一种头孢噻呋晶体混悬注射液及其制备方法.pdf

本发明提供了一种头孢噻呋晶体混悬注射液，由下述方法制得：将聚维酮、聚乙二醇加入注射用油中，获得注射溶媒；向注射溶媒加入抑菌剂；惰性气体保护下，将上述混合溶剂在高温下灭菌，冷至室温后，加入头孢噻呋晶体，高速剪切搅拌混匀；过胶体磨得到长效头孢噻呋晶体混悬注射液。本发明的头孢噻呋晶体混悬注射液具有重分散性好、流动性好、沉降慢、不良反应发生低等特点，质量符合中国兽药典相关规定；与硕腾公司易速达（excel）生物等效；同时制备工艺简单，设备要求低，适合工业化大规模生产，因此其应用前景十分广阔。

1.一种头孢噻呋晶体混悬注射液，其特征在于，包括以下组分：头孢噻呋晶体含量为10%-20%（W/V）；注射附加剂包含聚维酮、聚乙二醇，聚维酮含量为2~10%(W/V)，聚乙二醇含量为10~50%(V/V)；抑菌剂含量为0.5-2%(V/V)；其余为注射用油。 2.如权利要求1所述的头孢噻呋晶体混悬注射液，其特征在于，所述聚维酮为聚维酮K-17。 3.如权利要求1所述的头孢噻呋晶体混悬注射液，其特征在于，所述聚乙二醇为聚乙二醇400。 4.如权利要求1所述的头孢噻呋晶体混悬注射液，其特征在于，所述抑菌剂为苯甲醇。 5.如权利要求1所述的头孢噻呋晶体混悬注射液，其特征在于，所述注射用油为大豆油。 6.如权利要求1-5所述头孢噻呋晶体混悬注射液的制备方法，其特征在于，主要包括以下步骤：1）将聚维酮、聚乙二醇加入注射用油中，获得注射溶媒；2）向步骤1）的注射溶媒加入抑菌剂；3）惰性气体保护下，将步骤2）的混合溶剂在135-140℃高温下灭菌3~5h；4）惰性气体保护下，向混合溶剂中加入头孢噻呋晶体，通过高速剪切分散机搅拌混匀；5）过胶体磨得到长效头孢噻呋晶体混悬注射液。

技术领域

本发明涉及一种头孢类药物注射液及其制备方法，特别是指一种头孢噻呋晶体混悬注射液及其制备方法，属于动物医药领域。

背景技术

头孢噻呋，化学名(6R,7R)-7-[2-(2-氨基噻唑-4-基)(甲氧基亚胺基)乙酰胺基]-3-[(2-呋喃基羰基)硫甲基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸，第三代半合成动物专用头孢菌素。头孢噻呋(ceftiofur)是Bernard Labeeuw等人于1984年首先合成，其结构中具有内酰胺环和呋喃链，对革兰氏阳性菌、阴性菌均有较强的杀灭作用，进入体内后呋喃链首先被降解掉，产生代谢产物——去呋喃头孢噻呋，由于内酰胺环完整，仍具有强烈杀菌作用。

根据《兽药质量标准汇编2006-2011年》，头孢噻呋主要有头孢噻呋钠冻干粉针剂、盐酸头孢噻呋等剂型，这些剂型的缺点是作用时间短，其用药方法每天注射一次，连用3～5天，这种频繁注射给药造成的养殖场人力财力浪费，同时会引起动物的应激反应。结晶性头孢噻呋游离酸是头孢噻呋的结晶型化合物，不溶于水，热分解温度为212℃，比盐酸盐(187℃)高，pH值为7时的溶解度为8mg/ml，比盐酸盐(100mg/ml)低，结晶性头孢噻呋游离酸做成混悬注射液，由于药物稳定性高，溶解速度慢，体内释放时间长，具有长效的特点(CN1055090)。

结晶性头孢噻呋游离酸注射液有从硕腾公司进口的易速达(excel)，该药物作用时间比头孢噻酚钠冻干粉针和盐酸头孢噻呋混悬液长。根据《兽药质量标准汇编2006-2011年》头孢噻呋晶体注射液质量标准，易速达为头孢噻呋晶体与中链甘油三酯(Miglyol 182)等制成的无菌混悬液，该药品存在注射部位局部肿胀等不良反应。

发明内容

本发明的目的就是针对现有技术的不足，提供一种低不良反应、给药方便的头孢噻呋晶体混悬注射液。

一种头孢噻呋晶体混悬注射液包括以下组分：

头孢噻呋晶体含量为10％-20％(W/V)；

注射附加剂包含聚维酮、聚乙二醇，聚维酮含量为2～10％(W/V)，聚乙二醇含量为10～50％(V/V)；

抑菌剂含量为0.5-2％(V/V)；

其余为注射用油。

所述聚维酮的规格为K-12和K-17，优选K-17。聚维酮增加药物在体内的药物维持时间，降低对注射部位组织的副作用。

所述聚乙二醇为聚乙二醇300和聚乙二醇400，优选聚乙二醇400。聚乙二醇可以增加注射剂溶媒对药物的承载力，提高了药物的混悬附着效果，提高了混悬液的沉降比和重分散性。

所述抑菌剂为三氯叔丁醇、苯甲醇，优选苯甲醇。

所述注射用油为大豆油、橄榄油、油酸乙酯，优选大豆油。

本发明还提供了上述头孢噻呋晶体混悬注射液的制备方法，包括以下步骤：

1)将聚维酮、聚乙二醇加入注射用油中，获得注射溶媒；

2)向步骤1)的注射溶媒加入抑菌剂；

3)惰性气体保护下，将步骤2)的混合溶剂在135-140℃高温下灭菌3～5h；

4)惰性气体保护下，向混合溶剂中加入头孢噻呋晶体，通过高速剪切分散机搅拌混匀；

5)过胶体磨得到头孢噻呋晶体混悬注射液。

所述高速剪切分散机的工作速度为1200～2000r/min，过高速剪切分散机的时间为15～60min。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

1)本发明中加入聚维酮，使聚维酮与药物形成络合物，延长药物作用时间，同时降低对注射部位组织的副作用。

2)本发明加入聚乙二醇，能够增加注射剂溶媒对药物的承载力，提高了药物的混悬附着效果，提高了混悬液的沉降比和重分散性。

3)本发明的头孢噻呋晶体混悬注射液具有混合均匀、重分散性好、流动性好、沉降慢等特点，动物注射该制剂后消除半衰期长，。

4)本发明通过高速剪切分散机和胶体磨处理，对制备设备、条件要求低，适合工业化大规模生产，因此其应用前景十分广阔。

附图说明

图1是猪肌注头孢噻呋晶体混悬注射液药时曲线。

具体实施方式

实施例1

10％的头孢噻呋晶体混悬注射液配方一：

原料 投料 含量 头孢噻呋晶体 537.6g 10％(W/V) 聚维酮K-17 250g 2％(W/V) 聚乙二醇400 1.5L 30％(V/V) 苯甲醇 50mL 1％(V/V) 大豆油 3.06L

制备方法：

1)将聚维酮K-17溶解到聚乙二醇400中，加入大豆油，获得注射溶媒；

2)向步骤1的注射溶媒加入苯甲醇；

3)氮气保护下，将步骤2的混合溶剂在135℃温度下灭菌5h，放置至室温备用；

4)氮气保护下，向混合溶剂中加入头孢噻呋晶体，采用高速剪切分散机在1200r/min条件下搅拌30min，混合均匀；

5)过胶体磨，得到头孢噻呋晶体混悬注射液。

试验：

1)产品质量和加速试验

根据《兽药质量标准汇编2006-2011年》头孢噻呋晶体注射液质量标准和《中国兽药典2010版》附录标准进行检查产品质量和加速试验(温度40℃±2℃，相对湿度75％±5％)，6个月后的实验结果如下：

可以看出：该头孢噻呋晶体混悬注射液符合产品质量标准。

2)生物等效试验

将试验用健康大三元杂交猪(30Kg-40Kg/头)随机分成两组，每组6头，第一组肌内注射进口硕腾公司的易速达(excel)(100mL:10g)，第二组肌内注射上述方法制备得到的自制头孢噻呋晶体混悬注射液。肌内注射的给药方式均为颈部肌内一次性注射。给药前，对每只猪进行称重，经预试，根据药物在体内吸收、分布及消除规律确定采样时间点及肌内注射的间隔时间，以5mg/kg体重剂量颈部肌内注射。由于头孢噻呋在动物体内大部分很快代谢为去呋喃甲酰基头孢噻呋，所以检测血浆样品中的头孢噻呋的浓度是通过检测其代谢物去呋喃甲酰基头孢噻呋的浓度(C,μg/ml)来计算。

将猪绑定，从前腔静脉采血，给药前每只猪分别采集一次空白血样，给药后于不同时间点分别对每只猪进行采血，其中，给药动物采血时间(T,h)点为1h、2h、4h、6h、8h、10h、12h、24h、48h、72h、96h、120h、144h、168h。每次采血量约5mL，采集完毕后立即移入加有肝素的离心管中，1500r/min离心15min分离血浆，置于-20℃冰箱保存，待测定。

准确吸取血浆样品2mL，置于15mL具塞离心管中，加入7mL血浆药物提取液；50℃水浴加热15min，水浴时每隔3min振荡10s。振荡后立即放入水浴中，20min后置于室温，待冷却至室温时加入碘乙酰胺1.5mL振荡10s混匀，室温避光衍生2h，每隔10min振荡混匀一次。衍生完毕后加入5％磷酸2.5mL调节pH值至2.5～3.0后，10000r/min离心20min，取上清液进行SPE净化。BondElut C18固相萃取小柱分别用甲醇3mL、水3mL活化，样品上柱，5％甲醇水溶液3mL淋洗，用真空固相萃取装置抽干后，甲醇3mL洗脱，收集洗脱液，35℃氮气吹干至0.2mL以下，用0.5m纯化水定容，9000r/min离心10min后取100μL进行HPLC检测。

色谱条件：

固定相用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；理论板数以去呋喃甲酰基头孢噻呋峰计，应不低于1500。流动相：以0.005mol/l氢氧化四丁基铵溶液－乙腈(75：25)为流动相；流速：1ml/分钟；检测波长：230nm。

数据分析：

HPLC测定测得样品中药物峰面积代入标准曲线计算药物浓度，所得血药浓度数据用中国药理学会数学药理专业委员会编制的3P97药代动力学程序模拟药时曲线(图1)，计算药代动力学参数，见下表。

结论：将药物浓度数据使用3p97软件进行处理，可知两种头孢噻呋注射液产品在猪体内的药物动力学过程相似，均符合有吸收二室开放模型，表明本发明制备得到的头孢噻呋晶体混悬注射液与硕腾公司的易速达(excel)(100mL:10g)在猪体内具有生物等效性。

3)不良反应发生率试验

取20头30Kg-40Kg健康大三元杂交猪，随机分成2组，每组10头，分别以5mg/kg体重剂量颈部肌内注射硕腾公司的易速达(excel)和本发明的头孢噻呋晶体混悬注射液。注射12h后，观察注射部位局部肿胀情况：

硕腾公司的易速达(excel)(100mL:10g)10头猪注射部位均有不同程度局部肿胀的不良反应发生，其中3头红肿现象明显。

本发明的头孢噻呋晶体混悬注射液注射部位未发现明显局部肿胀，表明本发明制备得到的注射液不良反应较硕腾公司的易速达(excel)(100mL:10g)低。

实施例2

10％的头孢噻呋晶体混悬注射液配方二：

原料 投料 比重 头孢噻呋晶体 537.6g 10％(W/V) 聚维酮K-12 250g 2％(W/V) 聚乙二醇300 0.5L 10％(V/V) 三氯叔丁醇 25mL 0.5％(V/V) 橄榄油 4.08L

制备方法：

1)将聚维酮K-12溶解到聚乙二醇300中，加入橄榄油，获得注射溶媒；

2)向步骤1的注射溶媒加入三氯叔丁醇；

3)氩气保护下，将步骤2的混合溶剂在140℃温度下灭菌3h，放置至室温备用；

4)氩气保护下，向混合溶剂中加入头孢噻呋晶体，采用高速剪切分散机在2000r/min条件下搅拌15min，混合均匀；

5)过胶体磨得到头孢噻呋晶体混悬注射液。

实施例3

15％的头孢噻呋晶体混悬注射液配方：

原料 投料 比重 头孢噻呋晶体 805.4g 15％(W/V) 聚维酮K-17 625g 5％(W/V) 聚乙二醇400 0.5L 10％(V/V) 三氯叔丁醇 50mL 1％(V/V) 油酸乙酯 4.74L

制备方法：

1)将聚维酮K-17溶解到聚乙二醇400中，加入油酸乙酯，获得注射溶媒；

2)向步骤1的注射溶媒加入三氯叔丁醇；

3)氮气保护下，将步骤2的混合溶剂在135℃温度下灭菌5h，放置至室温备用；

4)氮气保护下，向混合溶剂中加入头孢噻呋晶体，采用高速剪切分散机在1500r/min条件下搅拌15min，混合均匀；

5)过胶体磨得到头孢噻呋晶体混悬注射液。

实施例4

20％的头孢噻呋晶体混悬注射液配方：

原料 投料 比重 头孢噻呋晶体 1075.2g 20％(W/V) 聚维酮K-17 1250g 10％(W/V) 聚乙二醇300 2.5L 50％(V/V) 苯甲醇 100mL 2％(V/V) 大豆油 1.25L

制备方法：

1)将聚维酮K-17溶解到聚乙二醇300中，加入大豆油，获得注射溶媒；

2)向步骤1的注射溶媒加入苯甲醇；

3)氮气保护下，将步骤2的混合溶剂在140℃温度下灭菌5h，放置至室温备用；

4)氮气保护下，向混合溶剂中加入头孢噻呋晶体，采用高速剪切分散机在1200r/min条件下搅拌60min，混合均匀；

5)过胶体磨得到头孢噻呋晶体混悬注射液。