N‑（5‑苄基噻唑‑2‑基）苯甲酰胺及其医药用途.pdf

摘要
申请专利号：	CN201410009342.X	申请日：	20140109
公开号：	CN104771397B	公开日：	20170308
当前法律状态：		有效性：	有效
法律详情：
IPC分类号：	A61K31/426,A61P31/16,C07D277/46	主分类号：	A61K31/426,A61P31/16,C07D277/46
申请人：	湖南大学
发明人：	胡艾希,伍智林,申坤,彭俊梅,刘艾琳,连雯雯
地址：	410082 湖南省长沙市岳麓区麓山南路1号
优先权：	CN201410009342A
专利代理机构：		代理人：
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内容摘要

本发明涉及化学结构式I所示的N‑（5‑苄基噻唑‑2‑基）苯甲酰胺在制备神经氨酸酶抑制剂中的应用：其中R选自：C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基；Y1选自：氢、氘、甲基、乙基、氟、氯、溴；Y2、Y4选自：氢、氘、甲基、乙基、氟、氯、溴；Y3选自：氢、氘、甲基、乙基、氟、氯、溴；R1、R5选自：氢、氘、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴、硝基、三氟甲基或三氟甲氧基；R2、R4选自：氢、氘、甲基、乙基、羟基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴、硝基、三氟甲基或三氟甲氧基；R3选自：氢、氘、甲基、乙基、羟基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴、硝基、三氟甲基或三氟甲氧基。

权利要求书

1.化学结构式I所示的N-(5-苄基噻唑-2-基)苯甲酰胺或其盐在制备神经氨酸酶抑制剂中的应用：其中R选自：C～C烷基、C～C直链或支链烷基；Y选自：氢、甲基、乙基、氟、氯、溴；Y、Y选自：氢、甲基、乙基；Y选自：氟、氯、溴；R、R选自：氢、甲基、乙基；R～R选自：氢、甲基、乙基或硝基；盐选自：盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐。 2.权利要求1所述的应用，其中式I所示的N-(5-苄基噻唑-2-基)苯甲酰胺选择N-[4-叔丁基-5-(4-氯苄基)噻唑-2-基]-3，5-二硝基苯甲酰胺、N-[4-叔丁基-5-(4-氯苄基)噻唑-2-基]-4-硝基苯甲酰胺或N-[4-叔丁基-5-(2，4-二氯苄基)噻唑-2-基]-4-硝基苯甲酰胺。

说明书

技术领域

本发明涉及化合物的新应用，具体是N-（5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺在制备神经氨酸酶抑制剂中的应用。

背景技术

流感病毒表面有两种糖蛋白：血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）。由于NA在流感病毒的变异过程中具有相对保守性，使其成为设计、合成抗流感药物非常好的靶标。NA是一种蘑菇云状的包膜糖蛋白，由453～466个氨基酸组成，其结构分头部和颈部，头部含酶，具抗原性，颈部有疏水区，使之易于插入双层脂质膜中。NA可催化裂解宿主细胞表面糖蛋白末端的N-乙酰氨基神经氨酸酶，释放出成熟的流感病毒体，并阻止新病毒体的聚集。此外，NA通过改变表面糖蛋白HA的碳水化合物部分，增强毒性，促进病毒从受感染的宿主细胞中释放，引起或加重流感症状。因此，NA抑制剂可通过抑制NA活性来抑制流感病毒复制和毒性。

人感染禽流感，是由禽流感病毒引起的人类疾病。流感病毒一般可分为A型、B型和C型，其中A型即通常所说的禽流感，对人及多种动物有致病力。A型流感病毒的抗原变异性最强，常根据HA和NA抗原性的不同将其分为16个HA亚型（H1～H16）和9个NA亚型（N1～N9）。至今发现能直接感染人的禽流感病毒亚型有：H5N1、H7N1、H7N2、H7N3、H7N7、H9N2和H7N9亚型。其中，高致病性H5N1亚型于1997年在香港首次发现能直接感染人类，自2003年7月以来，该病情呈现前所未有的暴发，波及亚洲、北美洲、欧洲和非洲17个国家和地区，造成数百人感染及死亡，直接经济损失高达100亿美元。2003年3月，荷兰发生H7N7型禽流感并波及整个欧洲，人类感染者达83例，不仅造成了人类的伤亡，同时重创了家禽养殖业。2009年3月底，墨西哥暴发人感染H1N1型猪流感疫情并扩散到世界各地，据世界卫生组织于2010年2月26日发布的甲型H1N1流感全球情况报告，至少有213个国家和地区的16226例病人死于这场大流感。经过基因序列分析，H1N1型病毒包含人流感病毒、北美禽流感病毒和北美、欧、亚猪流感病毒基因片段，为几种不同物种流感病毒的混合毒株，而非单独一种猪流感或禽流感病毒。2013年3月，我国首次发现人感染H7N9禽流感病例，截止2013年12月26日，世界卫生组织公布的H7N9禽流感确诊148人，死亡43人。

神经氨酸酶（NA）抑制剂是抗A型流感病毒的第一线药物。神经氨酸酶（NA）抑制剂有Zanamivir、Oseltamivir和Peramivir等类型化合物，其中Oseltamivir应用广泛。但研究已发现一些病毒株对Oseltamivir产生了耐药性，因此迫切需要研究新型抗A型流感病毒药。中国专利描述了噻嗪类和鱼藤环丙酰胺作为抗流感病毒神经氨酸酶抑制剂的应用：（1）4-叔丁基-6-苯基-2-氨基-6H-1,3-噻嗪盐的制备方法与医药用途，ZL200910043678.7，2010.8.18授权；（2）4-烷基-6-芳基-2-酰氨基-1,3-噻嗪-5-甲酸酯及其制备方法与应用，ZL201010225483.7，2012.3.14授权；（3）4-烷基-6-芳基-5-乙酰基-1,3-噻嗪作为制备神经氨酸酶抑制剂的应用，ZL201110077574.5，2013.2.27授权；（4）鱼藤环丙酰胺及其制备方法与应用，ZL201110226848.2，2013.3.20授权。

发明内容

本发明的目的在于提供化学结构式I所示的N-（5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺或其盐在制备神经氨酸酶抑制剂中的应用：

其中R选自：C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基；Y1选自：氢、氘、甲基、乙基、氟、氯、溴；Y2、Y4选自：氢、氘、甲基、乙基、氟、氯、溴；Y3选自：氢、氘、甲基、乙基、氟、氯、溴；R1、R5选自：氢、氘、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴、硝基、三氟甲基或三氟甲氧基；R2、R4选自：氢、氘、甲基、乙基、羟基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴、硝基、三氟甲基或三氟甲氧基；R3选自：氢、氘、甲基、乙基、羟基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴、硝基、三氟甲基或三氟甲氧基；盐选自：盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐。

本发明的目的在于提供的N-（5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺选自：N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-3，5-二硝基苯甲酰胺、N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-4-硝基苯甲酰胺、N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2-（三氟甲基）苯甲酰胺、N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-3，5-二（三氟甲基）苯甲酰胺、N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2-甲基-3硝基苯甲酰胺、N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2，6-二氟苯甲酰胺、N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2-甲氧基苯甲酰胺、N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2-氯苯甲酰胺、N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-4-氯苯甲酰胺、N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2，6-二氯苯甲酰胺、N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]乙酰胺、N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]丙酰胺、N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2-氯乙酰胺、N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2-氯丙酰胺、N-[4-叔丁基-5-[1-(4-氯苯基)-2-硝基乙基]噻唑-2-基]-2-氯乙酰胺、N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-4-氯苯甲酰胺、N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-2-氯苯甲酰胺、N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-2-（三氟甲基）苯甲酰胺、N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-4-硝基苯甲酰胺、N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-3，5-二硝基苯甲酰胺、N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-2-甲基-3硝基苯甲酰胺、N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-2，6-二氟苯甲酰胺或N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-3，5-二（三氟甲基）苯甲酰胺。

本发明与现有技术相比具有如下优点：

本发明的N-（5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺及其盐在制备神经氨酸酶抑制剂中的应用。

具体实施方式

以下实施例旨在说明本发明而不是对本发明的进一步限定。

实施例1

N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-2，6-二氟苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol2，6-二氟苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-2，6-二氟苯甲酰胺，收率78.1%，m.p.133～135℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.32（s，9H，3×CH3），4.29（s，2H，CH2），7.00～7.51（m，6H，2×C6H3），9.40（br，1H，NHCO）。

实施例2

N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-2-氯苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol2-氯苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-2-氯苯甲酰胺，收率78.3%，m.p.148～150℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.34（s，9H，3×CH3），4.30（s，2H，CH2），7.08（d，J=8.4Hz，1H，C6H36-H），7.18（dd，J=8.4Hz，J=2.0Hz，1H，C6H35-H），7.39～7.81（m，5H，ClC6H33-H，C6H4），9.50（br，1H，NHCO）。

实施例3

N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-4-氯苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol4-氯苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-4-氯苯甲酰胺，收率74.5%，m.p.137～140℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.36（s，9H，3×CH3），4.29（s，2H，CH2），7.06（d，J=8.4Hz，1H，C6H36-H），7.18（dd，J=8.4Hz，J=2.4Hz，1H，C6H35-H），7.41（d，J=2.4Hz，1H，C6H33-H），7.49（d，J=8.8Hz，2H，C6H43,5-H），7.89（d，，J=8.8Hz，2H，C6H42,6-H），9.57（br，1H，NHCO）。

实施例4

N-[4-叔丁基-5-（2-氯苄基）噻唑-2-基]-2-甲基-3-硝基苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（2-氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol2-甲基-3-硝基苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（2-二氯苄基）噻唑-2-基]-2-甲基-3-硝基苯甲酰胺，收率26.7%，m.p.176～178℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.38（s，9H，3×CH3），2.59（s，3H，CH3），4.36（s，2H，CH2），7.16～7.94（m,7H，C6H3，C6H4）。

实施例5

N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-3,5-二硝基苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol3，5-二硝基苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-3,5-二硝基苯甲酰胺，收率61.5%，m.p.93～95℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.47（s，9H，3×CH3），4.20（s，2H，CH2），7.16（d，J=8.4Hz，2H，C6H42,6-H），7.31（d，J=8.4Hz，2H，C6H43,5-H），9.15（d，J=2.0Hz，1H，C6H34-H），9.31（d，J=2.0Hz，2H，C6H32,6-H）。

实施例6

N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-4-硝基苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol4-硝基苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-4-硝基苯甲酰胺，收率58.6%，m.p.184～185℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.37（s，9H，3×CH3），4.24（s，2H，CH2），7.15（d，J=8.4Hz，2H，C6H4Cl2,6-H），7.28（d，J=8.4Hz，2H，C6H4Cl3,5-H），8.13（d，J=8.8Hz，2H，C6H4NO22,6-H），8.34（d，J=8.8Hz，2H，C6H4NO23,5-H），9.75（br，1H，NHCO）。

实施例7

N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2-（三氟甲基）苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol2-（三氟甲基）苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2-（三氟甲基）苯甲酰胺，收率66.2%，m.p.125～127℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.34（s，9H，3×CH3），4.23（s，2H，CH2），7.16（d，J=8.4Hz，2H，C6H4Cl2,6-H），7.28（d，J=8.4Hz，2H，C6H4Cl3,5-H），7.63～7.64（m，3H，C6H4CF33,4,5-H），7.77～7.79（m，1H，C6H4CF36-H），8.91（br，1H，NHCO）。

实施例8

N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-3，5-二（三氟甲基）苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol3，5-二（三氟甲基）苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmolN，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-3，5-二（三氟甲基）苯甲酰胺，收率72.6%，m.p.58～61℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.39（s，9H，3×CH3），4.22（s，2H，CH2），7.15（d，J=8.0Hz，2H，C6H42,6-H），7.29（d，J=8.0Hz，2H，C6H43,5-H），8.05（s，1H，C6H34-H），8.47（s，2H，C6H32,6-H），9.76（br，1H，NHCO）。

实施例9

N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2-甲基-3-硝基苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol2-硝基-3-甲基苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2-甲基-3-硝基苯甲酰胺，收率60.0%，m.p.157～158℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.37（s，9H，3×CH3），2.59（s，3H，CH3），4.25（s，2H，CH2），7.16（d，J=8.4Hz，2H，C6H42,6-H），7.29（d，J=8.4Hz，2H，C6H43,5-H），7.45（t，J=8.0Hz，1H，C6H35-H），7.72（d，J=8.0Hz，1H，C6H36-H），7.93（d，J=8.0Hz，1H，C6H34-H），9.06（br，1H，NHCO）。

实施例10

N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2，6-二氟苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol2，6-二氟苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2，6-二氟苯甲酰胺，收率84.1%，m.p.130～132℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.35（s，9H，3×CH3），4.24（s，2H，CH2），7.02～7.03（m，2H，C6H33,5-H），7.15（d，J=8.4Hz，2H，C6H42,6-H），7.28（d，J=8.4Hz，2H，C6H43,5-H），7.43～7.51（m，1H，C6H34-H），9.22（br，1H，NHCO）。

实施例11

N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2-甲氧基苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol2-甲氧基苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2-甲氧基苯甲酰胺，收率51.1%，m.p.142～143℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.38（s，9H，3×CH3），4.10（s，3H，OCH3），4.23（s，2H，CH2），7.05（d，J=8.0Hz，1H，CH3OC6H43-H），7.10～7.14（m，3H，C6H4Cl2,6-H，CH3OC6H45-H），7.26（d，J=8.4Hz，2H，C6H4Cl3,5-H），7.10～7.56（m，1H，CH3OC6H44-H），8.25（dd，J=8.0Hz，J=2.0Hz，1H，CH3OC6H46-H），10.82（br，1H，NHCO）。

实施例12

N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2-氯苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol2-氯苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2-氯苯甲酰胺，收率55.3%，m.p.105～107℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.34（s，9H，3×CH3），4.24（s，2H，CH2），7.15（d，J=8.4Hz，2H，C6H42,6-H），7.27（d，J=8.4Hz，2H，C6H43,5-H），7.35～7.48（m，3H，C6H44,5,6-H），7.79（d，J=8.8Hz，1H，C6H43-H），9.47（br，1H，NHCO）。

实施例13

N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-4-氯苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol4-氯苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-4-氯苯甲酰胺，收率79.7%，m.p.115～117℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.36（s，9H，3×CH3），4.24（s，2H，CH2），7.14（d，J=8.0Hz，2H，C6H42,6-H），7.27（d，J=8.0Hz，2H，C6H43,5-H），7.48（d，J=8.8Hz，2H，COC6H43,5-H），7.88（d，J=8.8Hz，2H，COC6H42,6-H），9.49（br，1H，NHCO）。

实施例14

N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2，6-二氯苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol2，6-二氯苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-2，6-二氯苯甲酰胺，收率64.1%，m.p.173～176℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.33（s，9H，3×CH3），4.23（s，2H，CH2），7.16（d，J=8.4Hz，2H，C6H42,6-H），7.29（d，J=8.4Hz，2H，C6H43,5-H），7.32～7.37（m，3H，C6H3），9.13（br，1H，NHCO）。

实施例15

N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-3，5-二硝基苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol3，5-二硝基苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmolN，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-3，5-二硝基苯甲酰胺，收率63.1%，m.p.165～167℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.46（s，9H，3×CH3），4.26（s，2H，CH2），7.12（d，J=8.4Hz，1H，2,4-diClC6H36-H），7.24（dd，J=8.4Hz，J=2.0Hz，1H，2,4-diClC6H35-H），7.44（d，J=2.0Hz，1H，2,4-diClC6H33-H），9.16（t，J=2.4Hz，1H，C6H34-H），9.30（d，J=2.4Hz，2H，C6H32,6-H）。

实施例16

N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-4-硝基苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol4-硝基苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-4-硝基苯甲酰胺，收率73.1%，m.p.100～101℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.38（s，9H，3×CH3），4.30（s，2H，CH2），7.07（d，J=8.0Hz，1H，C6H36-H），7.20（dd，J=8.0Hz，J=2.0Hz，1H，C6H35-H），7.42（d，J=2.0Hz，1H，C6H33-H），8.15（d，J=8.8Hz，2H，C6H42,6-H），8.37（d，J=8.8Hz，2H，C6H43,5-H），9.86（br，1H，NHCO）。

实施例17

N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-2-（三氟甲基）苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol2-（三氟甲基）苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmolN，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-2-（三氟甲基）苯甲酰胺，收率73.1%，m.p.130～133℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.32（s，9H，3×CH3），4.29（s，2H，CH2），7.09（d，J=8.4Hz，1H，C6H36-H），7.21（dd，J=8.4Hz，J=2.0Hz，1H，C6H35-H），7.42（d，J=2.0Hz，1H，C6H33-H），7.61～7.80（m，4H，C6H4），9.24（br，1H，NHCO）。

实施例18

N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-3，5-二（三氟甲基）苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol3，5-二（三氟甲基）苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-3，5-二（三氟甲基）苯甲酰胺，收率78.4%，m.p.110～111℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.42（s，9H，3×CH3），4.29（s，2H，CH2），7.08（d，J=8.4Hz，1H，2,4-diClC6H36-H），7.21（dd，J=8.4Hz，J=2.4Hz，1H，2,4-diClC6H35-H），7.43（d，J=2.4Hz，1H，2,4-diClC6H33-H），8.07（s，1H，C6H34-H），8.48（s，2H，C6H32,6-H），9.85（br，1H，NHCO）。

实施例19

N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-2-甲基-3-硝基苯甲酰胺的制备

1.5mmol4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-胺、1.6mmol2-甲基-3-硝基苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmolN，N′-二环己基碳二亚胺，TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-2-甲基-3-硝基苯甲酰胺，收率73.7%，m.p.181～182℃。1H NMR（CDCl3，400MHz），δ：1.34（s，9H，3×CH3），2.60（s，3H，CH3），4.31（s，2H，CH2），7.08（d，J=8.0Hz，1H，2,4-diClC6H36-H），7.21（dd，J=8.0Hz，J=2.0Hz，1H，2,4-diClC6H35-H），7.43～7.94（m，4H，2,4-diClC6H33-H，C6H3），9.13（br，1H，NHCO）。

实施例20

N-（5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺及其盐的抗神经氨酸酶活性

1.实验原理

化合物MUNANA是神经氨酸酶NA的特异性底物，在神经氨酸酶作用下产生的代谢产物在360nm照射激发下，可以产生450nm荧光，荧光强度的变化可以灵敏地反应神经氨酸酶活性。酶都来自A/PR/8/34（H1N1）病毒毒株。

2.实验方法

在酶反应体系中，一定浓度样品与流感病毒NA浮于反应缓冲液中（pH6.5），加入荧光底物MUNANA启动反应体系，37℃孵育40分钟后,加反应终止液终止反应。在激发波长360nm和发射波长为450nm的参数条件下，测定荧光强度值。反应体系的荧光强度可以反映酶的活性。根据荧光强度的减少量可以计算化合物对NA活性的抑制率。

3.检测样品：N-（5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺

4.活性结果

优选化合物在反应系统中检测浓度40.0μg/mL时对神经氨酸酶的抑制率列入表1：

表1N-（5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺对神经氨酸酶抑制活性

N-（5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺抑制率/% N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-3，5-二硝基苯甲酰胺 33.54 N-[4-叔丁基-5-（4-氯苄基）噻唑-2-基]-4-硝基苯甲酰胺 45.56 N-[4-叔丁基-5-（2，4-二氯苄基）噻唑-2-基]-4-硝基苯甲酰胺 36.94

活性测试结果显示，N-（5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺具有良好的抗神经氨酸酶活性，可用于制备神经氨酸酶抑制剂。

资源描述

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201410009342.X (22)申请日 2014.01.09 (65)同一申请的已公布的文献号申请公布号 CN 104771397 A (43)申请公布日 2015.07.15 (73)专利权人湖南大学地址 410082 湖南省长沙市岳麓区麓山南路1号 (72)发明人胡艾希伍智林申坤彭俊梅刘艾琳连雯雯 (51)Int.Cl. A61K 31/426(2006.01) A61P 31/16(2006.01) C07D 277/46(2006.01) (56)对。

2、比文件 CN 103333132 A,2013.10.02, 刘瑜.新型流感病毒神经氨酸酶抑制剂的设计、合成与初步活性研究. 中国博士学位论文全文数据库医药卫生科技辑 .2011,第112-120 页. 严汉英.稳定性同位素及其在药物代谢和临床药理学方面的应用. 铁道医学 .1984,第12卷 (第4期),第248-251页. 审查员曹寅秋 (54)发明名称 N- （5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺及其医药用途 (57)摘要本发明涉及化学结构式I所示的N- （5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺在制备神经氨酸酶抑制剂中的应用：其中R 选自： C1C2烷基、 C3C4直链或支链烷。

3、基； Y1选自：氢、氘、甲基、乙基、氟、氯、溴； Y2、 Y4选自：氢、氘、甲基、乙基、氟、氯、溴； Y3选自：氢、氘、甲基、乙基、氟、氯、溴； R1、 R5选自：氢、氘、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴、硝基、三氟甲基或三氟甲氧基； R2、 R4选自：氢、氘、甲基、乙基、羟基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴、硝基、三氟甲基或三氟甲氧基； R3选自：氢、氘、甲基、乙基、羟基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴、硝基、三氟甲基或三氟甲氧基。权利要求书1页说明书7页 CN 104。

4、771397 B 2017.03.08 CN 104771397 B 1.化学结构式I所示的N-(5-苄基噻唑-2-基)苯甲酰胺或其盐在制备神经氨酸酶抑制剂中的应用：其中R选自： C1C2烷基、 C3C4直链或支链烷基； Y1选自：氢、甲基、乙基、氟、氯、溴； Y2、 Y4 选自：氢、甲基、乙基； Y3选自：氟、氯、溴； R1、 R5选自：氢、甲基、乙基； R2R4选自：氢、甲基、乙基或硝基；盐选自：盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐。 2.权利要求1所述的应用，其中式I所示的N-(5-苄基噻唑-2-基。

5、)苯甲酰胺选择N-4-叔丁基-5-(4-氯苄基)噻唑-2-基-3， 5-二硝基苯甲酰胺、 N-4-叔丁基-5-(4-氯苄基)噻唑- 2-基-4-硝基苯甲酰胺或N-4-叔丁基-5-(2， 4-二氯苄基)噻唑-2-基-4-硝基苯甲酰胺。权利要求书 1/1 页 2 CN 104771397 B 2 N- （5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺及其医药用途技术领域 0001 本发明涉及化合物的新应用，具体是N- （5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺在制备神经氨酸酶抑制剂中的应用。背景技术 0002 流感病毒表面有两种糖蛋白：血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）。由于NA在流感病。

6、毒的变异过程中具有相对保守性，使其成为设计、合成抗流感药物非常好的靶标。 NA是一种蘑菇云状的包膜糖蛋白，由453466个氨基酸组成，其结构分头部和颈部，头部含酶，具抗原性，颈部有疏水区，使之易于插入双层脂质膜中。 NA可催化裂解宿主细胞表面糖蛋白末端的 N-乙酰氨基神经氨酸酶，释放出成熟的流感病毒体，并阻止新病毒体的聚集。此外， NA通过改变表面糖蛋白HA的碳水化合物部分，增强毒性，促进病毒从受感染的宿主细胞中释放，引起或加重流感症状。因此， NA抑制剂可通过抑制NA活性来抑制流感病毒复制和毒性。 0003 人感染禽流感，是由禽流感病毒引起的人类疾病。

7、。流感病毒一般可分为A型、 B型和 C型，其中A型即通常所说的禽流感，对人及多种动物有致病力。 A型流感病毒的抗原变异性最强，常根据HA和NA抗原性的不同将其分为16个HA亚型（H1H16）和9个NA亚型（N1N9）。至今发现能直接感染人的禽流感病毒亚型有： H5N1、 H7N1、 H7N2、 H7N3、 H7N7、 H9N2和H7N9亚型。其中，高致病性H5N1亚型于1997年在香港首次发现能直接感染人类，自2003年7月以来，该病情呈现前所未有的暴发，波及亚洲、北美洲、欧洲和非洲17个国家和地区，造成数百人感染及死亡，直接经济损失高达100亿美元。

8、。 2003年3月，荷兰发生H7N7型禽流感并波及整个欧洲，人类感染者达83例，不仅造成了人类的伤亡，同时重创了家禽养殖业。 2009年3月底，墨西哥暴发人感染H1N1型猪流感疫情并扩散到世界各地，据世界卫生组织于2010年2月26日发布的甲型 H1N1流感全球情况报告，至少有213个国家和地区的16226例病人死于这场大流感。经过基因序列分析， H1N1型病毒包含人流感病毒、北美禽流感病毒和北美、欧、亚猪流感病毒基因片段，为几种不同物种流感病毒的混合毒株，而非单独一种猪流感或禽流感病毒。 2013年3月，我国首次发现人感染H7N9禽流感病例，截止2013。

9、年12月26日，世界卫生组织公布的H7N9禽流感确诊148人，死亡43人。 0004 神经氨酸酶（NA）抑制剂是抗A型流感病毒的第一线药物。神经氨酸酶（NA）抑制剂有Zanamivir、 Oseltamivir和Peramivir等类型化合物，其中Oseltamivir应用广泛。但研究已发现一些病毒株对Oseltamivir产生了耐药性，因此迫切需要研究新型抗A型流感病毒药。中国专利描述了噻嗪类和鱼藤环丙酰胺作为抗流感病毒神经氨酸酶抑制剂的应用：（1） 4-叔丁基-6-苯基-2-氨基-6H-1,3-噻嗪盐的制备方法与医药用途， ZL200910043678.7，。

10、2010.8.18授权；（2） 4-烷基-6-芳基-2-酰氨基-1,3-噻嗪-5-甲酸酯及其制备方法与应用， ZL201010225483.7， 2012.3.14授权；（3） 4-烷基-6-芳基-5-乙酰基-1,3-噻嗪作为制备神经氨酸酶抑制剂的应用， ZL201110077574.5， 2013.2.27授权；（4）鱼藤环丙酰胺及其制备方法与应用， ZL201110226848.2， 2013.3.20授权。说明书 1/7 页 3 CN 104771397 B 3 发明内容 0005 本发明的目的在于提供化学结构式I所示的N- （5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺或其盐在制备神。

11、经氨酸酶抑制剂中的应用： 0006 0007 其中R选自： C1C2烷基、 C3C4直链或支链烷基； Y1选自：氢、氘、甲基、乙基、氟、氯、溴； Y2、 Y4选自：氢、氘、甲基、乙基、氟、氯、溴； Y3选自：氢、氘、甲基、乙基、氟、氯、溴； R1、 R5选自：氢、氘、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴、硝基、三氟甲基或三氟甲氧基； R2、 R4选自：氢、氘、甲基、乙基、羟基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴、硝基、三氟甲基或三氟甲氧基； R3选自：氢、氘、甲基、乙基、羟基、甲氧基、乙氧基、氟。

12、、氯、溴、硝基、三氟甲基或三氟甲氧基；盐选自：盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐。 0008 本发明的目的在于提供的N- （5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺选自： N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-3， 5-二硝基苯甲酰胺、 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-4- 硝基苯甲酰胺、 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-2- （三氟甲基）苯甲酰胺、 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-3， 5-二（三氟甲基）苯甲酰胺、 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-。

13、基-2-甲基-3硝基苯甲酰胺、 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-2， 6-二氟苯甲酰胺、 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-2-甲氧基苯甲酰胺、 N-4-叔丁基-5- （4- 氯苄基）噻唑-2-基-2-氯苯甲酰胺、 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-4-氯苯甲酰胺、 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-2， 6-二氯苯甲酰胺、 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基乙酰胺、 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基丙酰胺、 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-2-氯乙酰胺、 N。

14、-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-2-氯丙酰胺、 N-4-叔丁基-5-1-(4-氯苯基)-2-硝基乙基噻唑-2-基-2-氯乙酰胺、 N-4-叔丁基- 5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基-4-氯苯甲酰胺、 N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2- 基-2-氯苯甲酰胺、 N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基-2- （三氟甲基）苯甲酰胺、 N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基-4-硝基苯甲酰胺、 N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基-3， 5-二硝基苯甲酰胺、 N-4-叔丁基-5- （2，。

15、 4-二氯苄基）噻唑-2-基-2- 甲基-3硝基苯甲酰胺、 N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基-2， 6-二氟苯甲酰胺或 N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基-3， 5-二（三氟甲基）苯甲酰胺。 0009 本发明与现有技术相比具有如下优点： 0010 本发明的N- （5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺及其盐在制备神经氨酸酶抑制剂中的应用。具体实施方式 0011 以下实施例旨在说明本发明而不是对本发明的进一步限定。说明书 2/7 页 4 CN 104771397 B 4 0012 实施例1 0013 N-4-叔丁基-5- （2， 4-二。

16、氯苄基）噻唑-2-基-2， 6-二氟苯甲酰胺的制备 0014 1.5mmol4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol2， 6-二氟苯甲酸和40mL 二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基- 2， 6-二氟苯甲酰胺，收率78.1%， m.p.133135。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），： 1.32 （s， 9H， 3 CH3）， 4.29 （s，。

17、2H， CH2）， 7.007.51 （m， 6H， 2C6H3）， 9.40 （br， 1H， NHCO）。 0015 实施例2 0016 N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基-2-氯苯甲酰胺的制备 0017 1.5mmol4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol2-氯苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基-2-氯苯甲酰胺，。

18、收率78.3%， m.p.148150。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），： 1.34 （s， 9H， 3CH3）， 4.30 （s， 2H， CH2）， 7.08 （d， J=8.4Hz， 1H， C6H36-H）， 7.18 （dd， J=8.4Hz， J=2.0Hz， 1H， C6H35-H）， 7.397.81 （m， 5H， ClC6H33-H， C6H4）， 9.50 （br， 1H， NHCO）。 0018 实施例3 0019 N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基-4-氯苯甲酰胺的制备 0020 1.5mmol4-叔丁基-5-。

19、（2， 4-二氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol4-氯苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基-4-氯苯甲酰胺，收率74.5%， m.p.137140。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），： 1.36 （s， 9H， 3CH3）， 4.29 （s， 2H， CH2）， 7.06 （d， J=8.4Hz， 1H， C6H36-H）， 7.18 （dd， J=。

20、8.4Hz， J=2.4Hz， 1H， C6H35-H）， 7.41 （d， J=2.4Hz， 1H， C6H33-H）， 7.49 （d， J=8.8Hz， 2H， C6H43,5-H）， 7.89 （d，， J=8.8Hz， 2H， C6H42,6-H）， 9.57 （br， 1H， NHCO）。 0021 实施例4 0022 N-4-叔丁基-5- （2-氯苄基）噻唑-2-基-2-甲基-3-硝基苯甲酰胺的制备 0023 1.5mmol4-叔丁基-5- （2-氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol2-甲基-3-硝基苯甲酸和 40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol。

21、4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （2-二氯苄基）噻唑-2- 基-2-甲基-3-硝基苯甲酰胺，收率26.7%， m.p.176178。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），： 1.38 （s， 9H， 3CH3）， 2.59 （s， 3H， CH3）， 4.36 （s， 2H， CH2）， 7.167.94 （m,7H， C6H3， C6H4）。 0024 实施例5 0025 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-3,5-二硝基苯甲酰胺的制。

22、备 0026 1.5mmol4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol3， 5-二硝基苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-3,5-二硝基苯甲酰胺，收率61.5%， m.p.9395。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），： 1.47 （s， 9H， 3CH3）， 4.20 （s， 2H， CH2）， 7.16 （d， J=8.4Hz， 2H， C6。

23、H42,6-H）， 7.31 （d， J=8.4Hz， 2H， C6H43,5-H）， 9.15 （d， J=2.0Hz， 1H， C6H34-H）， 9.31 （d， J=2.0Hz， 2H， C6H32,6-H）。说明书 3/7 页 5 CN 104771397 B 5 0027 实施例6 0028 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-4-硝基苯甲酰胺的制备 0029 1.5mmol4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol4-硝基苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6。

24、mmol N， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-4-硝基苯甲酰胺，收率58.6%， m.p.184185。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），： 1.37 （s， 9H， 3CH3）， 4.24 （s， 2H， CH2）， 7.15 （d， J=8.4Hz， 2H， C6H4Cl2,6-H）， 7.28 （d， J=8.4Hz， 2H， C6H4Cl3,5-H）， 8.13 （d， J= 8.8Hz， 2H， C6H4NO22,6-H）， 8.34 （d， J=8.8Hz， 2H。

25、， C6H4NO23,5-H）， 9.75 （br， 1H， NHCO）。 0030 实施例7 0031 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-2- （三氟甲基）苯甲酰胺的制备 0032 1.5mmol4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol2- （三氟甲基）苯甲酸和40mL 二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-2- （三氟甲基）苯甲酰胺，收率66.2%，。

26、m.p.125127。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），： 1.34 （s， 9H， 3 CH3）， 4.23 （s， 2H， CH2）， 7.16 （d， J=8.4Hz， 2H， C6H4Cl2,6-H）， 7.28 （d， J=8.4Hz， 2H， C6H4Cl3,5- H）， 7.637.64 （m， 3H， C6H4CF33,4,5-H）， 7.777.79 （m， 1H， C6H4CF36-H）， 8.91 （br， 1H， NHCO）。 0033 实施例8 0034 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-3， 5-二（三氟甲基）苯。

27、甲酰胺的制备 0035 1.5mmol4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol3， 5-二（三氟甲基）苯甲酸和 40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmolN， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基- 3， 5-二（三氟甲基）苯甲酰胺，收率72.6%， m.p.5861。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），： 1.39 （s， 9H， 3CH3）， 4.22 （s， 2H， CH2）， 7.15 （d。

28、， J=8.0Hz， 2H， C6H42,6-H）， 7.29 （d， J=8.0Hz， 2H， C6H43, 5-H）， 8.05 （s， 1H， C6H34-H）， 8.47 （s， 2H， C6H32,6-H）， 9.76 （br， 1H， NHCO）。 0036 实施例9 0037 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-2-甲基-3-硝基苯甲酰胺的制备 0038 1.5mmol4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol2-硝基-3-甲基苯甲酸和 40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.。

29、6mmol N， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基- 2-甲基-3-硝基苯甲酰胺，收率60.0%， m.p.157158。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），： 1.37 （s， 9H， 3CH3）， 2.59 （s， 3H， CH3）， 4.25 （s， 2H， CH2）， 7.16 （d， J=8.4Hz， 2H， C6H42,6-H）， 7.29 （d， J= 8.4Hz， 2H， C6H43,5-H）， 7.45 （t， J=8.0Hz， 1H， C6H35-H）， 7.7。

30、2 （d， J=8.0Hz， 1H， C6H36-H）， 7.93 （d， J=8.0Hz， 1H， C6H34-H）， 9.06 （br， 1H， NHCO）。 0039 实施例10 0040 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-2， 6-二氟苯甲酰胺的制备 0041 1.5mmol4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol2， 6-二氟苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （。

31、4-氯苄基）噻唑-2-基-2， 6-二氟说明书 4/7 页 6 CN 104771397 B 6 苯甲酰胺，收率84.1%， m.p.130132。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），： 1.35 （s， 9H， 3CH3）， 4.24 （s， 2H， CH2）， 7.027.03 （m， 2H， C6H33,5-H）， 7.15 （d， J=8.4Hz， 2H， C6H42,6-H）， 7.28 （d， J =8.4Hz， 2H， C6H43,5-H）， 7.437.51 （m， 1H， C6H34-H）， 9.22 （br， 1H， NHCO）。 0。

32、042 实施例11 0043 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-2-甲氧基苯甲酰胺的制备 0044 1.5mmol4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol2-甲氧基苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-2-甲氧基苯甲酰胺，收率51.1%， m.p.142143。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），： 1.38 （s， 9H， 3CH。

33、3）， 4.10 （s， 3H， OCH3）， 4.23 （s， 2H， CH2）， 7.05 （d， J=8.0Hz， 1H， CH3OC6H43-H）， 7.107.14 （m， 3H， C6H4Cl2,6-H， CH3OC6H45-H）， 7.26 （d， J=8.4Hz， 2H， C6H4Cl3,5-H）， 7.107.56 （m， 1H， CH3OC6H44-H）， 8.25 （dd， J=8.0Hz， J=2.0Hz， 1H， CH3OC6H46-H）， 10.82 （br， 1H， NHCO）。 0045 实施例12 0046 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基。

34、）噻唑-2-基-2-氯苯甲酰胺的制备 0047 1.5mmol4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol2-氯苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-2-氯苯甲酰胺，收率55.3%， m.p.105107。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），： 1.34 （s， 9H， 3CH3）， 4.24 （s， 2H， CH2）， 7.15 （d， J=8.。

35、4Hz， 2H， C6H42,6-H）， 7.27 （d， J=8.4Hz， 2H， C6H43,5-H）， 7.357.48 （m， 3H， C6H44,5,6-H）， 7.79 （d， J=8.8Hz， 1H， C6H43-H）， 9.47 （br， 1H， NHCO）。 0048 实施例13 0049 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-4-氯苯甲酰胺的制备 0050 1.5mmol4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol4-氯苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mm。

36、ol N， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-4-氯苯甲酰胺，收率79.7%， m.p.115117。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），： 1.36 （s， 9H， 3CH3）， 4.24 （s， 2H， CH2）， 7.14 （d， J=8.0Hz， 2H， C6H42,6-H）， 7.27 （d， J=8.0Hz， 2H， C6H43,5-H）， 7.48 （d， J= 8.8Hz， 2H， COC6H43,5-H）， 7.88 （d， J=8.8Hz， 2H， COC6H4。

37、2,6-H）， 9.49 （br， 1H， NHCO）。 0051 实施例14 0052 N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-2， 6-二氯苯甲酰胺的制备 0053 1.5mmol4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol2， 6-二氯苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （4-氯苄基）噻唑-2-基-2， 6-二氯苯甲酰胺，收率64.1%， m.p.173176。 1H NM。

38、R （CDCl3， 400MHz），： 1.33 （s， 9H， 3CH3）， 4.23 （s， 2H， CH2）， 7.16 （d， J=8.4Hz， 2H， C6H42,6-H）， 7.29 （d， J=8.4Hz， 2H， C6H43,5-H）， 7.32 7.37 （m， 3H， C6H3）， 9.13 （br， 1H， NHCO）。 0054 实施例15 0055 N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基-3， 5-二硝基苯甲酰胺的制备 0056 1.5mmol4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol3， 5-二硝基苯。

39、甲酸和说明书 5/7 页 7 CN 104771397 B 7 40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmolN， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2- 基-3， 5-二硝基苯甲酰胺，收率63.1%， m.p.165167。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），： 1.46 （s， 9H， 3CH3）， 4.26 （s， 2H， CH2）， 7.12 （d， J=8.4Hz， 1H， 2,4-diClC6H36-H）， 7。

40、.24 （dd， J=8.4Hz， J =2.0Hz， 1H， 2,4-diClC6H35-H）， 7.44 （d， J=2.0Hz， 1H， 2,4-diClC6H33-H）， 9.16 （t， J=2.4Hz， 1H， C6H34-H）， 9.30 （d， J=2.4Hz， 2H， C6H32,6-H）。 0057 实施例16 0058 N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基-4-硝基苯甲酰胺的制备 0059 1.5mmol4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol4-硝基苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmo。

41、l4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基-4- 硝基苯甲酰胺，收率73.1%， m.p.100101。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），： 1.38 （s， 9H， 3 CH3）， 4.30 （s， 2H， CH2）， 7.07 （d， J=8.0Hz， 1H， C6H36-H）， 7.20 （dd， J=8.0Hz， J=2.0Hz， 1H， C6H35-H）， 7.42 （d， J=2.0Hz， 1H， C6H33-。

42、H）， 8.15 （d， J=8.8Hz， 2H， C6H42,6-H）， 8.37 （d， J= 8.8Hz， 2H， C6H43,5-H）， 9.86 （br， 1H， NHCO）。 0060 实施例17 0061 N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基-2- （三氟甲基）苯甲酰胺的制备 0062 1.5mmol4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol2- （三氟甲基）苯甲酸和 40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmolN， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测。

43、反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2- 基-2- （三氟甲基）苯甲酰胺，收率73.1%， m.p.130133。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），： 1.32 （s， 9H， 3CH3）， 4.29 （s， 2H， CH2）， 7.09 （d， J=8.4Hz， 1H， C6H36-H）， 7.21 （dd， J=8.4Hz， J= 2.0Hz， 1H， C6H35-H）， 7.42 （d， J=2.0Hz， 1H， C6H33-H）， 7.617.80 （m， 4H， C6H4）， 9.24 （br， 1H， N。

44、HCO）。 0063 实施例18 0064 N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基-3， 5-二（三氟甲基）苯甲酰胺的制备 0065 1.5mmol4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol3， 5-二（三氟甲基）苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmol N， N -二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基-3， 5-二（三氟甲基）苯甲酰胺，收率78.4%， m.p.11011。

45、1。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），： 1.42 （s， 9H， 3CH3）， 4.29 （s， 2H， CH2）， 7.08 （d， J=8.4Hz， 1H， 2,4-diClC6H36-H）， 7.21 （dd， J=8.4Hz， J=2.4Hz， 1H， 2,4-diClC6H35-H）， 7.43 （d， J=2.4Hz， 1H， 2,4-diClC6H33- H）， 8.07 （s， 1H， C6H34-H）， 8.48 （s， 2H， C6H32,6-H）， 9.85 （br， 1H， NHCO）。 0066 实施例19 0067 N-4-叔丁基。

46、-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-基-2-甲基-3-硝基苯甲酰胺的制备 0068 1.5mmol4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑-2-胺、 1.6mmol2-甲基-3-硝基苯甲酸和40mL二氯甲烷，室温搅拌，加入0.15mmol4-二甲氨基吡啶，搅拌0.5h，加入1.6mmolN， N - 二环己基碳二亚胺， TLC监测反应。反应毕，过柱，得N-4-叔丁基-5- （2， 4-二氯苄基）噻唑- 2-基-2-甲基-3-硝基苯甲酰胺，收率73.7%， m.p.181182。 1H NMR （CDCl3， 400MHz），：说明书 6/7 页 8 C。

47、N 104771397 B 8 1.34 （s， 9H， 3CH3）， 2.60 （s， 3H， CH3）， 4.31 （s， 2H， CH2）， 7.08 （d， J=8.0Hz， 1H， 2,4- diClC6H36-H）， 7.21 （dd， J=8.0Hz， J=2.0Hz， 1H， 2,4-diClC6H35-H）， 7.437.94 （m， 4H， 2,4- diClC6H33-H， C6H3）， 9.13 （br， 1H， NHCO）。 0069 实施例20 0070 N- （5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺及其盐的抗神经氨酸酶活性 0071 1.实验原理 0072。

48、化合物MUNANA是神经氨酸酶NA的特异性底物，在神经氨酸酶作用下产生的代谢产物在360nm照射激发下，可以产生450nm荧光，荧光强度的变化可以灵敏地反应神经氨酸酶活性。酶都来自A/PR/8/34 （H1N1）病毒毒株。 0073 2.实验方法 0074 在酶反应体系中，一定浓度样品与流感病毒NA浮于反应缓冲液中（pH6.5），加入荧光底物MUNANA启动反应体系， 37孵育40分钟后,加反应终止液终止反应。在激发波长 360nm和发射波长为450nm的参数条件下，测定荧光强度值。反应体系的荧光强度可以反映酶的活性。根据荧光强度的减少量可以计算化合物对NA活性的抑制率。 0075 3.检测样品： N- （5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺 0076 4.活性结果 0077 优选化合物在反应系统中检测浓度40.0 g/mL时对神经氨酸酶的抑制率列入表1： 0078 表1N- （5-苄基噻唑-2-基）苯甲酰胺对神经氨酸酶抑制活性 0079 N- （5-苄基噻唑。

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