利用声表面波实现细胞粉碎的方法.pdf

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摘要
申请专利号:

CN200910053742.X

申请日:

2009.06.25

公开号:

CN101586076A

公开日:

2009.11.25

当前法律状态:

撤回

有效性:

无权

法律详情:

发明专利申请公布后的视为撤回IPC(主分类):C12M 1/42公开日:20091125|||实质审查的生效|||公开

IPC分类号:

C12M1/42; C12M1/33

主分类号:

C12M1/42

申请人:

上海交通大学

发明人:

李以贵; 张 冠; 高 阳; 张俊峰; 孙 健

地址:

200240上海市闵行区东川路800号

优先权:

专利代理机构:

上海交达专利事务所

代理人:

王锡麟;王桂忠

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内容摘要

一种基因检测技术领域的利用声表面波实现细胞粉碎的方法,包括:将细胞和蒸馏水按所需比例配制成细胞溶液;将细胞溶液置在具有叉指换能器的声表面波器件的压电基底上,然后,对声表面波器件施加交变电压后,得到粉碎后的细胞。本发明的方法可借助声表面波对细胞溶液中的细胞进行破碎,从而使细胞内的物质溶于细胞溶液中,进而为接下来的提取细胞内的物质作好准备。

权利要求书

1、  一种利用声表面波实现细胞粉碎的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一:将细胞和蒸馏水按所需比例配制成细胞溶液;
步骤二:将细胞溶液置在具有叉指换能器的声表面波器件的压电基底上,然后,对声表面波器件施加交变电压源后,得到粉碎后的细胞。

2、
  根据权利要求1所述的利用声表面波实现细胞粉碎的方法,其特征是,所述的细胞包括动物细胞、植物细胞、细菌、牙孢或组织细胞。

3、
  根据权利要求1或2所述的利用声表面波实现细胞粉碎的方法,其特征是,所述的比例是指:1∶8~1∶10。

4、
  根据权利要求1所述的利用声表面波实现细胞粉碎的方法,其特征是,所述的声表面波器件包括:交流电压源、压电基底和叉指换能器,其中:叉指换能器置于压电基底的上方,交流电压源与叉指换能器相连接。

5、
  根据权利要求1所述的利用声表面波实现细胞粉碎的方法,其特征是,所述的交变电压源输出频率为8Mhz~10Mhz,输出功率5W~30W,施加时间为30分钟到1小时。

说明书

利用声表面波实现细胞粉碎的方法
技术领域
本发明涉及的是一种基因检测技术领域的方法,具体是一种利用声表面波实现细胞粉碎的方法。
背景技术
近年来,DNA检测技术、血液分析技术等生物技术得到了广泛应用。而很多基因工程产物都是细胞内物质,只有将细胞破壁,产物得以释放后,才能进一步提取所需物资。因此细胞破碎是提取细胞内产物的关键步骤。细胞破碎方法的合适与否,直接影响到所提取产品的产量、质量以及生产成本。目前,较为常用的细胞破碎方法有:高压匀浆法、高速珠磨法、超声破碎法、酶溶法、化学渗透法等。
经对现有技术的文献检索发现,修志龙、姜炜、苏志国在《化工进展》1994年1月第一期15~21页上发表了“细胞破碎技术的研究进展和发展方向”一文,文中对现有的各种细胞破碎技术进行了一个简要的概括,并指出了各种细胞破碎技术的优缺点。例如:高压匀浆法不适合对较易造成堵塞的团状或丝状真菌进行处理;高速珠磨法操作复杂,而且效率较低;超声破碎法产生的化学自由基团会使某些敏感性活性物质变形失活,散热困难等;酶溶法易造成产物抑制作用,而且溶酶价格高,同时还由于不同的细胞需要选择不同的溶酶,通用性差;化学渗透法不仅效率低、通用性差,而且由于化学试剂毒性较强,对产物同样具有毒害作用。同时,现有的细胞破碎方法还普遍具有体积大、携带不方便、高功率等缺点。
发明内容
本发明针对现有技术存在的上述不足,提供一种利用声表面波实现细胞粉碎的方法,通过对叉指换能器施加一定的交变电压后,叉指换能器产尘了沿压电基底传播的声表面波,当声表面波传播到细胞溶液后,声表面波会在细胞溶液中以漏声表面波的形式传播到细胞溶液中,细胞溶液产尘剧烈的震动,致使细胞破碎,从而获得所需的细胞内物质。利用声表面波破碎细胞的方法具有体积小、携带方便、功率消耗低、通用性高、破碎率高等优点。
本发明是通过以下技术方案实现的,本发明包括以下步骤:
步骤一:将细胞和蒸馏水按所需比例配制成细胞溶液;
所述的细胞包括动物细胞、植物细胞、细菌、牙孢或组织细胞。
所述的比例是指:1∶8~1∶10
步骤二:将细胞溶液置在具有叉指换能器的声表面波器件的压电基底上,然后,对声表面波器件施加交变电压源后,得到粉碎后的细胞。
所述的声表面波器件包括:交流电压源、压电基底和叉指换能器,其中:叉指换能器置于压电基底的上方,交流电压源与叉指换能器相连接。
所述的交变电压源的输出频率为8Mhz~10Mhz,输出功率为5W~30W,施加时间为30分钟到1小时。所述的叉指换能器采用10~20对的叉指对数,其材料为铜或铝。
本发明的方法可借助声表面波对细胞溶液中的细胞进行破碎,从而使细胞内的物质溶于细胞溶液中,进而为接下来的提取细胞内的物质作好准备。
附图说明
图1为本发明声表面波器件示意图。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明,本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施,给出了详细的实施方式和具体的操作过程,但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
如图1所示,以下实施例中所涉及的声表面波器件包括:交流电压源1、压电基底2、细胞溶液3、叉指换能器4和声表面波5,其中:叉指换能器4和细胞溶液3位于压电基底2上,交流电压源1与叉指换能器4相连接,声表面波5在压电基底2浅表层内传播。制备过程中,将配置好的细胞溶液3置于压电基底2上。然后打开交流电压源1对叉指换能器4施加交流电压,产生的声表面波沿图中X方向传播到细胞溶液3上。在声表面波5对细胞溶液3作用一段时间后,停止交流电压源1工作,完成细胞破碎。
实施例1
步骤一,配置细胞溶液:
酵母细胞溶液的配置:取20g的酵母细胞和160g的蒸馏水在烧杯中搅拌至均匀。
步骤二,取一滴酵母细胞溶液置于压电基底上。然后施加80Mhz,10W的交流电压功率对叉指换能器作用1小时。停止交流电压源工作,酵母细胞破碎完成。
粉碎结束后,通过显微观察得到:酵母细胞的破碎率达到了82%左右。
实施例2
步骤一,配置细胞溶液:
黄精细胞溶液的配置:取20g的黄精细胞和200g的蒸馏水在烧杯中搅拌至均匀。
步骤二,取一滴黄精细胞溶液置于压电基底上。然后施加100Mhz,30W的交流电压功率对叉指换能器作用30分钟后,停止2分钟。接着,继续以相同的频率和功率对叉指换能器作用30分钟。停止交流电压电压工作,细黄精细胞破碎完成。
粉碎结束后,通过显微观察得到:黄精细胞的破碎率达到了85%左右。

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一种基因检测技术领域的利用声表面波实现细胞粉碎的方法,包括:将细胞和蒸馏水按所需比例配制成细胞溶液;将细胞溶液置在具有叉指换能器的声表面波器件的压电基底上,然后,对声表面波器件施加交变电压后,得到粉碎后的细胞。本发明的方法可借助声表面波对细胞溶液中的细胞进行破碎,从而使细胞内的物质溶于细胞溶液中,进而为接下来的提取细胞内的物质作好准备。 。

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