技术领域
本发明涉及深亚微米粒乳液的制备技术领域，特别涉及一种具有抗老化功效的深亚微米粒乳液的制备方法。
背景技术
导致人体皮肤老化的外源性因素，主要是光老化和空气污染老化。现代工业对臭氧层破坏日渐严重，导致穿透大气层抵达地球表面的紫外线强度增加，受到过度的紫外线照射会导致皮肤出现光老化，其特征性改变是破坏肌肤细胞的DNA/RNA结构，胶原纤维弹力纤维组织结构缺失，这种损害表现为皮肤容易松弛，皱纹增加，严重者还会出现皮肤癌症状。同时现代社会空气污染加重，各种微尘，特别是纳米尺寸级别的微粒，如香烟燃烧后的微粒，汽车尾气排放微尘等，其表面活性很强，粘附在皮肤上容易引发自由基，使肌肤细胞受损，导致各种肌肤老化问题。
导致人类皮肤老化的内源性因素，主要是肌肤胶原蛋白的糖化和老化，造成胶原蛋白糖化和老化的原因主要是人体本身的基因问题和不良的生活习惯。皮肤领域的糖基化反应，是指美德拉反应，体内过多的糖分会附着在胶原蛋白上，使胶原蛋白交联变性成为褐色，失去弹性。皮肤抗氧化，是指提供抗氧化成分，保护细胞膜，避免过度氧化，帮助细胞延长生命周期。目前，改善内源性因素引起的肌肤老化问题，主要采用的方法是帮助肌肤抗糖化和抗氧化。
灰白岩蔷薇花提取物（Cistus Incanus Flower Extract，CAS号：93165-04-9）的活性成分为异槲皮苷(Isoquercitrin)，通过减少紫外线诱导的过氧化物的产生和保护细胞对抗过氧化物的伤害、减少晒伤细胞的数量，达到保护细胞DNA和抗氧化的作用。灰白岩蔷薇花提取物的生产商有德国EVONIK公司，商品名为TEGO Cistus。日本Katakura Chikkarin也有灰白岩蔷薇花提取物，作为商品销售。
空气中烟雾和颗粒物能诱发肌肤炎症，欧蒲公英(TARAXACUM OFFICINALE EXTRACT，CAS号：84775-55-3)提取物的活性物质为果聚糖，能够减少皮肤炎症因子白介素1-α的产生，减少污染物诱导的氧化蛋白比率，改善空气中烟雾和颗粒物导致的皮肤暗沉和粗燥纹理问题。在本发明使用的欧蒲公英提取物的生产商为法国SILAB公司，商品名为APOLLUSKIN。
脱羧肌肽HCL(DECARBOXY CARNOSINE HCL，化妆品原料目录序号：3751)能减少糖基化终末产物的形成，逆转已经初期糖化的胶原蛋白。在本发明使用的脱羧肌肽的生产商为摩洛哥EXSYMOL公司，商品名为ALISTIN。
类球红细菌溶胞物提取物（Rhodobacter Sphaeroides Lysate Extract)主要活性成分为番茄红素Lycopene(INCI名称为:番茄红素，CAS号：502-65-8)，可以对抗皮肤氧化，还可以效抑制紫外线诱发胶原蛋白分解促进胶原蛋白增生。可以对抗肌肤氧化，生产商为台湾亚比多生技发展有限公司，商品名为LYCOGEN。
针对皮肤抗老化的机理，本发明将灰白岩蔷薇花提取物、欧蒲公英提取物、脱羧肌肽HCL，类球红细菌溶胞物提取物进行复配，不仅具有对抗内源性老化的作用，而且具有对抗外源性老化的作用，两种作用协同达到全方位抗老化功效。但是灰白岩蔷薇花提取物、欧蒲公英提取物、脱羧肌肽 HCL、类球红细菌溶胞物提取物，它们的化学活性强，稳定性差，直接添加到化妆品配方中，易被氧化而导致活性物含量降低，产品颜色也会很快变黄、变褐。随着灰白岩蔷薇花提取物、欧蒲公英提取物、脱羧肌肽HCL，类球红细菌溶胞物提取物被氧化，出现不受欢迎的异臭，导致丧失其商品价值。
深亚微米粒乳液，是指乳液中的悬浮颗粒，平均粒径在0.25μm及以下。本发明制备的深亚微米粒乳液指的是粒径在100-250纳米之间的乳液，相对粒径在0-100纳米的纳米乳液来说，其对人体渗透性较弱，不会进入人体内循环系统，可以较长时间停留在皮肤表层，安全性和缓释性较一般纳米乳液更佳，对活性物的负载能力更强。
发明内容
本发明要解决的技术问题是，提供一种能同时负载灰白岩蔷薇花提取物、欧蒲公英提取物、脱羧肌肽 HCL、类球红细菌溶胞物提取物的具有抗老化功效的深亚微米粒乳液的制备方法。
为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：具有抗老化功效的深亚微米粒乳液的制备方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：
A ：称取脂质材料，加热至75 -85℃，得到液态油相；所述脂质材料包括甘油硬脂酸酯、鲸蜡硬脂醇、鲸蜡醇棕榈酸酯和植物油脂；
B ：按质量比为2.5-5:2-3:1-2:1的比例称取灰白岩蔷薇花提取物、欧蒲公英提取物、脱羧肌肽 HCL、类球红细菌溶胞物提取物，将上述四种物质混合，获得抗老化活性组合物；
C ：按质量比为0.225- 0.55:1的比例称取抗老化活性组合物和脂质材料，混合均匀后加热到75 -85℃，搅拌到抗老化活性组合物完全溶解，得混合油相；
D：按质量比为0.30- 0.50：1的比例称取鲸蜡硬脂醇聚醚-12和鲸蜡硬脂醇聚醚-20，形成复合乳化剂；
E ：按质量比为0.15- 0.30：1 的比例称取步骤D所得复合乳化剂和蒸馏水，两者混合后加热至75-85℃，搅拌均匀，得到混合水相；
F ：将C步骤所得混合油相和E步骤获得混合水相混合后，在常温、常压下以2800rpm的转速均质15分钟，得预混溶液；
G：将预混溶液在80-150MPa压力、75 -90℃温度条件下，通过高压均质机循环3500rpm均质8-15次，在高压均质机出口使用冷却装置，保证高压均质机出口段混合液温度不超过90℃，均质完成后得具有抗老化功效的深亚微米粒乳液。
进一步，所述植物油脂为盐地碱蓬籽油（Suaeda Salsa Seed Oil）、美藤果油（Sacha Inchi oil）、盐肤木果油（Sumac Fruit Oil）、翅果油（Elaeagnus Mollis Diels Oil）、茶叶籽油（Tea Camellia Seed Oil）、大麻籽油（Cannabis Sativa Seed Oil）、火麻仁油（Fructus CannabisSeed Oil）、石榴籽油（Punica GranatumSeed Oil）、南瓜籽油（Pumpkin Seed Oil）、宁夏枸杞籽油（Lycium BarbarumSeed Oil）、亚麻籽油（LINUM USITATISSIMUM Seed Oil）、鲨肝醇(Batyl Alcohol)中的一种或他们的混合物。
本发明方法通过选择合适的脂质材料，合理控制脂质材料与活性物之间的比例，在特定工艺条件下，能同时负载灰白岩蔷薇花提取物、欧蒲公英提取物、脱羧肌肽 HCL、类球红细菌溶胞物提取物四种活性成分，可有效保证四种活性成分同时被包覆在深亚微米固态脂质微粒结构中，可用于同时缓解皮肤内源性老化和外源性老化，达到全方位抗皮肤老化的功效。本发明方法通过深亚微米粒的固态脂质微粒结构提高了活性物的稳定性、透皮性和缓释性。本发明通过合适的脂质材料，同时控制物料之间配比，设置合适的压力、温度和均质次数，可以获得粒径在100—250nm范围内的深亚微米固态微粒乳液，乳液稳定性好，即有利于皮肤吸收，又不会进入人体体内循环系统，具有较高的安全性和缓释性。
通过本发明方法制备的具有抗老化功效的深亚微米粒乳液在转速为每分钟10000转的离心机中离心30分钟不分层；45℃环境下保存三个月不分层、不变色；常温储存3年不分层，稳定性良好。
通过招募经常性日光暴露，吸烟，35岁以下，男女各一半，轻微皱纹出现人群，共计30例，进行28天人体试验。在供测试用空白化妆品膏体（组成见下文备注）中添加有10％实施例四制备的具有抗老化功效深亚微米粒乳液进行测试。在本例中，该化妆品中实际含有灰白岩蔷薇花提取物0.30％、欧蒲公英提取物0.50％、脱羧肌肽 HCL 0.10％、类球红细菌溶胞物提取物0.10％，合计活性物总含量为1.0%，测试结果显示其抗皱紧致的效果优于仅添加1.0%灰白岩蔷薇花提取物，也优于仅添加1.0%欧蒲公英提取物或仅添加1.0%脱羧肌肽 HCL或仅添加1.0%类球红细菌溶胞物提取物的同基础配方化妆品。同时，也优于未经过深亚微米处理，而直接添加灰白岩蔷薇花提取物0.30％、欧蒲公英提取物0.50％、脱羧肌肽 HCL 0.10％、类球红细菌溶胞物提取物0.10％的同基础配方化妆品。每天早晚清洁面部后取适量含具有活性物的化妆品均匀涂抹在左脸部，右边脸部涂抹未加活性物的化妆品。每周用MPA580弹性测试仪、VISIA皮肤分析测试仪记录每个人的实验数据。实验数据如下表：
注：样品A、添加灰白岩蔷薇花提取物1.0％；
样品B、添加欧蒲公英提取物1.0％；
样品C、添加脱羧肌肽 HCL 1.0％；
样品D、添加类球红细菌溶胞物提取物1.0％；
样品E、直接添加灰白岩蔷薇花提取物0.30％、欧蒲公英提取物0.50％、脱羧肌肽 HCL 0.10％、类球红细菌溶胞物提取物0.10％；
样品F、添加含有灰白岩蔷薇花提取物0.30％、欧蒲公英提取物0.50％、脱羧肌肽 HCL 0.10％、类球红细菌溶胞物提取物0.10％的深亚微米粒乳液。
备注：供测试用空白化妆品膏体的配方如下，在本膏体中添加相应量的活性物，获得测试样品A、B、C、D、E、F。
在45℃环境下，放置三个月，下文实施例1至实施例5的抗老化功效深亚微米粒乳液，外观颜色无变化，与保存在5℃低温箱的标准样品比较，无明显外观和颜色改变。用马尔文粒径测试仪测定，其抗老化深亚微米粒乳液平均粒径也无明显变化。
用本发明方法制备的抗老化功效深亚微米粒乳液，其总活性物在深亚微米粒乳液中质量比可达到3.5 -11.0％，常温下粘度小于1500cps，可以冷配加入到化妆品配方中，在抗老化功效性化妆品中使用方便。
本发明制备的抗老化功效深亚微米粒乳液的粒径可以控制在100-250nm，该粒径微粒相对尺寸较大，不会渗入到人体内循环系统中，安全性较高。同时其固态脂质微粒结构亲肤，低粘度，水分散，使用方便，可以有效增强其蕴含的活性物质的稳定性。本方法还具有制备过程简单方便，产品质量稳定，规模化工业生产便利等优势。
综上所述，本发明方法具有以下优点：能制备同时负载灰白岩蔷薇花提取物、欧蒲公英提取物、脱羧肌肽 HCL、类球红细菌溶胞物提取物的具有抗老化功效的深亚微米粒乳液，缓解皮肤内源性老化和外源性老化，达到全方位抗老化功效，乳液稳定不变色，方便冷配加入到化妆品配方中。
具体实施方式
实施例一：
一种具有抗老化功效的深亚微米粒乳液的制备方法，采用如下步骤：
A. 称取25.0g油硬脂酸酯、鲸蜡硬脂醇、鲸蜡醇棕榈酸酯、碱蓬籽油、美藤果油（2:1:2:1:2）混合物于烧杯中，75℃水浴加热，得到液态油相；
B. 按4:2.5:1.5:1 的比例称取4.0g 灰白岩蔷薇花提取物、2.5g欧蒲公英提取物、1.5g脱羧肌肽 HCL、1.0 g类球红细菌溶胞物提取物，将它们加入到上述液态油相中，控制搅拌器转速为500rpm，搅拌5分钟，搅拌混合均匀，保持在75℃；
C. 取乳化剂和蒸馏水质量比为0.15∶ 1 的比例称取21.65g （鲸蜡硬脂醇聚醚-12：鲸蜡硬脂醇聚醚-20=0.5:1）和144.35g 蒸馏水，放入烧杯中，加热至75℃，搅拌均匀得到液态水相；
D .将B步骤获得的混合油相和C步骤获得的液态水相，在常温、常压下以2800rpm的转速均质15分钟，得预混溶液；
E .将预混溶液在80MPa压力、80℃温度条件下，通过高压均质机循环均质8次，在高压均质机出口使用冷却装置，控制高压均质机出口段混合液温度为75℃，均质完成后得深亚微米粒乳液。
将得到的高温深亚微米粒乳液快速冷却至室温，可添加0.15％的DMDM 乙内酰脲防腐剂，搅拌均匀，即得到平均粒径约为180nm 的含4.0g 灰白岩蔷薇花提取物、2.5g欧蒲公英提取物、1.5g脱羧肌肽 HCL、1.0 g类球红细菌溶胞物提取物的抗老化深亚微米粒乳液，抗老化活性物总含量为4.5％。
实施例二：
一种具有抗老化功效的深亚微米粒乳液的制备方法，采用如下步骤：
A. 称取30.0g油硬脂酸酯、鲸蜡硬脂醇，鲸蜡醇棕榈酸酯、盐肤木果油、翅果油（2:1:1:1:2）混合物于烧杯中，80℃水浴加热，得到液态油相；
B. 按3.3:2.3:1.3:1 的比例称取5.0g 灰白岩蔷薇花提取物、3.5g欧蒲公英提取物、2.0g脱羧肌肽 HCL、1.5 g类球红细菌溶胞物提取物，将它们加入到上述液态油相中，控制搅拌器转速为500rpm，搅拌5分钟，搅拌混合均匀，保持在75℃；
C. 取乳化剂和蒸馏水质量比为0.2∶ 1 的比例称取26.33g （鲸蜡硬脂醇聚醚-12：鲸蜡硬脂醇聚醚-20=0.3:1）和131.67g 蒸馏水，放入烧杯中，加热至75℃，搅拌均匀得到液态水相；
D .将B步骤获得的混合油相和C步骤获得的液态水相，在常温、常压下以2800rpm的转速均质15分钟，得预混溶液；
E .将预混溶液在100MPa压力、85℃温度条件下，通过高压均质机循环均质15次，在高压均质机出口使用冷却装置，控制高压均质机出口段混合液温度为75℃，均质完成后得深亚微米粒乳液。
将得到的高温深亚微米粒乳液快速冷却至室温，可添加0.15％的羟苯甲酯和0.15％的咪唑烷基脲作为防腐剂，搅拌均匀，即得到平均粒径约为200nm 的含5.0g 灰白岩蔷薇花提取物、3.5g欧蒲公英提取物、2.0g脱羧肌肽 HCL、1.5 g类球红细菌溶胞物提取物的抗老化深亚微米粒乳液，抗老化活性物总含量为6.0％。
实施例三：
一种具有抗老化功效的深亚微米粒乳液的制备方法，采用如下步骤：
A. 称取35.0g油硬脂酸酯、鲸蜡硬脂醇、鲸蜡醇棕榈酸酯、茶叶籽油、大麻籽油（1:1:2:1:2）混合物于烧杯中，80℃水浴加热，得到液态油相；
B. 按2.5:2:1.5:1 的比例称取2.5g 灰白岩蔷薇花提取物、2.0g欧蒲公英提取物、1.5g脱羧肌肽 HCL、1.0 g类球红细菌溶胞物提取物，将它们加入到上述液态油相中，控制搅拌器转速为500rpm，搅拌5分钟，搅拌混合均匀，保持在75℃；
C. 取乳化剂和蒸馏水质量比为0.25∶ 1 的比例称取31.6g （鲸蜡硬脂醇聚醚-12：鲸蜡硬脂醇聚醚-20=0.4:1）和126.4g 蒸馏水，放入烧杯中，加热至75℃，搅拌均匀得到液态水相；
D .将B步骤获得的混合油相和C步骤获得的液态水相，在常温、常压下以2800rpm的转速均质15分钟，得预混溶液；
E .将预混溶液在150MPa压力、90℃温度条件下，通过高压均质机循环均质10次，在高压均质机出口使用冷却装置，控制高压均质机出口段混合液温度为85℃，均质完成后得深亚微米粒乳液。
将得到的高温深亚微米粒乳液快速冷却至室温，可添加0.20％的羟苯甲酯和0.10％的咪唑烷基脲作为防腐剂，搅拌均匀，即得到平均粒径约为100nm 的含5.0g 灰白岩蔷薇花提取物、3.5g欧蒲公英提取物、2.0g脱羧肌肽 HCL、1.5 g类球红细菌溶胞物提取物的抗老化深亚微米粒乳液，抗老化活性物总含量为3.5％。
实施例四：
一种具有抗老化功效的深亚微米粒乳液的制备方法，采用如下步骤：
A. 称取40.0g油硬脂酸酯，鲸蜡硬脂醇，鲸蜡醇棕榈酸酯，火麻仁油、石榴籽油、南瓜籽油（2:2:1:2:1:1）混合物于烧杯中，75℃水浴加热，得到液态油相；
B. 按3:5:1:1 的比例称取6.0g 灰白岩蔷薇花提取物、10.0g欧蒲公英提取物、2.0g脱羧肌肽 HCL、2.0 g类球红细菌溶胞物提取物，将它们加入到上述液态油相中，控制搅拌器转速为500rpm，搅拌5分钟，搅拌混合均匀，保持在75℃；
C. 取乳化剂和蒸馏水质量比为0.28∶ 1 的比例称取30.63g （鲸蜡硬脂醇聚醚-12：鲸蜡硬脂醇聚醚-20=0.6:1）和109.37g 蒸馏水，放入烧杯中，加热至75℃，搅拌均匀得到液态水相；
D .将B步骤获得的混合油相和C步骤获得的液态水相，在常温、常压下以2800rpm的转速均质15分钟，得预混溶液；
E .将预混溶液在100MPa压力、90℃温度条件下，通过高压均质机循环均质10次，在高压均质机出口使用冷却装置，控制高压均质机出口段混合液温度为90℃，均质完成后得深亚微米粒乳液。
将得到的高温深亚微米粒乳液快速冷却至室温，可添加0.6％的苯氧乙醇防腐剂，搅拌均匀，即得到平均粒径约为220nm 的含4.0g 灰白岩蔷薇花提取物、2.5g欧蒲公英提取物、1.5g脱羧肌肽 HCL、1.0 g类球红细菌溶胞物提取物的抗老化深亚微米粒乳液，抗老化活性物总含量为10.0％。
实施例五：
一种具有抗老化功效的深亚微米粒乳液的制备方法，采用如下步骤：
A. 称取40.0g油硬脂酸酯，鲸蜡硬脂醇，鲸蜡醇棕榈酸酯，宁夏枸杞籽油、亚麻籽油、鲨肝醇（2:1:2:1:1:1）混合物于烧杯中，85℃水浴加热，得到液态油相；
B. 按5:3:2:1 的比例称取10.0g 灰白岩蔷薇花提取物、6.0g欧蒲公英提取物、4.0g脱羧肌肽 HCL、2.0 g类球红细菌溶胞物提取物，将它们加入到上述液态油相中，控制搅拌器转速为500rpm，搅拌5分钟，搅拌混合均匀，保持在75℃；
C. 取乳化剂和蒸馏水质量比为0.3∶ 1 的比例称取31.85g （鲸蜡硬脂醇聚醚-12：鲸蜡硬脂醇聚醚-20=0.45:1）和106.15g 蒸馏水，放入烧杯中，加热至75℃，搅拌均匀得到液态水相；
D.将B步骤获得的混合油相和C步骤获得的液态水相，在常温、常压下以2800rpm的转速均质15分钟，得预混溶液；
E .将预混溶液在130MPa压力、90℃温度条件下，通过高压均质机循环均质15次，在高压均质机出口使用冷却装置，控制高压均质机出口段混合液温度为82℃，均质完成后得深亚微米粒乳液。
将得到的高温深亚微米粒乳液快速冷却至室温，可添加0.3％的双( 羟甲基) 咪唑烷基防腐剂，搅拌均匀，即得到平均粒径约为250nm 的含10.0g 灰白岩蔷薇花提取物、6.50g欧蒲公英提取物、4.0g脱羧肌肽 HCL、2.0 g类球红细菌溶胞物提取物的抗老化深亚微米粒乳液，抗老化活性物总含量为11.0％。