所述技术领域
本发明是属于药物制剂领域，具体地说，涉及骨关节炎、类风湿性关节炎及 其它各类非风湿性炎症引起的疼痛等含有双氯芬酸盐和利多卡因的冻干制剂及其 制备方法。
技术背景
双氯芬酸为苯乙酸类中具有代表性的消炎镇痛药，主要是抑制环氧化酶，阻 止花生四烯酸转化为前列腺素，它对环氧化酶的2个异构体COX-1和COX-2的 作用相近，与许多传统的非甾体抗炎药(抑制COX-1的作用明显高于COX-2) 比较，在等效抗炎剂量下，其胃肠道反应相对较轻。双氯芬酸钠或双氯芬酸钾是 目前常用的非甾体抗炎药中抗炎镇痛作用较强的药物之一，具有显著的抗风湿， 消炎，止痛和解热作用，其抗炎作用比氟芬那酸、甲芬那酸强，比阿司匹林强26-50 倍，镇痛作用比阿司匹林、消炎痛、氟芬那酸强，能很好的解除关节疼痛，消肿， 改善其活动，同时具有良好的耐受性。特点是疗效好，不良反应轻，剂量是灭酸 类中最小者。
临床应用表明双氯芬酸及其盐类药物具有良好的抗炎、镇痛、解热作用。目 前临床上多用其口服制剂，如胶囊、片剂，以及外用剂型，如凝胶、乳膏等。对 这些剂型，药效受身体对药物吸收程度的影响很大，另外，给药和吸收的时间差 使药物有效成分延迟一定时间才能发挥作用。同时由于肝首过效应，以及口服对 胃肠道的直接刺激而使疗效减小，副作用增大。双氯芬酸盐的注射液不良反应较 轻，一般耐受良好，常见的副作用除了胃肠道反应外，还有42％-45％的患者出现 肌注局部较强疼痛。如果添加了利多卡因，可有效减少注射点疼痛，减少注射部 位组织损伤。而且，利多卡因起效速度快，作用强度高，但作用时效较短(＜2小 时)，双氯芬酸钠起效速度慢，但作用时效长，作用强度高，两种药代动力学互补 的(消炎)镇痛药的结合使其疗效更加完美，注射给药后，首先盐酸利多卡因在 5分钟内起效，迅速缓解关节炎患者的疼痛症状，随后双氯芬酸钠起效，发挥其 强效消炎镇痛作用，作用时间长达12～24小时，能够更好的控制关节炎病人的病 情。双氯芬酸钠利多卡因注射液已由瑞士美化(Mepha)药厂研制生产，已经药 监局批准在我国上市，规格为2ml：(75mg双氯芬酸钠、20mg利多卡因)。
双氯芬酸盐如双氯芬酸钠在水中略溶，将其制成水溶液的现有技术采用了例 如乙醇、异丙醇、丙二醇、聚乙二醇等低级醇和多元醇来溶解双氯芬酸盐以及进 一步将所得溶液用于制备药物制剂(如注射液)。这就极大地限制了其临床应用， 在使用中对病人的刺激性和副作用较大(例如疼痛、注射部位发炎、过敏等)。另 外，含双氯芬酸盐和利多卡因的溶液对光不稳定。通常，溶液中需添加稳定剂。 市售注射液采用避光的包装材料，使成本增加。因此，如何将含有双氯芬酸盐的 药物制成可供注射用的具有良好溶解性和稳定性的制剂一直是人们试图解决的问 题。
发明内容
本发明为了克服以上技术的不足，提供一种含有治疗有效量的双氯芬酸盐和 利多卡因的药物制剂，该制剂质量稳定，运输方便，贮存周期长，并且不存在使 用时因乙醇等有机溶剂造成的不良反应。
本发明的另一个目的在于提供一种制备上述含有双氯芬酸盐和利多卡因的药 物制剂的方法，该方法简便易行，有利于大工业生产。
本发明人经过大量深入地研究发现，采用冷冻干燥工艺可有效地解决制剂的 稳定性问题，通过添加表面活性剂、调节溶液的pH值等措施可以解决双氯芬酸 盐的溶解度问题，并使含有双氯芬酸盐和利多卡因的溶液适宜有效并经济地使用 常规冷冻干燥工艺来制备质量稳定、运输方便、且易贮存的含有双氯芬酸盐和利 多卡因的制剂。
本发明人在研究中发现，多种药学上可接受的增溶剂如β-环糊精、磷脂、 聚维酮、泊洛沙姆等均能增加双氯芬酸盐的溶解性，但与利多卡因配伍时产生沉 淀。而使用吐温80，可以使上述问题得以解决。
本发明提供一种含有双氯芬酸盐和利多卡因的冻干粉制剂，其由含有增溶作 用的吐温80、调节溶液pH值的药学上可接受的pH调节剂、治疗有效量的双氯 芬酸盐和利多卡因的溶液，溶液的pH值大于7.0，经冷冻干燥后制得。
本发明所述的溶液其pH值优选为7.5～9.0。所述的药学上可接受的pH调节 剂可以是至少一种药学上可接受的用于调节pH的常规或已知物质。可以是碱性 化合物或缓冲系统。所述的药学上可接受的碱性化合物可以是通常在药学上可接 受的可用于调节溶液pH值的碱性化合物，例如氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸三钠、 磷酸三钾等碱性化合物。所述的缓冲系统可以是常用或已知的在药学上可接受的、 可调节溶液pH值的缓冲系统，优选的缓冲系统包括磷酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐 和乳酸盐的缓冲系统。
所述的含有吐温80、pH调节剂、赋形剂、双氯芬酸盐和利多卡因的溶液， 可以是以水为溶剂的溶液，可以是以有机溶剂为溶剂的溶液，也可以以水和有机 溶剂为溶剂的溶液。所述的有机溶剂可以是药学上可接受的有机溶剂。
本发明提供的含有双氯芬酸盐和利多卡因的冻干粉制剂，还可以含有药学上 可接受的水溶性赋形剂、稳定剂、镇痛剂、缓冲剂和防腐剂等辅料的一种或一种 以上的物质。
所述的药学上可接受的水溶性赋形剂是可以用于制备冻干制剂的常规或已知 的物质，例如：甘露醇、山梨醇、氯化钠、葡萄糖、果糖、蔗糖、木糖醇、乳糖、 或右旋糖酐或它们的混合物，优选甘露醇。所述赋形剂的使用量是本领域常规的 用量。
所述的双氯芬酸盐和利多卡因为药学上可接受的盐，优选双氯芬酸钠或双氯 芬酸钾和盐酸利多卡因。
所述溶液中双氯芬酸盐的含量为0.75％～5％(g/ml)，利多卡因的含量为 0.2％～1.4％(g/ml)。所述的吐温80的用量为2％～10％(g/ml)，优选5％(g/ml)。
本发明提供一种含有双氯芬酸盐和利多卡因制剂冻干制剂的制备方法，包括 以步骤：(1)配制含有吐温80、pH调节剂、药学上可接受的水溶性赋形剂、治 疗有效量的双氯芬酸盐和利多卡因的溶液，所述溶液的pH值大于7.0；及(2) 冷冻干燥第(1)步所得溶液。所述的双氯芬酸盐和利多卡因指其药学上可接受的 盐，优选双氯芬酸钠和盐酸利多卡因。
所述的含有吐温80、pH调节剂、赋形剂、双氯芬酸盐和利多卡因的溶液， 可以是以水和/或有机溶剂为溶剂的溶液。所述的有机溶剂可以是药学上可接受的 有机溶剂。
在所述的第(1)步骤中，可以在加入双氯芬酸盐和利多卡因之前或之后、或 者加入吐温80之前或之后，或者加入pH调节剂之前或之后，或者加入赋形剂之 前或之后，加入常规药学上可接受的辅料，例如稳定剂、镇痛剂、缓冲剂和/或防 腐剂等。
在所述第(2)步骤，即冷冻干燥步骤前，所述含双氯芬酸盐和利多卡因溶液 可按照常规方法除去热原、过滤除菌。
所述的第(2)步骤可以是常规的或已知的冷冻干燥工艺步骤。所述的冷冻干 燥工艺在无菌条件下进行的，可根据临床制剂的需求和具体的生产设备，按照常 规或已知的方法调整冻干周期。
本发明的含有双氯芬酸盐和利多卡因冻干粉制剂，可以用2～5ml注射用水 很快复溶，供临床使用。
本发明通过添加吐温80、调节溶液的pH值等方法，使含有双氯芬酸盐和利 多卡因溶液稳定，含有双氯芬酸盐和利多卡因溶液的体积尽可能小，在解决含有 双氯芬酸盐和利多卡因的溶解度和稳定性问题的同时又使生产能耗大大减少，这 样可以有效并经济地使用常规冻干工艺来制备质量稳定、运输方便、且易贮存的 含有双氯芬酸盐和利多卡因的制剂。且工艺简单，不需要大规模的、特殊的设备， 能耗低。
本发明的冻干粉制剂，在光照(4500lx)、高温(60℃)条件下，与按照已有 技术制备的对比制剂相比，有关物质明显减少，说明本发明的冻干粉制剂比对比 制剂稳定。
本发明的冻干粉制剂，不但在刚刚制备之后，而且在长期贮藏之后都能保证 良好的溶解度和稳定性，便于运输、贮存和使用。
具体实施方式
下面将通过实施例对本发明作进一步的描述，这些描述并不是对本发明内容 作进一步的限定。本领域的技术人员应理解，对本发明内容所作的等同替换，或 相应的改进，仍属于本发明的保护范围之内。
实施例1
取100g吐温-80，加入40℃左右约1200ml的注射用水中，搅拌使溶解，加 入75g双氯芬酸钠搅拌使溶解。盐酸利多卡因23.1g用少量注射用水溶解后在不 断搅拌下加入上述溶液中，用5mol/L的氢氧化钠溶液调pH值到8.0左右。再加 入240g甘露醇、2g亚硫酸氢钠、0.2g依地酸二钠搅拌使完全溶解；加注射用水 至2000ml。加0.05％(g/ml)针用活性炭至药液中，室温搅拌30分钟，脱炭过滤。 测pH值及主药含量。用0.22μm微孔滤膜精滤除菌。在无菌条件下将所得溶液 置无菌西林瓶中(每支2ml)，按常规方法冷冻干燥，封口。即得本发明的含有双氯 酚酸盐和利多卡因的冻干粉制剂A。
实施例2
取100g吐温-80，加入约2000ml的注射用水中，搅拌使溶解，加入75g双氯 芬酸钠搅拌使溶解。盐酸利多卡因23.1g用少量注射用水溶解后在不断搅拌下加 入上述溶液中，用5mol/L的磷酸三钠钠溶液调pH值到8.5左右。再加入240g 甘露醇、2g亚硫酸氢钠搅拌使完全溶解；加注射用水至5000ml。加0.05％(g/ml) 针用活性炭至药液中，搅拌30分钟，脱炭过滤。测pH值及主药含量。用0.22μ m微孔滤膜精滤除菌。在无菌条件下将所得溶液置无菌西林瓶中(每支5ml)，按常 规方法冷冻干燥，封口。即得本发明的含有双氯酚酸盐和利多卡因的冻干粉制剂 B。
实施例3
取200g吐温-80，240g甘露醇、2g亚硫酸氢钠，加入约1500ml的注射用水 中，搅拌使溶解，加入75g双氯芬酸钠搅拌使溶解。盐酸利多卡因23.1g用少量 注射用水溶解后在不断搅拌下加入上述溶液中，用磷酸盐缓冲溶液调pH值到7.5 左右；加注射用水至2000ml。加0.05％(g/ml)针用活性炭至药液中，搅拌30 分钟，脱炭过滤。测pH值及主药含量。用0.22μm微孔滤膜精滤除菌。在无菌 条件下将所得溶液置无菌西林瓶中(每支2ml)，按常规方法冷冻干燥，封口。即得 本发明的含有双氯酚酸盐和利多卡因的冻干粉制剂C。
实施例4
取200g吐温-80，加入2000ml注射用水，搅拌，加入75g双氯芬酸钠搅拌使 溶解。盐酸利多卡因23.1g用少量注射用水溶解后在不断搅拌下加入上述溶液中， 用5mol/L的氢氧化钠溶液调pH值到8.0左右。再加入480g甘露醇搅拌使完全溶 解；加注射用水至10000ml。调pH值到8.0。加0.05％(g/ml)针用活性炭至药 液中，室温搅拌30分钟，脱炭过滤。测pH值及主药含量。用0.22μm微孔滤膜 精滤除菌。在无菌条件下将所得溶液置无菌西林瓶中(每支10ml)，按常规方法冷 冻干燥，封口。即得本发明的含有双氯酚酸盐和利多卡因的冻干粉制剂D。
实施例5
取70g吐温-80，加入40℃左右约1000ml的注射用水中，搅拌使溶解，加入 75g双氯芬酸钠搅拌使溶解。盐酸利多卡因23.1g用少量注射用水溶解后在不断 搅拌下加入上述溶液中，用5mol/L的氢氧化钠溶液调pH值到9.0左右。再加入 180g甘露醇、2g亚硫酸氢钠、0.2g依地酸二钠搅拌使完全溶解；加注射用水至 1500ml。加0.05％(g/ml)针用活性炭至药液中，室温搅拌30分钟，脱炭过滤。 测pH值及主药含量。用0.22μm微孔滤膜精滤除菌。在无菌条件下将所得溶液 置无菌西林瓶中(每支1.5ml)，按常规方法冷冻干燥，封口。即得本发明的含有 双氯酚酸盐和利多卡因的冻干粉制剂E。
实施例6
对实施例1制得的本发明的含有双氯酚酸盐和利多卡因的冻干粉制剂A与市 售双氯芬酸钠利多卡因注射液(简称对比制剂F)分别置光照(4500lx)、和高温 60℃下放置10天，分别于第5天和第10天进行稳定性考察，考察数据如下表。
双氯芬酸钠有关物质 照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录VD) 测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇 -0.01mol/L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调pH值至2.5)(66∶34)为流动相；检测 波长为254nm；流速：1.0ml/min。理论板数按双氯芬酸钠峰计算应不低于2000。
测定法 取本品适量(约相当于双氯芬酸钠25mg)，置50ml量瓶中，加流 动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液(应立即进样)；精密量取1ml 置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。取对照溶液20 μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度使主成分色谱峰高约为满量程的20％；再 精密量取供试品溶液和对照溶液各20μl分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主 峰保留时间的1.5倍，供试品溶液的色谱图中如显杂质峰，计算杂质峰面积与对 照品溶液主峰的面积百分比。(相对保留时间为双氯芬酸钠峰0.3以下的峰除外)。
利多卡因有关物质 照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录VD) 测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-醋 酸溶液(取冰醋酸50ml，加水930ml，混匀，用1mol/L氢氧化钠溶液调pH值至 3.4)(40∶60)为流动相；检测波长为234nm；流速：1.0ml/min。理论板数按2，6- 二甲基苯胺峰计算不低于2000。
测定法 取本品适量(约相当于利多卡因20mg)，用水溶解并稀释至10ml， 摇匀，作为供试品溶液；精密量取2，6-二甲基苯胺10.2μl(约相当于2，6-二甲基 苯胺10mg)，置100ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml 置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取对照品溶液 20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度使主成分色谱峰高约为满量程的20％； 再精密量取供试品溶液和对照品溶液各20μl分别注入液相色谱仪，记录色谱图 至双氯芬酸钠被洗出，供试品溶液的色谱图中在对照品主峰保留时间相应处如显 杂质峰，计算杂质峰面积与对照品溶液主峰的面积百分比。
含量测定 照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录VD)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈- 磷酸二氢铵溶液(取磷酸二氢铵1.0g，乙酸钠1.0g，加300ml水使溶解)(33∶ 67)为流动相；检测波长为230nm。理论板数按利多卡因峰计算应不低于2000。
测定法 取装量差异项下的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于双氯芬 酸钠90mg，利多卡因24mg)，置50ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇 匀；再精密量取5ml置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品 溶液，精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。另精密称取利多卡因对照 品约24mg，置50ml量瓶中，加0.5mol/L盐酸溶液0.7ml使溶解，加10ml乙醇， 摇匀，再精密称取在105℃干燥至恒重的双氯芬酸钠对照品约90mg，置同一50ml 量瓶中，再加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，再用流动相精密稀释10倍，同法测 定。按外标法以峰面积计算，即得。
表1：本发明的含有双氯芬酸盐和利多卡因的冻干粉制剂与对比制剂
在光照(4500lx)下稳定性对比
项目 样品 0天 5天 10天 性状 本发明制剂A 白色冻干块状物 白色冻干块状物 白色冻干块状物 对比制剂F 无色澄明液体 无色澄明液体 几乎无色澄明液 体 澄明度 本发明制剂A 合格 合格 合格 对比制剂F 合格 合格 合格 双氯芬酸钠有关物 质(％) 本发明制剂A 0.09 0.38 0.70 对比制剂F 0.18 0.47 0.91 利多卡因有关物质 (％) 本发明制剂A 0.001 0.001 0.002 对比制剂E 0.29 0.96 1.88 双氯芬酸钠含量 (％) 本发明制剂A 99.4 97.8 96.6 对比制剂F 100.9 98.4 97.1 利多卡因含量(％) 本发明制剂A 100.7 99.7 99.3 对比制剂F 99.3 98.9 97.4
表2：本发明的含有双氯芬酸盐和利多卡因的冻干粉制剂与对比制剂
在高温(60℃)下稳定性对比
项目 样品 0天 5天 10天 性状 本发明制剂A 白色冻干块状物 白色冻干块状物 微黄色冻干块状 物 对比制剂F 无色澄明液体 无色澄明液体 几乎无色澄明液 体 澄明度 本发明制剂A 合格 合格 合格 对比制剂F 合格 合格 合格 双氯芬酸钠有关物 质(％) 本发明制剂A 0.09 0.45 0.68 对比制剂F 0.18 0.66 0.89
利多卡因有关物质 (％) 本发明制剂A 0.001 0.001 0.001 对比制剂F 0.29 0.54 0.94 双氯芬酸钠含量(％) 本发明制剂A 99.4 98.7 98.1 对比制剂F 100.9 98.8 97.9 利多卡因含量(％) 本发明制剂A 100.7 99.0 99.6 对比制剂F 99.3 98.6 98.6
注：“有关物质”是指主药中存在的合成原料、中间体、副产物及可能的降解产物等杂质。
由以上结果可见，本发明的冻干粉制剂，在相同实验条件下，与对比制剂F 相比，有关物质明显减少，说明本发明的冻干粉制剂比对比制剂F稳定。
将本发明的冻干粉制剂A与对比制剂F分别进行了连续三次给药和单次给药 的肌肉刺激试验，方法和结果如下：
1、随机取健康家兔2只，雌兔无孕，分别在其左右两腿股四头肌内以无菌操 作法各注入对比制剂F1ml，药后48小时处死动物，解剖取出股四头肌，纵向切 开，观察注射局部刺激反应(必要时应做病理检查)并按表3所列标准换算相应 的反应级，然后算出4块股四头肌反应级的总和。结果见表4。
2、随机另取取健康家兔2只，雌兔无孕，分别在其左右两腿股四头肌内以无 菌操作法各注入冻干粉制剂A(用时每支以2ml灭菌注射用水溶解)水溶液1ml， 每天一次，连续注射三天，最后一次药后48小时处死动物，解剖取出股四头肌， 纵向切开，观察注射局部刺激反应(必要时应做病理检查)并按表3所列标准换 算相应的反应级，然后算出4块股四头肌反应级的总和。结果见表5。
表3.肌肉刺激评分标准
反应级 刺激性反应 0 1 2 3 4 5 无明显变化 轻度充血，其范围在0.5×1.0cm以下 中度充血，其范围在0.5×1.0cm以上 重度充血，伴有肌肉变性 出现坏死，有褐色变性 出现广泛性坏死
表4 对比制剂单次注射给药，家兔四块肌肉观察评分情况
兔号 注射部位 刺激性反应 反应级(分值) 1号 2号 左侧 右侧 左侧 右侧 中度充血，范围0.7×1.0cm 轻度充血，范围0.6×0.9cm 中度充血，范围0.8×1.0cm 中度充血，范围0.7×1.1cm 2 2 2 2
表5 本发明冻干粉制剂连续三次注射给药，家兔四块肌肉观察评分情况
兔号 注射部位 刺激性反应 反应级(分值) 1号 2号 左侧 右侧 左侧 右侧 中度充血，范围0.9×1.2cm 中度充血，范围0.7×1.2cm 轻度充血，范围0.6×0.8cm 轻度充血，范围0.5×0.9cm 2 2 1 1
从以上结果可以看出，本发明的冻干粉制剂，连续三次给家兔注射给药，对 家兔股四头肌四块肌肉总分为6分，而对比制剂F单次注射给药后，对家兔股四 头肌四块肌肉总分为8分，说明本发明的冻干粉制剂的刺激性小于对比制剂F。