体重增加促进剂.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201310312291.3

申请日:

20091214

公开号:

CN103432180A

公开日:

20131211

当前法律状态:

有效性:

失效

法律详情:

IPC分类号:

A61K36/22,A23K1/16,A61K31/19,A61P31/04

主分类号:

A61K36/22,A23K1/16,A61K31/19,A61P31/04

申请人:

出光兴产株式会社

发明人:

长岛协,望月正己,杉本康明

地址:

日本东京都千代田区丸之内3丁目1番1号

优先权:

2008-317425

专利代理机构:

上海市华诚律师事务所

代理人:

李晓

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内容摘要

一种体重增加促进剂。本发明提供特征为含有腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者同时含有槚如酸和腰果酚的、梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂。

权利要求书

1.腰果壳油、加热处理腰果壳油、腰果壳、槚如酸、腰果酚、腰果二酚或者槚如酸和腰果酚在促进畜禽的体重增加中的用途。

说明书

本申请是基于以下中国专利申请的分案申请:

原案申请日:2009年12月14日

原案申请号:200980150310.9(PCT/JP2009/070829)

原案申请名称:家畜的梭状芽孢杆菌属细菌引起的疾病的预防及/或治疗用饲料及抗 梭状芽孢杆菌剂

技术领域

本发明涉及含有腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或同时含有槚如酸和 腰果酚的由梭状芽孢杆菌属细菌引起的疾病的防治剂。

背景技术

家畜的感染症使家畜的体重减少或引起各种疾病等,显著降低其商品价值。例如,金 黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是牛、羊、山羊的乳房炎、皮下肿瘤、脓血症、马 的疹子、猪、鸡的关节炎、皮肤炎、败血症的病原菌。又,猪链球菌(Streptococcus suis) 是猪的脑膜炎、败血症、心内膜炎、关节炎的病原菌。

又,梭状芽孢杆菌属细菌中,尤以产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)通过感染 引发坏疽性肠炎等,成为肠毒血症、恶性水肿的原因。坏疽性肠炎的患病率、致死率都很 高,给养鸡、小型肉鸡、养猪、畜牧业带来的经济危害很大。所以,是家畜以及家禽的有 限的疾病中急需确立其防治对策的最重要的疾病之一。

坏疽性肠炎在疾病临床上表现为仔猪、雏鸡等的腹泻,以细菌侵入到肠粘膜、伴有小 肠的坏死为特征。肠毒血症是产气荚膜梭菌在动物小肠内繁殖、通过其产生的毒素引起坏 死性、出血性的病变、且由于毒血症招致急性死亡的一种疾病。恶性水肿是细菌侵入到因 偶发性或外科手术产生的创面中,其菌发芽、增殖后产生毒素,引起毒血症、菌血症,导 致死亡的疾病。

产气荚膜梭菌感染症虽然是重大的传染病,但是尚未确立预防·治疗方法。虽然适当 地进行饲养管理作为预防方法,但实际上预防是极其困难的。

目前为止,为了预防以及治疗本症,还进行了将抗生素或其他的抗菌剂和饲料一起同 时投与的方法。然而,近年来,尤其存在耐药菌的发生或抗生素等残留在食用肉的问题等, 认为给动物投与抗生素等并不恰当的形势正在高涨。因此,期待开发不使用抗生素等的本 病的预防及治疗方法和预防及治疗剂。

另一方面,已知有一种含有选自黄柏、龙胆草、厚朴、丹参、知母、大黄、丁香、女 贞子、荊芥、桂皮、玄参、决明子、枇杷叶、防风、啤酒花、紫苏叶、杨梅皮、连翘、芦 荟、牛舌、威灵仙、乌梅、延命草、车前草、辛夷、茵陈蒿、沉香、川芎、藁本、苦配巴、 山茱萸、紫根、胡黄连、芍药、金樱子、麝香草、白南天、地榆及麻黄的1种或2种以上 的生药的、家畜及家禽的产气荚膜梭菌感染症的预防及治疗剂(专利文献1)。此外,已知 特征为含有蒎烯、麝香草酚、丁香酚、柠檬烯、肉豆蔻、麝香草、丁香及柑橘的产气荚膜 梭菌感染症的预防及治疗剂(专利文献2)。

然而,这些技术都有效果不确定这样的问题,尚未达到实用化。

对腰果壳油及/或槚如酸,已知其有抗菌作用(非专利文献1)、减轻球虫病作用(专 利文献3)。此外,已有报告称腰果壳油及/或槚如酸对金黄色葡萄球菌、变形链球菌、枯 草杆菌、产氨短杆菌这样的革兰氏阳性菌有抗菌作用,对大肠杆菌、产气肠杆菌、绿脓杆 菌这样的革兰氏阴性菌及啤酒酵母菌、产朊假丝酵母菌、产黄青霉菌这样的真菌没有抗菌 作用(非专利文献2)。然而,关于腰果壳油及/或槚如酸对于梭状芽胞杆菌属细菌、尤其 对产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的抗菌作用不为人知,完全没有关于其对于坏 疽性肠炎、肠毒血症、恶性水肿的预防以及治疗效果的报告。

现有技术文献

专利文献

专利文献1:日本专利第2599161号公报

专利文献2:日本专利特开2008-110951号公报

专利文献3:日本专利特开平8-231410号公报

非专利文献1:Muroi,H.et al.Bioorganic&Medicinal Chemistry12,583-587(2004)

非特許文献2:Himejima M.and Kubo I.,J.Agric.Food Chem.,39,418-421(1991)

发明内容

本发明的课题在于防治家畜的重大传染病-产气荚膜梭菌感染症。

本发明人反复专心研究的结果,发现了腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果 酚或槚如酸和腰果酚的组合可以用于产气荚膜梭菌引起的疾病的防治,从而完成了本发 明。

即,本发明的要旨如下所述。

(1)梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂,其特征在于,含有:腰果壳油、加 热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者同时含有槚如酸和腰果酚。

(2)防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料组合物,其特征在于,含有:腰果 壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者同时含有槚如酸和腰果酚。

(3)防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料,其特征在于,含有:腰果壳油、 加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者同时含有槚如酸和腰果酚。

(4)防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料组合物,其特征在于,含有(1)记 载的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂。

(5)防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料,其特征在于,含有(4)记载的防 治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料组合物。

(6)梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治方法,其特征在于,向出现由梭状芽胞 杆菌属细菌引起的疾病的家畜投与腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者同 时投与槚如酸和腰果酚。

(7)腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合的 用途,用于制造由梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂。

(8)腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合的 用途,用于制造防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料组合物。

(9)腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合的 用途,用于制造防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料。

(10)一种畜禽用体重增加促进剂,含有腰果壳油及/或槚如酸。

(11)一种体重增加促进饲料,含有(10)记载的畜禽体重增加促进剂。

(12)饲养畜禽的方法,包括投与(10)记载的畜禽体重增加促进剂或(11)记载的 体重增加促进饲料。

(13)腰果壳油及/或槚如酸在促进畜禽的体重增加中的用途。

含有本发明的防治剂和含有该防治剂的饲料通过投与给家畜,可以防治梭状芽胞杆菌 属细菌引起的疾病。

本发明的防治剂和含有该防治剂的饲料能够通过杀灭梭状芽胞杆菌属细菌改善肠内 环境来促进家畜的生长。

具体实施方式

本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂的特征是含有腰果壳油、加热处理 腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者同时含有槚如酸和腰果酚。还有,本发明中,防治是包括 预防和治疗的概念。

本发明中使用的腰果壳油是鸡腰果(Anacardium occidentaleL.)的果实的壳中含有的 油状液体。腰果壳油的成分包括槚如酸、腰果酚、腰果二酚。一般,槚如酸通过进行加热 处理转换为腰果酚,也可以是通过加热处理仅成为腰果酚、腰果二酚的腰果壳油。

如J.Agric.Food Chem.2001,49,2548-2551记载,通过压榨腰果的壳提取出的非加热 腰果壳油(以下称腰果壳油)含有55~80质量%的槚如酸、5~20质量%的腰果酚、5~30质 量%的腰果二酚。

将腰果壳油在130℃以上加热处理得到的加热处理腰果壳油中,腰果壳油的主成份槚 如酸的大部分脱碳酸变成腰果酚,成为含有0~10质量%的槚如酸、55~80质量%的腰果酚、 5~30质量%的腰果二酚的油。

本发明中使用的腰果壳油可以通过压榨腰果的壳提取出的植物油来得到。此外,本发 明中使用的腰果壳油也可以通过加热或提取如将腰果壳干馏或溶剂提取来得到。进而,本 发明中使用的腰果壳油也可以通过日本专利特开平8-231410号公报中记载的方法来得到。

本发明中使用的腰果壳油可以是不加热而将腰果壳粉碎·破碎而得到的油。此外,也可 以是壳本身。

本发明中使用的腰果壳油可以使用市售品。

本发明的腰果壳油可以是将如上所述地得到的腰果壳油加热为70℃以上、理想的是加 热为130℃以上而得到的腰果壳油。

本发明的腰果壳油可以是从腰果壳压榨提取、将其在130℃加热处理得到的油。

本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂也可以含有加热处理腰果壳油、槚 如酸、腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合来替代腰果壳油。

作为本发明中使用的槚如酸举例有天然物槚如酸、合成槚如酸、它们的衍生物。此外, 也可以使用市售的槚如酸。如日本专利特开平8-231410号公报中记载,可以通过用有机溶 剂对腰果壳提取处理,使用如硅胶柱色谱法改变正己烷、醋酸乙酯及醋酸的混合溶剂的比 率对得到的腰果油进行洗脱来得到槚如酸(日本专利特开平3-240721号公报、特开平 3-240716号公报等)。

作为本发明中使用的腰果酚举例有天然物腰果酚、合成腰果酚、它们的衍生物。此外, 作为本发明中使用的腰果酚可以通过对腰果壳油的主成分槚如酸进行脱碳酸来得到。

此外,使用加热处理腰果壳油时,加热腰果壳油中的槚如酸和腰果酚之间的质量比理 想的是0:100~20:80。

以所述防治剂的总量为基准,本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂中的 腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合的含量理想的 是1质量%~100质量%,更理想的是5质量%~95质量%,特别理想的是10质量%~90质 量%。如果在1质量%以上,就可以有效防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病。如果在5 质量%以上、特别理想的是在10质量%以上,其倾向变显著,比较理想。另一方面,即使 是100质量%也能防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病,为了改善动物的嗜好性,理想的 是95质量%以下,特别理想的是在90质量%以下。

本发明的防治剂可以用于防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病。

本发明中,梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病特别指感染产气荚膜梭菌而发病的疾病, 具体地举例有坏疽性肠炎、肠毒血症、恶性水肿,并不限定于这些。

本发明中含有的梭状芽胞杆菌属细菌举例有产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)、 破伤风杆菌(C.tetani)、肉毒梭菌(C.botulinum)、艰难梭菌(C.difficile)、热纤梭菌(C. thermocellum)、丁酸梭菌(C.butyricum)等,并不限定于此。

本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂除了含有腰果壳油、加热处理腰果 壳油、槚如酸、腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合之外,只要是乳糖、白糖、D-甘露醇、 淀粉、玉米淀粉、结晶纤维素、硅胶、轻质无水硅酸等的能够用于饲料或药品或食品的赋 形剂,即可含有任何种类。

此外,本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂除了含有腰果壳油、加热处 理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合之外,也可以进一步含有对促进 家畜以及家禽的生长有效的成分、营养辅助成分、提高保存稳定性的成分、包衣剂成分等 的任意成分。作为这样的任意成分,举例有饲料的原料或饲料添加物、食品原料或食品添 加物、药品原材料等。例如,肠球菌属细菌、芽孢杆菌属细菌、双歧杆菌、乳酸杆菌等的 活菌剂;淀粉酶、脂肪酶等的酶、L-抗坏血酸、氯化胆碱、肌醇、叶酸等的维生素;氯化 钾、柠檬酸铁、氧化镁、磷酸盐类等的矿物质、DL-丙氨酸、DL-蛋氨酸、L-赖氨酸等的氨 基酸;富马酸、丁酸、乳酸、乙酸等的有机酸以及它们的盐;乙氧基喹、二丁基羟基甲苯 等的抗氧化剂;丙酸钙等的防霉剂;羧甲基纤维素(CMC)、酪蛋白钠、聚丙烯酸钠等的 粘结剂;脂肪酸甘油酯、脱水山梨糖醇脂肪酸酯等的乳化剂;虾青素、角黄素等的色素; 各种酯、醚、酮类等的着香料。

本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂的剂型没有特别限制,举例有粉 剂、液剂、固体、片剂、胶囊、乳剂、颗粒剂、包衣剂等任意形态,理想的是粉剂、液剂、 胶囊、颗粒剂、包衣剂。

作为粉剂,也可以在腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者槚如酸和腰 果酚的组合中添加上述赋形剂,进行粉末化。

作为液剂,可以直接使用腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者槚如酸 和腰果酚的组合,也可以在乙醇等的溶剂中溶解腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、 腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合,或者也可以添加上述赋形剂或任意成分使用。

作为胶囊,可以将腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者槚如酸和腰果 酚的组合直接装入胶囊中,或者也可以添加上述赋形剂或任意成分。

作为颗粒剂,可以在腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者槚如酸和腰 果酚的组合中添加上述赋形剂,造粒,颗粒化。

作为包衣剂,可以在腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者槚如酸和腰 果酚的组合中添加上述赋形剂并造粒,用包衣剂等包衣。

如上所述,可以通过将腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者槚如酸和 腰果酚及根据需要的赋形剂或任意成分混合并进行制剂化来制造本发明的梭状芽胞杆菌 属细菌引起的疾病的防治剂。还有,根据制剂的形态,可以使前述的腰果壳的粉碎·破碎物 或没有经过任何处理的腰果壳直接与其他任意成分混合后作为本发明的防治剂。进而,可 以不混合其他成分而将粉碎·破碎物本身或腰果壳本身作为防治剂,也可以将所述防治剂本 身作为饲料用组合物或者饲料。此外,也可以使腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、 腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合溶解于乙醇等的溶剂中,使其混合吸收到饲料用组合物 或者饲料中。

本发明的饲料用组合物的特征是含有腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚 或者槚如酸和腰果酚的组合。本发明的饲料用组合物中的腰果壳油、加热处理腰果壳油、 槚如酸、腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合的含量,以总量为基准,理想的是0.0005质量 %~100质量%,更理想的是0.05质量%~95质量%,尤其理想的是1质量%~90质量%。0.0005 质量%以上的话,可以有效防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病。0.05质量%以上、尤其 理想的在1质量%以上的话,其倾向变显著,比较理想。另一方面,即使在100质量%也 可以防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病,但为了改善动物的嗜好性,理想的是在95质 量%以下,尤其理想的是90质量%以下。

将本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂用作饲料用组合物时,可以与用 于动物用补充剂(以下称补充剂)的其他补充剂成分混合做成补充剂。补充剂的种类或腰 果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合以外的成分没有 特别限定。

本发明的饲料的特征在于,含有腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者 槚如酸和腰果酚的组合。

此外,本发明的饲料中的腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者槚如酸 和腰果酚的组合的含量,每份饲料的干燥质量,以总量为基准,理想的是0.001~5质量%, 更理想的是0.01~2质量%,尤其理想的是0.1~1质量%。0.001质量%以上时,可以有效防 治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病。0.01质量%以上、尤其理想的是0.1质量%以上的话, 其倾向变显著,比较理想。另一方面,即使在5质量%也可以防治梭状芽胞杆菌属细菌引 起的疾病,但为了改善动物的嗜好性,理想的是在2质量%以下,尤其理想的是在1质量 %以下。

将腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合直接添 加到饲料成分中混合,或者将含有腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者槚 如酸和腰果酚的组合的饲料用组合物添加到饲料成分中并混合,可以制造本发明的饲料。 此时,使用粉末状、固体状的饲料用组合物时,为了容易混合,可以将饲料用组合物做成 液状或凝胶状的形态。此时,可以将水、植物油、液体动物油、矿物油、合成油、水溶性 高分子化合物等的流动性液体作为液体载体使用。此外,为了确保饲料中的腰果壳油、加 热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合的均一性,混合藻酸、藻酸 钠、苍耳烷胶、酪蛋白钠、阿拉伯胶、瓜尔胶、罗望子种子多糖类等的水溶性多糖类也比 较理想。

摄取本发明的饲料的家畜中除了牛、猪等的家畜外也包括鸡等的家禽。摄取的饲料的 量可以依据家畜的种类、体重、年龄、性别、健康状态、饲料的成分等适当调节。

摄取饲料的方法及饲养的方法可以根据家畜的种类采取通常使用的方法。

实施例

制造例

从カシュー·トレーディング(株)得到500kg腰果壳,压榨,从而制造了腰果壳油 158kg。此外,从カシュー·トレーディング(株)得到通过在130℃下加热处理将槚如酸 转换为腰果酚的加热处理腰果壳油(コールドプレスオイル(印度产))。

腰果壳油的组成用以下的方法测定。即,使用了HPLC(Waters600、日本ウォーター ズ(株))、检测器(Waters490E、日本ウォーターズ(株))、打印机(クロマトパックC -R6A、岛津制作所)、柱(SUPELCOSILLC18、SUPELCO社)。使用乙腈:水:醋酸为 80:20:1(容量比)的溶剂,流速为2ml/分钟。用280nm的吸光度检测。

腰果壳油中含有槚如酸61.8质量%、腰果酚8.2质量%、腰果二酚19.9质量%,加热 处理腰果壳油中含有槚如酸0.0质量%、腰果酚71.4质量%、腰果二酚14.4质量%。

实施例1

依据日本化学疗法学会标准法(1981)测定腰果壳油以及加热处理腰果壳油的最小发 育阻止浓度(MIC)。前培养使用感受性测定用肉汤培养基(日水制药(株)产品)培养, 对接种菌液用生理盐水调整至约105~106CFU/ml。测定培养基使用了感受性测定用培养基 (日水制药(株)产品)。厌氧培养产气荚膜梭菌,37℃下约20小时后测定。

结果在表1显示。

[表1]

腰果壳油的最小发育阻止浓度

菌株 最小发育阻止浓度(μg/ml) Clostridium perfringens W-1 6.25

加热处理腰果壳油的最小发育阻止浓度

菌株 最小发育阻止浓度(μg/ml) Clostridium perfringens W-1 12.5

可知腰果壳油和加热处理腰果壳油对产气荚膜梭菌具有很强的抗菌作用。

实施例2

1L的三角烧瓶中制作500mlGAM肉汤(日水制药(株)产品),高压锅灭菌后,分 别无菌性地投与腰果壳油和产气荚膜梭菌,使用37℃的恒温器在厌氧条件下缓慢搅拌培 养。在试验区,将腰果壳油1g溶解于10ml的二甲基甲酰胺中,将5ml添加到三角烧瓶中。 在对照区,仅将5ml二甲基甲酰胺添加到三角烧瓶中。产气荚膜梭菌的前培养刮取在CW 琼脂培养基(日水制药(株)产品)以厌氧条件37℃培养48小时的菌株,用灭菌生理盐 水悬浮之后,调整至最终浓度约为106CFU/ml。产气荚膜梭菌的菌数测定方法:无菌地采 集培养液,用灭菌生理盐水阶段性稀释10倍之后,将各稀释阶段的0.1ml涂布到CW琼脂 培养基(日水制药(株)产品)之后,厌氧条件下37℃、培养72小时,计数发育好的特 征性的菌落。

结果在表2显示。

[表2]

产气荚膜梭菌数测定结果

  试验第0天 试验第3天 试验第7天 对照区 1.1×106 8.6×106 4.2×106 腰果壳油、0.1% 1.1×106 <102 <102

在对照区通过试验期间确认了产气荚膜梭菌的细菌数,但腰果壳油添加区,在第3天 和第7天为检测限以下。可知腰果壳油对产气荚膜梭菌具有很强的抗菌作用。

实施例3

用来自日本ハイポー(株)第一ファーム事业所饲养的小型肉鸡种鸡(品种:チャン キー)的鸡蛋孵化的没有疫苗经历的雏鸡在实验鸡舍预饲养7天。一区为7只,分配时注 意在试验开始时体重上没有差异。腰果壳油和加热处理腰果壳油添加到0.5质量%饵中, 从预饲养结束后开始一直给予至试验结束时为止。关于饲料,将日本配合饲料(株)小型 肉鸡肥育前期用标准饲料(SDBNo1)提供给0~21天龄、将小型肉鸡肥育后期用标准饲料 (SDBNo2)提供给22~35天龄。于8天(试验开始时)、14天、21天、28天及35天龄 时测定体重。雏鸡饲养结束时,从各组分别随机选出5只,屠杀、开腹,取出盲肠内容物。 还有,取出的盲肠内容物分组存放用以检查。检体1g阶段性稀释10倍,每种稀释倍率各 0.1ml接种到5个培养基中。产气荚膜梭菌使用CW琼脂(日水制药(株)产品),在厌氧 条件下37℃、培养24小时,计数特征性的菌落。

平均体重示于表3。

[表3]

雏鸡平均体重测定结果(g)

  8天龄 14天龄 21天龄 28天龄 35天龄 对照区 143 333 619 1,080 1,736 腰果壳油 143 353 690 1,196 1,807 加热处理腰果壳油 143 337 690 1,106 1,786

饲料中添加0.5质量%的腰果壳油和加热处理腰果壳油的雏鸡与对照例相比体重增加 了。可知腰果壳油和加热处理腰果壳油有增重效果。

盲肠内容物中的产气荚膜梭菌数示于表4。

[表4]

雏鸡肠内细菌数测定结果(CFU/g)

  对照区 腰果壳油 加热处理腰果壳油 产气荚膜梭菌 3.6×104 2.3×103 4.0×102

饲料中添加0.5质量%的腰果壳油的雏鸡中,肠内的产气荚膜梭菌的菌数减少为对照 区的十分之一,再者,加热处理腰果壳油处理区中,肠内的产气荚膜梭菌的菌数减少为对 照区的百分之一。此结果与显示腰果壳油对产气荚膜梭菌具有杀菌作用的实施例1、2的 结果相一致。

产业上的利用可能性

根据本发明,提供产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的感染引起的坏疽性肠炎、 肠毒血症、恶性水肿的预防和/或治疗用饲料、以及抗梭状芽胞杆菌剂。

本发明的防治剂可以通过向由梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病而发病的家畜以及家 禽等的动物投与腰果壳油和加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组 合,从而防治由梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病。

本发明的防治剂能够通过杀灭梭状芽胞杆菌属细菌改善肠内环境来促进动物的生长。

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1、(10)申请公布号 CN 103432180 A (43)申请公布日 2013.12.11 CN 103432180 A *CN103432180A* (21)申请号 201310312291.3 (22)申请日 2009.12.14 2008-317425 2008.12.12 JP 200980150310.9 2009.12.14 A61K 36/22(2006.01) A23K 1/16(2006.01) A61K 31/19(2006.01) A61P 31/04(2006.01) (71)申请人 出光兴产株式会社 地址 日本东京都千代田区丸之内3丁目1番 1 号 (72)发明人 长。

2、岛协 望月正己 杉本康明 (74)专利代理机构 上海市华诚律师事务所 31210 代理人 李晓 (54) 发明名称 体重增加促进剂 (57) 摘要 一种体重增加促进剂。本发明提供特征为含 有腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚 或者同时含有槚如酸和腰果酚的、 梭状芽胞杆菌 属细菌引起的疾病的防治剂。 (30)优先权数据 (62)分案原申请数据 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 8 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书8页 (10)申请公布号 CN 103432180 A CN 103432180 A *CN1034。

3、32180A* 1/1 页 2 1. 腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 腰果壳、 槚如酸、 腰果酚、 腰果二酚或者槚如酸和腰果 酚在促进畜禽的体重增加中的用途。 权 利 要 求 书 CN 103432180 A 2 1/8 页 3 体重增加促进剂 0001 本申请是基于以下中国专利申请的分案申请 : 0002 原案申请日 : 2009 年 12 月 14 日 0003 原案申请号 : 200980150310.9(PCT/JP2009/070829) 0004 原案申请名称 : 家畜的梭状芽孢杆菌属细菌引起的疾病的预防及或治疗用饲料 及抗梭状芽孢杆菌剂 技术领域 0005 本发明涉及含有腰果壳油。

4、、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或同时含有槚如酸 和腰果酚的由梭状芽孢杆菌属细菌引起的疾病的防治剂。 背景技术 0006 家畜的感染症使家畜的体重减少或引起各种疾病等, 显著降低其商品价值。 例如, 金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus) 是牛、 羊、 山羊的乳房炎、 皮下肿瘤、 脓血症、 马 的疹子、 猪、 鸡的关节炎、 皮肤炎、 败血症的病原菌。又, 猪链球菌 (Streptococcus suis) 是 猪的脑膜炎、 败血症、 心内膜炎、 关节炎的病原菌。 0007 又, 梭状芽孢杆菌属细菌中, 尤以产气荚膜梭菌 (Clostridium perfring。

5、ens) 通过 感染引发坏疽性肠炎等, 成为肠毒血症、 恶性水肿的原因。坏疽性肠炎的患病率、 致死率都 很高, 给养鸡、 小型肉鸡、 养猪、 畜牧业带来的经济危害很大。所以, 是家畜以及家禽的有限 的疾病中急需确立其防治对策的最重要的疾病之一。 0008 坏疽性肠炎在疾病临床上表现为仔猪、 雏鸡等的腹泻, 以细菌侵入到肠粘膜、 伴有 小肠的坏死为特征。肠毒血症是产气荚膜梭菌在动物小肠内繁殖、 通过其产生的毒素引起 坏死性、 出血性的病变、 且由于毒血症招致急性死亡的一种疾病。 恶性水肿是细菌侵入到因 偶发性或外科手术产生的创面中, 其菌发芽、 增殖后产生毒素, 引起毒血症、 菌血症, 导致死 。

6、亡的疾病。 0009 产气荚膜梭菌感染症虽然是重大的传染病, 但是尚未确立预防治疗方法。虽然 适当地进行饲养管理作为预防方法, 但实际上预防是极其困难的。 0010 目前为止, 为了预防以及治疗本症, 还进行了将抗生素或其他的抗菌剂和饲料一 起同时投与的方法。 然而, 近年来, 尤其存在耐药菌的发生或抗生素等残留在食用肉的问题 等, 认为给动物投与抗生素等并不恰当的形势正在高涨。 因此, 期待开发不使用抗生素等的 本病的预防及治疗方法和预防及治疗剂。 0011 另一方面, 已知有一种含有选自黄柏、 龙胆草、 厚朴、 丹参、 知母、 大黄、 丁香、 女贞 子、 荊芥、 桂皮、 玄参、 决明子、 。

7、枇杷叶、 防风、 啤酒花、 紫苏叶、 杨梅皮、 连翘、 芦荟、 牛舌、 威灵 仙、 乌梅、 延命草、 车前草、 辛夷、 茵陈蒿、 沉香、 川芎、 藁本、 苦配巴、 山茱萸、 紫根、 胡黄连、 芍 药、 金樱子、 麝香草、 白南天、 地榆及麻黄的 1 种或 2 种以上的生药的、 家畜及家禽的产气荚 膜梭菌感染症的预防及治疗剂 (专利文献 1) 。此外, 已知特征为含有蒎烯、 麝香草酚、 丁香 酚、 柠檬烯、 肉豆蔻、 麝香草、 丁香及柑橘的产气荚膜梭菌感染症的预防及治疗剂 (专利文献 说 明 书 CN 103432180 A 3 2/8 页 4 2) 。 0012 然而, 这些技术都有效果不确定。

8、这样的问题, 尚未达到实用化。 0013 对腰果壳油及 / 或槚如酸, 已知其有抗菌作用 (非专利文献 1) 、 减轻球虫病作用 (专利文献3) 。 此外, 已有报告称腰果壳油及/或槚如酸对金黄色葡萄球菌、 变形链球菌、 枯 草杆菌、 产氨短杆菌这样的革兰氏阳性菌有抗菌作用, 对大肠杆菌、 产气肠杆菌、 绿脓杆菌 这样的革兰氏阴性菌及啤酒酵母菌、 产朊假丝酵母菌、 产黄青霉菌这样的真菌没有抗菌作 用 (非专利文献 2) 。然而, 关于腰果壳油及 / 或槚如酸对于梭状芽胞杆菌属细菌、 尤其对产 气荚膜梭菌 (Clostridium perfringens) 的抗菌作用不为人知, 完全没有关于其对。

9、于坏疽 性肠炎、 肠毒血症、 恶性水肿的预防以及治疗效果的报告。 0014 现有技术文献 0015 专利文献 0016 专利文献 1 : 日本专利第 2599161 号公报 0017 专利文献 2 : 日本专利特开 2008-110951 号公报 0018 专利文献 3 : 日本专利特开平 8-231410 号公报 0019 非专利文献 1 : Muroi,H.et al.Bioorganic&Medicinal Chemistry12,583-587(2004) 0020 非特許文献 2 : Himejima M.and Kubo I.,J.Agric.Food Chem.,39,418-4。

10、21(1991) 发明内容 0021 本发明的课题在于防治家畜的重大传染病 - 产气荚膜梭菌感染症。 0022 本发明人反复专心研究的结果, 发现了腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰 果酚或槚如酸和腰果酚的组合可以用于产气荚膜梭菌引起的疾病的防治, 从而完成了本发 明。 0023 即, 本发明的要旨如下所述。 0024 (1) 梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂, 其特征在于, 含有 : 腰果壳油、 加热 处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者同时含有槚如酸和腰果酚。 0025 (2) 防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料组合物, 其特征在于, 含有 : 腰果 壳油、 加热处理腰果。

11、壳油、 槚如酸、 腰果酚或者同时含有槚如酸和腰果酚。 0026 (3) 防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料, 其特征在于, 含有 : 腰果壳油、 加 热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者同时含有槚如酸和腰果酚。 0027 (4) 防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料组合物, 其特征在于, 含有 (1) 记 载的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂。 0028 (5) 防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料, 其特征在于, 含有 (4) 记载的防 治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料组合物。 0029 (6) 梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治方法, 其特征在于, 向出现由梭状芽胞 杆菌。

12、属细菌引起的疾病的家畜投与腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者同时 投与槚如酸和腰果酚。 0030 (7) 腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合的 说 明 书 CN 103432180 A 4 3/8 页 5 用途, 用于制造由梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂。 0031 (8) 腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合的 用途, 用于制造防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料组合物。 0032 (9) 腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合的 用途, 用于制造防治梭状芽胞。

13、杆菌属细菌引起的疾病用饲料。 0033 (10) 一种畜禽用体重增加促进剂, 含有腰果壳油及 / 或槚如酸。 0034 (11) 一种体重增加促进饲料, 含有 (10) 记载的畜禽体重增加促进剂。 0035 (12) 饲养畜禽的方法, 包括投与 (10) 记载的畜禽体重增加促进剂或 (11) 记载的 体重增加促进饲料。 0036 (13) 腰果壳油及 / 或槚如酸在促进畜禽的体重增加中的用途。 0037 含有本发明的防治剂和含有该防治剂的饲料通过投与给家畜, 可以防治梭状芽胞 杆菌属细菌引起的疾病。 0038 本发明的防治剂和含有该防治剂的饲料能够通过杀灭梭状芽胞杆菌属细菌改善 肠内环境来促进。

14、家畜的生长。 具体实施方式 0039 本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂的特征是含有腰果壳油、 加热 处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者同时含有槚如酸和腰果酚。 还有, 本发明中, 防治是包括 预防和治疗的概念。 0040 本发明中使用的腰果壳油是鸡腰果 (Anacardium occidentaleL.) 的果实的壳中 含有的油状液体。腰果壳油的成分包括槚如酸、 腰果酚、 腰果二酚。一般, 槚如酸通过进行 加热处理转换为腰果酚, 也可以是通过加热处理仅成为腰果酚、 腰果二酚的腰果壳油。 0041 如 J.Agric.Food Chem.2001,49,2548-2551 记载, 。

15、通过压榨腰果的壳提取出的非 加热腰果壳油 (以下称腰果壳油) 含有 55 80 质量 % 的槚如酸、 5 20 质量 % 的腰果酚、 5 30 质量 % 的腰果二酚。 0042 将腰果壳油在 130以上加热处理得到的加热处理腰果壳油中, 腰果壳油的主成 份槚如酸的大部分脱碳酸变成腰果酚, 成为含有 0 10 质量 % 的槚如酸、 55 80 质量 % 的 腰果酚、 5 30 质量 % 的腰果二酚的油。 0043 本发明中使用的腰果壳油可以通过压榨腰果的壳提取出的植物油来得到。此外, 本发明中使用的腰果壳油也可以通过加热或提取如将腰果壳干馏或溶剂提取来得到。进 而, 本发明中使用的腰果壳油也可以。

16、通过日本专利特开平 8-231410 号公报中记载的方法 来得到。 0044 本发明中使用的腰果壳油可以是不加热而将腰果壳粉碎 破碎而得到的油。 此外, 也可以是壳本身。 0045 本发明中使用的腰果壳油可以使用市售品。 0046 本发明的腰果壳油可以是将如上所述地得到的腰果壳油加热为 70以上、 理想的 是加热为 130以上而得到的腰果壳油。 0047 本发明的腰果壳油可以是从腰果壳压榨提取、 将其在 130加热处理得到的油。 0048 本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂也可以含有加热处理腰果壳 说 明 书 CN 103432180 A 5 4/8 页 6 油、 槚如酸、 腰果酚或。

17、者槚如酸和腰果酚的组合来替代腰果壳油。 0049 作为本发明中使用的槚如酸举例有天然物槚如酸、 合成槚如酸、 它们的衍生物。 此 外, 也可以使用市售的槚如酸。如日本专利特开平 8-231410 号公报中记载, 可以通过用有 机溶剂对腰果壳提取处理, 使用如硅胶柱色谱法改变正己烷、 醋酸乙酯及醋酸的混合溶剂 的比率对得到的腰果油进行洗脱来得到槚如酸 (日本专利特开平 3-240721 号公报、 特开平 3-240716 号公报等) 。 0050 作为本发明中使用的腰果酚举例有天然物腰果酚、 合成腰果酚、 它们的衍生物。 此 外, 作为本发明中使用的腰果酚可以通过对腰果壳油的主成分槚如酸进行脱碳。

18、酸来得到。 0051 此外, 使用加热处理腰果壳油时, 加热腰果壳油中的槚如酸和腰果酚之间的质量 比理想的是 0 : 100 20 : 80。 0052 以所述防治剂的总量为基准, 本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂 中的腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合的含量理想 的是 1 质量 % 100 质量 %, 更理想的是 5 质量 % 95 质量 %, 特别理想的是 10 质量 % 90 质量 %。如果在 1 质量 % 以上, 就可以有效防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病。如果 在 5 质量 % 以上、 特别理想的是在 10 质量 % 以上, 其倾向变。

19、显著, 比较理想。另一方面, 即 使是100质量%也能防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病, 为了改善动物的嗜好性, 理想的 是 95 质量 % 以下, 特别理想的是在 90 质量 % 以下。 0053 本发明的防治剂可以用于防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病。 0054 本发明中, 梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病特别指感染产气荚膜梭菌而发病的疾 病, 具体地举例有坏疽性肠炎、 肠毒血症、 恶性水肿, 并不限定于这些。 0055 本发明中含有的梭状芽胞杆菌属细菌举例有产气荚膜梭菌 (Clostridium perfringens) 、破 伤 风 杆 菌 (C.tetani) 、肉 毒 梭 菌 (C.b。

20、otulinum) 、艰 难 梭 菌 (C.difficile) 、 热纤梭菌 (C.thermocellum) 、 丁酸梭菌 (C.butyricum) 等, 并不限定于此。 0056 本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂除了含有腰果壳油、 加热处理 腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合之外, 只要是乳糖、 白糖、 D- 甘露醇、 淀粉、 玉米淀粉、 结晶纤维素、 硅胶、 轻质无水硅酸等的能够用于饲料或药品或食品的赋形 剂, 即可含有任何种类。 0057 此外, 本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂除了含有腰果壳油、 加 热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者。

21、槚如酸和腰果酚的组合之外, 也可以进一步含有对促 进家畜以及家禽的生长有效的成分、 营养辅助成分、 提高保存稳定性的成分、 包衣剂成分等 的任意成分。 作为这样的任意成分, 举例有饲料的原料或饲料添加物、 食品原料或食品添加 物、 药品原材料等。 例如, 肠球菌属细菌、 芽孢杆菌属细菌、 双歧杆菌、 乳酸杆菌等的活菌剂 ; 淀粉酶、 脂肪酶等的酶、 L- 抗坏血酸、 氯化胆碱、 肌醇、 叶酸等的维生素 ; 氯化钾、 柠檬酸铁、 氧化镁、 磷酸盐类等的矿物质、 DL- 丙氨酸、 DL- 蛋氨酸、 L- 赖氨酸等的氨基酸 ; 富马酸、 丁 酸、 乳酸、 乙酸等的有机酸以及它们的盐 ; 乙氧基喹、 。

22、二丁基羟基甲苯等的抗氧化剂 ; 丙酸 钙等的防霉剂 ; 羧甲基纤维素 (CMC) 、 酪蛋白钠、 聚丙烯酸钠等的粘结剂 ; 脂肪酸甘油酯、 脱 水山梨糖醇脂肪酸酯等的乳化剂 ; 虾青素、 角黄素等的色素 ; 各种酯、 醚、 酮类等的着香料。 0058 本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂的剂型没有特别限制, 举例有 粉剂、 液剂、 固体、 片剂、 胶囊、 乳剂、 颗粒剂、 包衣剂等任意形态, 理想的是粉剂、 液剂、 胶囊、 说 明 书 CN 103432180 A 6 5/8 页 7 颗粒剂、 包衣剂。 0059 作为粉剂, 也可以在腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者。

23、槚如酸和 腰果酚的组合中添加上述赋形剂, 进行粉末化。 0060 作为液剂, 可以直接使用腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如 酸和腰果酚的组合, 也可以在乙醇等的溶剂中溶解腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合, 或者也可以添加上述赋形剂或任意成分使用。 0061 作为胶囊, 可以将腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如酸和腰 果酚的组合直接装入胶囊中, 或者也可以添加上述赋形剂或任意成分。 0062 作为颗粒剂, 可以在腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如酸和 腰果酚的组合中添加上述赋形剂, 造粒,。

24、 颗粒化。 0063 作为包衣剂, 可以在腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如酸和 腰果酚的组合中添加上述赋形剂并造粒, 用包衣剂等包衣。 0064 如上所述, 可以通过将腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如酸 和腰果酚及根据需要的赋形剂或任意成分混合并进行制剂化来制造本发明的梭状芽胞杆 菌属细菌引起的疾病的防治剂。还有, 根据制剂的形态, 可以使前述的腰果壳的粉碎 破碎 物或没有经过任何处理的腰果壳直接与其他任意成分混合后作为本发明的防治剂。进而, 可以不混合其他成分而将粉碎破碎物本身或腰果壳本身作为防治剂, 也可以将所述防治 剂本身作为饲料用组合物或。

25、者饲料。 此外, 也可以使腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合溶解于乙醇等的溶剂中, 使其混合吸收到饲料用组合物 或者饲料中。 0065 本发明的饲料用组合物的特征是含有腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果 酚或者槚如酸和腰果酚的组合。本发明的饲料用组合物中的腰果壳油、 加热处理腰果壳 油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合的含量, 以总量为基准, 理想的是 0.0005 质 量 % 100 质量 %, 更理想的是 0.05 质量 % 95 质量 %, 尤其理想的是 1 质量 % 90 质 量%。 0.0005质量%以上的话, 可以有效防治。

26、梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病。 0.05质量% 以上、 尤其理想的在 1 质量 % 以上的话, 其倾向变显著, 比较理想。另一方面, 即使在 100 质 量 % 也可以防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病, 但为了改善动物的嗜好性, 理想的是在 95 质量 % 以下, 尤其理想的是 90 质量 % 以下。 0066 将本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂用作饲料用组合物时, 可以 与用于动物用补充剂 (以下称补充剂) 的其他补充剂成分混合做成补充剂。补充剂的种类或 腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合以外的成分没有 特别限定。 0067 本发明的饲料的特。

27、征在于, 含有腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或 者槚如酸和腰果酚的组合。 0068 此外, 本发明的饲料中的腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如 酸和腰果酚的组合的含量, 每份饲料的干燥质量, 以总量为基准, 理想的是 0.001 5 质 量 %, 更理想的是 0.01 2 质量 %, 尤其理想的是 0.1 1 质量 %。0.001 质量 % 以上时, 可 以有效防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病。0.01 质量 % 以上、 尤其理想的是 0.1 质量 % 以上的话, 其倾向变显著, 比较理想。另一方面, 即使在 5 质量 % 也可以防治梭状芽胞杆菌 说 明。

28、 书 CN 103432180 A 7 6/8 页 8 属细菌引起的疾病, 但为了改善动物的嗜好性, 理想的是在 2 质量 % 以下, 尤其理想的是在 1 质量 % 以下。 0069 将腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合直接 添加到饲料成分中混合, 或者将含有腰果壳油、 加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚 如酸和腰果酚的组合的饲料用组合物添加到饲料成分中并混合, 可以制造本发明的饲料。 此时, 使用粉末状、 固体状的饲料用组合物时, 为了容易混合, 可以将饲料用组合物做成液 状或凝胶状的形态。 此时, 可以将水、 植物油、 液体动物油、 矿物油、 。

29、合成油、 水溶性高分子化 合物等的流动性液体作为液体载体使用。 此外, 为了确保饲料中的腰果壳油、 加热处理腰果 壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如酸和腰果酚的组合的均一性, 混合藻酸、 藻酸钠、 苍耳烷胶、 酪蛋白钠、 阿拉伯胶、 瓜尔胶、 罗望子种子多糖类等的水溶性多糖类也比较理想。 0070 摄取本发明的饲料的家畜中除了牛、 猪等的家畜外也包括鸡等的家禽。摄取的饲 料的量可以依据家畜的种类、 体重、 年龄、 性别、 健康状态、 饲料的成分等适当调节。 0071 摄取饲料的方法及饲养的方法可以根据家畜的种类采取通常使用的方法。 0072 实施例 0073 制造例 0074 从 (株) 得到 。

30、500kg 腰果壳, 压榨, 从而制造了腰果壳油 158kg。此外, 从 (株) 得到通过在 130下加热处理将槚如酸转 换为腰果酚的加热处理腰果壳油 ( (印度产) ) 。 0075 腰果壳油的组成用以下的方法测定。即, 使用了 HPLC(Waters600、 日本 (株) ) 、 检测器 (Waters490E、 日本 (株) ) 、 打印机 ( C R6A、 岛津制作所 )、 柱 (SUPELCOSILLC18、 SUPELCO 社) 。使用乙腈 : 水 : 醋酸为 80 : 20 : 1(容 量比) 的溶剂, 流速为 2ml/ 分钟。用 280nm 的吸光度检测。 0076 腰果壳油中。

31、含有槚如酸 61.8 质量 %、 腰果酚 8.2 质量 %、 腰果二酚 19.9 质量 %, 加 热处理腰果壳油中含有槚如酸 0.0 质量 %、 腰果酚 71.4 质量 %、 腰果二酚 14.4 质量 %。 0077 实施例 1 0078 依据日本化学疗法学会标准法 (1981) 测定腰果壳油以及加热处理腰果壳油的最 小发育阻止浓度 (MIC) 。前培养使用感受性测定用肉汤培养基 (日水制药 (株) 产品) 培养, 对接种菌液用生理盐水调整至约 105 106CFU/ml。测定培养基使用了感受性测定用培养 基 (日水制药 (株) 产品) 。厌氧培养产气荚膜梭菌, 37下约 20 小时后测定。 。

32、0079 结果在表 1 显示。 0080 表 1 0081 腰果壳油的最小发育阻止浓度 0082 菌株最小发育阻止浓度 (g/ml) Clostridium perfringens W-16.25 0083 加热处理腰果壳油的最小发育阻止浓度 0084 说 明 书 CN 103432180 A 8 7/8 页 9 菌株最小发育阻止浓度 (g/ml) Clostridium perfringens W-112.5 0085 可知腰果壳油和加热处理腰果壳油对产气荚膜梭菌具有很强的抗菌作用。 0086 实施例 2 0087 1L 的三角烧瓶中制作 500mlGAM 肉汤 (日水制药 (株) 产品) 。

33、, 高压锅灭菌后, 分别无 菌性地投与腰果壳油和产气荚膜梭菌, 使用 37的恒温器在厌氧条件下缓慢搅拌培养。在 试验区, 将腰果壳油 1g 溶解于 10ml 的二甲基甲酰胺中, 将 5ml 添加到三角烧瓶中。在对照 区, 仅将 5ml 二甲基甲酰胺添加到三角烧瓶中。产气荚膜梭菌的前培养刮取在 CW 琼脂培养 基 (日水制药 (株) 产品) 以厌氧条件 37培养 48 小时的菌株, 用灭菌生理盐水悬浮之后, 调整至最终浓度约为 106CFU/ml。产气荚膜梭菌的菌数测定方法 : 无菌地采集培养液, 用灭 菌生理盐水阶段性稀释 10 倍之后, 将各稀释阶段的 0.1ml 涂布到 CW 琼脂培养基 。

34、(日水制药 (株) 产品) 之后, 厌氧条件下 37、 培养 72 小时, 计数发育好的特征性的菌落。 0088 结果在表 2 显示。 0089 表 2 0090 产气荚膜梭菌数测定结果 0091 试验第 0 天试验第 3 天试验第 7 天 对照区1.11068.61064.2106 腰果壳油、 0.1%1.1106 102 102 0092 在对照区通过试验期间确认了产气荚膜梭菌的细菌数, 但腰果壳油添加区, 在第 3 天和第 7 天为检测限以下。可知腰果壳油对产气荚膜梭菌具有很强的抗菌作用。 0093 实施例 3 0094 用来自日本 (株) 第一事业所饲养的小型肉鸡种鸡 (品种 : ) 。

35、的鸡蛋孵化的没有疫苗经历的雏鸡在实验鸡舍预饲养 7 天。一区为 7 只, 分配时 注意在试验开始时体重上没有差异。腰果壳油和加热处理腰果壳油添加到 0.5 质量 % 饵 中, 从预饲养结束后开始一直给予至试验结束时为止。关于饲料, 将日本配合饲料 (株) 小型 肉鸡肥育前期用标准饲料 (SDBNo1) 提供给 0 21 天龄、 将小型肉鸡肥育后期用标准饲料 (SDBNo2) 提供给 22 35 天龄。于 8 天 (试验开始时) 、 14 天、 21 天、 28 天及 35 天龄时测定 体重。雏鸡饲养结束时, 从各组分别随机选出 5 只, 屠杀、 开腹, 取出盲肠内容物。还有, 取 出的盲肠内容。

36、物分组存放用以检查。检体 1g 阶段性稀释 10 倍, 每种稀释倍率各 0.1ml 接 种到 5 个培养基中。产气荚膜梭菌使用 CW 琼脂 (日水制药 (株) 产品) , 在厌氧条件下 37、 培养 24 小时, 计数特征性的菌落。 0095 平均体重示于表 3。 0096 表 3 0097 雏鸡平均体重测定结果 (g) 0098 说 明 书 CN 103432180 A 9 8/8 页 10 8 天龄14 天龄21 天龄28 天龄35 天龄 对照区1433336191,0801,736 腰果壳油1433536901,1961,807 加热处理腰果壳油1433376901,1061,786 0。

37、099 饲料中添加0.5质量%的腰果壳油和加热处理腰果壳油的雏鸡与对照例相比体重 增加了。可知腰果壳油和加热处理腰果壳油有增重效果。 0100 盲肠内容物中的产气荚膜梭菌数示于表 4。 0101 表 4 0102 雏鸡肠内细菌数测定结果 (CFU/g) 0103 对照区腰果壳油加热处理腰果壳油 产气荚膜梭菌3.61042.31034.0102 0104 饲料中添加 0.5 质量 % 的腰果壳油的雏鸡中, 肠内的产气荚膜梭菌的菌数减少为 对照区的十分之一, 再者, 加热处理腰果壳油处理区中, 肠内的产气荚膜梭菌的菌数减少为 对照区的百分之一。此结果与显示腰果壳油对产气荚膜梭菌具有杀菌作用的实施例。

38、 1、 2 的 结果相一致。 0105 产业上的利用可能性 0106 根据本发明, 提供产气荚膜梭菌 (Clostridium perfringens) 的感染引起的坏疽 性肠炎、 肠毒血症、 恶性水肿的预防和 / 或治疗用饲料、 以及抗梭状芽胞杆菌剂。 0107 本发明的防治剂可以通过向由梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病而发病的家畜以 及家禽等的动物投与腰果壳油和加热处理腰果壳油、 槚如酸、 腰果酚或者槚如酸和腰果酚 的组合, 从而防治由梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病。 0108 本发明的防治剂能够通过杀灭梭状芽胞杆菌属细菌改善肠内环境来促进动物的 生长。 说 明 书 CN 103432180 A 10 。

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