取代的苯基 ( 氧基 / 硫基 ) 烷醇衍生物 本发明涉及一种新型取代的苯基 ( 氧基 / 硫基 ) 烷醇衍生物、 制备这些化合物的 方法、 含有这些化合物的组合物及其作为生物活性化合物的应用， 特别是用于在作物保护 和材料保护中控制有害微生物以及作为植物生长调节剂。
已知的是， 某些苯基 ( 氧基 / 硫基 ) 烷醇衍生物可作为杀真菌剂和 / 或生长调节 剂用于作物保护 ( 参见 ： DE-A 39 05 317、 JP-A58-124772、 EP-A 0 298 332、 EP-A 0 028 755、 EP-A 0 061 835、 EP-A 0 040 345、 EP-A 0 001 399、 EP-A 0 297 383、 EP-A 0 793 657 和 EP-A 0 594 963)。
由于对现代活性化合物， 如杀真菌剂在生态和经济上的要求不断增加， 如活性谱、 毒性、 选择性、 施用率、 残留的形成和有利的制备方面， 此外还有其它问题， 如具有抗性， 因 而需要不断开发至少在某些方面优于现有化合物的新型杀真菌剂。
本发明提供新型式 (I) 的取代的苯基 ( 氧基 / 硫基 ) 烷醇衍生物及其农用化学活 性盐，
其中
X 表示 5- 嘧啶基、 1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基、 3- 吡啶基、 1H-1， 3- 咪唑 -1- 基甲 基或 2， 4- 二氢 -3H-1， 2， 4- 三唑 -3- 亚硫酰 -1- 基甲基，
Y 表示 O、 S、 SO、 SO2 或 CH2， 1
Z 表示溴、 碘或三氟甲基， 2 3
Z 和 Z 彼此独立地表示卤素、 C1-C4- 烷基、 C1-C4- 烷氧基、 C1-C4- 烷硫基、 C1-C4- 卤 代烷基、 C1-C4- 卤代烷氧基或 C1-C4- 卤代烷硫基，
n 表示 0 或 1，
R 表示叔丁基、 异丙基、 1- 卤代环丙基、 1-(C1-C4- 烷基 ) 环丙基、 1-(C1-C4- 烷氧基 ) 环丙基或 1-(C1-C4- 烷硫基 ) 环丙基，
下述化合物除外 ：
1-(3- 溴 -2- 氯苯氧基 )-3， 3- 二甲基 -2-(1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基 ) 丁 -2- 醇，
1-(4- 溴 -2- 氯苯氧基 )-3， 3- 二甲基 -2-(1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基 ) 丁 -2- 醇，
4-(3- 溴 -4- 氟苯基 )-2-(1- 氯环丙基 )-1-(1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基 ) 丁 -2- 醇，
1-[3， 5- 双 ( 三氟甲基 ) 苯基 ]-4， 4- 二甲基 -3-(1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基 ) 戊 -3- 醇。
由这种方式获得的盐也具有杀真菌和 / 或调节植物生长的特性。
式 (I) 提供了可根据本发明使用的苯基 ( 氧基 / 硫基 ) 烷醇衍生物的一般定义。 如上和如下所示的式中优选的基团的定义如下所示。这些定义适用于式 (I) 的终产物， 也
同样适用于所有的中间体 ( 参见下文 “方法和中间体的说明” 项下 )。
X 优选表示 5- 嘧啶基、 1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基、 3- 吡啶基或 2， 4- 二氢 -3H-1， 2， 4- 三唑 -3- 亚硫酰 -1- 基甲基。
X 特别优选表示 5- 嘧啶基。
X 也特别优选表示 1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基。
X 也特别优选表示 2， 4- 二氢 -3H-1， 2， 4- 三唑 -3- 亚硫酰 -1- 基甲基。
X 极特别优选表示 5- 嘧啶基。
X 也极特别优选表示 1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基。
Y 优选表示 O、 S 或 CH2。
Y 特别优选表示 O 或 CH2。
Y表示 O。Z1 优选表示溴或碘。 Z1 特别优选表示溴。 Z1 也特别优选表示碘。 Z1 Z1 表示 4 位为溴。 表示 4 位为碘。Z2 优选表示氟、 氯、 溴、 碘、 甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 正、 异、 仲或叔丁基、 甲氧 基、 乙氧基、 甲硫基、 乙硫基、 三氟甲基、 三氯甲基、 二氟甲基、 二氯甲基、 三氟甲氧基或三氟 甲硫基。
Z2 特别优选表示 2 或 3 位为氟、 氯、 溴、 碘、 甲基、 甲氧基、 乙氧基、 甲硫基、 乙硫基、 三氟甲基、 三氟甲氧基或三氟甲硫基。
Z2表示 2 位或 3 位为氟、 氯、 甲基、 甲氧基、 甲硫基、 三氟甲基、 三氟甲氧基或三氟甲硫基。 Z3 优选表示氟、 氯、 溴、 碘、 甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 正、 异、 仲或叔丁基、 甲氧 基、 乙氧基、 甲硫基、 乙硫基、 三氟甲基、 三氯甲基、 二氟甲基、 二氯甲基、 三氟甲氧基或三氟 甲硫基。
Z3 特别优选表示氟、 氯、 溴、 碘、 甲基、 甲氧基、 乙氧基、 甲硫基、 乙硫基、 三氟甲基、 三氟甲氧基或三氟甲硫基。
Z3表示氟、 氯、 甲基、 甲氧基、 甲硫基、 三氟甲基、 三氟甲氧基或三氟甲硫基。 n 优选表示 0。
n 也优选表示 1。
n 特别优选表示 0。
R 优选表示叔丁基、 异丙基、 1- 氯环丙基、 1- 氟环丙基、 1- 甲基环丙基、 1- 甲氧基环 丙基或 1- 甲硫基环丙基。
R 特别优选表示叔丁基、 异丙基、 1- 氯环丙基、 1- 氟环丙基或 1- 甲基环丙基。
本发明进一步的实施方案涉及式 (I-a) 的化合物
其中， Y、 Z1、 Z2、 Z3、 n 和 R 的含义如上所述。 本发明进一步的实施方案涉及式 (I-b) 的化合物
其中， Y、 Z1、 Z2、 Z3、 n 和 R 的含义如上所述。 在式 (I-b) 中， n 在进一步的实施方案中表示 0。 本发明进一步的实施方案涉及式 (I-c) 的化合物
其中， Y、 Z1、 Z2、 Z3、 n 和 R 的含义如上所述。 本发明进一步的实施方案涉及式 (I-d) 的化合物
其中， Y、 Z1、 Z2、 Z3、 n 和 R 的含义如上所述。 在式 (I-d) 中， n 在进一步的实施方案中表示 0。 本发明进一步的实施方案涉及式 (I-e) 的化合物
其中， Y、 Z1、 Z2、 Z3、 n 和 R 的含义如上所述。 本发明进一步的实施方案涉及式 (I-f) 的化合物
其中， Y、 Z1、 Z2、 Z3、 n 和 R 的含义如上所述。 在式 (I-f) 中， n 在进一步的实施方案中表示 0。 本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴且 R 表示叔丁基。 本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴且 R 表示表示异丙基。 本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴且 R 表示 1- 氯环丙 本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴且 R 表示 1- 氟环丙 本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴且 R 表示 1- 甲基环 本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘且 R 表示叔丁基。 本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘且 R 表示异丙基。 本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘且 R 表示 1- 氯环丙 本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘且 R 表示 1- 氟环丙 本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘且 R 表示 1- 甲基环 本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基且 R 表示叔丁 本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基且 R 表示异丙 本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基且 R 表示 1- 氯 本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基且 R 表示 1- 氟基。
基。
丙基。
基。
基。
丙基。
基。
基。
环丙基。
环丙基。 本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基且 R 表示 1- 甲 基环丙基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示叔丁基且 X 表 示 5- 嘧啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示叔丁基且 X 表 示 1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示叔丁基且 X 表 示 3- 吡啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示叔丁基且 X 表
示 1H-1， 3- 咪唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示叔丁基且 X 表 示 2， 4- 二氢 -3H-1， 2， 4- 三唑 -3- 亚硫酰 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示异丙基且 X 表 示 5- 嘧啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示异丙基且 X 表 示 1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示异丙基且 X 表 示 3- 吡啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示异丙基且 X 表 示 1H-1， 3- 咪唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示异丙基且 X 表 示 2， 4- 二氢 -3H-1， 2， 4- 三唑 -3- 亚硫酰 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示 1- 氯环丙基 且 X 表示 5- 嘧啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示 1- 氯环丙基 且 X 表示 1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示 1- 氯环丙基 且 X 表示 3- 吡啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示 1- 氯环丙基 且 X 表示 1H-1， 3- 咪唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示 1- 氯环丙基 且 X 表示 2， 4- 二氢 -3H-1， 2， 4- 三唑 -3- 亚硫酰 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示 1- 氟环丙基 且 X 表示 5- 嘧啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示 1- 氟环丙基 且 X 表示 1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示 1- 氟环丙基 且 X 表示 3- 吡啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示 1- 氟环丙基 且 X 表示 1H-1， 3- 咪唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示溴， R 表示 1- 氟环丙基 且 X 表示 2， 4- 二氢 -3H-1， 2， 4- 三唑 -3- 亚硫酰 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示叔丁基且 X 表 示 5- 嘧啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示叔丁基且 X 表 示 1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示叔丁基且 X 表 示 3- 吡啶基。本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示叔丁基且 X 表 示 1H-1， 3- 咪唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示叔丁基且 X 表 示 2， 4- 二氢 -3H-1， 2， 4- 三唑 -3- 亚硫酰 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示异丙基且 X 表 示 5- 嘧啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示异丙基且 X 表 示 1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示异丙基且 X 表 示 3- 吡啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示异丙基且 X 表 示 1H-1， 3- 咪唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示异丙基且 X 表 示 2， 4- 二氢 -3H-1， 2， 4- 三唑 -3- 亚硫酰 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示 1- 氯环丙基 且 X 表示 5- 嘧啶基。 本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示 1- 氯环丙基 且 X 表示 1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示 1- 氯环丙基 且 X 表示 3- 吡啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示 1- 氯环丙基 且 X 表示 1H-1， 3- 咪唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示 1- 氯环丙基 且 X 表示 2， 4- 二氢 -3H-1， 2， 4- 三唑 -3- 亚硫酰 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示 1- 氟环丙基 且 X 表示 5- 嘧啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示 1- 氟环丙基 且 X 表示 1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示 1- 氟环丙基 且 X 表示 3- 吡啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示 1- 氟环丙基 且 X 表示 1H-1， 3- 咪唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示碘， R 表示 1- 氟环丙基 且 X 表示 2， 4- 二氢 -3H-1， 2， 4- 三唑 -3- 亚硫酰 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示叔丁基 且 X 表示 5- 嘧啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示叔丁基 且 X 表示 1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示叔丁基
且 X 表示 3- 吡啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示叔丁基 且 X 表示 1H-1， 3- 咪唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示叔丁基 且 X 表示 2， 4- 二氢 -3H-1， 2， 4- 三唑 -3- 亚硫酰 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示异丙基 且 X 表示 5- 嘧啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示异丙基 且 X 表示 1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示异丙基 且 X 表示 3- 吡啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示异丙基 且 X 表示 1H-1， 3- 咪唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示异丙基 且 X 表示 2， 4- 二氢 -3H-1， 2， 4- 三唑 -3- 亚硫酰 -1- 基甲基。 本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示 1- 氯 环丙基且 X 表示 5- 嘧啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示 1- 氯 环丙基且 X 表示 1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示 1- 氯 环丙基且 X 表示 3- 吡啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示 1- 氯 环丙基且 X 表示 1H-1， 3- 咪唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示 1- 氯 环丙基且 X 表示 2， 4- 二氢 -3H-1， 2， 4- 三唑 -3- 亚硫酰 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示 1- 氟 环丙基且 X 表示 5- 嘧啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示 1- 氟 环丙基且 X 表示 1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示 1- 氟 环丙基且 X 表示 3- 吡啶基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示 1- 氟 环丙基且 X 表示 1H-1， 3- 咪唑 -1- 基甲基。
本发明进一步的实施方案为式 (I) 的化合物， 其中 Z1 表示三氟甲基， R 表示 1- 氟 环丙基且 X 表示 2， 4- 二氢 -3H-1， 2， 4- 三唑 -3- 亚硫酰 -1- 基甲基。
然而， 在上述概述的或在优选的范围中所述的基团定义和说明也可根据需要彼此 组合， 即在各自范围和优选的范围之间。 它们同样适用于终产物以及相应的前体和中间体。 此外， 各自的定义不见得适用。
优选式 (I) 的化合物， 其中， 所有情况下所有基团具有上述优选的含义。
特别优选式 (I) 的化合物， 其中， 所有情况下所有基团具有上述特别优选的含义。
方法和中间体的说明
式 (I) 的苯基 ( 氧基 / 硫基 ) 烷醇衍生物可通过各种途径进行制备。首先， 可行 的方法如下图所示。除非另有说明， 给定的基团具有上述的定义。
上述和下述的化学式和反应路线中的优选的基团定义已如上所述。 这些定义不仅 适用于终产物， 也同样适用于所有的中间体。
方法 A
作为起始原料实施本发明方法 A 所需的式 (II) 的环氧乙烷衍生物是新的， 化合物 2-{2-[3， 5- 双 ( 三氟甲基 ) 苯基 ] 乙基 }-2- 叔丁基环氧乙烷除外。可通过已知的方法从 式 (VI) 的苯基氧基 ( 硫基 ) 酮制备 ( 参见 EP-A 0 040 345)。
式 (III) 的 1， 2， 4- 三唑和 1， 3- 咪唑是已知的。
在稀释剂存在下以及， 如合适， 在碱的存在下， 实施本发明的方法 A。如合适， 将酸 或金属盐加入到所获得的式 (I-g) 的化合物中 ( 见下述 )。
本发明反应适合的稀释剂为所有的惰性有机溶剂。这些优选包括醇， 如乙醇和甲 氧基乙醇 ； 酮， 如 2- 丁酮 ； 腈， 如乙腈 ； 酯， 如乙酸乙酯 ； 醚， 如二噁烷 ； 芳香烃， 如苯和甲苯 ； 或酰胺， 如二甲基甲酰胺。
本发明反应适合的碱为所有常规使用的有机和无机碱。 这些优选包括碱金属碳酸 盐， 如碳酸钠或碳酸钾 ； 碱金属氢氧化物， 如氢氧化钠 ； 碱金属醇盐， 如甲醇钠、 甲醇钾、 乙 醇钠和乙醇钾 ； 碱金属氢化物， 如氢化钠 ； 以及低级叔烷胺、 环烷胺和芳烷胺， 如特别为三 乙胺。
当实施本发明方法时， 反应温度可在相对较宽的范围内变化。 一般而言， 实施该方 法的温度为 0 ～ 200℃， 优选 60 ～ 150℃。
如合适， 本发明的反应在可加压下进行。一般而言， 在 1 ～ 50 巴， 优选 1 ～ 25 巴 下进行反应。
当根据本发明实施方法 A 时， 优选每摩尔通式 (II) 的环氧乙烷使用 1 ～ 2mol 的 式 (III) 的 1， 2， 4- 三唑， 以及如合适， 1 ～ 2mol 的碱。用常规方法分离终产物。
方法 B
作为起始原料实施本发明方法 B 所需的一些式 (IV) 的环氧乙烷衍生物是新的。 可 通过已知的方法从相应的三唑基酮中制备 ( 参见 DE-A31 11 238、 EP-A 0 157 712)。
式 (IV-a) 的环氧乙烷衍生物是新的，
其中，
Ra 表示异丙基、 1- 卤代环丙基、 1-(C1-C4- 烷基 ) 环丙基、 1-(C1-C4- 烷氧基 ) 环丙 基或 1-(C1-C4- 烷硫基 ) 环丙基，
A 表示 CH 或 N。
Ra 优选表示异丙基、 1- 氯环丙基、 1- 甲基环丙基、 1- 甲氧基环丙基或 1- 甲硫基环 丙基。
Ra 特别优选表示异丙基、 1- 氯环丙基或 1- 甲基环丙基。
Ra表示异丙基。式 (IV-b) 的环氧乙烷衍生物也同样是新的，
其中， R 的含义如上所述， 且 A 表示 CH 或 N， 其中， 如果 A 表示 CH， 那么 R 不表示叔丁基。 R 优选、 特别优选以及 上述给出的含义， 其中， 如果 A 表示 CH， 那么 R不表示叔丁基。
式 (V) 的 ( 硫代 ) 苯酚是已知的。
在稀释剂存在下以及， 如合适， 在碱的存在下， 实施本发明的方法 B。如合适， 将酸 或金属盐加入到所获得的式 (I-h) 的化合物中 ( 见下述 )。 本发明反应适合的稀释剂为所有的惰性有机溶剂。这些优选包括醇， 如乙醇和甲 氧基乙醇 ； 酮， 如 2- 丁酮 ； 腈， 如乙腈 ； 酯， 如乙酸乙酯 ； 醚， 如二噁烷 ； 芳香烃， 如苯和甲苯 ； 或酰胺， 如二甲基甲酰胺。
本发明反应适合的碱为所有常规使用的有机和无机碱。 这些优选包括碱金属碳酸 盐， 如碳酸钠或碳酸钾 ； 碱金属氢氧化物， 如氢氧化钠 ； 碱金属醇盐， 如甲醇钠、 甲醇钾、 乙 醇钠和乙醇钾 ； 碱金属氢化物， 如氢化钠 ； 以及低级叔烷胺、 环烷胺和芳烷胺， 如特别为三 乙胺。特别优选使用氢化钠。
当实施本发明方法时， 反应温度可在相对较宽的范围内变化。 一般而言， 实施该方 法的温度为 0 ～ 200℃， 优选 60 ～ 150℃。
如合适， 本发明的反应在可加压下进行。一般而言， 在 1 ～ 50 巴， 优选 1 ～ 25 巴 下进行反应。
当根据本发明实施方法 B 时， 优选每摩尔通式 (IV) 的环氧乙烷使用 1 ～ 2mol 的 式 (V) 的 ( 硫代 ) 苯酚， 以及如合适， 1 ～ 2mol 的碱。用常规方法分离终产物。
方法 C
作为起始原料实施本发明方法 C 所需的一些式 (VI) 的苯基 ( 氧基 / 硫基 ) 酮是 新的。可通过已知的方法进行制备 ( 参见 EP-A 0 040 345、 EP-A 0 001 399)。
式 (VII) 的卤化物是已知的。在式 (VII) 中， Hal 优选为氯或溴。
在稀释剂以及有机碱金属化合物的存在下， 实施本发明的方法 C。如合适， 将酸或 金属盐加入到所获得的式 (I-i) 的化合物中 ( 见下述 )。
本发明反应优选的稀释剂为惰性有机溶剂。这些优选包括低凝固点的有机溶剂， 如特别为醚， 如二乙醚或四氢呋喃。优选这两种醚的混合物。
用于本发明反应的优选的有机碱金属化合物为烷基碱金属， 如特别为正丁基锂 ； 然而， 还可使用芳基碱金属， 如苯基锂。
在本发明的方法中， 反应温度可在一定的范围内变化。 一般而言， 实施该方法的温 度为 -150 ～ -50℃， 优选 -120 ～ -80℃。 本发明的反应优选在惰性气体下进行， 如特别为氮气或氩气。
当实施本发明方法时， 式 (VI) 的苯基氧基 ( 硫基 ) 酮和式 (VII) 的卤化物约以等 摩尔的量进行反应 ； 然而， 还可低于或高于这一比例 20mol％。有机碱金属化合物的使用量 超过 5 ～ 75mol％为宜， 优选超过 10 ～ 50mol％。
本 申 请 中， 有 机 碱 金 属 化 合 物 可 最 初 与 式 (VII) 的 卤 化 物 进 行 反 应， 然后再 加 入 式 (VI) 的 酮 类 化 合 物 ； 然 而， 还 可 最 初 加 入 酮 类 化 合 物 和 卤 化 物， 然后再低温 ( 如 -100 ～ -130℃ ) 加入有机碱金属化合物。通过用水、 该反应最初形成的碱金属醇盐 ( 如醇锂 ) 进行水解反应以分离式 (I-b) 的化合物。用常规方法进行进一步的后处理。
方法 D
式 (VIII) 的溴化物是已知的。式 (V) 的 ( 硫代 ) 苯酚也同样是已知的。
当实施本发明的方法 D 时， 作为中间体的式 (IX) 的苯基 ( 氧基 / 硫基 ) 酮是新的。 可通过已知方法进行制备 ( 参见 JP-A 62-084061、 WO01/87878)。
式 (X) 的有机金属化合物是已知的， 其中， 式 (X) 中的 M 优选表示锂或镁。
在稀释剂存在下以及， 如合适， 在碱的存在下， 实施本发明的方法 D( 步骤 1)。 本发 明反应适合的稀释剂为所有的惰性有机溶剂。这些优选包括醇， 如乙醇和甲氧基乙醇 ； 酮， 如 2- 丁酮 ； 腈， 如乙腈 ； 酯， 如乙酸乙酯 ； 醚， 如二噁烷 ； 芳香烃， 如苯和甲苯 ； 或酰胺， 如二 甲基甲酰胺。
本发明反应适合的碱为所有常规使用的有机和无机碱。 这些优选包括碱金属碳酸 盐， 如碳酸钠或碳酸钾 ； 碱金属氢氧化物， 如氢氧化钠 ； 碱金属醇化物， 如甲醇钠、 甲醇钾、 乙醇钠和乙醇钾 ； 碱金属氢化物， 如氢化钠 ； 以及低级叔烷胺、 环烷胺和芳烷胺， 如特别为 三乙胺。
当实施本发明方法时， 反应温度可在相对较宽的范围内变化。 一般而言， 实施该方 法的温度为 0 ～ 200℃， 优选 20 ～ 100℃。
如合适， 本发明的反应在可加压下进行。一般而言， 在 1 ～ 50 巴， 优选 1 ～ 25 巴 下进行反应。
当根据本发明实施方法 D( 步骤 1) 时， 优选每摩尔通式 (VIII) 的溴酮使用 1 ～ 2mol 的式 (V) 的 ( 硫代 ) 苯酚以及， 如合适， 1 ～ 3mol 的碱。用常规方法分离终产物。
在稀释剂以及有机碱金属化合物的存在下， 实施本发明的方法 D( 步骤 2)。如合 适， 将酸或金属盐加入到所获得的式 (I-d) 的化合物中 ( 见下述 )。
本发明用于将式 (IX) 的化合物转化成式 (I-d) 的化合物的优选稀释剂为惰性有 机溶剂。这些特别包括醚， 如二乙醚或四氢呋喃。用于本发明反应的有机碱金属化合物优 选为烷基碱土金属， 如特别为氯化叔丁基镁 ； 然而， 还可使用烷基碱金属， 如叔丁基锂。
在本发明的方法中， 反应温度可在一定的范围内变化。 一般而言， 实施该方法的温 度为 -100 ～ +20℃， 优选 -78 ～ 0℃。
本发明的反应优选在惰性气体下进行， 如特别为氮气或氩气。
当实施本发明方法时， 式 (IX) 的酮和式 (X) 的有机金属化合物约以等摩尔的量 进行反应 ； 然而， 还可低于或高于这一比例 20mol％。有机碱金属化合物的使用量超过 5 ～ 75mol％为宜， 优选超过 10 ～ 50mol％。 本申请中， 可最初加入式 (IX) 的酮， 然后， 再在合适的温度 ( 如 0℃ ) 下加入式 (X) 的有机金属化合物。通过用水、 该反应最初形成的金属醇盐 ( 如醇化镁 ) 进行水解反应以 分离式 (I-d) 的化合物。用常规方法进行进一步的后处理。
方法 E
可通过两个不同的反应路线将式 (I-c) 的苯基 ( 氧基 / 硫基 ) 烷醇衍生物转化成 式 (I-e) 的苯基 ( 氧基 / 硫基 ) 烷醇衍生物 ( 参见 EP-A 0 793657)。
式 (I-c) 的苯基 ( 氧基 / 硫基 ) 烷醇衍生物，
(α) 在稀释剂存在下， 连续与强碱和硫反应， 然后用水， 如合适在酸存在下进行水 解， 或者
(β) 在高沸点稀释剂存在下， 与硫反应， 必要时， 用水进行处理， 以及必要时用酸 进行处理。
实施本发明方法 E， 方法变型 (α) 的适合的碱为常规用于这种反应的所有的强碱 金属碱。优选使用与四甲基乙二胺 ( ＝ TMEDA) 形成混合物的正丁基锂、 二异丙酰胺锂、 氢 化钠、 氨基钠以及叔丁醇钾。
实施本发明方法 E， 方法变型 (α) 的适合的稀释剂为常规用于这种反应的所有惰 性有机溶剂。优选使用醚， 如四氢呋喃、 二噁烷、 二乙醚和 1， 2- 二甲氧基乙烷， 以及液态氨 或强极性溶剂， 如二甲基亚砜。
优选使用粉末形式的硫。实施本发明方法 E， 方法变型 (α) 时， 如合适在酸存在 下， 用水进行水解。适合的酸为常规用于这种反应的所有有机或无机酸。优选使用乙酸、 稀 硫酸和稀盐酸。然而， 还可用氯化铵水溶液进行水解。
实施方法变型 (α) 时， 反应温度可在一定的范围内变化。一般而言， 实施该方法 变型的温度为 -70 ～ +20℃， 优选 -70 ～ 0℃。
通常在大气压下实施方法 E。然而， 也可在加压或减压下实施。因此， 实施方法变 型 (α) 时， 可特别在加压下进行操作。
实施本发明方法 E 的方法变型 (α) 时， 一般而言， 每摩尔式 (I-c) 的苯基 ( 氧基 / 硫基 ) 烷醇衍生物使用 2 ～ 3 当量， 优选 2.0 ～ 2.5 当量的强碱以及等量或过量的硫。可 在保护气体， 如氮气或氩气氛下进行反应。用常规方法进行后处理。
实施本发明方法 E 方法变型 (β) 的适合的稀释剂为常规用于这一反应的所有高 沸点有机溶剂。优选使用酰胺， 如二甲基甲酰胺和二甲基乙酰胺， 以及杂环化合物， 如 N- 甲 基吡咯烷酮， 以及醚， 如二苯醚。
实施本发明方法 E 方法变型 (β) 时， 通常使用粉末形式的硫。反应后， 用水进行 处理， 以及如合适， 可任选用酸进行处理。这同实施方法变型 (α) 的水解类似。
实施本发明方法 E 方法变型 (β) 时， 反应温度可在较宽的范围内变化。 一般而言， 实施该方法变型的温度为 150 ～ 300℃， 优选 180 ～ 250℃。
实施本发明方法 E 方法变型 (β) 时， 一般而言， 每摩尔式 (I-c) 的苯基 ( 氧基 / 硫基 ) 烷醇衍生物使用 1 ～ 5mol， 优选 1.5 ～ 3mol 的硫。用常规方法进行后处理。
通过本发明方法 A 和 B 获得的通式 (I) 化合物可转化成酸加成盐或金属盐络合 物。
适合生产通式 (I) 化合物的生理可接受酸加成盐的酸优选下述酸 ： 氢卤酸， 如盐 酸和氢溴酸， 特别为盐酸， 以及磷酸、 硝酸、 硫酸、 单和双官能团的羧酸和羟基羧酸， 如乙酸、 马来酸、 琥珀酸、 富马酸、 酒石酸、 柠檬酸、 水杨酸、 山梨酸、 乳酸以及磺酸， 如对甲苯磺酸和 1， 5- 萘二磺酸。
可通过常规形成盐的简单方法获得通式 (I) 化合物的酸加成盐， 如将通式 (I) 化 合物溶于适合的惰性溶剂中并加入酸， 如盐酸， 并以已知的方式进行分离， 如通过过滤， 以 及必要时用惰性有机溶剂洗涤进行纯化。
优选的用于制备通式 (I) 的 65 个化合物的金属盐络合物为元素周期表中的 II ～ IV 主族元素以及 I 和 II 以及 IV ～ VIII 过渡元素的金属盐， 可提及的实例为铜、 锌、 锰、 镁、 锡、 铁和镍。
适合的盐的阴离子来源于下述优选的酸 ： 氢卤酸， 如盐酸和氢溴酸， 以及磷酸、 硝 酸和硫酸。
可通过常规的简单方法获得通式 (I) 的化合物的金属盐络合物， 例如将金属盐溶 于醇， 如乙醇中， 将该溶液加入至通式 (I) 的化合物中。可用已知方法分离金属盐络合物， 如通过过滤， 以及必要时， 通过重结晶进行纯化。
本发明还涉及用于控制有害微生物的组合物， 其包括本发明的活性化合物。这些 组合物优选杀真菌组合物， 其含有农业上可接受的助剂、 溶剂、 载体、 表面活性剂和延长效 用剂 (extender)。
此外， 本发明还涉及控制有害微生物的方法， 其特征在于， 将本发明的活性化合物 施用到病原性真菌和 / 或它们的生境。
根据本发明， 载体是天然物或合成的有机或无机物， 活性化合物与它们混合或结 合后可以更好施用， 特别是施用到植物或植物部位及种子。固态或者液态的载体一般是惰 性且适于农业上使用的载体。
适宜的固体或液体载体为 ： 如铵盐和磨碎的天然矿物质， 如高岭土、 粘土、 滑石、 白 垩、 石英、 凹凸棒石、 蒙脱石或硅藻土， 以及磨碎的合成矿物质， 如细磨二氧化硅、 矾土及天然或合成硅酸盐、 树脂、 蜡、 固体肥料、 水、 醇， 尤其是丁醇、 有机溶剂、 矿物和植物油以及它 们的衍生物。还可使用这些载体的混合物。适宜的用于粒剂的固体载体为 ： 如粉碎并分离 的天然岩石， 例如方解石、 大理石、 浮石、 海泡石和白云石， 以及合成的无机和有机粉颗粒， 以及有机材料颗粒， 如锯末、 椰壳、 玉米穗轴及烟草杆。
适合的液化气态延长效用剂或载体是在环境温度及大气压下是气体的液体， 例如 气溶胶喷射剂， 如卤代烃， 以及丁烷、 丙烷、 氮气和二氧化碳。
增粘剂为， 如羧甲基纤维素， 以及粉末、 颗粒或胶乳形式的天然及合成的聚合物， 如阿拉伯树胶、 聚乙烯醇、 聚乙酸乙烯酯， 或者为天然磷脂， 如用于制剂的脑磷脂和卵磷脂 以及合成磷脂。其它添加剂可为矿物油和植物油。
如果延长效用剂为水， 也可用例如有机溶剂作为助溶剂。适宜的液体溶剂基本上 为： 芳香族化合物， 如二甲苯、 甲苯或烷基萘 ； 氯化的芳香烃或氯化的脂肪烃， 如氯苯、 氯乙 烯或二氯甲烷 ； 脂肪烃， 如环己烷或石蜡， 例如矿物油馏分、 矿物油和植物油 ； 醇类， 如丁醇 或乙二醇以及它们的醚或酯， 酮类， 如丙酮、 甲乙酮、 甲基异丁酮或环己酮 ； 强极性溶剂， 例 如二甲基甲酰胺和二甲亚砜 ； 也包括水。
本发明的组合物还进一步包括另外的组分， 例如表面活性剂。适宜的表面活性剂 为乳化剂和 / 或起泡剂、 具有离子或非离子特性的分散剂或润湿剂、 或上述表面活性剂的 混合物， 其实例为聚丙烯酸盐、 木质素磺酸盐、 酚磺酸或萘磺酸盐、 环氧乙烯与脂肪醇或与 脂肪酸或与脂肪胺的缩聚物、 取代的酚类 ( 优选烷基酚或芳基酚 )、 磺化琥珀酸酯的盐、 牛 磺酸衍生物 ( 优选烷基牛磺酸盐 )、 聚乙氧基醇或酚的磷酸酯、 多元醇的脂肪酯， 以及含有 硫酸、 磺酸或磷酸的化合物衍生物， 例如烷基芳基聚乙二醇酯、 烷基磺酸盐、 烷基硫酸盐、 芳 基磺酸盐、 蛋白水解产物、 木质素亚硫酸盐的废液和甲基纤维素。如果一种活性成分和 / 或 一种惰性载体是不溶于水的， 而应用是在水中进行的， 则表面活性剂的存在是必需的。 表面 活性剂的比例是本发明组合物重量的 5 ～ 40％。
还可以使用着色剂， 诸如无机颜料， 如氧化铁、 氧化钛和普鲁士蓝 ； 有机染料， 如茜 素染料、 偶氮染料和金属酞菁染料 ； 以及微量营养素， 如铁、 锰、 硼、 铜、 钴、 钼以及锌的盐。
如合适， 还可存在其它附加成分 ： 诸如保护性胶体、 粘结剂、 粘合剂、 增稠剂、 触变 物质、 渗透剂、 稳定剂、 螯合剂、 络合成型剂 (complex fomers)。总之， 活性化合物可以与制 剂学上常规使用的任意的固体或液体添加剂联合使用。
本发明的组合物和制剂通常含有重量百分比为 0.05 ～ 99％， 0.01 ～ 98％， 优选为 0.1 ～ 95％， 特别优选 0.5 ～ 90％， 极特别优选 10 ～ 70％的活性化合物。
根据它们的物理和 / 或化学性质， 本发明的活性化合物或组合物可以它们的制剂 形式或由其制备的使用形式使用， 如气溶胶、 胶囊悬浮剂、 冷雾化浓缩剂、 热雾化浓缩剂、 胶 囊粒剂、 细粒剂、 用于种子处理的可流动浓缩剂、 即用型溶液、 粉剂、 浓缩乳剂、 水包油型乳 剂、 油包水型乳剂、 大颗粒粒剂、 小颗粒粒剂、 油可分散粉末、 油可混合可流动浓缩剂、 油可 混合液体、 泡沫剂、 糊剂、 杀虫剂涂布的种子、 悬浮浓缩剂、 悬乳浓缩剂、 可溶浓缩剂、 悬浮 剂、 可湿性粉剂、 可溶性粉剂、 粉粒剂、 水可溶性粒剂或片剂、 用于种子处理的水可溶性粉 剂、 可湿性粉剂、 含有活性化合物的天然产物以及合成物， 以及聚合物和种子包埋材料中的 微胶囊剂， 以及 ULV 冷雾化和热雾化制剂。
可以本身已知的方法制备提及的制剂， 如将活性化合物与至少一种常规的延长效用剂、 溶剂或稀释剂、 乳化剂、 分散剂和 / 或粘合剂或固定剂、 润湿剂、 防水剂， 如合适， 干燥 剂和 UV 稳定剂以及如合适， 染料和色素、 消泡剂、 防腐剂、 二次增稠剂、 粘合剂、 赤霉素以及 其它加工助剂。
本发明的组合物不仅包括可立即使用并可用适合的装置施用到植物或种子上的 制剂， 也包括使用前必须进行稀释的市售浓缩剂。
本发明的活性化合物可以其本身或在其 ( 市售的 ) 制剂中以及在由这些制剂与其 它 ( 已知的 ) 活性化合物混合制备的可用形式中存在， 所述其它活性化合物为杀虫剂、 引诱 剂、 消毒剂、 杀菌剂、 杀螨剂、 杀线虫剂、 杀真菌剂、 生长调节剂、 除草剂、 肥料、 安全剂和 / 或 化学信息素。
用本发明的活性化合物或组合物对植物及植物部位进行的处理， 可以通过常规 方法直接操作或施用于其环境、 生境或贮存空间， 所述常规方法为例如浸泡、 喷雾、 雾化 (atomizing)、 灌溉、 蒸发、 撒粉、 雾化 (fogging)、 撒播、 发泡、 涂抹、 洒布 (spreading-on)、 喷水 ( 喷淋 )、 滴灌以及， 对于繁殖材料， 特别是种子来说， 其中用粉末进行干种子处理， 用 溶液进行种子处理， 用水溶性粉末进行悬浮液处理， 可以进行包壳、 进行一层或多层包衣， 等等。此外， 还可将活性化合物用超低容量法施用或将活性化合物制剂或活性化合物本身 注射到土壤中。
本发明还包括一种处理种子的方法。
本发明还涉及使用根据之前的段落中所述的一种方法处理过的种子。 本发明的种 子用于保护种子免于植物病原有害微生物侵害的方法中。这些方法中， 使用被至少一种本 发明所述的活性化合物处理的种子。
本发明的活性化合物和组合物也适宜处理种子。 大部分的作物损害是由于在种子 储存期间或播种到土壤后、 在植物发芽过程中或发芽后， 遭到有害生物体感染引起的。 生长 期植物的根和嫩枝特别敏感， 即使较小的损害也能导致植物的死亡， 因此这个阶段是特别 关键的。因此使用合适的组合物保护种子和发芽的植物具有重要意义。
通过处理种子来防治植物病原性真菌已经为人所知很久了， 并且是不断改进的主 题。然而， 在种子处理中还有一些问题总是不能得到令人满意的解决。因此， 就需要开发一 种保护种子和发芽植物的方法， 该方法在播种后或植物发芽后不需要或至少能显著地降低 额外的作物保护剂施用。 此外， 还需要优化活性化合物的使用量， 以便最好地保护种子和发 芽植物免受植物病原性真菌的侵袭， 且不会被使用的活性化合物损害。 特别是， 处理种子的 方法还应该考虑到转基因植物的固有杀菌性质， 以实现使用最少量的植物保护剂最大化地 保护种子和发芽植物。
本发明也涉及一种通过使用本发明的组合物来处理种子以防止植物病原性真菌 攻击种子或发芽植物的方法。同样的， 本发明还涉及本发明的组合物在处理种子以保护种 子和发芽植物免于植物病原性真菌的侵袭中的应用。此外， 本发明涉及经本发明的组合物 处理以防止植物病原性真菌侵害的种子。
通过使用作物保护剂处理土壤和植物的地上部分， 危害出芽后植物的植物病原性 真菌得到了预先防治。由于植物保护剂可能对环境以及人和动物的健康产生影响， 因此需 要减少活性化合物的使用量。
本发明的一个优势在于本发明活性化合物和组合物的内吸性， 用这些活性化合物和组合物处理的种子不仅保护了种子本身免受植物病原性真菌侵袭， 而且还保护了出苗后 长成的植物免受植物病原性真菌的损害。这样， 可以免除播种或播种后的即时处理。
同样也能视为优势的是本发明的活性化合物或组合物也可以特别是应用于长成 植物后可表达杀虫蛋白的转基因种子。通过使用本发明的活性化合物或组合物处理的种 子， 可以通过表达如杀虫蛋白， 来防治某些害虫。让人意料不到的是， 还观察到了更进一步 的协同效果 ： 这种蛋白还能增加抗害虫侵袭的效果。
本发明的组合物适于保护农业、 温室、 林业或园艺和葡萄栽培中使用的任何植物 品种的种子。 特别地， 其为谷类 ( 如小麦、 大麦、 黑麦、 黑小麦、 高粱 / 小米和燕麦 )、 玉米、 棉 花、 大豆、 水稻、 土豆、 向日葵、 黄豆、 咖啡、 甜菜 ( 例如糖用甜菜和饲用甜菜 )、 花生、 油菜、 罂 粟、 橄榄、 椰子、 可可、 甘蔗、 烟草， 蔬菜 ( 例如西红柿、 黄瓜、 洋葱和莴苣 )、 草坪草以及观赏 植物 ( 见下文 ) 的种子。谷类 ( 如小麦、 大麦、 黑麦、 黑小麦和燕麦 )、 玉米以及水稻的种子 的处理是至关重要的。
同样如下所述， 使用本发明的活性化合物或组合物对转基因种子进行处理至关 重要。这涉及含有至少一种可以使具有杀虫特性的多肽或蛋白表达的外源基因的植物种 子。在转基因种子中的外源基因源自， 如芽孢杆菌菌种、 根瘤菌、 假单胞菌、 沙雷菌属、 木霉 属、 棍状杆菌属、 球囊霉 (Glomus) 或粘帚霉的微生物。优选地， 外源基因来源于芽孢杆菌属 (Bacillus sp.)， 该基因产物具有很强的抗欧洲玉米螟和 / 或西方玉米根虫的活性。特别 优选的外源基因来源于苏云金芽孢杆菌 (Bacillus thuringiensis)。
在本发明的上下文中， 本发明的组合物可单独地或以适宜的制剂形式施用于种 子， 优选地可以在一种足够稳定以避免处理期间损害的状态下处理种子。 通常， 种子可在采 收和播种之间的任意时间点进行处理。通常使用已从植物体中分离并且除去穗轴、 壳、 茎、 表皮、 毛或果肉的种子。 因此， 可以使用例如， 已被采摘、 清洁及干燥至含水量低于 15％ ( 重 量 ) 的种子。或者是， 也可以是干燥后又被例如水处理， 然后又再次干燥的种子。
处理种子时， 施用于种子的本发明组合物的量和 / 或其它添加剂的量必须注意选 择， 以不会不利于种子的发芽， 或者不会损害生成的植株为度。 对于在一定施用率的情况下 可能具有植物毒性效应的活性化合物， 这一点尤其要注意。
本发明的组合物可以直接施用， 换言之无需包含任何其它组分， 也无需稀释。通 常， 优选以适宜的制剂形式将组合物施用于种子。适宜的制剂及种子的处理方法是本领 域技术人员公知的， 且描述于例如下列文献中 ： US4272417 A、 US4245432 A、 US4808430A、 US5876739 A、 US2003/0176428 A1、 WO02/080675 A1、 WO02/028186 A2。
本发明可使用的活性化合物可被转化成常规拌种剂， 如溶液、 乳剂、 悬浮液、 散剂、 泡沫剂、 浆液或其它种子包衣组合物， 以及超低容量喷雾剂 (ULV)。
这些制剂可以用已知的混合活性化合物与常规添加剂的方式制备， 所述常规添加 剂为常规延长效用剂和溶剂或稀释剂、 着色剂、 润湿剂、 分散剂、 乳化剂、 消泡剂、 防腐剂、 二 次增稠剂、 粘合剂、 赤霉素以及水。
可存在于本发明使用的拌种剂中的着色剂为所有为此目的使用的常规着色剂。 本 申请上下文中， 可使用微溶于水的染料， 也可以使用溶于水的染料。可提及的实例包括如 下已知的着色剂 ： 玫瑰红 (Rhodamine)B、 C.I. 颜料红 (Pigment Red)112 以及 C.I. 苏丹红 (Solvent Red)1。本发明使用的拌种剂中还可以含有适宜的润湿剂， 包括能提升湿度且在农用化学 活性化合物制剂中常规使用的所有润湿剂， 优选为烷基萘 - 磺酸盐， 如二异丙基 - 或二异丁 基萘 - 磺酸盐。
本发明使用的拌种剂中还可以含有适宜的分散剂和 / 或乳化剂， 包括在农用化学 活性化合物制剂中常规使用的所有的非离子、 阴离子及阳离子分散剂。优选使用非离子或 阴离子分散剂或非离子或阴离子分散剂的混合物。 可特别提及的适合的非离子分散剂是环 氧乙烷 / 环氧丙烷嵌段聚合物、 烷基酚聚乙二醇醚和三苯乙烯酚聚乙二醇醚， 及它们的磷 酸盐或硫酸盐衍生物。 特别适合的阴离子分散剂是木质素磺酸盐、 聚丙烯酸盐， 以及芳基磺 酸酯 / 甲醛缩合物。
本发明使用的拌种剂中还可以含有的适宜的消泡剂， 包括为此目的的常规用于农 用化学活性化合物制剂的所有泡沫抑制物。优选使用硅胶消泡剂和硬脂酸镁。
本发明使用的拌种剂中还可以含有适宜的防腐剂， 包括为此目的常规用于农用化 学组合物的所有物质。作为实例可提及的是二氯酚和苯甲醇半缩甲醛。
本发明使用的拌种剂中还可以含有适宜的二次增稠剂， 包括为此目的常规用于农 用化学品组合物的所有物质。优选纤维素衍生物、 丙烯酸衍生物、 黄原胶、 改性粘土和高度 分散的二氧化硅。
本发明使用的拌种剂中还含有适宜的粘合剂， 包括能用于拌种剂产品的所有常规 粘合剂。优选提及聚乙烯吡咯烷酮、 聚醋酸乙烯酯、 聚乙烯醇和羟乙基纤维素 (tylose)。
本 发 明 使 用 的 拌 种 剂 中 还 含 有 适 宜 的 赤 霉 素， 优 选 赤 霉 素 A1、 A3( ＝ 赤 霉 酸 )、 A4 和 A7 ； 特 别 优 选 赤 霉 酸。 赤 霉 素 是 已 知 的 ( 参 见， “Chemie der Pflanzenschutz-und ”植 物 保 护 和 害 虫 防 治 剂 化 学 [Chemistry of Plant Protection and Pest Control Agents]， Vol.2， Springer Verlag， 1970， pp.401-412)。
本发明使用的拌种剂可以直接使用或预先用水稀释后处理各种类型的种子， 包括 转基因植物的种子。 在本发明中， 与通过表达所形成物质的组合还可产生另外的协同效应。
适于用本发明使用的拌种剂或对上述拌种剂加水制备的制剂处理种子的混合设 备包括所有常规用于包衣的设备。具体的拌种程序为 ： 将种子置于混合器中， 加入所需特 定用量的拌种制剂本身或事先用水稀释后的制剂， 然后进行混合直到制剂均匀分布到种子 上。如合适， 接着进行干燥。 本发明的活性化合物或组合物具有有效的杀微生物活性， 可在作物保护和材料保 护中控制有害微生物， 如真菌和细菌。
在作物保护中， 可使用杀真菌剂用于控制根肿菌纲 (Plasmodiophoromycetes)， 卵 菌 纲 (Oomycetes)， 壶 菌 纲 (Chytridiomycetes)， 接 合 菌 纲 (Zygomycetes)， 子囊菌纲 (Ascomycetes)， 担子菌纲 (Basidiomycetes) 及半知菌纲 (Deuteromycetes)。
在 作 物 保 护 中， 可 使 用 杀 细 菌 剂 用 于 控 制 假 单 胞 菌 科 (Pseudomonadaceae)， 根 瘤 菌 科 (Rhizobiaceae)，肠 杆 菌 科 (Enterobacteriaceae)，棒 状 杆 菌 科 (Corynebacteriaceae) 以及链霉菌科 (Streptomycetaceae)。
本发明的杀真菌组合物可用于治疗和防治植物病原性真菌。因此， 本发明还涉及 使用本发明的活性化合物或组合物治疗和防治植物病原性真菌的方法， 所述化合物或组合
物被施用到种子、 植物或植物部位、 果实或植物生长的土壤中。
在作物保护中， 用于防治植物病原性真菌的本发明的组合物包含有效的， 但无植 物毒性的量的本发明的活性化合物， “有效的， 但无植物毒性的量” 意思是指本发明的组合 物以足够以令人满意的方式有效地防治植物真菌病或完全根除真菌病的用量， 并且， 同时， 不会导致明显的植物毒性症状。通常， 这种施用率可在相当大的范围内变化。这取决于多 种因素， 例如， 取决于防治的真菌、 植物、 气候条件以及本发明的活性组合物成分。
在控制植物病害的所需浓度下， 植物能很好地耐受活性化合物的事实允许对植物 的地上部分、 繁殖枝和种子以及土壤进行处理。
根据本发明， 可以处理所有植物及植物部位， 在本说明书中， 植物应理解为所有植 物和植物种群， 如无害和有害的野生植物或作物 ( 包括自然生长的作物 )。作物可为通过 常规育种和优化法或通过生物技术和基因工程方法或通过上述方法的结合而获得的植物， 包括转基因植物也包括受多种产权保护或不受产权保护的植物品种。 植物部位应理解为指 植物的所有地上及地下部分以及植物器官， 如茎尖、 叶子、 花和根， 可提及的实例为叶子、 针 叶、 茎、 干、 花、 子实体、 果实、 种子、 根、 块茎和根茎。 植物部位还包括收割的植物和无性及有 性繁殖材料， 例如幼苗、 块茎、 根茎、 插条及种子。 本发明的活性化合物适合保护植物和植物器官， 以增加产量、 提高采收作物的质 量， 而植物能很好地耐受， 且对温血物种具有有利的毒性和环境友好。 它们优选可用作植物 保护剂。它们对常规的敏感和抗性物种以及对于所有或一些发育阶段具有活性。
根据本发明可处理的植物可为下面提到的植物 ： 棉花， 亚麻， 葡萄， 果树， 蔬菜， 如 蔷薇科 (Rosaceae sp.)( 例如梨果类， 如苹果和梨， 以及核果类， 如杏、 樱桃、 杏仁和桃， 以 及浆果类， 如草莓 )， Ribesioidae sp.， 胡桃科 (Juglandaceae sp.)， 桦木科 (Betulaceae sp.)， 漆 树 科 (Anacardiaceae sp.)， 山 毛 榉 科 (Fagaceae sp.)， 桑 科 (Moraceae sp.)， 木犀科 (Oleaceae sp.)， 猕猴桃科 (Actinidaceae sp.)， 樟科 (Lauraceae sp.)， 芭蕉科 (Musaceae sp.)( 如香蕉树和香蕉种植园 )， 茜草科 (Rubiaceae sp.)( 例如咖啡 )， 山茶科 (Theaceae sp.)， 梧桐科 (Sterculaiceae sp.)， 芸香科 (Rutaceae sp.)( 例如柠檬、 橘子和 葡萄柚 )， 茄科 (Solanaceae sp.)( 例如番茄 )， 百合科 (Liliaceae sp.)， 菊科 (Asteraceae sp.)( 例 如 莴 苣 )， 伞 形 花 科 (Umbelliferae sp.)， 十 字 花 科 (Cruciferae sp.)， 藜科 (Chenopodiaceae sp.)， 葫芦科 (Cucurbitaceae sp.)( 例如黄瓜 )， 葱科 (Alliaceae sp.) ( 例如韭菜和洋葱 )， 蝴蝶花科 (Papilionaceae sp.)( 例如豌豆 ) ； 大多数作物， 比如禾木 科 (Gramineae sp.)( 例如玉米， 草坪草， 谷物如小麦、 黑麦、 水稻、 大麦、 燕麦、 小米及黑小 麦 )， 菊科 (Asteraceae sp.)( 例如向日葵 )， 十字花科 (Brassicaceae sp.)( 例如包心菜、 紫甘蓝、 西兰花、 白菜花、 抱子甘蓝、 白菜、 大头菜、 红萝卜， 以及油菜、 芥菜、 山葵和水芹 )， 豆 科 (Fabacae sp.)( 例如黄豆、 花生 )， 蝶形花科 (Papilionaceae sp.)( 例如大豆 )， 茄科 (Solanaceae sp.)( 例如土豆 )， 藜科 (Chenopodiaceae sp.)( 例如糖用甜菜、 饲用甜菜、 唐 以及所有这些植物的遗传修饰类 莴苣、 甜菜头 ) ； 在园艺和林业中的有用植物和观赏植物 ； 型。
如上所述， 能够处理本发明的所有植物及其部分。在一个优选实施方式中， 处 理野生植物物种和植物栽培品种或由传统的生物育种方法诸如杂交或原生质体融合获 得的那些植物及其部分。在另一个优选实施方式中， 如合适， 与常规方法 ( 转基因生物，
Genetically Modified Organisms) 结合处理通过基因工程的方法获得的转基因植物和转 基因植物栽培品种及其部分。术语 “部分” 、 “植物的部分” 和 “植物部分” 在上文已作出解 释。尤其优选地， 本发明可在各种条件下对市售的或使用中的植物栽培品种进行处理。植 物栽培品种应理解为是指具有新颖特性 (“性状” ) 的植物， 其通过常规育种、 诱变或重组 DNA 技术获得。这些能够是栽培品种、 生物型或基因型。
本发明的处理方法可以用于处理基因改良的生物体 (GMOs)， 例如植物或种子。基 因改良的植物 ( 或转基因植物 ) 是外源基因稳定的整合到染色体组的植物。术语 “外源基 因” 本质上是一种植株体外提供或重组基因， 当该基因被导入受体植物的细胞核基因组、 叶 绿体基因组或粒线体基因组中， 其通过表达相关蛋白质或多肽， 或通过使植物体内的其它 基因下调表达或者沉默 ( 应用的实例是 ： 反义技术、 共抑制技术或 RNAi 技术 [RNA 干扰 ]， 从而赋予转基因植物新的或改良的农艺或其它性状。 存在于基因组中的外源基因也称为转 移基因。在植物基因组中的特定位置的转移基因被称为基因转化或转基因事件 (event)。
根据植物种类或植物品种、 其位置及其生长条件 ( 土壤、 气候、 生长期、 营养 )， 本 发明的处理亦可产生超加性 (“协同” ) 效应。因此， 例如， 可能出现下列超过实际预期的 效应 ： 降低施用率和 / 或扩大活性谱和 / 或提高本发明使用的活性化合物与组合物的活 性、 改善植物生长、 提高对高温或低温的耐受性、 提高对干旱、 水或土壤盐分的耐受性、 增加 开花表现、 易于收获、 加速成熟、 提高产量、 增大果实、 增加植物高度、 加深叶子绿色、 提早开 花、 改善收获产品的质量和 / 或提高营养价值、 提高果实的糖含量、 改善所收获产品的贮存 稳定性和 / 或可加工性。
在某些施用率下， 本发明的活性化合物还可对植物有强化作用。 因此， 它们还适于 调动植物对抗有害植物病原性真菌和 / 或微生物和 / 或病毒侵袭的植物防御体系。 如合适， 这可能是本发明的组合物活性提高的原因之一， 例如抗真菌。 在本发明的上下文中， 强化植 物 ( 抗性诱导 ) 的物质应理解成可以激活植物的防御体系的那些物质或物质的组合物， 即 当接种了有害的植物病原性真菌后， 处理过的植物显示出对这些有害的植物病原性真菌很 大程度的抗性。 因此， 在处理后的一段时间内， 本发明物质可用于保护植物以免上述病原体 的侵袭。产生保护的时间通常在植物用活性化合物处理之后的第 1 ～ 10 天， 优选第 1 ～ 7 天。
本发明优选处理的植物和植物栽培品种包括所有具有能赋予其特定的有利、 有用 性状的遗传物质的植物 ( 通过育种和 / 或生物技术方式培育 )。
本发明还优选处理的植物和植物栽培品种为对一种或多种生物性胁迫因素具有 抗性的植物， 也即， 所述植物对动物与微生物病害更具抗性， 如： 抗线虫、 昆虫、 螨、 植物病原 性真菌、 细菌、 病毒和 / 或类病毒。
本发明还可处理的植物与植物栽培品种为对一种或多种非生物胁迫因素具有抗 性的植物。 非生物胁迫的因素包括如干旱、 低温、 高温、 渗透压力、 水涝、 土壤高盐分、 高矿物 浓度、 臭氧、 强光、 氮营养元素利用率受限、 磷营养元素利用率受限、 避荫。
本发明可处理的植物与植物栽培品种为具有增加的产量这一性状特征的植物。 所 述植物产量的提高可源于如改善植物生理、 生长与发育， 如水分利用率、 保水率、 改善氮利 用率、 提高碳同化作用、 改善光合作用、 提高发芽率和加快成熟。可通过改善株型 ( 胁迫下 与非胁迫条件下 ) 来进一步影响产量， 包括但不限于， 提早开花、 控制开花以产生杂交种子、 幼苗长势、 植物大小、 节间数量与距离、 根部生长、 种子大小、 果实大小、 果荚大小、 果荚 或穗数量、 每荚或每穗的种子数量、 种子质量、 加强种子饱满度、 减少种子散落、 减少果荚开 裂与倒伏抗。 其它产量性状包括种子成分， 如碳水化合物含量、 蛋白质含量、 油含量与成分、 营养价值、 降低不良营养素化合物、 改善可加工性和提高贮存稳定性。
可本根据发明处理的植物为已表现出异源或杂种优势性状的杂交植物， 所述杂交 植物一般可为高产量、 长势、 健康及对生物和非生物胁迫具有抗性。 所述植物通常通过将雄 性不育自交系亲本 ( 母本 ) 与雄性可育自交系亲本 ( 父本 ) 杂交制得。杂交种子通常收获 自雄性不育亲本， 然后出售给种植者。 雄性不育植物， 例如玉米， 有时可通过去雄制得， 也即 通过机械去除雄性繁殖器官或雄花， 但更为常见的是基因组中基因决定子造成雄性不育。 这种情况下， 尤其当杂交植物中收获的种子为所需产物时， 其通常可确保杂交植物完全恢 复雄性可育性。这样可以确保父本具有适当育性恢复基因， 可使含有负责雄性不育的基因 决定子的杂交植物恢复雄性可育性。雄性不育基因决定子可能位于细胞质中。细胞质雄性 不育 (CMS) 的实例在如芸苔 (Brassica) 属植物中已有描述。然而， 雄性不育基因决定子也 可位于细胞核基因组中。雄性不育植物也可采用植物生物技术方法获得， 如基因工程。获 得雄性不育植物的特别适用的方法公开于 WO 89/10396， 其中例如核糖核酸酶， 如芽孢杆菌 RNA 酶 (barnase) 选择性地在雄蕊的绒毡层细胞中进行表达。 通过核糖核酸酶抑制子， 如芽 孢杆菌 RNA 酶抑制剂 (barstar) 在绒毡层细胞中的表达即可恢复育性。
本发明可处理的植物或者植物品种 ( 可由植物生物技术方法， 如基因工程获得 ) 为除草剂耐受性植物， 即可以耐受一种或多种特定除草剂的植物。所述植物可采用转基因 方法或筛选包含赋予除草剂抗性的突变的植物获得。
除草剂 - 抗性植物为例如草甘膦抗性植物， 即可以抗草甘膦除草剂或其盐的植 物。例如， 草甘膦抗性植物可通过在植物中转化编码酵素 5- 烯醇丙酮酰莽草酸 -3- 磷酸酯 合酶 (EPSPS) 的基因获得。所述 EPSPS 基因实例为沙门氏菌 (Salmonella typhimurium) 的 AroA 基因 ( 突变株 CT7)、 农杆菌属 (Agrobacterium sp.) 细菌的 CP4 基因、 编码矮牵牛 EPSPS、 西红柿 EPSPS 或牛筋草 EPSPS(WO 2001/66704) 的基因。其也可为突变的 EPSPS。草 甘膦抗性植物也可通过表达编码草甘膦氧化还原酶的基因获得。 草甘膦抗性植物也可通过 表达编码草甘膦乙酰基转移酶的基因获得。 草甘膦抗性植物还可通过筛选包含上述基因的 天然突变的植物获得。
其它除草剂抗性植物， 如抗抑制谷氨酰胺合成酶的除草剂， 如双丙胺膦、 草铵膦或 草丁膦的植物。所述植物的制备方法为通过表达可解除除草剂毒性的酶或可抗该抑制作 用的突变谷氨酰胺合成酶而获得。其中一种有效解除毒性的酶为编码草铵膦乙酰转移酶 (如： 来自链霉菌 (Streptomyces) 属的 bar 或 pat 蛋白 )。也描述了表达外源草铵膦乙酰 转移酶的植物。
其它除草剂抗性植物也可以是抗抑制羟苯基丙酮酸双加氧酶 (HPPD) 的除草剂的 植物。羟基苯基丙酮酸二氧化酶催化对羟基苯基丙酮酸酯 (HPP) 合成黑尿酸。抗 HPPD 抑 制剂的植物可通过转化编码天然抗性 HPPD 酶的基因或编码突变的 HPPD 酶的基因而获得。 将编码某些酶的基因转化植物， 使得尽管在 HPPD 抑制剂抑制天然 HPPD 酶活性情况下， 仍可 形成黑尿酸， 也可获得对 HPPD 抑制剂的抗性。植物对 HPPD 抑制剂的抗性除了用编码 HPPD 抗性酶的基因转化植物外， 也可通过用编码预苯酸脱氢酶的基因转化植物得到改良。其它除草剂抗性植物也可以是抗乙酰乳酸合成酶 (ALS) 抑制剂的植物。已知的 ALS- 抑制剂包括例如磺脲类、 咪唑啉酮类、 三唑并嘧啶类、 嘧啶基氧 ( 硫 ) 苯甲酸酯类和 / 或磺酰基胺基羰基三唑啉酮类除草剂。已知不同 ALS 酶的突变体 ( 也称为乙酰基羟基酸合 成酶， AHAS) 可对不同除草剂和不同类除草剂赋予耐受性。 国际公开文本 WO1996/033270 公 开了磺脲类抗性植物与咪唑啉酮类抗性植物的制备。 其它磺脲类与咪唑啉酮类抗性植物也 例如在 WO 2007/024782 中公开。
其它抗咪唑啉酮类和 / 或磺脲类的植物可通过诱变、 在除草剂存在情况下进行细 胞培养选择， 或者诱变育种获得。
本发明还可处理的植物或植物品种 ( 由植物生物技术方法， 如： 基因工程获得 ) 为 抗虫转基因植物， 即对某些目标昆虫侵害具有抗性的植物。 所述植物可利用转基因方法， 或 筛选能抗虫的突变植物得到。
本文所用的 “抗虫转基因植物” 包括任何包含至少一种转移基因的植物， 所述转基 因包含编码下述的编码序列 ：
1) 来自苏云金芽孢杆菌的杀虫结晶蛋白或其杀虫部分， 如记载于网址 ： http:// www.lifesci.sussex.ac.uk/Home/Neil_Crickmore/Bt/) 的杀虫结晶蛋白， 或其杀虫部分， 例如 ： Cry 蛋白类 Cry1Ab、 Cry1Ac、 Cry1F、 Cry2Ab、 Cry3Ae 或 Cry3Bb 蛋白或其杀虫部分 ； 或
2) 来自苏云金芽孢杆菌的结晶蛋白或其部分， 其在来自苏云金芽孢杆菌的第二种 其它结晶蛋白或其部分的存在下具有杀虫性， 如由 Cry34 与 Cry35 结晶蛋白组成的二元毒 素； 或
3) 包含来自苏云金芽孢杆菌的两种杀虫结晶蛋白的部分的杂种杀虫蛋白， 如上述 1) 的杂种蛋白或上述 2) 的杂种蛋白， 例如由玉米品种 (event)MON98034(WO 2007/027777) 产生的 Cry1A.105 蛋白 ； 或
4) 上述 1) 至 3) 中任一蛋白质， 其中有些氨基酸， 特别是 1-10 氨基酸已被另一个 氨基酸替换， 可对目标昆虫物种产生更高杀虫活性和 / 或可扩大受影响的目标昆虫物种的 范围和 / 或由于在克隆或转化过程中改变编码的 DNA， 如： 玉米品种 MON863 或 MON88017 的 Cry3Bb1 蛋白， 或玉米品种 MIR604 的 Cry3A 蛋白 ； 或
5) 来自苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌 (Bacillus cereus) 的杀虫分泌蛋白质， 或其杀虫部分， 如： 营养期杀虫蛋白 (VIP)， 其列于 ： http://www.lifesci.sussex.ac.uk/ Home/Neil_Crickmore/Bt/vip.html， 如： 来自 VIP3Aa 蛋白类的蛋白 ； 或
6) 来自苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌的分泌蛋白质， 其在来自苏云金芽孢杆菌 或蜡状芽孢杆菌的第二分泌蛋白的存在下具有杀虫性， 如： 由 VIP1A 与 VIP2A 蛋白组成的二 元毒素 ； 或
7) 包含来自苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌的不同分泌蛋白的部分组成的杂种 杀虫蛋白， 如： 上述 1) 的杂种蛋白或上述 2) 的杂种蛋白 ； 或
8) 上述 1) 至 3) 中任一蛋白质， 其中有些氨基酸， 特别是 1-10 氨基酸已被另一 个氨基酸替换， 可对目标昆虫物种产生更高杀虫活性和 / 或可扩大受影响的目标昆虫物 种范围和 / 或在克隆或转化过程中改变编码的 DNA( 但仍可编码杀虫蛋白 )， 如： 棉花品种 COT102 的 VIP3Aa 蛋白。
当然， 本文所述的抗虫转基因植物也包括任何含有编码上述 1 至 8 类任一种蛋白的基因组合的植物。在一个具体实施方案中， 抗虫转基因植物含有多种编码上述 1 至 8 类 任一种蛋白的转移基因， 通过对具有不同作用模式如结合到昆虫中不同受体结合位点的相 同目标昆虫使用不同杀虫蛋白， 可以扩大受影响的目标昆虫物种范围， 或可以推迟昆虫对 植物抗性的发展。
本发明还可处理的植物或植物品种 ( 由植物生物技术方法， 如基因工程获得 ) 可 以抗非生物胁迫因素。 所述植物可通过转基因的方法或筛选具有抗上述胁迫的突变体而获 得。特别有用的抗胁迫的植物包括如下植物 ：
a. 包含可以降低聚 (ADP- 核糖 ) 聚合酶 (PARP) 基因在植物细胞或植物中的表达 / 或活性的转基因的植物 ；
b. 包含可以降低植物或植物细胞的 PARG 编码基因的表达和 / 或活性的抗胁迫能 力增强的转基因的植物 ；
c. 包含编码烟酰胺腺嘌呤二核苷酸补救合成途径的植物功能性酶， 包括烟酰胺 酶、 烟酸酯核糖磷酸转化酶、 烟酸单核苷酸腺嘌呤基转化酶、 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸合成酶 或烟碱酰胺核糖磷酸转化酶的抗胁迫能力增强的转基因的植物。
本发明还可处理的植物或植物品种 ( 由植物生物技术方法制得， 如基因工程获 得 ) 所收获的产品表现出产量、 质量和 / 或贮存稳定性得到改变和 / 或改变所收获的产品 的特定成分的性状， 如：
1) 合成改性淀粉的转基因植物， 其相对于野生型植物细胞或植物所合成的淀粉， 已在物理化学特性上， 特别是直链淀粉含量或直链淀粉 / 支链淀粉比例、 分支程度、 平均链 长、 侧链分布、 黏度表现、 胶凝阻力、 淀粉粒大小和 / 或淀粉粒形态等方面均已改变， 因此更 适于特定用途。
2) 合成非淀粉碳水化合物聚合物或合成与未经基因改良的野生型植物相比性状 改变的非淀粉碳水化合物聚合物的转基因植物。其实例为产生聚果糖的植物， 尤指菊糖型 与果聚糖型， 产生 α-1， 4 葡聚糖的植物， 产生 α-1， 6 分支 α-1， 4 葡聚糖的植物， 产生交替 糖 (alternan) 的植物。
3) 产生玻尿酸 (hyaluronan) 的转基因植物。
还可根据本发明处理的植物或植物品种 ( 通过植物生物技术， 例如遗传工程而获 得 ) 为具有改变的纤维性质的植物， 例如棉花植物。所述植物可通过遗体转化或通过筛选 含有能赋予所述改变的纤维性质的突变植物而获得， 所述植物包括 ：
a) 含有形式改变的纤维素合酶基因的植物， 例如棉花植物，
b) 含有形式改变的 rsw2 或 rsw3 同源核苷酸的植物， 例如棉花植物 ；
c) 蔗糖磷酸合酶表达增强的植物， 例如棉花植物，
d) 蔗糖合成酶表达增强的植物， 例如棉花植物 ；
e) 如通过下调纤维选择性 β-1， 3- 葡聚糖酶而改变纤维细胞基部胞间连丝门控 时间的植物， 例如棉花植物 ；
f) 如通过包括 nodC 的 N- 乙酰葡萄糖胺转移酶基因和几丁质合成酶基因的表达而 改变了纤维反应性的植物， 如棉花植物。
还可根据本发明处理的植物或植物品种 ( 通过植物生物技术， 例如遗传工程而获 得 ) 为具有改变的油成分的性质的植物， 例如油菜或有关的芸苔属植物。所述植物可通过遗传转化或通过筛选含有能给予所述改变的油性质的突变植物而获得， 所述植物包括 ：
a) 产生具有高油酸含量的油的植物， 例如油菜植物 ；
b) 产生具有低亚麻酸含量的油的植物， 例如油菜植物 ；
c) 产生具有低水平的饱和脂肪酸的油的植物， 例如油菜植物。
可根据本发明处理的特别有用的转基因植物为含有一种或多种编码一种或多种 毒素的基因的植物， 所述植物为例如以下述的商品名市售的转基因植物 ： YIELD ( 例如玉米、 棉花、 大豆 )、 ( 例如玉米 )、 ( 例如玉米 )、 ( 例 如 玉 米 )、 Nucotn ( 棉花 )、 ( 例 如 玉 米 )、 ( 例如玉米 )、 ( 棉 花 )、 和 ( 棉 花 )、 ( 马铃薯 )。 ( 对草甘膦可提及的除草剂耐受性植物的实例有下述市售的商品名为 Roundup( 对草丁膦具有耐受性， 例如油菜 )、 具有耐受性， 例如玉米、 棉花、 大豆 )、 Liberty ( 对咪唑啉酮具有耐受性 ) 和 ( 对磺酰脲具有耐受性， 例如玉米 ) 的玉米品 种、 棉花品种和大豆品种。可提及的除草剂抗性植物 ( 以常规的除草剂耐受性方式育种的 植物 ) 包括市售的商品名为 ( 例如玉米 ) 的品种。
可根据本发明处理的特别有用的转基因植物为含有转化事件 (event) 或转化事 件 (events) 组合的植物， 所述植物列于例如多个国家或地区管理机构的数据库中 ( 参见， 例如 http://gmoinfo.jrc.it/gmp_browse.aspx 和 http://www.agbios.com/dbase.php)。 此外， 在材料保护方面， 本发明的活性化合物或组合物可用于保护工业材料免受 有害微生物， 例如真菌的侵袭和破坏。
此外， 本发明的混合物可单独使用或与其它作为防污组合物的活性混合物组合使 用。
在本发明的上下文中， 工业材料应理解为工业中适于使用的无生命的材料。 例如， 受本发明的活性化合物保护免受微生物改变或破坏的工业材料可以为 ： 粘合剂、 胶料、 纸 张、 壁纸、 和板材、 织品、 皮革、 木材、 油漆和塑料制品、 冷却的润滑剂以及其它可被微生物侵 袭或破坏的材料。 在要保护的材料中， 还可提及生产设备和建筑物的部件， 例如可因微生物 的繁殖而受到损坏的冷却水回路、 冷却和加热系统以及通风和空调机组。 在本发明中， 可优 选提及的工业材料为粘合剂、 胶料、 纸张和板材、 皮革、 木材、 油漆、 冷却润滑剂和传热流体， 特别优选木材。本发明的活性化合物或组合物能够阻止不利效果如腐败、 腐朽、 变色、 褪色 以及霉变的发生。 此外， 本发明的混合物可用于保护与盐水或微成水接触的物体， 防止其污 垢的形成， 如外壳、 屏幕、 网、 建筑物、 锚泊和信号传导系统。
本发明防治有害真菌的方法可用于保护仓储物。此处， 仓储物应理解为需要长期 保护的自然的植物源或动物源， 或其自然来源的物质的加工产品。可保护刚收割的或通过 干燥、 润湿、 粉碎、 研磨、 压榨或烧烤加工后的植物源仓储物质， 如植物或植物部位， 如茎、 叶、 块茎、 种子、 果实、 谷物。仓储物质还包括木材， 既包括未加工的木材， 如建筑木材、 电线 杆和栅栏， 也包括制成品， 如家具。 动物源的仓储物质， 例如兽皮、 皮革制品、 毛皮以及头发。 本发明的活性化合物能够防止不利效果如腐败、 腐朽、 变色、 褪色或霉变的发生。
根据本发明可治疗的真菌病害的一些病原体包括但不限于如下的实例 ：
由白粉病病原体引起的病害， 所述病原体诸如 ： 布氏白粉菌 (Blumeria)， 例如禾 本科布氏白粉菌 (Blumeria graminis) ； 叉丝单囊壳属 (Podosphaera) 菌种， 例如苹果白
粉病属 (Podosphaera leucotricha) ； 单丝壳属 (Sphaerotheca) 菌种， 如黄瓜种质白粉 病 (Sphaerotheca fuliginea) ； 钩 丝 壳 属 (Uncinula species) 菌 种， 例如葡萄白粉病 (Uncinula necator)。
由锈病病原体引起的病害， 所述病原体诸如 ： 胶锈菌属 (Gymnosporangium) 菌种， 例如褐色胶锈菌 (Gymnosporangium sabinae) ； 驼孢锈属 (Hemileia) 菌种， 例如咖啡驼孢 锈菌 (Hemileia vastatrix) ； 层锈菌属 (Phakopsora) 菌种， 例如豆薯层锈菌 (Phakopsora pachyrhizi) 和山马蝗层锈菌 (Phakopsora meibomiae) ； 柄锈菌 (Puccinia) 菌种， 例如 小麦叶锈病 (Puccinia recondita) 或小麦叶锈菌 (Puccinia triticina) ； 单胞锈菌属 (Uromyces) 菌种， 例如菜豆锈病菌 (Uromyces appendiculatus) ；
由 卵 菌 纲 (Oomycetes) 群 病 原 体 引 起 的 病 害， 所述病原体诸如： 盘梗霉 属 (Bremia) 菌 种， 例 如 莴 苣 盘 梗 霉 (Bremia lactucae) ； 霜 霉 属 (Peronospora) 菌 种， 例 如 真 菌 豌 豆 霜 霉 (Peronospora pisi) 或 紫 菜 薹 霜 霉 病 菌 (P.brassicae) ； 疫 霉 属 (Phytophthora) 菌 种， 例 如 马 铃 薯 晚 疫 病 菌 (Phytophthora infestans) ； 单 轴 霉 属 (Plasmopara) 菌 种， 例 如 葡 萄 单 轴 霉 (Plasmopara viticola) ； 假霜霉属 (Pseudoperonospora) 菌种， 例如律草假霜霉 (Pseudoperonospora humuli) 或黄瓜霜霉 病菌 (Pseudoperonospora cubensis) ； 腐霉属 (Pythium) 菌种， 例如终极腐霉 (Pythium ultimum) ；
由以下病原体引起的叶斑枯病和叶萎蔫病病害， 诸如， 链格孢属 (Alternaria) 菌 种， 例 如 番 茄 早 疫 病 菌 (Alternaria solani) ； 尾 孢 属 (Cercospora) 菌 种， 例如甜 菜 褐 斑 病 菌 (Cercospora beticola) ； 枝 孢 属 (Cladosporium) 菌 种， 例如黄瓜黑星 病 菌 (Cladosporium cucumerinum) ； 旋 孢 腔 菌 属 (Cochliobolus) 菌 种， 例如禾旋孢 腔 菌 (Cochliobolus sativus)( 分 生 孢 子 形 式 ： 内 脐 蠕 孢 属 (Drechslera)， 类似的 ： 长 蠕 孢 菌 (Helminthosporium)) ； 炭 疽 菌 属 (Colletotrichum) 菌 种， 例如菜豆炭疽 菌 (Colletotrichum lindemuthanium) ； Cycloconium 菌 种， 例如油橄榄孔雀斑病菌 (Cycloconium oleaginum) ； 间座壳属 (Diaporthe) 菌种， 例如柑橘黑点病菌 (Diaporthe citri) ； 痂 囊 腔 菌 属 (Elsinoe) 菌 种， 例 如 痂 囊 腔 菌 (Elsinoe fawcettii) ； 盘长孢属 (Gloeosporium) 菌种， 例如桃炭疽病盘长孢菌 (Gloeosporium laeticolor) ； 小丛壳属 (Glomerella) 菌种， 例如围小丛壳菌 (Glomerella cingulata) ； 球座菌属 (Guignardia) 菌 种， 例 如 葡 萄 球 座 菌 (Guignardia bidwelli) ； 小 球 腔 菌 属 (Leptosphaeria) 菌 种， 例 如 油 菜 茎 基 溃 疡 病 菌 (Leptosphaeria maculans) ； 大 毁 壳 属 (Magnaporthe) 菌 种， 例 如 稻 瘟 病 菌 (Magnaporthe grisea) ； 微 结 节 菌 属 (Microdochium) 菌 种， 例如雪霉 叶 枯 菌 (Microdochium nivale) ； 球 腔 菌 属 (Mycosphaerella) 菌 种， 例如禾生球腔菌 (Mycosphaerella graminicola) 和斐济球腔菌 (M.fijiensis) ； Phaeosphaeria 菌种， 例 如小麦叶枯病菌 (Phaeosphaeria nodorum) ； 核腔菌属 (Pyrenophora) 菌种， 例如圆核腔 菌 (Pyrenophora teres) ； 柱隔孢属 (Ramularia) 菌种， 例如 Ramularia collo-cygni ； 喙 孢属 (Rhynchosporium) 菌种， 例如大麦云纹病菌 (Rhynchosporium secalis) ； 壳针孢属 (Septoria) 菌种， 例如芹菜斑枯病菌 (Septoria apii) ； 雪腐病属 (Typhula) 菌种， 例如雪 腐褐色小粒菌核病菌 (Typhula incarnata) ； 黑星菌属 (Venturia) 菌种， 例如苹果黑星病 菌 (Venturia inaequalis) ；由例如以下病原体引起的根和茎病害， 诸如 ： 伏革菌属 (Corticium) 菌种， 例 如 Corticium graminearum ； 镰 刀 菌 属 (Fusarium) 菌 种， 例 如 尖 孢 镰 刀 菌 (Fusarium oxysporum) ； 顶 囊 壳 菌 (Gaeumannomyces) 菌 种， 例 如 小 麦 全 蚀 病 菌 (Gaeumannomyces graminis) ； 丝 核 菌 属 (Rhizoctonia) 菌 种， 例 如 立 枯 丝 核 菌 (Rhizoctonia solani) ； Tapesia 菌种， 例如 Tapesia acuformis ； 根串珠霉属 (Thielaviopsis) 菌种， 例如烟草根黑 腐病菌 (Thielaviopsis basicola) ；
由以下病原体引起的穗和圆锥花序 ( 包括玉米穗轴 ) 病害， 诸如 ： 链格孢属 (Alternaria) 菌 种， 例 如 菌 链 格 孢 (Alternaria spp.) ； 曲 霉 属 (Aspergillus) 菌 种， 例 如 黄 曲 霉 (Aspergillus flavus) ； 枝 孢 属 (Cladosporium) 菌 种， 例如芽枝状枝孢菌 (Cladosporium cladosporioides) ； 麦角菌属 (Claviceps) 菌种， 例如麦角菌 (Claviceps purpurea) ； 镰刀菌属 (Fusarium) 菌种， 例如黄色镰刀菌 (Fusarium culmorum) ； 赤霉菌 属 (Gibberella) 菌种， 例如玉蜀赤霉菌 (Gibberella zeae) ； Monographella 菌种， 例如 小麦雪霉叶枯病 (Monographella nivalis) ； 壳针孢属 (Septoria) 菌种， 例如颖枯壳针孢 (Septoria nodorum) ；
由黑粉菌引起的病害， 所述黑粉菌诸如 ： 轴黑粉菌属 (Sphacelotheca) 菌种， 例 如玉米丝黑穗病菌 (Sphacelotheca reiliana) ； 腥黑粉菌属 (Tilletia) 菌种， 例如小麦 网腥黑穗病菌 (Tilletia caries) 或小麦矮化腥黑穗病菌 (T.controversa) ； 条黑粉菌属 (Urocystis) 菌种， 例如隐条黑粉菌 (Urocystis occulta) ； 黑粉菌属 (Ustilago) 菌种， 例 如裸麦黑粉菌 (Ustilago nuda)、 小麦黑粉菌 (U.nuda tritici) ；
由以下病原体引起的果实腐烂， 诸如 ： 曲霉属 (Aspergillus) 菌种， 例如黄曲 霉 (Aspergillus flavus) ； 葡 萄 孢 属 (Botrytis) 菌 种， 例 如 灰 葡 萄 孢 菌 (Botrytis cinerea) ； 青霉菌属 (Penicillium) 菌种， 例如扩展青霉菌 (Penicillium expansum) 或产 紫青霉菌 (P.purpurogenum) ； 核盘菌属 (Sclerotinia) 菌种， 例如核盘菌 (Sclerotinia sclerotiorum) ； 轮 枝 孢 属 (Verticilium) 菌 种， 例 如 黑 白 轮 枝 孢 菌 (Verticilium alboatrum) ；
由以下病原体引起的种子传播的和土壤传播的腐烂和萎蔫病的病害以及幼苗 病 害， 诸如 ： 镰 刀 菌 属 (Fusarium) 菌 种， 例 如 黄 色 镰 刀 菌 (Fusarium culmorum) ； 疫霉 属 (Phytophthora) 菌 种， 例 如 恶 疫 霉 (Phytophthora cactorum) ； 腐 霉 属 (Pythium) 菌 种， 例如终极腐霉菌 (Pythium ultimum) ； 丝核菌属 (Rhizoctonia) 菌种， 例如立枯丝核 菌 (Rhizoctonia solani) ； 小核菌属 (Sclerotium) 菌种， 例如齐整小核菌 (Sclerotium rolfsii) ；
由以下病原体引起的癌性病害、 菌瘿和丛枝病， 诸如 ： 丛赤壳属 (Nectria) 菌种， 例如仁果癌丛赤壳菌 (Nectria galligena) ；
由以下病原体引起的萎蔫病害， 诸如 ： 褐腐病属 (Monilinia) 菌种， 例如核果褐腐 病菌 (Monilinia laxa) ；
由以下病原体引起的叶、 花和果实的畸形， 诸如 ： 外囊菌属 (Taphrina) 菌种， 例如 畸形外囊菌 (Taphrina deformans) ；
由 以 下 病 原 体 引 起 的 木 本 植 物 的 退 化 病 害， 诸如 ： 埃 斯 卡 (Esca) 菌 种， 例 如 Phaemoniella chlamydospora 、 Phaeoacremonium aleophilum 及 Fomitiporiamediterranea ；
由以下病原体引起的花和种子的病害， 诸如 ： 葡萄孢属 (Botrytis) 菌种， 例如灰 葡萄孢菌 (Botrytis cinerea) ；
由以下病原体引起的植物块茎病害， 诸如 ： 丝核菌属 (Rhizoctonia) 菌种， 例如立 枯丝核菌 (Rhizoctonia solani) ； 长蠕孢属 (Helminthosporium) 菌种， 例如云南马铃薯银 腐病菌 (Helminthosporium solani) ；
由细菌性病原体引起的病害， 诸如黄单胞菌属 (Xanthomonas) 菌种， 例如野油菜 假单胞菌水稻变种菌 (Xanthomonas campestris pv.oryzae) ； 假单胞菌 (Pseudomonas) 菌 种， 例 如 甜 瓜 细 菌 性 叶 斑 病 菌 (Pseudomonas syringae pv.lachrymans) ； 欧文菌属 (Erwinia) 菌种， 例如梨火疫病欧文菌 (Erwinia amylovora)。
优选地控制下列大豆病害 ：
由以下病原体引起的叶、 茎、 荚和种子的真菌病害， 诸如 ： 斑点落叶病菌 ( 轮 纹 叶 斑 病 菌 (alternaria spec.atrans tenuissima))、炭 疽 病 菌 (Colletotrichum gloeosporoides dematium var.truncatum)、 褐 斑 病 菌 ( 大 豆 褐 纹 壳 针 孢 (Septoria glycines))、 白斑和叶枯病菌 ( 大豆紫斑病菌 (Cercospora kikuchii))、 笄霉叶枯病菌 (Choanephora infundibulifera trispora(Syn.))、 疏毛核菌霉叶斑病菌 (Dactuliophora glycines)、 霜 霉 病 菌 ( 毛 豆 露 菌 病 (Peronospora manshurica))、 德斯霉叶枯病菌 (Drechslera glycini)、 灰斑病菌 ( 大豆抗灰斑病菌 (Cercospora sojina))、 枯斑病菌 ( 三叶草胡麻斑病菌 (Leptosphaerulina trifolii))、 叶点霉叶斑病菌 ( 大豆叶点霉菌 (Phyllosticta sojaecola))、 荚和茎枯萎病菌 ( 大豆荚杆枯腐病 (Phomopsis sojae))、 白 粉 病 菌 ( 大 豆 白 粉 病 菌 (Microsphaera diffusa))、 叶斑病菌 ( 大豆红叶斑病菌 (Pyrenochaeta glycines))、 立枯丝核菌叶枯病菌 ( 立枯丝核菌 (Rhizoctonia solani))、 锈 病 菌 ( 豆 薯 层 锈 菌 (Phakopsora pachyrhizi))、 黑 星 病 菌 ( 黑 痘 病 菌 (Sphaceloma glycines))、 匐柄霉叶枯病菌 ( 葱叶枯病菌 (Stemphylium botryosum))、 靶斑病菌 ( 茎枯病 菌 (Corynespora cassiicola))。
由 以 下 病 原 体 引 起 的 根 和 茎 的 真 菌 病 害， 诸如 ： 黑色根腐病菌 ( 丽赤壳菌 (Calonectria crotalariae))， 炭腐病菌 ( 大豆炭腐病菌 (Macrophomina phaseolina))、 镰孢枯萎病菌或萎蔫、 根腐以及荚和根颈腐烂 ( 尖镰孢 (Fusarium oxysporum)、 直喙镰 孢 (Fusarium orthoceras)、 半 裸 镰 孢 (Fusarium semitectum)、 木 贼 镰 孢 (Fusarium equiseti))、 mycoleptodiscus 根 腐 菌 ( 大 豆 褐 红 坏 死 病 菌 (Mycoleptodiscus terrestris))、根 腐 菌 (neocosmospora)( 菌 丝 束 衣 领 腐 烂 菌 (Neocosmopspora vasinfecta))、 荚和茎枯萎病菌 ( 大豆茎溃疡病菌 (Diaporthe phaseolorum))、 茎溃疡 菌 ( 大豆北方茎溃疡病菌 (Diaporthe phaseolorum var.caulivora))、 疫霉腐病菌 ( 大 豆 疫 病 菌 (Phytophthora megasperma))、 褐 茎 腐 病 菌 ( 大 豆 茎 褐 腐 病 菌 (Phialophora gregata))、 腐 霉 病 菌 ( 瓜 果 腐 霉 (Pythium aphanidermatum)、 畸 雌 腐 霉 (Pythium irregulare)、 德巴利腐霉 (Pythium debaryanum)， 群结腐霉 (Pythium myriotylum)、 终 极腐霉 (Pythium ultimum))、 丝核菌根腐、 茎腐和枯萎病菌 ( 立枯丝核菌 (Rhizoctonia solani))、 核 盘 菌 茎 腐 病 菌 ( 核 盘 菌 (Sclerotinia sclerotiorum))、 核盘菌白绢病菌 (Sclerotinia rolfsii)、 根串珠霉根腐病菌 ( 根串珠霉 (Thielaviopsis basicola))。可提及的会引起工业材料降解或改变的微生物为， 诸如 ： 细菌、 真菌、 酵母菌、 藻类及粘液微生物 (slime organism)。本发明的活性化合物优选抑制真菌， 特别是霉 菌、 使木材变色和毁坏木材的真菌 ( 担子菌 ) 以及粘液微生物和藻类。下述提到的微生 物作为实例， 诸如 ： 链格孢属 (Alternaria)， 例如链格孢 (Alternaria tenuis) ； 曲霉属 (Aspergillus)， 例 如 黑 曲 霉 (Aspergillus niger) ； 毛 壳 菌 属 (Chaetomium)， 例如球毛 壳 菌 (Chaetomium globosum) ； 粉 革 菌 属 (Coniophora)， 例 如 Coniophora puetana ； 香 菇属 (Lentinus)， 例如虎皮香菇菌 (Lentinus tigrinus) ； 青霉属 (Penicillium)， 例如 灰绿青霉 (Penicillium glaucum) ； 多孔菌属 (Polyporus)， 例如杂色多孔菌 (Polyporus versicolor) ； 短梗霉属 (Aureobasidium)， 例如出芽短梗霉 (Aureobasidium pullulans) ； Sclerophoma 属， 例 如 Sclerophoma pityophila ； 木 霉 属 (Trichoderma)， 例如绿色木霉 (Trichoderma viride) ； 埃 希 氏 菌 属 (Escherichia)， 例 如 大 肠 埃 希 氏 菌 (Escherichia coli) ； 假单胞菌属 (Pseudomonas)， 例如铜绿假单胞菌 (Pseudomonas aeruginosa) ； 葡萄 球菌属 (Staphylococcus)， 例如金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)。
另 外， 本 发 明 式 的 活 性 化 合 物 具 有 很 好 的 杀 菌 活 性。 它 们 具 有 非 常 光 谱 的 抗 菌 活 性， 特 别 是 抗 皮 肤 真 菌 和 酵 母 菌， 霉 菌 和 双 相 真 菌 ( 例 如 抗 念 珠 菌， 如白色 念 珠 菌 (Candida albicans)、 光 滑 念 珠 菌 (Candida glabrata)) 及 絮 状 表 皮 癣 菌 (Epidermophyton floccosum)， 曲 霉 属 菌 种， 如 黑 曲 霉 (Aspergillus niger) 和 烟 曲 霉 (Aspergillus fumigatus)， 发 癣 菌 属 (Trichophyton) 菌 种 如 须 发 癣 菌 (Trichophyton mentagrophytes)， 小孢子菌属 (Microsporon) 菌种， 如犬小芽孢菌 (Microsporon canis) 和奥杜盎小孢子菌 (Microsporon audouinii)， 所列举的这些真菌仅用作说明之用。
因此， 本发明式的活性化合物可以作为医疗和非医疗应用。
当使用本发明的活性化合物用作杀真菌剂时， 施用率可依据施用类型在较宽范围 内变化。本发明活性化合物的施用率为 ：
处理植物部位， 比如树叶时， 施用率为 0.1 ～ 10000g/ha， 优选为 10 ～ 1000g/ha， 特别优选 50 ～ 300g/ha( 当通过浇灌或滴注施用时， 甚至可以降低施用率， 尤其是使用惰性 物质如石棉或珍珠岩时 ) ；
处理种子时， 施用率为 2 ～ 200g/100kg 种子， 优选为 3 ～ 150g/100kg 种子， 特别 优选为 2.5 ～ 25g/100kg 种子， 更特别优选 2.5 ～ 12.5g/100kg 种子。
处理土壤时， 施用率为 0.1 ～ 10000g/ha， 优选 1 ～ 5000g/ha。
上述施用率仅是典型的方法， 而不应该限制本发明的目的。
根据本发明， 活性化合物或组合物还可用于保护植物在处理后的一段期间内免于 所述病原物的侵袭。提供保护的周期通常为植物接受活性化合物处理之后延长 1 ～ 28 天， 优选为 1 ～ 14 天， 更优选为 1 ～ 10 天， 特别优选为 1 ～ 7 天， 或为处理种子之后高达 200 天。
此外， 通过本发明的处理， 可降低收获的材料和食物以及由其制备的饲料中霉菌 毒素的含量。本申请中， 特别但不限地可提及下述霉菌毒素 ： 脱氧萎镰菌醇 (DON)， 瓜萎镰 菌醇， 15-Ac-DON， 3-Ac-DON， T2- 和 HT2- 毒素， 伏马镰孢毒素 (Fumonisine)， 玉米赤霉烯 酮， 串珠镰刀菌素， 镰刀菌素， 蛇形菌素 (DAS)， 白僵菌素， 恩镰孢菌素， fusaroproliferin， fusarenol， 赭 曲 霉 素， 展 青 霉 素， 麦角生物碱和例如由下述真菌生产的黄曲霉毒素： 镰 刀 菌 属， 如 锐 顶 镰 刀 菌 (Fusarium acuminatum)， 燕 麦 镰 刀 菌 (F.avenaceum)， F.crookwellense， 大 刀 镰 刀 菌 (F.culmorum)， 禾 谷 镰 孢 菌 (F.graminearum)( 玉 米 赤 霉 (Gibberella zeae))， 水 贼 镰 刀 菌 (F.equiseti)， F.fujikoroi， F.musarum， 尖孢镰 刀 菌 (F.oxysporum)， 层 生 镰 刀 菌 (F.proliferatum)， 早 熟 禾 镰 刀 菌 (F.poae)， 小麦冠 腐 病 菌 (Fusarium pseudograminearum)， 接 骨 木 镰 刀 菌 (F.sambucinum)， 麃草镰刀菌 (F.scirpi)， 半裸镰刀菌 (F.semitectum)， 腐皮镰刀菌 (F.solani)， F.sporotrichoides， F.langsethiae， 亚粘团镰孢霉 (F.subglutinans)， 三线镰刀菌 (F.tricinctum)， 轮枝样镰 刀菌 (F.verticillioides)， 还包括曲霉属、 青霉属、 麦角菌 (Claviceps purpurea)、 葡萄穗 霉属等。
如合适， 本发明的化合物在某一浓度和施用率下还可用作除草剂、 安全剂、 生长调 节剂或提高植物特性的助剂， 或用作杀微生物剂， 例如用于杀真菌剂、 抗霉菌剂、 杀细菌剂、 杀病毒剂 ( 包括抗类病毒剂 ) 或作为抗 MLO( 类支原体， Mycoplasma-like organisms) 剂 以及抗 RLO( 类立克次体， Rickettsia-like organisms) 剂。如合适， 它们还可作为其它活 性化合物合成中的中间体或前体。
本发明的活性化合物干扰植物的代谢， 因此可用作生长调节剂。 植物生长调节剂对植物有各种作用。 化合物的作用基本上取决于基于植物发育阶 段的施用时机、 施用到植物或它们的环境中的活性化合物的量以及施用类型。在不同情况 下， 生长调节剂应当对作物有一定的预期效果。
可使用植物生长调节物用于如抑制植物的营养生长。 这种生长的抑制是有经济上 的益处的， 如草的这种情况， 可减少在观赏花园、 公园、 运动场所、 路边、 机场或果园中割草 的频率。抑制路边、 管道或架空电缆附近或相当普遍地不想让植物旺盛生长的区域的草本 和木本植物的生长也是重要的。
使用生长调节剂抑制谷类的纵向生长也是很重要的。这样， 可降低或完全消除植 物在收获前倒伏的风险。此外， 在谷类中， 生长调节剂可增强茎杆强度， 这也可抗倒伏。施 用生长调节剂稳固和强化茎杆可允许提高肥料的施用量， 从而增加谷类的产量且无倒伏的 风险。
在许多作物中， 抑制营养生长可使株型更紧凑， 因此可提高基于土壤表面的产量。 这种方式获得的较小的植物的另一个优点是作物更易于栽培和收获。
抑制植物的营养生长还由于营养和同化物提供给花朵和果实的形成的比提供给 植物营养器官的多， 从而增加产量。
经常， 生长调节剂还可用于促进营养生长。这当收获的是植物的营养部分时是有 极大好处的。 然而， 促进营养生长还可促进生殖生长， 在营养生长中形成更多的同化物从而 生成更多或更大的果实。
在某些情况下， 可通过控制植物代谢， 且检测不到任何营养生长的改变而实现产 量的增加。此外， 生长调节剂还可用于改变植物的组成， 从而可导致收获的产品的质量提 高。 因而， 例如可增加糖用甜菜、 甘蔗、 菠萝以及柑桔类果实中的糖含量， 或增加大豆或谷类 中的蛋白质含量。 例如， 还可用生长调节剂抑制所需组分的降解， 如采前或采后的糖用甜菜 或甘蔗中的糖。此外， 对次生植物组分的生成或消除有积极作用。作为实例可提及的是橡 胶树的乳胶流。
在生长调节剂的影响下， 可形成单性果实。此外， 它还可影响花朵的性别。它还可 生成不育花粉， 这对培育和生产杂交种子是特别重要的。
通过使用生长调节剂， 可控制植物的分枝性。一方面， 通过去除顶端优势， 可促进 侧枝的发育， 这对于观赏植物的培育是尤其需要的， 还可以抑制生长。 然而， 另一方面， 可抑 制侧枝的生长。该作用特别有助于如烟草或番茄的栽培。
在生长调节剂的影响下， 可控制植物叶片的数量， 从而可实现植物在所需的时间 点进行落叶。 这种落叶在机械收获棉花中特别重要， 但也有助于方便其它作物的收获， 如葡 萄栽培中。还可在移植前使植物落叶以降低植物的蒸腾作用。
生长调节剂还可用于调节果实开裂。一方面， 可防止早熟的果实开裂。另一方面 可促进果实开裂或花朵凋落来达到所需的质量 (“减重” ) 从而打破交替。交替应理解为一 些果实类物种的特征， 由于内在的因素， 年与年之间的产量变化极大。最终， 在收获时用生 长调节剂， 可减小果实采摘所需要的力度， 可实现机械化收获或方便手工收获。
生长调节剂还可用于实现采前或采后加速或延迟收获的材料的成熟。 由于这可最 佳地适应市场的需求， 因此是特别有益的。此外， 某些情况下， 生长调节剂还可改良果实的 着色。此外， 生长调节剂还可用于实现在特定的时间段内集中成熟。这使得可在一次操作 中实现完全机械或手工收获， 例如对于烟草、 番茄或咖啡的情况。 通过使用生长调节剂， 它还可以影响植物剩下的种子或芽， 所以植物， 如苗圃中的 菠萝或观赏植物可在它们通常不会萌发、 长芽或开花的时候萌发、 长芽或开花。 在一些有霜 冻危险的地方， 在生长调节剂的帮助下， 有望延迟种子出芽或萌发从而避免晚霜造成的损 害。
最终， 生长调节剂可诱导植物对霜冻、 干旱或高盐度土壤的抗性。 这使得植物可栽 培于通常不适于栽培的区域。
根据本发明， 可以特别有益的方式用本发明式 (I) 的化合物和 / 或组合物处理列 举的植物。上述活性化合物或组合物的优选范围也可适于处理这些植物。特别优选用本申 请中特别提及的化合物或组合物处理植物。
用下述的实施例对本发明进行举例说明。然而， 本发明不限于这些实施例。
制备例
制备编号 12 的化合物 ( 方法 C)
在 氩 气 氛 下， 将 于 20ml 干 四 氢 呋 喃 和 20ml 干 二 乙 醚 中 的 4.0g(14.0mmol)1-(4- 溴 -2- 甲基苯氧基 )-3， 3- 二甲基丁 -2- 酮和 2.57g(16.1mmol)5- 溴 嘧啶的混合物冷却到 -120℃。然后， 缓慢加入正丁基锂 (10.5ml， 1.6M， 16.8mmol) 并进行 搅拌。加入正丁基锂后， 将反应混合物缓慢升温至室温， 过夜。将 20ml 10％的氯化铵溶液 加入到反应混合物中， 去除有机相。然后用 1N 盐酸和饱和氯化钠水溶液洗涤有机相， 用硫 酸钠干燥并过滤， 将滤液浓缩。用柱层析纯化粗产物 ( 环己烷 / 乙酸乙酯 1 ∶ 1)。获得
0.7g(13％ ) 所需产物。
制备编号 13 的化合物 ( 方法 B)
在室温和氩气氛下， 将 0.17g(60％， 4.32mmol) 的氢化钠加入到溶于 20ml N， N- 二 甲基甲酰胺的 0.90g(4.32mmol)2， 3- 二氟 -4- 溴苯酚中， 反应混合物在室温下搅拌 1h。然 后， 加入 0.7g(3.92mmol)5-(2- 叔丁基环氧乙烷 -2- 基 )) 嘧啶， 反应混合物在 100℃下搅拌 12h。冷却到室温后， 减压去除溶剂， 向残留物中加入饱和氯化钠水溶液和乙酸乙酯。分离 出有机相， 用硫酸钠干燥， 过滤并浓缩。用柱层析纯化粗产物 ( 环己烷 / 乙酸乙酯 1 ∶ 1)。 获得 0.33g(22％ ) 所需产物。
制备 5-(2- 叔丁基环氧乙烷 -2- 基 ) 嘧啶
在氩气氛下， 将 10ml 二甲基亚砜缓慢滴加到 0.96g(4.3mmol) 三甲基碘化亚砜和 0.17g 氢化钠 (60％， 4.3mmol) 中。反应混合物在室温下搅拌 15min， 加入 0.65g(3.9mmol) 溶于 2ml 四氢呋喃的 2， 2- 二甲基 -1-(5- 嘧啶基 )-1- 丙酮。反应混合物在 50 ℃下搅拌 90min。减压下浓缩反应混合物， 向残留物加入饱和氯化钠水溶液和乙酸乙酯。分离出有机 相， 用硫酸钠干燥， 过滤并浓缩。获得 0.70g(99％ ) 的所需产物， 其无需进一步纯化就可进 行反应。
制备编号 1 的化合物 ( 方法 B)
在室温和氩气氛下， 将 124mg(60％， 3.09mmol) 的氢化钠加入到溶于 25ml N， N- 二 甲基甲酰胺的 0.72g(3.39mmol)2- 氯 -5- 三氟甲硫基苯酚中， 反应混合物在室温下搅拌 1h。 然后， 加入 0.56g(3.09mmol)1-[[2-(1， 1- 二甲基乙基 )-2- 环氧乙烷基 ] 甲基 ]-1H-1， 2， 4- 三唑 ( 制备见 DE 3111238)， 反应混合物在 100℃下搅拌 12h。冷却到室温后， 减压去除 溶剂， 向残留物中加入饱和氯化钠水溶液和乙酸乙酯。分离出有机相， 用硫酸钠干燥， 过滤 并浓缩。用柱层析纯化粗产物 ( 环己烷 / 乙酸乙酯 1 ∶ 1)。获得 0.21g(18％ ) 所需产物。
与上述实施例类似， 并根据本发明方法的一般描述， 可获得下表 1 中所列举的式 (I) 的化合物。
表1
根据 EEC 指令 79/831 附录 V.A8， 用 HPLC( 高效液相色谱 ) 在反相柱 (C 18) 上测 定 logP 值， 方法如下 ：
[a] 在 pH2.7 的酸性范围内， 进行 LC-MS 测定， 流动相为 0.1％甲酸水溶液和乙腈 ( 含有 0.1％甲酸 )， 线性梯度为 10％乙腈至 95％乙腈。
实施例 A ： 单丝壳菌 (Sphaerotheca) 测试 ( 黄瓜 )/ 保护性
溶剂 ： 49 重量份的 N， N- 二甲基甲酰胺
乳化剂 ： 1 重量份的烷基芳基聚乙二醇醚
为生产活性化合物的适合制剂， 将 1 重量份的活性化合物与所述量的溶剂和乳化
剂混合， 用水将浓缩液稀释到所需的浓度。 为测试保护活性， 将活性化合物的制剂以所述的 施用率喷施幼嫩的黄瓜植株。处理后 1 天， 用黄瓜白粉菌 (Sphaerotheca fuliginea) 的孢 子悬液接种植株。然后， 将植株置于相对空气湿度为 70％， 温度为 23℃的温室内。接种 7 天后， 进行评价。0％是对应于对照的效力， 而 100％是指没有观察到感染。在这一测试中， 下述编号的本发明的化合物 ： 1、 4、 5、 7、 8、 11、 12、 13、 14、 15、 16、 17、 18、 19、 20、 21、 22、 23、 24、 25、 26、 27、 28、 29、 30、 31、 32、 33、 34、 35、 36、 37、 38、 39、 40、 41、 42、 43、 44、 45、 46、 47、 48、 49、 50、 51、 52、 53、 54、 55 和 56， 在 500ppm 的活性化合物浓度下表现出 70％或以上的效力。
实施例 B ： 黑星菌 (Venturia) 测试 ( 苹果 )/ 保护性
溶剂 ： 24.5 重量份的丙酮
24.5 重量份的二甲基乙酰胺
乳化剂 ： 1 重量份的烷基芳基聚乙二醇醚
为生产活性化合物的适合制剂， 1 重量份的活性化合物与所述量的溶剂和乳化剂 混合， 用水将浓缩液稀释到所需的浓度。 为测试保护活性， 将活性化合物的制剂以所述的施 用率喷施幼嫩植株。 在喷雾涂布液干燥后， 植株用苹果黑星病的病原苹果黑星菌 (Venturia inaequalis) 的分生孢子水悬液进行接种， 再置于约 20℃、 相对空气湿度为 100％的保温箱 内 1 天。然后， 将植物置于约 21℃、 相对空气湿度为 90％的温室内。接种 10 天后， 进行评 价。 0％是对应于对照的效力， 而 100％是指没有观察到感染。 在这一测试中， 下述编号的本 发明的化合物 ： 7、 8、 11、 12、 13、 18、 19、 22、 25、 26、 28、 29、 30、 31、 40、 41、 43、 47、 50、 51、 52 和 53， 在 100ppm 的活性化合物浓度下表现出 70％或以上的效力。
实施例 C ： 单胞锈菌 (Uromyces) 测试 ( 豆 )/ 保护性
溶剂 ： 24.5 重量份的丙酮
24.5 重量份的二甲基乙酰胺
乳化剂 ： 1 重量份的烷基芳基聚乙二醇醚
为生产活性化合物的适合制剂， 1 重量份的活性化合物与所述量的溶剂和乳化剂 混合， 用水将浓缩液稀释到所需的浓度。为测试保护活性， 将活性化合物的制剂以所述的 施用率喷施幼嫩植株。在喷雾涂布液干燥后， 植株用豆锈病病原疣顶单胞锈 (Uromyces appendi-culatus) 的孢子水悬液进行接种， 再置于约 20℃、 相对空气湿度为 100％的保温 箱内 1 天。 然后， 将植物置于约 21℃、 相对空气湿度为 90％的温室内。 接种 10 天后， 进行评 价。 0％是对应于对照的效力， 而 100％是指没有观察到感染。 在这一测试中， 下述编号的本 发明的化合物 ： 7、 8、 11、 12、 13、 14、 18、 19、 22、 25、 26、 28、 29、 30、 31、 33、 40、 41、 43、 47、 50、 51、 52 和 53， 在 100ppm 的活性化合物浓度下表现出 70％或以上的效力。
实施例 D ： 禾本科布氏白粉菌 (Blumeria graminis) 测试 ( 大麦 )/ 保护性
溶剂 ： 49 重量份的 N， N- 二甲基乙酰胺
乳化剂 ： 1 重量份的烷基芳基聚乙二醇醚
为生产活性化合物的适合制剂， 1 重量份的活性化合物与所述量的溶剂和乳化剂 混合， 用水将浓缩液稀释到所需的浓度。为测试保护活性， 将活性化合物的制剂以所述的 施用率喷施幼嫩植株。在喷雾涂布液干燥后， 植株粘上大麦白粉菌 (Blumeria graminis f.sp.hordei) 的孢子。 将植株置于约 18℃、 相对空气湿度约为 80％的保温箱内促进霉脓泡 的发育。接种 7 天后， 进行评价。0％是对应于对照的效力， 而 100％是指没有观察到感染。在这一测试中， 下述编号的本发明的化合物 ： 7、 8、 11、 11、 12、 13、 14、 19、 22、 25、 28、 29、 30、 31 和 37， 在 500ppm 的活性化合物浓度下表现出 70％或以上的效力。
实施例 E ： 颖枯球腔菌 (Leptosphaeria nodorum) 测试 ( 小麦 )/ 保护性
溶剂 ： 49 重量份的 N， N- 二甲基乙酰胺
乳化剂 ： 1 重量份的烷基芳基聚乙二醇醚
为生产活性化合物的适合制剂， 1 重量份的活性化合物与所述量的溶剂和乳化剂 混合， 用水将浓缩液稀释到所需的浓度。 为测试保护活性， 将活性化合物的制剂以所述的施 用率喷施幼嫩植株。 在喷雾涂布液干燥后， 用颖枯球腔菌 (Leptosphaeria nodorum) 的孢子 悬液对植株进行喷雾。将植株置于约 20℃、 相对空气湿度约为 100％的保温箱内 48 小时。 将植物置于温度约 22℃、 相对空气湿度约为 80％的温室内。接种 8 天后， 进行评价。0％是 对应于对照的效力， 而 100％是指没有观察到感染。在这一测试中， 下述编号的本发明的化 合物 ： 7、 8、 11、 12、 13、 14、 19、 22、 25、 28、 29、 30、 31 和 37， 在 500ppm 的活性化合物浓度下表现 出 70％或以上的效力。
实施例 F ： 梨孢菌 (Pyricularia) 测试 ( 水稻 )/ 保护性
溶剂 ： 28.5 重量份的丙酮
乳化剂 ： 1.5 重量份的烷基芳基聚乙二醇醚
为生产活性化合物的适合制剂， 1 重量份的活性化合物与所述量的溶剂混合， 用水 和所述量的乳化剂将浓缩液稀释到所需的浓度。为测试保护活性， 将活性化合物的制剂以 所述的施用率喷施幼嫩植株。处理后 1 天， 植株接种稻瘟病菌 (Pyricularia oryzae) 的孢 子水悬液。然后将植株置于相对空气湿度为 100％、 温度为 25℃的温室内。接种 7 天后， 进 行评价。 0％是对应于对照的效力， 而 100％是指没有观察到感染。 在这一测试中， 下述本发 明的编号 12 的化合物在 500ppm 的活性化合物浓度下表现出 80％或以上的效力。
实施例 G ： 丝核菌 (Rhizoctonia) 测试 ( 水稻 )/ 保护性
溶剂 ： 28.5 重量份的丙酮
乳化剂 ： 1.5 重量份的烷基芳基聚乙二醇醚
为生产活性化合物的适合制剂， 1 重量份的活性化合物与所述量的溶剂混合， 用水 和所述量的乳化剂将浓缩液稀释到所需的浓度。为测试保护活性， 将活性化合物的制剂以 所述的施用率喷施幼嫩植株。处理后 1 天， 植株接种立枯丝核菌 (Rhizoctonia solani) 的 菌丝。然后将植株置于相对空气湿度为 100％、 温度为 25℃的温室内。接种 4 天后， 进行评 价。 0％是对应于对照的效力， 而 100％是指没有观察到感染。 在这一测试中， 下述本发明的 编号 12 的化合物在 500ppm 的活性化合物浓度下表现出 80％或以上的效力。
实施例 H ： 旋孢腔菌 (Cochliobolus) 测试 ( 水稻 )/ 保护性
溶剂 ： 28.5 重量份的丙酮
乳化剂 ： 1.5 重量份的烷基芳基聚乙二醇醚
为生产活性化合物的适合制剂， 1 重量份的活性化合物与所述量的溶剂混合， 用 水和所述量的乳化剂将浓缩液稀释到所需的浓度。为测试保护活性， 将活性化合物的制 剂以所述的施用率喷施幼嫩植株。处理后 1 天， 植株接种官部旋孢腔菌 (Cochliobolus miyabeanus) 的孢子水悬液。然后将植株置于相对空气湿度为 100％、 温度为 25℃的温室 内。接种 4 天后， 进行评价。0％是对应于对照的效力， 而 100％是指没有观察到感染。在这一测试中， 下述本发明的编号 12 的化合物在 500ppm 的活性化合物浓度下表现出 80％或以 上的效力。
实施例 I ： 层锈菌 (Phakopsora) 测试 ( 大豆 )/ 保护性
溶剂 ： 28.5 重量份的丙酮
乳化剂 ： 1.5 重量份的烷基苯酚聚氧乙烯醚 ( 三硬脂酰苯酚聚氧乙烯醚 (16))
为生产活性化合物的适合制剂， 1 重量份的活性化合物与所述量的溶剂和乳化剂 混合， 用水将浓缩液稀释到所需的浓度。 为测试保护活性， 将活性化合物的制剂以所述的施 用率喷施幼嫩植株。喷施后 1 天， 植株接种豆薯层锈菌 (Phakopsora pachyrhizi) 的孢子 水悬液。将植株置于 20℃、 相对空气湿度为 80％的温室内。接种 11 天后， 进行评价。0％ 是对应于对照的效力， 而 100％是指没有观察到感染。在这一测试中， 下述本发明的编号 8 的化合物在 250ppm 的浓度下表现出 80％或以上的效力。
实施例 J ： 层出镰刀菌 (Fusarium proliferatum) 生产的伏马毒素 FB1
在微滴定板的含 DMSO(0.5％ ) 的伏马毒素诱导液体培养基 ( 每升含 0.5g 麦芽提 取物、 1g 酵母提取物、 1g 细菌用蛋白胨、 20g 果糖、 1g KH2PO4、 0.3g MgSO4×7H2O、 0.3g KCl、 0.05g ZnSO4×7H2O 和 0.01g CuSO4×5H2O) 中进行化合物的测试。用终浓度为 2000 个孢子 /ml 的层出镰刀菌 (Fusarium proliferatum) 的浓缩孢子悬液进行接种。 将平板置于 20℃、 高空气湿度下孵育 5 天。在一开始以及 5 天后， 测定 OD620 的 OD 值 ( 重复测定 ： 每孔 3×3 次测定 )， 计算生长的抑制。5 天后， 取出液体培养基的样品， 用 50％的乙腈以 1 ∶ 1000 进 行稀释。用 HPLC-MS/MS 分析稀释样品的 FB1 的浓度， 测定值用于计算与无活性化合物的对 照相比， 伏马毒素 FB1 生产的抑制。
用下述参数实施 HPLC-MS/MS ：
离子化 ： ESI 正离子 (positive)
离子喷雾电压 ： 5500V
喷雾气体温度 ： 500℃
去簇电压 ： 114V
碰撞能量 ： 51eV
碰撞气体 ： N2
NMR 示踪 ： 722.3 ＞ 352.3 ； 停留时间 100ms
HPLC 柱 ： Waters Atlantis T3( 键合相 ： 三官能十八烷基， 端基封尾 )
粒径 ： 3μm
柱尺寸 ： 50 x 2mm
温度 ： 40℃
溶剂 A ： 水 +0.1％ HCOOH(v/v)
溶剂 B ： 乙腈 +0.1％ HCOOH(v/v)
流速 ： 400μl/ 分钟
进样体积 ： 5μl
梯度 ：
47CN 102471285 A说时间 [min] 0 2 4 4.1 9明A％ 90 5 5 90 90书B％ 10 95 95 10 1043/45 页抑制伏马毒素 FB1 生产的实例
编号 4、 5、 9、 7、 8、 10、 11、 12 和 13 的化合物实例在 50μM 的浓度下表现出抑制伏马 毒素 FB1 生产的活性＞ 80％。 提及的实例在 50μM 对层出镰刀菌 (Fusarium proliferatum) 的生长抑制率变化范围为 0 ～ 98％。
实施例 K ： 禾谷镰孢菌 (Fusarium graminearum) 的 DON/ 乙酰基 -DON 生产
在微滴定板的含 DMSO(0.5％ ) 的 DON 诱导液体培养基 ( 每升含 1g(NH4)2HPO4、 0.2g MgSO4×7H2O、 3g KH2PO4、 10g 甘油、 5g NaCl 和 40g 蔗糖 ) 中进行化合物的测试。用终浓度为
2000 个孢子 /ml 的禾谷镰孢菌 (Fusarium graminearum) 的浓缩孢子悬液进行接种。将平 板置于 28℃、 高空气湿度下 7 天。在一开始以及 3 天后， 测定 OD620 的 OD 值 ( 重复测定 ： 每孔 3×3 次测定 )， 计算生长的抑制。7 天后， 加入 1 体积的 84/16 乙腈 / 水混合物， 然后， 每孔取出液体培养基的样品， 用 10％的乙腈以 1 ∶ 100 进行稀释。用 HPLC-MS/MS 分析样品 的 DON 和乙酰基 -DON 的比例， 测定值用于计算与无活性化合物的对照相比， DON/AcDON 生 产的抑制。
用下述参数实施 HPLC-MS/MS ：
离子化 ： ESI 负离子 (negative)
离子喷雾电压 ： -4500V
喷雾气体温度 ： 500℃
去簇电压 ： -40V
碰撞能量 ： -22eV
碰撞气体 ： N2 NMR 示踪 ： 355.0 ＞ 264.9 ； HPLC 柱 ： Waters Atlantis T3( 键合相 ： 三官能十八烷基， 端基封尾 ) 粒径 ： 3μm 柱尺寸 ： 50 x 2mm 温度 ： 40℃ 溶剂 A ： 水 /2.5mM NH4OAc+0.05％ CH3COOH(v/v) 溶剂 B ： 甲醇 /2.5mM NH4OAc+0.05％ CH3COOH(v/v) 流速 ： 400μl/ 分钟 进样体积 ： 11μl梯度 ：A％ 100 100 5 5 100 100 B％ 0 0 95 95 0 0DON 抑制的实例
编号 9、 7、 8、 10、 11、 12 和 13 的化合物实例在 50μM 的浓度下表现出抑制 DON/ AcDON 生产的活性＞ 80％。提及的实例在 50μM 的禾谷镰孢菌 (Fusarium graminearum) 生长抑制率变化范围为 0 ～ 98％。
实施例 L ： 植物调节剂的萌芽前作用
植物调节剂的萌芽前作用
将单子叶或双子叶作物的种子置于木纤维盆中的沙壤土中并用土壤覆盖。 制备成 可湿性粉剂 (WP) 形式的测试化合物， 添加 0.2％的润湿剂制备成具有 600l/ha 的水施用率 ( 转换的 ) 的水悬液， 以不同的剂量施用到覆土的表面。 处理以后， 将盆置于温室中， 保持测 试植物良好的生长条件。在约 3 周的试验后， 通过与未处理的对照进行比较， 目测评估测试 植物生长的抑制 ( 植物调节活性百分比 ： 100％活性＝最大地抑制植物生长， 0％活性＝植 物生长同未处理的对照 )。
结果 ： 植物调节剂的萌芽前作用
SETVI ＝ Setaria viridis( 狗尾草 )， TRZAS ＝ Triticum aestivum( 普通小麦 )， BRSNW ＝ Brassica napus( 油菜 )， VIOTR ＝ Viola tricolor( 三色堇 )， ABUTH ＝ Abuthilon theophrasti( 苘麻 )。50