适用于治疗响应于调节血清素5HT6受体的疾病的苯磺酰基苯胺化合物.pdf

适用于治疗响应于调节血清素 5-HT6 受体的疾病的苯磺酰 基苯胺化合物
    发明背景
     本发明涉及新的苯磺酰基苯胺化合物、 含有它们的药物组合物及其用于治疗的用 途。所述化合物具有有价值的治疗性质， 并且特别适用于治疗响应于调节血清素 5-HT6 受 体的疾病。
     血清素 (5- 羟基色胺， 5-HT)， 一种单胺神经递质和局部激素， 由色氨酸羟基化和 脱羧生成。最大浓度发现于胃肠道的肠嗜铬细胞， 其余主要存在于血小板和中枢神经系统 (CNS)。5-HT 涉及大量生理和病理生理途径。在外周， 它收缩许多平滑肌， 并诱导内皮依赖 性血管舒张。在 CNS 中， 相信它涉及多种功能， 包括控制食欲、 情绪、 焦虑、 幻觉、 睡眠、 呕吐 和疼痛感觉。
     分泌 5-HT 的神经元称为血清素能。 5-HT 的功能在与特异性 ( 血清素能 ) 申经元相 互作用时发挥。到现在为止， 已鉴别七个类型的 5-HT 受体 ： 5-HT1( 具有亚型 5-HT1A、 5-HT1B、 5-HT1D、 5-HT1E 和 5-HT1F)、 5-HT2( 具有亚型 5-HT2A、 5-HT2B 和 5-HT2C)、 5-HT3、 5-HT4、 5-HT5( 具 有亚型 5-HT5A 和 5-HT5B)、 5-HT6 和 5-HT7。这些受体的大多数偶联到影响腺苷酸环化酶或磷 脂酶 Cγ 活性的 G- 蛋白。
     人 5-HT6 受体明确偶联到腺苷酸环化酶。它们遍布脑的边缘、 纹状体和皮层区域 分布， 并且显示与抗精神病药的高亲合性。
     预料由适合的物质调节 5-HT6 受体改善某些疾病， 包括认知功能障碍， 如记忆、 认 知和学习缺陷， 特别与阿尔茨海默病、 年龄相关的认知衰退和轻微认知障碍相关 ； 注意力 缺陷疾病 / 过动综合征 ； 人格障碍， 如精神分裂症， 特别是与精神分裂症相关的认知缺陷 ； 情感障碍， 如抑郁、 焦虑和强迫症 ； 动作或运动障碍， 如帕金森病和癫痫病 ； 偏头痛 ； 睡眠障 碍 ( 包括昼夜节律紊乱 ) ； 摄食障碍， 如厌食和贪食 ； 某些胃肠紊乱， 如过敏性肠综合征 ； 与 神经变性相关的疾病， 如中风 ； 脊柱或头创伤和头损伤， 如脑积水 ； 成瘾疾病和肥胖症 ( 参 见， 例如 A.Meneses， Drug News Perspect 14(7)(2001)396-400 页和其中引用的文献 ； J.Pharmacol.Sci.Vol.101(Suppl.1)， 2006， 124 页 )。 在临床前和临床研究中发现， 5HT6- 受 体的调节剂， 如 PRX-07034(Epix Pharmaceuticals)， 在认知功能障碍 ( 特别与阿尔茨海默 病或精神分裂症相关 ) 的治疗或者在肥胖症的治疗中特别有用 ( 参见， 例如 http://www. epixpharma.com/products/prx-07034.asp)。
     WO 98/027081、 WO 99/02502、 WO 00/12623、 WO 00/12073、 US2003/0069233、 WO 02/08179、 WO 02/92585 和 WO 2006/010629 公开具有 5HT6 受体拮抗剂活性的某些苯磺酰基 苯胺化合物， 并提出这些将化合物用于治疗对用 5HT6 受体拮抗剂治疗敏感的医学疾病， 如 某些 CNS 疾病、 药物滥用、 ADHD、 肥胖症和 II 型糖尿病。WO 2004/080986 和 WO 03/014097 描述某些二芳基砜化合物， 提出将这些化合物用于治疗对用 5HT6 受体拮抗剂治疗敏感的医 学疾病， 如某些 CNS 疾病、 药物滥用、 ADHD、 肥胖症和 II 型糖尿病。WO 2008/087123 提出用 于预防复发为成瘾的具有 5HT6 受体拮抗剂活性的化合物。
     然而， 仍需要提供对 5-HT6 受体具有高亲合性并且对此受体显示高选择性的化合
     物。特别地， 该化合物应对以下受体具有低亲合性 ： 肾上腺素能受体， 如 α1- 肾上腺素能 受体 ； 组胺受体， 如 H1- 受体 ； 和多巴胺能受体， 如 D2- 受体， 以避免或减小与调节这些受体 相关的显著副作用， 如体位性低血压、 反射性心动过速、 哌唑嗪、 特拉唑嗪、 多沙唑嗪和拉贝 洛尔的抗高血压作用或与 α1- 肾上腺素能受体阻断有关的眩晕的强化、 体重增加、 镇静、 瞌 睡或与 H1- 受体阻断有关的中枢抑制药的强化、 或锥体束外运动障碍 ( 如张力障碍、 帕金森 病、 静坐不能、 迟发性运动障碍或兔唇综合征 ) 或内分泌作用 ( 如催乳激素升高 )( 乳溢、 男 子女性型乳房、 月经变化、 男性性功能障碍 )， 其与 D2- 受体阻断有关。
     本发明的一个目的是提供对 5-HT6 受体具有高亲合性的化合物。本发明的另一个 目的是提供选择性结合到 5-HT6 受体的化合物。
     所述化合物也应具有良好的药理学情况 (profile)， 例如良好的生物利用率和 / 或良好的代谢稳定性。
     发明概述
     现已发现， 本文限定的式 (I) 和 (I′ ) 的苯磺酰基苯胺化合物及其生理学上可耐 受的酸加成盐和 N- 氧化物以令人惊讶和意外的程度显示选择性结合到 5-HT6 受体。因此， 本发明涉及式 (I) 和 (I′ ) 的化合物、 其生理学上可耐受的酸加成盐、 式 (I) 或 (I′ ) 的 N- 氧化物和所述 N- 氧化物的生理学上可耐受的酸加成盐 ：
     其中 n为1或2； R1 为氢或甲基 ； R2 为氢或甲基 ； R3 为 C1-C3 烷基 ； R4 为氢、 C1-C4 烷基、 环丙基、 C3-C4 环烷基甲基或氟化 C1-C4 烷基 ； 5 R 为氢、 氟、 氯、 C1-C4 烷基、 氟化 C1-C4 烷基、 C1-C4 烷氧基或氟化 C1-C4 烷氧基 ； 并且 6 R 为氢、 氟或氯 ； 2 其中 R 位置邻近基团 R1。关于这一点， 术语 “位置邻近基团 R1” 是指 R2 连接到邻近 R1 连接的氮原子的碳原子。 本发明还涉及一种药物组合物， 所述药物组合物包含至少一种式 (I) 或 (I′ ) 的 苯磺酰基苯胺化合物和 / 或至少一种式 (I) 或 (I′ ) 的生理学上可耐受的酸加成盐和 / 或 至少一种式 (I) 或 (I′ ) 的 N- 氧化物， 适当时连同生理学上可接受的载体和 / 或辅助物 质。
     本发明进一步涉及式 (I) 或 (I′ ) 的苯磺酰基苯胺化合物和 / 或其生理学上可耐 受的酸加成盐和 / 或至少一种 (I) 或 (I′ ) 的 N- 氧化物或其盐， 任选连同至少一种生理学 上可接受的载体或辅助物质， 用于制备药物组合物的用途。
     所述化合物为选择性 5-HT6 受体配体。 因此， 所述化合物特别适用于治疗中枢神经 系统疾病、 成瘾疾病或肥胖症， 因为这些紊乱 (disorder) 和疾病可能响应于通过 5-HT6 受 体配体施加影响。 因此， 本发明还提供治疗哺乳动物的疾病的方法， 所述方法包含给予需要 的受试者有效量的至少一种式 (I) 或 (I′ ) 的化合物和 / 或至少一种式 (I) 或 (I′ ) 的 生理学上可耐受的酸加成盐和 / 或至少一种 (I) 或 (I′ ) 的 N- 氧化物。
     发明详述
     对用式 (I) 和 (I′ ) 的苯磺酰基苯胺化合物治疗敏感的疾病包括， 例如中枢神经 系统的紊乱和疾病， 特别是认知功能障碍， 如记忆、 认知和学习缺陷， 特别与阿尔茨海默病、 年龄相关的认知衰退和轻微认知障碍相关 ； 注意力缺陷疾病 / 过动综合征 (ADHD) ； 人格障 碍， 如精神分裂症， 特别是与精神分裂症相关的认知缺陷 ； 情感障碍， 如抑郁、 焦虑和强迫 症； 动作或运动障碍， 如帕金森病和癫痫病 ； 偏头痛 ； 睡眠障碍 ( 包括昼夜节律紊乱 ) ； 摄食 障碍， 如厌食和贪食 ； 某些胃肠紊乱， 如过敏性肠综合征 ； 与神经变性相关的疾病， 如中风 ； 脊柱或头创伤和头损伤， 包括脑积水 ； 药物成瘾和肥胖症。
     根据本发明， 至少一种通式 (I) 或 (I′ ) 的苯磺酰基苯胺化合物、 (I) 或 (I′ ) 的 N- 氧化物或其盐用于治疗上述疾病、 紊乱或医学适应症。如果所给组成的式 (I) 或 (I′ ) 的化合物可以不同空间排列存在， 例如， 如果它们具有一个或多个不对称中心、 多取代环或 双键， 或者作为不同的互变异构体， 也可使用对映异构体混合物 ( 特别是外消旋体 )、 非对 映异构体混合物和互变异构体混合物， 然而， 优选式 (I) 或 (I′ ) 的化合物的相应的基本纯 的对映异构体、 非对映异构体和互变异构体和 / 或它们的盐和 / 或它们的 N- 氧化物。
     同样可以使用式 (I) 或 (I ′ ) 的化合物的生理学上可耐受的盐， 尤其是与生理 学上可耐受的酸的酸加成盐。合适的生理学上可耐受的有机和无机酸的实例为盐酸、 氢溴 酸、 磷酸、 硫酸、 C1-C4- 烷基磺酸 ( 如甲磺酸 )、 芳族磺酸 ( 如， 苯磺酸和甲苯磺酸 )、 草酸、 马 来酸、 富马酸、 乳酸、 酒石酸、 己二酸和苯甲酸。其它可利用的酸描述于 Fortschritte der Arzneimittelforschung[Advances in drug research( 药物研究进展 )]， Volume 10， 224
     页及以后，
     Verlag， Basel 和 Stuttgart， 1966。同样可以使用式 (I) 或 (I′ ) 的化合物的 N- 氧化物， 如果那些化合物含有碱性氮 原子， 如哌嗪部分的氮原子。
     同样可以使用所述 N- 氧化物的生理学上可耐受的酸加成盐。
     与术语卤素一样， 在以上变量定义中提到的有机部分为单独基团成员的单独列举 的集合性术语。前缀 Cn-Cm 在各情况下表示基团中碳原子的可能数目。本文所用 C1-C4 烷基为具有 1、 2、 3 或 4 个碳原子的直链或支化烷基。 此基团的实例 包括甲基、 乙基、 正丙基、 1- 甲基乙基 ( 异丙基 )、 正丁基、 1- 甲基丙基 ( ＝ 2- 丁基 )、 2- 甲 基丙基 ( ＝异丁基 ) 和 1， 1- 二甲基乙基 ( ＝叔丁基 )。C1-C3- 烷基是指具有 1、 2 或 3 个碳 原子的以上限定的直链或支化烷基。
     本文所用氟化 C1-C2- 烷基为具有 1 或 2 个碳原子的直链烷基， 其中至少一个氢原 子由氟代替， 例如 1、 2、 3、 4 或 5 个氢原子。此基团的实例包括氟甲基、 二氟甲基、 三氟甲基、 2- 氟乙基、 2， 2- 二氟乙基、 2， 2， 2- 三氟乙基、 1， 1， 2， 2- 四氟乙基和 1， 1， 2， 2， 2- 五氟乙基。
     本文所用氟化 C1-C4- 烷基为具有 1、 2、 3 或 4 个碳原子的直链或支化烷基， 其中至 少一个氢原子由氟代替， 例如 1、 2、 3、 4、 5、 6 或 7 个氢原子。此基团的实例包括氟甲基、 二氟 甲基、 三氟甲基、 2- 氟乙基、 2， 2- 二氟乙基、 2， 2， 2- 三氟乙基、 1， 1， 2， 2- 四氟乙基、 1， 1， 2， 2， 2- 五氟乙基、 3- 氟丙基、 3， 3- 二氟丙基、 3， 3， 3- 三氟丙基、 2， 2， 3， 3- 四氟丙基、 2， 2， 3， 3， 3- 五氟丙基、 1， 1， 2， 2， 3， 3， 3- 七氟丙基、 2- 氟 -1- 甲基乙基、 2， 2- 二氟 -1- 甲基乙基、 2， 2， 2- 三氟 -1- 甲基乙基、 2， 2， 2- 三氟 -1-( 三氟甲基 ) 乙基等。
     本文所用 C1-C4 烷氧基为通过氧原子结合到分子其余部分的具有 1、 2、 3或4个(特 别 1 或 2 个 ) 碳原子的直链或支化烷基。此基团的实例为甲氧基和乙氧基。 本文所用氟化 C1-C4 烷氧基为以上限定的烷氧基， 其中至少一个氢原子由氟原子 代替， 例如 1、 2、 3、 4、 5、 6 或 7 个氢原子。此基团的实例为氟甲氧基、 二氟甲氧基、 三氟甲氧 基、 2- 氟乙氧基、 2， 2- 二氟乙氧基、 2， 2， 2- 三氟乙氧基和 1， 1， 2， 2- 四氟乙氧基。
     本文所用 C3-C4 环烷基为具有 3 至 4 个碳原子的脂环族基团， 即环丙基和环丁基。
     本文所用 C3-C4 环烷基甲基为携带具有 3 至 4 个碳原子的脂环族基团的亚甲基， 即 CH2- 环丙基 ( ＝ CH2-c-Pr) 和 CH2- 环丁基 ( ＝ CH2-c-But)。
     在式 I 和 I′中， 整数 “5” 和 “6” 命名苯环的位置。
     关于化合物调节 5-HT6 受体的能力， 变量 R1、 R2、 R3、 R4、 R5、 R6 和 n 优选具有以下含 义， 在单独或组合时， 这些含义表示式 (I) 或 (I′ ) 的化合物的具体实施方案。
     本发明的第一优选实施方案涉及式 I 和 I′的化合物、 其药理学上可耐受的盐及 1 其 N- 氧化物， 其中 R 为氢。
     本发明的另一个优选实施方案涉及式 I 和 I′的化合物、 其药理学上可耐受的盐 1 及其 N- 氧化物， 其中 R 为甲基。
     本发明的一个优选实施方案涉及式 I 和 I′的化合物、 其药理学上可耐受的盐及 2 其 N- 氧化物， 其中 R 为氢。
     本发明的另一个实施方案涉及其中 R2 为甲基的式 I 和 I′的化合物。 在其中 R2 为 甲基的化合物中， 携带 R2 的碳原子产生手性的中性。 因此， 本发明的一个具体实施方案涉及 式 I 的化合物、 其药理学上可耐受的盐及其 N- 氧化物， 其中 R2 为甲基， 并且其中携带 R2 的 碳原子具有 S- 构型。本发明的另一个具体实施方案涉及式 I 和 I′的化合物、 其药理学上 2 2 可耐受的盐及其 N- 氧化物， 其中 R 为甲基， 并且其中携带 R 的碳原子具有 R- 构型。
     本发明的化合物的混合物同样是优选的， 其中携带 R2 的碳原子分别具有 S- 构型 或 R- 构型。这些混合物可分别含有关于部分 CH-R2 具有 R- 构型的相等量或不相等量的化 合物 I， 或相等量或不相等量的化合物 I′， 和关于 CH-R2 具有 S- 构型的化合物 I 或 I′。
     术语 “对映异构纯” 是指混合物含有对映异构体过量至少 80％ ( 特别至少 90％ )
     (ee) 的相应化合物。
     优选式 I 和 I′的化合物、 其药理学上可耐受的盐及其 N- 氧化物， 其中 R3 为甲基、 乙基或正丙基， 特别为甲基。
     优选式 I 和 I′的化合物、 其药理学上可耐受的盐及其 N- 氧化物， 其中 R4 为氢、 C1-C4 烷基、 环丙基或环丙基甲基。更优选其中 R4 为氢、 甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 环丙基 或环丙基甲基 ( 特别为氢、 甲基、 乙基或正丙基， 具体为氢 ) 的本发明的化合物。
     优选式 I 和 I′的化合物、 其药理学上可耐受的盐及其 N- 氧化物， 其中 R5 为氢、 氟、 C1-C4 烷基、 氟化 C1-C4 烷基、 C1-C4 烷氧基或氟化 C1-C4 烷氧基。R5 优选选自氢、 氟、 甲基、 乙基、 三氟甲基、 甲氧基、 乙氧基、 二氟甲氧基和三氟甲氧基， 更优选选自氢、 甲基、 甲氧基和 5 二氟甲氧基。在本发明的一个特别优选的实施方案中， R 为氢。在本发明的另一个特别优 5 选的实施方案中， R 选自氟、 甲基、 三氟甲基、 甲氧基、 二氟甲氧基和三氟甲氧基， 更优选选 自甲基、 甲氧基和二氟甲氧基。同样优选式 I 和 I′的化合物、 其药理学上可耐受的盐及其 5 N- 氧化物， 其中 R 为氯。 6
     R 优选选自氢和氟。在本发明的一个特别优选的实施方案中， R6 为氢。在本发明 的另一个特别优选的实施方案中， R6 不同于氢， 特别为氟。如果 R6 不同于氢， 则优选位于苯 环的 5- 或 6- 位。 变量 n 为 1 或 2， 因此， 形成哌嗪或高哌嗪部分。优选 n 为 1， 即， 具有哌嗪部分的 化合物。
     优选式 I 和 I′的化合物、 其药理学上可耐受的盐及其 N- 氧化物， 其中 R3 为甲基 且 R6 为氢， 或者 R3 为甲基且 R6 为位于苯环的 5- 或 6- 位的氟。
     也优选式 I 和 I′的那些化合物、 其药理学上可耐受的盐及其 N- 氧化物， 其中满足 一个或多个以下条件 a)、 b) 或 c) ： 5
     a)R 选自氟、 C1-C2 烷基、 氟化 C1-C2 烷基、 C1-C2 烷氧基和氟化 C1-C2 烷氧基， 特别选 自氟、 甲基、 三氟甲基、 二氟甲氧基和甲氧基 ； 6
     b)R 为氟或氯， 优选位于苯环的 5- 或 6- 位 ； 和/或 4
     c)R 为 C3-C4- 烷基或氟化 C1-C4- 烷基， 特别为正丙基、 异丙基或三氟甲基。 3
     在这些化合物中， 优选其中 R 为甲基的那些化合物。
     本发明的一个特别优选的实施方案涉及式 I 和 I′的化合物、 其药理学上可耐受 的盐及其 N- 氧化物， 其中
     n为1或2；
     R1 为氢或甲基 ；
     R2 为氢或甲基， 特别为氢 ； 3
     R 为甲基或乙基， 特别为甲基 ； 4
     R 为氢、 甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 环丙基或环丙基甲基、 特别为氢、 甲基或乙 基；
     R5 选自氢、 氟、 甲基、 乙基、 三氟甲基、 甲氧基、 乙氧基、 二氟甲氧基和三氟甲氧基， 更优选选自氢、 甲基、 甲氧基和二氟甲氧基 ； 并且 6
     R 为位于苯环的 5- 或 6- 位的氢或氟， 特别为氢。
     在此特别优选的实施方案的化合物中， 优选式 I 和 I′的那些化合物、 其药理学上
     可耐受的盐及其 N- 氧化物， 其中 R2、 R5 和 R6 为氢， R3 为甲基， 并且 R4 为氢或 C1-C3 烷基， 特 别为氢或甲基。
     本发明的一个特别实施方案涉及式 I 和 I′的化合物、 其药理学上可耐受的盐及 其 N- 氧化物， 其中
     n为1或2；
     R1 为氢或甲基 ；
     R2 为氢或甲基， 特别为氢 ； 3
     R 为 C1-C3 烷基， 特别为甲基 ； 4
     R 为氢、 C1-C4 烷基、 环丙基或环丙基甲基， 特别为氢、 甲基或乙基 ； 5
     R 为氢 ； 并且 6
     R 为氢。
     本发明的一个特别优选的实施方案 Ia 涉及式 I 的化合物、 其药理学上可耐受的盐 及其 N- 氧化物， 其中 1
     R 为氢 ；
     R2 为氢 ； R3 为甲基 ； 并且 4
     R 为氢。
     本发明的另一个特别优选的实施方案 Ib 涉及式 I 的化合物、 其药理学上可耐受的 盐及其 N- 氧化物， 其中 1
     R 为氢 ；
     R2 为氢 ；
     R3 为甲基 ； 并且 4
     R 为 C1-C3 烷基或环丙基甲基， 特别为甲基、 乙基或正丙基。
     本发明的另一个特别优选的实施方案 Ic 涉及式 I 的化合物、 其药理学上可耐受的 盐及其 N- 氧化物， 其中 1
     R 为甲基 ；
     R2 为氢 ；
     R3 为甲基 ； 并且 4
     R 为氢。
     本发明的另一个特别优选实施方案 Id 涉及式 I 的化合物、 其药理学上可耐受的盐 及其 N- 氧化物， 其中 1
     R 为甲基 ；
     R2 为氢 ；
     R3 为甲基 ； 并且 4
     R 为 C1-C3 烷基或环丙基甲基， 特别为甲基、 乙基或正丙基。
     在实施方案 Ia、 Ib、 Ic 和 Id 的化合物中， 优选其中式 I 中的基团 R5 和 R6 两者均 为氢的那些化合物。
     在实施方案 Ia、 Ib、 Ic 和 Id 的化合物中， 同样优选其中式 I 中的基团 R5 为氢并且 其中式 I 中的基团 R6 为位于苯环的 5- 位或 6- 位的氟的那些化合物。
     在实施方案 Ia、 Ib、 Ic 和 Id 的化合物中， 同样优选其中式 I 中的基团 R5 为甲基并 且其中式 I 中的基团 R6 为氢的那些化合物。
     在实施方案 Ia、 Ib、 Ic 和 Id 的化合物中， 同样优选其中式 I 中的基团 R5 为甲氧基 并且其中式 I 中的基团 R6 为氢的那些化合物。
     在实施方案 Ia、 Ib、 Ic 和 Id 的化合物中， 同样优选其中式 I 中的基团 R5 为甲基并 且其中式 I 中的基团 R6 为位于苯环的 5- 位或 6- 位的氟的那些化合物。
     在实施方案 Ia、 Ib、 Ic 和 Id 的化合物中， 同样优选其中式 I 中的基团 R5 为甲氧基 并且其中式 I 中的基团 R6 为位于苯环的 5- 位或 6- 位的氟的那些化合物。
     在实施方案 Ia、 Ib、 Ic 和 Id 的化合物中， 同样优选其中式 I 中的基团 R5 为二氟甲 氧基并且其中式 I 中的基团 R6 为氢的那些化合物。
     在实施方案 Ia、 Ib、 Ic 和 Id 的化合物中， 同样优选其中式 I 中的基团 R5 为二氟甲 氧基并且其中式 I 中的基团 R6 为位于苯环的 5- 位或 6- 位的氟的那些化合物。
     本发明的一个特别优选的实施方案 I′ a 涉及式 I′的化合物、 其药理学上可耐受 的盐及其 N- 氧化物， 其中 1
     R 为氢 ；
     R2 为氢 ；
     R3 为甲基 ； 并且 4
     R 为氢。
     本发明的另一个特别优选的实施方案 I′ b 涉及式 I′的化合物、 其药理学上可耐 受的盐及其 N- 氧化物， 其中 1
     R 为氢 ；
     R2 为甲基 ；
     R3 为甲基 ； 并且 4
     R 为氢。
     本发明的另一个特别优选的实施方案 I′ c 涉及式 I′的化合物、 其药理学上可耐 受的盐及其 N- 氧化物， 其中 1
     R 为氢 ；
     R2 为氢 ；
     R3 为甲基 ； 并且 4
     R 为 C1-C3 烷基或环丙基甲基， 特别为甲基、 乙基或正丙基。
     本发明的另一个特别优选的实施方案 I′ d 涉及式 I′的化合物、 其药理学上可耐 受的盐及其 N- 氧化物， 其中 1
     R 为氢 ；
     R2 为甲基 ；
     R3 为甲基 ； 并且 4
     R 为 C1-C3 烷基或环丙基甲基， 特别为甲基、 乙基或正丙基。
     在实施方案 I′ a、 I′ b、 I′ c 和 I′ d 的化合物中， 优选式 I′中的基团 R5 和 R6 两者均为氢的那些化合物。
     在实施方案 I′ a、 I′ b、 I′ c 和 I′ d 的化合物中， 同样优选其中式 I′中的基团 R5 为氢并且其中式 I′中的基团 R6 为位于苯环的 5- 位或 6- 位的氟的那些化合物。
     在式 I 的化合物中， 特别在实施方案 Ia、 Ib、 Ic 和 Id 的化合物中， 特别优选其中 OCHF2- 基团位于苯环上相对于磺酰基的间位的那些化合物。在这些化合物中， 特别优选其 5 中 R 为氢的式 I 的那些化合物。 在这些化合物中， 同样优选式 I 的那些化合物， 其中 R5 不同 于氢， 并且特别选自氟、 甲基、 三氟甲基、 甲氧基、 二氟甲氧基和三氟甲氧基， 更优选选自甲 基、 甲氧基和二氟甲氧基， 并且相对于磺酰基位于对位， 或者相对于 OCHF2- 基团位于对位。
     在式 I 的化合物中， 特别是在实施方案 Ia、 Ib、 Ic 和 Id 的化合物中， 同样优选其 中 OCHF2- 基团位于苯环上相对于磺酰基的邻位的那些化合物。在这些化合物中， 特别优选 5 其中 R 为氢的式 I 的那些化合物。在这些化合物中， 同样优选式 I 的那些化合物， 其中 R5 不同于氢， 并且特别选自氟、 甲基、 三氟甲基、 甲氧基、 二氟甲氧基和三氟甲氧基， 更优选选 自甲基、 甲氧基和二氟甲氧基， 并且相对于磺酰基位于对位， 或者相对于 OCHF2- 基团位于对 位。
     在式 I 的化合物中， 特别是在实施方案 Ia、 Ib、 Ic 和 Id 的化合物中， 同样优选其中 OCHF2- 基团位于苯环上相对于磺酰基的对位的那些化合物。在这些化合物中， 特别优选其 5 中 R 为氢的式 I 的那些化合物。在这些化合物中， 同样优选式 I 的那些化合物， 其中 R5 不 同于氢， 并且特别选自氟、 甲基、 三氟甲基、 甲氧基、 二氟甲氧基和三氟甲氧基， 更优选选自 甲基、 甲氧基和二氟甲氧基， 并且相对于磺酰基位于间位。 在式 I′的化合物中， 特别是在实施方案 I′ a、 I′ b、 I′ c 和 I′ d 的化合物中， 特别优选其中磺酰基连接到苯环相对于 1， 3- 间二氧杂环戊烯环的 α- 位的那些化合物。 在 5 这些化合物中， 特别优选其中 R 为氢的式 I′的那些化合物。
     在式 I′的化合物中， 特别是在实施方案 I′ a、 I′ b、 I′ c 和 I′ d 的化合物中， 特别优选其中磺酰基连接到苯环相对于 1， 3- 间二氧杂环戊烯环的 β- 位的那些化合物。 在 5 这些化合物中， 特别优选其中 R 为氢的式 I′的那些化合物。
     本发明的优选化合物为式 I 的化合物、 其药理学上可耐受的盐及其 N- 氧化物， 其 2 6 3 1 4 5 中 R 和 R 为氢， R 为甲基， 并且 n、 R、 R、 R 和部分 OCHF2 在苯环上相对于磺酰基的位置如 上限定。这些化合物以后称为式 I-1 的化合物。实例在以下表 A 中给出 ：
     表A序号 1. n 1 R1 H R4 H OCHF2 的位置 * 2 R5* H11CN 102459200 A 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.
     序号 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. n 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 R1 H CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 H H H H H R4 H H H H H H H H H H CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 1 1 1 1 1 1 1 H H H H H H H H H H H H H H说明3 4 3 2 3 3 2书H H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH39/32 页OCHF2 的位置 * 3 2 3 4 3 2 3 3 2 3 2 3 4 3 2R5* 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH312CN 102459200 A 24. 25. 26. 27. 28. 29. 30. 31. 32. 33. 34. 35. 36. 37. 38. 39. 40. 41. 42. 43. 44. 45. 46. 47. 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 H H H H CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 H H H H H H H H H CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3说明3 3 2 3 2 3 4 3 2 3 3 2 3 2 3 4 3 2 3 3 2 3 2 3书4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH3 H H10/32 页13CN 102459200 A
     序号 48. 49. 50. 51. 52. 53. 54. 55. 56. 57. 58. 59. 60. 61. 62. 63. 64. 65. 66. 67. 68. 69. n 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 R1 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 H H H H H H H H H CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 R4 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3说明书OCHF2 的位置 * 4 3 2 3 3 2 3 2 3 4 3 2 3 3 2 3 2 3 4 3 2 3 R5* H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH311/32 页CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH314CN 102459200 A 70. 71. 72. 73. 74. 75. 76. 77. 78. 79. 80. 81. 82. 83. 84. 85. 86.
     序号 87. 88. 89. 90. 91. n 1 1 1 1 1 R1 CH3 CH3 CH3 CH3 H R4 i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 CH3 CH3 CH3 H H H H H H H H H CH3 CH3 CH3 CH3 CH3说CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr明3 2 3 2 3 4 3 2 3 3 2 3 2 3 4 3 2书6-CH3 4-CH3 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH312/32 页OCHF2 的位置 * 3 3 2 3 2R5* 4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH3 HCH2-c-Pr15CN 102459200 A 92. 93. 94. 95. 96. 97. 98. 99. 100. 101. 102. 103. 104. 105. 106. 107. 108. 109. 110. 111. 112. 113. 114. 115. 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 2 H H H H H H H H CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 H H H H H H H说CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr H H H H H H H明3 4 3 2 3 3 2 3 2 3 4 3 2 3 3 2 3 2 3 4 3 2 3 3书H H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH313/32 页16CN 102459200 A 116. 117. 118. 119. 120. 121. 122. 123. 124. 125.
     序号 126. 127. 128. 129. 130. 131. 132. 133. 134. 135. 136. 137. n 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 R1 CH3 H H H H H H H H H CH3 CH3 R4 H CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 H H CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 H H H H H H H H H H说明2 3 2 3 4 3 2 3 3 2书4-CH3 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH314/32 页OCHF2 的位置 * 3 2 3 4 3 2 3 3 2 3 2 3R5* 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH3 H H17CN 102459200 A 138. 139. 140. 141. 142. 143. 144. 145. 146. 147. 148. 149. 150. 151. 152. 153. 154. 155. 156. 157. 158. 159. 160. 161. 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 H H H H H H H H H CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH3说明4 3 2 3 3 2 3 2 3 4 3 2 3 3 2 3 2 3 4 3 2 3 3 2书H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH315/32 页18CN 102459200 A 162. 163. 164.
     序号 165. 166. 167. 168. 169. 170. 171. 172. 173. 174. 175. 176. 177. 178. 179. 180. 181. 182. 183. n 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 R1 H H H H H H H CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 H H H R4 2 2 2 CH3 H H CH2CH3说明3 2 3书4-CH3 H H16/32 页CH2CH2CH3 CH2CH2CH3OCHF2 的位置 * 4 3 2 3 3 2 3 2 3 4 3 2 3 3 2 3 2 3 4R5* H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH3 H H HCH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 i-Pr i-Pr i-Pr19CN 102459200 A 184. 185. 186. 187. 188. 189. 190. 191. 192. 193. 194. 195. 196. 197. 198. 199. 200. 201. 202. 203.
     序号 204. 205. n 2 2 R1 H H R4 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 H H H H H H CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 H H H H H i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr i-Pr说明3 2 3 3 2 3 2 3 4 3 2 3 3 2 3 2 3 4 3 2书6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH317/32 页CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-PrOCHF2 的位置 * 3 3R5* 4-OCH3 6-CH3CH2-c-Pr CH2-c-Pr20CN 102459200 A 206. 207. 208. 209. 210. 211. 212. 213. 214. 215. 216.
     *说2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 H H CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr明2 3 2 3 4 3 2 3 3 2 3书4-CH3 4-CH3 H H H 6-OCH3 4-OCH3 4-OCH3 6-CH3 4-CH3 4-CH318/32 页相对于磺酰基部分的位置 ( 邻位＝ 2- 位， 间位＝ 3- 位， 对位＝ 4- 位 ) ；
     CH2-c-Pr ＝环丙基甲基 ；
     i-Pr ＝异丙基。
     本发明的优选化合物为式 I′的化合物、 其药理学上可耐受的盐及其 N- 氧化物， 2 5 6 3 1 4 其中 R 、 R 和 R 为氢， R 为甲基， 并且其中 n、 R、 R 和磺酰基在苯环上相对于间二氧杂环戊 烯环的位置如上限定。这些化合物以后称为式 I′ -1 的化合物。实例在以下表 B 中给出 ：
     表B：n 217. 218. 219. 1 1 1 R1 H H H R4 H H CH3 21 SO2 的位置 *CN 102459200 A 220. 221. 222. 223.
     n 224. 225. 226. 227. 228. 229. 230. 231. 232. 233. 234. 235. 236. 237. 238. 239. 240. 241. 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 R1 H H H H H CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 H 1 1 1 1 H H H H说CH3 CH2CH3 CH2CH3明书19/32 页CH2CH2CH3R4 CH2CH2CH3 i-Pr i-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr H H CH3 CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 i-Pr i-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr HSO2 的位置 *22CN 102459200 A 242. 243. 244. 245. 246. 247. 248. 249. 250. 251. 252. 253. 254. 255. 256. 257. 258. 259. 260. 261. 262.
     n 263. 2 R1 CH3 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 H H H H H H H H H H H CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3说H CH3 CH3 CH2CH3 CH2CH3明书20/32 页CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 i-Pr i-Pr CH2-c-Pr CH2-c-Pr H H CH3 CH3 CH2CH3 CH2CH3 CH2CH2CH3 CH2CH2CH3 i-Pr i-PrR4 CH2-c-PrSO2 的位置 *23CN 102459200 A 264.
     *说2 CH3明书21/32 页CH2-c-Pr相对于间二氧杂环戊烯环的位置 ；
     CH2-c-Pr ＝环丙基甲基 ；
     i-Pr ＝异丙基。
     本发明的化合物 I 和 I′类似于从文献已知的方法制备。得到本发明化合物的重 要途径通过以下提供 ： 式 II 的 1-( 哌嗪 -1- 基 )-3- 氨基苯或 1-( 高哌嗪 -1- 基 )-3- 氨基 苯化合物与方案 1 描绘的二氟甲氧基苯磺酸衍生物 III 反应， 或者与方案 1a 描绘的 2， 2- 二 氟苯并 [1， 3] 间二氧杂环戊烯磺酸衍生物 IIIa 反应。
     方案 1 ：
     方案 1a ：在方案 1 和 1a 中， n、 R 2、 R3、 R5 和 R6 具有上述含义， 并且 R2 位置邻近 Ra。Ra 为氮 保护基或甲基。适合的 N- 保护基描述于例如 P.J.Kocienski“Protecting Groups” ， 第二 版， Georg Thieme Verlag， Stuttgart 2000， 186-237 页和其中引用的文献。N- 保护基的 优选实例为， 例如氧基羰基， 如 C1-C6- 烷氧基羰基， 例如甲氧基羰基、 乙氧基羰基和 Boc( 叔 丁氧基羰基 ) 和其它氧基羰基， 如苄基氧基羰基 (Cbz)、 烯丙基氧基羰基、 9- 芴基甲氧基羰 基 (Fmoc) 和 2- 三甲基甲硅烷基乙氧基羰基 (Teoc) 或 2- 丙烯基 ( 烯丙基 )。X 为可亲核 取代的离去基团， 特别是卤素原子， 尤其是氯或溴。
     式 IV 和 IVa 的化合物是新的， 其中 Ra 为氮保护基， 特别是 C1-C6- 烷氧基羰基， 如 甲氧基羰基、 乙氧基羰基和 Boc( 叔丁氧基羰基 )， 因此也形成本发明的一部分。 a
     其中 R 为甲基的式 IV 的化合物相当于其中 R1 为甲基的化合物 I。其中 Ra 为甲基 的式 IVa 的化合物相当于其中 R1 为甲基的化合物 I′。
     在方案 1 和 1a 中描绘的反应在通常用于分别制备芳基磺酰胺化合物或芳基磺酸 酯的反应条件下进行， 所述反应条件描述于例如 J.March， Advanced Organic Chemistry， 第 三 版， John Wiley & Sons， New York， 1985， 444 页 和 其 中 引 用 的 文 献 ； Eur.J.Org. Chem.2002(13)， 2094-2108 页 ； Tetrahedron 2001， 57(27)， 5885-5895 页 ； Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters 2000， 10(8)， 835-838 页 ； 和 Synthesis 2000(1)， 103-108
     页。 反应通常在惰性溶剂中进行， 例如醚， 如乙醚、 异丙醚、 甲基·叔丁基醚或四氢呋 喃； 卤代烃， 如二氯甲烷 ； 脂族或脂环族烃， 如戊烷、 己烷或环己烷 ； 或芳族烃， 如甲苯、 二甲 苯、 枯烯等 ； 或在上述溶剂的混合物中进行。化合物 II 与化合物 III( 或化合物 IIIa) 的反 应通常在辅助碱存在下进行。 适合的碱为无机碱， 例如碳酸钠或碳酸钾， 或碳酸氢钠或碳酸 氢钾 ； 和有机碱， 例如， 三烷基胺， 如三乙胺或吡啶化合物， 如吡啶、 二甲基吡啶、 4- 二甲基 氨基 - 吡啶等。后者化合物可同时作为溶剂。辅助碱通常基于胺化合物 II 至少等摩尔量 使用。
     化合物 II 分别与化合物 III 或 IIIa 的反应分别得到化合物 IV 或 IVa， 其在 Ra 为 N- 保护基的情况下去保护， 得到通式 I 或 I′的化合物， 其中 R1 为氢。化合物 IV 或 IVa 去 保护可分别通过标准方法实现， 例如通过 P.J.Kocienski“Protecting Groups” ， 第二版， Georg Thieme Verlag， Stuttgart 2000， 186-237 页和其中引用的文献所述的方法。
     然后， 可用常用方法使这些化合物与甲基化剂 ( 如甲基碘或硫酸二甲酯 ) 反应， 分别得到化合物 I 或 I ′， 其中 R1 为甲基。此甲基化反应需要的反应条件公开于例如 WO 02/083652、 Tetrahedron 2000， 56(38)7553-7560 页和 Synlett 2000(4)， 475-480 页。 1
     为了分别制备其中 R 为甲基的式 I 或 I′的化合物， 同样可使其中 R1 为氢的式 I 或 I′的化合物与甲醛在还原剂存在下反应 ( 以还原性胺化的意义 )。适合的还原剂为硼 氢化物， 如硼氢化钠、 氰基硼氢化钠、 三乙酰氧基硼氢化钠或硼烷 - 吡啶。还原性胺化通常 在有机溶剂中进行， 如二氯甲烷、 1， 2- 二氯乙烷、 四氢呋喃或乙腈。
     化合物 IV 或 IVa 与烷化剂的反应分别得到式 IV′或 IV′ a 的化合物， 其中 n、 Ra、 R2、 R3、 R5 和 R6 如上限定。分别在式 IV′或 IV′ a 的化合物中， 磺酰胺氢由 C1-C4 烷基、 环丙 基、 C3-C4 环烷基甲基或氟化 C1-C4 烷基取代。
     可使化合物 IV 或 IVa 与甲基化剂 ( 如甲基碘或硫酸二甲酯 ) 反应， 以分别得到式 a 2 3 5 6 IVc 或 IVd 的化合物， 其中 R 、 R、 R、 R 和 R 如上限定。
     如果式 IVc 或 IVd 中的 Ra 为 N- 保护基， 则化合物 IVc 或 IVd 分别去保护， 得到 1 通式 I 的化合物， 其中 R 为氢。化合物 IVc 或 IVd 去保护可通过标准方法实现， 例如通过 P.J.Kocienski “Protecting Groups” ， 第二版， Georg Thieme Verlag， Stuttgart 2000，186-237 页和其中引用的文献所述的方法。
     通式 II 的化合物本身已知， 或者可按方案 2 中所示的方式制备。
     方案 2 ：
     在方案 2 中， n、 Ra、 R2、 R3 和 R6 具有上述含义。
     在方案 2 的步骤 i) 中， 化合物 V 在标准条件下经过硝化， 从而得到化合物 VI。反 应条件可例如从 US 6,599,904 或从本申请的实施例取得。
     在方案 2 的步骤 ii) 中， 通过以上限定的常规 N- 保护基， 或者通过甲基化剂 ( 如 甲基溴、 甲基碘或硫酸二甲酯 ) 引入甲基， 来保护化合物 VI 的 NH- 基团。将 N- 保护基引 入化合物 VI 可通过标准方法实现， 例如通过 P.J.Kocienski “Protecting Groups” ， 第二 版， Georg Thieme Verlag， Stuttgart 2000， 186-237 页和其中引用的文献所述的方法。同 样通过有机化学的标准方法实现化合物 VI 的甲基化。
     在步骤 iii) 中， 将化合物 VII 中的硝基还原成 NH2 基团， 以得到化合物 II。步骤 iii) 需要的反应条件相当于还原芳族硝基的通常条件， 这些条件已充分描述于文献中 ( 参 见， 例如 J.March， Advanced Organic Chemistry， 第三版， J.Wiley & Sons， New-York， 1985， 1183 页和该参考文献中引用的文献 )。还原可通过以下实现， 例如使硝基化合物 VII 与金 属 ( 如铁、 锌或锡 ) 在酸性反应条件下 ( 即使用初生氢， 或者使用络合氢化物， 如氢化铝锂 或硼氢化钠 )， 优选在镍或钴的过渡金属化合物 ( 如 NiCl2(P( 苯基 )3)2 或 CoCl2) 存在下 ( 参见 Ono 等人 .Chem.Ind.(London)， 1983 480 页 )， 或者使用 NaBH2S3( 参见 Lalancette 等人 .Can.J.Chem.49， 1971， 2990 页 ) 而反应， 可根据所给试剂， 在物质或在溶剂或稀释剂 中进行这些还原。或者， VII 至 II 的还原可在过渡金属催化剂的存在下用氢进行， 例如， 在 基于铂、 钯、 镍、 钌或铑的催化剂的存在下用氢进行。催化剂可含有元素形式的过渡金属或 过渡金属的络合化合物、 盐或氧化物的形式， 并且为了改变活性的目的， 可使用通常的协同 配位体， 例如， 有机膦化合物， 如三苯基膦、 三环己基膦或三正丁基膦或亚磷酸盐。 按催化剂 金属计算， 催化剂通常以 0.001 至 1mol/mol 化合物 VII 的量使用。在一个优选变化中， 还 原用氯化锡 (II) 以类似于 Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters 2002， 12(15)， 1917-1919 页和 J.Med.Chem.2002， 45(21)， 4679-4688 页所述的方法进行。VII 与氯化锡 (II) 的反应优选在惰性有机溶剂中进行， 优选在醇中进行， 如甲醇、 乙醇、 异丙醇或丁醇。
     通式 VI 的化合物本身已知， 或者可根据以下合成方案 3 制备。 方案 3 ：在方案 3 中， n、 R2、 R3 和 R6 具有上述含义。PG 为氢或氮保护基。
     在方案 3 的步骤 i) 中， 通过 Pd- 催化的 Buchwald-Hartwig 反应， 使溴 - 硝基苯化 合物 IX 和任选保护的 ( 高 ) 哌嗪衍生物 VIII( 两者均可购得或按照已建立的合成程序制 备 ) 偶合， 分别直接得到或在去保护后得到化合物 VI。
     如果未另外指明， 上述反应一般在溶剂中在室温和所用溶剂沸点温度之间的温度 下进行。或者， 反应需要的活化能可用微波引入反应混合物， 这已证明有价值， 特别在由过 渡金属催化的反应的情况下 ( 关于使用微波的反应， 参见 Tetrahedron 2001， 57， 9199 页及 以后和 9225 页及以后， 一般方式也参见″ Microwaves in Organic Synthesis( 有机合成 中的微波 )″， AndréLoupy(Ed.)， Wiley-VCH 2002)。
     化合物 I 和 I′的酸加成盐以通常的方式通过混合游离碱与相应的酸而制备， 适 当时在有机溶剂的溶液中制备， 所述有机溶剂例如乙腈、 低级醇 ( 如甲醇、 乙醇或丙醇 )、 醚 ( 如乙醚、 甲基·叔丁基醚或异丙醚 )、 酮 ( 如丙酮或甲基·乙基酮 )、 酯 ( 如乙酸乙酯 )、 其 混合物及其与水的混合物。
     本发明的化合物可以为 5-HT6 受体激动剂， 包括部分激动剂活性， 或 5-HT6 受体拮 抗剂， 包括反激动剂活性。
     本发明的式 I 和 I′的化合物及其盐和其 N- 氧化物对 5-HT6 受体具有令人惊讶 的高亲合性。本发明的化合物对 5-HT6 受体的高亲合性反映于极低的体外受体结合常数 (Ki(5-HT6) 值 )， 通常小于 250nM(nmol/l)， 通常小于 100nM， 优选小于 50nM， 特别小于 10nM， 3 具体小于 5nM。可将 H-LSD 的置换例如用于受体结合研究中测定对 5-HT6 受体的结合亲合 性。
     另外， 式 I 和 I′的化合物及其盐和其 N- 氧化物为选择性 5-HT6 受体配体， 由于 其对其它受体的低亲合性， 比其它选择性更小的 5-HT6 配体产生更少的副作用， 所述其它受 体如多巴胺受体、 肾上腺素能受体、 毒蕈碱型受体、 组胺受体、 阿片受体， 特别是多巴胺 D2、 α1- 肾上腺素能和组胺 H1 受体。
     例如， 本发明的化合物的 5-HT6/D2、 5-HT6/α1- 肾上腺素能或 5-HT6/H1 选择性， 即 受体结合常数之比 Ki(D2)/Ki(5-HT6)、 Ki(α1- 肾上腺素能 )/Ki(5-HT6) 或 Ki(H1)/Ki(5-HT6)， 一般至少 10， 通常至少 25， 优选至少 50， 甚至更佳至少 100。 3 125
     例如， 可将 [ H]SCH23390 或 [ I] 螺环哌啶酮的置换用于例如对 D1、 D2 和 D4 受体 进行受体结合研究。
     另外， 由于其结构特性， 本发明的化合物容易显示比其它已知的 5-HT6 受体配体增 强的脑渗透。
     由于它们的结合情况， 本发明的化合物可用于治疗响应于 5-HT6 受体配体 ( 或对 用 5-HT6 受体配体治疗敏感 ) 的疾病， 即， 它们有效用于治疗其中对 5-HT6 受体施加影响 ( 调 节 5-HT6 受体 ) 导致临床表现改善或疾病治愈的那些医学紊乱或疾病。这些疾病的实例为 中枢神经系统的紊乱或疾病。
     中枢神经系统的紊乱或疾病理解为表示影响脊髓 ( 特别是脑 ) 的紊乱。在本发明 的含义内， 术语 “紊乱” 表示失调和 / 或异常， 通常被认为是病理疾病或功能， 并且可自身表 现为特定征兆、 症状和 / 或功能障碍的形式。虽然本发明的治疗可指向单独的紊乱， 即异常 或病理疾病， 但可能在原因上相互联系的数种异常组合成可根据本发明治疗的模式 ( 即综 合征 ) 也是可能的。
     可根据本发明治疗的疾病特别为响应于调节 5-HT6 受体的疾病。它们包括认知功 能障碍， 如记忆、 认知和学习缺陷， 特别与阿尔茨海默病、 年龄相关的认知衰退和轻微认知 障碍相关 ； 注意力缺陷疾病 / 过动综合征 ； 人格障碍， 如精神分裂症， 特别是与精神分裂症 相关的认知缺陷 ； 情感障碍， 如抑郁、 焦虑和强迫症 ； 动作或运动障碍， 如帕金森病和癫痫 病； 偏头痛 ； 睡眠障碍 ( 包括昼夜节律紊乱 ) ； 摄食障碍， 如厌食和贪食 ； 某些胃肠紊乱， 如 过敏性肠综合征 ； 与神经变性相关的疾病， 如中风 ； 脊柱或头创伤和头损伤， 如脑积水 ； 成 瘾疾病， 包括例如药物成瘾和肥胖症。 成瘾疾病包括由精神药物 ( 包括某些药物， 如镇静剂、 抗焦虑药、 催眠药或麻醉 剂 ) 滥用导致的精神疾病和行为紊乱 ( 以后也称为药物成瘾 )， 以及其它成瘾疾病， 如对 博弈成瘾 ( 赌博， 冲动控制疾病不另外分类 )。成瘾物质的实例为 ： 阿片类 ( 例如， 吗啡、 海洛因和可待因 ) ； 可卡因 ； 烟碱 ； 酒精 ； 与 GABA 氯化物通道复合物相互作用的物质、 镇静 药、 催眠药和安定药， 例如， 苯并二氮 ； LSD ； 大麻素 ； 精神运动刺激剂， 如 3， 4- 亚甲基二氧 基 -N- 甲基苯丙胺 ( 摇头丸 ) ； 苯丙胺和苯丙胺类物质， 如哌醋甲酯和其它刺激剂 ( 包括咖 啡因 )。特别考虑的成瘾物质为阿片类、 可卡因、 苯丙胺或苯丙胺类物质、 迷幻剂、 NMDA- 受 体拮抗剂 ( 如苯环利定和相关的环利定 )、 右美沙芬、 去甲右美沙芬、 伊博格碱、 酮亚胺和替 来他明、 大麻、 烟碱和酒精。其它成瘾疾病包括博弈 ( 赌博 )， 包括问题赌博 ( 强迫性赌博、 嗜赌 (ludomania))、 电脑或电视游戏成瘾和互联网成瘾。
     关于治疗成瘾疾病， 特别优选它们自身不具有任何精神病治疗效果的本发明的那 些化合物。 这也可在使用大鼠的试验中观察到， 在已给予可根据本发明使用的化合物后， 大 鼠减少其精神病治疗物质 ( 例如可卡因或酒精 ) 的自我给药。
     根据本发明的另一方面， 本发明的化合物适用于治疗其诱因可至少部分归因于 5-HT6 受体的异常活性的疾病。
     根据本发明的另一方面， 治疗特别指向 ( 在适宜的医药治疗的意义内 ) 可受优选 外源给予的结合配合体 ( 配体 ) 与 5-HT6 受体结合的影响的那些疾病。
     可用本发明的化合物治疗的疾病通常表征为进行性发展， 即在一段时间过程中上 述疾病改变， 通常， 严重性增加， 并且疾病可能相互合并， 或者， 除了已存在的那些疾病外， 可出现其它疾病。
     本发明的化合物可用于治疗与中枢神经系统紊乱 ( 特别是上述疾病 ) 有关的大 量征兆、 症状和 / 或功能障碍。这些征兆、 症状和 / 或功能障碍包括， 例如对现实的紊乱关 系、 缺乏满足通常社会标准或生活需求的洞察力和能力、 性格改变、 个体内驱力 ( 如饥饿、
     睡眠、 口渴等 ) 和情绪的改变、 观察和综合能力紊乱、 个性改变 ( 特别是情绪不稳 )、 幻觉、 自 我紊乱、 分神、 矛盾情绪、 孤独症、 人格解体和假知觉、 妄想观念、 歌唱式言语、 协同性自动运 动、 小步态、 躯干和四肢屈曲姿势、 震颤、 面部表情贫乏、 单调言语、 抑郁、 淡漠、 自发性和决 断性阻碍、 交往能力缺乏、 焦虑、 紧张不安、 口吃、 社交恐惧症、 慌乱、 与依赖性有关的戒断症 状、 手形综合征、 兴奋和混乱状态、 烦躁不安、 运动障碍综合症和痉挛疾病 ( 例如， 亨廷顿舞 蹈症和图雷特综合症 )、 眩晕综合征 ( 例如， 周边位置、 旋转和摆动眩晕 )、 忧郁症、 癔病、 疑 病等。
     在本发明的意义内， 治疗也包括预防治疗 ( 预防 )， 特别是作为复发预防或阶段预 防， 以及治疗急性或慢性征兆、 症状和 / 或功能障碍。治疗可指向症状， 例如， 作为症状的抑 制。可短期进行， 指向中期， 或者可以是长期治疗， 例如， 在维持治疗的背景下。
     本发明的化合物优先适用于治疗中枢神经系统疾病， 更优选治疗认知功能障碍， 特别是用于治疗与精神分裂症或与阿尔茨海默病相关的认知功能障碍。
     根据本发明的另一方面， 本发明的化合物特别适用于治疗例如由精神药物 ( 如药 物、 麻醉剂、 烟碱或酒精 ) 滥用引起的成瘾疾病， 包括精神障碍和与之相关的行为紊乱。本 发明的化合物同样特别适用于治疗不是由精神药物滥用引起的成瘾疾病， 如博弈 ( 赌博 )， 包括问题赌博 ( 强迫性赌博、 嗜赌 (ludomania))、 电脑或电视游戏成瘾和互联网成瘾。 关于 成瘾疾病， 本发明的化合物可用于成瘾期间治疗， 也用于预防复发为成瘾。
     根据本发明的另一方面， 式 (I) 和 (I)′的化合物及其盐和其 N- 氧化物特别适用 于治疗营养紊乱， 如肥胖症和与之相关的疾病， 如心血管疾病、 消化疾病、 呼吸疾病、 癌症或 2 型糖尿病。
     在治疗背景内， 所述化合物的本发明的用途包括方法。 在此方法中， 给予要治疗的 个体 ( 优选哺乳动物， 特别是人、 生产型动物或家养动物 ) 有效量的一种或多种化合物， 一 般根据药学和兽医学实践配制。是否指出此治疗和进行何种形式取决于个体情况， 并且经 过医学评估 ( 诊断 )， 这要考虑表现的征兆、 症状和 / 或功能障碍， 产生具体征兆、 症状和 / 或功能障碍的风险和其它因素。
     通常， 通过单一或重复每日给药进行治疗， 适当时与其它活性化合物或含活性化 合物的制剂一起或交替， 从而将优选约 0.1 至 1000mg/kg 体重 ( 在口服给药的情况下 ) 或 约 0.1 至 100mg/kg 体重 ( 在胃肠外给药的情况下 ) 的每日剂量提供给要治疗的个体。
     本发明还涉及制造用于治疗个体 ( 优选哺乳动物， 特别是人、 生产型动物或家养 动物 ) 的药物组合物。因此， 式 I 或 I′的化合物、 其盐和 / 或其 N- 氧化物通常以药物组合 物形式给药， 所述药物组合物包含药学上可接受的赋形剂与至少一种本发明的化合物和其 它活性化合物 ( 适当时 )。 这些组合物可例如口服、 直肠、 透皮、 皮下、 静脉内、 肌内或鼻内给 药。
     适合的药物制剂的实例为固体药物剂型， 例如散剂、 颗粒剂、 片剂 ( 特别是膜衣片 剂 )、 糖锭剂、 小药囊、 扁囊剂、 糖衣片剂、 胶囊剂 ( 如硬明胶胶囊剂和软明胶胶囊剂 )、 栓剂 或阴道药物剂型 ； 半固体药物剂型， 例如软膏剂、 乳膏剂、 水凝胶、 糊剂或药膏 ； 以及液体药 物剂型， 例如溶液、 乳剂 ( 特别是水包油乳剂 )、 混悬剂 ( 例如， 洗剂 )、 注射制剂和输液制剂 以及滴眼剂和滴耳剂。植入释放装置也可用于给予本发明的抑制剂。另外， 也可使用脂质 体或微球体。在制备组合物时， 本发明的化合物任选与一种或多种赋形剂混合或用其稀释。赋 形剂可以为固体、 半固体或液体材料， 其充当活性化合物的媒介物、 载体或介质。
     适合的赋形剂列于专家药物专论中。另外， 制剂可包含药学上可接受的载体或 通常的辅助物质， 如助流剂 ； 湿润剂 ； 乳化剂和悬浮剂 ； 防腐剂 ； 抗氧化剂 ； 抗刺激剂 ； 螯合 剂； 包衣助剂 ； 乳化稳定剂 ； 成膜剂 ； 胶凝剂 ； 气味掩蔽剂 ； 矫味剂 ； 树脂 ； 水胶体 ； 溶剂 ； 增 溶剂 ； 中和剂 ； 扩散促进剂 ； 色素 ； 季铵化合物 ； 重新加脂和过度加脂剂 (refatting and overfatting agent) ； 用于软膏、 乳膏剂或油剂的原料 ； 硅酮衍生物 ； 铺展助剂 ； 稳定剂 ； 消毒剂 ； 栓剂基质 ； 片剂助剂， 如粘合剂、 填料、 助流剂、 崩解剂或衣料 ； 推进剂 ； 干燥剂 ； 遮光剂 ； 增稠剂 ； 蜡； 增塑剂和白色矿物油。在此方面， 制剂基于专家知识， 例如描述于 Fiedler， H.P.， Lexikon der Hilfsstoffe für Pharmazie， Kosmetik und angrenzende Gebiete [Encyclopedia of auxiliary substances for pharmacy， cosmetics and related fields( 制药、 化妆品及相关领域辅助物质百科全书 )]， 第四版， Aulendo rf ： ECV-Editio-Kantor-Verlag， 1996。
     以下实施例用于说明本发明， 而不限制其范围。
     化合物通过质子 -NMR 在 d6- 二甲亚砜或 d- 氯仿中在 400MHz 或 500MHz NMR 仪器 (Bruker AVANCE) 上表征， 或者通过质谱表征， 一般通过 HPLC-MS 在 C18- 材料上以快速梯度 ( 电喷 - 离子化 (ESI) 模式 ) 记录， 或者通过熔点表征。
     核磁共振谱性质 (NMR) 涉及化学位移 (δ)， 用百万分率 (ppm) 表示。1H NMR 谱的 位移的相对面积相当于分子中特定官能类型的氢原子数。关于多重性， 位移的性质指示为 单重 (s)、 宽单重 (s.br.)、 二重 (d)、 宽二重 (d br.)、 三重 (t)、 宽三重 (t br.)、 四重 (q)、 五重 (quint.) 和多重 (m)。
     I. 制备中间体化合物 IV
     制备实施例 1 ：
     4-[5-(3- 二氟甲氧基 - 苯磺酰氨基 )-2- 甲基 - 苯基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁酯
     1.1 4-(2- 甲基 -5- 硝基 - 苯基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁酯
     在第一烧瓶中， 使 0.135g 乙酸钯 (0.135g， 0.602mmol) 和 BINAP(2， 2′ - 双 ( 二苯 基膦基 )-1， 1′ - 联萘 )(0.375g) 悬浮于 5mL 甲苯中， 并在 70℃搅拌 30 分钟。在第二烧瓶 中， 将 2- 溴 -1- 甲基 -4- 硝基苯 (1g， 4.63mmol)、 哌嗪 -1- 甲酸叔丁酯 (1.12g， 6.02mmol) 和叔丁醇钠 (1.068g， 11.11mmol) 加入到 5mL 甲苯， 并在 60℃搅拌 30 分钟。向此混合物加 入第一烧瓶的内容物， 并在 60℃继续搅拌 3 小时。使溶剂蒸发， 残余物用二氯甲烷 - 甲醇 (0 至 100％ ) 通过硅胶层析纯化， 得到标题化合物 (0.145g)。
     1.2 4-(5- 氨基 -2- 甲基 - 苯基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁酯
     使 4-(2- 甲基 -5- 硝基 - 苯基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁酯 (0.145g， 0.45mmol) 溶于 10mL 乙醇和 10mL 水的混合物。加入甲酸铵 (0.284g， 0.4mmol) 和 10％ Pd/C(0.048g)， 并在 40℃搅拌反应混合物 8 小时。 然后， 通过 Celite 过滤反应混合物， 使溶剂蒸发， 得到 0.064g 标题化合物， 该化合物用于随后步骤， 不用进一步纯化。
     1.3 4-[5-(3- 二氟甲氧基 - 苯磺酰氨基 )-2- 甲基 - 苯基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁酯
     使 4-(5- 氨基 -2- 甲基 - 苯基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁酯 (0.065g， 0.222mmol) 溶于 5ml 吡啶。加入 3-( 二氟甲氧基 )- 苯 - 磺酰氯 (0.051g， 0.212mmol)， 并将反应混合物在室温搅拌 16 小时。使溶剂蒸发， 残余物用二氯甲烷 - 甲醇 (0-20％ ) 通过硅胶层析纯化， 得到 标题化合物 (0.097mg)。
     II. 制备化合物 I
     实施例 1 ：
     3- 二氟甲氧基 -N-(4- 甲基 -3- 哌嗪 -1- 基 - 苯基 )- 苯磺酰胺盐酸盐
     使 4-[5-(3- 二氟甲氧基 - 苯磺酰氨基 )-2- 甲基 - 苯基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁酯 (0.097g， 0.195mmol) 溶于 5mL 二氯甲烷。加入 0.293mL 2N 盐酸在乙醚中的溶液， 并在室 温搅拌混合物 16 小时。使溶剂蒸发， 残余物通过反相 HPLC 纯化， 将包含产物的级分合并。 pH 用碳酸氢钠水溶液调节到 9， 含水层用二氯甲烷萃取。然后， 有机相经硫酸镁干燥， 过滤， 并蒸发至干。残余物用 2N 盐酸在乙醚中的溶液处理， 混合物蒸发至干， 得到标题化合物 (0.017mg)。
     ESI-MS ： 398.1[M+H]+ ； 1
     H-NMR(DMSO-d 6 ， 400Hz) ： δ [ppm]10.2(s ， 1H) ， 8.7(s 宽， 2H) ， 7.6(m ， 2H) ， 7.4-7.5(m， 2H)， 7.25(t， 1H)， 7.05(d， 1H)， 6.8(s， 1H)， 6.7(d， 1H)， 3.2( 宽， 4H)， 2.9( 宽， 4H)， 2.15(s， 3H).
     实施例 2 ：
     N-(3-[1， 4] 二氮杂环庚 -1- 基 -4- 甲基 - 苯基 )-2- 二氟甲氧基 - 苯磺酰胺盐酸 盐
     类似于制备上述实施例 1 制备标题化合物。
     ESI-MS ： 412.1[M+H]+ 1
     H-NMR(DMSO-d 6， 400Hz) ： δ [ppm]10.2(s ， 1H) ， 9.55( 宽， 2H) ， 7.87(d ， 1H) ， 7.65(m， 1H)， 7.35(m， 2H)， 7.3(t， 1H)， 6.95(d， 1H)， 6.85(s， 1H)， 6.7(d， 1H)， 3.1-3.3(m， 6H)， 2.95(m， 2H)， 2.1(s， 3H)， 2.0(m， 2H).
     实施例 3 ：
     N-(3-[1， 4] 二氮杂环庚 -1- 基 -4- 甲基 - 苯基 )-3- 二氟甲氧基 -N- 甲基 - 苯磺
     酰胺盐酸盐
     由以下制备标题化合物 ： 在氢化钠存在下， 用甲基碘作为烷化剂， 用类似于制备实 施例 1 的标题化合物的制备方式制备 4-[5-(3- 二氟甲氧基 - 苯磺酰氨基 )-2- 甲基 - 苯 基 ]-[1， 4] 二氮杂环庚烷 -1- 甲酸叔丁酯， 然后去除氨基保护基 Boc。 +
     ESI-MS ： 426.1[M+H] 1
     H-NMR(DMSO-d 6， 400Hz) ： δ [ppm]9.75( 宽， 2H) ， 7.77(m ， 1H) ， 7.55(m ， 1H) ， 7.4(d， 1H)， 7.3(t， 1H)， 7.23(m， 1H)， 7.12(d， 1H)， 6.75(s， 1H)， 6.7(d， 1H)， 4.05(m， 2H)， 3.15-3.5( 数个 m， 8H)， 3.13(s， 3H)， 2.95(m， 2H)， 2.25(s， 3H)， 2.0(m， 2H).
     实施例 4 ：
     N-(3-[1， 4] 二氮杂环庚 -1- 基 -4- 甲基 - 苯基 )-3- 二氟甲氧基 - 苯磺酰胺盐酸 盐
     类似于制备上述实施例 1 制备标题化合物。
     ESI-MS ： 412.1[M+H]+ 1
     H-NMR(DMSO-d6， 400Hz) ： δ[ppm]10.3(s， 1H)， 9.5( 宽， 2H)， 7.6(m， 2H)， 7.52(s， 1H)， 7.4(m， 1H)， 7.3(t， 1H)， 7.0(d， 1H)， 6.85(s， 1H)， 6.7(d， 1H)， 3.1-3.3( 数 个 m， 6H)， 2.95(m， 2H)， 2.1(s， 3H)， 2.0(m， 2H).
     实施例 5 ：
     2- 二氟甲氧基 -N-[4- 甲基 -3-(4- 甲基 -[1， 4] 二氮杂环庚烷 -1- 基 )- 苯基 ]- 苯 磺酰胺盐酸盐
     利用甲醛水溶液和乙腈中的硼氢化钠作为溶剂， 在还原性胺化条件下， 从实施例 2 的标题化合物制备标题化合物。
     ESI-MS ： 426,2[M+H]+ 1
     H-NMR(DMSO-d 6， 400Hz) ： δ[ppm]10.8( 宽， 1H)， 10.15( 宽， 1H)， 7.87(d， 1H)， 7.65(m， 1H)， 7.35(m， 2H)， 7.28(t， 1H)， 6.95(d， 1H)， 6.83(s， 1H)， 6.67(d， 1H)， 3.1-3.6(m， 6H)， 2.95(m， 2H)， 2.8(s， 3H)， 2.2(s， 3H)， 2.0-2.2(m， 2H).
     III. 生物学研究
     置换结合到以下克隆人受体的放射性配体
     1. 通过超声处理和差速离心制备膜
     用 PBS(w/o Ca++， Mg++) 洗涤来自表达相应受体 (5-HT6、 α1- 肾上腺素能、 多巴胺 D2 或组胺 H1 受体 ) 的稳定克隆细胞系的细胞， 并收获在具有 0.02％ EDTA 的 PBS 中。通过在 4℃于 500g 离心 10 分钟而收集细胞， 用 PBS 洗涤， 并离心 (500g， 10 分钟， 4℃ )。将粒状物 在 -80℃储存， 直至使用。为了制备膜， 使解冻的细胞粒状物重新悬浮于冰冷的蔗糖缓冲液 (0.25M 蔗糖、 10mM Hepes(pH 7.4)、 1mM 在 DMSO 中的苯基甲基磺酰基氟 (PMSF)、 5μg/ml 胃 酶抑素 (Pepstatin)-A、 3mMEDTA、 0.025 ％杆菌肽素 )， 并用 Branson Sonifier W-250( 设 置： 计时器 4 ； 输出控制 3 ； 负载循环常数 ； 2 至 3 个循环 ) 均化。借助于显微镜检查细胞破 坏。 将其余未破坏细胞在 1.000g 在 4℃造粒 10 分钟。 然后， 将蔗糖缓冲液上清液在 60.000g 在 4℃离心 1 小时 (Beckman Ultrazentrifuge XL 80)。通过 10ml 血清学移液管移液， 使 粒状物重新悬浮于 30ml 冰冷的 Tris 缓冲液 (20mM TRIS(pH 7.4)， 5μg/ml 胃酶抑素 A， 0.1mM PMSF， 3mM EDTA)， 并在 60.000g 在 4℃离心 1 小时。通过血清学移液管加压， 在小体 积冰冷的 Tris 缓冲液 ( 见上 ) 中进行最后重新悬浮， 随后用 Branson Sonifier W-250( 设 置： 计时器 1 ； 输出控制 3 ； 负载循环常数 ； 1 个循环 ) 超声处理。测定蛋白浓度 (BCA-Kit ； Pierce)， 并将等分试样储存于 -80℃或液氮中用于长期储存。
     2. 受体结合试验
     在不同浓度的试验化合物 (10-5M 至 10-9M， 十倍连续稀释， 二重测定 ) 存在下， 在总体积 200μl 的相应的测定缓冲液中进行所有受体结合试验。利用 Tomtec MachIII U 96 孔板收集器， 通过在聚乙烯亚胺 (PEI， 0.1 ％或 0.3 ％ ) 预浸的 Packard Unifilter Plates(GF/C 或 GF/B) 上 过 滤 而 终 止 测 定。 在 板 在 干 燥 室 中 于 55 ℃ 干 燥 2 小 时 后， 加 入 闪 烁 混 合 液 (BetaPlate Scint ； PerkinElmer)。 在 加 入 闪 烁 混 合 物 后 2 小 时， 在 Microbeta Trilux 中测量放射性。利用 Statistical Analysis System(SAS) 通过迭代 非线性回归分析法分析从液体闪烁计数得到的数据， 所述 SAS 是一个类似于如 Munson 和 Rodbard(Analytical Biochemistry 107， 220-239(1980)) 所述 “LIGAND” 的软件。
     a)5-HT6 受体结合测定
     在补充 25mM HEPES、 10％胎牛血清和 1-2mM 谷氨酰胺的 RPMI1640 培养基中培养稳 定表达 h-5-HT6 受体的 HEK293 细胞 (NCBI 参考序列 XM 001435)。 如部分 1 中所述进行膜制 3 备。 对于这些膜， 通过饱和结合试验测定对于 H-LSD( 麦角酸二乙酰胺 ； Amersham， TRK1038) 的 1.95nM 的 KD。在测定当天， 将膜解冻， 在测定缓冲液 (50mM Tris-HCl， 5mM MgCl2， 0.1％ 抗坏血酸， 10μM 帕吉林， pH 7.4) 中稀释到 8μg 蛋白 / 测定的浓度， 并通过轻轻涡旋而均 化。对于抑制研究， 在测定缓冲液中在不同浓度试验化合物存在下培养 1nM[3H]- 麦角酸二 乙酰胺。非特异性结合用 1μM 美赛西平限定。结合反应在室温进行 3.5 小时。在培养期 间， 将板在板摇动器上于 100rpm 摇动， 并通过在 Packard Unifilter GF/C(0.1％ PEI) 板上 过滤而终止， 随后是用冰冷的 50mM Tris-HCl， 5mM CaCl2 的 2 个洗涤循环。
     b) 多巴胺 D2 受体结合测定
     在补充 25mM HEPES、 10％胎牛血清和 1-2mM 谷氨酰胺的 RPMI1640 培养基中培养稳 定表达多巴胺 D2 受体的 HEK293 细胞 (NCBI 参考序列 NM_000795)。如部分 1 中所述进行膜 制备。 对于这些膜， 通过饱和结合试验测定对于 [125I]- 碘代螺环哌啶酮 (PerkinElmer Life Sciences， NEX284) 的 0.22nM 的 KD。 在测定当天， 将膜解冻， 在测定缓冲液 (50mM Tris-HCl， 120mM NaCl， 5mM MgCl2， 5mM KCl， 1.5mM CaCl2， pH 7.4) 中稀释到 15μg 蛋白 / 测定的浓 度， 并通过轻轻涡旋而均化。对于抑制研究， 在测定缓冲液中在不同浓度试验化合物存在 125 下培养 0.01nM[ I]- 碘代螺环哌啶酮 (PerkinElmer Life Sciences， NEX284)。非特异性 结合用 1μM 氟哌啶醇限定。结合反应在室温进行 1 小时， 通过在 Packard Unifilter GF/ B(0.1％ PEI) 板上过滤而终止， 随后是用冰冷的 7％聚乙二醇溶液的 6 个洗涤循环。
     c)α1- 肾上腺素能受体结合测定
     在补充 25mM HEPES、 10％胎牛血清和 1-2mM 谷氨酰胺的 RPMI1640 培养基中培养 稳定表达 α1- 肾上腺素能受体的 CHO-K1 细胞 (NCBI 参考序列 NM_033303)。如部分 1 中所 述进行膜制备。对于这些膜， 通过饱和结合试验测定对于 [3H]- 哌唑嗪 (PerkinElmer Life Sciences， NET823) 的 0.12nM 的 KD。 在测定当天， 将膜解冻， 在测定缓冲液 (50mM Tris-HCl， pH 7.4) 中稀释到 4μg 蛋白 / 测定的浓度， 并通过轻轻涡旋而均化。对于抑制研究， 在 3 测定缓冲液中在不同浓度试验化合物存在下培养 0.1nM[ H]- 哌唑嗪 (PerkinElmer Life Sciences， NET823)。非特异性结合用 1μM 酚妥拉明限定。结合反应在室温进行 1 小时， 通 过在 Packard Unifilter GF/C(0.1％ PEI) 板上过滤而终止， 随后是用冰冷的测定缓冲液的 3 个洗涤循环。
     d)H1 受体结合测定
     在补充 25mM HEPES、 10％胎牛血清和 1-2mM 谷氨酰胺的 RPMI1640 培养基中培养 稳定表达组胺 H1 受体的 CHO-K1 细胞 (Euroscreen-ES-390-C， NCBI 参考序列 NM_000861)。 如部分 1 中所述进行膜制备。对于这些膜， 通过饱和结合试验测定对于 [3H]- 吡拉明 (PerkinElmer Life Sciences， NET594) 的 0.83nM 的 KD。在测定当天， 将膜解冻， 在测定缓 冲液 (50mM Na2HPO4， 50mM KH2PO4， pH 7.4) 中稀释到 6μg 蛋白 / 测定的浓度， 并通过轻轻涡 旋而均化。对于抑制研究， 在测定缓冲液中在不同浓度试验化合物存在下培养 1nM[3H]- 吡 拉明 (PerkinElmer Life Sciences， NET594)。非特异性结合用 1μM 吡拉明限定。结合反 应在室温进行 50 分钟， 通过在 Packard Unifilter GF/C(0.3％ PEI) 板上过滤而终止， 随后是用冰冷的测定缓冲液的 2 个洗涤循环。
     3. 数据分析
     利用 Statistical Analysis System(SAS)， 通过迭代非线性回归分析法分析从液 体闪烁计数得到的数据， 所述 SAS 是一个类似于如 Munson 和 Rodbard(Anal.Biochem.1980， 107， 220-239) 所述 “LIGAND” 的软件。 拟合根据 Feldman(Anal.Biochem.1972， 48， 317-338) 所述的公式进行。将 IC50、 nH 和 Ki 值表示为几何平均。关于对试验化合物具有低亲合性的 受体， 其中试验的最高化合物浓度抑制小于 30％的特异性放射性配体结合， Ki 值根据 Cheng 和 Prusoff(Biochem.Pharmacol.1973， 22， 2099-2108) 的公式测定， 并表示为大于 ( ＞ )。
     受体结合研究的结果分别表示为如本文前述的受体结合常数 Ki(5-HT6)、 Ki(D2)、 Ki(α1- 肾上腺素能 ) 和 Ki(H1)， 并在表 I 中给出。
     在这些试验中， 本发明的化合物显示对 5-HT6 受体非常好的亲合性 (Ki ＜ 250nM 或 ＜ 50nM 或＜ 20nM， 通常＜ 10nM)。另外， 和对于 D2、 α1- 肾上腺素能或 H1 受体的亲合性比 较， 这些化合物选择性结合到 5-HT6 受体。这些化合物对 D2、 α1- 肾上腺素能或 H1 受体几 乎不显示亲合性 (Ki ＞ 250nM 或＞ 1000nM， 通常＞ 10000nM)。
     实施例 1 ： Ki(5HT6) ＜ 20nM
     实施例 2 ： Ki(5HT6) ＜ 50nM
     实施例 3 ： Ki(5HT6) ＜ 250nM
     实施例 4 ： Ki(5HT6) ＜ 20nM
     实施例 5 ： Ki(5HT6) ＜ 20nM
     4. 测定代谢稳定性
     通过分析微粒体半衰期， 在以下测定中测定本发明的化合物的代谢稳定性。如下 在 0.5μM 浓度培养试验物质 ：
     于 37℃在微量滴定板中， 将 0.5μM 试验物质与不同物种的肝微粒体 (0.25mg 蛋 白 /ml) 在 0.05M 磷酸钾缓冲液 pH 7.4 中预培养 5 分钟。通过加入 NADPH(1mg/mL) 开始反 应。在 0、 5、 10、 15、 20 和 30 分钟后取等分试样， 反应用相同体积的乙腈终止， 并冷却。其余 试验化合物浓度通过液相色谱 - 质谱分析测定。固有清除值用试验化合物消耗的消除速率 常数计算。35