所属领域 本发明涉及一种干扰素眼膏及其制备方法，它是一种眼部抗病毒药物，是干 扰素的外用剂型。
背景技术 干扰素自1957年问世到现在，已开发了许多剂型，在国内就有冻干粉针剂、 液体注射剂、软膏剂、凝胶剂、妇科栓剂、滴眼剂等等，但作为眼膏剂，迄今为止还没有 见报道。干扰素作为广谱抗病毒、抗增殖和免疫调节药物已用于治疗二十余种疾病，如慢 性乙肝、丙肝、丁肝、毛细胞白血病、慢性髓细胞性白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、黑 色素瘤、卵巢癌、肝细胞癌、肾细胞癌、爱滋病相关综合症、流感及其它呼吸道病毒疾病、 尖锐湿疣、病毒性肺炎、带状疱疹、水痘、流行性乙型脑炎、流行性出血热、病毒性角膜 炎。局部用药也很广，尤其针对皮肤及黏膜用药，作为干扰素眼膏，它主要治疗眼睑单纯 疱疹、单纯性结膜炎、单纯性虹膜炎、睫状体炎等眼疾。而液体的干扰素滴眼剂治疗病毒 引起的眼部疾患的效果已被肯定，如腺病毒引起的严重流行性角膜炎，传染性强，对存在 传染源的家庭成员每日点用3次，约5000单位，有90％的预防效果，(对照组75％感染)。 发病早期使用，可缩短病程，减少角膜后遗症，防止视力减退。对单纯疱疹病毒引起的眼 疱疹病、IDU顽固性疱疹角膜炎也有效。治疗单纯疱疹性角膜炎，治愈率可达84-92.4％。 但滴眼剂是液体制剂，存在以下几点不足：
1.稳定性不好，有效期短，且在有效期内干扰素活性降低较快。
2.药物利用度低(1-10％)，这是由于人眼结膜囊暂时只可容纳30ul溶液，滴入部分 药液可迅速从膜囊溢出或从泪液中流失。
3.用药局部可产生眼前组织(角膜、结膜、巩膜、房水、睫状体)药物比眼后部组 织中(晶状体、玻璃体、视网膜)浓度高，很难达到治疗眼后部组织的作用。
几年来，临床医生及患者反映滴眼液虽白天使用方便，可需多次点滴，并且夜间不能 持续用药。而使用眼用膏剂，不仅减少用药次数，而且可以夜间用药，从而延长了用药时 间提高了治疗效果。发明人经过大量实验和临床研究，解决了上述问题。所以干扰素眼膏 克服干扰素滴眼剂存在的这些不足，具有使用方便，作用直接、集中、全面、持久等特点。
发明内容 本发明的目的是提供一种干扰素眼膏，它不仅具有稳定性好、药物利用度高、 药效持久、疗效好，且具有使用方便，作用直接、集中、全面、持久等特点。
本发明的另一个目的是提供一种干扰素眼膏的制备方法。它具有制备工艺稳定，制品 均一性好，生物活性稳定，药效持久等优点。
本发明的技术方案是，一种干扰素眼膏，含有药用活性成分干扰素的干扰素溶液和眼 膏基质；所述的干扰素溶液中含有干扰素、磷酸二氢钠、磷酸二氢钠、氯化钠、稳定剂， 稳定剂选自人血白蛋白、甘露醇、甘油、甘氨酸中的一种或几种的组合；所述的眼膏基质 中含有黄凡士林，液体石蜡，羊毛脂，乳化剂；乳化剂选自聚山梨酯-60、聚山梨酯-80、 司盘-80中的一种或几种的组合。干扰素与眼膏基质以及乳化剂聚山梨酯-80等赋形剂共同 形成油包水型稳定的眼膏剂。干扰素在赋形剂中表现出稳定的生物活性，眼部用药时，干 扰素利用率高，药效持久，充分体现了干扰素广谱抗病毒的优越性。
如上所述的干扰素眼膏的组分中：所述的干扰素溶液，其组份中干扰素按生物活性体 积比为1.0×105IU/ml～3.0×108IU/ml，其它按体积比为：磷酸氢二钠0.5％～1.2％，磷 酸二氢钠0.2％～0.8％，氯化钠0.1％～0.8％，0.1％～2.0％稳定剂，稳定剂选自人血白蛋 白、甘露醇、甘油、甘氨酸中的一种或几种的组合，人血白蛋白作为优选。所述的眼膏基 质，按重量比，其组份：黄凡士林60％～90％，液体石蜡5％～20％，羊毛脂5％～20％，0～ 2.0％的乳化剂，乳化剂选自聚山梨酯-60、聚山梨酯-80、司盘-80中的一种或几种的组合， 其中以聚山梨酯-80作为优选。干扰素∶眼膏基质＝1.0×103IU～5.0×108IU∶1克。
如上所述的干扰素眼膏的制备方法，主要分为三个步骤：其一是制备眼膏基质，即按 眼膏基质组分比例称取各赋形剂，然后加热进行混合，150℃干热灭菌1小时，冷却后备 用；其二是按眼膏组分比例取干扰素原液、稳定剂、缓冲溶液，在无菌条件下制备干扰素 溶液液，经0.22um滤膜除菌后备用；其三是制备干扰素眼膏剂，即先将油相眼膏基质预热 至40℃至56℃，再将按组分比例将水相干扰素溶液缓慢加入油相眼膏基质中，边加边搅 拌，搅拌10分钟至30分钟后利用分装系统进行分装成成品。
如上所述的干扰素眼膏的干扰素是天然的，或是基因重组的人干扰素，可以是αβγ 三种的任一型别。三种干扰素具有很大的同源性，只是三种干扰素在基因序列上稍有不同 而已，其药物功效基本相近。
如上所述的干扰素眼膏的干扰素优选为α2b亚型。由于干扰素α2b具有比活性高， 抗病毒作用强，中和抗体产生率低的优点。使用重组人扰素α2b眼膏可治疗由病毒感染 引起的眼科疾病，如眼睑单纯疱疹、单纯性结膜炎、角膜炎、单纯性虹膜炎、睫状体炎等 等。同时，本发明的干扰素眼膏具有易于均匀的涂敷于眼睑内，粘着性好，且无刺激性， 更易被眼部黏膜吸收，且使用方便的优点。
本发明的干扰素眼膏产品，它具有制备工艺稳定，制品均一性好，生物活性稳定等优 点。配方采用的是干扰素与眼膏赋型基质、稳定剂以及乳化剂等组成的油包水型眼膏剂。 眼部用药时，药效持久，与干扰素滴眼液相比，明显的提高了治疗效果。基质中采用聚山 梨酯80作为优选乳化剂，具有提高干扰素的稳定性，增强干扰素的生物疗效。
具体实施方式 下面结合实施例对本发明作进一步说明
实施例1 干扰素眼膏及其制备方法
1.组分：
眼膏基质： 黄凡士林： 900.0g 液体石蜡： 50.0g
羊毛脂： 50.0g
干扰素溶液：IFNα2b： 2.0×107IU 人血白蛋白： 5.0g
Na2HPO4：4.2g NaH2PO4： 2.3g
NaCl： 0.6g H2O： 至500ml
干扰素含量∶眼膏基质＝2.0×105IU∶1g
2.制备方法
A.称取眼膏基质的各组分，并进行加热混合，将混合后的基质进行150℃干烤灭菌1 小时，冷却后备用；
B.按眼膏组分比例取干扰素原液、稳定剂、缓冲溶液，在无菌条件下制备干扰素溶 液液，经0.22um滤膜除菌后备用；
C.将干扰素溶液加入到眼膏基质中，即先将油相眼膏基质预热至40℃至56℃，再将 按组分比例将水相干扰素溶液缓慢加入油相基质中，边加边搅拌，搅拌10分钟至30分钟 后利用分装系统进行分装。
实施例2干扰素眼膏及其制备方法
1.组分：
眼膏基质： 黄凡士林： 800.0g 液体石蜡： 98.0g
羊毛脂： 100.0g 聚山梨酯-60：2.0g
干扰素溶液：IFNα2b： 5.0×107IU 甘露醇： 5.0g
Na2HPO4：5.6g NaH2PO4： 1.1g
NaCl： 0.5g H2O： 至500ml
干扰素含量∶眼膏基质＝1.0×105IU∶1g
2.制备方法同具体实施例1。
实施例3干扰素眼膏及其制备方法
1.组分：
眼膏基质： 黄凡士林：800.0g 液体石蜡： 97.5g
羊毛脂： 100.0g 聚山梨酯-80： 2.5g
干扰素溶液：IFNα2b： 2.0×107IU 人血白蛋白： 2.5g
Na2HPO4： 4.2g NaH2PO4： 2.3g
NaCl： 0.6g H2O： 至500ml
干扰素含量∶眼膏基质＝2.0×105IU∶1g
2.制备方法同具体实施例1。
实施例4 干扰素眼膏及其制备方法
1.组分：
眼膏基质： 黄凡士林： 800.0g 液体石蜡： 97.5g
羊毛脂： 100.0g 司盘-80： 2.5g
干扰素溶液：IFNα2b： 2.0×107IU 人血白蛋白： 2.5g
Na2HPO4：4.2g NaH2PO4： 2.3g
NaCl： 0.6g H2O： 至500ml
干扰素含量∶眼膏基质＝2.0×105IU∶1g
2.制备方法同具体实施例1。
实施例5干扰素眼膏及其制备方法
1.组分：
眼膏基质： 黄凡士林： 600.0g 液体石蜡： 195.0g
羊毛脂： 200.0g 聚山梨酯-80：5.0g
干扰素溶液：IFNα2b： 2.0×107IU 甘油： 2.5g
Na2HPO4：4.2g NaH2PO4： 2.3g
NaCl： 0.6g H2O： 至500ml
干扰素含量∶眼膏基质＝2.0×105IU∶1g
2.制备方法同具体实施例1。
试验实施例1 药理学研究试验
1.试验材料：采用无环鸟苷组、滴宁(购自长春长生基因药业股份有限公司生产的重 组人干扰素α1b滴眼液)为阳性对照药，眼膏的空白基质为阴性对照药，使用的干扰素眼 膏是根据最优选的实施例三中制备的重组人干扰素α2b眼膏，并分为低、中、高三种剂量， 利用体重为2～3Kg的大耳白兔(中国人民解放军农牧大学实验动物中心提供)为动物模 型。
2.试验方法：
(1)模型制备：将大白兔若干只分别固定，分别滴入眼内1滴丁卡因溶液，用扩眼 器扩开眼睑，用6mm环钻在角膜上钻一环形印记，用手术刀片将角膜上皮刮去3×3mm2的 创面，然后将50μl单疱病毒滴入损伤的角膜上，用手轻揉30秒钟，左右眼均做上述手术。
(2)分组及给药：将上述兔均分6组：模型组、阴性对照组、阳性对照组、干扰素 眼膏组。阳性组中，无环鸟苷为2滴/次，滴宁为7500IU/次，重组人干扰素α2b眼膏， 是按低、中、高剂量组3750IU/次、7500IU/次、15000IU/次，3次/日，连续7日， 其中中剂量组为临床组，同时对大耳白兔已经感染单疱病毒的左右眼进行涂(或滴)眼药。
(3)及评分标准：分别于造模型后24h、给药后3、5、7、天，用沾1％荧光素钠的 滤纸染色，于裂隙灯下观察角膜病变程度、照相，于给药后第7天观察、照相后，麻醉取 角膜，10％中性福尔马林固定，做病理学检查。
角膜病变程度评分：印记环明显，弥漫点状、片状及树枝状着色为5分；印记环明 显，散在点状、片状及树枝状着色为4分；印记环不明显，散在点状、片状着色为3分； 印记环不明显，散在少数点状、片状及浅树枝着色为2分；印记环不明显，散在少数点状 着色为1分；表面光滑，有极少数点状着色为0分。
3.试验结果：将每个大耳白兔各角膜病变程度按上述评分标准打分后，按统计学进行 统计，则P值均小于0.001。观察结果表明应用无环鸟苷及滴宁后，角膜的病损变浅、变 小，应用重组人干扰素α2b眼膏，角膜的病损也变浅、变小，其中以中、高剂量组的疗效 为佳，所以重组人干扰素α2b有明显地抑制单疱病毒角膜炎的作用。
试验实施例2 大耳白兔的急性毒性试验
1.试验材料：使用的干扰素眼膏是根据最优选的实施例3中制备的重组人干扰素α2b 眼膏，利用体重为2～3Kg的大耳白兔(中国人民解放军农牧大学实验动物中心提供)为 动物模型。
2.试验方法：利用重组人干扰素α2b眼膏最大给药量4.8万IU/Kg作为实验药品， 各兔双眼均涂敷干扰素α2b眼膏3cm×2，即120mg，相当于12万IU/2.5Kg(4.8IU/ Kg)，涂敷眼膏后，每日观察，连续7日，观察结果。
3.试验结果：观察发现给药后7日之内动物体重、毛发、食欲、四肢活动、精神状态 均无异常，无一只死亡。而重组人干扰素α2b眼膏临床用量为40万IU/g的1.5cm，若 人体重按60Kg计算，相当于0.04万IU/Kg；而重组人干扰素α2b眼膏兔急毒试验证明， 其最大给药量4.8IU/Kg未出现毒性反应，该剂量相当于临床剂量的120倍，所以临床 用药非常安全。
试验实施例3 大耳白兔的眼部刺激试验
1.试验材料：采用眼膏的空白基质为阴性对照药，使用的干扰素眼膏是根据最优选的 实施例中制备的重组人干扰素α2b眼膏临床用药规格20万IU/g为试验膏剂，利用体重 为2～3Kg的大耳白兔(中国人民解放军农牧大学实验动物中心提供)为动物模型。
2.试验方法：取重组人干扰素α2b眼膏，将其100mg涂敷于大耳白兔右侧眼结膜囊内， 另一侧涂敷等量的空白基质作对照，给药后使眼睛被动闭合5～10秒，每曰给药3次，连 续给药7天。记录首次给药后6h、24h、48h、72h、5天、7天眼的局部反应情况(裂隙灯 下观察、照相)。
3.试验结果：依据《新药(西药)临床前研究指导原则汇编》进行评分标准，将每只 动物的眼角膜、虹膜、结膜的刺激反应分值相加，即是1只动物眼刺激反应的总积分，再 按《新药(西药)临床前研究指导原则汇编》眼刺激评价标准进行判定，见下表。
IFNα2b眼膏刺激性试验最后分值评分结果表
根据按《新药(西药)临床前研究指导原则汇编》眼刺激性评分标准，给药期间内三 个批号的重组人干扰素α2b眼膏对眼均无刺激性反应。所以这种干扰素眼膏100mg/次， 3次/日，连续7日给药，对兔眼均无刺激性反应。