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1、(10)申请公布号 CN 102247465 A (43)申请公布日 2011.11.23 CN 102247465 A *CN102247465A* (21)申请号 201110159904.5 (22)申请日 2011.06.04 A61K 36/76(2006.01) A61P 39/06(2006.01) A61K 127/00(2006.01) (71)申请人 新乡医学院 地址 453003 河南省新乡市红旗区金穗大道 东段 (72)发明人 吴艳芳 王新胜 荆云 郑建芳 董若怡 (54) 发明名称 柳芽乙醇提取物的制备工艺及抗氧化活性 (57) 摘要 本发明属医药技术领域， 涉及一种。
2、柳芽乙醇 提取物的制备工艺及抗氧化活性， 具体技术方 案 ： 取干燥柳芽， 粉碎后过筛， 加入 8-12 倍体积量 70乙醇， 室温下先浸提 2-4 小时， 然后超声 1 小 时， 温度为 30， 功率为 120W ； 然后抽滤， 滤渣再 分别用 10 倍体积量和 8 倍体积量 70的乙醇按 以上步骤中超声方法各重复一次， 合并三次滤液， 减压回收乙醇， 在温度 70下浓缩至相对密度为 1.30 的浸膏， 冷冻干燥成粉末。将乙醇提取物的 冷冻干燥粉末进行抗氧化试验， 结果表明本发明 产品具很强的抗氧化活性。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权。
3、利要求书 1 页 说明书 3 页 CN 102247465 A1/1 页 2 1. 一种以柳芽为原料制备柳芽乙醇提取物的制备工艺， 其特征在于经过以下步骤 ： 步骤 1、 取干燥柳芽， 粉碎后过筛， 加入 8-12 倍体积量 70乙醇， 室温下先浸提 2-4 小 时， 然后超声 1 小时， 温度为 30， 功率为 120W ； 步骤 2、 将步骤 1 中的 70的乙醇提取液抽滤， 滤渣再分别用 10 倍体积量和 8 倍体积 量 70的乙醇按步骤 1 中超声方法各重复一次 ； 步骤 3、 将步骤 2 中的 70的乙醇滤液合并， 减压回收乙醇， 在温度 70下浓缩至相对 密度为 1.30 的浸膏，。
4、 冷冻干燥 ； 步骤 4、 将步骤 3 中的柳芽乙醇提取物干燥粉末进行抗氧化试验， 表明柳芽提取物具有 很强的抗氧化活性。 2.根据权利要求1所述的制备工艺， 所述原料为杨柳科(Salicaceae)柳属(Salix)植 物的干燥嫩芽。 权 利 要 求 书 CN 102247465 A1/3 页 3 柳芽乙醇提取物的制备工艺及抗氧化活性 技术领域 0001 本发明涉及柳芽乙醇提取物的制备工艺及抗氧化活性， 属医药技术领域。 背景技术 0002 本发明涉及柳芽乙醇提取物的制备工艺及抗氧化活性。柳芽为杨柳科 (Salicaceae)柳属(Salix)植物的干燥嫩芽， 全国均有分布。 目前， 有关柳。
5、芽的研究报道较 少， 与柳芽有关的专利申请仅有 “柳芽保健茶的制作方法” ( 公开号 ： CN 1461596A)。因此， 本发明对柳芽的乙醇提取物制备工艺和抗氧化活性进行研究。 0003 机体在生命过程中会不断产生氧自由基， 适量氧自由基对细胞的分裂， 生长， 消 炎， 解毒等起积极作用， 过剩则引起细胞的衰老， 造成机体损伤， 诱发炎症、 免疫失调、 恶性 肿瘤等多种疾病。自由基清除剂可以直接清除体内过剩自由基， 或通过增强体内抗氧化酶 活力起增强抗氧化作用， 有效地防止或减轻体内自由基所导致的氧化损伤， 增强机体免疫 能力， 延缓衰老。由于合成抗氧化剂的都副作用， 天然抗氧化剂受到越来越。
6、多的关注。 发明内容 0004 1. 本发明涉及柳芽乙醇提取物的制备工艺及抗氧化活性， 其特征在于经过以下步 骤 ： 0005 步骤1、 取干燥柳芽， 粉碎后过筛， 加入8-12倍体积量70乙醇， 室温下先浸提2-4 小时， 然后超声 1 小时， 温度为 30， 功率为 120W ； 0006 步骤 2、 将步骤 1 中的 70的乙醇提取液抽滤， 滤渣再分别用 10 倍体积量和 8 倍 体积量 70的乙醇按步骤 1 中超声方法各重复一次 ； 0007 步骤 3、 将步骤 2 中的 70的乙醇滤液合并， 减压回收乙醇， 在温度 70下浓缩至 相对密度为 1.30 的浸膏， 冷冻干燥 ； 0008。
7、 步骤 4、 将步骤 3 中的柳芽乙醇提取物干燥粉末进行抗氧化试验， 表明柳芽提取物 具有很强的抗氧化活性。 0009 2. 根据权利要求 1 所述的制备工艺， 所述原料为杨柳科 (Salicaceae) 柳属 (Salix) 植物的干燥嫩芽。 具体实施方式 0010 本发明通过以下实施例进一步详述， 但本实施例所述的技术内容是说明性的， 而 不是限定性的， 不以任何方式限制本发明。 0011 实例 1 本发明的制备工艺 0012 步骤 1、 取干燥柳芽， 粉碎后过筛， 加入 8 倍体积量 70乙醇， 室温下先浸提 4 小 时， 然后超声 1 小时， 温度为 30， 功率为 120W ； 00。
8、13 步骤 2、 将步骤 1 中的 70的乙醇提取液抽滤， 滤渣再分别用 10 倍体积量和 8 倍 体积量 70的乙醇按步骤 1 中超声方法各重复一次 ； 说 明 书 CN 102247465 A2/3 页 4 0014 步骤 3、 将步骤 2 中的 70的乙醇滤液合并， 减压回收乙醇， 在温度 70下浓缩至 相对密度为 1.30 的浸膏， 冷冻干燥 ； 0015 步骤 4、 将步骤 3 中的柳芽乙醇提取物的冷冻干燥粉末进行抗氧化试验。 0016 实例 2 本发明的制备工艺 0017 步骤 1、 取干燥柳芽， 粉碎后过筛， 加入 12 倍体积量 70乙醇， 室温下先浸提 2 小 时， 然后超声。
9、 1 小时， 温度为 30， 功率为 120W ； 0018 步骤 2、 将步骤 1 中的 70的乙醇提取液抽滤， 滤渣再分别用 10 倍体积量和 8 倍 体积量 70的乙醇按步骤 1 中超声方法各重复一次 ； 0019 步骤 3、 将步骤 2 中的 70的乙醇滤液合并， 减压回收乙醇， 在温度 70下浓缩至 相对密度为 1.30 的浸膏， 冷冻干燥 ； 0020 1.4 将步骤 1.3 中的柳芽乙醇提取物的冷冻干燥粉末进行抗氧化试验。 0021 实例 3 柳芽乙醇提取物抗氧化活性试验 0022 1.DPPH 自由基清除试验 0023 吸取不同浓柳芽乙醇提取物和 Vc 各 2mL， 分别加入 。
10、0.2mmol/L DPPH 无水乙醇溶 液 2mL， 摇匀后于 40恒温避光净置 30min， 以无水乙醇作空白对照于 517nm 波长处测定各 反应的吸光度 As。同时测定 0.2mmol/LDPPH 无水乙醇溶液 2mL 与无水乙醇 2mL 混合液的吸 光度 A0， 以及待测液 2mL 与无水乙醇 2mL 混合液的吸光度 Ar。按以下公式计算样品对 DPPH 自由基的清除率 ： 清除率 ( ) 1-(As-Ar)/A0100。结果见表 1 所示。 0024 表 1 柳芽乙醇提取物与 Vc 对 DPPH 的清除率结果 (n 3) 0025 0026 由表 1 可以看出， 柳芽乙醇提取物对 。
11、DPPH 具有很强自由基的清除能力， 且随着提 取物浓度的增加而增加， 浓度为 200g/mL 时对 DPPH 清除率达到 90.12， 基本相当于 Vc 浓度为 120g/mL 的清除率。 0027 2. 对 H2O2诱导小鼠红细胞溶血的抑制作用试验 0028 小鼠摘眼球取血， 加入肝素制成抗凝血样品， 以3000rpm离心5min得红细胞， 用冰 冷生理盐水洗3次， 用生理盐水制成0.5的红细胞悬浮液。 取红细胞悬浮液1ml， 加入阳性 对照药Vc及不同浓度的柳芽乙醇提取物样品溶液0.2ml， 最后加0.1ml H2O2(100mmol/L)溶 液， 混匀， 于 37水浴中反应 60min。
12、， 用生理盐水稀释 6 倍， 3000rpm 离心 5min， 取上清液于 415nm 处测定吸收度， 设正常红细胞组 ( 即不加入 H2O2， 其他条件相同 )， 以对照组为 100 溶血， 按下式计算抑制率 ： 抑制率 ( ) (A对照-A样品)/(A对照-A空白)100。结果见表 2 所 示。 0029 表 2 柳芽乙醇提取物对 H2O2诱导小鼠红细胞溶血的抑制作用 (n 5) 说 明 书 CN 102247465 A3/3 页 5 0030 0031 由表 2 可以看出， 小鼠红细胞经 H2O2诱导后 A 值增加， 溶血度明显高于正常组， 说 明H2O2氧化红细胞膜， 致胞内物质外流。 柳芽乙醇提取物各剂量组的溶血度均低于对照组， 表明柳芽乙醇提取物可抑制红细胞的氧化损伤， 使红细胞膜稳定。 说 明 书 。