技术领域
本发明涉及一类新化合物的制备与应用，具体是2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮的制备及其在作为流感病毒神经氨酸酶抑制剂的应用。
背景技术
禽流感病毒可引起禽类的呼吸器官或全身性感染，高致病性禽流感病毒可直接感染禽类，也能直接或间接感染人类。高致病性禽流感病毒是在人群中引发流感的一个潜在危险因素，并会严重地威胁人类健康。20世纪人类曾发生过4次流感大流行：1918年到1919年的“西班牙流感”(H1N1亚型)、1957年到1958年的“亚洲流感”(H2N2亚型)、1968年到1969年的“香港流感”(H3N2亚型)和1977年的“俄罗斯流感”(H1N1亚型)。禽流感病毒含有两个表面蛋白：血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)，根据这两个蛋白抗原性的不同，可将禽流感病毒分为16个HA亚型(H1～H16)和9个NA亚型(N1～N9)。至今发现能直接感染人的禽流感病毒亚型有：H5N1、H7N1、H7N2、H7N3、H7N7、H9N2、H7N9和H10N8亚型。其中，高致病性H5N1亚型于1997年在香港首次发现能直接感染人类，2003年7月之后，H5N1禽流感疫情呈现前所未有的暴发，波及亚洲、北美洲、欧洲和非洲17个国家和地区，造成数百人感染及死亡，直接经济损失高达100亿美元。2003年3月，荷兰发生H7N7型禽流感并波及整个欧洲，人类感染者达83例，不仅造成了人类的伤亡，同时重创了家禽养殖业。2009年3月底，墨西哥暴发人感染H1N1型猪流感疫情并扩散到世界各地，据世界卫生组织于2010年2月26日发布的甲型H1N1流感全球情况报告，至少有213个国家和地区的16226例病人死于这场大流感[曾祥兴，李康生。医学与社会，2010，11，4-6。]。经过基因序列分析，H1N1型病毒包含人流感病毒、北美禽流感病毒和北美、欧、亚猪流感病毒基因片段，为几种不同物种流感病毒的混合毒株，而非单独一种猪流感或禽流感病毒。2013年3月，我国首次发现人感染H7N9禽流感病例，截止2015年1月25日，世界卫生组织公布的H7N9禽流感确诊494人，死亡221人。因此对抗禽流感病毒药物的研发，已成为世界各国政府及卫生防疫部门日益关注和积极着手解决的重大问题之一。
禽流感病毒是一种含有包膜蛋白的病毒，其基因组是包含有8节段的单股负链RNA，可编码多种病毒蛋白：病毒表面蛋白(血凝素HA，神经氨酸酶NA)、基质蛋白(M1，M2)核蛋白(NP)、非结构蛋白(NS1，NS2)、RNA聚合酶P蛋白复合体PA，PB1，PB2)[CN101990534A]。HA是一种介导病毒对靶细胞的结合和病毒基因组进入靶细胞的凝集素。NA可催化裂解宿主细胞表面糖蛋白末端的N-乙酰氨基，从感染细胞释放子代病毒。NA还可通过改变表面糖蛋白HA的碳水化合物部分，增强毒性，促进病毒从受感染的宿主细胞中释放，引起或加重流感症状[CN103755697A]。此外，NA在流感病毒的变异过程中具有相对保守性，使其成为设计、合成抗流感药物非常好的靶标。因此，以NA为作用靶标，通过抑 制NA活性来抑制流感病毒复制和毒性的NA抑制剂是抗禽流感病毒的第一线药物，代表药物有Zanamivir、Oseltamivir和Peramivir及其衍生物，其中Oseltamivir应用广泛。但已有研究发现一些病毒株对Oseltamivir产生了耐药性。
2010年，Mohan等设计并合成了一类含有三氮唑结构的Oseltamivir类似物，体外酶抑制剂活性测试筛选出一个对NAs(Nl)具有较高活性和选择性的抑制剂A[Mohan S.et al，J.Med.Chem.2010，53(20)，7377-7391]。谢元超以L-羟脯氨酸的吡咯烷为基本母核，设计合成出一类含有三氮唑的化合物B显示有较好的NA抑制活性[谢元超。山东大学，2014。]。
噻唑类和噻唑啉酮类化合物具有抗流感病毒活性：中国发明专利[ZL 200810152537.4，2010.12.22授权，ZL 201010223400.0，2012.07.25授权]报道了系列具有抗流感病毒活性的噻唑衍生物和取代噻唑巯乙酰胺类衍生物；中国发明专利[CN 103830233 A，2014.06.04公开，CN 103705511 A，2014.04.09公开]描述了5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-苯乙酰氨基噻唑和N-[5-(1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]脂肪酰胺的抗流感活性；中国发明专利[CN 103755697 A，2014.04.30公开，CN 103739599 A，2014.04.23公开]报道了3-[[2-(2-苄亚氨基)噻唑-5-基]甲基]喹啉-2(1H)-酮和3-[[2-(2-苄亚肼基)噻唑-5-基]甲基]喹啉-2(1H)-酮的制备与抗流感活性；此外，中国专利[CN 103648282 A，2014.03.19公开，CN101990534 A，2008.10.3公开]还报道了噻唑类化合物在预防和治疗病毒感染方面的用途。
发明内容
本发明的目的在于提供化学结构式Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ或Ⅳ所示的2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮或其混合物：
其中，R1选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟代C1～C2烷基、氯代C1～C2烷基、溴代C1～C2烷基或碘代C1～C2烷基；X、Y或Z选自：CH或N；X1、X5选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；X2、X4选自：氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；X3选自：氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；其中R选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或C3～C4支链烷基。
Ⅰ式所示的2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮为(2E,5Z)-2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮；Ⅱ式所示的2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮为(2Z,5Z)-2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮；Ⅲ式所示的2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮为(2E,5E)-2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮；Ⅳ式所示的2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮为(2Z,5E)-2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮。
本发明提供的2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮选自下列合物：
其中，R1选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟代C1～C2烷基、氯代C1～C2烷基、溴代C1～C2烷基或碘代C1～C2烷基；X1、X5选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；X2、X4选自：氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；X3选自：氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；其中R选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或C3～C4支链烷基。
本发明提供的2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮选自下列合物：
其中，R1选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟代C1～C2烷基、氯代C1～C2烷基、溴代C1～C2烷基或碘代C1～C2烷基；X1、X5选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；X2、X4选自：氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；X3选自：氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；其中R选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或C3～C4支链烷基。
本发明提供的2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮选自下列合物：
其中，R1选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟代C1～C2烷基、氯代C1～C2烷基、溴代C1～C2烷基或碘代C1～C2烷基；X1、X5选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；X2、X4选自：氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；X3选自：氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；其中R选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或C3～C4支链烷基。
本发明提供的2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮选自下列合物：
其中，R1选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟代C1～C2烷基、氯代C1～C2烷基、溴代C1～C2烷基或碘代C1～C2烷基；X1、X5选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；X2、X4选自：氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；X3选自：氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；其中R选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或C3～C4支链烷基。
本发明的目的在于提供的2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮选自下列化合物：
其中，R1选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟代C1～C2烷基、氯代C1～C2烷基、溴代C1～C2烷基或碘代C1～C2烷基；X、Y或Z选自：CH或N；n选自：1、2或3；(NH2)n选自：2-NH2、3-NH2、4-NH2、2,4-(NH2)2、2,5-(NH2)2、2,6-(NH2)2、3,4-(NH2)2、3,5-(NH2)2、2,3,4-(NH2)3或2,3,5-(NH2)3。
本发明的目的在于提供的2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮选自下列化合物：
其中，R1选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟代C1～C2烷基、氯代C1～C2烷基、溴代C1～C2烷基或碘代C1～C2烷基；X、Y或Z选自：CH或N；n选自：1、2或3；(NHCOR)n选自：2-NHCOR、3-NHCOR、4-NHCOR、2,4-(NHCOR)2、2,5-(NHCOR)2、2,6-(NHCOR)2、3,4-(NHCOR)2、3,5-(NHCOR)2、2,3,4-(NHCOR)3或2,3,5-(NHCOR)3。
本发明的目的在于提供的结构式Ⅰ所示的2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮选自：2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(2-氟亚苄基)噻唑啉-4-酮、2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-氟亚苄基)噻唑啉-4-酮、2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(2-氯亚苄基)噻唑啉-4-酮、2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-氯亚苄基)噻唑啉-4-酮、2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(4-氯亚苄基)噻唑啉-4-酮、2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(2-溴亚苄基)噻唑啉-4-酮、2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-溴亚苄基)噻唑啉-4-酮、2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(4-溴亚苄基)噻唑啉-4-酮、5-亚苄基-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮、2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(2-甲基亚苄基)噻唑啉-4-酮、2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-甲基亚苄基)噻唑啉-4-酮、2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(4-甲基亚苄基)噻唑啉-4-酮、2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(2-甲氧基亚苄基)噻唑啉-4-酮、2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-甲氧基亚苄基)噻唑啉-4-酮、2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-硝基亚苄基)噻唑啉-4-酮、2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(4-硝基亚苄基)噻唑啉-4-酮、5-(3-氨基亚苄基)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮、5-(4-氨基亚苄基)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮、5-(3-乙酰氨基亚苄基)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮或5-(4-乙酰氨基亚苄基)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮。
本发明的目的在于提供的2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮的制备方法，其特征在于它的制备反应如下：
式中，R1选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟代C1～C2烷基、氯代C1～C2烷基、溴代C1～C2烷基或碘代C1～C2烷基；X、Y或Z选自：CH或N；X1、X5选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基或硝基；X2、X4选自：氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基或硝基；X3选自：氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基或硝基。
本发明的目的在于提供5-(氨基亚苄基)-2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]噻唑啉-4-酮和5-(乙酰氨基亚苄基)-2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]噻唑啉-4-酮的制备方法，其特征在于它们的制备反应如下：
式中，R选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或C3～C4支链烷基；R1选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟代C1～C2烷基、氯代C1～C2烷基、溴代C1～C2烷基或碘代C1～C2烷基；X、Y或Z选自：CH或N；n选自1、2或3；(NO2)n选自：2-NO2、3-NO2、4-NO2、2,4-(NO2)2、2,5-(NO2)2、2,6-(NO2)2、3,4-(NO2)2、3,5-(NO2)2、2,3,4-(NO2)3或2,3,5-(NO2)3；(NH2)n选自：2-NH2、3-NH2、4-NH2、2,4-(NH2)2、2,5-(NH2)2、2,6-(NH2)2、3,4-(NH2)2、3,5-(NH2)2、2,3,4-(NH2)3或2,3,5-(NH2)3；(NHCOR)n选自：2-NHCOR、3-NHCOR、4-NHCOR、2,4-(NHCOR)2、2,5-(NHCOR)2、2,6-(NHCOR)2、3,4-(NHCOR)2、3,5-(NHCOR)2、2,3,4-(NHCOR)3或2,3,5-(NHCOR)3。
本发明的目的在于提供的2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮具有流感病毒神经氨酸酶抑制活性，在制备流感病毒神经氨酸酶抑制剂中的应用。
本发明与现有技术相比具有如下优点：
发明了2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮具有流感病毒神经氨酸酶抑 制活性。
具体实施方式
以下实施例旨在说明本发明而不是对本发明的进一步限定。
(2E,5E)-2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮(Ⅲ)的制备方法如实施例1～24所述。
实施例1
2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮(2)的制备
11.25g(50mmol)4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-胺，100mL二氯甲烷，搅拌溶解，加入6.90g(50mmol)无水碳酸钾，常温搅拌30min，滴加4.0ml(50mmol)氯乙酰氯，常温反应2.5h。反应液倒入冰水，二氯甲烷萃取，饱和碳酸钠水溶液洗涤，合并有机相，无水硫酸钠干燥，脱溶，乙醇重结晶得13.50g白色固体1，收率93％，m.p.130～133℃。
10.25g(34mmol)化合物1，4.95g(34mmol)硫氰酸钾，100ml乙醇溶解，加热回流反应5.0h。冷却，析出固体，抽滤，干燥得9.50g淡黄色固体2，收率86％，m.p.182～185℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.19(s，9H，3×CH3)，3.90(s，2H，CH2)，8.11(s，1H，C2H2N33-H)，8.28(s，1H，C2H2N35-H)，12.01(s，1H，NH)。
实施例2
(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-硝基亚苄基)噻唑啉-4-酮的制备
35ml乙酸溶解0.65g乙酸钠配制pH＝4～5的缓冲溶液，加入2.0mmol中间体2和4.0mmol 3-硝基苯甲醛，加热回流反应10h。冷却，水洗，过滤，乙醇重结晶得黄色固体(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-硝基亚苄基)噻唑啉-4-酮，收率80％，m.p.258～260℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.22，1.29(s，9H，3×CH3)， 7.67～7.74(m，1H，C6H4)，7.85～7.92(m，2H，C6H4，＝CH)，8.13(s，1H，C2H2N33-H)，8.30～8.32(m，2H，C6H4)，8.42，8.55(s，1H，C2H2N35-H)，12.07(s，1H，NH)。
实施例3
(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(4-硝基亚苄基)噻唑啉-4-酮的制备
操作方法同实施例2，化合物2与4-硝基苯甲醛，反应10h，得到黄色固体(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(4-硝基亚苄基)噻唑啉-4-酮，收率82％，m.p.272～273℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.22，1.26(s，9H，3×CH3)，7.70～7.76(m，2H，C6H4)，7.83，7.91(s，1H，＝CH)，8.13(s，1H，C2H2N33-H)，8.30(s，1H，C2H2N35-H)，8.34～8.38(m，2H，C6H4)，12.09(s，1H，NH)。
实施例4
(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(2-氟亚苄基)噻唑啉-4-酮的制备
操作方法同实施例2，化合物2与2-氟基苯甲醛，反应10h，得到黄色固体(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(2-氟亚苄基)噻唑啉-4-酮，收率70％，m.p.254～256℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.19，1.24(s，9H，3×CH3)，7.17～7.22(m，1H，C6H4)，7.29(d，J＝7.9Hz，1H，C6H4)，7.43～7.47(m，1H，C6H4)，7.59～7.65(m，1H，C6H4)，8.08(s，1H，＝CH)，8.14(s，1H，C2H2N33-H)，8.33(s，1H，C2H2N35-H)，12.01(s，1H，NH)。
实施例5
(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-氟亚苄基)噻唑啉-4-酮的制备
操作方法同实施例2，化合物2与3-氟基苯甲醛，反应10h，得到黄色固体(2E,5E)-2-{[4- 叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-氟亚苄基)噻唑啉-4-酮，收率81％，m.p.203～205℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.22，1.27(s，9H，3×CH3)，7.16(t，J＝8.1Hz，1H，C6H4)，7.30～7.39(m，2H，C6H4)，7.45～7.50(m，1H，C6H4)，7.78，7.85(s，1H，＝CH)，8.13(s，1H，C2H2N33-H)，8.31(s，1H，C2H2N35-H)，12.01(s，1H，NH)。
实施例6
(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(2-氯亚苄基)噻唑啉-4-酮的制备
操作方法同实施例2，化合物2与2-氯基苯甲醛，反应10h，得到黄色固体(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(2-氯亚苄基)噻唑啉-4-酮，收率67％，m.p.286～288℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.22(s，9H，3×CH3)，7.38～7.40(m，2H，C6H4)，7.51～7.53(m，1H，C6H4)，7.64(s，1H，C6H4)，8.14(s，1H，C2H2N33-H)，8.21(s，1H，＝CH)，8.32(s，1H，C2H2N35-H)。
实施例7
(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-氯亚苄基)噻唑啉-4-酮的制备
操作方法同实施例2，化合物2与3-氯基苯甲醛，反应10h，得到黄色固体(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-氯亚苄基)噻唑啉-4-酮，收率73％，m.p.240～242℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.22，1.27(s，9H，3×CH3)，7.42～7.46(m，3H，C6H4)，7.53，7.64(s，1H，C6H4)，7.75，7.82(s，1H，＝CH)，8.13(s，1H，C2H2N33-H)，8.30(s，1H，C2H2N35-H)，12.03(s，1H，NH)。
实施例8
(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(4-氯亚苄基)噻唑啉-4-酮的制备
操作方法同实施例2，化合物2与4-氯基苯甲醛，反应10h，得到黄色固体(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(4-氯亚苄基)噻唑啉-4-酮，收率73％，m.p.260～262℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.25(s，9H，3×CH3)，7.47～7.52(m，4H，C6H4)，7.78，7.84(s，1H，＝CH)，8.13(s，1H，C2H2N33-H)，8.30(s，1H，C2H2N35-H)，12.01(s，1H，NH)。
实施例9
(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(2-溴亚苄基)噻唑啉-4-酮的制备
操作方法同实施例2，化合物2与2-溴基苯甲醛，反应10h，得到黄色固体(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(2-溴亚苄基)噻唑啉-4-酮，收率81％，m.p.285～287℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.19，1.21(s，9H，3×CH3)，7.28～7.32(m，1H，C6H4)，7.42～7.47(m，1H，C6H4)，7.65～7.67(m，1H，C6H4)，7.72(dd，J＝8.0，1.0Hz，1H，C6H4)，8.12(s，1H，＝CH)，8.13(s，1H，C2H2N33-H)，8.31(s，1H，C2H2N35-H)。
实施例10
(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-溴亚苄基)噻唑啉-4-酮的制备
操作方法同实施例2，化合物2与3-溴基苯甲醛，反应10h，得到黄色固体(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-溴亚苄基)噻唑啉-4-酮，收率82％，m.p.251～253℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.22，1.27(s，9H，3×CH3)，7.37(t，J＝7.7Hz，1H，C6H4)，7.50(d，J＝7.7Hz，1H，C6H4)，7.58(d，J＝7.9Hz，1H，C6H4)，7.69～7.74(s，1H，C6H4)，7.81(s，1H，＝CH)，8.13(s，1H，C2H2N33-H)，8.30(s，1H，C2H2N35-H)，12.03(s，1H，NH)。
实施例11
(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(4-溴亚苄基)噻唑啉-4-酮的制备
操作方法同实施例2，化合物2与4-溴基苯甲醛，反应10h，得到黄色固体(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(4-溴亚苄基)噻唑啉-4-酮，收率81％，m.p.268～270℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.22,1.25(s，9H，3×CH3)，7.44(dd，J＝17.8，8.0Hz，2H，C6H4)，7.67(dd，J＝21.4，8.4Hz，2H，C6H4)，7.75，7.82(m，1H，＝CH)，8.13(s，1H，C2H2N33-H)，8.30(s，1H，C2H2N35-H)，12.05(s，1H，NH)。
实施例12
(2E,5E)-5-亚苄基-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮的制备
操作方法同实施例2，化合物2与苯甲醛，反应10h，得到黄色固体(2E,5E)-5-亚苄基-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮，收率75％，m.p.225～227℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.24(s，9H，3×CH3)，7.44～7.53(m，3H，C6H4)，7.59(d，J＝7.2Hz，2H，C6H4)，7.87(s，1H，＝CH)，8.14(s，1H，C2H2N33-H)，8.32(s，1H，C2H2N35-H)。
实施例13
(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(2-甲基亚苄基)噻唑啉-4-酮的制备
操作方法同实施例2，化合物2与2-甲基苯甲醛，反应10h，得到黄色固体(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(2-甲基亚苄基)噻唑啉-4-酮，收率60％，m.p.260～262℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.22(s，9H，3×CH3)，2.48(s，3H，CH3)，7.29～7.37(m，3H，C6H4)，7.52～7.60(m，1H，C6H4)，8.07(s，1H，＝CH)，8.12(s，1H，C2H2N33-H)，8.30(s，1H，C2H2N35-H)。
实施例14
(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-甲基亚苄基)噻唑啉-4-酮的制备
操作方法同实施例2，化合物2与3-甲基苯甲醛，反应10h，得到黄色固体(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-甲基亚苄基)噻唑啉-4-酮，收率66％，m.p.241～243℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.26(s，9H，3×CH3)，2.42(s，3H，CH3)，7.28～7.39(m，3H，C6H4)，7.44～7.70(m，1H，C6H4)，7.82(s，1H，＝CH)，8.13(s，1H，C2H2N33-H)，8.31(s，1H，C2H2N35-H)。
实施例15
(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(4-甲基亚苄基)噻唑啉-4-酮的制备
操作方法同实施例2，化合物2与4-甲基苯甲醛，反应10h，得到黄色固体(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(4-甲基亚苄基)噻唑啉-4-酮，收率62％，m.p.245～247℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.25(s，9H，3×CH3)，2.43(s，3H，CH3)，7.31(d，J＝7.9Hz，2H，C6H4)，7.49(d，J＝7.9Hz，2H，C6H4)，7.84(s，1H，＝CH)，8.14(s，1H，C2H2N33-H)，8.32(s，1H，C2H2N35-H)。
实施例16
(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(2-甲氧基亚苄基)噻唑啉-4-酮的制备
操作方法同实施例2，化合物2与2-甲氧基苯甲醛，反应10h，得到黄色固体(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(2-甲氧基亚苄基)噻唑啉-4-酮，收率77％，m.p.251～253℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.23(s，9H，3×CH3)，3.93(s，3H，OCH3)，6.97(d，J＝8.3Hz，1H，C6H4)，7.07(t，J＝7.5Hz，1H，C6H4)，7.42～7.46(m，1H，C6H4)，7.55(s，1H，C6H4)，8.13(s，1H，＝CH)，8.24(s，1H，C2H2N33-H)，8.31(s，1H，C2H2N35-H)。
实施例17
(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-甲氧基亚苄基)噻 唑啉-4-酮的制备
操作方法同实施例2，化合物2与3-甲氧基苯甲醛，反应10h，得到黄色固体(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-甲氧基亚苄基)噻唑啉-4-酮，收率74％，m.p.220～222℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.24(s，9H，3×CH3)，3.87(s，3H，OCH3)，7.01(dd，J＝8.2，2.1Hz，1H，C6H4)，7.07～7.20(m，2H，C6H4)，7.41(t，J＝7.8Hz，1H，C6H4)，7.83(s，1H，＝CH)，8.13(s，1H，C2H2N33-H)，8.30(s，1H，C2H2N35-H)，11.99(s，1H，NH)。
实施例18
(2E,5E)-5-(3-氨基亚苄基)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮的制备
10ml二氯甲烷和10ml乙酸溶解1.0mmol原料(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}-5-(3-硝基亚苄基)噻唑啉-4-酮，加入适量铁粉和1ml水，常温搅拌反应5h。过滤，水洗，二氯甲烷萃取，饱和碳酸钠水溶液洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，脱溶得黄色固体(2E,5E)-5-(3-氨基亚苄基)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮，收率81％，m.p.224～226℃。1H NMR(DMSO，400MHz)δ:1.18(s，9H，3×CH3)，5.49(s，2H，NH2)，6.69(d，J＝7.7Hz，1H，C6H4)，6.81(d，J＝6.4Hz，2H，C6H4)，7.18(t，J＝8.0Hz，1H，C6H4)，7.57(s，1H，＝CH)，8.29(s，1H，C2H2N33-H)，9.03(s，1H，C2H2N35-H)，12.66(s，1H，NH)。
实施例19
(2E,5E)-5-(4-氨基亚苄基)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮的制备
操作方法同实施例18，(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨 基}-5-(4-硝基亚苄基)噻唑啉-4-酮为原料，反应5h，得到黄色固体(2E,5E)-5-(4-氨基亚苄基)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮，收率85％，m.p.210～212℃。1H NMR(DMSO，400MHz)δ:1.20(s，9H，3×CH3)，6.16(s，2H，NH2)，6.67(d，J＝7.9Hz，2H，C6H4)，7.39(d，J＝7.6Hz，2H，C6H4)，7.58(s，1H，＝CH)，8.29(s，1H，C2H2N33-H)，9.03(s，1H，C2H2N35-H)，12.59(s，1H，NH)。
实施例20
(2E,5E)-5-(3-乙酰氨基亚苄基)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮的制备
10ml乙酸溶解0.5mmol原料(2E,5E)-5-(3-氨基亚苄基)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮，滴加0.5mmol乙酰氯，常温搅拌反应1h。水洗，乙酸乙酯萃取，饱和碳酸钠水溶液洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，脱溶得黄色固体(2E,5E)-5-(3-乙酰氨基亚苄基)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮，收率64％，m.p.302～304℃。1H NMR(DMSO，400MHz)δ:1.16(s，9H，3×CH3)，2.05(s，3H，COCH3)，7.33(d，J＝6.1Hz，1H，C6H4)，7.44(d，J＝6.5Hz，2H，C6H4)，7.70(s，1H，＝CH)，8.20(s，1H，C6H4)，8.28(s，1H，C2H2N33-H)，9.02(s，1H，C2H2N35-H)，10.12(s，1H，NHAc)，12.82(s，1H，NH)。
实施例21
(2E,5E)-5-(4-乙酰氨基亚苄基)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮的制备
操作方法同实施例20，(2E,5E)-5-(4-氨基亚苄基)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮为原料，反应1h，得到黄色固体(2E,5E)-5-(4-乙酰氨基亚苄基)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]亚氨基}噻唑啉-4-酮，收率68％，m.p.245～247℃。1H NMR(DMSO，400MHz)δ:1.19(s，9H，3×CH3)，2.08(s，3H，COCH3)，7.62(d，J＝8.4Hz，2H，C6H4)，7.69(s，1H，＝CH)，7.75(d，J＝7.7Hz，2H，C6H4)，8.29(s，1H，C2H2N33-H)，9.02(s，1H，C2H2N35-H)，10.28(s，1H，NHAc)，12.79(s，1H，NH)。
实施例22
2-{[4-叔丁基-5-(1H-咪唑-1-基)噻唑-2-基]氨基}噻唑啉-4-酮的制备
4.4g(20mmol)4-叔丁基-5-(1H-咪唑-1-基)噻唑-2-胺，50mL二氯甲烷，搅拌溶解，加入2.75g(50mmol)无水碳酸钾，常温搅拌30min，滴加1.60ml(50mmol)氯乙酰氯，常温反应2.5h。反应液倒入冰水，二氯甲烷萃取，饱和碳酸钠水溶液洗涤，合并有机相，无水硫酸钠干燥，脱溶，乙醇重结晶得4.4g白色固体3，收率82％，m.p.175～177℃。
0.9g(3mmol)化合物7，0.29g(3mmol)硫氰酸钾，20ml乙醇溶解，加热回流反应5.0h。冷却，析出固体，抽滤，干燥得0.8g粉色固体4，收率83％，m.p.241～243℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.20(s，9H，3×CH3)，3.90(s，2H，CH2)，7.09(s，1H，C2H3N22-H)，7.19(s，1H，C2H3N24-H)，7.70(s，1H，C2H3N25-H)，12.08(s，1H，NH)。
实施例23
(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-咪唑-1-基)噻唑-2-基]氨基}-5-(3-硝基亚苄基)噻唑啉-4-酮的制备
35ml乙酸溶解0.65g乙酸钠配制pH＝4～5的缓冲溶液，加入2.0mmol中间体4和4.0mmol 3-硝基苯甲醛，加热回流反应10h。冷却，水洗，过滤，乙醇重结晶得黄色固体(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-咪唑-1-基)噻唑-2-基]氨基}-5-(3-硝基亚苄基)噻唑啉-4-酮，收率75％，m.p.273～275℃。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ:1.23，1.30(s，9H，3×CH3)，7.11(s，1H，C2H3N22-H)，7.19(s，1H，C2H3N24-H)，7.68～7.72(m，2H，＝CH，C2H3N25-H)，7.88(m，2H，C6H4)，8.31(d，J＝8.5Hz，1H，C6H4)，8.56(s，1H，C6H4)，12.13(s，1H，NH)。
实施例24
(2E,5E)-5-(3-氨基亚苄基)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-咪唑-1-基)噻唑-2-基]氨基}噻唑啉-4-酮的制备
10ml二氯甲烷和10ml乙酸溶解1.0mmol原料(2E,5E)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-咪唑-1-基) 噻唑-2-基]氨基}-5-(3-硝基亚苄基)噻唑啉-4-酮，加入适量铁粉和1ml水，常温搅拌反应5h。过滤，水洗，二氯甲烷萃取，饱和碳酸钠水溶液洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，脱溶得还原产物：黄色固体黄色固体(2E,5E)-5-(3-氨基亚苄基)-2-{[4-叔丁基-5-(1H-咪唑-1-基)噻唑-2-基]氨基}噻唑啉-4-酮，收率82％，m.p.223～225℃。1H NMR(DMSO，400MHz)δ:1.21(s，9H，3×CH3)，5.43(s，2H，NH2)，6.68(d，J＝7.7Hz，1H，C6H4)，6.81(s，2H，C2H3N22-H，C6H4)，7.15～7.19(m，2H，C2H3N24-H，C6H4)，7.44～7.56(m，2H，C2H3N25-H，C6H4)，8.00(s，1H，＝CH)，11.98(s，1H，NH)。
按照实施例1～24所述的方法制备(2E,5Z)-2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮(Ⅰ)、(2Z,5Z)-2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮(Ⅱ)和(2Z,5E)-2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮(Ⅳ)。
其中，R1选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟代C1～C2烷基、氯代C1～C2烷基、溴代C1～C2烷基或碘代C1～C2烷基；X、Y或Z选自：CH或N；X1、X5选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；X2、X4选自：氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；X3选自：氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；其中R选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或C3～C4支链烷基。
实施例25
2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮抗流感病毒神经氨酸酶活性
1.实验原理
化合物MUNANA是神经氨酸酶的特异性底物，在神经氨酸酶作用下产生的代谢产物在360nm照射激发下，可产生450nm荧光，荧光强度的变化可以灵敏地反映神经氨酸酶活性。酶均来自A/PR/8/34(H1N1)病毒毒株。
2.实验方法
在酶反应体系中，一定浓度样品与流感病毒神经氨酸酶NA悬浮于反应缓冲液中(pH6.5)，加入荧光底物MUNANA启动反应体系，37℃孵育40分钟后，加反应终止液终止反应。在激发波长360nm和发射波长为450nm的参数条件下，测定荧光强度值。根据荧光强度的减少量可以计算化合物对NA活性的抑制率。
3.检测样品：2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ或Ⅳ)
其中，R1选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟代C1～C2烷基、氯代C1～C2烷基、溴代C1～C2烷基或碘代C1～C2烷基；X、Y或Z选自：CH或N；X1、X5选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基、氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；X2、X4选自：氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；X3选自：氟、氯、溴、碘、羟基、二甲氨基、甲氧基、乙氧基、硝基、氨基或NHCOR；其中R选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或C3～C4支链烷基。
4.活性结果
优选化合物在反应系统中检测浓度40.0μg/mL时对神经氨酸酶的抑制率及其IC50值列入下表1：
表12-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮对神经氨酸酶的抑制活性
2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基噻唑啉-4-酮具有良好的抗流感病毒神经氨酸酶活性，可用于制备流感病毒神经氨酸酶抑制剂。