快速检测弧菌数量的方法及检测剂.pdf

本发明涉及一种检测危害鱼虾贝类的弧菌数量的方法。
    弧菌是鱼虾贝类细菌性病害的主要病原体。及时掌握养殖、育苗水体中的弧菌数量是决定施药、换水时机，防止病害爆发，取得最佳防治效果的重要手段。目前，国内外大多以TCBS培养液采用平板法或三管法对弧菌进行检测和计数。这些传统方法的缺点是检测速度慢，检测一次需48～72小时，程序比较复杂，非经专业训练的人员难以掌握，成本也高，尤其是TCBS培养液对副溶血弧菌选择性不强，致使这些方法的准确性很差。

    本发明的目的就是提供一种简便、快速、较为准确的检测弧菌的方法及检测剂，它能弥补现有检测方法的上述不足。

    在稳定、适宜的培养条件下弧菌快速生长，其分泌物达到一定浓度后，可使检测剂中的指示剂变色，变色的快慢与水样中弧菌的数量、培养时的温度有关，因此本发明的技术方案如下：

    在现有的TCBS培养液的基础上再加入0.5～100‰的阿拉伯糖作培养液，将此培养液放入安瓿中;检测时，打开安瓿，接入含弧菌水样后，在15～37℃的条件下培养，观察培养液颜色，记下由兰色经兰绿、绿色到黄色所经历的时间，再由弧菌数量、温度、时间对照表查出水样中弧菌的数量。

    本发明的检测方法快速，测定温度为34℃，水样中有1万8千个/毫升弧菌时，检测一次需6.5小时，程序简单，比较准确，成本低，普通工作人员皆可掌握。

    实施例

    在由5g酵母浸膏、10g蛋白胨、10g柠檬酸钠、15g氯化钠、5g牛胆盐，1g柠檬酚铁铵、10g硫代硫酸钠、10g蔗糖、3g去氧胆酸钠、20ml0.2%麝香草酚兰、20ml0.2%溴麝香草酚兰和1000ml蒸馏水组成的TCBS培养液中加入2.5g阿拉伯糖作为本发明地检测剂。将此检测剂5ml装入10ml安瓿中。为检测某养殖池，水体中的弧菌，在池内多点取其表层水（水深3～5公分）混合后，用滴管取混合水样5ml注入安瓿中至标定刻度，摇匀，套上膜套放在34℃的环境中，每隔10分钟观察一次，记录安瓿内液体由兰色变到黄色所经历的时间为7小时，然后由对照表读出1ml该水样中有0.82万个弧菌。

    本发明的检测剂最好低温避光贮藏，保质期为15个月。