用酶工程技术从蚕砂中制取叶绿素酸盐的方法.pdf

摘要
申请专利号：	CN92103649.3	申请日：	1992.05.12
公开号：	CN1078750A	公开日：	1993.11.24
当前法律状态：	撤回	有效性：	无权
法律详情：	\|\|\|公开
IPC分类号：	C12P9/00; C12P17/00; C12N9/50	主分类号：	C12P9/00; C12P17/00; C12N9/50
申请人：	张辉;
发明人：	张辉; 梁婷
地址：	510089广东省广州市中山二路74号中山医科大学化学教研室
优先权：
专利代理机构：	中山医科大学专利事务所	代理人：	温旭
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内容摘要

本发明涉及一种蚕砂中制取叶绿素酸盐的方法，尤其是应用酶工程技术。将蚕砂先经预处理：用稀酸浸渍、冲洗，用稀碱浸渍、冲洗；然后调整酸度和控制温度，加入水解酶、金属螯合剂和抗氧剂等。本发明使用水作溶剂来提取叶绿素，因而具有成本低、安全、投资少等优点。

权利要求书

1：一种从蚕砂中制取叶绿素酸盐的方法，其特征在于先将蚕砂进行预处理：用酸浸渍，冲洗，用碱浸渍，冲洗；然后调整PH值及控制温度，加入水解酶、金属螯合剂和抗氧剂，搅拌；滤去水溶液，滤渣经洗涤后加入碱溶液，保温并搅拌；过滤，洗涤，收集滤液和洗涤液，调至PH2.0～6.0，放置，收集沉淀，加入金属盐溶液，保温并搅拌；分出沉淀物，水洗至无金属离子反应，用稀碱溶液溶解沉淀，并使溶液PH8～11，过滤，滤液蒸干得叶绿素酸盐固体。
2：根据权利要求1所述的制取叶绿素的方法，其特征在于加入水解酶前所控制的pH以4.0～9.0为宜，控制的温度以30～60℃为宜。
3：根据权利要求1所述的制取叶绿素的方法，其特征在于所加的水解酶可以是胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜酶、菠萝酶、蛋白水解酶3942等。

说明书

本发明涉及一种从蚕砂中制取叶绿素酸盐的方法及酶工程技术。
    叶绿素酸盐不仅是食品、药品和化妆品工业的重要绿色天然色素，而且其制剂曾成功地治疗胃痛、肝炎、骨髓炎、皮肤色素沉着、湿疹、阴道和子宫糜烂等症;同时还具有抗癌、抗过敏、抗毒素和除口臭的作用。据报道叶绿素的基本结构原卟啉，有防治爱滋病的效果。另外，由于叶绿素酸可以和多种金属离子形成配位化合物，因而可以利用叶绿素酸作为载体，使之与人体必需微量元素形成配位化合物，做成各种治疗、保健和补益药剂。因此，叶绿素酸盐有广阔的开发前景。

    目前，提取叶绿素的主要原料有绿色植物的叶和蚕砂（蚕的粪便干燥物）。蚕砂是我国常用的、便宜易得的提取叶绿素酸盐的原材料，但由于其存在较大量的蛋白质和果胶，至使提取工艺较复杂，要使用有机溶剂，生产成本高，厂房和设备要求防火防爆，能源消耗也大。

    本发明的目的是提供这样一种技术，使用水作溶剂从蚕砂中制取叶绿素酸盐，以大幅度地降低生产成本和厂房设备的投资，并提高收得率。

    本发明是这样实现的：先将蚕砂用稀酸溶液浸渍，滤去酸液，洗涤，再用稀碱溶液浸渍，滤去碱液并冲洗;然后在pH4.0～9.0和温度30～60℃条件下，加入水解酶、金属螯合剂和抗氧剂，搅拌;滤去水溶液，滤渣经洗涤后加入碱溶液，保温60～90℃，搅拌;过滤，洗涤，收集滤液和洗涤液，调pH2.0～6.0，放置，收集沉淀，加入金属盐溶液，保温40～70℃，搅拌，分出沉淀物，水洗至无金属离子反应，用稀碱溶液溶解沉淀，并使溶液pH8～11，过滤，滤液蒸干得叶绿素酸盐固体。

    下面结合实施例对本发明作进一步描述。

    叶绿素酸铜钠的制取

    1.取蚕砂100克，加入0.1～0.2%草酸溶液500～800毫升，浸渍12～24小时，滤去碱液，并用大量水冲洗，至洗出液呈淡黄绿色。

    2.经预处理后的蚕砂，加入水解酶0.2～0.5克，金属螯合剂0.1克，抗氧剂0.2克和水450毫升，调pH值4.0～8.0，保温35～60℃，搅拌4小时。

    3.过滤收集沉淀，水洗后，再加入450毫升水和10～25克氢氧化钠，保温60～90℃，搅拌2～4小时。

    4.过滤收集滤液，残渣用水洗至淡黄绿色。合并滤液和洗涤液，调pH2.0～5.0，放置，收集沉淀，水洗。加入0.3～0.4克硫酸铜，调pH2.0～5.0，搅拌0.5～1.0小时。

    5.分出沉淀物，水洗至无Cu2+反应;用5%氢氧化钠溶液溶解沉淀，并使溶液pH11～12，过滤。滤液加酸调pH2～5，放置，收集沉淀，水洗。再用5%氢氧化钠溶液溶解，并使溶液pH9～11，过滤，滤液蒸发、干燥，得墨绿色的叶绿素酸铜钠固体。

    本发明的优点在于通过酶工程技术，能够用水作为溶剂，从蚕砂中制取叶绿素酸盐，使生产成本大大降低。另外，也减少了生产设备、厂房的资金投入和节约能源。