理。
15、后的蛹虫草粉末与复合酶解液按照1:3的质量比混合， 在50下酶解 20min； 酶解完后的蛹虫草-复合酶混合液按照料液质量比1:15补水， 在50下提取2h， 过 滤， 取滤液， 加入质量分数为70的乙醇， 静置24h， 取上层清液， 50下旋转蒸发除去乙醇； 0033 除去乙醇的蛹虫草黄色素提取液添加质量分数为10麦芽糊精后进行喷雾干燥， 喷雾干燥的条件为： 进口温度为110， 热风量为1.10m3/min， 进料流量为0.04cm3/min， 喷头 转速为18000r/min。 经喷雾干燥制得的即为蛹虫草黄色素粉末。 0034 用紫外分光光度法测定， 蛹虫草黄色素含量为95.6， 总黄酮含。
16、量为93.85。 稳 定性研究结果表明， 制备的蛹虫草黄色素低温下热稳定性好， 酸性条件下稳定性好， 具有较 好的金属稳定性和耐氧性。 0035 实施例3 0036 将蛹虫草子实体在50烘箱中烘干至恒重， 用高速粉碎机粉碎成粉末； 0037 选用几丁质酶、 纤维素酶与半纤维素酶， 按照几丁质酶、 纤维素酶与半纤维素酶质 量比5:1:1配制复合酶， 再用水配制质量百分比为0.6的复合酶液， 并用0.1mol/L柠檬酸 溶液、 0.2mol/L磷酸氢二钠溶液缓冲溶液调节复合酶液的pH至6.0； 0038 将预处理后的蛹虫草粉末与复合酶解液按照1:6的质量比混合， 在60下酶解 30min； 酶解完。
17、后的蛹虫草-复合酶混合液按照料液质量比1:20补水， 在60下提取1h， 过 滤， 取滤液， 加入质量分数为80的乙醇， 静置24h， 取上层清液， 50下旋转蒸发除去乙醇； 0039 除去乙醇的蛹虫草黄色素提取液添加质量分数为15麦芽糊精后进行喷雾干燥， 喷雾干燥的条件为： 进口温度为120， 热风量为1.30m3/min， 进料流量为0.06cm3/min， 喷头 转速为20000r/min。 经喷雾干燥制得的即为蛹虫草黄色素粉末。 0040 用紫外分光光度法测定， 蛹虫草黄色素含量为96.84， 总黄酮含量为93.12。 稳 定性研究结果表明， 制备的蛹虫草黄色素低温下热稳定性好， 酸性。
18、条件下稳定性好， 较好的 金属稳定性和耐氧性。 0041 实验例 0042 A组： 申请号为201110280492.0的发明专利申请公开的蛹虫草酶解营养液的制备 方法中所用的酶， 将该酶及相应的酶解条件和酶解时间等替换本申请的复合酶解液， 本申 请的其余步骤不变。 0043 B组： 申请号为201410002259.x的发明专利申请中所用到的酶及相应的酶解条件 和酶解时间等替换本申请的复合酶解液， 本申请的其余步骤不变。 0044 C组： 按照实施例1的步骤。 0045 结果如表1所示。 说明书 3/4 页 5 CN 106046845 A 5 0046 表1 0047 组别ABC 酶解时间512h12h30min 酶解温度5080406030 得率65.9670.5692.68 总黄酮45.6258.2190.70 0048 由表1可知， 本发明所使用的特定的复合酶解液对蛹虫草进行酶解， 酶解的时间大 大缩短， 且酶解所需温度也比A组和B组都低， 得率和总黄酮均远高于A、 B两组。 说明书 4/4 页 6 CN 106046845 A 6 。