水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物及其制备方法和应用.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201510624986.4 (22)申请日 2015.09.26 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 106554497 A (43)申请公布日 2017.04.05 (73)专利权人 南京友怡医药科技有限公司 地址 210009 江苏省南京市鼓楼区新模范 马路5号科技创新大厦A1816室 (72)发明人 张跃华 (74)专利代理机构 南京知识律师事务所 32207 代理人 韩朝晖 (51)Int.Cl. A61K 31/785(2006.01) (56)对比文件 。

2、CN 101659677 A,2010.03.03, CN 104856973 A,2015.08.26, CN 103974703 A,2014.08.06, CN 104473873 A,2015.04.01, 审查员 王远洋 (54)发明名称 水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物及其制备 方法和应用 (57)摘要 本 发 明 公 开 了 一 种 水 溶 性 卡 巴 他 赛 (cabazitaxel)抗癌药物化合物， 具有下式I的结 构。 抗癌药物活性部分卡巴他赛与聚乙二醇单烷 基醚， 通过连接基团二甘醇酰基(羰基甲氧基乙 酰基)共价结合形成所述的水溶性卡巴他赛抗癌 药物化合物。 本发明还涉及所述。

3、药物化合物的制 备方法及应用。 其中R-CH3、 -CH2CH3、 -CH2CH2CH3和- CH2CH2CH2CH3； n5-500。 权利要求书2页 说明书11页 附图3页 CN 106554497 B 2018.08.10 CN 106554497 B 1.一种水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物， 具有下式I的结构： 其中： R为C1C5的烷基， n5-500。 2.根据权利要求1所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物， 其特征在于， 式中R-CH3、 - CH2CH3、 -CH2CH2CH3和-CH2CH2CH2CH3。 3.一种权利要求1所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物的制备方法， 包括以下。

4、步骤： 1)聚乙二醇单烷基醚与二甘醇酸或二甘醇酸酐发生酯化反应， 生成聚乙二醇单烷基醚 二甘醇酸单酯； 2)步骤1)所得到的聚乙二醇单烷基醚二甘醇酸单酯， 或者它们的酰氯化产物， 与卡巴 他赛发生酯化反应， 生成所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物。 4.根据权利要求3所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物的制备方法， 其特征在于， 所 述的方法包括以下步骤： 1)以2-乙基己酸锡(II)、 三氯化铝或碳酸铯为催化剂， 聚乙二醇单烷基醚与二甘醇酸 酐反应， 或者以4-二甲氨基吡啶和2-氯-1-甲基吡啶鎓碘化物， 或N,N -二环己基碳化二亚 胺和4-二甲氨基吡啶为催化剂， 与过量的二甘醇酸反应， 生。

5、成聚乙二醇单烷基醚二甘醇酸 单酯； 2)步骤1)中所得到的聚乙二醇单烷基醚二甘醇酸单酯与酰氯化试剂反应生成酰氯化 产物； 3)以碱为催化剂， 步骤2)所得到酰氯化产物与卡巴他赛反应； 生成所述的水溶性卡巴 他赛抗癌药物化合物； 或者 以4-二甲氨基吡啶和2-氯-1-甲基吡啶鎓碘化物， 或以N,N -二环己基碳化二亚胺和4- 二甲氨基吡啶为催化剂， 步骤1)所得到的聚乙二醇单烷基醚二甘醇酸单酯与卡巴他赛反 应， 生成所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物。 5.根据权利要求4所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物的制备方法， 其特征在于， 所 权 利 要 求 书 1/2 页 2 CN 106554497。

6、 B 2 述的酰氯化试剂为氯化亚砜， 碱催化剂选自三乙胺、 吡啶、 4-二甲氨基吡啶、 碳酸钠、 碳酸钾 或碳酸铯。 6.一种权利要求1所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物注射剂， 包含： 1)具有式 结构的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物； 2)水、 生理盐水或葡萄糖注射液。 7.根据权利要求6所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物注射剂， 其特征在于， 所述的 注射剂中， 水溶性卡巴他赛药物化合物在配方中重量百分含量为0.005至5.0。 8.权利要求1所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物在制备抗癌药物中的应用。 权 利 要 求 书 2/2 页 3 CN 106554497 B 3 水溶性卡巴他赛抗癌。

7、药物化合物及其制备方法和应用 技术领域 0001 本发明涉及一种新的抗癌药物化合物及其制备方法和应用， 特别是涉及一种水溶 性卡巴他赛抗癌药物化合物， 包含该化合物的制备方法、 制剂以及作为抗癌药物的应用。 背景技术 0002 许多具有抗癌活性的化合物由于不溶于水和/或其它生物相容性溶剂， 或在水和 生物相容性溶剂中稳定性差已成为药物开发的一个障碍， 往往导致药物开发时间延迟。 据 估计， 多达百分之四十经筛选出的具有潜在价值的候选药物化合物由于其水溶性差而被拒 绝进入制剂研究与开发阶段， 并且百分之三十的现有药物是难溶性的。 当前有数种技术正 在研究和开发之中， 以解决药物化合物溶解度差的问。

8、题， 这些技术包括增加溶解度的配位 剂技术、 纳米颗粒技术、 微乳液技术、 增强溶解度的制剂技术、 脂质体制剂技术、 脂溶性和水 溶性前药技术， 以及新型的聚合物载药技术等。 0003 卡巴他赛(cabazitaxel， 式1)其分子结构如式1所示， 几乎不溶于水。 药理作用： 卡 巴他赛的抗癌作用机制和特点与多西他赛相似， 属于抗微管类药物。 它通过干扰细胞有丝 分裂和分裂间期细胞功能所必需的微管网络而起抗肿瘤作用。 它可与游离的微管蛋白结 合， 促进微管蛋白装配成稳定的微管， 同时抑制其解聚， 导致丧失了正常功能的微管束的产 生和微管的固定， 从而抑制细胞的有丝分裂。 临床主要用于治疗对多。

9、烯紫杉醇无效甚至病 情加重的晚期前列腺癌患者。 正在进行临床试验的其他主要适应症有脑癌、 乳腺癌、 胃癌、 非小细胞肺癌、 卵巢癌等。 0004 0005 式1.卡巴他赛分子结构。 0006 卡巴他赛抗肿瘤活性高， 安全性及耐受性较好， 自上市以来其临床应用日趋广泛， 但与其他抗肿瘤药物一样， 它对肿瘤细胞和正常细胞没有选择性识别作用， 使得其副作用 表现也尤为凸显， 关于其不良反应的报道也逐渐增加， 目前发现的主要不良反应有临床试 验常见的不良反应， 包括中性粒细胞减少、 贫血、 白细胞减少、 血小板减少、 腹泻、 疲乏、 恶 心、 呕吐、 便秘以及肾衰。 因此不能用于治疗中性粒细胞计数小于。

10、1500mm3以及对Jevtana或 山梨醇80有严重超敏史的患者。 发明内容 说 明 书 1/11 页 4 CN 106554497 B 4 0007 本发明的目的在于提供一种新的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物， 具有高抗癌活 性且毒性低； 所述化合物不仅可以溶于水， 而且在水溶液中能够形成纳米颗粒， 且具有药物 缓释功能。 0008 本发明的另一目的在于提供所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物的合成方法。 0009 本发明的另一目的还在于提供一种包含所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物 的组合物， 以所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物为前药， 可直接溶于水、 生理盐水或葡 萄糖溶液制成注射液。 。

11、0010 同时， 本发明的另一目的还在于提供所述化合物在制备抗癌药物中的应用。 0011 本发明的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物， 含有亲脂性的抗癌药物活性部分和亲 水部分， 亲脂性的抗癌药物活性部分是具有抗癌活性的药物化合物分子卡巴他赛， 亲水部 分是水溶性烷氧基聚乙二醇酯， 烷氧基聚乙二醇通过连接基团二甘醇酰基(oxydiacetyl， diglycoloyl， diglycolyl)与抗癌药物化合物卡巴他赛(docetaxel)以酯键共价结合形成 本发明的抗癌药物化合物。 0012 实现本发明目的采用以下技术方案： 一种水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物， 其分 子式可以用以下通式I表示： 00。

12、13 0014 其中， R为C1C5的烷基， 常见及优选以下基团： 0015 a)甲基(-CH3)； 0016 b)乙基(-CH2CH3)； 0017 c)丙基(-CH2CH2CH3)； 0018 d)丁基(-CH2CH2CH2CH3)。 0019 其中聚合度n5-500。 0020 本发明还涉及一种所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物的制备方法， 包括以下 步骤： 说 明 书 2/11 页 5 CN 106554497 B 5 0021 1)聚乙二醇单烷基醚(1)与二甘醇酸或二甘醇酸酐发生酯化反应， 生成聚乙二醇 单烷基醚二甘醇酸单酯(2)； 0022 2)步骤1)所得到的聚乙二醇单烷基醚二甘。

13、醇酸单酯(2)， 或者它们的酰氯化产物 (3)， 与卡巴他赛发生酯化反应， 生成所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物(I)。 0023 更具体和优化地， 所述的方法包括以下步骤： 0024 1)以2-乙基己酸锡(II)、 三氯化铝或碳酸铯为催化剂， 聚乙二醇单烷基醚(1)与二 甘醇酸酐反应， 或者以4-二甲氨基吡啶(DMAP)和2-氯-1-甲基吡啶鎓碘化物(CMPI)， 或N, N -二环己基碳化二亚胺(DCC)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)为催化剂， 与过量的二甘醇酸反 应， 生成聚乙二醇单烷基醚二甘醇酸单酯(2)； 0025 2)聚乙二醇单烷基醚二甘醇酸单酯(2)与酰氯化试剂(如亚硫酰(二)。

14、氯)反应生成 酰氯化产物(3)； 0026 3)以碱(如三乙胺， 吡啶， 4-二甲氨基吡啶、 碳酸钠， 碳酸钾， 碳酸铯)为催化剂， 步 骤2)所得到的酰氯化产物(3)与卡巴他赛反应， 生成所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合 物(I)； 或者 0027 以4-二甲氨基吡啶(DMAP)和2-氯-1-甲基吡啶鎓碘化物(CMPI)为催化剂， 或以N, N -二环己基碳化二亚胺(DCC)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)为催化剂， 步骤1)所得到的聚乙二 醇单烷基醚二甘醇酸单酯(2)与卡巴他赛反应， 生成所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合 物(I)。 0028 0029 式2.水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物的合。

15、成路线。 0030 本发明还涉及所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物的制剂配方， 这类新的水溶性卡巴 他赛抗癌药物化合物可直接溶于水、 生理盐水(0.9氯化钠)或葡萄糖(5)注射液制成注 说 明 书 3/11 页 6 CN 106554497 B 6 射剂， 形成胶束制剂。 0031 采用的技术方案为， 一种所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物注射剂， 包含： 0032 1)具有式 结构的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物； 0033 2)水、 生理盐水(0.9氯化钠)或葡萄糖(5)注射液。 0034 所述的注射剂中， 水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物在注射剂配方中重量百分含量 可以为约0.005至5.0； 优选。

16、重量百分含量约为0.01至2.5； 更优选药物化合物在配 方中重量百分含量约为0.1至2.0。 0035 所述的药物化合物具有较好的水溶性， 在水溶液中形成纳米颗粒胶束液。 该化合 物含有亲脂的抗癌药物活性部分和亲水聚乙二醇部分， 整个分子既是药物分子也是表面活 性剂， 溶于水后可自动形成纳米胶束， 不需要加入任何表面活性剂或助剂。 作为溶剂型给药 体系， 纳米颗粒胶束液还具有药物缓释功能。 0036 本发明的药物化合物具有较高的抗癌活性且毒性低， 同时具有较好的水溶解性， 该药物化合物作为前药， 在水溶液或体液中可经水解或酶催化水解释放出活性药物分子- 卡巴他赛。 申请人尝试了不同连接基团，。

17、 如羰基-(CO)-、 C1-10亚烷基羰基(-(CH2)nCO-)、 C1-10双酰基(-(CO)(CH2)n(CO)-， 如戊二酰基)、 -P(O)(R)-等， 在抗肿瘤活性和给药 系统上， 均难以取得令人满意的效果。 0037 本发明还提供了新发明的药物化合物的应用， 即所述的水溶性卡巴他赛抗癌药物 化合物在制备抗癌药物中的应用。 0038 例如， 本发明的药物化合物用于制备治疗癌症的药物。 本发明的药物化合物可用 于治疗包括血液系统的癌症， 如白血病， 淋巴瘤， 骨髓瘤； 和非血液癌症， 如实体瘤癌(如前 列腺癌、 乳腺癌、 卵巢癌、 胰腺癌、 结肠癌、 直肠癌、 非小细胞肺癌、 膀胱。

18、癌)， 肉瘤和胶质瘤 等。 0039 本发明的药物化合物的疗效和毒性用体外细胞或体内动物实验来确定， 例如ED50 (50effective dose,半数有效量： 50实验对象出现阳性反应时的药量)、 LD50(50 lethal dose， 半数致死量： 杀死一半试验对象的剂量)和GI50(concentration of the anti-cancer drug that inhibits the growth of cancer cells by 50， 抑制50的 实验对象生长的药物浓度)。 通常将半数致死量(LD50)/半数有效量(ED50)的比值称为治疗 指数， 用以表示药物的安。

19、全性。 治疗指数大的药物相对治疗指数小的药物更安全。 0040 新发明的抗癌药物化合物旨在提高治疗指数和药物的安全性， 同时也提高治疗效 果。 从体外细胞实验和体内动物实验获得的药物剂量可以用来制定用于人体的剂量范围。 这种化合物的剂量最好在很少或根本没有毒性的ED50范围内。 剂量变化通常取决于采用的 剂型、 病人的敏感性和给药途径等。 通常可用相同或类似药物的常规剂量做参考， 如卡巴他 赛,英文商品名Jevtana(Cabazitaxel)。 0041 本发明的药物化合物可以单独使用， 也可与一个或多个其它的治疗药物一起使 用。 例如， 在癌症的治疗时， 本发明的药物化合物可与以下治疗药物。

20、一起使用， 包括但不限 于： 雄激素抑制剂， 如氟他胺(flutamide)和鲁珀若利得(luprolide)； 抗雌激素， 如他莫昔 芬(tomoxifen)； 抗代谢药物和细胞毒性药物， 如道诺红菌素(daunorubicin)、 五氟脲嘧啶 (fluorouracil)、 氟尿苷(floxuridine)、 -干扰素(interferon alpha)、 甲氨蝶呤 (methotrexate)、 光神霉素(plicamycin)、 硫基嘌呤(mecaptopurine)、 硫鸟嘌呤 说 明 书 4/11 页 7 CN 106554497 B 7 (thioguanine)、 阿霉素(ad。

21、riamycin)、 卡莫司汀(carmustine)、 洛莫司汀(lomustine)、 阿 糖胞苷(cytarabine)、 环磷酰胺(cyclophosphamide)、 阿霉素(doxorubicin)、 雌莫司汀 (estramustine)、 六甲蜜胺(altretamine)、 羟基脲(hydroxyurea)、 异环磷酰胺 (ifosfamide)、 甲基苄肼(procarbazine)、 突变霉素(mutamycin)、 白消安(busulfan)、 米托 蒽醌(mitoxantrone)、 卡铂carboplatin)、 顺铂(cisplatin)、 链脲佐菌素(strep。

22、tozocin)、 博莱霉素(bleomycin)、 放线菌素(dactinomycin)、 和依达比星(idamycin)； 激素， 如甲孕酮 (medroxyprogesterone)、 炔雌二醇(ethinyl estradiol)、 雌二醇(estradiol,)、 .亮丙瑞 林 (leuprolide) 、 甲地孕酮(megestrol) 、 奥曲肽(octreotide) 、 己 烯雌酚 (diethylstilbestrol)、 氯烯雌醚(chlorotrianisene)、 足叶乙甙(etoposide)、 鬼臼毒素 (podophyllotoxin)和戈舍瑞林(goserel。

23、in)； 氮芥衍生物， 如苯丙酸氮芥(melphalan)、 苯 丁酸氮芥(chlorambucil)和塞替派(thiotepa)； 类固醇， 如倍他米松(betamethasone)； 和 其他抗肿瘤药物， 如活牛分枝杆菌(live Mycobacterium bovis) 、 达卡巴嗪 (dicarbazine)、 天冬酰胺酶(asparaginase)、 甲酰四氢叶酸(leucovorin)、 米托坦 (mitotane)、 长春新碱(vincristine)、 和长春碱(vinblastine)等。 0042 本发明将具有抗癌活性的药物化合物分子卡巴他赛与水溶性烷氧基聚乙二醇酯 通过二。

24、甘醇酰基共价结合， 得到水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物， 所述的化合物含有亲脂 的抗癌药物活性部分和亲水聚乙二醇部分， 药物分子具有药物和表面活性剂双重功能， 不 需要任何表面活性剂， 可以溶于水、 生理盐水或葡萄糖注射液形成胶束状的纳米颗粒， 直接 制成注射剂。 本发明的新的抗癌药物化合物具有较高的抗癌活性， 同时具有较好的水溶解 性， 能够提高卡巴他赛在体内生理条件下的持续作用时间(半衰期)和疗效， 具有缓释作用， 降低其毒副作用。 所述的药物化合物可以制成注射剂， 广泛应用于血液系统和非血液系统 癌症的治疗， 为卡巴他赛的临床应用提供了一种新的方法和途径。 0043 下面结合具体实施例对本。

25、发明进行详细描述。 本发明的保护范围并不以具体实施 方式为限， 而是由权利要求加以限定。 附图说明 0044 图1水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物(聚乙二醇单甲醚卡巴他赛-2 -二甘醇酸酯， 聚乙二醇单甲醚的平均分子量： Mn1000)的核磁共振氢谱图。 0045 图2水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物(聚乙二醇单甲醚卡巴他赛-2 -二甘醇酸酯， 聚乙二醇单甲醚的平均分子量： Mn1000)的质谱图。 0046 图3药物化合物XBB-022水溶液的浓度为2.5mg/mL时， 胶束平均粒径分布图。 0047 图4药物化合物XBB-022水解不同时间后得到的卡巴他赛百分比含量变化。 0048 图5药物化合物。

26、XBB-022水解不同时间后的百分比含量变化。 0049 图6药物化合物XBB-022水解的三维色谱叠加图。 具体实施方式 0050 下面的实施例用来说明本发明的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物的合成、 制剂、 体外细胞实验和体内药效学等。 实施例中， 申请人以聚乙二醇单甲醚卡巴他赛-2 -二甘醇 酸酯为例进行详细描述， 对于本发明范围内的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物， 可以采用 说 明 书 5/11 页 8 CN 106554497 B 8 相同或相似方法合成， 并经验证具有相同或相似的结果。 所述的实施例有助于对本发明的 理解和实施， 并不构成对于本发明的限制。 0051 实施例1.聚乙二醇单。

27、甲醚(Mn1000)卡巴他赛-2 -二甘醇酸酯的合成 0052 所述水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物的合成包括以下步骤： 0053 1)聚乙二醇单甲醚(Mn1000)二甘醇酸酯的合成 0054 方法一： 0055 反应式如下式所示： 0056 0057 实验步骤： 0058 在100mL圆底烧瓶中， 加入2.400g(2.4mmol)干燥后的聚乙二醇单甲醚(Mn 1000)、 0.557g(4mmol)二甘醇酸酐和200mg 2-乙基己酸锡(II)， 再加入30mL二甲苯， 搅拌， 氮气保护下加热回流至反应完成， 用薄层色谱法跟踪反应进程(展开剂为： 1， 4-二氧六环: DMF(体积比)6:1)。

28、。 用旋转蒸发仪除去反应液中的二甲苯后， 加入20mL乙酸乙酯， 搅拌， 再 加入10mL乙醚， 析出白色固体， 过虑除去固体物质， 用旋转蒸发仪将滤液浓缩至10mL， 柱层 分离(100-200mesh硅胶为固定相， 乙腈和1， 4-二氧六环的混和液为淋洗液)， 得1.865g聚乙 二醇单甲醚(Mn1000)二甘醇酸酯， 收率69.3。 0059 方法二： 在100mL圆底烧瓶中， 加入0.644g(4.8mmol)二甘醇酸、 1.450g(12mmol)4- 二甲氨基吡啶、 1.530g(6mmol)2-氯-1-甲基吡啶鎓碘化物和30mL N,N-二甲基乙酰胺， 电磁 搅拌， 慢慢向反应液。

29、中滴加2.400g(2.4mmol)干燥后的聚乙二醇单甲醚(Mn1000)和30mL N,N-二甲基乙酰胺的溶液。 在室温和氮气的保护下反应12h， 用旋转蒸发仪将滤液浓缩至 10mL， 柱层分离(100-200mesh硅胶为固定相， 乙腈和1， 4-二氧六环的混和液为淋洗液)， 得 1.631g聚乙二醇单甲醚(Mn1000)二甘醇酸酯， 收率60.6。 0060 2)聚乙二醇单甲醚(Mn1000)卡巴他赛-2 -二甘醇酸酯(XBB-022)的合成 0061 反应式如下式所示： 0062 0063 在100mL圆底烧瓶中， 将1.327g(1.19mmol)聚乙二醇单甲醚(Mn1000)二甘醇。

30、酸 酯溶解在30mL的无水甲苯中， 加入435 L(5.95mmol)二氯亚砜， 2滴DMF。 电磁搅拌， 在室温和 说 明 书 6/11 页 9 CN 106554497 B 9 氮气的保护下反应4h。 减压蒸馏除去甲苯和过量的亚硫酰氯， 得到粘稠液体， 加入10mL无水 氯仿得溶液A。 0064 在50mL的反应瓶中， 将0.958g(1.18mmol)的卡巴他赛溶解在20mL的氯仿中， 加入 350 L(2.5mmol)的三乙胺， 冰盐浴冷却， 搅拌， 慢慢加入10mL溶液A， 在室温和氮气的保护下 反应4h。 反应完毕后， 减压蒸馏除去反应液中的氯仿， 再向反应瓶中加入20mL的乙酸乙。

31、酯， 搅拌， 过滤除去白色固体， 再将滤液浓缩至10mL。 柱层分离(100-200mesh硅胶为固定相， 乙 腈和1， 4-二氧六环为淋洗剂(的混和液为淋洗液)， 进行梯度洗脱， 得1.002g聚乙二醇单甲 醚(Mn1000)卡巴他赛-2 -二甘醇酸酯， 产物为白色粘稠液体， 产率为61.7。 0065 合成得到的化合物其质谱和核磁共振氢谱见图1和图2。 0066 MS(Positive ESI):m/z2002.0， 1958.0， 1913.0， 1869.0， 1825.9， 1780.9， 1737.8。 0067 1H NMR(300MHz,CDCl3): ppm:8.12398.。

32、0995(d,2H,J7.32Hz) ,7.6281 7.5788(t,1H,J7.40Hz),7.51897.4688(t,2H， J7.52Hz)， 7.42587.3779(m,2H), 7.34657.2837(m,3H),6.29886.2417(t,1H,J8.57Hz),5.66045.6378(d,1H,J 6.78Hz) ,5.48785.4217(m,3H) ,5.01124.9808(d,1H,J9.12Hz) ,4.8257(s,1H) , 4.32774.1609(m,8H),3.92833.7862(m,2H),3.6425(s,84H),3.56193.5317(。

33、m,2H), 3.4419(s,3H),3.3789(s,3H),3.3082(s,3H),2.7000(m,1H),2.4229(s,3H),2.2000(m, 3H),1.9986(s,3H),1.7173(s,3H),1.3454(s,9H),1.2183(s,3H),1.2030(s,3H)。 0068 实施例2.水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物(XBB-022)的制剂 0069 本实施例中包括用水、 生理盐水(0.9氯化钠)、 5葡萄糖注射液制成的注射液， 制剂配方中含有本发明的水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物， 每一组分在配方中的含量按重 量百分比计算。 0070 A.水溶性卡巴他赛抗癌药。

34、物化合物的去离子水注射液 0071 将100mg水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物(XBB-022)加入到10mL的容量瓶中， 用去 离子水定容至10mL， 振摇后所生产的注射液的组成如下： 0072 XBB-022 1.0 0073 去离子水 99.0。 0074 制成的注射液通过一个0.2微米的过滤器过滤， 再装入无菌的玻璃瓶中。 0075 B.水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物的生理盐水注射液 0076 将50mg水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物(XBB-022)加入到10mL的容量瓶中， 用生 理盐水(0.9氯化钠)定容至10mL， 振摇后所生产的注射液的组成如下： 0077 XBB-022 0.5 。

35、0078 生理盐水 99.5。 0079 制成的注射液通过一个0.2微米的过滤器过滤， 再装入无菌的玻璃瓶中。 0080 C.水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物的5葡萄糖注射液 0081 将50mg水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物(XBB-022)加入到10mL的容量瓶中， 用5 葡萄糖注射液定容至10mL， 振摇后所生产的注射液的组成如下： 0082 XBB-022 0.5 0083 5葡萄糖溶液 99.5。 说 明 书 7/11 页 10 CN 106554497 B 10 0084 制成的注射液通过一个0.2微米的过滤器过滤， 再装入无菌的玻璃瓶中。 0085 实施例3.水溶性卡巴他赛抗癌药物化合。

36、物(XBB-022)胶束粒径的测定 0086 XBB-022溶于水后形成胶束， 胶束的粒径采用美国BROOKHAVEN公司的ZetaPlus型 激光散射粒度仪测量， 测量方法为： 称取药品(XBB-022)5mg， 加入到2mL蒸馏水中， 搅拌使其 充分溶解， 静置10min， 待气泡消失后将该液体加入到样品池(比色皿)中， 注意加入样品过 程中不能产生气泡， 然后将比色皿放入样品池底座相应的凹槽内， 开始测量， 样品平行测量 三次取其平均值。 0087 实验结果见图3。 结果表明： 当XBB-022水溶液的浓度为2.5mg/mL时， 其平均粒径为 129.5纳米。 0088 实施例4.水溶性。

37、卡巴他赛抗癌药物化合物(XBB-022)体外药物缓释实验 0089 1.仪器与试剂 0090 Shimadzu LC-20AT高效液相色谱仪， SPD-20A检测器， LabSolutions色谱工作站 (日本岛津公司)； DF-1集热式磁力恒温搅拌器(上海市江星仪器有限公司)； FA2004B电子天 平(上海越平科学仪器有限公司)。 0091 甲醇为色谱级， 购于Tedia公司(USA)； KH2PO4、 NaOH是分析纯药品， 购于国药集团化 学试剂有限公司； 实验用水为蒸馏水。 0092 配制pH7.40的磷酸缓冲盐溶液(0.05M KH2PO4， 0.04M NaOH)。 0093 2。

38、.实验方法 0094 准确称取5mg XBB-022放入螺口菌种瓶中， 加入2ml磷酸缓冲盐溶液， 磁力搅拌至 澄清。 设置集热式磁力恒温搅拌器油浴温度为37， 将XBB-022制剂置于其中进行水解反 应。 0095 用移液枪移取60 L XBB-022反应液于色谱瓶中， 另移取540 L乙腈， 制得0.25mg/ ml的样品， 依次在开始水解后0h,1h,4h,5h,6h,22h,29h,48h,74h,96h,168h进行HPLC分析。 0096 3.HPLC分析 0097 色谱柱： C18柱(5 m,150mm5mm)； 流动相： 乙腈： 水(60:40)； 检测波长： 227nm； 流。

39、 速： 1.0ml/min； 进样量5 L； 柱温40。 0098 用以上HPLC分析条件可同时检测XBB-022和卡巴他赛。 目标物保留时间tXBB-022 5.6min， t卡 巴 他 赛7.4min。 0099 4.实验结果 0100 用面积归一法可以获得XBB-022水解不同时间后卡巴他赛和XBB-022的百分比含 量， 实验结果如表1、 表2、 图4、 图5和图6所示。 对比XBB-022不同水解时间的色谱图可知， 随 着时间的增加XBB-022峰面积逐渐减小， 峰高逐渐降低； 卡巴他赛保留时间处有峰出现， 且 峰面积逐渐增大， 峰高逐渐增高。 表明随着时间的增加， XBB-022会。

40、不断水解释放出卡巴他 赛。 0101 表1.XBB-022水解不同时间后得到的卡巴他赛百分比含量 说 明 书 8/11 页 11 CN 106554497 B 11 0102 0103 表2.XBB-022水解不同时间后的百分比含量 0104 0105 5.结论 0106 结果表明， 药物化合物XBB-022在体外37， PH4.0的缓冲溶液中可逐步水解释放 出卡巴他赛。 因此， 药物化合物XBB-022作为前药， 可直接溶于水、 生理盐水或葡萄糖溶液制 成注射液等制剂， 在体内可释放出卡巴他赛， 抑制肿瘤生长。 0107 实施例5.水溶性卡巴他赛抗癌药物化合物(XBB-022)对动物移植性肿。

41、瘤S180的抑 制作用实验 0108 1)XBB-022配制方法 0109 精密称取0.02g药物XBB-022， 加入0.9氯化钠注射液(生产厂家： 辰欣药业股份 有限公司； 批号： 1403222705； 规格： 250ml:2.25g)5ml配制成4mg/ml的溶液。 加入0.9氯化 钠注射液(生产厂家： 辰欣药业股份有限公司； 批号： 1403222705； 规格： 250ml:2.25g)稀释， 得浓度为2mg/ml， 1mg/ml的溶液。 给药体积为0.2ml/20g， 即给药剂量为20mg/kg， 10mg/kg。 0110 2)阳性对照药物(卡巴他赛注射液)配制方法 0111 。

42、卡巴他赛注射液提供单位： 北京华素制药股份有限公司； 批号： 1304262； 规格： 30mg/g。 0112 称取原液(30mg/g)0.03g， 加入0.9氯化钠注射液(生产厂家： 辰欣药业股份有限 说 明 书 9/11 页 12 CN 106554497 B 12 公司； 批号： 1403222705； 规格： 500ml*0.9)3ml， 配制成浓度为0.3mg/ml的液体。 给药体积 为0.2ml/20g， 即给药剂量为3mg/kg。 0113 3)动物 0114 品系和来源： ICR小鼠， 清洁级 0115 扬州大学比较医学中心提供， 许可证号： SCXK(苏)2012-0004。

43、 0116 体重： 18-22g 0117 性别： 雄性 0118 饲料： 颗粒饲料， 由江苏省协同医药生物工程有限责任公司供给； 0119 饲养条件： 空调房间， 温度18-24， 相对湿度70。 0120 4)瘤株来源： S180由江苏省肿瘤药物研究所提供。 0121 5)仪器： YJ-875型医用净化工作台(苏州净化设备厂)。 0122 6)实验方法 0123 取ICR小鼠， 按移植性肿瘤研究法， 接种实体型瘤(在无菌操作下取瘤块， 称重， 用 玻璃组织匀浆器研磨， 磨匀后放入无菌容器内， 加生理盐水稀释成1:3的细胞悬液， 容器置 冰块上， 用空针抽吸， 每次抽吸前将细胞混匀， 每只小。

44、鼠右前肢腋窝皮下接种0.2ml)， 接种 后24小时称鼠重， 并随机分为4组。 各给药组于接种24小时后(d1)第一次给药， XBB-022和卡 巴他赛注射液尾静脉注射给药， 1次/2天， 共给药4次。 给药体积均为0.2ml/20g。 于接种后第 9天(d9)处死荷瘤小鼠称重， 并分离瘤块称重， 所得数据进行统计学处理(t检验)。 0124 剂量设置： 共设4组 0125 0126 7)实验结果 0127表3药物对小鼠移植瘤S180抑制作用 0128 0129 *P0.05 *P0.01与模型对照组比较 说 明 书 10/11 页 13 CN 106554497 B 13 0130 8)实验。

45、结论 0131 结果表明， XBB-022 20mg/kg、 10mg/kg和卡巴他赛3mg/kg对S180肿瘤生长具有极 显著的抑制作用(P0.01)， 分别为61.1、 42.13和48.79， XBB-022 20mg/kg对S180肿 瘤抑制作用高于卡巴他赛3mg/kg。 给药后， 卡巴他赛3mg/kg对实验鼠体重有极显著影响(P 0.01)， XBB-022 20mg/kg和10mg/kg对实验鼠体重影响(P0.05)明显小于卡巴他赛， 说明 XBB-022的毒性明显低于卡巴他赛。 说 明 书 11/11 页 14 CN 106554497 B 14 图1 图2 说 明 书 附 图 1/3 页 15 CN 106554497 B 15 图3 图4 说 明 书 附 图 2/3 页 16 CN 106554497 B 16 图5 图6 说 明 书 附 图 3/3 页 17 CN 106554497 B 17 。