一种显微受精用移卵针的制备方法及其制备的移卵针.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201010518105.8

申请日:

2010.10.25

公开号:

CN102451047A

公开日:

2012.05.16

当前法律状态:

撤回

有效性:

无权

法律详情:

发明专利申请公布后的视为撤回IPC(主分类):A61D 19/02申请公布日:20120516|||公开

IPC分类号:

A61D19/02

主分类号:

A61D19/02

申请人:

陈浩杰

发明人:

陈浩杰

地址:

215400 江苏省苏州市太仓市城厢镇大庆锦绣新城涵乐苑17幢304室

优先权:

专利代理机构:

北京连和连知识产权代理有限公司 11278

代理人:

贺小明

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内容摘要

本发明提供一种显微受精用移卵针的制备方法及其制备的移卵针。其方法主要包含步骤:将玻璃管在清洁液中浸泡,取出后用自来水反复冲洗;用Milli-Q水浸洗,放入烘箱,56℃~60℃烘干;将烘干的玻璃管在加热灯上加热,当加热部分颜色发红并变得很柔软后,移出火焰并向两端牵拉,拉制成为孔径的微管;将制备的微管在合适的部位断开,并将断口在加热灯上烧平滑,制得所述显微受精用移卵针。根据上述的方法制备的移卵针,其孔径为本发明提供的显微受精用移卵针的制备方法简单、成本低且制备的该移卵针质量稳定。

权利要求书

1: 一种显微受精用移卵针的制备方法, 其特征在于, 包含步骤 : 1) 将玻璃管在清洁液中浸泡, 取出后用自来水反复冲洗 ; 2) 用 Milli-Q 水浸洗, 放入烘箱, 56℃~ 60℃烘干 ; 3) 将烘干的玻璃管在加热灯上加热, 当加热部分颜色发红并变得很柔软后, 移出火焰 并向两端牵拉, 拉制成为 的微管 ; 4) 将步骤 3) 制备的微管在合适的部位断开, 并将断口在加热灯上烧平滑, 制得所述移 卵针。
2: 根据权利要求 1 所述的方法, 其特征在于, 步骤 1) 所述玻璃管的直径为 0.25 ~ 0.35cm。
3: 根据权利要求 1 所述的方法, 其特征在于, 步骤 1) 所述清洁液含有重铬酸钾 63g、 浓 硫酸 1000ml、 蒸馏水 200ml。
4: 根据权利要求 1 所述的方法, 其特征在于, 步骤 1) 所述玻璃管在清洁液中浸泡 24 小 时。
5: 权利要求 1 所述的方法制备的显微受精用移卵针。
6: 根据权利要求 5 所述的移卵针, 其特征在于, 其孔径为

说明书


一种显微受精用移卵针的制备方法及其制备的移卵针

    技术领域 本发明涉及一种显微受精用操作工具, 尤其涉及一种显微受精用移卵针的制备方 法及其制备的移卵针。
     背景技术 在目前, 显微操作系统已广泛应用于生物工程领域, 而在实验过程中制作出符合 要求的显微操作针对于实验的正确操作尤其重要。
     显微操作工具尤其是移卵针的质量是影响胚胎质量的重要因素。 选择合适的移卵 针, 可将胚胎的损伤降到最低限度。避免对卵子造成损伤。
     因此, 有必要提供一种简单易行且质量稳定的移卵针的制备方法, 以制备耐用、 高 质量的移卵针。
     发明内容
     本发明的目的在于提供一种显微受精用移卵针的制备方法, 其主要包含步骤 :
     1) 将玻璃管在清洁液中浸泡, 取出后用自来水反复冲洗 ;
     2) 用 Milli-Q 水浸洗, 放入烘箱, 56℃~ 60℃烘干 ;
     3) 将烘干的玻璃管在加热灯上加热, 当加热部分颜色发红并变得很柔软后, 移出 火焰并向两端牵拉, 拉制成为
     的微管 ;4) 将步骤 3) 制备的微管在合适的部位断开, 并将断口在加热灯上烧平滑, 制得所 述移卵针。
     所述的方法, 步骤 1) 所述玻璃管的直径为 0.25 ~ 0.35cm。所述清洁液含有重铬 酸钾 63g、 浓硫酸 1000ml、 蒸馏水 200ml。
     所述的方法, 步骤 1) 中, 将玻璃管在清洁液中浸泡 24 小时。
     本发明还提供根据上述方法制备的移卵针。其孔径为 本发明提供的显微受精用移卵针的制备方法简单、 成本低且制备的该移卵针质量稳定。
     为让本发明的上述和其它目的、 特征和优点能更明显易懂, 下文特举较佳实施例, 作详细说明如下。具体实施方式
     取直径为 0.25 ~ 0.35cm 将玻璃管在清洁液中浸泡 24 小时, 清洁液含有重铬酸钾 63g、 浓硫酸 1000ml、 蒸馏水 200ml, 取出后用自来水反复冲洗 ; 然后用 Milli-Q 水浸洗, 放入 烘箱, 56℃~ 60℃烘干 ; 烘干后, 取出放入干净的锥形瓶中, 用锡箔纸盖上, 避免落入灰尘。
     将烘干的玻璃管在加热灯上加热, 当加热部分颜色发红并变得很柔软后, 移出火 焰并迅速向两端牵拉, 拉制成为
     的微管。根据实际操作的需要, 将制备的微管在合适的部位断开, 并将断口在加热灯上烧平滑, 管口光滑平整以减轻插入输卵管时对输卵管的损伤, 同时必须注意移卵管头在火焰 上时间不可太长, 防止融化堵塞。管口要平且钝化。
     根据上述方法制备的显微受精用移卵针, 其孔径为在显微注射前, 可以应用移卵针移动卵母细胞, 将 5-10 枚卵母细胞移入操作液滴 中, 然后用注射针抓取一个精子放入液滴中, 用针尖在精子尾部迅速划过进行制动, 随后从 尾部吸入注射针内。
     在用移卵针将注射后受精卵转移到假孕母体内时, 从孵箱中取出受精卵, 用移卵 针吸出受精卵并用 M2 溶液洗涤 2-3 次, 调整实验用量, 将其置于凹玻片的 M2 溶液中, 调焦 使在低倍镜下清楚地看到受精卵的轮廓, 并且保证受精卵有足够空间自由移动, 用持卵器 将卵汇聚到一起, 移卵时注意不要将气泡移入, 影响操作视野。
     在对卵母细胞进行冷冻处理时, 也可以应用本发明的移卵针来移动卵母细胞 : 用 吸管按顺序吸入 0.5mol 蔗糖溶液 (5.5cm) →空气 (1.5cm) →玻璃化溶液 (0.5cm) →空气 (0.5cm) →玻璃化溶液 (1.5cm), 平行放置于操作台上, 将卵母细胞用移卵针移入玻璃化溶 液中洗一次, 然后将 10 枚卵母细胞置于细管中的玻璃化溶液中, 卵母细胞导入后依次再吸 入空气 (0.5cm) →玻璃化溶液 (0.5cm) →空气 (0.5cm), 最后吸 0.5mol 蔗糖溶液 (1cm)。 用 封口机将塑料细管封口。将含有卵母细胞的细管一端直接投入液氮, 另一半用液氮气熏蒸 冷冻, 待蔗糖部分冻结后转入液氮罐中长期保存。
     应用该移卵针时, 还能插入输卵管壶腹部靠进伞部开口的弯曲部位, 吹入含有胚 胎的操作液, 大幅缩短了操作周期, 且对输卵管的损伤小。
     本发明提供的显微受精用移卵针的制备方法简单、 成本低且制备的该移卵针质量 稳定。
     虽然本发明已以较佳实施例披露如上, 然其并非用以限定本发明, 任何所属技术 领域的技术人员, 在不脱离本发明的精神和范围内, 当可作些许的更动与改进, 因此本发明 的保护范围当视权利要求所界定者为准。4

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1、10申请公布号CN102451047A43申请公布日20120516CN102451047ACN102451047A21申请号201010518105822申请日20101025A61D19/0220060171申请人陈浩杰地址215400江苏省苏州市太仓市城厢镇大庆锦绣新城涵乐苑17幢304室72发明人陈浩杰74专利代理机构北京连和连知识产权代理有限公司11278代理人贺小明54发明名称一种显微受精用移卵针的制备方法及其制备的移卵针57摘要本发明提供一种显微受精用移卵针的制备方法及其制备的移卵针。其方法主要包含步骤将玻璃管在清洁液中浸泡,取出后用自来水反复冲洗;用MILLIQ水浸洗,放入烘箱。

2、,5660烘干;将烘干的玻璃管在加热灯上加热,当加热部分颜色发红并变得很柔软后,移出火焰并向两端牵拉,拉制成为孔径的微管;将制备的微管在合适的部位断开,并将断口在加热灯上烧平滑,制得所述显微受精用移卵针。根据上述的方法制备的移卵针,其孔径为本发明提供的显微受精用移卵针的制备方法简单、成本低且制备的该移卵针质量稳定。51INTCL权利要求书1页说明书2页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页1/1页21一种显微受精用移卵针的制备方法,其特征在于,包含步骤1将玻璃管在清洁液中浸泡,取出后用自来水反复冲洗;2用MILLIQ水浸洗,放入烘箱,5660烘干;3将烘干的玻。

3、璃管在加热灯上加热,当加热部分颜色发红并变得很柔软后,移出火焰并向两端牵拉,拉制成为的微管;4将步骤3制备的微管在合适的部位断开,并将断口在加热灯上烧平滑,制得所述移卵针。2根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1所述玻璃管的直径为025035CM。3根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1所述清洁液含有重铬酸钾63G、浓硫酸1000ML、蒸馏水200ML。4根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1所述玻璃管在清洁液中浸泡24小时。5权利要求1所述的方法制备的显微受精用移卵针。6根据权利要求5所述的移卵针,其特征在于,其孔径为权利要求书CN102451047A1/2页3一种显微受精。

4、用移卵针的制备方法及其制备的移卵针技术领域0001本发明涉及一种显微受精用操作工具,尤其涉及一种显微受精用移卵针的制备方法及其制备的移卵针。背景技术0002在目前,显微操作系统已广泛应用于生物工程领域,而在实验过程中制作出符合要求的显微操作针对于实验的正确操作尤其重要。0003显微操作工具尤其是移卵针的质量是影响胚胎质量的重要因素。选择合适的移卵针,可将胚胎的损伤降到最低限度。避免对卵子造成损伤。0004因此,有必要提供一种简单易行且质量稳定的移卵针的制备方法,以制备耐用、高质量的移卵针。发明内容0005本发明的目的在于提供一种显微受精用移卵针的制备方法,其主要包含步骤00061将玻璃管在清洁。

5、液中浸泡,取出后用自来水反复冲洗;00072用MILLIQ水浸洗,放入烘箱,5660烘干;00083将烘干的玻璃管在加热灯上加热,当加热部分颜色发红并变得很柔软后,移出火焰并向两端牵拉,拉制成为的微管;00094将步骤3制备的微管在合适的部位断开,并将断口在加热灯上烧平滑,制得所述移卵针。0010所述的方法,步骤1所述玻璃管的直径为025035CM。所述清洁液含有重铬酸钾63G、浓硫酸1000ML、蒸馏水200ML。0011所述的方法,步骤1中,将玻璃管在清洁液中浸泡24小时。0012本发明还提供根据上述方法制备的移卵针。其孔径为0013本发明提供的显微受精用移卵针的制备方法简单、成本低且制备。

6、的该移卵针质量稳定。0014为让本发明的上述和其它目的、特征和优点能更明显易懂,下文特举较佳实施例,作详细说明如下。具体实施方式0015取直径为025035CM将玻璃管在清洁液中浸泡24小时,清洁液含有重铬酸钾63G、浓硫酸1000ML、蒸馏水200ML,取出后用自来水反复冲洗;然后用MILLIQ水浸洗,放入烘箱,5660烘干;烘干后,取出放入干净的锥形瓶中,用锡箔纸盖上,避免落入灰尘。0016将烘干的玻璃管在加热灯上加热,当加热部分颜色发红并变得很柔软后,移出火焰并迅速向两端牵拉,拉制成为的微管。0017根据实际操作的需要,将制备的微管在合适的部位断开,并将断口在加热灯上烧说明书CN1024。

7、51047A2/2页4平滑,管口光滑平整以减轻插入输卵管时对输卵管的损伤,同时必须注意移卵管头在火焰上时间不可太长,防止融化堵塞。管口要平且钝化。0018根据上述方法制备的显微受精用移卵针,其孔径为0019在显微注射前,可以应用移卵针移动卵母细胞,将510枚卵母细胞移入操作液滴中,然后用注射针抓取一个精子放入液滴中,用针尖在精子尾部迅速划过进行制动,随后从尾部吸入注射针内。0020在用移卵针将注射后受精卵转移到假孕母体内时,从孵箱中取出受精卵,用移卵针吸出受精卵并用M2溶液洗涤23次,调整实验用量,将其置于凹玻片的M2溶液中,调焦使在低倍镜下清楚地看到受精卵的轮廓,并且保证受精卵有足够空间自由。

8、移动,用持卵器将卵汇聚到一起,移卵时注意不要将气泡移入,影响操作视野。0021在对卵母细胞进行冷冻处理时,也可以应用本发明的移卵针来移动卵母细胞用吸管按顺序吸入05MOL蔗糖溶液55CM空气15CM玻璃化溶液05CM空气05CM玻璃化溶液15CM,平行放置于操作台上,将卵母细胞用移卵针移入玻璃化溶液中洗一次,然后将10枚卵母细胞置于细管中的玻璃化溶液中,卵母细胞导入后依次再吸入空气05CM玻璃化溶液05CM空气05CM,最后吸05MOL蔗糖溶液1CM。用封口机将塑料细管封口。将含有卵母细胞的细管一端直接投入液氮,另一半用液氮气熏蒸冷冻,待蔗糖部分冻结后转入液氮罐中长期保存。0022应用该移卵针时,还能插入输卵管壶腹部靠进伞部开口的弯曲部位,吹入含有胚胎的操作液,大幅缩短了操作周期,且对输卵管的损伤小。0023本发明提供的显微受精用移卵针的制备方法简单、成本低且制备的该移卵针质量稳定。0024虽然本发明已以较佳实施例披露如上,然其并非用以限定本发明,任何所属技术领域的技术人员,在不脱离本发明的精神和范围内,当可作些许的更动与改进,因此本发明的保护范围当视权利要求所界定者为准。说明书CN102451047A。

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