技术领域
本发明涉及日用品技术领域，特别涉及护肤组合物、护肤膏霜及其制备方法。
背景技术
衰老是机体各组织、器官功能随着年龄的增长而发生的退行性变化，其中最明显的一个表现为皱纹的产生。皱纹是指皮肤受到外界环境影响，形成游离自由基，自由基破坏正常细胞膜组织内的胶原蛋白、活性物质，氧化细胞而形成的小细纹、皱纹。随着年龄的增加，皱纹会逐渐显现，研究表明，25岁左右眼角可能出现浅小皱纹，30岁左右额部皱纹加深增多，外眼角出现鱼尾纹，上下睑皮出现不同程度的皱纹，40岁左右鼻唇沟加深，口角出现细小皱纹，50-60岁全颜面弹性下降，颜面皱纹加深。因此需要使用一些抗衰老产品，延缓皱纹的产生，提高皮肤美感。
为了满足市场需求，目前出现了较多的抗衰老、抗皱类护肤品，但大多数产品过于重视抗衰老效果，而使用一些强效化学试剂，该类产品，虽然在短时期内可以取得较好的效果，但长期使用容易产生依耐性，增加皮肤负担，反而加速皮肤老化。
发明内容
基于此，有必要提供一种安全有效的护肤组合物、护肤膏霜及其制备方法。
一种护肤组合物，由以下重量份的组分组成：
上述护肤组合物主要由乙酰基四肽-2、乙酰基四肽-5、乙酰基六肽-8、乙酰基八肽-3及乳清蛋白组成，其中乙酰基四肽-2可以通过作用FBLN5和LOXL1来促进胶原蛋白和弹性蛋白等的合成，增强细胞支持力，抵抗重力作用，防止皮肤松弛。此外，乙酰基四肽-2还可以增加与细胞粘附相关的黏着斑基因的表达，从而增加皮肤的紧致度，改善真皮结构和老化肤质。
乙酰基四肽-5具有抑制胶原糖化的作用，从而避免过氧化物歧化酶失活，进而可以抑制自由基的产生，防止肌肤老化，其还可以改善血管通透性，实现排水和消除充血，缓解浮肿现象，故其对抗眼袋和黑眼圈具有明显的作用。
乙酰基六肽-8是SNAP-25的N端复制物，在SNARE复合物中与其竞争位置，进而降低SNARE复合物的稳定性，使得囊泡无法有效释放神经递质，从而减弱肌肉收缩，防止细纹和皱纹的形成。
乙酰基八肽-3能够通过肉毒杆菌毒素的替代机理来减少由面部表情肌肉收缩造成的皱纹深度，减少局部的表情纹，其也可以降低SNARE复合物的稳定性来减弱神经元的兴奋性，减少由于过多的神经递质的释放而引起的面部肌肉刺激，缓解皮肤由于过于紧张而导致的皱纹。
乳清蛋白可以重新激活皮肤细胞，并在真皮中引发细胞外基质分子(如胶原、透明质酸和纤连蛋白)的合成，从而减少明显的老化痕迹，其还可以使皮肤更加紧致并增强弹性，能快速高效地减少皱纹深度，改善皮肤结构。
在其中一实施例中，所述护肤组合物由以下重量份的组分组成：
上述护肤组合物的各组分在上述范围内具有更强的抗衰老效果。
上述护肤组合物在制备具有抗衰老和/或保湿功效的护肤品或化妆品中的应用。
由于上述护肤组合物具有较强的抗衰老、保湿效果，且该其组分均为生物功能分子，易吸收，温和无毒副作用，不易致敏，故上述护肤组合物适用于具有抗衰老和/或保湿功效的护肤品或化妆品中。
一种护肤膏霜，由功效成分和护肤品中可接受的辅料制备而成，所述功效成分包括上述的护肤组合物。
在其中一实施例中，所述护肤组合物在所述护肤膏霜中的质量百分比为1％-10％。
在其中一实施例中，所述护肤组合物在所述护肤膏霜中的质量百分比为2％-8％。
在其中一实施例中，所述护肤组合物在所述护肤膏霜中的质量百分比为3％-6％。
在其中一实施例中，所述护肤膏霜由以下质量百分比的原料制备而成：所述护肤组合物1％-10％、保湿剂5％-13％、增稠剂0.2％-0.6％、润肤剂13％-32％、乳化剂2％-6％、防腐剂0.3％-0.6％、中和剂0.1％-0.3％及水余量。
在其中一实施例中，所述护肤膏霜由以下质量百分比的原料制备而成：所述护肤组合物2％-8％、保湿剂6％-10％、增稠剂0.3％-0.5％、润肤剂15％-28％、乳化剂3％-5％、防腐剂0.3％-0.6％、中和剂0.1％-0.3％及水余量。
在其中一实施例中，所述保湿剂为甘油、双甘油、1，3-丁二醇、1，3-丙二醇、1，2-戊二醇、辛甘醇、甘油辛酸酯、山梨醇、聚乙二醇、甜菜碱、透明质酸、神经酰胺、胶原蛋白、尿素、甲壳素衍生物、芦荟以及海藻提取物中的一种或多种；
所述增稠剂为麦芽糊精、黄原胶、卡波姆、聚丙烯酸钠、氯化三甲基铵乙基甲基丙烯酸酯的均聚物、丙烯酸共聚物、营养拉丝蛋白质钠、高分子纤维素中的一种或多种；
所述润肤剂为角鲨烷、鳄梨油酸硬脂基酯、聚乙二醇月桂酸酯、聚乙二醇油酸酯中的一种或多种；
所述乳化剂为甲基葡糖倍半硬脂酸脂和PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸脂中的一种或多种；
所述防腐剂为苯氧乙醇/羟苯甲酯/羟苯乙酯/乙基己基甘油；
所述中和剂为三乙醇胺。
在其中一实施例中，所述保湿剂为甘油、双甘油、1，3-丁二醇及辛甘醇的组合；
所述增稠剂为黄原胶和卡波姆的组合；
所述润肤剂为环五聚二甲基硅氧烷、鲸蜡硬脂醇、碳酸二乙基己酯、霍霍巴籽油、聚二甲基硅氧烷及巴巴苏籽油的组合；
所述乳化剂为甲基葡糖倍半硬脂酸脂和PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸脂的组合。
在其中一实施例中，所述护肤膏霜由以下质量百分比的原料制备而成：所述护肤组合物1％-8％、1,3-丙二醇3％-8％、双甘油2％-5％、1，3-丁二醇0.1％-2％、辛甘醇0.5％-4％、黄原胶0.1％-0.3％、卡波姆0.1％-0.3％、甲基葡糖倍半硬脂酸脂1％-3％、PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸脂1％-3％、环五聚二甲基硅氧烷1％-3％、鲸蜡硬脂醇2％-4％、碳酸二乙基己酯6％-10％、霍霍巴籽油2％-7％、聚二甲基硅氧烷1％-4％、巴巴苏籽油1％-4％、苯氧乙醇/羟苯甲酯/羟苯乙酯/乙基己基甘油0.3％-0.6％及水余量。
在其中一实施例中，所述护肤膏霜由以下质量百分比的原料制备而成：所述护肤组合物3％-6％、1,3-丙二醇4％-6％、双甘油2.5％-4％、1，3-丁二醇0.5％-1％、辛甘醇1％-3％、黄原胶0.15％-0.25％、卡波姆0.15％-0.25％、甲基葡糖倍半硬脂酸脂1.5％-2.5％、PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸脂1.5％-2.5％、环五聚二甲基硅氧烷1.5％-2.5％、鲸蜡硬脂醇2.5％-3.5％、碳酸二乙基己酯7％-9％、霍霍巴籽油3％-5％、聚二甲基硅氧烷1％-3％、巴巴苏籽油1％-3％、苯氧乙醇/羟苯甲酯/羟苯乙酯/乙基己基甘油0.3％-0.6％及水余量。
一种护肤膏霜的制备方法，包括以下步骤：
将上述保湿剂和增稠剂加入水中，在80℃-85℃的条件下搅拌均匀，得水相组分；
将上述乳化剂和润肤剂在80℃-85℃的条件下混合均匀，得油相组分；
再将所述水相组分和所述油相组分混合，混合均匀后加入上述中和剂；
降温至35℃-45℃，加入上述防腐剂和护肤组合物，搅拌均匀即得所述抗衰老护肤品。
上述制备方法先分别制得水相组分和油相组分，然后再将二者混合，这样更易控制该护肤品的粘度、表面张力等物理性质，保证其性状。且上述方法根据组分的性质选择合适的添加温度，可以有效地防止活性组分失活。
上述护肤组合物通过将四种不同结构的多肽与乳清蛋白进行组合，并优化配方，使各组分在充分发挥各自作用的同时，相互协同作用，促进胶原蛋白、弹性蛋白等的合成，抑制自由基的形成以及胶原糖化，从而改善皮肤弹性，缓解皱纹，抵抗肌肤衰老，可以深层改善肌肤，且该组合物具有较强的保湿作用，能使肌肤滋润有弹性。另外，上述多肽和乳清蛋白均为生物功能分子，易吸收，温和无毒副作用，不易致敏。
上述护肤膏霜不仅可以缓解皱纹，抵抗肌肤衰老，改善皮肤弹性，还可以滋润皮肤，使肌肤滋润有弹性，达到深层改善肌肤的目的。另外，该护肤膏霜中各组分均温和无刺激，不易致敏，适用各种肌肤。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述，并给出了本发明的较佳实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
需要说明的是，本发明未注明具体来源的试剂或仪器，为市场购买的常规试剂或仪器。
本发明中苯氧乙醇/羟苯甲酯/羟苯乙酯/乙基己基甘油是指由苯氧乙醇、羟苯甲酯、羟苯乙酯以及乙基己基甘油组成的物质，例如K350防腐剂。
乳清蛋白：Chemisches Laboratorium Dr.Kurt Richter GmbH公司
乙酰基四肽-2、乙酰基四肽-5、乙酰基六肽-8以及乙酰基八肽-3：Lipotec公司
实施例1
本实施例的护肤组合物的组成：如表1
本实施例的护肤膏霜由以下质量百分比的原料制备而成：护肤组合物1.8％、1,3-丙二醇3％、双甘油4％、黄原胶0.1％、卡波姆0.2％、甲基葡糖倍半硬脂酸脂1.2％、PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸脂1％、环五聚二甲基硅氧烷1％、鲸蜡硬脂醇2％、碳酸二乙基己酯6％、霍霍巴籽油4％、聚二甲基硅氧烷2％、巴巴苏籽油2％、三乙醇胺0.2％、苯氧乙醇/羟苯甲酯/羟苯乙酯/乙基己基甘油(K350)0.5％、水余量。
护肤膏霜的制备方法：
1)将水加入水相锅中，将黄原胶、卡波姆加入双甘油中润湿，然后加入水相锅中，开启搅拌，再加入1,3-丙二醇，升温至80～82℃，保温10分钟，得水相组分；
2)将甲基葡糖倍半硬脂酸脂、PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸脂、环五聚二甲基硅氧烷、鲸蜡硬脂醇、碳酸二乙基己酯、霍霍巴籽油、聚二甲基硅氧烷以及巴巴苏籽油依次加入油相锅中，开启搅拌，混合均匀，并升温至80～85℃，得油相组分；
3)乳化锅的搅拌速度保持在30转/分钟，将水相组分通过真空吸入，开启低速均质，然后将油相组分的原料吸入，均质10分钟；
4)将三乙醇胺加入乳化锅中，搅拌均匀、降温；
5)搅拌降温至42℃以下时，加入苯氧乙醇/羟苯甲酯/羟苯乙酯/乙基己基甘油(K350防腐剂)以及抗衰老组合物，搅拌均匀；降至38℃时出料；
6)灭菌、包装即可。
表1：实施例1-实施例4的护肤组合物的组分及其含量(重量份)
实施例2
本实施例的护肤组合物：如表1
本实施例的护肤膏霜由以下质量百分比的原料制备而成：护肤组合物4.7％、1,3-丙二醇3份、双甘油5％、黄原胶0.1％、卡波姆0.3％、甲基葡糖倍半硬脂酸脂2％、PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸脂2％、环五聚二甲基硅氧烷3％、鲸蜡硬脂醇2％、碳酸二乙基己酯6％、霍霍巴籽油7％、聚二甲基硅氧烷2％、巴巴苏籽油2％、三乙醇胺0.2％、苯氧乙醇/羟苯甲酯/羟苯乙酯/乙基己基甘油(K350)0.5％、水余量。
本实施例的护肤膏霜的制备方法：同实施例1
实施例3
本实施例的护肤组合物：如表1
本实施例的护肤膏霜由以下质量百分比的原料制备而成：护肤组合物6％、1,3-丙二醇5％、双甘油3％、黄原胶0.2％、卡波姆0.2％、甲基葡糖倍半硬脂酸脂1.2％、PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸脂1.5％、环五聚二甲基硅氧烷2％、鲸蜡硬脂醇3％、碳酸二乙基己酯8％、霍霍巴籽油4％、聚二甲基硅氧烷2％、巴巴苏籽油2％、三乙醇胺0.2％、苯氧乙醇/羟苯甲酯/羟苯乙酯/乙基己基甘油(K350)0.5％、水余量。
本实施例的护肤膏霜的制备方法：同实施例1
实施例4
本实施例的护肤组合物：如表1
本实施例的护肤膏霜由以下质量百分比的原料制备而成：护肤组合物9.8％、1,3-丙二醇6％、双甘油5％、黄原胶0.2％、卡波姆0.3％、甲基葡糖倍半硬脂酸脂3％、PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸脂1.5％、环五聚二甲基硅氧烷2％、鲸蜡硬脂醇3％、碳酸二乙基己酯8％、霍霍巴籽油5％、聚二甲基硅氧烷3％、巴巴苏籽油3％、三乙醇胺0.2％、苯氧乙醇/羟苯甲酯/羟苯乙酯/乙基己基甘油(K350)0.5％、水余量。
本实施例的护肤膏霜的制备方法：同实施例1
对比例1
本对比例的护肤组合物：如表2
本对比例的护肤膏霜与实施例3的护肤膏霜基本相同，不同之处在于护肤组合物不相同，本对比例的护肤组合物中不含乳清蛋白。
本对比例的护肤膏霜的制备方法：同实施例1
表2：对比例1-对比例3的护肤组合物的组分及其含量(重量份)
对比例2
本实施例的护肤组合物：如表2
本实施例的护肤膏霜与实施例3护肤膏霜基本相同，不同之处在于，护肤组合物不相同，本对比例的护肤组合物仅含乳清蛋白。
本对比例的护肤膏霜的的制备方法：同实施例1
对比例3
本实施例的护肤组合物：如表2
效果验证实验
(1)人皮肤成纤维细胞增殖活性试验
待测试样：实施例1-实施例4、对比例1-对比例4的护肤组合物
试验方法：将人皮肤成纤维细胞(江苏齐氏生物科技有限公司)置于MEM培养基(含5％胎牛血清)中，在37℃的CO2培养箱中培养(5％CO2、95％湿度)，每3天换液1次，培养5-6天，吸出原培养液，经PBS洗涤2次，加入0.25％的胰蛋白酶(1mM)的EDTA-4Na溶液0.5mL，于37℃下30秒后，加入MEM培养基10mL，轻柔吸取，使细胞悬浮，移至50mL离心管，于2000rpm下离心2min，除去上清液，加入适量含血清培养基，轻柔吹吸，令细胞均匀悬浮。取96孔板，每孔中加入细胞悬浮100μL(含细胞1000个)，待细胞附着后，分别按组加入实施例1-实施例4以及对比例1-对比例3的护肤组合物10μL，并以相同量PBS作为空白对照。将含细胞和测试物的96孔板，在恒温培养箱中培养72h，取出后，向各孔中加入WST-8溶液10μL，再次放入培养箱中孵育4h显色，取出，在450nm测定OD值，数据按均数±标准差表示。p＜0.05表示有统计学差异。结果如下表3
表3
OD 空白对照 0.255±0.083 实施例1 0.656±0.065* 实施例2 0.674±0.047* 实施例3 0.686±0.033* 实施例4 0.648±0.077* 对比例1 0.458±0.057* 对比例2 0.316±0.048* 对比例3 0.424±0.053*
*p＜0.01
从表3可以看出，实施例1-实施例4以及对比例1-对比例3的OD值均高于对照组，且实施例1-实施例4的OD值高于对比例1-对比例3。说明实施例1-实施例4的组合物具有增加纤维细胞生长的作用，且其促生长作用大于对比例1-对比例3。
(2)促进可溶性胶原蛋白分泌的检测
试验方法：将在含10％FBS的DMEM培养基中培养人成纤维细胞(江苏齐氏生物科技有限公司)，并播种于96孔板上，细胞附着后，用含有0.25％FBS和抗坏血酸磷酸镁的DMEM培养基进行培养基交换，分别加入10μL实施例1-实施例4，对比例1-对比例3的样品。培养72h后，回收培养基上清液，离心分离，使用Biocolor可溶性胶原蛋白测定试剂盒，测定所得上清液中可溶性胶原蛋白的含量，其中空白对照表示不加样品。p＜0.05表示有统计学差异。结果如下表4：
表4
*p＜0.01
从表4可以看出，实施例1-实施例4、对比例1-对比例3的护肤组合物均具有促胶原蛋白合成的作用，但实施例1-实施例4的作用强于对比例1-对比例3。
(3)护肤膏霜临床试验
测试人员：自愿者120名，年龄在28-60岁；将自愿者分为6组，每组20名，分别测试上述实施例1-实施例4及对比例1、对比例2的护肤膏霜(第1组使用实施例1的膏霜，第2组使用实施例2的膏霜，第3组使用实施例3的膏霜，第4组使用实施例4的膏霜，第5组使用对比例1的膏霜，第6组使用对比例2的膏霜)；
入选标准：皮肤干燥、弹性降低、出现皱纹、肤色暗黄等存在肌肤问题的自愿者，但无任何皮肤和系统性疾病患史，近一个月内未使用激素类药物；
产品使用规则：测试前2-3天及整个测试期间，使用相同的洗面奶进行清洁，且在此期间不涂抹除测试样品外的任何护肤品或药品，每天早晚各1次。
3.1抗敏测试
给上述自愿者进行相应组别的产品的斑贴试验，评价标准如表5
表5皮肤不良反应分级标准
试验结果如表6：
表6斑贴试验结果
测试组均无不良反应，可以进行后续测试。
3.2抗衰老测试
仪器：VISA面部图像分析系统
测试方法：选取5个测试点，分别为眉间纹、前额皱纹、鱼尾纹、鼻唇沟以及唇周皱纹，每次测试时，尽量取相同区域的肌肤，测试时放松。以未使用产品前的测试结果为空白对照，测试使用产品30天和3个月的皱纹情况，每次每个区域测3次，统计每个人每个区域测定值，求平均值。
评估标准：
10分，没有皱纹；
7-9分，有2-3条皱纹，长度小于1.5cm；
4-6分，有3-6条皱纹，长度小于3cm；
1-3分，有数条主皱纹，长度大于4cm，还伴随有浅皱纹。
测试结果如下表7
上述测试完成后，第5组(对比例1)、第6组(对比例2)的自愿者停用产品2-3天，然后使用实施例3的产品，按上述同样的方法进行测试和统计，测试结果如下表8。
表8
3.2保湿测试
测试仪器：Corneometer CM825
实验环境：25℃25℃，湿度5025％，并且实时动态监测
测试方法：选取5个测试点，分别为前额、两颊、鼻及下颚，每次测试时，尽量取相同区域的肌肤，在测试前30分钟，不喝水，置于测试环境先静坐30分钟，再开始测试。以未使用产品前的测试结果为空白对照，测试使用产品15天、30天及3个月的水分含量，每次每个区域测3次，统计每个人每个区域测定值，将每组所有人所有测定区域的值汇总取均值。结果如下表9。
表9
上述测试完成后，第5组(对比例1)、第6组(对比例2)的自愿者停用产品2-3天，然后使用实施例3的产品，按上述同样的方法进行测试和统计，测试结果如下表10。
表10
从表7的抗衰老试验的测试结果可以看出，实施例1-实施例4的护肤膏霜均具有较好的抗衰老效果。从表9的保湿测试的实验中可以看出，实施例1-实施例4的膏霜具有较强的保湿作用。
另外，从表8可以看出，第5组、第6组的自愿者使用对比例1、对比例2后抗衰老效果不明显，再使用实施例3的护肤品后，皮肤皱纹有了较大幅度的改善，该实验排除了个体差异，说明实施例3的护肤品的抗衰老作用强于对比例1、对比例2。
从表10可以看出，第5组、第6组的自愿者使用对比例1、对比例2后再使用实施例3的护肤品后，皮肤含水量有了较大幅度提高，该实验排除了个体差异，说明实施例3的护肤品的保湿作用强于对比例1和对比例2。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。