本发明是从1982年12月28日公开的“鲎试剂质量和中试工艺研究鉴定书”发展而来的。 增加完整细胞的收获量和将细胞彻底破碎是制备鲎试剂的关键，公知的鲎试剂生产工艺，采用N-乙基马来酰胺（N-ethy maleimide，简称NEM）或其它黄嘌呤类药物作为抗凝剂，使在采血、分离血细胞、洗涤血细胞等过程中。鲎血细胞不因崩解而凝集。鲎血细胞的胞膜含有巯基。NEM，茶碱、咖啡因等黄嘌呤类的药物能和巯基结合，使胞膜得到巩固，因此在采血和分离细胞的过程中细胞不会崩解凝集，但这类抗凝剂与鲎血细胞接触时间过长，就会损害血细胞，影响试剂灵敏度。并将因与巯基结合太过牢固，细胞不易破裂，凝聚缩小成片状硬块，即使加进崩解液，细胞也不会完全崩解，从而使有效成分的提取量大为减少。因此要严格控制这类抗凝剂的用量并在分离血浆后立即用洗涤剂洗弃。洗弃抗凝剂需要重复2～3次以上，这样就增加了细胞破碎和污染的机会，所以工效低、得率少、成本高。
本发明的任务是研究一种得率高，操作简便，可大量收集、洗涤鲎血细胞的生产工艺及相应的抗凝方法。
权利要求1的特征部分解决了此任务，以0.05M三羟甲基氨基甲烷盐酸为缓冲剂，配制PH7.2，浓度为3.3%的氯化钠溶液，把配好的3.3%氯化钠溶液一份盛入无菌容量瓶，再采取新鲜鲎血2份以上与一份3.3%氯化钠溶液混合立即以1000转/分的速度离心沉淀八分钟，抽弃蓝色上清液。留下白色沉淀物（即鲎血细胞），加入2倍量以上的3.3%氯化钠溶液，轻轻摆动洗涤细胞，同时把原分开在各自容器中的血细胞与氯化钠溶液的混合液多份归并在一个容器中，再以1600转/分的速度离心沉淀八分钟，抽弃上清液。得到浓集的鲎血细胞。
本工艺中采用渗透压略高于鲎血液地氯化钠溶液，利用渗透压差，使鲎血细胞内液轻度外渗，细胞轻度皱缩，达到在短时间内细胞不会崩解破碎，与公知的抗凝技术相比，因为不采用含NEM，茶碱等黄嘌呤类药物的抗凝剂，避免了因NEM，茶碱等黄嘌呤类药物与胞膜结合而引起的细胞损害而影响鲎试剂灵敏度及需立即多次洗涤去除抗凝剂的问题。因此分离血浆后也只需洗涤一次，加上采用归并离心弃除洗涤剂的办法，不必逐瓶处理，减少了血细胞因多次洗涤而破碎和受污染的机会。又提高了细胞得率，使工效提高四倍以上，成本下降50%，试剂质量好而稳定。
生产操作流程：
1、试剂配制（1）配制3.3%氯化钠溶液，并用0.05M三羟甲基氨基甲烷盐酸调至PH7.2作为抗凝剂和洗涤剂。（2）无热源蒸馏水用0.02M三羟甲基氨基甲烷盐酸调至PH7.2作为崩解液。（3）准备0.4M氯化钙溶液（A）、1M氯化镁溶液（B）、3.42M氯化钠溶液（C）作为增感剂。
2、所有与鲎血接触的玻璃器皿均用清洁液浸泡、蒸馏水洗净，于250℃干烤30分钟。
3、采血，用自来水将鲎体表的泥沙洗净，用1%碘酊、75%酒精消毒头胸部与腹部连接的关节部位，用适宜的注射针头刺入鲎心门，使蔚蓝色的血液流入盛有50毫升抗凝剂的250毫升接收瓶，满刻度时，另换接收瓶。
4、鲎血细胞的分离与洗涤：把盛满鲎血液与抗凝剂的混合液，立即以1000转/分的速度离心沉淀八分钟。抽弃蓝色上清液，留下白色沉淀物（即鲎血细胞），加入5～6倍量的洗涤剂，轻轻摆动洗涤细胞，同时把六瓶归并成一瓶，再以1600转/分的速度离心沉淀八分钟，抽弃上清液，得到浓集的鲎血细胞。
5、崩解物的提取：将所得的鲎血细胞以1∶6的体积比例加入崩解液。置0-4℃冰箱48小时（振摇数次）取出，用3000转/分的速度离心20分钟，分取清液即为鲎血细胞溶解物，剩下的细胞残渣凝块可反复冻溶，再次抽取部分溶解物。
6、弃物抑制物，添加增感剂：取鲎血细胞崩解液加入1至2倍量氯仿振摇，离心弃去氯仿，再加溶解物体积的5%的增感剂（A、B、C共5%），测活性，分装，于-40℃冻干，30℃以下溶封即得。
7、包装
工艺流程见附图。