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一种土壤中病原菌多重PCR快速检测方法,其特征在于,采用多重PCR一次性同时扩增致病性大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和福氏志贺菌的特异性基因:phoA、ttrBCA、vicK、ecfX、ipaH和virA,再通过琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物。本发明克服了常规病原菌检测技术操作繁琐,费时耗力等不足,充分发挥多重PCR技术在土壤病原菌检测中的应用,尽量增加病原菌的种类和引物的对数。