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1、(10)申请公布号 CN 103611180 A (43)申请公布日 2014.03.05 CN 103611180 A (21)申请号 201310594072.9 (22)申请日 2013.11.21 A61L 15/26(2006.01) A61L 15/28(2006.01) A61L 15/44(2006.01) A61L 15/50(2006.01) (71)申请人 无锡中科光远生物材料有限公司 地址 214192 江苏省无锡市锡山区芙蓉三路 99 号科创园青云 6 座无锡中科光远生 物材料有限公司 (72)发明人 韩志超 许杉杉 (74)专利代理机构 北京品源专利代理有限公司 1。
2、1332 代理人 巩克栋 (54) 发明名称 一种自粘止血防粘连纤维体的制备方法 (57) 摘要 本发明公开了一种自粘止血防粘连纤维体的 制备方法， 包括 ：（1） 将选自聚乳酸 - 羟基乙酸共 聚物、 聚乳酸、 聚乳酸 - 聚乙二醇嵌段共聚物、 聚 己内酯 - 羟基乙酸共聚物和聚己内酯的有机高分 子通过高压静电纺丝制成复合纤维材料 ；（2） 将 所述复合纤维材料在羧甲基壳聚糖和氯化钙的水 溶液中浸泡 1-5 小时， 冷冻干燥后， 在 40-85条 件下热压 15-60 分钟， 得到所述自粘止血防粘连 纤维体。所述制备方法制备的自粘止血防粘连纤 维体具备足够的机械强度， 同时可以止血防粘连， 。
3、适合活动性出血的止血和防粘连治疗。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 6 页 附图 1 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书6页 附图1页 (10)申请公布号 CN 103611180 A CN 103611180 A 1/1 页 2 1. 一种自粘止血防粘连纤维体的制备方法， 包括 ： （1） 将选自聚乳酸 - 羟基乙酸共聚物、 聚乳酸、 聚乳酸 - 聚乙二醇嵌段共聚物、 聚己内 酯 - 羟基乙酸共聚物和聚己内酯的有机高分子通过高压静电纺丝制成复合纤维材料 ； （2） 将所述复合纤维材料在羧甲基壳聚糖和氯化钙的水溶液中浸泡 。
4、1-5 小时， 冷冻干 燥后， 在 40-85条件下热压 15-60 分钟， 得到所述自粘止血防粘连纤维体。 2.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述有机高分子的重均分子量为5 50 万。 3.根据权利要求1或2所述的制备方法， 其特征在于， 所述羧甲基壳聚糖的重均分子量 为 1 8 万。 4. 根据权利要求 1-3 任一项所述的制备方法， 其特征在于， 所述羧甲基壳聚糖和氯化 钙的水溶液中， 羧甲基壳聚糖的浓度为 2-6%（W/V） 、 氯化钙的浓度为 5-20%（W/V） 。 5. 根据权利要求 1-4 任一项所述的制备方法， 其特征在于， 所述羧甲基壳聚糖和氯化 钙的水溶液。
5、通过如下方法配制 ： 将羧甲基壳聚糖溶于水中配制成浓度为 1-3%（W/V） 的水溶 液， 室温搅拌并滴加饱和氯化钙水溶液， 然后补加羧甲基壳聚糖， 使羧甲基壳聚糖的终浓度 为 2-6%（W/V） 、 氯化钙的终浓度为 5-20%（W/V） 。 6. 根据权利要求 1-5 任一项所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤 （1） 具体为 ： （1a） 将选自聚乳酸 - 羟基乙酸共聚物、 聚乳酸、 聚乳酸 - 聚乙二醇嵌段共聚物、 聚己内 酯 - 羟基乙酸共聚物和聚己内酯的有机高分子溶于有机溶剂中， 配制成浓度为 20-50%（W/ V） 的有机高分子溶液 ； （1b） 将所述有机高分子溶液注入注。
6、射器中， 加上不锈钢针头， 在电压为 10-30KV， 溶液 流速为 1-5mL/h， 接收距离为 5-25cm 的条件下， 进行静电纺丝得到复合纤维材料， 室温真空 干燥 24-48 小时， 去除残留溶剂。 7.根据权利要求6所述的制备方法， 其特征在于， 所述有机溶剂为N,N-二甲基甲酰胺、 丙酮、 四氢呋喃和六氟异丙醇中的一种或至少两种的混合。 8. 根据权利要求 1-7 任一项所述的制备方法， 其特征在于， 所述制备方法包括 ： （1 ） 将选自聚乳酸 - 羟基乙酸共聚物、 聚乳酸、 聚乳酸 - 聚乙二醇嵌段共聚物、 聚己内 酯 - 羟基乙酸共聚物和聚己内酯的有机高分子溶于 N,N- 。
7、二甲基甲酰胺、 丙酮、 四氢呋喃和 六氟异丙醇中的一种或至少两种的混合的有机溶剂， 配制成浓度为 20-50%（W/V） 的有机高 分子溶液 ； （2 ） 将所述有机高分子溶液注入注射器中， 加上不锈钢针头， 在电压为 10-30KV， 溶液 流速为 1-5mL/h， 接收距离为 5-25cm 的条件下， 进行静电纺丝得到复合纤维材料， 室温真空 干燥 24-48 小时， 去除残留溶剂 ； （3 ） 将羧甲基壳聚糖溶于水中配制成浓度为 1-3%（W/V） 的水溶液， 室温搅拌并滴加饱 和氯化钙水溶液， 然后补加羧甲基壳聚糖， 得到羧甲基壳聚糖的终浓度为 2-6%（W/V） 、 氯化 钙的终浓度。
8、为 5-20%（W/V） 的混合溶液 ； 和 （4 ） 将所述复合纤维材料在所述混合溶液中浸泡2小时， 冷冻干燥24-48小时， 然后在 50的热压板中热压 20 分钟， 得到所述自粘止血防粘连纤维体。 权 利 要 求 书 CN 103611180 A 2 1/6 页 3 一种自粘止血防粘连纤维体的制备方法 技术领域 0001 本发明涉及医用防粘连材料技术领域， 尤其涉及一种自粘止血防粘连纤维体的制 备方法。 背景技术 0002 手术后粘连是国内外外科手术领域至今尚未解决的重要医学难题之一。 粘连不仅 可以引起严重的并发症， 而且不良粘连也是再次手术时并发症明显增高的主要原因之一。 要想高效治。
9、疗粘连， 首先应明确粘连的机理， 从根本上入手解决问题。研究表明， 当组织受 到损伤， 会引起细胞释放大量组胺和细胞因子， 这些物质会引发局部炎症反应。同时， 血管 渗出纤维蛋白， 形成网状结构， 进而造成纤维组织和蛋白的沉积。 此时有两种可能的现象发 生， 其一是纤维蛋白溶酶原激活， 使纤维蛋白溶解， 从而引发正常的愈合过程 ； 其二是如果 纤维蛋白溶酶原被抑制， 则会构成纤维蛋白结构， 发生粘连。所以应该及时止血， 从根本上 防止粘连的发生。 0003 理想的防粘连材料应具有低致敏性、 适宜的组织粘附性 ； 能完全覆盖创伤表面并 且具有足够的体内存留时间 ； 能降解吸收而不需二次手术将其取。
10、出 ； 促进创面愈合 ； 同时 具有一定的机械强度而便于实施操作等。 现有的已上市防粘连材料， 尤其是膜材料， 虽然防 粘连效果确切， 但都有明确的禁忌症， 即感染性伤口及活动性出血性伤口禁用。研究表明， 凝胶具有局部止血作用及抑制血纤维蛋白束形成， 从而减少了因血肿机化而造成的组织粘 连。 同时具有选择性促进上皮细胞、 内皮细胞生长而抑制成纤维细胞生长的生物特性， 从而 促进组织生理性修复， 抑制疤痕形成， 减少组织粘连。 但是， 凝胶的机械强度较差， 不便于体 内植入和形态的长期保持。 0004 因此， 目前我们亟待寻找一种合适的复合高分子材料制备的防粘连纤维材料， 所 制备的材料具有适宜。
11、的机械强度， 同时可以止血防粘连， 实现高效治疗， 达到止血、 预防术 后粘连的功效。 我们前期的研究表明将止血剂与防粘连材料复合能够有效阻止术后活动性 出血的发生， 但对于止血剂用量的选择， 如何更好的针对不同创面释放以及止血完成后防 粘连膜中残留止血剂的代谢问题一直没有解决。 如何更好的将止血凝胶与防粘连材料联合 使用发挥其各自功效， 即保留防粘连材料的机械强度和止血凝胶的止血功能， 凝血被锁定 在材料内不诱使成纤维原细胞粘附， 同时不影响间皮细胞愈合， 是材料选择和设计的关键， 也是作为止血防粘连材料的关键。 发明内容 0005 本发明的目的在于提供一种自粘止血防粘连纤维体的制备方法， 。
12、所述制备方法制 备的自粘止血防粘连纤维体具备足够的机械强度， 同时可以止血防粘连， 适合活动性出血 的止血和防粘连治疗。 0006 为实现本发明的目的， 提供以下技术方案 ： 0007 一种自粘止血防粘连纤维体的制备方法， 包括 ： 说 明 书 CN 103611180 A 3 2/6 页 4 0008 （1） 将选自聚乳酸-羟基乙酸共聚物、 聚乳酸、 聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物、 聚己 内酯 - 羟基乙酸共聚物和聚己内酯的有机高分子通过高压静电纺丝制成复合纤维材料 ； 0009 （2） 将所述复合纤维材料在羧甲基壳聚糖和氯化钙的水溶液中浸泡 1-5 小时， 冷 冻干燥后， 在 40-85条件。
13、下热压 15-60 分钟， 得到所述自粘止血防粘连纤维体。 0010 本 发 明 的 自 粘 止 血 防 粘 连 纤 维 体 中，聚 乳 酸 - 羟 基 乙 酸 共 聚 物 （poly(lactic-co-glycolic acid)， PLGA） ， 是由两种单体乳酸 （Lactic acid， LA） 和羟基乙酸 （glycolic acid， GA）随机聚合而成， 是一种可降解的功能高分子有机化合 物， 具有良好的生物相容性、 无毒、 良好的成囊和成膜的性能， 已被广泛应用于制药、 医用 工程材料和现代化工业领域， 在美国 PLGA 通过美国食品和药物管理局 （Food and Drug。
14、 Administration， FDA） 认证， 被正式作为药用辅料收录进美国药典。两种单体乳酸和 羟基乙酸的比例不同可以制备出不同类型的 PLGA， 例如 ： PLGA75 ： 25 表示该聚合物由 75% 乳酸和 25% 羟基乙酸组成。聚乳酸 （polylactic acid， PLA） 又称聚丙交酯， 是以乳酸为主 要原料聚合得到的聚合物， 原料来源充分而且可以再生， 聚乳酸的生产过程无污染， 而且产 品可以生物降解， 实现在自然界中的循环， 因此是理想的绿色高分子材料。聚乳酸 - 聚乙 二醇嵌段共聚物， 是由聚乳酸和聚乙二醇 （polyethylene glycol， PEG） 共聚。
15、形成的， 是可 降解医用材料， 目前有多种方法可以制备， 比如中国发明专利公布号 CN102702535A 公开了 一种肌酐催化合成聚乳酸 - 聚乙二醇嵌段共聚物的工艺方法。聚己内酯 - 羟基乙酸共聚 物， 又称乙交酯 - 己内酯共聚物 （poly(glycolide-co-caprolactone)， PGCL） ， 是乙 交酯 （glycollide， GA） 和 - 已内酯 （-caprolactone， CL） 的共聚物， 作为可生物降解 的高分子材料， 在医用高分子材料的研究和开发中占有重要地位， 在手术缝合线、 人造皮肤 及血管、 骨骼固定及修复、 药物控制释放、 组织工程等许多领。
16、域得到了应用。通过控制乙交 酯单体和 - 已内酯单体的比例， 可以得到不同重量比的乙交酯己内酯共聚物。聚己内酯 （Polycaprolactone， PCL） ， 是由 - 己内酯在金属有机化合物 （如四苯基锡） 做催化剂， 二 羟基或三羟基做引发剂条件下开环聚合而成， 属于聚合型聚酯， 其分子量与歧化度随起始 物料的种类和用量不同而异。 0011 羧甲基壳聚糖 （Carboxymethyl chitosan） 是一种水溶性壳聚糖衍生物， 有许多特 性， 如抗菌性强， 具有保鲜作用， 是一种两性聚电解质等。 其主要药理作用包括抗菌抗感染、 降脂和防治动脉硬化、 抗病毒、 抗肿瘤、 抗凝血、 降。
17、血糖， 在化妆品、 保鲜及医药等方面有多 种应用。Muzzarelli 等在五六十年代就充分认识到壳聚糖硫酸酯的化学结构与肝素相似， 预示此类化合物有抗凝血活性。1985 年 Hirano 报道， 分子量 26000 的 O- 位双硫酸酯羧甲 基壳聚糖的抗凝血活性是肝素 （174 单位 / 毫克） 的 1.9 2.2 倍。 0012 优选地， 所述有机高分子的重均分子量为 5 50 万， 例如 5 万、 6 万、 8 万、 10 万、 12 万、 15 万、 18 万、 20 万、 24 万、 25 万、 27 万、 30 万、 32 万、 35 万、 38 万、 40 万、 42 万、 45。
18、 万、 48 万、 49 万或 50 万。 0013 优选地， 所述羧甲基壳聚糖的重均分子量为 1 8 万， 例如 1 万、 2 万、 3 万、 4 万、 5 万、 6 万、 7 万或 20 万。 0014 优选地， 所述羧甲基壳聚糖和氯化钙的水溶液中， 羧甲基壳聚糖的浓度为 2-6% （W/ V） ， 例如 2%（W/V） 、 3%（W/V） 、 4%（W/V） 、 5%（W/V） 或 6%（W/V） ， 氯化钙的浓度为 5-20%（W/ V） ， 例如 6%（W/V） 、 8%（W/V） 、 12%（W/V） 、 15%（W/V） 、 18%（W/V） 或 19%（W/V） 。 说 明 书。
19、 CN 103611180 A 4 3/6 页 5 0015 更优选地， 所述羧甲基壳聚糖和氯化钙的水溶液通过如下方法配制 ： 将羧甲基壳 聚糖溶于水中配制成浓度为 1-3% （W/V） 的水溶液， 室温搅拌并滴加饱和氯化钙水溶液， 然后 补加羧甲基壳聚糖， 使羧甲基壳聚糖的终浓度为 2-6%（W/V） 、 氯化钙的终浓度为 5-20%（W/ V） 。 0016 其中， 所述步骤 （2） 中， 浸泡时间可以是 1 小时、 2 小时、 3 小时、 4 小时或 5 小时 ； 热 压温度可以是42、 45、 50、 55、 60、 65、 70、 75、 80或84； 热压时间可以是 15 分钟、 。
20、18 分钟、 25 分钟、 30 分钟、 40 分钟或 50 分钟 ； 优选 50热压 20 分钟。 0017 优选地， 所述步骤 （1） 具体为 ： 0018 （1a） 将选自聚乳酸 - 羟基乙酸共聚物、 聚乳酸、 聚乳酸 - 聚乙二醇嵌段共聚物、 聚 己内酯 - 羟基乙酸共聚物和聚己内酯的有机高分子溶于有机溶剂中， 配制成浓度为 20-50% （W/V） 的有机高分子溶液 ； 0019 （1b） 将所述有机高分子溶液注入注射器中， 加上不锈钢针头， 在电压为 10-30KV， 溶液流速为 1-5mL/h， 接收距离为 5-25cm 的条件下， 进行静电纺丝得到复合纤维材料， 室温 真空干燥。
21、 24-48 小时， 去除残留溶剂。 0020 更优选地， 所述有机溶剂为 N,N- 二甲基甲酰胺、 丙酮、 四氢呋喃和六氟异丙醇中 的一种或至少两种的混合。 0021 更优选地， 所述有机溶剂为 N,N- 二甲基甲酰胺 （N,N-Dimethylformamide， DMF） 、 丙酮、 四氢呋喃 （Tetrahydrofuran， THF） 和六氟异丙醇 （Hexafluoroisopropanol， HFIP） 中 的一种或至少两种的混合。所述混合的典型但非限定性的实例比如 ： DMF 和丙酮， THF 和丙 酮， DMF、 THF 和丙酮等。 0022 其中， 有机高分子溶液的浓度可以。
22、是 ： 20%（W/V） 、 25%（W/V） 、 28%（W/V） 、 30%（W/ V） 、 32%（W/V） 、 35%（W/V） 、 38%（W/V） 、 42%（W/V） 、 45%（W/V） 或 48%（W/V） ， 其中重量 （W） 以 单位克 （g） 计， 体积 （V） 以单位毫升 （mL） 计， 重量 / 体积 （W/V） 以单位克 / 毫升 （g/mL） 计。 0023 优选地， 所述步骤 （1b） 中， 电压可以是 12KV、 15KV、 18KV、 22KV、 25KV、 27KV 或 29KV ； 溶液流速可以是 1.5mL/h、 2mL/h、 2.5mL/h、 3m。
23、L/h、 3.5mL/h、 4mL/h 或 4.5mL/h ； 接收距离可 以是 6cm、 7cm、 9cm、 11cm、 13cm、 15cm、 17cm、 19cm、 21cm、 23cm 或 24cm ； 干燥时间可以是 25 小 时、 27 小时、 30 小时、 35 小时、 38 小时、 40 小时、 42 小时、 44 小时、 46 小时或 47 小时。 0024 作为本发明的一个最优选技术方案， 所述制备方法包括 ： 0025 （1 ） 将选自聚乳酸 - 羟基乙酸共聚物、 聚乳酸、 聚乳酸 - 聚乙二醇嵌段共聚物、 聚 己内酯 - 羟基乙酸共聚物和聚己内酯的有机高分子溶于 N,N。
24、- 二甲基甲酰胺、 丙酮、 四氢呋 喃和六氟异丙醇中的一种或至少两种的混合的有机溶剂， 配制成浓度为 20-50%（W/V） 的有 机高分子溶液 ； 0026 （2 ） 将所述有机高分子溶液注入注射器中， 加上不锈钢针头， 在电压为 10-30KV， 溶液流速为 1-5mL/h， 接收距离为 5-25cm 的条件下， 进行静电纺丝得到复合纤维材料， 室温 真空干燥 24-48 小时， 去除残留溶剂 ； 0027 （3 ） 将羧甲基壳聚糖溶于水中配制成浓度为 1-3%（W/V） 的水溶液， 室温搅拌并滴 加饱和氯化钙水溶液， 然后补加羧甲基壳聚糖， 得到羧甲基壳聚糖的终浓度为 2-6%（W/V）。
25、 、 氯化钙的终浓度为 5-20%（W/V） 的混合溶液 ； 和 0028 （4 ） 将所述复合纤维材料在所述混合溶液中浸泡2小时， 冷冻干燥24-48小时， 然 说 明 书 CN 103611180 A 5 4/6 页 6 后在 50的热压板中热压 20 分钟， 得到所述自粘止血防粘连纤维体。 0029 本发明的有益效果为 ： 采用本发明制备方法制备的自粘止血防粘连纤维体， 将羧 甲基壳聚糖热压物理交联， 并与防粘连的复合纤维材料复合， 有效保持原有特性， 热压物理 交联的羧甲基壳聚糖在遇活动性出血时能够快速凝胶化， 与创口表面紧密贴合， 形成物理 挤压的止血效果， 同时分子上的双硫酸酯能够。
26、活化凝血酶， 进一步止血， 同时不产生代谢隐 患 ； 当活动性出血停止后， 凝血被包覆在羧甲基壳聚糖凝胶内， 大约 2 小时后凝胶逐渐被稀 释吸收， 剩余的防粘连的复合纤维材料不影响创面间皮细胞修复， 进一步起到术后防粘连 的效果。 附图说明 0030 图1是采用本发明实施例1制备的自粘止血防粘连纤维体对活动性出血模型鼠进 行伤口包扎的结果图。 具体实施方式 0031 下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述。本领域技术人员将会理 解， 以下实施例仅为本发明的优选实施例， 以便于更好地理解本发明， 因而不应视为限定本 发明的范围。 对于本领域的技术人员来说， 本发明可以有各种更改和变化，。
27、 凡在本发明的精 神和原则之内， 所作的任何修改、 等同替换或改进等， 均应包含在本发明的保护范围之内。 下述实施例中的实验方法， 如无特殊说明， 均为常规方法 ； 所用的实验材料， 如无特殊说明， 均为自常规生化试剂厂商购买得到的。 0032 实施例 1 ： 0033 本实施例按照如下方法制备具有自粘止血功能的防粘连纤维体 ： 0034 （1） 配制有机高分子混合溶液 ： 将 PLGA（Mw=8 万， LA/GA=75/25） 溶于 DMF/ 丙酮混 合溶剂 （DMF/ 丙酮的体积比 1/1） ， 配制成浓度为 30%（W/V） 的有机高分子混合溶液， 室温搅 拌 12 小时。 0035 （。
28、2） 制备防粘连纤维材料 ： 将步骤 （1） 配制的有机高分子混合溶液分别注入 10 个 10mL 的注射器中， 加上 5 号不锈钢针头， 在电压为 25KV， 溶液流速为 1.5mL/h， 接收距离为 18cm的条件下进行多喷头静电纺丝40分钟， 得到复合纤维材料， 室温真空干燥24-48小时， 除去残留溶剂， 纤维膜材料厚度为 100-140 微米。 0036 （3） 配制止血材料溶液 ： 将羧甲基壳聚糖 （Mw=25000） 200mg 溶于水溶液配制成浓 度为 2%（W/V） 的溶液 10mL， 室温搅拌缓慢滴加饱和 CaCl2水溶液 1mL， 控制速率为 1mL/h ； 此后补加羧甲。
29、基壳聚糖 100mg， 使最终羧甲基壳聚糖的浓度为 3%， CaCl2浓度为 12%。 0037 （4） 制备自粘止血防粘连纤维体复合材料 ： 将步骤 （2） 制备的复合纤维材料浸泡 于步骤 （3） 的止血材料溶液中， 置于表面皿中 2 小时后， 直接冷冻干燥 24 小时， 取出后， 在 50热压板中热压 20 分钟， 得到自粘止血防粘连纤维体。 0038 实施例 2 ： 0039 本实施例按照如下方法制备具有自粘止血功能的防粘连纤维体 ： 0040 （1） 配制有机高分子混合溶液 ： 将 PLA（Mw=5 万） 溶于 DMF/ 丙酮混合溶剂 （DMF/ 丙酮的体积比 1/1） ， 配制成浓度。
30、为 20%（W/V） 的有机高分子混合溶液， 室温搅拌 8 小时。 说 明 书 CN 103611180 A 6 5/6 页 7 0041 （2） 制备防粘连纤维材料 ： 将步骤 （1） 配制的有机高分子混合溶液分别注入 10 个 10mL 的注射器中， 加上 5 号不锈钢针头， 在电压为 10KV， 溶液流速为 5mL/h， 接收距离为 25cm 的条件下进行多喷头静电纺丝 40 分钟， 得到复合纤维材料， 室温真空干燥 24 小时， 除 去残留溶剂， 纤维膜材料厚度为 100-120 微米。 0042 （3） 配制止血材料溶液 ： 将羧甲基壳聚糖 （Mw=10000） 100mg 溶于水溶。
31、液配制成浓 度为 1%（W/V） 的溶液 10mL， 室温搅拌缓慢滴加饱和 CaCl2水溶液 0.5mL， 控制速率为 1mL/ h ； 此后补加羧甲基壳聚糖 100mg， 使最终羧甲基壳聚糖的浓度为 2%， CaCl2浓度为 6%。 0043 （4） 制备自粘止血防粘连纤维体复合材料 ： 将步骤 （2） 制备的复合纤维材料浸泡 于步骤 （3） 的止血材料溶液中， 置于表面皿中 2 小时后， 直接冷冻干燥 48 小时， 取出后， 在 40热压板中热压 60 分钟， 得到自粘止血防粘连纤维体。 0044 实施例 3 ： 0045 本实施例按照如下方法制备具有自粘止血功能的防粘连纤维体 ： 004。
32、6 （1） 配制有机高分子混合溶液 ： 将 PGCL（Mw=50 万， CL/GA=75/25） 溶于 DMF/ 丙酮 混合溶剂 （DMF/ 丙酮的体积比 1/1） ， 配制成浓度为 50%（W/V） 的有机高分子混合溶液， 室温 搅拌 15 小时。 0047 （2） 制备防粘连纤维材料 ： 将步骤 （1） 配制的有机高分子混合溶液分别注入 10 个 10mL 的注射器中， 加上 5 号不锈钢针头， 在电压为 30KV， 溶液流速为 1mL/h， 接收距离为 5cm 的条件下进行多喷头静电纺丝 60 分钟， 得到复合纤维材料， 室温真空干燥 48 小时， 除去残 留溶剂， 纤维膜材料厚度为 1。
33、50-180 微米。 0048 （3） 配制止血材料溶液 ： 将羧甲基壳聚糖 （Mw=80000） 400mg 溶于水溶液配制成浓 度为 4%（W/V） 的溶液 10mL， 室温搅拌缓慢滴加饱和 CaCl2水溶液 1.5mL， 控制速率为 1mL/ h ； 此后补加羧甲基壳聚糖 200mg， 使最终羧甲基壳聚糖的浓度为 6%， CaCl2浓度为 18%。 0049 （4） 制备自粘止血防粘连纤维体复合材料 ： 将步骤 （2） 制备的复合纤维材料浸泡 于步骤 （3） 的止血材料溶液中， 置于表面皿中 2 小时后， 直接冷冻干燥 48 小时， 取出后， 在 85热压板中热压 15 分钟， 得到自粘。
34、止血防粘连纤维体。 0050 实施例 4 ： 0051 本实施例按照如下方法制备具有自粘止血功能的防粘连纤维体 ： 0052 （1） 配制有机高分子混合溶液 ： 将 PCL（Mw=20 万） 溶于 DMF/ 丙酮混合溶剂 （DMF/ 丙酮的体积比 2/1） ， 配制成浓度为 35%（W/V） 的有机高分子混合溶液， 室温搅拌 10 小时。 0053 （2） 制备防粘连纤维材料 ： 将步骤 （1） 配制的有机高分子混合溶液分别注入 10 个 10mL 的注射器中， 加上 5 号不锈钢针头， 在电压为 20KV， 溶液流速为 3mL/h， 接收距离为 15cm 的条件下进行多喷头静电纺丝 50 分。
35、钟， 得到复合纤维材料， 室温真空干燥 36 小时， 除 去残留溶剂， 纤维膜材料厚度为 110-130 微米。 0054 （3） 配制止血材料溶液 ： 将羧甲基壳聚糖 （Mw=40000） 200mg 溶于水溶液配制成浓 度为 2%（W/V） 的溶液 10mL， 室温搅拌缓慢滴加饱和 CaCl2水溶液 1mL， 控制速率为 1mL/h ； 此后补加羧甲基壳聚糖 200mg， 使最终羧甲基壳聚糖的浓度为 4%， CaCl2浓度为 12%。 0055 （4） 制备自粘止血防粘连纤维体复合材料 ： 将步骤 （2） 制备的复合纤维材料浸泡 于步骤 （3） 的止血材料溶液中， 置于表面皿中 2 小时后。
36、， 直接冷冻干燥 36 小时， 取出后， 在 50热压板中热压 20 分钟， 得到自粘止血防粘连纤维体。 说 明 书 CN 103611180 A 7 6/6 页 8 0056 试验实施例 1 0057 采用本发明实施例 1 制备的自粘止血防粘连纤维体对活动性出血模型鼠进行伤 口包扎的结果如图 1 所示。直接用湿润纱布包覆的伤口 （空白对照） ， 5min 后依旧存在活动 性出血 ； 未加止血海绵的纤维材料包覆的伤口 （85/15） 会使血液凝固在伤口表面， 形成大 量凝血 ； 化学交联的止血海绵包覆的伤口 （85/15+Chem） ， 由于交联度较高， 凝胶化及粘附 性差， 也会存在一定血块。
37、 ； 而本发明的自粘止血防粘连纤维体 （85/15+Phys） ， 将超细纤维 （防粘连纤维材料） 与止血海绵 （热压物理交联的羧甲基壳聚糖） 有效结合， 止血海绵采用物 理交联， 能够快速成凝胶粘附于创口表面， 大约 2 小时后即完全凝胶化被稀释吸附， 止血效 果确切， 且不影响创口愈合， 能够有效减少术后粘连的发生。 0058 申请人声明， 本发明通过上述实施例来说明本发明的详细特征以及详细方法， 但 本发明并不局限于上述详细特征以及详细方法， 即不意味着本发明必须依赖上述详细特征 以及详细方法才能实施。 所属技术领域的技术人员应该明了， 对本发明的任何改进， 对本发 明选用组分的等效替换及辅助成分的添加、 具体方式的选择等， 均落在本发明的保护范围 和公开范围之内。 说 明 书 CN 103611180 A 8 1/1 页 9 图 1 说 明 书 附 图 CN 103611180 A 9 。