治疗心脑血管疾病的中药制剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明是一种治疗心脑血管疾病的中药制剂及其制备方法和应用，属于中 药的技术领域。
技术背景
据国家卫生部门调查统计，2004年，我国有260余万人死于心脑血管疾病， 平均每十二秒就有一人死亡，心脑血管疾病患者总数将近1.5亿，每年的防治 支出超过1000亿。而心脑血管疾病患者一般都有高脂血症、高血压、高血粘、 血栓、血管硬化、血管狭窄等。如果按照目前“一药一治、头痛医头、脚痛医 脚”的治疗方法，那么患者每天必须要吃“降脂药、降压药、降血粘药、扩张 血管药、溶栓药”等五、六种甚至十余种中、西药。为了达到更好的防治目的， 许多发明人及药品企业做了大量的研究，也提供了一些优秀的治疗产品；如： 本申请人申请的专利申请号为：200410022503、名称为“抗肿瘤及增强免疫力 的中药制剂及其制备方法”的专利申请，它用于治疗心脑血管方面的疾病有确 切的疗效；但是在深入研究中发现，采用有效部位配伍不仅能减少患者的服用 量，除去药材提取物中的一些毒副作用较强成分，提高了制剂的安全性和质量 的可控性，极大地提高疗效，而且更有利于制剂的成型，减少了成型过程中一 些不必要的工艺。
发明内容
本发明的目的在于：提供一种治疗心脑血管疾病的中药制剂及其制备方法 和应用；本发明针对现有技术，根据心脑血管疾病如冠心病、脑血栓、老年性 痴呆等均因血管窄缩、血流量减少等原因致使供血不足引发疾病的原理，在实 验筛选的基础上，采用人参总皂苷、黄芪总多糖、总皂苷配伍做成制剂，优选 出最佳的组方及工艺；得到的产品，特别是注射制剂产品能起到活血化淤、通 脉舒络、改善血循环和代谢作用。例如冠心病是冠状动脉粥样硬化导致心肌缺 血，缺氧而引起心脏病，两药合用，可起到改善心肌代谢作用、增加冠状动脉 血流，改善心肌的血供以缓解心绞痛的作用。本发明对于治疗心脑血管疾病如 冠心病、心绞痛、心律失常、脑血栓、老年性痴呆等有较好的疗效。而且本发 明为纯中药制剂，其不良反应小、可供病人长期使用。
本发明是这样构成的：按照重量百分比计算，它是由人参总皂苷1～99％和 黄芪总多糖、总皂苷99～1％和适当的辅料制作而成。优选为：按照重量百分比 计算，它是由人参总皂苷80～20％和黄芪总多糖、总皂苷20～80％和适当的辅 料制作而成。准确的说：按照重量百分比计算，它是由人参总皂苷40～60％、 黄芪总多糖、总皂苷60～40％和适当的辅料制作而成。所述组方中的人参总皂 苷可以是人参醇提取物、人参水提取物、人参水提醇沉提取物、人参半仿生提 取物、人参超临界萃取物或者以上各提取物的精制品；黄芪总多糖、总皂苷可 以是黄芪醇提取物、黄芪水提取物、黄芪水提醇沉提取物、黄芪半仿生提取物、 黄芪超临界萃取物或者以上各提取物的精制品。所述的制剂为直接用于注射给 药的注射液、直接供静脉滴注的静脉输液、需稀释后用于静脉滴注的注射用浓 溶液和用冷冻干燥法或喷雾干燥法制得的注射用无菌粉末和无菌块状物以及片 剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂、丸剂、软胶囊剂、口服液体制剂、口腔崩解片、 舌下片或分散片剂。所述的制剂可以在将人参总皂苷和黄芪总多糖、总皂苷中 的一种或两种制备成脂质体或前体脂质体的基础上制得。制剂中含有皂苷类成 分和多糖类成分，以重量百分比计算，制剂中皂苷类成分含量、多糖类成分含 量之和不低于制剂中扣除辅料量和水分量的总固体量的50％。按照重量百分比计 算，人参总皂苷中总皂苷的含量不低于50％，黄芪总多糖中总多糖的含量不低 于50％，黄芪总皂苷中总皂苷的含量不低于50％。
所述的药物有效部位是市售的或采用如下方法制备的：
A、黄芪总多糖有效部位是这样制备的：取黄芪药材，粉碎后加入水或乙醇 溶液提取，合并提取液，过滤，浓缩得黄芪粗提物，在此基础上采用乙醇沉淀 法、柱层析法、萃取法、絮凝沉淀法中的一种或几种联合使用进行适当精制， 得黄芪总多糖有效部位；
B、人参总皂苷有效部位是这样制备的：取人参药材，粉碎后加入水或乙醇 溶液提取，合并提取液，过滤，浓缩得人参总皂苷粗提物，或在此基础上采用 乙醇沉淀法、柱层析法、萃取法、絮凝沉淀法中的一种或几种联合使用进行适 当精制，得人参总皂苷有效部位；
C、黄芪总皂苷有效部位是这样制备的：取黄芪药材，粉碎后加入水或乙醇 溶液提取，合并提取液，过滤，浓缩得黄芪粗提物，在此基础上采用乙醇沉淀 法、柱层析法、萃取法、絮凝沉淀法中的一种或几种联合使用进行适当精制， 得黄芪总皂苷有效部位。
所述制剂中的注射用无菌块状物这样制备：取人参总皂苷、黄芪总多糖、 总皂苷，按药物与辅料用量比1∶2.0加入甘露醇，加1800ml注射用水，搅拌 使溶解，用饱和氢氧化钠溶液调pH值至6.5～7.0，加注射用水至2000ml，混 匀，加入0.5％的针用活性炭，煮沸30分钟，粗滤，再用0.45μm和0.22μm微 孔滤膜滤过，滤液分装，每瓶2.0ml，冷冻干燥，第一阶段的平衡冻结温度为0 ℃时的平衡时间为2.5小时，即搁板温度与产品温度基本一致的时间；第二阶 段冻结温度从0℃到最低共熔温度-19℃时，搁板温度与产品温度平衡时间为2.5 小时；第三阶段继续降温至-50℃，约需2.5小时，保持此温度2.5小时，直至 产品完全冻牢，即开始抽真空，进入干燥程序，在-50℃恒温下抽真空，缓慢升 温，2～4℃/h，至最低共熔点温度，时间约为12小时，升华干燥完成后，继续 在低压条件下，升温干燥以除去残余水分，时间约为11～12小时，保持35℃以 上干燥2.5小时，压盖，即得。
所述制剂中的前体脂质体这样制备：取人参总皂苷、黄芪总多糖、总皂苷， 加磷酸缓冲液溶解，加入豆磷脂、胆固醇和十八胺混匀的熔融液中，搅拌均匀， 超声处理，低温冷冻，得到的干粉过筛，即得。
所述的制剂用于制备治疗缺血性脑中风、冠心病心绞痛、心功能不全、中 风后遗症、肝肾综合症、心肺病、糖尿病及其并发症等疾病的药物。
与现有技术相比，本申请人进行过大量实验研究，筛选出治疗冠心病心绞 痛等疾病的处方为人参总皂苷、黄芪总多糖、总皂苷，最佳配伍范围为人参总 皂苷40～60％、黄芪总多糖、总皂苷60％～40％。采用本发明的工艺制备产品外 观良好、质量稳定。
为证明本发明提供的药物具有有效的效果，申请人进行了一系列实验；
实验例1：对不同配比药效学比较研究
我们通过抗血小板聚集试验、抑制小鼠尾血栓形成试验，对不同比例的处 方进行了系统的筛选试验，结果如下：
组方研究结论 配方 编号 处方组成及比例 筛选评价指标 黄芪总多糖、总皂苷∶人参总皂苷 血小板抑制率(％) 血栓形成抑制率(％) 1 2 3 4 5 6 7 8 模型组 1∶99 20∶80 40∶60 60∶40 80∶20 99∶1 阳性对照组 0.26％ 43.2％ 48.7％ 57.5％ 58.2％ 49.9％ 45.8 57.3％ -0.16％ 21.2％ 32.1％ 38.6％ 39.3％ 32.8％ 23.4％ 38.7％
由实验结果可知，人参总皂苷、黄芪总多糖、总皂苷最佳配伍范围为人参 总皂苷60～40％与黄芪总多糖、总皂苷40～60％。
实验例2：注射剂成型工艺研究
2.1填充剂种类及用量的选择
本申请人在研制中发现，适当的填充剂、填充剂用量是粉针制剂成型和稳 定的重要因素，为了提高该粉针制剂的质量，首先，本申请人对填充剂的种类 和用量进行了考察。结果见下表。
不同填充剂种类和用量对冻干效果的影响
填充剂 药物∶填充剂 颜色 成型性 水溶性 澄明度 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 甘露醇 甘露醇 甘露醇 乳糖 乳糖 乳糖 1∶1.5 1∶2.0 1∶2.5 1∶1.5 1∶2.0 1∶2.5 1∶1.5 1∶2.0 1∶2.5 - - - 黄色 黄色 淡黄色 - - - 不成型 不成型 不成型 差 好 好 不成型 不成型 不成型 - - - 好 好 好 - - - - - - 差 好 差 - - -
可见，由于甘露醇的共熔点高，水溶性好，利于本品的冻干和成型，而其 他的填充剂均不适合本品，且当药物∶甘露醇＝1∶2.0时，产品成型效果最好， 故确定药物∶甘露醇＝1∶2.0。
实验例3：制剂药效学实验
对大鼠急性心肌缺血的保护作用：取SD大鼠，体重230～250g，雌雄各半， 随机分为模型组(每天给予等量生理盐水)、本发明口服液组(每天给药 60mg/kg)、本发明注射液组(每天给药60mg/kg)、本发明脂质体组(每天给 药60mg/kg)以及人参/黄芪60/40药材提取物配比注射液组(简称药材配伍组， 每天给药60mg/kg)，每组10只，连续7天，在末次给药后1h结扎大鼠冠状动 脉左前降支。于冠脉结扎3h后心室取血3ml，以3000×g的速度离心5min制备 血清，取血清，用超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒分别测定血清 中相应指标。摘取大鼠心脏排出心腔内积血，用生理盐水冲洗并用滤纸吸去水分， 剔除脂肪血管等非心肌组织，剪除心房和右心室，留下左心室称重，计算梗死区 (湿重)占左心室(湿重)百分比。结果见下表。
对大鼠冠脉结扎后心肌梗死范围及血清中SOD、MDA的影响
组别 心梗范围(％) SOD(NU/ml) MDA(nmol/ml) 模型组 本发明注射剂组 本发明口服液组 本发明脂质体组 药材配伍组 20.1±1.9 13.5±1.2 15.2±1.5 12.4±0.8 15.3±2.1 193.2±32.7 349.4±35.3 323.7±41.2 361.5±38.4 304.1±37.6 8.37±1.11 4.51±1.53 4.92±1.27 4.13±0.89 5.46±1.06
由实验结果可知，本发明药物制剂能明显提高冠脉结扎大鼠血清中SOD活 性，显著抑制了MDA的生成，并且明显减小心肌梗死区面积，脂质体注射液组 作用更强，本发明制剂的整体治疗效果明显好于药材配伍组。
具体的实施方式：
本发明的实施例1：人参总皂苷60g黄芪总多糖、总皂苷40g
取人参总皂苷、黄芪总多糖、总皂苷，按药物与辅料用量比1∶2.0加入甘 露醇，加1800ml注射用水，搅拌使溶解，用饱和氢氧化钠溶液调pH值至6.5～ 7.0，加注射用水至2000ml，混匀，加入0.5％的针用活性炭，煮沸30分钟，粗 滤，再用0.45μm和0.22μm微孔滤膜滤过，滤液分装，每瓶2.0ml，冷冻干燥， 第一阶段的平衡冻结温度为0℃时的平衡时间为2.5小时，即搁板温度与产品温 度基本一致的时间；第二阶段冻结温度从0℃到最低共熔温度-19℃时，搁板温 度与产品温度平衡时间为2.5小时；第三阶段继续降温至-50℃，约需2.5小时， 保持此温度2.5小时，直至产品完全冻牢，即开始抽真空，进入干燥程序，在 -50℃恒温下抽真空，缓慢升温，2～4℃/h，至最低共熔点温度，时间约为12 小时，升华干燥完成后，继续在低压条件下，升温干燥以除去残余水分，时间 约为11～12小时，保持35℃以上干燥2.5小时，压盖，即得注射用无菌块状物， 一次2支，一日1次，用250ml0.9％生理盐水溶解后使用。以重量百分比计算， 注射剂中皂苷类成分含量多糖类成分含量之和为制剂中扣除辅料量和水分量的 总固体量的83％。
其中，人参总皂苷是这样制备的：
取人参药材加10倍量60％乙醇回流提取三次，每次1小时，提取液减压浓 缩回收乙醇，浓缩液加4倍药材量水转溶，离心，上清液上AB-8柱吸附，水 洗至无色，10倍柱体积的70％乙醇洗至无色，70％乙醇洗脱液上D280柱，90％ 乙醇洗脱，收集5倍柱体积的流出液，洗脱液减压浓缩，真空干燥，即得人参 总皂苷。
黄芪有效部位是这样制备的：
黄芪药材，加8倍量90％乙醇，水浴回流提取3次，1h/次，合并提取液，减压回 收乙醇，浓缩液上AB-8型大孔吸附树脂，上样流速0.2ml/(cm2·min)，上样 完成后，用水洗至流出液无色，然后用30％乙醇除杂，洗至流出液无色后用70％ 乙醇洗脱7-15倍树脂体积，分段收集洗脱液，减压浓缩、干燥得到黄芪总皂苷； 醇提取后的黄芪药渣挥去乙醇后，加6倍量水，加热提取3次，2h/次。水提液减 压浓缩至1ml/克药材，冷藏过夜，离心后取上清液，与大孔树脂水洗液合并，加 95％乙醇使含量达80％以上，静置24h后，倾出上清液，离心，沉淀用适量丙酮洗涤 2次，置干燥器中干燥，干后研碎，制得黄芪多糖，将总皂苷与总多糖合并，即得。
本发明的实施例2：人参总皂苷60g黄芪总多糖、总皂苷40g
取人参总皂苷、黄芪总多糖、总皂苷，加入适量注射用水溶解，按体积加 入0.5％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，滤液加注射用水至规定 量，用饱和氢氧化钠溶液调pH值至6.5～7.0，煮沸，4℃冷藏过夜，粗滤、精 滤，加注射用水，分装到安剖瓶，封口灭菌，即得注射液和注射用浓溶液。
本发明的实施例3：人参总皂苷40g黄芪总多糖、总皂苷60g
取人参总皂苷、黄芪总多糖、总皂苷，加入适量注射用水溶解，按体积加 入0.5％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，滤液加注射用水至规定 量，用饱和氢氧化钠溶液调pH值至6.5～7.0，煮沸，4℃冷藏过夜，粗滤、精 滤，加注射用水，分装到安剖瓶，封口灭菌，即得注射液和注射用浓溶液。
本发明的实施例4：人参总皂苷40g黄芪总多糖、总皂苷60g
取人参总皂苷、黄芪总多糖、总皂苷，按药物与辅料用量比1∶2.0加入甘 露醇，加1800ml注射用水，搅拌使溶解，用饱和氢氧化钠溶液调pH值至6.5～ 7.0，加注射用水至2000ml，混匀，加入0.5％的针用活性炭，煮沸30分钟，粗 滤，再用0.45μm和0.22μm微孔滤膜滤过，滤液分装，每瓶2.0ml，冷冻干燥， 第一阶段的平衡冻结温度为0℃时的平衡时间为2.5小时，即搁板温度与产品温 度基本一致的时间；第二阶段冻结温度从0℃到最低共熔温度-19℃时，搁板温 度与产品温度平衡时间为2.5小时；第三阶段继续降温至-50℃，约需2.5小时， 保持此温度2.5小时，直至产品完全冻牢，即开始抽真空，进入干燥程序，在 -50℃恒温下抽真空，缓慢升温，2～4℃/h，至最低共熔点温度，时间约为12 小时，升华干燥完成后，继续在低压条件下，升温干燥以除去残余水分，时间 约为11～12小时，保持35℃以上干燥2.5小时，在无菌条件下分装到西林瓶中， 即得注射用无菌粉末。
本发明的实施例5：人参总皂苷50g黄芪总多糖、总皂苷50g
取人参总皂苷、黄芪总多糖、总皂苷，加入适量注射用水溶解，按体积加 入0.5％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，滤液加注射用水至规定 量，用饱和氢氧化钠溶液调pH值至6.5～7.0，煮沸，4℃冷藏过夜，粗滤、精 滤，加注射用水，分装到安剖瓶，封口灭菌，即得注射液和注射用浓溶液。
本发明的实施例6：人参总皂苷50g黄芪总多糖、总皂苷50g
取人参总皂苷、黄芪总多糖、总皂苷，按药物与辅料用量比1∶2.0加入甘 露醇，加1800ml注射用水，搅拌使溶解，用饱和氢氧化钠溶液调pH值至6.5～ 7.0，加注射用水至2000ml，混匀，加入0.5％的针用活性炭，煮沸30分钟，粗 滤，再用0.45μm和0.22μm微孔滤膜滤过，滤液分装，每瓶2.0ml，冷冻干燥， 第一阶段的平衡冻结温度为0℃时的平衡时间为2.5小时，即搁板温度与产品温 度基本一致的时间；第二阶段冻结温度从0℃到最低共熔温度-19℃时，搁板温 度与产品温度平衡时间为2.5小时；第三阶段继续降温至-50℃，约需2.5小时， 保持此温度2.5小时，直至产品完全冻牢，即开始抽真空，进入干燥程序，在 -50℃恒温下抽真空，缓慢升温，2～4℃/h，至最低共熔点温度，时间约为12 小时，升华干燥完成后，继续在低压条件下，升温干燥以除去残余水分，时间 约为11～12小时，保持35℃以上干燥2.5小时，在无菌条件下分装到西林瓶中， 即得注射用无菌粉末。
本发明的实施例7：人参总皂苷95g黄芪总多糖、总皂苷5g
取人参总皂苷、黄芪总多糖、总皂苷，混匀，加入适量注射用水溶解，按 体积加入0.5％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，滤液加注射用水 至规定量，用饱和氢氧化钠溶液调pH值至6.5～7.0，煮沸，4℃冷藏过夜，粗 滤、精滤，在进风温度为130℃，出风温度为60℃，气流速度为20m·s-1的条件 下喷雾干燥得粉末，分装，即得注射用无菌粉末。
本发明的实施例8：人参总皂苷5g黄芪总多糖、总皂苷95g
取人参总皂苷、黄芪总多糖、总皂苷，加入适量注射用水溶解，加入规定 量的葡萄糖或氯化钠，混合溶解后按体积加入0.5％的活性炭，煮沸，保持微沸 30min，稍冷滤过，滤液加注射用水至规定量，再用饱和氢氧化钠溶液调pH值 至6.5～7.0，煮沸，4℃冷藏过夜，粗滤、精滤，加注射用水，分装，灭菌即得 葡萄糖或氯化钠静脉输液。
本发明的实施例9：人参总皂苷80g黄芪总多糖、总皂苷20g
将人参总皂苷与黄芪总多糖、总皂苷混合均匀，加入6％的羧甲基淀粉钠和 1.1％山梨醇，压制成片，即得口崩片。
本发明的实施例10：人参总皂苷20g黄芪总多糖、总皂苷80g
将人参总皂苷与黄芪总多糖、总皂苷混合均匀，将与主药比例是1∶1.5的 泊洛沙姆置不锈钢容器内，加入提取物，混合均匀，加热至80-85℃，待全部熔 融后，70-75℃保温，机械高速搅拌15min至均匀，转移至贮液瓶中，70～75℃ 保温，调节滴液阀门，滴入30～35℃的煤油中，滴距5～6cm，滴速40～45滴/ 分，将形成的滴丸沥尽并擦除煤油，包装，即得滴丸剂。
其中，人参总皂苷是这样制备的：
取人参药材，加10倍量60％乙醇回流提取三次，每次1小时，提取液减压 浓缩回收乙醇，浓缩液加4倍药材量水转溶，离心，上清液上D101型大孔吸附 树脂，上样流速0.2ml/(cm2·min)，上样完成后用水洗除杂，水洗至流出液不 显molish反应，50％乙醇洗脱，洗脱流速为1ml/(cm2·min)，共收集10倍 树脂体积洗脱液，洗脱液减压浓缩，真空干燥，即得人参总皂苷。
黄芪有效部位是这样制备的：
黄芪药材，加8倍量90％乙醇，水浴回流提取3次，1h/次，合并提取液，减压回 收乙醇，浓缩液上AB-8型大孔吸附树脂，上样流速0.2ml/(cm2·min)，上样 完成后，用水洗至流出液无色，然后用30％乙醇除杂，洗至流出液无色后用70％ 乙醇洗脱3-6倍树脂体积，分段收集洗脱液，减压浓缩、干燥得到黄芪总皂苷； 醇提取后的黄芪药渣挥去乙醇后，加6倍量水，加热提取3次，2h/次。水提液减 压浓缩至1ml/克药材，冷藏过夜，离心后取上清液，加90％乙醇使含量达60％，静置 24h后，滤过，上清液与大孔树脂水洗液合并，减压浓缩至小体积，置干燥器中干 燥，干后研碎，制得黄芪多糖，将总皂苷与总多糖合并，即得。
本发明的实施例11：人参总皂苷99g黄芪总多糖、总皂苷1g
将人参总皂苷与黄芪总多糖、总皂苷混合均匀，按主药：辅料＝1∶1.5 的比例加入磷酸钙，按主药：辅料＝1.3∶1的比例加入预凝胶淀粉，以及 按主药：辅料＝3∶1的交聚维酮，混和均匀，用75％乙醇适量制软材，过 20目筛制颗粒，50℃干燥，取出，过30目筛整粒，加入适量滑石粉、微 粉硅胶，混和均匀，压片，即得分散片。
本发明的实施例12：人参总皂苷1g黄芪总多糖、总皂苷99g
将人参总皂苷与黄芪总多糖、总皂苷混合均匀，加入2倍量淀粉，0.6％的 乳糖，1.2％的微粉纤维素，用适量乙醇溶液制软材，制粒，70℃鼓风干燥，制 粒，整粒，即得颗粒剂。
本发明的实施例13：人参总皂苷70g黄芪总多糖、总皂苷30g
将人参总皂苷与黄芪总多糖、总皂苷混合均匀，加入等量的淀粉，混合均 匀，制粒，装胶囊，即得胶囊剂。
本发明的实施例14：人参总皂苷30g黄芪总多糖、总皂苷70g
将人参总皂苷与黄芪总多糖、总皂苷混合均匀，加入蒸馏水，反复滤过， 至滤液澄清为止。加蔗糖于滤液中，搅拌溶解后用脱脂棉滤过，自滤器上添加 蒸馏水适量，摇匀，即得糖浆剂。
本发明的实施例15：人参总皂苷60g黄芪总多糖、总皂苷40g
将人参总皂苷、黄芪总多糖、总皂苷混合均匀，溶于磷酸盐缓冲液(0.1M) 中备用，将一定比例的豆磷脂、胆固醇溶于十八胺溶液中，加入上述药物 的磷酸盐缓冲液溶液中，水浴式超声仪处理10min，得脂质体混悬液，磷酸 盐缓冲液定容，过滤除菌，无菌分装，即得脂质体注射液。
本发明的实施例16：人参总皂苷40g黄芪总多糖、总皂苷60g
将人参总皂苷、黄芪总多糖、总皂苷混合均匀，溶于磷酸盐缓冲液(0.1M) 中备用，将一定比例的豆磷脂、胆固醇溶于十八胺溶液中，加入上述药物 的磷酸盐缓冲液溶液中，水浴式超声仪处理8min，得脂质体混悬液，低温 冷冻干燥后，过180目筛，无菌分装，即得前体脂质体粉针剂。
以上实施例中的人参总皂苷、黄芪总多糖、总皂苷可以用市售的或按本发 明方法制得的人参总皂苷、黄芪总多糖、总皂苷，无论是醇提取物、水提取物、 水提醇沉提取物、半仿生提取物还是超临界萃取物等，但是，其中人参总皂苷 的总皂苷含量大于50％，黄芪总多糖的总多糖含量大于50％，黄芪总皂苷的总 皂苷含量大于50％，这样才能够保证产品的治疗效果。